Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin trong tảo spirulina

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA CÔNG NGHỆ  - LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT – NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP TÁCH PHYCOCYANIN TRONG TẢO SPIRULINA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN ThS Phan Thế Duy Châu Phượng Quyên MSSV: 2064002 Ngành: Công Nghệ Hóa Học-Khóa 32 Cần Thơ, 2010 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA CÔNG NGHỆ  - LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT – NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP TÁCH PHYCOCYANIN TRONG TẢO SPIRULINA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN ThS Phan Thế Duy Châu Phượng Quyên MSSV: 2064002 Ngành: Công Nghệ Hóa Học-Khóa 32 Cần Thơ, 2010 Trường Đại học Cần Thơ Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Độc lập – Tự – Hạnh phúc Khoa Công Nghệ Bộ môn Công nghệ hóa học -Cần Thơ, ngày tháng năm 2010 PHIẾU ĐỀ NGHỊ ĐỀ TÀI TỐT NGHIỆP CHO SINH VIÊN NĂM HỌC: 2009 – 2010 Họ tên cán hướng dẫn: Phan Thế Duy Tên đề tài: “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina” Địa điểm thực hiện: Phòng thí nghiệm Bộ Môn Hóa Học Hữu Cơ – Khoa Công nghệ - Trường Đại học Cần Thơ Số lượng sinh viên thực hiện: 01 sinh viên Họ tên sinh viên: Châu Phượng Quyên Lớp: Công Nghệ Hóa Học MSSV: 2064002 Khóa: 32 Mục đích đề tài Tìm phương pháp tách chiết phycocyanin (chất màu xanh đặc trưng tảo) Đánh giá sản phẩm thu đề xuất hướng sử dụng chất Đánh giá chất lượng phần lại tảo (sau tách chiết chất màu) Các nội dung giới hạn đề tài Nội dung - Tiến hành khảo sát tảo khô tảo tươi - Tìm phương pháp làm tăng độ tinh phycocyanin Giới hạn đề tài Trên giới có nhiều công trình nghiên cứu phương pháp chiết tách làm tinh phycocyanin từ tảo Spirulina công dụng người Tùy theo mục đích sử dụng mà độ tinh phycocyanin được giới hạn như: độ tinh 0,7 dùng thực phẩm, 3,9 dùng phản ứng 4,0 dùng phân tích Do hạn chế thời gian, nên đề tài “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina” dừng lại mức độ ứng dụng thực phẩm Các yêu cầu hỗ trợ cho việc thực đề tài Các hóa chất để thực Kinh phí dự trù cho việc thực đề tài: 250.000 đồng DUYỆT CỦA BỘ MÔN DUYỆT CỦA CBHD Phan Thế Duy DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG THI & XÉT TỐT NGHIỆP Nhận xét cán hướng dẫn NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN   Nhận xét cán hướng dẫn NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN   Lời cảm ơn LỜI CẢM ƠN  Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến Bộ môn Công Nghệ Hoá Học, Khoa Công Nghệ, trường Đại học Cần Thơ tạo hội điều kiện thuận lợi cho em tập thể lớp Công Nghệ Hoá Học suốt thời gian thực luận văn tốt nghiệp Lời biết ơn sâu sắc xin gửi đến thầy Phan Thế Duy, cán hướng dẫn khoa học tận tình bảo hỗ trợ cho em tập thể nhóm trình thực đề tài Những kinh nghiệm kiến thức quý báu thầy mà em tiếp thu, hành trang cho em suốt trình làm luận văn từ em có kinh nghiệm cho thân Bên cạnh đó, thời gian qua nhóm nhận quan tâm giúp đỡ của quý thầy cô khác Bộ môn Công Nghệ Hoá Học Em xin chân thành cảm ơn lời khuyên nhận xét quý thầy cô góp phần quan trọng vào nội dung làm hoàn chỉnh