công nghệ enzyme - protein - Chương 4

bài giảng đầy đủ về enzyme

52 Chương Cấu trúc phân tử enzyme Enzyme có khả hiệu lực xúc tác lớn, có tính đặc hiệu cao Để đảm bảo cho chức enzyme chất xúc tác sinh học, cấu trúc enzyme phải tinh vi phức tạp 4.1 Bản chất hóa học enzyme Từ gần kỷ trước đây, nhà khoa học đổ xơ vào việc xác định chất hóa học enzyme Cho đến nay, nói rằng, ngồi nhóm nhỏ phân tử RNA có hoạt tính xúc tác, tuyệt đại đa số enzyme có chất protein thể hoạt tính xúc tác phụ thuộc vào cấu trúc bậc 1, 2, phân tử protein trạng thái tự nhiên chúng Thực tế chất hóa học enzyme xác định đắn từ sau kết tinh enzyme enzyme nhận dạng tinh thể urease đậu tương (Sumner, 1926), pepsin trypsin (Northrop Kunitz, 1930, 1931) Sau tác giả khác kết tinh số enzyme khác có đủ chứng xác nhận tinh thể protein nhận enzyme Kết nghiên cứu tính chất hóa lý enzyme cho thấy enzyme có tất thuộc tính hóa học chất protein hình dạng phân tử: đa số enzyme có dạng hình cầu (dạng hạt) Tỷ lệ trục dài trục ngắn phân tử vào khoảng - - Về khối lượng phân tử: enzyme có khối lượng phân tử lớn, thay đổi rộng từ 12000 dalton đến 1.000.000 dalton lớn Ví dụ ribonuclease có khối lượng phân tử 12700, glutamat dehydrogenase có khối lượng phân tử 1.000.000 Đa số enzyme có khối lượng phân tử từ 20.000 đến 90.000 vài trăm nghìn Do kích thước phân tử lớn, enzyme khơng qua màng bán thấm Enzyme tan nước, tan tạo thành dung dịch keo; chúng tan dung dịch muối lỗng, glycerin dung mơi hữu có cực khác Enzyme khơng bền dễ dàng bị biến tính tác dụng nhiệt độ cao Enzyme bị biến tính khả xúc tác Mức độ giảm hoạt tính enzyme tương ứng với mức độ biến tính protein chế phẩm Kiềm, acid mạnh, kim loại nặng làm cho enzyme biến tính Cũng protein, enzyme có tính chất lưỡng tính 53 4.2 Thành phần cấu tạo enzyme Cũng protein, enzyme protein đơn giản protein phức tạp Trên sở đó, người ta thường phân enzyme thành hai nhóm: enzyme thành phần (enzyme cấu tử) enzyme hai thành phần (enzyme hai cấu tử) Trường hợp enzyme protein đơn giản gọi enzyme thành phần Trường hợp enzyme protein phức tạp nghĩa protein đơn giản cịn có nhóm ngoại khơng phải protein gọi enzyme hai thành phần Phần protein enzyme hai thành phần gọi apoprotein hay apoenzyme, cịn phần khơng phải protein gọi nhóm ngoại coenzyme Phần protein thường chất hữu đặc hiệu gắn chặt vào phần protein liên kết lỏng lẻo tách khỏi phần protein cho thẩm tích qua màng Coenzyme phần protein enzyme trường hợp dễ tách khỏi phần apoenzyme cho thẩm tích qua màng bán thấm tồn độc lập Phần protein enzyme gọi nhóm ngoại hay nhóm prosthetic, liên kết chặt chẽ với phần protein enzyme liên kết đồng hóa trị Một phức hợp hồn chỉnh gồm apoenzyme coenzyme gọi holoenzyme Một coenzyme kết hợp với apoenzyme tạo thành holoenzyme khác xúc tác cho q trình chuyển hóa chất khác giống kiểu phản ứng Coenzyme trực tiếp tham gia phản ứng xúc tác, giữ vai trò định kiểu phản ứng mà enzyme xúc tác làm tăng độ bền apoenzyme yếu tố