PHẨY KHUẨN TẢ (Vibrio cholerae)

PHẨY KHUẨN TẢ (Vibrio cholerae) Mã bài: XN2 18.22 Thời lượng: LT: 2tiết TH:0 GIỚI THIỆU: Vibrio thuộc họ Vibrionaceae, họ có giống có giống quan trọng Y học Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas Có tới 30 loài thuộc giống Vibrio có số loài phát hiện, hiểu biết vi khuẩn khả gây bệnh chúng hạn chế Vibrio cholerae ( R Kock phát năm 1883) Vibrio parahaemolyticus (được Fujino phát 1951) loài có vai trò quan trọng MỤC TIÊU: Sau học xong này, học sinh có khả năng: Trình bày đặc điểm sinh vật học khả gây bệnh phẩy khuẩn tả Nêu phương pháp chẩn đoán vi khuẩn học phẩy khuẩn tả NỘI DUNG Đặc điểm sinh vật học 1.1 Hình thể tính chất bắt màu Phẩy khuẩn tả có hình que cong dấu phẩy, dài 2- 4µm, rộng 0,30,6µm Nuôi cấy lâu ngày hình thẳng Vi khuẩn có lông đầu, di động nhanh mạnh vỏ, không sinh nha bào, nhuộm bắt màu gram âm 1.2 Tính chất nuôi cấy Phẩy khuẩn tả hiếu khí, nhiệt độ thích hợp 37 0C phát triển 16420C Phát triển tốt môi trường kiềm (pH 8,5 -9,5) nồng độ muối cao (3%) - Trong môi trường pepton kiềm vi khuẩn mọc nhanh, sau 6-8 tạo thành váng mặt môi trường - Trên môi trường thạch kiềm sau 18 khuẩn lạc tròn, lồi, nhẵn suốt - Trên môi trường Macconkey khuẩn lạc (không lên men đường lactose) - Trên môi trường TCBS (Thiosunfat, Citrate Bile Salts, Saccharose) Sau 18 khuẩn lạc tròn, bóng, màu vàng (lên men đường saccharose) 1.3 Tính chất sinh vật hoá học - Lên men không sinh đường glucose, saccharose, maltose, mannitol - Không lên men đường lactose, arabinose - Oxydase (+); indol (+) sớm, citratsimons (+), LDC (Lysin dercarboxylase ) (+), ODC (ornithin decarboxylase) (+), ONPG (+) - H2S (-), urease (-), VP (±); ADH (arginin dihydrolase): (-) 1.4 Cấu tạo kháng nguyên phân loại Vibrio cholerae loài bao gồm vi khuẩn gây bệnh tả vi khuẩn không gây bệnh tả có giống cấu trúc ADN, có giống tính chất sinh vật hoá học Phẩy khuẩn tả có loại kháng nguyên : - Kháng nguyên H (kháng nguyên lông) : Là kháng nguyên chung cho tất loại vi khuẩn tả, dễ bị phá huỷ 1000C/2 - Kháng nguyên O (kháng nguyên thân): Là lipopolysaccharid, có tính đặc hiệu cao, bị phá huỷ 1000C/1 Căn vào khác kháng nguyên O, Vibrio cholerae chia thành 100 nhóm, chủng gây dịch tả trước thuộc nhóm O1 Năm 1992 xuất nhóm O139 gây dịch tả nhiều nước giới Vibrio cholerae O1 chia typ huyết thanh: Typ huyết Ogawa Inaba Hikojima Thành phần kháng nguyên A, B A, C A, B,C A, B, C: loại định kháng nguyên Dựa vào tính chất sinh học, vi khuẩn tả chia thành typ sinh học (sinh typ): V.cholerae sinh typ cổ điển (gọi tắt V.cholerae) V cholerae sinh typ Eltor (gọi tắt V Eltor) Eltor tên trạm cách ly bệnh nhân tả, nơi mà Gotschlich phân lập vi khuẩn từ tử thi bệnh nhân năm 1905 Sự khác tính chất typ sinh học là: Tính chất V cổ điển V Eltor Làm tan hồng cầu cừu Ngưng kết hồng cầu gà Nhậy cảm với polymycin B