Cảm ơn tất bạn tập thể lớp Công Nghệ Hóa Học K32, Đại học Cần Thơ trao đổi, hỗ trợ lẫn trình học tập trau dồi kiến thức Quá trình trao đổi học hỏi lẫn nguồn động lực giúp em vượt qua khó khăn hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp Châu Phượng Quyên ii Mở đầu MỞ ĐẦU  Từ ngày xưa, người biết sử dụng nguồn thực phẩm giàu dinh dưỡng, vị thuốc từ thiên nhiên để loại trừ bệnh tật có thể khỏe mạnh Ngày nay, với tiến khoa học kỹ thuật, nhiều công trình nghiên cứu đời nhằm tìm hoạt chất quý từ thiên nhiên có nhiều ứng dụng y học Không thế, hoạt chất mang lại nhiều ứng dụng quan trọng ngành thực phẩm mỹ phẩm Thực tế nghiên cứu tìm nhiều hoạt chất sinh học tự nhiên cần thiết cho sức khoẻ sắc đẹp trích ly từ động vật, cỏ, vi sinh vật, tảo đưa vào thành phần thực phẩm chức năng, dược phẩm mỹ phẩm để điều khiển chức phận thể, phòng chống điều trị số bệnh, kể bệnh hiểm nghèo (tăng tạo máu, tăng trí nhớ, tăng hoạt động bắp, tăng miễn dịch, chống lão hoá, phòng ngừa điều trị ung thư, viêm nhiễm ) Spirulina loài tảo nghiên cứu nhiều đem lại nhiều lợi ích cho người Ngoài khả chống oxy hóa, tăng cường khả miễn dịch, phòng điều trị bệnh ung thư, viêm nhiễm,… Spirulina chứng minh có chứa hoạt chất kháng virus herps, virus HIV- bệnh kỉ, làm đau đầu nhà khoa học Do có nhiều lợi ích mà Spirulina nhanh chóng đưa vào nghiên cứu để xây dựng mô hình nuôi trồng, chế biến chiết xuất nhằm phục vụ cho người Mặc dù Spirulina mang nhiều dưỡng chất hoạt chất sinh học quý hiếm, loài tảo có nhiều lợi ích cho người Vì vậy, đề tài “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina” xin góp phần vào công trình nghiên cứu tảo Spirulina để loài tảo khai thác ứng dụng rộng rải Trong đề tài này, đối tượng nghiên cứu tảo Spirulina (Arthrospira) cung cấp từ công ty Vĩnh Hảo Hướng nghiên cứu tập trung vào nội dung sau:  Tìm phương pháp tách chiết phycocyanin (chất màu xanh đặc trưng tảo)  Đánh giá sản phẩm thu đề xuất hướng sử dụng chất  Đánh giá chất lượng phần lại tảo (sau tách chiết chất màu) Châu Phượng Quyên iii Mở đầu Mặc dù cố gắng thực đề tài cách hoàn thiện nhất, song với kiến thức kinh nghiệm hạn chế, chắn không tránh khỏi thiếu sót Kính mong nhận quan tâm đóng góp ý kiến quý thầy cô tất bạn để đạt kết tốt Châu Phượng Quyên iv Mục lục MỤC LỤC Phụ bìa Phiếu đề nghị đề tài Nhận xét cán hướng dẫn Nhận xét cán phản biện Lời cảm ơn……………………………………………………………………………………ii Lời mở đầu……………………………………………………………………………………iii Mục lục…………………………………………………………………………………………v Danh mục hình……………………………………………………………………………….ix Danh mục bảng……………………………………………………………………………….x Danh mục đồ thị…………………………………………………………………………… xii Danh mục từ viết tắt…………………………………………………………………….xv CHƯƠNG I TỔNG QUAN Sơ lược tảo Spirulina 1.1 Tên gọi, chủng loại hình thái 1.2 Nguồn gốc phát triển 1.3 Thành phần hóa học tảo Spirulina 1.4 Giá trị dinh dưỡng tảo Spirulina 1.4.1 Giàu b - caroten chất dinh dưỡng tự nhiên 1.4.2 Spirulina chứa khoảng 60% protein thực vật dễ tiêu hoá, chất béo cholesterol 1.4.3 Spirulina chứa acid béo đặc biệt cần thiết cho sức khoẻ 1.4.4 Sắt (Fe2+) sức khoẻ phụ nữ trẻ em 1.4.5 Hàm lượng vitamin B12 vitamin nhóm B cao 1.5 Công dụng Spirulina 1.5.1 Đối với sức khỏe 1.5.2 Trong ngành mỹ phẩm Châu