Huyết học truyền máu miễn dịch sinh học phân tử

BỘ Y TẾ CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Số: 2017 /QĐ-BYT Hà Nội, ngày 09 tháng năm 2014 QUYẾT ĐỊNH Về việc ban hành tài liệu “Hƣớng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học-Truyền máu-Miễn dịch-Di truyền-Sinh học phân tử” BỘ TRƢỞNG BỘ Y TẾ Căn Luật khám bệnh, chữa bệnh năm 2009; Căn Nghị định số 63/2012/NĐ-CP ngày 31/8/2012 Chính Phủ quy định chức năng, nhiệm vụ, quyền hạn cấu tổ chức Bộ Y tế; Xét Biên họp Hội đồng nghiệm thu Hướng dẫn Quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học- Truyền máu- Miễn dịch di truyền- Sinh học phân tử Bộ Y tế; Theo đề nghị Cục trưởng Cục Quản lý Khám, chữa bệnh, QUYẾT ĐỊNH: Điều Ban hành kèm theo Quyết định tài liệu “Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học- Truyền máu- Miễn dịch di truyền- Sinh học phân tử”, gồm 147 quy trình kỹ thuật Điều Tài liệu “Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết họcTruyền máu- Miễn dịch di truyền- Sinh học phân tử” ban hành kèm theo Quyết định áp dụng sở khám bệnh, chữa bệnh Căn vào tài liệu hướng dẫn điều kiện cụ thể đơn vị, Giám đốc sở khám bệnh, chữa bệnh xây dựng ban hành tài liệu Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết học- Truyền máu- Miễn dịch di truyền- Sinh học phân tử phù hợp để thực đơn vị Điều Quyết định có hiệu lực kể từ ngày ký ban hành Điều Các ông, bà: Chánh Văn phòng Bộ, Cục trưởng Cục Quản lý Khám, chữa bệnh, Chánh Thanh tra Bộ, Cục trưởng Vụ trưởng Cục, Vụ thuộc Bộ Y tế, Giám đốc bệnh viện, viện có giường bệnh trực thuộc Bộ Y tế, Giám đốc Sở Y tế tỉnh, thành phố trực thuộc trung ương, Thủ trưởng Y tế Bộ, Ngành Thủ trưởng đơn vị có liên quan chịu trách nhiệm thi hành Quyết định này./ Nơi nhận: - Như Điều 4; - Bộ trưởng Bộ Y tế (để b/c); - Các Thứ trưởng BYT; - Bảo hiểm Xã hội Việt Nam (để phối hợp); - Cổng thông tin điện tử BYT; - Website Cục KCB; - Lưu VT, KCB KT BỘ TRƢỞNG THỨ TRƢỞNG Đã ký Nguyễn Thị Xuyên BỘ Y TẾ CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do- Hạnh Phúc DANH SÁCH HƢỚNG DẪN QUY TRÌNH KỸ THUẬT CHUYÊN NGÀNH HUYẾT HỌC- TRUYỀN MÁU- MIỄN DỊCHDI TRUYỀN- SINH HỌC PHÂN TỬ (Ban hành kèm theo Quyết định số: 2017 /QĐ-BYT ngày 09 tháng năm 2014 Bộ trưởng Bộ Y tế) TÊN QUY TRÌNH KỸ THUẬT TT Chƣơng I Huyết học tế bào Nhuộm hóa học tế bào Tìm ấu trùng giun (phương pháp thủ công) Tìm ký sinh trùng sốt rét (phương pháp thủ công) Nhuộm hoá mô miễn dịch mảnh sinh thiết tuỷ xương Nhuộm sợi xơ mô tuỷ xương (Phương pháp sợi Collagen Van Gieson) Nhuộm sợi liên võng mô tuỷ xương (Phương pháp Gomori) Xét nghiệm tế bào dịch não tuỷ (phương pháp thủ công) Xét nghiệm tế bào loại dịch (phương pháp thủ công) Xét nghiệm tế bào nước tiểu (phương pháp thủ công) 10 Xét nghiệm tế bào nước tiểu (bằng máy tự động) 11 Đếm số lượng tiểu cầu máy đếm tự động theo nguyên lý trở kháng laser; quan sát độ tập trung tiểu cầu tiêu máu ngoại vi 12 Tìm hồng cầu có chấm ưa bazơ 13 Tìm mảnh vỡ hồng cầu Xét nghiệm hồng cầu lưới (bằng máy đếm tự động) Xét nghiệm hồng cầu lưới (Bằng kỹ thuật nhuộm xanh sáng Cresyl) Tìm tế bào Hargrave Xử lý bệnh phẩm sinh thiết chẩn đoán mô học Chụp ảnh kính hiển vi kỹ thuật số ghi đĩa Chụp ảnh kính hiển vi kỹ thuật số Chƣơng II Đông cầm máu 20 Thời gian máu chảy (phương pháp Ivy) 21 Nghiệm pháp dây thắt (phương pháp tăng áp) 22 Phát kháng đông đường ngoại sinh 14 15 16 17 18 19 Định lượng Fibrinogen (phương pháp gián tiếp) máy bán tự động/tự động 24 Định lượng yếu tố XII (phương pháp thì) 25 Nghiệm pháp sinh Thromboplastin (TGT:Thromboplastin Generation Test) 26 Định lượng ức chế yếu tố IX 27 Định lượng hoạt tính Plasminogen 28 Đo độ quánh máu/huyết tương 29 Phát kháng đông đường chung Xét nghiệm phát giảm tiểu cầu Heparin (Heparin induced 30 Thrombocytopenia) Định lượng kháng nguyên chất ức chế hoạt hóa Plasminogen (PAI-1 31 antigen: Plasminogen activated inhibitor type antigen) Chƣơng III Miễn dịch- Di truyền- Sinh học phân tử Định lượng kháng thể kháng nDNA (anti-nDNA) kỹ thuật miễn dịch 32 gắn men (ELISA) Định lượng kháng thể kháng dsDNA (anti-dsDNA) kỹ thuật miễn dịch 33 gắn men (ELISA) 34 Định tính kháng thể kháng dsDNA (bằng kỹ thuật ngưng kết latex) 35 Định tính kháng thể kháng nhân kỹ thuật miễn dịch gắn men (ELISA) Định lượng anti – β2 glycoprotein kỹ thuật miễn dịch gắn men 36 (ELISA) + 37 Đếm tế bào gốc tạo máu CD34 máy phân tích tế bào dòng chảy (Flow Cytometry) 23 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 Đọ chéo ghép máy phân tích tế bào dòng chảy (Flow Cytometry) Đếm tế bào lympho T-CD3, T-CD4, T-CD8 kỹ thuật phân tích tế bào dòng chảy Xét nghiệm CD55/59 bạch cầu Điện di huyết sắc tố máy điện di mao