Ly giải phage IV Ly giải phage V + + - + + + 1.5 Sức đề kháng Phẩy khuẩn tả có sức đề kháng yếu, dễ bị tiêu diệt chất sát khuẩn thông thường, sống số phân số ngày nước Khả gây bệnh Dịch tả bệnh tối gây hiểm: lây lan nhanh, tử vong cao Hiện bệnh tả tản phát nhiều tỉnh nước ta, đặc biệt đồng sông Cửu Long Phẩy khuẩn tả xâm nhập vào thể đường tiêu hoá, gây bệnh cho người Chúng gây bệnh vượt qua dày người có độ acid giảm Vi khuẩn dễ chết qua dày người (bình thường có pH xấp xỉ ) Đối với người dày tiết dịch bình thường thức ăn, nước uống phải có khả trung hoà bớt acid dịch vị, vi khuẩn gây bệnh Sau xuống ruột non, vi khuẩn bám vào niêm mạc không xâm nhập nên không gây tổn thương cấu trúc niêm mạc ruột Vi khuẩn phát triển nhanh nhờ pH thích hợp (pH ≈ 8), vi khuẩn tiết độc tố ruột LT (thermolabile toxin), LT gắn vào thụ thể phù hợp màng tế bào niêm mạc ruột non làm hoạt hoá men adenyl cyclase dẫn đến tăng nhiều AMP vòng, làm cho tế bào niêm mạc ruột giảm hấp thu Na +, tăng tiết nước Cl- gây ỉa chảy cấp tính Bệnh nhân chết nước điện giải Thời gian ủ bệnh ngắn, vài ngày Sau khỏi bệnh miễn dịch bền vững Một số nghiên cứu cho thấy 90% số người mắc bệnh tả vùng lưu hành không mắc lại Thời gian bảo vệ kháng thể khoảng năm Chủ yếu kháng thể IgA tiết ruột định Chẩn đoán vi khuẩn học 3.1 Chẩn đoán trực tiếp Lấy bệnh phẩm phân chất nôn bệnh nhân, cần lấy sớm trước bệnh nhân uống kháng sinh, xét nghiệm trước giờ, chưa xét nghiệm phải cấy vào môi trường bảo quản Carry- Blair giữ mẫu phân 48 (1) KHT: Kháng huyết Phân/chấtnôn nônnôn (2) Dương tính: oxydase, idol, glucose, saccharose, manose, di động (3) Â m tính: H2S, urease, lactose, arabinose Sơ đồ phân lập xác định vi khuẩn tả Carry Blair 3.1.2 Nuôi cấy: Ngưng với nuôi cấy vào môi trường pepton, Thạch kiềm/TCBS - Bệnhkếtphẩm sau lấy váng mặt o KHT (1) 37 C/18-24h môi trường nhuộm soi cấy chuyển sang môi trường phân lập ống pepton khác Xác định tính chất Ngưngđể kết tủ vớiấm - Đồng thời cấy bệnh phẩm vào môi trường thạch kiềm, TCBS, hoá sinh học (2) 37 C, sau 18-24 nhuộm soi xác định tính chất sinh vật hoá học.KHT 3.1.3 Phản ứng ngưng kết: Ngưngxác kết với Sau vi khuẩn định tính chất sinh vật hoá học tiến hành KHT phản ứng ngưng kết lam kính với kháng huyết đa giá Nếu ngưng kết tiếp tục làm phản ứng ngưng kết với kháng huyết đơn giá Ogawa, Inaba KẾT LUẬN 3.1.4 Kỹ thuật kháng thể huỳnh quang trực tiếp: Làm tiêu từ bệnh phẩm từ váng môi trường pepton kiềm, nhuộm tiêu kháng thể gắn huỳnh quang soi kính hiển vi huỳnh quang Phương pháp cho kết nhanh tính đặc hiệu cao 3.2 Chẩn đoán gián tiếp Trên thực tế thường không làm bệnh tả có thời kỳ ủ bệnh nhanh, kháng thể chưa xuất hiện, kết chậm Nhưng dùng để điều tra dịch tễ học Phòng bệnh điều trị 4.1 Phòng bệnh - Phòng bệnh đặc hiệu: Trước thường dùng vaccin tả chết, đưa vào thể đường tiêm, hiệu lực miễn