gây biến tính Cịn apoenzyme có tác dụng nâng cao hoạt tính xúc tác coenzyme định tính đặc hiệu enzyme Các coenzyme thường dẫn xuất vitamin hòa tan nước Cần ý phân biệt coenzyme nhóm ngoại tương đối, khó có tiêu chuẩn thật rành mạch để phân biệt “liên kết chặt chẽ” “liên kết không chặt chẽ”, năm gần đây, người ta chứng minh rằng, nhiều coenzyme kết hợp vào apoenzyme chúng liên kết đồng hóa trị Do đó, ngày người ta ý đến phân biệt coenzyme nhóm ngoại Ngồi ra, thành phần cấu tạo, nhiều enzyme có chứa kim loại Thuộc loại enzyme hai thành phần gồm có hầu hết enzyme lớp 1, 2, 4, 5, Các enzyme thủy phân (lớp 3) thường enzyme thành phần có chứa ion kim loại địi hỏi ion kim loại làm cofactor (đồng yếu tố) 54 4.3 Cấu trúc bậc enzyme Trong nhiều trường hợp, chuỗi polypeptide có cấu trúc bậc ba kết hợp với tạo thành phân tử enzyme có cấu trúc bậc bốn Như cấu trúc bậc bốn cách xếp đặc trưng không gian chuỗi polypeptide riêng biệt phân tử enzyme Đến người ta xác định số lớn enzyme tế bào có cấu trúc bậc bốn Các enzyme có cấu trúc bậc bốn enzyme olygomer polymer nhiều đơn vị nhỏ cấu tạo nên, đơn vị nhỏ chuỗi polypeptide Các đơn vị nhỏ phân tử enzyme giống nhau, khác cấu tạo chức năng, số giống nhau, số khác Những enzyme nhiều đơn vị nhỏ cấu tạo nên gọi enzyme polymer đơn vị nhỏ gọi protomer (các đơn vị nhỏ gọi mảnh tiểu phần đơn vị) So với enzyme monomer, enzyme có cấu trúc bậc bốn có điểm sai khác sau đây: - Có trọng lượng phân tử tương đối lớn, vào khoảng 100.000 - Phân tử thường chứa vài trung tâm hoạt động, có có đến 3,4 trung tâm hoạt động - Khả tương tác trung tâm hoạt động với chất phụ thuộc vào trạng thái chức trung tâm hoạt động khác Trong số trường hợp, tiểu phần có trung tâm hoạt động tương tác tiểu phần ảnh hưởng đến cấu hình khơng gian trung tâm hoạt động tiểu phần, ảnh hưởng đến hoạt động xúc tác enzyme Trong số trường hợp khác, nhóm định chức trung tâm hoạt động lại nằm tiểu phần khác nhau, hoạt động enzyme thể có kết hợp đắn tiểu phần Như vậy, enzyme có cấu trúc bậc bốn có tính tổ chức hệ thống hợp tác cao - Là điều kiện cần thiết để xuất tính chất allosteric enzyme Cần nói thêm răng, enzyme allosteric (enzyme dị lập thể, dị không gian) enzyme mà chất trao đổi làm ảnh hưởng (ức chế hoạt hóa) lên tác dụng chúng Hình tượng dị lập thể (allosteric) bắt đầu xảy trước hết enzyme xây dựng nên từ số tiểu đơn vị hiệu ứng dị lập thể có ảnh hưởng đến độ bền liên kết tiểu đơn vị (xem thêm phần enzyme dị lập thể) 55 - Gồm tiểu phần đơn vị: Đa số enzyme có cấu trúc bậc bốn chứa từ - protomer, số enzyme khác chứa từ - protomer Ví dụ enzyme catalase có trọng lượng phân tử 252.000, chứa mảnh đơn vị, mảnh có phân tử lượng 42.000 Một số enzyme chứa đến 12 protomer ví dụ arginine carboxylase, oxaloacetate carboxylase - Sự xếp mảnh đơn vị phân tử enzyme thường có tính chất đối xứng cao Có kiểu chính, biểu thị hình Hình 4.1 Sự xếp tiểu phần enzyme có cấu trúc bậc bốn - Các tiểu phần tương tác với kiểu