quản Sức bền hồng cầu Tiền mẫn cẩm kỹ thuật miễn dịch gắn men (ELISA) Xét nghiệm gen kỹ thuật FISH Nhuộm băng G nhiễm sắc thể Công thức nhiễm sắc thể tuỷ Công thức nhiễm sắc thể máu ngoại vi Cấy hỗn hợp tế bào lympho Phát người mang gen Hemophilia (bằng kỹ thuật PCR-PFLP) Xét nghiệm FISH xác định nhiễm sắc thể X,Y Xét nghiệm FISH xác định nhiễm sắc thể Ph1 (BCR/ABL) Xét nghiệm FISH chẩn đoán chuyển đoạn NST 4;11 Xét nghiệm FISH chẩn đoán chuyển đoạn NST 1;19 Xét nghiệm FISH chẩn đoán chuyển đoạn NST 8;21 Xét nghiệm FISH chẩn đoán chuyển đoạn NST 15;17 Tách chiết DNA từ máu ngoại vi/máu cuống rốn Tách chiết RNA từ máu ngoại vi/tủy xương PCR chẩn đoán bệnh anpha thalassemia (05 đột biến) Kỹ thuật Nested RT-PCR phát gen lai BCR/ABL Định lượng gen bệnh máu ác tính kỹ thuật Real - Time PCR Xét nghiệm phát tồn gen bệnh kỹ thuật RT-PCR Phát gene JAK2 V617F kỹ thuật AS- PCR Xét nghiệm phát đột biến gene kỹ thuật Multiplex PCR ( phát 63 lúc nhiều đột biến) 64 Định lượng virut Cytomegalo (CMV) băng kỹ thuật Real Time PCR Phát đảo đoạn intron 22 gen yếu tố VIII bệnh Hemophilia kỹ 65 thuật longrange PCR Chƣơng IV Truyền máu o 66 Xét nghiệm hòa hợp miễn dịch phát máu 22 C (kỹ thuật ống nghiệm) 67 Nghiệm pháp coombs trực tiếp (phương pháp ống nghiệm) 68 Nghiệm pháp coombs gián tiếp (phương pháp ống nghiệm) 69 Định nhóm máu hệ Rh D (yếu) (kỹ thuật ống nghiệm) 70 Xác định kháng nguyên C hệ Rh (kỹ thuật ống nghiệm) 71 Xác định kháng nguyên c hệ Rh (kỹ thuật ống nghiệm) 72 Xác định kháng nguyên E hệ Rh (kỹ thuật ống nghiệm) 73 Xác định kháng nguyên e hệ Rh (kỹ thuật ống nghiệm) 74 Xác định kháng nguyên K hệ KELL (kỹ thuật ống nghiệm) 75 Xác định kháng nguyên k hệ KELL (kỹ thuật ống nghiệm) 76 Xác định kháng nguyên Jka hệ kidd (kỹ thuật ống nghiệm) 77 Xác định kháng nguyên Jkb hệ kidd (kỹ thuật ống nghiệm) 78 Xác định kháng nguyên S hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 79 Xác định kháng nguyên P1 hệ P1PK (kỹ thuật ống nghiệm) 80 Xác định kháng nguyên Lea hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 81 Xác định kháng nguyên Leb hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 82 Xác định kháng nguyên Kpa hệ KELL (kỹ thuật ống nghiệm) 83 Xác định kháng nguyên Kpb hệ KELL (kỹ thuật ống nghiệm) 84 Xác định kháng nguyên M hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 85 Xác định kháng nguyên N hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 86 Xác định kháng nguyên Fya hệ DUFFY (kỹ thuật ống nghiệm) 87 Xác định kháng nguyên Fyb hệ DUFFY (kỹ thuật ống nghiệm) 88 Xác định kháng nguyên s hệ MNS (kỹ thuật ống nghiệm) 89 Xác định kháng nguyên Lua hệ Lutheran (kỹ thuật ống nghiệm) 90 Xác định kháng nguyên Lub hệ Lutheran (kỹ thuật ống nghiệm) 91 Xác định kháng nguyên C hệ Rh (phương pháp gelcard) 92 Xác định kháng nguyên c hệ Rh (phương pháp gelcard) 55 56 57 58 59 60 61 62 Xác định kháng nguyên E hệ Rh (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên e hệ Rh (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên K hệ KELL (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên k hệ KELL (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Kpa hệ KELL (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Kpb hệ KELL (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Fya hệ DUFFY (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Fyb hệ DUFFY (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Jka hệ kidd (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Jkb hệ kidd (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Lea hệ LEWIS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Leb hệ LEWIS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên s hệ MNS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên S hệ MNS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên M hệ MNS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên N hệ MNS (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Lua hệ Lutheran (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên Lub hệ Lutheran (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên P1 hệ P1PK (phương pháp gelcard) Xác định kháng nguyên D phần (DVI) (phương pháp gelcard) Sàng lọc kháng thể bất thường (kỹ thuật ống nghiệm) Sàng lọc kháng thể bất thường (phương pháp gelcard) Định danh kháng thể bất thường (kỹ thuật ống nghiệm) Định danh kháng thể bất thường (phương pháp gelcard) Gan tế bào máu từ máu ngoại vi (Dành cho người hiến máu thành phần) Chƣơng V Công nghệ Tế bào gốc 118 Tuyển chọn người cho huy động tế bào gốc 119 Thu nhận máu dây rốn 120 Thu nhận tế bào gốc từ máu ngoại vi sau huy động 121 Thu nhận tế bào lympho từ người hiến 122 Thu nhận