Phượng Quyên v Kết bàn luận Y% Tảo khô Tảo tươi 1 Dung môi Đồ thị 3.45 So sánh hiệu suất tảo khô tảo tươi (Khối lượng tảo khô: 2g;khối lượng tảo tươi:9,2955 ; Nhiệt độ: 20oC; Thể tích dung môi: 50 ml;Thời gian khuấy: giờ; Tốc độ khuấy: 500 vòng/phút;1 Đệm phosphate; H2O; Đệm acetate; NaCl 0,15M; CaCl2 10 g/l ) Nhận xét: - Từ kết so sánh trình chiết sinh khối tảo khô tảo tươi cho thấy rằng, chiết phycocyanin từ nguyên liệu tảo tươi cho nồng độ phycocyanin, độ tinh khiết cao so với tảo khô Do mà hiệu suất trình chiết phycocyanin từ tảo tươi cao nhiều so với tảo khô Sự khác biệt tảo khô tảo tươi có lẽ tảo khô trải qua trình sấy khô bị lượng phycocyanin đáng kể (khoảng 50%) - Vì vậy, đề thực trình chiết phycocyanin từ tảo Spirulina đạt hiệu cao nguyên liệu sinh khối tảo tươi lựa chọn Châu Phượng Quyên 72 Kết bàn luận 4.2 So sánh kết thu từ trình làm tinh Bảng 3.20: So sánh trình làm tinh phycocyanin từ tảo khô tảo tươi Tảo khô Tảo tươi Tên mẫu EP Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu 0,48 0,47 0,76 0,72 Tảo khô Tảo tươi 0.8 0.7 0.6 EP 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 Số lần so sánh n Đồ thị 3.46 Độ tinh khiết tảo khô so với tảo tươi sau làm tinh Nhận xét : Từ kết cho thấy, độ tinh khiết dịch chiết phycocyanin chiết từ sinh khối tảo tươi sau làm tinh cao tảo khô nhiều (gần gấp đôi) Đó tảo khô bị ảnh hưởng trình sấy làm cho phần lớn phycocyanin bị biến (khoảng 50%) Châu Phượng Quyên 73 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua khảo sát phương pháp chiết làm tinh phycocyanin từ tảo Spirulina platensis, có số kết luận rút sau: - Khi chiết phycocyanin với sinh khối tảo tươi cho nồng độ phycocyanin độ tinh khiết hiệu suất thu cao so với sinh khối tảo khô - Chiết phương pháp học phá vỡ tế tảo, giải phóng phycocyanin phương pháp đơn giản, dễ thực hiện, tốn chi phí Nhưng nồng độ phycocyanin thu hiệu suất trình không cao - Phương pháp làm tinh phycocyanin kỹ thuật chiết tách hệ hai pha lỏng đơn giản, dễ thực hiện, độ tinh dịch chiết thu mức ứng dụng thực phẩm (EP = 0,70) - Khi thực trình chiết nhiệt độ cao hay thấp cho nồng độ phycocyanin không cao, tốt 20 – 25oC - Khi tiến hành chiết với lượng lớn thực chiết nhiều lần hay dùng tỷ lệ khối lượng sinh khối - thể tích dung môi thích hợp để đạt hiệu suất tốt - Lượng bã sau chiết phycocyanin tảo khô thu nhiều tảo tươi - Khi tiến hành chiết nhiều lần lượng bã thu sau chiết lần tảo khô cho hàm lượng phycocyanin không thấp tảo tươi Kiến nghị Căn vào kết thu từ trình thí nghiệm số mặt hạn chế đề tài, xin đưa số kiến nghị sau: - Tiến hành khảo sát với nhiều phương pháp khác để nâng cao lượng phycocyanin thu hiệu suất chiết áp suất cao, sóng siêu âm hay xử lý lyzozyme Châu Phượng Quyên 74 Kết luận kiến nghị - Khảo sát phương pháp nâng cao độ tinh dịch chiết phycocyanin thu nhằm ứng dụng phản ứng (EP = 3,9) hay phân tích (EP = 4,0) Châu Phượng Quyên 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Văn Lăng Spirulina - nuôi trồng sử dụng y dược dinh dưỡng, 1999, NXB Y học Lê Văn Lăng Công nghệ nuôi tảo Spirulina ứng dụng dược phẩm, thực phẩm dinh dưỡng, 2009, hội dinh dưỡng thực phẩm Tp Hồ Chí Minh Vũ Thành Lâm Nuôi tảo quy mô lớn – thiết kế quản lý, 2006, Trung tâm