BIOTIN Biotinum C10H16N2O3S P.t.l: 244,3 Biotin acid 5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxohexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoic, phải chứa từ 98,5% đến 101,0% C10H16N2O3S, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột kết tinh trắng tinh thể không màu, khó tan nước ethanol, thực tế không tan aceton, tan dung dịch loãng hydroxyd kim loại kiềm Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm I: A Nhóm II: B, C A Phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2 ) chế phẩm thử phải phù hợp với phổ hồng ngoại biotin chuẩn (ĐC) B Kiểm tra sắc ký đồ dung dịch thử tạp chất liên quan (xem mục tạp chất liên quan) Một vết sắc ký đồ dung dịch thử (2) có vị trí kích thước tương tự vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) C Hoà tan khoảng 10 mg chế phẩm 20 ml nước cách đun nóng Để nguội Thêm 0,1 ml nước brom (TT) Nước brom bị màu Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hoà tan 0,250 g chế phẩm dung dịch natri hydroxyd 0,4% pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Dung dịch S phải (Phụ lục 9.2) không màu (Phụ lục 9.3, phương pháp 2) Góc quay cực riêng Từ +89o đến +93o, tính theo chế phẩm làm khô (Phụ lục 6.4) Dùng dung dịch S để đo Tạp chất liên quan Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel (5 µm) Dung môi khai triển: Methanol : acid acetic băng - toluen (5 : 25 : 75) Dung dịch thử (1): Hoà tan 50 mg chế phẩm acid acetic băng (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi Dung dịch thử (2): Pha loãng ml dung dịch thử (1) thành 10 ml acid acetic băng (TT) Dung dịch đối chiếu (1): Hoà tan mg biotin chuẩn (ĐC) acid acetic băng (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng ml dung dịch thử (2) thành 20 ml acid acetic băng (TT) Dung dịch đối chiếu (3): Pha loãng ml dung dịch thử (2) thành 40 ml acid acetic băng (TT) Các dung dịch pha trước dùng phải bảo quản tránh ánh sáng chói Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 µl dung dịch Triển khai sắc ký đồ đến dung môi khoảng dài 15 cm Làm khô mỏng luồng không khí ấm Để nguội phun lên mỏng dung dịch 4-dimethylaminocinnamaldehyd (TT) Kiểm tra sắc ký đồ ánh sáng ban ngày Bất kỳ vết nào, trừ vết sắc ký đồ dung dịch thử (1) không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) (0,5%) tối đa có vết đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (3) (0,25%) Kim loại nặng Không 10 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 1,0 g chế phẩm tiến hành thử theo phương pháp Dùng 10 ml dung dịch chì chuẩn phần triệu (TT) để điều chế dung dịch mẫu Mất khối lượng làm khô Không 1,0% (Phụ lục 9.6) (1,000 g; 100 oC đến 105 oC) Tro sulfat Không 0,1% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm để thử Định lượng Lắc 0,200 g chế phẩm ml dimethylformamid (TT) Đun nóng chế phẩm tan hoàn toàn Thêm 50 ml ethanol 96% (TT) chuẩn độ dung dịch tetrabutylamoni hydroxyd 0,1 M (CĐ), xác định điểm kết thúc phương pháp chuẩn độ đo điện (Phụ lục 10.2) ml dung dịch tetrabutylamoni hydroxyd 0,1 M (CĐ) tương đương với 24,43 mg C10H16N2O3S Bảo quản Tránh ánh sáng Loại thuốc Vitamin