dịch không cao Hiện có loại vaccin dùng đường uống kích thích đáp ứng miễn dịch ruột Có loại vaccin sống giảm độc lực vaccin chết, vaccin sống giảm độc lực có khả tạo miễn dịch bảo vệ 80% Vaccin phòng tả Việt Nam dùng gồm O1 O139 vaccin chết - Phòng không đặc hiệu: Những biện pháp phòng bệnh quan trọng vệ sinh ăn uống, phát sớm cách ly triệt để bệnh nhân, sử lý phân chất nôn bệnh nhân Diệt ruồi nhặng trung gian truyền bệnh 4.2 Điều trị - Bù nước điện giải: Có vai trò quan trọng để cứu sống bệnh nhân, cho bệnh nhân uống oresol (ORS) chất lỏng tương đương với số nước Truyền tĩnh mạch cần thiết - Kháng sinh: Thường dùng tetraxyclin, cloramphenicol, bactrim Tốt nên điều trị theo kháng sinh đồ LƯỢNG GIÁ Trả lời ngắn câu sau - Kể môi trường nuôi cấy bệnh phẩm chẩn đoán tả: A………………… B…………………….C………………… - Phẩy khuẩn tả có kháng nguyên sau: A…………………………… B…………………………… - Vibrio cholerae O1 có typ huyết là: A……………………… B………………………C……………………… - Nêu phương pháp chẩn đoán trực tiếp phẩy khuẩn tả: A…………………………… B………………………… C……………………………….D………………………… - Phẩy khuẩn tả bắt màu ……………………… nhuộm gram - Ở môi trường pepton kiềm, phẩy khuẩn tả mọc sau ………………… - Trên môi trường TCBS, khuẩn lạc phẩy khuẩn tả có màu vàng vì……… - Phẩy khuẩn tả ………………………… oxydase - Phẩy khuẩn tả phát triển tốt môi trường có pH…………………… Trả lời sai câu sau: TT Nội dung Đ S Phản ứng ngưng kết chẩn đoán phảy khuẩn tả để xác định kháng thể Phảy khuẩn tả phát triển môi trường có kiềm cao muối mặn Phảy khuẩn tả không lên men đường arabinose Trên môi trường Macconkey, khuẩn lạc phảy khuẩn tả có màu vàng Phảy khuẩn tả di động nhanh Tìm kháng thể huyết kỹ thuật thường dùng chẩn đoán phảy khuẩn tả Phảy khuẩn tả có sức đề kháng yếu Phảy khuẩn tả thuộc nhóm vi khuẩn đường ruột Phảy khuẩn tả vi khuẩn chí đường ruột Phảy khuẩn tả phát triển nhanh môi trường pepton kiềm Chọn câu trả lời - Bệnh phẩm để chẩn đoán phẩy khuẩn tả : A Phân D Máu B Chất nôn E Tuỳ theo bệnh C Phân chất nôn - Trên môi trường pepton kiềm, phảy khuẩn tả phát triển: A Tạo váng mặt môi trường B Nằm lơ lửng môi trường C Lắng xuống đáy môi trường D Môi trường chuyển màu vàng E Tất sai - Phảy khuẩn tả có tính chất sau: A Xitrat simmons (-) D Cả A+B+C B Hiếu khí E Cả B+C C Mọc nhanh môi trường pepton kiềm - Bệnh nhân tả chết thường do: A Nhiễm nội độc tố D Hoại tử ruột B Nhiễm ngoại độc tố E Cả A+C+D C Mất nước muối - Phảy khuẩn tả tính chất: A Có hình dấu phẩy B Chỉ phát triển môi trường kiềm cao muối mặn C Có lông, không sinh nha bào D Kháng nguyên O có chất lipopolysaccharis E Indol (+) - Trên môi trường ure Indol nuôi cấy phảy khuẩn tả , môi trường có đặc điểm: A Đục B Tạo váng C Màu hồng cánh sen D Mầu đỏ tươi E Mầu vàng - Bệnh phẩm phân để chẩn đoán phảy khuẩn tả nuôi cấy vào môi trường sau để xem tính chất khuẩn lạc: A Thạch máu B Pepton kiềm C Thạch TCBS D Cả A+B E Cả A+C