Công nghệ Sinh học, Đại Học Quốc Gia Hà Nội Vũ Thành Lâm Nuôi trồng tảo Spirulina, 2006, Trung tâm Công nghệ Sinh học, Đại Học Quốc Gia Hà Nội Bách mở, http://vi.wikipedia.org/wiki/T%E1%BA%A3o_xo%E1%BA%AFn, truy cập ngày 11.06.2010 Công ty TNHH Thiên Thần Cuộc Sống, http://www.spirulina.com.vn/Service.aspx?ctype=S, truy cập ngày 11.06.2010 Diễn đàn trường THCS Nguyễn Văn http://www.nguyenvanto.net/family/lofiversion/index.php?t4416.html, cập ngày 25.05.2010 Dr Len Dekker, http://www.scribd.com/doc/21596874/What-is-Phycocyanin, truy cập ngày 20.06.2010 Bách khoa toàn thư mở, http://en.wikipedia.org/wiki/Phycocyanin, truy cập ngày 20.06.2010 khoa toàn thư Tố, truy 10 R Sarada, Manoj G Pillai, G.A Ravishankar Phycocyanin from Spirulina sp: influence of processing of biomass on phycocyanin yield, analysis of efficacy of extraction methods and stability studies on phycocyanin Process Biochemistry, 1999, 34, 795 - 801 11 Amha Belay, Ph.D Summary of Studies on the Health Benefits of Spirulina (Arthrospira): A Literature Review, 2007, Earthrise 12 Niels T Eriksen Production of phycocyanin—a pigment with applications in biology, biotechnology, foods and medicine Appl Microbiol Biotechnol, 2008, 80, - 14 13 Ganapathi Patil, K.S.M.S Raghavarao Aqueous two phase extraction for purification of C – phycocyanin Biochemical Engineering Journal, 2007, 34, 156 – 164 14 Deepa Balasubramaniam Lysozyme separation from Tobacco extraction by aqueous, 2003, Virginia Polytechnic Institute and State University 15 Phùng Nguyễn Thái Hằng, http://mientayvn.com/Cao%20hoc%20quang%20dien%20tu/Semina%20tren% 20lop/Mang_mong/SERMINAR/Quang/phuong_phap_do_tinh_chat_quang_c ua_mang_mong.pdf, truy cập ngày 25.10.2010 16 Nguyễn Hoài Hương, Bùi Văn Thế Vinh, Bài giảng thực hành Hoá Sinh, 2009, Khoa Môi trường Công nghệ Sinh học, Trường Đại Học Kỹ thuật Công nghệ Thành phố Hồ Chí Minh 17 S.T Silveria, J.F.M Burkert, J.A.V Costa, C.A.V Burkert, S.J.Kalil, Optimization of phycocyanin extraction from Spirulina platensis using factorial design Bioresource Technology, 2007, 98, 1629 - 1634 18 Ganapathi Patil, S Chethana, A.S Sridevi, K.S.M.S Raghavarao Method to obtain C – phycocyanin of high purity Journal of Chromotography A, 2006, 1127, 76 – 81 19 Carilina P Carvalho, Jane Se1lia R Coimbra, Isabele Andressa F Costa, Luis Antonio Minim, Luis Henrique M Silva, Maria Cristina Maffia Equilibrium Data for PEG 4000 + Salt + Water Systems from (278.15 to 318.15) K J Chem Eng Data, 2007, 52, 351 – 356 20 Lê Thị Ngọc Ny, http://giaoan.violet.vn/present/showprint/entry_id/1074833, truy cập ngày 20.10.2010 21 Trung tâm công nghệ sinh học Thành Phố Hồ Chí Minh, http://www.hcmbiotech.com.vn/technology_detail.php?cateid=8&id=32, truy cập ngày 20.10.2010 22 The Hash group, http://www.hashmerchants.com/, truy cập ngày 01.11.2010 23 Matt Robar, http://holistikhealth.com/blog/superfoods/spirulina, truy cập ngày 30.10.2010 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ BỘ MÔN CÔNG NGHỆ HÓA HỌC - Cần Thơ, ngày 10 tháng 08 năm 2010 *********** ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Năm học: 2010 – 2011 Formatted: Font: Bold Formatted: Font: Bold Tên đề tài “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina”.