tế bào gốc từ tủy xương 123 Phân lập tế bào gốc túi lấy máu Phân lập tế bào gốc từ máu dây rốn phương pháp ly tâm có sử dụng 124 HES 125 Phân lập tế bào gốc ống ly tâm 50ml, không sử dụng hóa chất 126 Cô đặc tinh tế bào gốc ống Res-Q60 Phân lập tế bào gốc phương pháp ly tâm phân lớp theo tỷ trọng sử 127 dụng FICOLL 128 Phân lập tế bào gốc hệ thống tự động SEPAX 129 Phân lập tế bào gốc máu dây rốn hệ thống tự động AXP 130 Phân lập tế bào gốc từ dịch hút tủy xương máy COMTEC 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 Phân lập tế bào gốc từ dịch hút tủy xương máy HARVEST-TERUMO Bảo quản đông lạnh tế bào gốc tạo máu bình nitơ lỏng Rã đông khối tế bào gốc đông lạnh Đánh giá tỷ lệ sống tế bào kỹ thuật nhuộm xanh Tryban Nuôi cấy cụm tế bào gốc tạo máu Vận chuyển tế bào gốc sau bảo quản Định nhóm HLA độ phân giải cao kỹ thuật SSO – Luminex Chƣơng VI Huyết học lâm sàng 138 Trao đổi huyết tương 139 Gạn bạch cầu điều trị 140 Gạn tiểu cầu điều trị 141 Truyền hóa chất đường tĩnh mạch 142 Truyền máu giường 143 Rút máu 144 Chọc tủy sống lấy dịch não tủy làm xét nghiệm 145 Chọc tủy sống tiêm hóa chất nội tủy 146 Ghép tế bào gốc tạo máu tự thân 147 Ghép tế bào gốc tạo máu đồng loại (Tổng số 147 quy trình kỹ thuật) 131 132 133 134 135 136 137 KT BỘ TRƢỞNG THỨ TRƢỞNG Đã ký Nguyễn Thị Xuyên CHƢƠNG I HUYẾT HỌC TẾ BÀO (Cell-Hematology) NHUỘM HÓA HỌC TẾ BÀO (CYTOCHEMICAL STAIN) I NGUYÊN LÝ Hóa học tế bào phương pháp khảo sát số thành phần có chứa bào tương tế bào, kính hiển vi quang học sau làm màu thuốc nhuộm chất thích hợp Nguyên tắc chung Tất phƣơng pháp nhuộm hóa học tế bào bao gồm ba giai đoạn: - Cố định: Ngoài mục đích cố định tế bào tiêu bản, phương pháp nhuộm phải lựa chọn hóa chất cố định hợp lý để bảo tồn tối đa thành phần cần khảo sát: ví dụ không bào mỡ nhuộm Soudan Black, men peroxydase nhuộm Peroxydase, - Nhuộm: Dùng thuốc nhuộm (Soudan Black) hay chất (benzidin,  naphtol acetat, ) để trực tiếp gián tiếp làm màu thành phần cần khảo sát - Tạo nền: Dùng thuốc nhuộm làm màu hình thái tế bào (nhân bào tương) tiêu Màu phải có độ tương phản cần thiết để giúp quan sát thuận lợi hạt dương tính phương pháp nhuộm Đảm bảo tiêu khô, bƣớc kỹ thuật Phải loại bỏ hết chất cố định hay chất nhuộm để khô tiêu trước chuyển sang bước II CHỈ ĐỊNH - Hỗ trợ phương pháp hình thái học để xác định dòng, mức độ biệt hoá tế bào phân loại lơ xê mi cấp, hội chứng rối loạn sinh tuỷ bất thường khác - Trong số trường hợp đặc biệt, hoá học tế bào giúp xác định quần thể tế bào có phải blast hay không: ví dụ microblast dòng hạt tiêu Giemsa giống lympho rối loạn hình thái III CHỐNG CHỈ ĐỊNH Không có chống định IV CHUẨN BỊ Ngƣời thực Cử nhân kỹ thuật, kỹ thuật viên Huyết học  Truyền máu thuộc nhóm kỹ thuật chuyên sâu thực quy trình Phƣơng tiện – Hóa chất Hiện nay, hầu hiết Labo Huyết học – Tế bào sử dụng phương pháp nhuộm hóa học tế bào cách cố định tiêu formol 40% dung dịch cồn formol 10% Mặc dù sử dụng hóa chất hãng khác nhau, để đạt hiệu tốt việc chuẩn bị phương tiện để tiến hành kỹ thuật có điểm chung như: 2.1 Dụng cụ - Bể nhuộm thủy tinh dung tích 100ml: chiếc; - Bàn sấy, quạt sấy tiêu bản: chiếc; - Bain - marie (bình cách thủy) có điều chỉnh nhiệt độ; - Pipette Pasteur:  cái/1tiêu bản; - Pipette man loại 100 - 1000l: 1- cái, kèm đầu côn; - Gạc thấm: cái/ 1tiêu bản; - Lam kính làm tiêu theo nhu cầu; - Giá cài tiêu bản: sử dụng theo số xét nghiệm; - Kính hiển vi + dầu soi 2.2 Hóa chất - Cồn formol 10%: 100ml cho đợt dùng; - Cơ chất cho phản ứng: Soudan black, periodic acid shiff, benzidin, Napthol acetat ; - Các hóa chất đệm phản ứng: Tris, TBS, PO4-3, ; - Các hóa chất nhuộm như: Hematoxyllin, Giemsa, Nuclear Fasred… Bệnh phẩm - Sử dụng tiêu tủy xương tiêu máu ngoại vi (theo định); - Tiêu sấy khô ghi ký hiệu kỹ thuật cần làm Phiếu xét nghiệm V CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH Trước tiến hành cần làm thao tác sau: - Kiểm tra thông tin tiêu (tên, tuổi người bệnh); - Ghi ký hiệu tiêu (ví dụ: PAS, Peroxydase, Soudan Black …); - Làm khô tiêu bản; - Tiến hành bước kỹ thuật: +Cố định tiêu (máu, tủy) cồn formol 10% formol 40%: 10 phút + Rửa dòng nước chảy mạnh (đối với cố định cồn formol 10%), rửa nhẹ nhàng (đối với cố định formol 40%) sấy khô tiêu bản: thường khoảng – 10 phút + Nhuộm với chất tùy loại xét nghiệm Tùy theo loại xét nghiệm chất mà để thời gian phù hợp, tạo điều kiện cho phản ứng hiệu + Rửa dòng nước chảy mạnh để loại bỏ hóa chất lại sau phản ứng tạp bẩn tiêu  sấy khô tiêu + Nhuộm nền: Tùy theo loại xét nghiệm mà có hóa chất thời gian nhuộm khác để có chất lượng tốt + Rửa dòng nước chảy mạnh  sấy khô làm đẹp, hoàn thiện tiêu VI NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ Đánh giá mức độ dƣơng tính Độ 0: Không có hạt bắt màu hóa học tế bào () Độ 1: Các hạt bắt màu chiếm khoảng  1/3 bào tương tế bào (+) Độ 2: Các hạt bắt màu chiếm khoảng >1/3 đến < 3/4 bào tương tế bào (++) Độ 3: Các hạt bắt màu chiếm hết bào tương tế bào (+++) Độ 4: Các hạt bắt màu chiếm hết bào tương đè lên nhân tế bào (++++) Tính điểm (score) Đánh giá mức độ dương tính hóa học tế bào 100 tế bào cần nghiên cứu Giả sử tỷ lệ phần trăm tế bào độ 0, 1, 2, 3, tương ứng với a, b, c, d, e công thức tính điểm sau: Score = (a x 0) + (b x 1) + (c x 2) + (d x 3) + (e x 4) VII THEO DÕI Ở phương pháp nhuộm đòi hỏi nồng độ hóa chất thời gian phản ứng khác Vì vậy, người tiến hành kỹ thuật phải theo dõi thời gian phản ứng xét nghiệm để chọn thời gian tối ưu cho phản ứng Việc góp phần quan trọng đến việc có tạo sản phẩm chất lượng cao hay không VIII NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ Nhuộm hóa học tế bào đòi hỏi chặt chẽ nồng độ hóa chất, thời gian phản ứng điều kiện phản ứng Nếu xảy cố xử trí cách thực quy chuẩn điều kiện cho loại xét nghiệm 10 CHỌC TỦY SỐNG LẤY DỊCH NÃO TỦY XÉT NGHIỆM I NGUYÊN LÝ Là phương pháp đưa kim vào khoang nhện vùng thắt lưng để lấy dịch não tủy II CHỈ ĐỊNH Các bệnh nhiễm khuẩn - Viêm màng não - Viêm não - Áp xe não Các bệnh viêm không nhiễm khuẩn - Xơ hệ thống - Guillain - Barré - Bệnh Luput ban đỏ hệ thống Các bệnh ung thƣ - Lơxêmi cấp dòng Tủy, dòng Lympho U lympho có thâm nhiễm thần kinh trung ương - Các bệnh ung thư có thâm nhiễm não màng não - U não III CHỐNG CHỈ ĐỊNH - Tăng áp lực nội sọ cao khối u choán chỗ tắc hệ thống dẫn lưu não thất - Chấn thương tủy chèn ép tủy - Nhiễm trùng chỗ vị trí chọc dò - Bệnh lý giảm tiểu cầu, rối loạn đông máu - Suy hô hấp, suy tuần hoàn nặng IV CHUẨN BỊ Ngƣời thực - Bác sĩ - Điều dưỡng phụ (nếu bệnh nhi cần thêm điều dưỡng) Phƣơng tiện, dụng cụ - Kim chọc dò kích cỡ 22G 20G, với trẻ em sử dụng kim ngắn - Bơm tiêm 391 - Thuốc gây tê - Dung dịch sát khuẩn Povidone Iodine 10% (Betadine) - Khăn vô khuẩn - Ống nghiệm (4 ống) Ngƣời bệnh Được giải thích kỹ mục đích làm thủ thuật, người thực hiện:, nơi thời gian thực Người bệnh dặn không ăn uống đại tiểu tiện trước sau thực thủ thuật Phiếu xét nghiệm - Sinh hóa nước dịch - Tế bào nước dịch - Nuối cấy vi khuẩn - Các xét nghiệm đặc thù chuyên khoa khác (BK, PCR lao, tìm nấm, virus ) V CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH Tư người bệnh Người bệnh ngồi nằm cong lưng phía thầy thuốc, cúi gập đầu phía ngực, co hai đùi cẳng chân phía bụng Với trẻ em cần điều dưỡng tay giữ gáy tay giữ khoeo chân chân để tránh phản ứng bất thường Xác định mốc Đường nối hai mào chậu người bệnh qua thân đốt sống L4, vị trí chọc thường L3-L4 cao L2-L3 Sát trùng gây tê Bác sĩ tiến hành thủ thuật găng vô khuẩn, sát trùng vị trí chọc từ Trải khăn vô khuẩn Điều dưỡng đưa bơm tiêm có thuốc gây tê để thủ thuật viên gây tê cho người bệnh Tiến hành chọc dò Chọc kim cột sống vị trí khe hai đốt sống góc chếch 150, đưa kim qua da, tổ chức da, dây chằng cột sống, khoang màng cứng, màng cứng vào khoang nhện Kéo nòng kim để dịch chảy Nếu không thấy dịch phải rút kim điều chỉnh lại 392 Điều dưỡng viên đưa áp kế cho thủ thuật viên đo áp lực dịch não tủy Tiếp hứng dịch não tủy vào ống xét nghiệm Thủ thuật viên rút kim chọc dò, điều dưỡng phụ đặt gạc lên vùng lưng vừa chọc dán băng giữ bên Người bệnh nằm sấp nằm nghiêng sau chọc dò Theo dõi toàn trạng người bệnh Thủ thuật viên ghi kết việc chọc dò vào hồ sơ bệnh án Điều dưỡng kiểm tra họ tên người bệnh ống giấy xét nghiệm, ghi chép vào phiếu chăm sóc người bệnh VI NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ Dịch não tủy bình thƣờng - Dịch không màu - Áp lực 50-180mmHg - Protein 15-40mg/100ml - Glucose 50-80mg/100ml - Tế bào: 0-4 bạch cầu/mm3 Dịch não tủy bệnh lý 2.1 Thay đổi áp lực - Tăng áp lực dịch não tủy khối u choán chỗ nhiễm trùng - Giảm áp lực dịch não tủy tắc nghẽn lưu thông phía chỗ chọc dò 2.2 Thay đổi màu sắc - Dịch đục tăng bạch cầu dịch não tủy thường gặp nhiễm khuẩn - Màu đỏ chảy máu khoang nhện, chấn thương thủ thuật - Màu vàng tổn thương lao, chảy máu cũ 2.3 Thành phần dịch não tủy - Tăng protein: Do viêm, khối u, chảy máu vào dịch não tủy - Giảm protein: Dịch não tủy tiết nhiều bình thường - Glucose tăng: Tăng đường máu toàn thân - Glucose giảm: Nhiễm trùng, lao - Tăng bạch cầu: Viêm màng não, áp xe não, thâm nhiễm bệnh ác tính - Có hồng cầu: Do chảy máu khoang nhện, chạm vào mạch máu vùng chọc dò VII NHỮNG TAI BIẾN VÀ XỬ TRÍ 393 - Thoát vị não (lọt hạnh nhân tiểu não lọt cực thái dương) gây tử vong Nếu nghi ngờ chụp CT trước - Nhức đầu sau chọc dò: Nằm nghỉ, giảm