An toàn sinh học phòng thí nghiệm theo paster

PHỤ LỤC : TRANG THIẾT BỊ THIẾT YẾU CHO PHÒNG XÉT NGHIỆM AN TOÀN SINH HỌC CẤP I, II, III: Vòi tắm vòi rửa mắt cấp cứu Cửa dán biển hiệu an toàn sinh học (có chất phóng xạ) Tủ lạnh Tủ ấm 30oC Máy ly tâm Tủ hút khí độc Bồn rửa Thùng rác chứa chất phóng xạ BSL 1, thêm: 9.Lò hấp ướt (autoclave) 10.Tủ an toàn sinh học 11.Thùng chứa rác sinh học II QUY ĐỊNH ĐỐI VỚI PHÒNG XÉT NGHIỆM CƠ BẢN - AN TOÀN SINH HỌC CẤP ĐỘ I Định nghĩa: Là phòng xét nghiệm dùng để nghiên cứu, giảng dạy làm việc với tác nhân sinh học thuộc nhóm nguy số (Không có nguy lây nhiễm cá thể cộng đồng thấp) Các vi sinh vật có khả gây bệnh cho người động vật Tiêu chuẩn thực hành Tiêu chuẩn danh mục bao gồm nguyên tắc thực hành thiết yếu quy trình kỹ thuật vi sinh vật an toàn (GMT) Mỗi phòng xét nghiệm phải áp dụng thực hành an toàn để loại trừ giảm thiểu tối đa tính nguy hiểm, độc hại GMT tảng cho an toàn phòng xét nghiệm Các thiết bị xét nghiệm đặc chủng góp phần làm tăng tính an toàn sinh học không thay quy trình thực hành theo quy định an toàn Các nguyên tắc liệt kê đây: 2.1 Phòng hộ cá nhân Nhân viên phải mặc áo choàng phòng xét nghiệm, áo khoác dài đồng phục suốt thời gian làm việc phòng xét nghiệm Nhân viên phải đeo găng tay tất quy trình có tiếp xúc trực tiếp tiếp xúc gián tiếp với máu, dịch thể chất có khả lây nhiễm động vật nhiễm bệnh khác Sau sử dụng, găng tay phải tháo bỏ cách (lộn trái), tiệt trùng, phải rửa tay Nếu dùng lại, phải rửa găng mang sau cởi găng Nhân viên phải rửa tay kĩ xà phòng/dung dịch rửa có phổ kháng khuẩn rộng sau lần thao tác với chất mang mầm bệnh hay động vật bị bệnh, trước rời khỏi khu vực làm việc phòng xét nghiệm Kính bảo hộ, mặt nạ thiết bị bảo hộ khác cần phải dùng thường xuyên để khỏi bị bắn vào mắt mặt dung dịch nhiễm trùng bảo vệ mắt khỏi tia cực tím Nghiêm cấm việc mặc quần áo phòng hộ phòng thí nghiệm, ví dụ nhà ăn, phòng nghỉ, phòng giải lao, nơi làm việc, thư viện, phòng họp, phòng nhân viên phòng vệ sinh Aó quần nhiễm trùng phải khử trùng phương pháp thích hợp Không dùng giầy, dép hở ngón chân phòng xét nghiệm Nghiêm cấm ăn, uống, hút thuốc lá, sử dụng mỹ phẩm, đeo tháo kính áp tròng phòng xét nghiệm Nghiêm cấm để thức ăn đồ uống khu vực làm việc phòng xét nghiệm 10 Các quần áo bảo hộ sử dụng không để chung vào ngăn tủ đựng quần áo quần áo mặc thông thường 11 Qui trình mặc cởi trang phục bảo hộ A Thứ tự mặc trang phục bảo hộ - Quần - Bao giầy - Aó - Khẩu trang - Mũ - Kính - Găng B Thứ tự cởi trang phục bảo hộ - Rửa găng chất tiệt trùng - Kính - Mũ - Khẩu trang - Aó - Bao giầy - Quần - Găng 2.2 Quy định đảm bảo an toàn : Tuyệt đối nghiêm cấm sử dụng pipét hút miệng Không dùng miệng để thực thao tác thí nghiệm Không dùng nước bọt để dán nh•n dán m• số Tất thao tác phải thực theo phương pháp làm giảm thiểu hình thành giọt, khí dung từ bệnh phẩm.