liên kết khác Trong đa số trường hợp nhờ tương tác kỵ nước, liên kết hydrogen, mội số trường hợp khác nhờ liên kết disulfide (ví dụ glucoseoxydase Asp.niger) cầu polypeptide (ví dụ enzyme leucin-s-RNAsynthetase) Cầu polypeptide có vai trị quan trọng với tính đặc hiệu enzyme, thay đổi tính chất phản ứng Cần lưu ý độ bền tương tác tiểu phần phụ thuộc vào kiểu liên kết chúng Vì vậy, tác dụng hóa chất khác nhau, enzyme bị phân ly thuận nghịch thành mảnh đơn vị Ví dụ liên kết hydrogen bị phá vỡ tác dụng urê, clorua guanidin chloride nồng độ cao; tương tác kỵ nước bị phá vỡ tác dụng số dung môi hữu dioxan, ethylen clorhydrin v.v muối trung hoà nồng độ cao Độ bền cấu trúc bậc bốn phân tử enzyme phụ thuộc vào tỷ lệ tổng số thể tích gốc acid kỵ nước (VK) với tổng số thể tích gốc amino acid ưa nước (Vư) phân tử enzyme Nếu VK/Vư > 1, cấu tạo bậc bốn phân tử bền vững; ngược lại VK/Vư < 1, khơng tạo thành cấu trúc bậc bốn có khơng bền vững Ví dụ, cytochrome C, ribonuclease dễ dàng tạo thành cấu trúc olygomer, cấu trúc dễ dàng bị phân ly lọc qua gel sephadex Tuy nhiên tỷ lệ VK/Vư enzyme có cấu trúc bậc bốn khơng phải ln 56 lớn tỷ số VK/Vư enzyme monomer, trái lại số trường hợp bé Ví dụ enzyme polymer phosphorylase b có tỷ lệ VK/Vư giống với α - chymotrypsine (1,04) nhỏ tỷ lệ VK/Vư lysozyme (1,08) Sự hình thành cấu trúc bậc bốn bước đường hình thành hệ thống tổ chức cấu trúc tế bào 4.4 Trung tâm hoạt động enzyme Tồn cấu trúc khơng gian phân tử enzyme có vai trị quan trọng hoạt tính xúc tác enzyme Tuy nhiên, hoạt động enzyme liên hệ trực tiếp với phần xác định phân tử enzyme Trung tâm hoạt động enzyme phần phân tử enzyme trực tiếp kết hợp với chất, tham gia trực tiếp việc tạo thành chuyển hóa phức chất trung gian enzyme chất để tạo thành sản phẩm phản ứng Trung tâm hoạt động bao gồm nhiều nhóm chức khác amino acid, phân tử nước liên kết nhiều có cofactor hữu (coenzyme) vơ Ở enzyme thành phần, trung tâm hoạt động thường bao gồm tổ hợp nhóm chức amino acid không tham gia tạo thành trục sợi polypeptide Ví dụ nhóm - SH cysteine - OH serine, threonine tyrosine, ε - NH2 lysine, -COOH glutamic acid, aspartic, vòng imidazol histidine, indol tryptophan, nhóm guanidin arginine Các nhóm xa mạch polypeptide lại gần không gian, định hướng xác định không gian cách khoảng cách định cho chúng tương tác với q trình xúc tác Ví dụ: trung tâm hoạt động α - chymotrypsin bao gồm nhóm hydroxyl Ser - 195, imidazol His - 57 nhóm carboxyl Asp 102 Các gốc xa chuỗi polypetide nhóm chức chúng cách từ 2,8 - 3,0 Å Trung tâm hoạt động enzyme hai thành phần thường bao gồm nhóm ngoại (vitamin, ion kim loại ) nhóm chức amino acid phần apoenzyme Sự tương ứng cấu hình khơng gian trung tâm hoạt động chất hình thành trình enzyme tiếp xúc với chất 57 Theo quan niệm Fisher trung tâm hoạt động enzyme hình thành sẵn với cấu tạo định cho phép chất có cấu tạo tương ứng kết hợp vào Do ví tương ứng “ổ khóa với chìa khóa”(Hình 4.2.a) Cơ chất + Cơ chất + Vùng hoạt động Phức hợp ES Phức hợp ES Enzyme Enzyme a b Hình 4.2 Mơ hình Fisher (a) mơ hình Koshland (b) Thuyết giải thích số tượng khơng giải thích thỏa đáng nhiều kết thu thực nghiệm Vì vậy, Koshland đưa giả thuyết khác hấp dẫn tế nhị Theo thuyết đặc điểm vùng trung tâm hoạt động mềm dẻo linh hoạt, nhóm chức trung tâm hoạt động enzyme tự chưa tư sẵn sàng hoạt động, tiếp xúc với chất, nhóm chức phần trung tâm hoạt động phân tử enzyme thay đổi vị trí khơng gian, tạo thành hình thể khớp với hình thể chất (Hình 4.2.b) Cũng vậy, người ta gọi mơ hình mơ hình “tiếp xúc cảm ứng” “khớp cảm ứng” Giữa chất trung tâm hoạt động tạo thành nhiều tương tác yếu, dễ dàng bị cắt đứt q trình phản ứng để giải phóng enzyme sản phẩm phản ứng Trung tâm hoạt động enzyme có cấu trúc bậc nằm phần đơn vị bao gồm nhóm chức thuộc phần đơn vị khác 4.5 Phương pháp thăm dị phát nhóm chức trung tâm hoạt động enzyme Đây việc khó khăn phức tạp, phải sử dụng hàng loạt phương pháp khác Khi xác định vai trị quan trọng nhóm hoạt tính enzyme, chưa có nghĩa nhóm thuộc trung tâm 58 hoạt động enzyme, có nhiều nhóm chức làm nhiệm vụ trì cấu trúc khơng gian hoạt động cho phân tử enzyme Muốn thăm dò, phát xác định nhóm chức phân tử enzyme, người ta thường dùng phương pháp vật lý, hóa học, xác định số ion hóa nhóm chức tốt kết hợp với việc nghiên cứu cấu trúc phân tử enzyme trung tâm hoạt động Các phương pháp vật lý có khả nưng phá huỷ cách đặc hiệu nhóm chức enzyme thường khơng nhiều, khó chọn tác nhân phá huỷ số nhóm hóa học định mà lại không làm ảnh hưởng đến tồn cấu trúc phân tử enzyme Chính vậy, thơng thường người ta khóa, phá huỷ, đánh dấu nhóm chức thuốc thử hóa học chất ức chế đặc hiệu, chất coenzyme 4.5.1 Phương pháp dùng chất ức chế Tùy trường hợp dùng chất ức chế đặc hiệu khác nhau, ví dụ: - Đối với số enzyme oxy hóa khử có nhóm hoạt động ion sắt người ta dùng xyanua (cyanide CN) để phát vai trị ion sắt hoạt tính enzyme CN kết hợp với ion sắt làm cho enzyme khả vận chuyển điện tử Ví dụ CN ức chế enzyme cytochromoxydase - Một số enzyme cần có ion kim loại tham gia vào q trình xúc tác để giữ ổn định cấu trúc phân tử enzyme Để thăm dị phát đặc tính cần kim loại chúng, người ta dùng chất kết hợp kim loại EDTA (Ethylen diamino tetraacetate) orthophenantrolin Nếu enzyme cần kim loại hoạt tính - Để thăm dị vai trị nhóm - S - CH methionine hoạt tính enzyme oxy hóa nhóm thành sunfoxit tương ứng: - S - CH3 O enzyme khả xúc tác - Vai trị nhóm - SH Cysteine hoạt động enzyme xác định cách cho phản ứng với muối kim loại nặng dẫn chất chúng ví dụ PCMB (parachloromercuri - benzoate) cho phản ứng với iodoacetate Dưới tác dụng chất nêu, nhóm SH enzyme bị khóa enzyme hoạt động - Để phát nhóm imidazol Histidine hoạt tính enzyme người ta phá huỷ nhóm phương pháp oxy hóa quang học 59 với có mặt xanh metylen cho phản ứng với iodoacetate Khi nhóm chức bị phá huỷ bị khóa enzyme hoạt tính - Để tìm hiểu vai trị nhóm ε - NH2 