đau - Chảy máu vị trí chọc gây chèn ép tủy chảy máu vào tủy sống: Theo dõi điều chỉnh rối loạn đông cầm máu có - Nhiễm khuẩn: Kháng sinh toàn thân - Rỉ dịch chỗ chọc: Theo dõi vệ sinh chỗ - Choáng đau thuốc gây tê: Xử trí theo phác đồ chống choáng TÀI LIỆU THAM KHẢO Hướng dẫn quy trình kỹ thuật bệnh viện, tập 1, Nhà xuất y học, 1999, tr 61-63 394 CHỌC TỦY SỐNG TIÊM HÓA CHẤT NỘI TỦY I NGUYÊN LÝ Là phương pháp đưa hóa chất qua kim chọc dò vào khoang nhện vùng thắt lưng để điều trị II CHỈ ĐỊNH - Điều trị dự phòng thâm nhiễm thần kinh trung ương bệnh Lơxêmi cấp dòng Tủy, dòng Lympho U lympho; - Các bệnh ung thư có di não màng não; - Dự phòng thâm nhiễm thần kinh trung ương Hội chứng thực bào máu III CHỐNG CHỈ ĐỊNH - Nhiễm trùng chỗ vị trí chọc; - Giảm tiểu cầu nặng, rối loạn đông máu; - Suy hô hấp, suy tuần hoàn nặng IV CHUẨN BỊ Ngƣời thực - Bác sĩ; - Điều dưỡng phụ (nếu bệnh nhi cần thêm điều dưỡng) Phƣơng tiện, dụng cụ - Kim chọc dò kích cỡ 22G 20G, với trẻ em sử dụng kim ngắn hơn; - Bơm tiêm; - Thuốc gây tê; - Hóa chất điều trị: Thường sử dụng Cytarabin, Methotrexate Methylprednisolone; - Dung dịch sát khuẩn Povidone Iodine 10% (Betadine); - Khăn vô khuẩn; - Ống nghiệm (2 ống) Ngƣời bệnh Được giải thích kỹ mục đích làm thủ thuật, người thực hiện:, nơi thời gian thực Người bệnh dặn không ăn uống đại tiểu tiện trước sau thực thủ thuật Phiếu xét nghiệm 395 - Sinh hóa nước dịch; - Tế bào nước dịch V CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH Tư người bệnh Người bệnh ngồi nằm cong lưng phía thầy thuốc, cúi gập đầu phía ngực, co hai đùi cẳng chân phía bụng Với trẻ em cần điều dưỡng tay giữ gáy tay giữ khoeo chân chân để tránh phản ứng bất thường Xác định mốc Đường nối hai mào chậu người bệnh qua thân đốt sống L4, vị trí chọc thường L3-L4 cao L2-L3 Sát trùng gây tê Bác sĩ tiến hành thủ thuật găng vô khuẩn, sát trùng vị trí chọc từ Trải khăn vô khuẩn Điều dưỡng đưa bơm tiêm có thuốc gây tê để thủ thuật viên gây tê vị trí chọc Tiến hành tiêm tủy sống Chọc kim cột sống vị trí khe hai đốt sống góc chếch 15o, đưa kim qua da, tổ chức da, dây chằng cột sống, khoang màng cứng, màng cứng vào khoang nhện Kéo nòng kim để dịch chảy Nếu không thấy dịch phải rút kim điều chỉnh lại Điều dưỡng viên hứng dịch não tủy vào ống xét nghiệm Thủ thuật viên lắp bơm tiêm có sẵn hóa chất vào đốc kim rút nhẹ thấy có dịch chảy vào bơm tiêm bơm thuốc, điều chỉnh lại kim hút dịch Thủ thuật viên rút kim tiêm tủy, điều dưỡng phụ đặt gạc lên vùng lưng vừa chọc dán băng giữ bên Người bệnh nằm sấp nằm nghiêng sau tiêm Theo dõi toàn tràng người bệnh Thủ thuật viên ghi kết việc tiêm tủy sống vào hồ sơ bệnh án Điều dưỡng kiểm tra họ tên người bệnh ống giấy xét nghiệm, ghi chép vào phiếu chăm sóc người bệnh VI NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ - Khi rút bơm tiêm có dịch chảy bơm thuốc thấy nhẹ thuốc vào khoang nhện; 396 - Dịch não tủy có màu hồng kim chạm vào mạch máu vùng chọc dò; - Bơm thuốc thấy nặng kim chưa vào khoang nhện vùng tiêm bị xơ lần tiêm trước VII NHỮNG TAI BIẾN VÀ XỬ TRÍ - Nhức đầu sau chọc dò: Nằm nghỉ, giảm đau; - Chảy máu vị trí chọc gây chèn ép tủy chảy máu vào tủy sống: Theo dõi điều chỉnh rối loạn đông cầm máu có; - Nhiễm khuẩn chỗ hệ thống não tủy: Kháng sinh toàn thân; - Rỉ dịch chỗ chọc: Theo dõi vệ sinh chỗ; - Choáng đau thuốc gây tê: Xử trí theo phác đồ chống choáng TÀI LIỆU THAM KHẢO Hướng dẫn quy trình kỹ thuật bệnh viện, tập 1, Nhà xuất y học, 1999, tr 61-63 397 GHÉP TẾ BÀO GỐC TẠO MÁU TỰ THÂN (Autologous stem cell transplantation) I ĐẠI CƢƠNG Ghép tế bào gốc tạo máu tự thân phương pháp sử dụng tế bào gốc người bệnh ghép lại cho người bệnh Đây phương pháp xem đợt hóa trị liệu liều cao nhằm mục đích điều trị cho bệnh máu ác tính không đáp ứng với phác đồ đa hóa trị liệu chuẩn tái phát Hiệu ghép tế bào gốc tự thân chủ yếu có nhờ đa hóa trị liệu liều cao Đây biện pháp hỗ trợ hệ thống sinh máu người bệnh phục hồi nhanh chóng sau đa hóa trị liệu liều cao để phòng tránh biến chứng đe dọa tính mạng người bệnh Nguồn tế bào gốc tạo máu tế bào gốc tuỷ xương tế bào gốc máu ngoại vi Bên cạnh sử dụng tế bào gốc máu dây rốn tự thân bảo quản lạnh Tiêu chuẩn số lượng tế bào gốc tạo máu đủ để ghép dựa vào số lượng tế bào CD34+ phải đạt > 3x106/kg cân nặng người bệnh II CHỈ ĐỊNH Ghép tự thân - Các bệnh ác tính máu: Đa u tủy xương, U lympho không Hodgkin, lơxêmi cấp dòng tủy - Các bệnh u bướu: ung thư vú, buồng trứng, phổi, u tế bào mầm… - Các bệnh tự miễn: ban đỏ rải rác, xơ hoá hệ thống, viêm khớp dạng thấp, xuất huyết giảm tiểu cầu miễn dịch… III CHỐNG CHỈ ĐỊNH - Tuổi 65 Đa u tủy xương 60 tuổi U lympho ác tính không Hodgkin; - Người bệnh có bệnh lí