( Sử dụng kim tiêm bơm tiêm nên hạn chế tối đa, tuyệt đối không dùng để thay cho pipet cho mục đích khác mục đích tiêm hút dịch từ động vật thí nghiệm Báo cáo người phụ trách phòng xét nghiệm làm tràn, làm rơi, đổ bệnh phẩm dung dịch có chứa có khả chứa mầm bệnh Phải lập biên tất cố Phòng xét nghiệm cần lập thành văn Quy trình xử lý cố, phổ biến sẵn có cho nhân viên thực Các dịch nhiễm trùng phải khử trùng (bằng hoá chất, phương pháp vật lý) trước thải hệ thống cống Có thể sử dụng hệ thống xử lý riêng, phụ thuộc vào việc đánh giá nguy tác nhân gây bệnh xét nghiệm, nghiên cứu Các giấy tờ ghi chép đưa khỏi phòng xét nghiệm phải khử trùng để khỏi bị nhiễm mầm bệnh (có thể dùng máy fax để gửi liệu từ phòng thí nghiệm buồng hành chính, máy chiếu tia cực tím) 2.3 Vệ sinh khu vực làm việc phòng xét nghiệm Phòng xét nghiệm phải giữ gìn gọn gàng, để vật dụng cần thiết Các mặt bàn, mặt ghế phòng xét nghiệm phải khử trùng sau làm đổ chất mang mầm bệnh, cuối ngày làm việc Tất dụng cụ nhiễm trùng, bệnh phẩm môi trường nuôi cấy cần tiệt trùng trước thải rửa để tái sử dụng Đóng gói vận chuyển bệnh phẩm phải tuân theo quy định quốc gia quốc tế Các cửa sổ phòng xét nghiệm phép mở phải lắp lưới chống côn trùng 2.2 Quy định đảm bảo an toàn : Tuyệt đối nghiêm cấm sử dụng pipét hút miệng Không dùng miệng để thực thao tác thí nghiệm Không dùng nước bọt để dán nh•n dán m• số Tất thao tác phải thực theo phương pháp làm giảm thiểu hình thành giọt, khí dung từ bệnh phẩm Sử dụng kim tiêm bơm tiêm nên hạn chế tối đa, tuyệt đối không dùng để thay cho pipet cho mục đích khác mục đích tiêm hút dịch từ động vật thí nghiệm Báo cáo người phụ trách phòng xét nghiệm làm tràn, làm rơi, đổ bệnh phẩm dung dịch có chứa có khả chứa mầm bệnh Phải lập biên tất cố Phòng xét nghiệm cần lập thành văn Quy trình xử lý cố, phổ biến sẵn có cho nhân viên thực Các dịch nhiễm trùng phải khử trùng (bằng hoá chất, phương pháp vật lý) trước thải hệ thống cống Có thể sử dụng hệ thống xử lý riêng, phụ thuộc vào việc đánh giá nguy tác nhân gây bệnh xét nghiệm, nghiên cứu Các giấy tờ ghi chép đưa khỏi phòng xét nghiệm phải khử trùng để khỏi bị nhiễm mầm bệnh (có thể dùng máy fax để gửi liệu từ phòng thí nghiệm buồng hành chính, máy chiếu tia cực tím) 2.3 Vệ sinh khu vực làm việc phòng xét nghiệm Phòng xét nghiệm phải giữ gìn gọn gàng, để vật dụng cần thiết Các mặt bàn, mặt ghế phòng xét nghiệm phải khử trùng sau làm đổ chất mang mầm bệnh, cuối ngày làm việc Tất dụng cụ nhiễm trùng, bệnh phẩm môi trường nuôi cấy cần tiệt trùng trước thải rửa để tái sử dụng Đóng gói vận chuyển bệnh phẩm phải tuân theo quy định quốc gia quốc tế Các cửa sổ phòng xét nghiệm phép mở phải lắp lưới chống côn trùng II QUY ĐỊNH ĐỐI VỚI PHÒNG XÉT NGHIỆM CƠ BẢN - AN TOÀN SINH HỌC CẤP ĐỘ I 2.4 Quản lý an toàn sinh học Đây trách nhiệm trưởng phòng xét nghiệm (người có trách nhiệm trực tiếp với phòng xét nghiệm) để đảm bảo xây dựng áp dụng kế hoạch quản lý an toàn sinh học thực hành an toàn Người quản lý phòng xét nghiệm phải đảm bảo việc tập huấn thường xuyên an toàn phòng xét nghiệm cho nhân viên Nhân viên phải tập huấn để hiểu nguy cơ, đặc biệt phải đọc quy định an toàn thực hành an toàn Nhân viên phải tuân thủ thực hành quy trình an toàn theo quy định Người quản lý phòng xét nghiệm cần phải đảm bảo tất nhân viên nắm quy định thực hành an toàn Trong phòng xét nghiệm phải có tài liệu hướng dẫn thực hành an toàn cho nhân viên Cần phải có biện pháp kiểm soát côn trùng chuột phòng xét nghiệm Cần khám sức khoẻ, giám sát định kỳ điều trị cho tất nhân viên