“Khảo sát – nNghiên cứu phương pháp chiết tách làm tinh phycocyanin tảo Spirulina” Formatted: Font color: Red Sinh viên thực Formatted: Font: Not Bold, Font color: Auto - Họ tên: Châu Phượng Quyên - MSSV: 2064002 Formatted: Font: Not Bold Formatted: Font: Not Bold, Font color: Auto Formatted: Font: Not Bold Formatted: Font: Not Bold Formatted: Font: Not Bold, Font color: Auto Formatted: Font: Not Bold - Ngành: Công nghệ Hóa học - Khóa: 32 Cán hướng dẫn ThS Phan Thế Duy - Bộ môn Công Nghệ Hóa học - Khoa Công Nghệ - Trường Đại học Cần Thơ Đặt vấn đề Vấn nạn sức khỏe cộng đồng kỷ 21 rõ ràng bệnh lý mãạn tính sức đề kháng không ngừng bị đục khoét đủ loại bệnh nguyên, từ siêu vi biến thể muôn hình vạn trạng độc chất sinh ung thư tràn ngập môi trường ô nhiễm, từ sống căng thẳng stress khuynh hướng lạm dụng thực phẩm công nghệ, dược phẩm, chất kích thích… Vấn đề tìm đâu loại thực phẩm có cấu trúc lý tưởng tỷ lệ hàm lượng chất đường, đạm béo, vừa dồi sinh tố khoáng tố, lại thêm phong phú Formatted: Font color: Red chất kháng oxy hóa để góp phần ngăn chặn tượng thoái hóa, lão hóa biến thể ác tính chực chờ hội thuận tiện thể? Với xu đó, tTảo Spirulina phát nghiên cứu từ nhiều năm gần đâynay Chúng mang giá trị dinh dưỡng cao hoạt chất sinh học có ứng dụng nhiều thực phẩm chức năng, y học, mỹ phẩm Tuy nhiên, hoạt chất sinh học phát huy hiệu chiết tách ứng dụng trực tiếp Với tầm quan trọng đó, giới có nhiều công trình nghiên cứu Spirulina hoạt chất sinh học Spirulina để phục vụ nhiều cho sống người Trước vấn đề việc tìm phương pháp tách hoạt chất Spirulina, đánh giá tính chất đề xuất hướng sử dụng cần thiết Vì vậy, đề tài “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina”“Khảo sát – nNghiên cứu phương pháp chiết tách làm tinh phycocyanin tảo Spirulina” xin góp phần vào công trình nghiên cứu tảo Spirulina để loài tảo khai thác ứng dụng rộng rãi Mục đích yêu cầu  Tách lấy phycocyanin (chất tạo màu xanh) tảo Spirulina  Đánh giá sản phẩm thu đề xuất hướng sử dụng chất  Đánh giá chất lượng phần lại tảo sau tách phycocyanin Địa điểm, thời gian thực  Địa điểm: pPhòng thí nghiệm hữu Công nghệ Hóa học, Kkhoa Công nghệ, tTrường Đại học Cần Thơ  Thời gian thực hiện: từ ngày 09/08 /2010 đến ngày 08/11/2010 Giới thiệu thực trạng có liên quan tới vấn đề đề tài Các nghiên cứu tảo Spirulina nhiều nhà khoa học nhiều nước giới nghiên cứu thu kết khả quan Tuy nhiên, Việt Nam hạn chế mức nuôi trồng sử dụng sinh khối tảo thô Đa phần chất chiết xuất từ tảo Spirulina phải nhập ngoại có giá thành cao, chẳng hạn bột acideaxit amin có giá 70 USDS/kg, chất phycocyanin tinh chế dùng chẩn đoán bệnh có giá 50 USD/1mg, chất pro-vitamin A có giá thành khoảng 200 USD/kg, chất phycocyanin thô dùng nhuộm màu dược phẩm mỹ phẩm có giá 150 USD/kg, (http://vietbao.vn/Khoa-hoc/Nuoi-trong-tao-Spirulina-Thu-nhap-1-2ty-dong-nam/20154388/195/) Công dụng phycocyanin nghiên cứu: tăng cường miễn dịch, chống oxy hóa, chống viêm, bảo vệ tim mạch, đường huyết, chống ung thư, chống virus, chữa trị nhiễm kim loại nặng, nhiễm phóng xạ, ngộ độc,… Formatted: Space Before: pt, After: pt, Line spacing: At least 18 pt Formatted: Justified Các nội dung giới hạn đề tài 8.1 Các nội