lysine cho phản ứng với fluordinitro benzen (FDNB) để tạo thành dinitrophenyl (DNP) màu vàng FDNB phản ứng với nhánh bên amino acid khác imidazol, phenol, thiol tạo dẫn chất DNP khơng màu Cũng ức chế nhóm ε - NH2 cách cho phản ứng với yếu tố oxy hóa - Vai trị nhóm - OH serine hoạt tính enzyme thăm dò cách cho tác dụng với chất ức chế đặc hiệu diisopropylfluor-phosphate (DFP) DFP khóa nhóm - OH serine enzyme hoạt tính Trong số trường hợp nhóm chức tham gia vào chế xúc tác phát dễ dàng so với nhóm hóa học khác loại, nhờ khả phản ứng tăng lên vị trí đặc biệt chúng phân tử enzyme 4.5.2 Phương pháp đánh dấu chất đặc hiệu coenzyme - Nhiều người cho dùng chất đặc hiệu để đánh dấu nhóm chức hợp lý song gặp nhiều khó khăn phức hợp tạo thành thường không vững bền (phức hợp enzyme - chất dễ dàng bị phân ly ngược chiều, phức hợp enzyme - sản phẩm phản ứng phân ly với tốc độ cao) Tuy vậy, phương pháp thực nghiệm khôn khéo người ta tách sản phẩm trung gian phản ứng kết hợp với enzyme liên kết đồng hóa trị vững bền Ví dụ người ta tách phosphoserine đánh dấu trường hợp phosphoglucosemutase trình phản ứng vận chuyển phosphore, phức hợp enzyme với sản phẩm trung gian triosephosphate dehydrogenase - Phương pháp đánh dấu coenzyme sử dụng có giá trị số trường hợp Như người ta nghiên cứu trung tâm hoạt động cytochrome C cách dùng coenzyme heme làm chất đánh dấu dùng pyridoxal phosphate làm chất đánh dấu để nghiên cứu số enzyme cần coenzyme làm yếu tố phối hợp Cần lưu ý dùng coenzyme, chất hay chất giống chất để đánh dấu nhóm chức trung tâm hoạt động enzyme liên kết hóa học chất đánh dấu với nhóm 60 đủ vững bền biến thành liên kết vững bền phương pháp thích hợp Mặt khác, chất coenzyme kết hợp với enzyme làm cho enzyme không bị ức chế thuốc thử đặc hiệu enzyme chất kết hợp với nhóm chức năng, làm ngăn cách cách đặc hiệu nhóm chức enzyme thuốc thử Như vậy, trường hợp nêu, nhóm chức kết luận cách suy luận gián tiếp kết thực nghiệm trực tiếp 4.5.3 Xác định trị số pK nhóm hoạt động Enzyme phân tử protein đặc hiệu có nhiều nhóm hóa học bị ion hóa, nên enzyme tồn nhiều trạng thái ion hóa khác nhau; thường có dạng ion phân tử enzyme có khả thể hoạt tính xúc tác, trạng thái ion hóa nhóm hoạt động enzyme có liên quan trực tiếp đến q trình xúc tác Trạng thái ion hóa nhóm khác khơng có liên quan trực tiếp đến chế xúc tác enzyme thường khơng ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme Trạng thái ion hóa enzyme, chất phức hợp enzyme-cơ chất chịu ảnh hưởng trực tiếp pH môi trường phản ứng Do nghiên cứu ảnh hưởng pH hoạt tính enzyme tìm trị số pK nhóm hoạt động enzyme (K = số ion hóa, pK = - logK), Với trị số pK suy đốn nhóm hoạt động enzyme Cũng cần ý rằng, phương pháp xác định trị số pK dẫn sơ cần phải phối hợp với nhiều phương pháp khác 4.5.4 Nghiên cứu cấu trúc phân tử Các phương pháp hóa học đặc hiệu xác định trị số pK thơng tin cần thiết để suy đốn chưa đủ để chứng minh vai trò nhóm hoạt động Vì cần