trường hợp cần thiết Có hồ sơ theo dõi sức khỏe cho nhân viên Thiết kế phòng xét nghiệm xếp thiết bị xét nghiệm Việc thiết kế phòng xét nghiệm xếp công việc phòng xét nghiệm cần phải trọng đặc biệt đến vấn đề ảnh hưởng đến mức độ an toàn Những vấn đề bao gồm: Thao tác tạo hạt khí dung Làm việc với lượng lớn mầm bệnh, tập trung nhiều loại mầm bệnh Quá đông nhân viên nhiều thiết bị Có khả xâm nhập côn trùng chuột Vào phòng xét nghiệm không phép Các thao tác: sử dụng bệnh phẩm sinh phẩm đặc biệt I 3.3.Các thiết bị an toàn sinh học cần thiết: Có quy định cụ thể trang thiết bị bắt buộc trang thiết bị nên có phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ I (Xem phụ lục 1) 1.Phần hỗ trợ hút Pipet - để tránh hút pipet miệng Rất nhiều loại khác sẵn có thị trường 2.Tủ an toàn sinh học, sử dụng khi: a.Sử dụng dung dịch, sinh phẩm, dụng cụ mang mầm bệnh; dung dịch ly tâm phòng xét nghiệm mở có nắp an toàn gắn chặt với ống đựng dung dịch ly tâm thao tác tủ an toàn sinh học mở nắp đóng nắp b.Nguy lây nhiễm qua đường không khí tăng cao c.Khi sử dụng quy trình có khả lây nhiễm cao tạo hạt khí dung; bao gồm ly tâm, nghiền, cắt, trộn lắc, mở dụng cụ mang mầm bệnh, áp lực ống bệnh phẩm khác với áp lực phòng thí nghiệm, thu hoạch mô bệnh phẩm từ động vật trứng, gây nhiễm động vật theo đường mũi họng 3.Que cấy chuyển dùng lần Que cấy chuyển tự đốt dùng tủ an toàn sinh học để làm giảm thiểu việc tạo hạt khí dung 4.Lọ ống nghiệm đóng nắp xoáy 5.Lò hấp thiết bị phù hợp khác để khử trùng vật nhiễm 6.Pipét Pasteur nhựa dùng lần, nên sử dụng cần, để giảm thiểu việc sử dụng vật dụng thuỷ tinh 7.Các thiết bị nồi hấp tủ an toàn sinh học phải thẩm định phương pháp phù hợp trước đưa vào sử dụng Việc cấp chứng nhận lại cần thực cách đặn, theo hướng dẫn nhà sản xuất (xem chương 7) Xử lý chất thải Trong phòng thí nghiệm, việc khử trùng chất thải nguy hại việc thải bỏ chất có liên quan chặt chẽ với Trong sử dụng hàng ngày, vài dụng cụ mang mầm bệnh cần loại bỏ tiêu huỷ Phần lớn vật dụng thuỷ tinh quần áo phòng thí nghiệm sử dụng lại Do nguyên tắc tất dụng cụ mang mầm bệnh cần khử trùng nồi hấp lò đốt phòng xét nghiệm Trước thải vật có liên quan đến vi sinh vật gây bệnh mô động vật khỏi phòng xét nghiệm cần phải tự hỏi: - Các dụng cụ khử trùng khử nhiễm hoàn toàn quy trình chuẩn chưa? - Nếu chưa, vật thải có đóng gói phù hợp để thiêu huỷ chỗ không chuyển sang phương tiện khác để thiêu huỷ? - Việc thải vật khử trùng có liên quan đến nguy tiềm tàng thêm sinh học nguy khác, với người thực quy trình thải trực tiếp người tới tiếp xúc với vật thải bên phòng xét nghiệm không? 6.1 Khử độc, khử trùng: Nồi hấp ướt biện pháp ưu tiên cho trình khử trùng Các dụng cụ để khử trùng vật thải phải cho vào thùng chứa, nồi hấp, túi ni lông có màu sắc quy định việc xử lý hấp khử trùng và/hoặc thiêu huỷ Các phương pháp thay dùng biện pháp loại trừ và/hoặc tiêu diệt hoàn toàn vi sinh vật 6.2 Quy trình tiếp nhận xử lý chất thải, dụng cụ, vật liệu chất thải có mầm bệnh Cần phải sử dụng hệ thống chuyên biệt để dùng cho chất mang mầm bệnh hộp đựng chúng Phải tuân thủ theo luật quốc gia quốc tế Có điểm sau: - Chất thải không mang mầm bệnh tái sử dụng tái sinh thải chất thải sinh hoạt