dung  Giới thiệu  Tổng quan  Phương tiện phương pháp nghiên cứu  Kết thực nghiệm bàn luận  Kết luận  Kiến nghị 8.2 Giới hạn đề tài Trên giới có nhiều công trình nghiên cứu phương pháp chiết tách làm tinh phycocyanin từ tảo Spirulina công dụng đối vcới người Tùy theo mục đích sử dụng mà độ tinh phycocyanin được giới hạn như: độ tinh 0,7 dùng thực phẩm, 3,9 dùng phản ứng 4,0 dùng phân tích Do hạn chế thời gian, nên đề tài “Khảo sát – nghiên cứu phương pháp tách phycocyanin tảo Spirulina” “Nghiên cứu phương pháp chiết tách làm tinh phycocyanin tảo Spirulina” dừng lại mức độ ứng dụng thực phẩm http://vietbao.vn/Khoa-hoc/Nuoi-trong-tao-Spirulina-Thu-nhap-1-2-ty-dong-nam/20154388/195/ Phương pháp thực đề tài 9.1 Phương pháp chiết tách phycocyanin Các bước trình chiết tách thực theo sơ đồ sau: 20g sSinh khối tảo khô Khuấy 500 vòng/phút, 25oC, Ly tâm 3000 vòng/20 phút Gạn lấy phần dung dịch Đo độ hấp thu quang phổ ( = 615, 652 280 Xác định nồng độ PC Xác định độ tinh khiết Xác định hiệu suất Hình Sơ đồ khối phương pháp chiết tách phycocyanin 9.21 Phương pháp làm tinh phycocyanin Formatted: Centered Các bước trình chiết tách thực theo sơ đồ sau: 20g Ssinh khối tảo khô Khuấy 500 vòng/phút, 20oC, Ly tâm lần 3000 vòng/20 phút Formatted: Centered Dịch chiết lần Bã + Thêm PEG 4000 + muối kali phosphate Để lắng 12 giờ, thu dịch chiết 500 ml nước Khuấy 500 vòng/phút, 20oC, Ly tâm lần 3000 vòng/20 phút Formatted: Centered Dịch chiết lần Thêm PEG 4000 + muối kali phosphate Để lắng 12 giờ, thu dịch chiết Formatted: Left Formatted: Centered Hình Sơ đồ khối phương pháp làm tinh phycocyanin Formatted: Font: 13 pt, Not Bold Formatted: Centered, Tab stops: 0.4", Left + 0.75", Left Formatted: Centered Formatted: Centered 10 Kế hoạch thực Tuần Lược khảo tài liệu 10 11 12 13 14 15 Formatted Table    Formatted: Left Khảo sát chọn điều       kiện tối ưu Tách lấy phycocyanin          Phân tích lượng protein phycocyanin          Formatted Table Làm tinh Formatted Table          phycocyanin Viết                Cần Thơ, ngày tháng 08 năm 2010 SINH VIÊN THỰC HIỆN DẪN CÁN BỘ HƯỚNG SINH VIÊN THỰC HIỆN Formatted: Tab stops: 1.63", Centered + 4.88", Centered ThS Phan Thế Duy ThS Phan Thế Duy DUYỆT CỦA BỘ MÔN Châu Phượng Quyên DUYỆT CỦA HĐLV & TLTN Formatted: Space Before: pt, After: pt, Line spacing: single, Tab stops: 1.5", Centered + 4.88", Centered [...]... 15,4 13 – chlorophyl (a) 0,61 – 1,15 3 – chất béo 1,5 – 3,8 14 – phycocyanin (biliprotein) 6–7 4 – chất xơ 2,5 – 4,1 15 – vitamin B1 (mg/kg) 35 5 – khoáng 11,5 – 16 16 – vitamin B6 (mg/kg) 8 6 – độ ẩm 9 17 – vitamin E (mg/kg) Vết 7 – calcium (mg/%)  300 18 – magnesi (mg/%) 370 8 – sodium (mg/%) 230 19 – zinc (mg/%) 3 9 – potassium (mg/%) 1670 20 – mangan (mg/%) 2 10 – phosphor (mg/%) 310 21 – copper... dùng 1 viên tảo Spirulina 5g, đã cho thấy sự phục hồi rõ rệt sau 5 tuần, số còn lại không dùng tảo Spirulina thì vẫn mắc bệnh 3 Tham khảo các phương pháp chiết C – PC trên thế giới [12] C – PC có thể được chiết từ vi khuẩn lam hay vi tảo bằng nhiều phương pháp khác nhau nhằm phá vỡ vách tế bào và tách phycobiliprotein trong môi trường nước 3.1 Phương pháp chiết C – PC đi từ sinh khối tảo khô C – PC được... khối tảo khô 15 3.2 Phương