phải nghiên cứu cấu tạo hóa học cấu trúc khơng gian phân tử enzyme đặc biệt trung tâm hoạt động Bằng cách cắt bỏ dần gốc amino acid phân tử enzyme người ta chứng minh hoạt độ enzyme phụ thuộc vào số phận định phân tử enzyme.Ví dụ papain enzyme thủy phân protein, bị cắt bỏ 2/3 số gốc amino acid hoạt động, trung tâm hoạt động nằm đầu nhóm - COOH 61 4.6 Các dạng phân tử enzyme Trong cấu trúc phân tử enzyme, tính chất tinh vi phức tạp khơng giới hạn phạm vi phân tử, từ thành phần cấu tạo bậc cấu trúc cấu tạo trung tâm hoạt động với vai trị nhóm chức mà cịn thể tính đa dạng phân tử enzyme Tính đa dạng nhiều enzyme khác phát thể sống khác từ người, động vật, thực vật đến vi sinh vật Người ta thấy có enzyme xúc tác phản ứng hóa học có tính đặc hiệu chất có nguồn gốc khác nên thể nhiều tính chất khác Aldolase có nguồn gốc từ nấm men có nhiều tính chất khác với aldolase mô động vật; pepsin, trypsin, chymotrypsin, xanthin - oxydase lysozyme có dạng phân tử khác Nhiều enzyme tương tự thu từ loại mơ lồi khác có tính chất khác biệt nhau: α - amylase dịch nước bọt dịch tụy người giống nhau, chúng khác với α - amylase thu từ tụy lợn độ hịa tan, pH thích hợp số tính chất khác Những enzyme có nguồn gốc từ mơ khác lồi, xúc tác loại phản ứng hóa học, khác rõ rệt tính đặc hiệu chất trường hợp cholinesterase Các enzyme xúc tác phản ứng chuyển hóa giống tế bào nhiều mơ khác có tính chất đặc hiệu quan, ví dụ lactat dehydrogenase tim xương khác rõ rệt tốc độ di chuyển điện di nhiều tính chất khác Ngay mô hay quan, tồn dạng phân tử khác nhau: tim có hai dạng phân tử lactat dehydrogenase có tốc độ di chuyển điện di khác nhau, từ nấm men tách bốn dạng phân tử phosphoglyceraldehyde dehydrogenase Trong tế bào, enzyme có dạng phân tử khác tồn phần khác tế bào, ví dụ aspartat aminotransferase có dạng phân tử ty lạp thể khác với dạng phân tử enzyme bào tương Như vậy, tính đa dạng phân tử enzyme thể nhiều mức độ, từ loài khác đến mô hay quan khác thể phận khác tế bào Các dạng phân tử khác enzyme, có chức xúc tác phản ứng hóa học giống cấu trúc phân tử chúng nhiều có khác nhau, chúng có tính chất khác hóa học, vật lý, miễn dịch chí động học tính đặc hiệu phản ứng enzyme 62 Theo kiến nghị thức ủy ban thường trực enzyme Hội Hóa sinh Quốc tế, danh từ isoenzyme dùng để dạng phân tử khác enzyme tồn loài; danh từ này, danh từ isozyme quen dùng Theo số tác giả, phân loại dạng phân tử khác enzyme, phải phân biệt isoenzyme heteroenzyme Danh từ isoenzyme dành cho dạng phân tử enzyme có nguồn gốc từ quan mơ phải có hoạt động xúc tác nhau; danh từ heteroenzyme dành cho dạng phân tử có hoạt động xúc tác giống có nguồn gốc từ quan loài khác Trong enzyme đa dạng trình bày, isoenzyme lactat dehydrogenase nghiên cứu đặc điệt kỹ chúng có ý nghĩa mặt chẩn đốn bệnh Chúng có dạng phân tử tetrame có trọng lượng phân tử phân chia riêng rẽ điện di thành cấu tử khác 4.7 Phức hợp multienzyme Trong thể sống, enzyme polyme - enzyme có cấu