thông thường - Chất thải sắc nhọn có mang mầm bệnh – kim tiêm, dao, mảnh thuỷ tinh vỡ; phải gom lại hộp không chọc thủng được, có nắp đậy xử lý đặc biệt - Các dụng cụ mang mầm bệnh khử trùng nồi hấp sau rửa tái sử dụng tái sinh - Các dụng cụ mang mầm bệnh khử trùng thải - Các dụng cụ mang mầm bệnh thiêu huỷ 6.2.1 Các đồ nhọn, sắc: Sau sử dụng, kim tiêm không đậy lại vỏ kim tiêm, bẻ cong lấy khỏi bơm tiêm dùng lần Toàn phải đặt thùng đựng chất thải sắc nhọn Các xy lanh sử dụng riêng rẽ dùng với kim tiêm, phải đặt thùng đựng chất thải sắc nhọn thiêu huỷ, với hấp khử trùng trước tiêu huỷ cần thiết Các thùng đựng chất thải sắc nhọn phải không đâm thủng được, không đựng đầy Khi đựng đến ba phần tư thể tích phải đặt thùng vào chỗ chất thải mang mầm bệnh thiêu huỷ, phải khử trùng trước thiêu huỷ loại phòng xét nghiệm yêu cầu Các thùng đựng chất thải sắc nhọn cấm thải bãi rác Các dụng cụ mang mầm bệnh phải hấp khử trùng tái sử dụng Không rửa trước dụng cụ hấp khử trùng tái sử dụng Bất kỳ việc làm cần thiết nào, sửa chữa phải thực sau hấp khử trùng tiệt trùng 6.2.2 Các dụng cụ mang mầm bệnh dùng để hấp khử trùng tái sử dụng: Phần sắc nhọn thải theo quy trình trên, tất chất mang mang mầm bệnh cần hấp khử trùng thùng kín, ví dụ thùng hấp được, túi ni lông có mầu sắc riêng đánh dấu trước thải Sau hấp khử trùng, dụng cụ cho vào thùng vận chuyển để chuyển đến nơi thiêu huỷ Các dụng cụ dùng cho hoạt động y tế không phép thải bãi rác, chí sau khử trùng Nếu có lò đốt khu vực phòng xét nghiệm, nồi hấp không cần đến: chất thải mang mầm bệnh phải đặt thùng thiết kế riêng (có mầu sắc, túi mã hoá) vận chuyển đến lò đốt Các thùng vận chuyển dùng nhiều lần phải có nắp đậy kín vừa Các thùng phải khử trùng rửa trước đưa trở lại phòng xét nghiệm để dùng tiếp 6.2.3 Các chất thải mang mầm bệnh: Các thùng đựng chất thải, bình, lọ, nên dùng loại không bị vỡ (ví dụ nhựa) cần phải đặt tất nơi làm việc Khi sử dụng tiệt trùng, chất thải cần ngâm hoàn toàn dung dịch tiệt trùng (không có bọt khí ngăn cách) thời gian định Các thùng đựng chất thải phải khử trùng rửa trước tái sử dụng Thiêu huỷ chất thải mang mầm bệnh cần phải đồng ý cộng đồng dân cư sống xung quanh phòng xét nghiệm đạt yêu cầu không làm ô nhiễm môi trường, đồng ý nhân viên an toàn sinh học phòng xét nghiệm An toàn hoá chất, lửa, điện, phóng xạ dụng cụ Đổ vỡ vật chứa mầm bệnh làm gián tiếp gây tai nạn tiếp xúc với hoá chất, lửa, điện chất phóng xạ Do cần thiết để trì công tác an toàn với tiêu chuẩn cao môi trường làm việc phòng thí nghiệm vi sinh Phải thực nghiêm quy định cho hoạt động phải đựơc giám sát thường xuyên Ban an toàn sinh học tuyến sở, huy động chuyên gia lĩnh vực liên quan cần thiết Cán làm việc phòng xét nghiệm: Cần phải có cán bao gồm trưởng phòng xét nghiệm, nhân viên: kỹ thuật viên, Bác sĩ chuyên khoa vi sinh (nếu có), cán tu, bảo dưỡng Nhân viên phòng xét nghiệm phải khám sức khoẻ trước tuyển vào làm việc thời điểm bắt đầu làm việc Phải lập hồ sơ sức khoẻ ghi chép đầy đủ Phải định kỳ kiểm tra sức khoẻ Báo cáo trường hợp ốm tai nạn xảy phòng xét nghiệm CA61P2 Quy định an toàn sinh học: Tất mục quy định phần quy định an toàn sinh học cho phòng xét nghiệm cấp độ NhXXXXXXXXXXI phải bổ sung: Cửa vào Biển báo nguy hiểm sinh học với biểu tượng quốc tế (hình 1) phải gắn cửa tất phòng có chứa xử lý vi sinh vật thuộc nhóm nguy cao Không nhiệm vụ miễn vào Phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ: Người chịu trách nhiệm: Số điện thoại liên hệ trường hợp khẩn cấp: Số điện thoại hành Số điện thoại hành chính: Thẩm quyền cho phép vào phòng xét nghiệm trưởng phòng xét nghiệm chịu trách nhiệm thực Hình 1: Biển báo độc hại sinh học gắn cửa phòng xét nghiệm Chỉ người có thẩm quyền phép vào khu vực làm việc phòng xét nghiệm Các cửa phòng xét nghiệm phải đóng Không cho trẻ em vào khu vực làm việc phòng xét nghiệm Các động vật phép đưa vào sau đ• áp dụng biện pháp đảm bảo an toàn theo quy định Không có động vật phép đưa vào phòng xét nghiệm ngoại trừ động vật phục vụ cho công tác xét nghiệm Thiết kế trang thiết bị phòng xét nghiệm: Như quy định phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ I phải bổ sung: - mức độ an toàn sinh học cấp II, phòng xét nghiệm phòng kín, nên có hệ thống thông khí chiều, kiểm soát thông khí, có bồn rửa mắt - Các trang thiết bị: Như quy định trang thiết bị tối thiểu phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ I thêm: + Lò hấp ướt tiệt trùng, phương tiện khác để khử trùng phải phù hợp với quy mô phòng xét nghiệm đặt gần cửa PTN + Tủ an toàn sinh học cấp độ I II + Thùng đựng rác sinh học đặt bên phòng xét nghiệm Giám sát sức khoẻ y tế: Như quy định cho phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ I phải bổ sung: Việc tuyển nhân viên, thông qua trưởng phòng xét nghiệm, có trách nhiệm đảm bảo có hệ thống theo dõi đầy đủ sức khoẻ nhân viên phòng xét nghiệm Mục tiêu việc theo dõi sức khoẻ kiểm soát bệnh mắc phải nghề nghiệp Các hoạt động thích hợp thực mục tiêu này: - áp dụng tiêm chủng chủ động thụ động định - Là sở để phát sớm bệnh nghề nghiệp mắc phải phòng xét nghiệm - Không cho người tình trạng cảm nhiễm cao (ví dụ phụ nữ mang thai, người suy giảm miễn dịch) thực công việc xét nghiệm có nguy cao - Sử dụng thiết bị phòng hộ cá nhân cách hiệu Hướng dẫn giám sát nhân viên thao tác với mầm bệnh mức độ an toàn sinh học cấp II - Khám sức khoẻ trước tuyển dụng bắt buộc Hồ sơ sức khoẻ cá nhân phải ghi lại phải định kỳ kiểm tra sức khoẻ - Người quản lý phòng xét nghiệm cần ghi lại ngày nghỉ ốm nghỉ việc - Phụ nữ tuổi sinh đẻ cần phải cảnh báo nguy bào thai phơi nhiễm nghề nghiệp với số vi sinh vật định, ví dụ vi rút Rubella Các bước chi tiết cần đựơc thực để bảo vệ bào thai, phụ thuộc vào loại mầm bệnh mà người phụ nữ bị phơi nhiễm Đào tạo, tập huấn, xử lý chất thải an toàn hoá chất lửa, điện, phóng xạ dụng cụ: Như quy định cho phòng xét nghiệm an toàn sinh học cấp độ I phải bổ sung: phải có thùng đựng rác sinh học 6 Cán làm việc phòng xét nghiệm: Cần có cán phòng xét nghiệm bao gồm trưởng phòng xét nghiệm, phó trưởng phòng xét nghiệm, nhân viên phòng xét nghiệm (kỹ thuật viên, bác sĩ chuyên khoa), nhân viên tu, bảo dưỡng [...]...6 Cán bộ làm việc tại phòng xét nghiệm: Cần có ít nhất 7 cán bộ trong phòng xét nghiệm bao gồm trưởng phòng xét nghiệm, phó trưởng phòng xét nghiệm, nhân viên phòng xét nghiệm (kỹ thuật viên, bác sĩ chuyên khoa), nhân viên duy tu, bảo dưỡng