pháp chiết C – PC đi từ sinh khối tảo tươi 15 4 Một số công trình làm tinh sạch C – PC 15 4.1 Phương pháp sắc ký 15 4.2 Kỹ thuật chiết tách hệ hai pha lỏng (ATPE) 16 4.3 Phương pháp kết hợp kỹ thuật chiết tách hệ hai pha nước với sắc ký trao đổi ion 16 5 Máy quang phổ UV – Vis 17 CHƯƠNG II PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ... khối trong dung dịch đệm phosphate 0,1M có pH = 7 hoặc dung dịch (NH4)2SO4 3.2 Phương pháp chiết C – PC đi từ sinh khối tảo tươi C – PC được chiết theo chu trình làm cho đóng băng ở - 25 đến – 15oC hay trong nitrogen lỏng và làm cho rã đông ở 4 đến 30oC So với các phương pháp khác thì phương pháp này cho hiệu suất cao nhất Ngoài ra, C – PC còn được chiết bằng phương pháp phá vỡ tế bào tảo bằng biện pháp. .. 22 Bảng 3.1 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin với những dung môi khác nhau 29 Bảng 3.2 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin với những thời gian khác nhau 32 Bảng 3.3 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin ở những nhiệt độ khác nhau 35 Bảng 3.4 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin ở những pH khác nhau 38 Bảng 3.5 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin với những tỷ... hiện……………………………………………………….19 4 Phương pháp nghiên cứu và thực nghiệm………………………………………….20 4.1 Phương pháp chiết phycocyanin trong tảo Spirulina 20 4.1.1 Xác định nồng độ phycocyanin, độ tinh khiết của dịch chiết và hiệu suất đạt được 20 4.1.1.1 Nồng độ phycocyanin (PC) 20 4.1.1.2 Độ tinh khiết (EP) 21 4.1.1.3 Hiệu suất (%Y) 21 4.1.2 Tiến hành các thí nghiệm khảo sát chọn điều... 23 4.1.2.4 Chọn pH tối ưu 23 4.1.2.5 Chọn tỷ lệ khối lượng sinh khối – thể tích dung môi tối ưu 23 4.1.3 Phương pháp chiết nhiều lần 24 4.2 Phương pháp làm tinh sạch phycocyanin trong tảo Spirulina ………… 25 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 1 Độ ẩm của mẫu nguyên liệu 27 2 Khảo sát đối với sinh khối tảo khô 27 2.1 Chọn điều kiện tối ưu cho quá trình chiết 27 2.1.1... sinh khối – thể tích dung môi khác nhau 41 Bảng 3.6 Điều kiện tối ưu cho quá trình chiết 43 Bảng 3.7 Kết quả khảo sát chọn tỷ lệ khối lượng PEG – muối – dung dịch 44 Bảng 3.8 Kết quả khi chiết phycocyanin nhiều lần 45 Bảng 3.9 Kết quả làm tinh sạch phycocyanin 47 Bảng 3.10 Kết quả khảo sát sự chiết PC với những dung môi khác nhau 51 Bảng 3.11 Kết quả khảo sát chiết phycocyanin. .. sánh nồng độ phycocyanin giữa tảo khô và tảo tươi 71 Đồ thị 3.44 So sánh độ tinh khiết giữa tảo khô và tảo tươi 71 Đồ thị 3.45 So sánh hiệu suất giữa tảo khô và tảo tươi 72 Đồ thị 3.46 Độ tinh khiết của tảo khô so với tảo tươi sau khi làm tinh sạch 73 Châu Phượng Quyên xiv Danh mục các từ viết tắt và ký hiệu DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT, KÝ HIỆU C – PC: phycocyanin PC: nồng độ phycocyanin. .. quy trình làm tinh sạch phycocyanin trong tảo Spirulina 25 Châu Phượng Quyên ix Danh mục các bảng DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại khoa học của tảo Spirulina 1 Bảng 1.2 Thành phần hóa học của tảo Spirulina 4 Bảng 1.3 So sánh công thức dinh dưỡng chuẩn và tảo Spirulina để thiết kế thực phẩm dinh dưỡng / chức năng 5 Bảng 1.4 So sánh tỷ lệ acid amin của spirulina với tiêu chuẩn