trúc bậc bốn, nhiều đơn vị nhỏ cấu tạo nên; tồn hệ thống nhiều enzyme hay cịn gọi hệ thống multienzyme Đó hệ thống gồm enzyme có liên quan với nhau, xúc tác cho dây chuyền phản ứng trình trao đổi xác định, sản phẩm phản ứng enzyme trước xúc tác chất enzyme xúc tác cho phản ứng Có thể minh họa hệ thống gồm enzyme E 1, E2, E3 xúc tác cho dây chuyền phản ứng sau: E1 E2 E3 A→B→C→D Trong sơ đồ này, A chất E1, B sản phẩm phản ứng E1 xúc tác lại chất E2 v.v Các hệ thống nhiều enzyme tế bào có mức độ tổ chức phức tạp khác Các enzyme hệ thống nhiều enzyme tồn riêng rẽ dạng hịa tan, khơng liên kết với kết tụ với nhau, liên kết với bền tạo thành phức hợp nhiều enzyme tách riêng khỏi phức hợp enzyme, hoạt tính xúc tác Ngồi ra, số hệ thống 63 enzyme liên kết với thành phần cấu tạo tế bào màng ribosome Các enzyme chuỗi hơ hấp xúc tác cho q trình chuyển điện tử từ chất đến oxy, gắn chặt vào màng ty thể thực chất phần cấu trúc ty thể Người ta gặp phức hợp multienzyme nhiều trình chuyển hóa: q trình khử carboxyl oxy hóa pyruvic acid tạo thành acetyl coenzyme A, trình tổng hợp acid béo ty lạp thể nấm men, loài có vú, lồi chim , q trình tổng hợp peptide có hoạt tính kháng sinh gramicidine tyrocidin, trình tổng hợp tryptophan v.v TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Hữu Chấn, 1983 Enzyme xúc tác Sinh học Nxb Y học, Hà Nội Phạm Thị Trân Châu, Trần Thị Áng, 2000 Hóa sinh học Nxb Giáo dục, Hà Nội Đỗ Ngọc Liên, Phạm Thị Trân Châu, 1972 Enzyme I, II Đại học Tổng hợp, Hà Nội Nguyễn Tiến Thắng, Nguyễn Đình Hun, 1998 Giáo trình sinh hóa đại Nxb Giáo dục, Hà Nội Nguyễn Xuân Thắng, Đào Kim Chi, Phạm Quang Tùng, Nguyễn Văn Đồng, 2004 Hóa sinh học Nxb Y học, Hà Nội Lê Ngọc Tú, La Văn Chứ, Phạm Trân Châu, Nguyễn Lân Dũng, 1982 Enzyme vi sinh vật Nxb KH&KT, Hà Nội Lê Ngọc Tú (chủ biên), Lê Văn Chứ, Đặng Thị Thu, Phạm Quốc Thăng Nguyễn Thị Thịnh, Bùi Đức Hợi, Lưu Duẫn, Lê Dỗn Diên, 2000 Hóa sinh Cơng nghiệp, Nxb KH&KT, Hà Nội Tài liệu tiếng nước Bermeyer H U, Bermeyer J and Grasel M (editors) 1983 Methods of enzymatic analysis Vol II Verlag chemie Weinheim Lehringer A L., 2004 Principle of Biochemistry, 4th Edition W.H Freeman, 2004 Pelmont J., 1993 Enzymes Presses universitaires de grenobe Stryer L., 1981 Biochemistry W.H.Freeman and company San Francisco Biochemical information, 1973 Boehringer Mannheim GmbH Biochemica  ...53 4. 2 Thành phần cấu tạo enzyme Cũng protein, enzyme protein đơn giản protein phức tạp Trên sở đó, người ta thường phân enzyme thành hai nhóm: enzyme thành phần (enzyme cấu tử) enzyme hai... phần (enzyme hai cấu tử) Trường hợp enzyme protein đơn giản gọi enzyme thành phần Trường hợp enzyme protein phức tạp nghĩa ngồi protein đơn giản cịn có nhóm ngoại khơng phải protein gọi enzyme. .. Để thăm dị vai trị nhóm - S - CH methionine hoạt tính enzyme oxy hóa nhóm thành sunfoxit tương ứng: - S - CH3 O enzyme khả xúc tác - Vai trị nhóm - SH Cysteine hoạt động enzyme xác định cách cho