gan, thận, phổi bệnh tim IV CHUẨN BỊ Ngƣời thực Bác sĩ, điều dưỡng kỹ thuật viên chuyên khoa huyết học - truyền máu 398 Phƣơng tiện 2.1 Buồng bệnh: - Buồng bệnh có hệ thống lọc không khí áp lực dương; - Hệ thống nước sinh hoạt buồng bệnh lọc vi khuẩn; - Hệ thống máy gạn tách tế bào gốc máu ngoại vi; - Hệ thống máy theo dõi dấu hiệu sinh tồn khí máu, máy điện tim, máy giúp thở; 2.2 Thuốc: - Các thuốc đặc trị: + Huy động tế bào gốc: dùng thuốc kích thích tăng trưởng tế bào gốc tạo máu (G-GSF, GM-CSF) + Thuốc điều trị trước ghép: tùy bệnh có phác đồ có loại thuốc khác + Thuốc điều kiện hóa cho ghép: tùy theo bệnh - Các thuốc hỗ trợ khác Ngƣời bệnh - Người bệnh đạt lui bệnh hoàn toàn phần hoá trị liệu; - Người bệnh không mắc bệnh di truyền bẩm sinh, không bị bệnh tim, gan, thận; - Người bệnh gia đình đồng ý tiến hành ghép tế bào gốc Hồ sơ bệnh án: theo quy định Bộ Y tế V CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH Bước 1: Người bệnh điều trị hóa chất trước ghép theo phác đồ Đặt catherter Hiskman vào tĩnh mạch trung tâm Bước 2: Chuẩn bị khối tế bào gốc cho ghép + Huy động tế bào gốc người bệnh: Tiêm thuốc kích bạch cầu G-CSF đơn với liều 10 µg/kg/ngày phối hợp Cyclophosphamide (liều 2g/m2, lần) với G-CSF Đếm số lượng bạch cầu số lượng tế bào CD34+ 399 hàng ngày Nếu số lượng tế bào CD34+ > 10 tế bào/ml tiến hành thu thập tế bào gốc máu ngoại vi + Thu thập tế bào gốc máu ngoại vi máy tách tế bào túi tế bào gốc Kết thúc thu gom số lượng CD34+ > 3x106/kg cân nặng + Lưu trữ tế bào gốc máu ngoại vi nhiệt độ -1960C nitơ lỏng nhiệt độ 2-80C vòng 72 Bước 3: Điều kiện hóa trước ghép cho người bệnh: tùy theo bệnh, ví dụ: + Đa u tủy xương: Melphalan liều 200mg/m2 + U lympho ác tính không Hodgkin: phác đồ BEAM LEED Bước 4: Truyền khối tế bào gốc chăm sóc + Truyền khối tế bào gốc: truyền vào thời điểm 24h sau kết thúc điều kiện hóa Nếu dịch tuỷ xương tế bào gốc ngoại vi truyền 40 giọt/phút Nếu dịch tế bào máu dây rốn bơm chậm qua ống thông Hiskman từ 10 - 15 phút + Chăm sóc người nhận ghép: Theo phương pháp chăm sóc toàn diện Theo dõi xét nghiệm tổng phân tích máu hàng ngày, xét nghiệm chức gan, thận ngày/lần + Chống nhiễm khuẩn, nhiễm nấm: Sử dụng kháng sinh phòng ngừa + Truyền chế phẩm máu: truyền khối hồng cầu khối tiểu cầu gạn tách từ người cho có định + Sử dụng thuốc kích bạch cầu (G-GSF, GM-CSF) + Kiểm tra tuỷ đồ ngày thứ 30 sau ghép Bước 5: Đánh giá người bệnh để viện: - Người bệnh không sốt, không cần dinh dưỡng qua đường tĩnh mạch; - Không cần truyền tiểu cầu hay tuần/lần; - Số lượng tuyệt đối bạch cầu trung tính (ANC) > 1G/L VI THEO DÕI - Theo dõi diễn biến dấu hiệu sinh tồn, lượng khí máu lúc ghép thu thập tế bào gốc máu ngoại vi 400 - Theo dõi lâm sàng xét nghiệm sau ghép tuỷ mọc thể người bệnh VII NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ - Trong trình truyền tế bào gốc: thường tai biến; có tăng huyết áp cần cho thuốc hạ áp, phản ứng rét run dị ứng xử trí corticoid - Sau ghép: có sốt nhiễm trùng, nhiễm nấm cần điều trị kháng sinh tĩnh mạch TÀI LIỆU THAM KHẢO Jo JC, Kang BW, Jang G, Sym SJ, Lee SS, Koo JE, Kim JW, Kim S, Huh J, Suh C BEAC or BEAM high-dose chemotherapy followed by autologous stem cell transplantation in non-Hodgkin's lymphoma patients: comparative analysis of efficacy and toxicity Ann Hematol 2008 Jan;87(1):43-8 2.Takamatsu H, Munemoto S, Murata R, Terasaki Y, Nakajima K, Nakao S Post-transplantation Consolidation and Maintenance Therapy with lenalidomide for Japanese Patients with Multiple Myeloma Anticancer Res 2013 Dec;33(12):5681-5 McCarthy PL, Hahn T Strategies for induction, autologous hematopoietic stem cell transplantation, consolidation, and maintenance fortransplantationeligible multiple myeloma patients Hematology Am Soc Hematol Educ Program ;2013:496-503 Fratino L, Rupolo M, Mazzuccato M, Berretta M, Lleshi A, Tirelli U, Michieli M Autologus stem cell transplatation as a care option in elderly patients A review Anticancer Agents Med Chem 2013 Nov;13(9):1419-29 401 GHÉP TẾ BÀO GỐC TẠO MÁU ĐỒNG LOẠI (Allogeneic stem cell transplantation) I ĐẠI CƢƠNG Ghép tế bào gốc đồng loại phương pháp truyền tế bào gốc tạo máu từ người cho huyết thống hay không huyết thống phù hợp hệ kháng nguyên bạch cầu HLA (Human Leukocyte Antigen) Nguồn tế bào gốc tạo máu tế bào gốc tuỷ xương Tuy nhiên, tế bào gốc máu ngoại vi dần thay Bên cạnh sử dụng tế bào gốc máu dây rốn Tiêu chuẩn số lượng tế bào gốc tạo máu đủ để ghép dựa vào số lượng tế bào CD34+ phải đạt > 3x106/kg cân nặng người bệnh II CHỈ ĐỊNH Ghép đồng loại - Các bệnh máu ác tính: lơxêmi cấp, lơxêmi kinh, rối loạn sinh tuỷ, U lympho ác tính - Các bệnh di truyền bẩm sinh - Các bệnh lý huyết học không ác tính: suy tuỷ xương, đái huyết sắc tố, Thalassemia III CHỐNG CHỈ ĐỊNH - Người bệnh có bệnh lí gan, thận, phổi tim bẩm sinh, suy tim - Tuổi > 55 IV CHUẨN BỊ Ngƣời thực Bác sĩ, điều dưỡng kỹ thuật viên chuyên khoa huyết học - truyền máu Phƣơng tiện 2.1 Buồng bệnh - Buồng bệnh có hệ thống lọc không khí áp lực dương; - Hệ thống nước sinh hoạt buồng bệnh lọc vi khuẩn; - Hệ thống máy gạn tách tế bào gốc máu ngoại vi; - Hệ thống máy theo dõi dấu hiệu sinh tồn khí máu, máy điện tim, máy giúp thở; 2.2 Thuốc: - Các thuốc đặc trị 402 + Huy động tế bào gốc: sử dụng thuốc kích thích tăng trưởng tế bào (G-GSF, GM-CSF); + Diệt tuỷ xương: Busulfan, Melphalan + Thuốc ức chế miễn dịch: Fludarabin, Cyclophosphamide, ATG + Thuốc ức chế miễn dịch phòng ghép chống chủ: Cyclosporin A, Methotrexate, Cellceft (MMF), Tacrolimus - Các thuốc hỗ trợ khác 2.3 Vật tư tiêu hao: - Bộ kít lọc bạch cầu khối hồng cầu, tiểu cầu; - Kít sàng lọc CMV cho chế phẩm máu Ngƣời bệnh - Người bệnh đạt lui bệnh hoàn toàn phần điều trị điều trị hoá chất; - Người bệnh không mắc bệnh di truyền bẩm sinh, không bị bệnh tim, gan, thận; - Người cho sản phẩm ghép bao gồm tuỷ xương, tế bào gốc tạo máu ngoại vi hay máu dây rốn phải khoẻ mạnh; không bị bệnh nhiễm trùng đặc biệt HIV; không bị nhiễm HCV, HBV giai đoạn tiến triển; không mắc bệnh tim, gan, thận… nguy tuần hoàn, hô hấp chiết tách tế bào gốc máu ngoại vi nguy biến chứng gây mê lấy tuỷ xương Hồ sơ bệnh án: theo quy định Bộ Y tế V CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH Bước 1: Kiểm tra xét nghiệm HLA người cho người nhận Nếu phù hợp tiến hành bước Bước 2: Kiểm tra lâm sàng người cho người nhận tim, phổi, thần kinh… xét nghiệm máu; chức gan, thận, yếu tố lây nhiễm…; xét nghiệm phân tích nước tiểu, điện tim, siêu âm tim… Bước 3: Chuẩn bị khối tế bào gốc cho ghép: - Huy động tế bào gốc người cho: tiêm thuốc kích bạch cầu G-CSF với liều 10 µg/kg/ngày Đếm số lượng bạch cầu số lượng tế bào CD34+ hàng ngày Nếu số lượng tế bào CD34+ > 10 tế bào/ml tiến hành thu thập tế bào gốc máu ngoại vi - Thu thập tế bào gốc máu ngoại vi máy tách tế bào túi tế bào gốc Kết thúc thu gom số lượng CD34+ > 3x106/kg cân nặng 403 - Lưu trữ tế bào gốc máu ngoại vi nhiệt độ -1960C nitơ lỏng nhiệt độ 2-80C vòng 72 Bước 4: Người bệnh đặt ống thông Hiskman vào tĩnh mạch trung tâm điều trị điều kiện hóa theo phác đồ giảm cường độ liều hay diệt tủy theo phác đồ Bước 5: Truyền khối tế bào gốc: truyền vào thời điểm 24-48h sau kết thúc điều kiện hóa Nếu dịch tuỷ xương tế bào gốc ngoại vi truyền 40 giọt/phút Nếu dịch tế bào máu dây rốn bơm chậm qua ống thông Hiskman từ 10 - 15 phút Bước 6: Các bước theo dõi xử trí biến chứng sau ghép + Phòng ghép chống chủ ghép từ anh chị em ruột phù hợp HLA: Sử dụng thuốc ức chế miễn dịch (Cyclosporin A) từ ngày D-4, liều mg/kg/ngày (tĩnh mạch) 5mg/kg/ngày (uống) Phối hợp methotrexate liều thấp 5mg/m2/ngày x ngày thứ 1, 3, + Chống nhiễm khuẩn, nấm: Có thể sử dụng kháng sinh phòng ngừa + Sử dụng chế phẩm máu: loại bạch cầu máy lọc bạch cầu, tia xạ gamma sàng lọc CMV âm tính + Sử dụng thuốc kích bạch cầu (G-GSF, GM-CSF) tuỳ trường hợp + Chăm sóc người nhận ghép: Theo dõi lượng nước đưa vào (ăn, uống, truyền dịch) lượng nước thải phải đảm bảo cân Theo dõi xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu hàng ngày, xét nghiệm chức gan, thận ngày/lần + Kiểm tra: xét ngiệm định lượng CMV nồng độ Cyclosporin định kỳ, kiểm tra tuỷ đồ ngày thứ 30 sau ghép Bước 7: Đánh giá người bệnh để viện: - Người bệnh không sốt, không cần dinh dưỡng qua đường tĩnh mạch - Không cần truyền tiểu cầu hay tuần/lần - Số lượng tuyệt đối bạch cầu trung tính (ANC) > 1G/L VI THEO DÕI - Theo dõi diễn biến dấu hiệu sinh tồn, lượng khí máu lúc ghép thu thập tế bào gốc máu ngoại vi - Theo dõi lâm sàng xét nghiệm sau ghép tuỷ mọc thể người bệnh VII NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ Các biến chứng sớm 404 - Nhiễm trùng: vi khuẩn, vi rút (BK, CMV EBV tái hoạt động trở lại), nhiễm nấm; - Viêm bàng quang chảy máu; - Hội chứng mọc mảnh ghép; - Ghép chống chủ cấp tính; - Thải ghép; - Tái phát Các biến chứng muộn - Ghép chống chủ mạn tính; - Giảm tiểu cầu: phá huỷ ngoại vi hay tuỷ bị ức chế; - TTP hay HUS: hay liên quan thuốc ức chế MD CSA; - Suy thận: lưu ý thuốc, TTP; - Biến chứng thần kinh: hội chứng PRES (do CSA); - Viêm BQ chảy máu: Cyclo, BK Adeno VR; - Tăng sinh lympho EBV hoạt động trở lại TÀI LIỆU THAM KHẢO Childs R, (2005), “Protocol title: Non-myeloablabtive Allogeneic Peripheral Blood Mobilized hematopoietic Precursor Cell Transplantation for Benign Hematological Disorders and solid Tumors Americal Society of Hematology Education Program Book”, Hematology: 372-397 Cho BS, KS Eom, YJ Kim, HJ Kim, S Lee, CK Min, SG Cho, WS Min, CW Park, CC Kim and JW Lee (2010), “HLA-mathched sibling transplantation with BM and CD34+-purified PBSCs in adult patients with high-risk severe aplastic anemia to overcome graft rejecttion without an increase in GVHD”, Bone Marrow Transplantation, 45, 1497-1501.(2) Islam MS, Anoop P, Datta P (2010), “ Implications of CD34+ cell dose on clinical and haematological outcome of allo-SCT for acquired aplastic anaemia”, Bone Marrow Transplantation (2010) 45, 886–894 405 [...]... TèM Kí SINH TRNG ST RẫT (Phng phỏp th cụng) (Malaria parasite Test by manual method) I I CNG - Kớ sinh trựng st rột (KSTSR) kớ sinh ngi, vt ch trung gian truyn bnh l mui Anopheles - KSTSR xut hin nhiu nht mỏu ngoi vi, khi ngi bnh bt u lờn cn st hay trong khi ang st - Mỏu c ly tỡm KSTSR t tnh mch, chng ụng bng EDTA hoc ly trc tip t mao mch (bng cỏch chớch u ngún tay, dỏi tai hay gút chõn) - Kớ sinh. .. bt mu xanh tớm ca Hematoxylin, nguyờn sinh cht khụng cú biu hin gỡ Dng tớnh: Nu cú s hin din khỏng nguyờn trờn t bo, phc hp khỏng nguyờn khỏng th DAB Chromogen s cho mu vng nõu trờn nguyờn sinh cht ca t bo, nhõn ca t bo bt mu xanh tớm ca Hematoxylin VII NHNG SAI SểT V X TR - lam khụ trong quỏ trỡnh nhum; - Thc hin khụng y theo quy trỡnh k thut; - X lý mnh sinh thit khụng tt; - Thi gian nhum cỏc... th 1: L s kt hp ca Anti Diluent (100àl/1 tiờu bn) vi khỏng th ó bit (Anti Human) theo t l khuyn cỏo ca nh sn xut v tựy tng maker s dng 3 Bnh phm Lc nn mnh sinh thit ty xng 4 Phiu xột nghim V Các b-ớc tiến hành 1 Chun b tiờu bn - ỳc khuụn parafin mnh sinh thit ty xng ó c x lý, lm ngui v trong t lnh 2-8oC - Ct tiờu bn mng 0,2 m, dỏn trờn lam kớnh chuyờn dng - Sy khụ tiờu bn trong t m 37oC trong thi gian... ngi khỏc; - Quỏ trỡnh c nh, nhum khụng tt gõy bong trúc, trụi mt bnh phm; - Chn oỏn sai do khụng bỏm sỏt tiờu chun chn oỏn 17 NHUM HểA Mễ MIN DCH MNH SINH THIT TY XNG (Immunohistochemical stain on bone marrow biopsy) I NGUYấN Lí Nhum húa mụ min dch mnh sinh thit ty xng l phng phỏp nhum s dng cỏc khỏng th ó bit xỏc nh khỏng nguyờn cú trong t chc ty xng õy l k thut kt hp phn ng min dch v húa cht lm... phng phỏp kt hp ba mu gm: mt cht nhum nhõn Hematoxylinferric, mt cht nhum bo tng bng Picro Fuchsin v mt mu trng lc ca collagen l Solution Van Gieson II CH NH Cỏc trng hp bnh lý cú tng sinh x trong ty xng ( hi chng tng sinh ty ) III CHNG CH NH Khụng cú chng ch nh IV CHUN B 1 Ngi thc hin 01 K thut viờn hoc C nhõn k thut y cú kin thc chuyờn khoa 2 Phng tin - Húa cht 2.1 Dng c - Kớnh hin vi quang hc; -... 100ml; 22 - Dung dch Hematoxylinferric; - Dung dch Picro Fuchsin; - Dung dch Solution Vn Gieson; - Boom Canada: núng chy 60oC lng va phi 3 Bnh phm Lc nn mnh sinh thit ty xng 4 Phiu xột nghim V CC BC TIN HNH 1 Chun b tiờu bn - ỳc khuụn parafin mnh sinh thit ty xng ó c x lý, lm ngui v lnh 28oC - Ct tiờu bn mng 0,2 m, dỏn trờn lam kớnh - Sy khụ tiờu bn trong t m 37oC trong thi gian 3 gi 2 Tin hnh nhum... bc amoniac; - Dung dch Cloruador 0,2%; - Dung dch metabisulfit 2%; - Dung dch Hyposulfit 2%; - Boom Canada: núng chy 60oC lng va phi 3 Bnh phm Lc nn mnh sinh thit ty xng 4 Phiu xột nghim V Các b-ớc tiến hành 1 Chun b tiờu bn - ỳc khuụn parafin mnh sinh thit ty xng ó c x lý, lm ngui v lnh 28oC - Ct tiờu bn mng 0,2 m, dỏn trờn lam kớnh - Sy khụ tiờu bn trong t m 37oC trong thi gian 3 gi 2 Tin hnh nhum... 15 3 Ngi bnh Nờn lm xột nghim cho ngi bnh trc hoc trong khi lờn cn st, lỳc ny kh nng tỡm thy KSTSR mỏu ngoi vi cao hn 4 H s bnh ỏn Giy ch nh xột nghim (biu mu s.) ghi y thụng tin v ngi bnh: H tờn, nm sinh, a ch khoa/phũng, s ging, ni c trỳ, chn oỏn, ch nh xột nghim; Ghi rừ ngy, thỏng, nm ch nh, ch ký bỏc s ra y lnh V CC BC TIN HNH - Trng hp mỏu c ly t tnh mch: Khi tip nhn ng mỏu t y tỏ bnh phũng, tin... bch huyt vo mỏu - u trựng lu hnh trong mỏu, thng xut hin mỏu ngoi vi vo ban ờm (t 20h n 4h) II CH NH - Nhng ngi cn ch nh lm xột nghim bao gm: cú biu hin lõm sng nghi ng nhim giun ch; nhng ngi ó v ang sinh sng vựng cú giun ch lu hnh - Ly mỏu ngoi vi vo ban ờm; tt nht ly mỏu vo khong thi gian t 20h n 2h sỏng - Cú th ly mỏu tỡm u trựng vo ban ngy khi dựng thuc kớch thớch Dietylcarbazine (D.E.C) III CHNG... l k thut kt hp phn ng min dch v húa cht lm hin rừ cỏc khỏng nguyờn hin din trong t bo (bo tng, mng t bo, nhõn t bo) II CH NH - Nghi ng u lympho xõm ln ty xng; - Nghi ng K di cn ty xng; - Nghi ng tng sinh bt thng cỏc dũng t bo trong ty xng III CHNG CH NH Khụng cú chng ch nh Iv Chuẩn bị 1 Ngi thc hin 01 k thut viờn hoc c nhõn k thut chuyờn khoa Huyt hc Truyn mỏu 2 Phng tin - Húa cht 2.1 Dng c - Kớnh