Năm 1796 E.Jenner đã cho chủng đậu để phòng bệnh đậu mùa. L.Pasteur dã tìm ra vaccine chống bệnh dại vào năm 1885, nhưng chưa chứng minh được tác nhân gây bệnh vì chúng không trông thấy được ở kính hiển vi quang học và không mọc ở môi trường nuôi cấy nhân tạo. 3.3. Cấu trúc Virus có cấu trúc rất đơn giản, không có cấu tạo tế bào. Tất cả các hạt virus đều có 2 thành phần cơ bản: axit nucleic là thành phần mang mật mã di truyền của virus và capsid là vỏ protein bao quanh axit nucleic. Lõi axit nucleic và capsid hợp lại tạo thành nucleocapsid. Đối với một số virus, nucleocapsid còn được bao quanh bởi một vỏ lipit hay lipoprotein gọi là bao ngoài ( envelope hoặc peplos) Nói chung quá trình nhân lên của virus trong tế bào được chia thành 5 giai đoạn: Hấp phụ Xâm nhập Tổng hợp các thành phần cấu trúc Lắp ráp Giải phóng.
ĐẠI CƯƠNG VIRUS Mục tiêu học tập Trình bày đặc điểm , kích thước, hình thể cấu trúc virus Trình bày nhân lên virus hậu nhân lên virus tế bào Trình bày phương pháp nuôi cấy virus Nội dung: SƠ LƯỢC LỊCH SỬ PHÁT HIỆN VIRUS Năm 1796 E.Jenner cho chủng đậu để phòng bệnh đậu mùa L.Pasteur dã tìm vaccine chống bệnh dại vào năm 1885, chưa chứng minh tác nhân gây bệnh chúng không trông thấy kính hiển vi quang học không mọc môi trường nuôi cấy nhân tạo Năm 1892 D.I Ivanovski chứng minh mầm bệnh gây bệnh khảm thuốc chui qua lọc vi khuẩn sứ Ivanovski cho chất độc tương tự độc tố bị bệnh tiết Năm 1898 M.W.Beijerinck chứng minh tác nhân gây bệnh khảm thuốc chất độc qua lọc vi khuẩn ông dùng tiếng Latin virus (mầm độc) để gọi mầm bệnh Năm 1898 F.Loeffler P.Frosch chứng minh tính qua lọc sứ tác nhân gây bệnh lở mồm long móng bò Năm 1915 - 1917 F.W.Twort F.H d’Hérelle phát virus vi khuẩn đặt tên Bacteriophage, sau thường gọi tắt phage Năm 1935, W.M Stanley lần tách biệt kết tinh virus khảm thuốc Từ năm 1940 trở kính hiển vi điện tử hoàn thiện dần cho phép quan sát hình dạng thành phần cấu trúc virus NHỮNG ĐẶC ĐIỂM CỦA VIRUS Virus tác nhân nhiễm trùng nhỏ (đường kính từ 20 - 300 nm) lọt qua lọc vi khuẩn, có cấu tạo đơn giản Virus đại phân tử nucleoprotein có đặc tính sinh vật, khả tự sinh sản, cấu tạo tế bào, trình trao đổi chất coi chúng trung gian chất sống chất vô sinh Virus khác biệt với vi sinh vật khác đặc điểm sau đây: - Virus chứa loại axit nucleic nhất: ADN ARN, không chứa đồng thời loại axit nhân - Virus sinh sản cách chép từ vật liệu di truyền chúng, không phân chia cách phân đôi vi khuẩn - Virus ký sinh bắt buộc tế bào sống, chúng dựa vào nguồn lượng máy tế bào (ví dụ ribosome, ARN vận chuyển ) để tổng hợp protein - Virus tổng hợp thành phần chúng cách riêng rẽ sau tự lắp ráp với để tạo thành hạt virus - Virus không nhạy cảm với kháng sinh thông thường KÍCH THƯỚC, HÌNH THỂ VÀ CẤU TRÚC CỦA VIRUS 3.1 Kích thước Virus có kích thước nhỏ bé, qua lọc vi khuẩn Chính mà quan sát thấy virus qua kính hiển vi điện tử Đơn vị đo kích thước virus nanomet (nm) nm =1/1000 micromet Mỗi loại virus có kích thước định (từ 20-300 nm) không thay đổi suốt trình phát triển 3.2 Hình thể Phần lớn virus có hình thể định, đặc trưng cho loài virus Một số loại hình thể virus thường gặp: - Hình cầu : virus cúm, sởi, bại liệt - Hình khối đa diện : Adenovirus, Papovavirus -Hình que : virus khảm thuốc - Hình viên gạch : virus đậu mùa - Hình dùi trống (đinh ghim): phage T2 E.coli 3.3 Cấu trúc Virus có cấu trúc đơn giản, cấu tạo tế bào Tất hạt virus có thành phần bản: axit nucleic thành phần mang mật mã di truyền virus capsid vỏ protein bao quanh axit nucleic Lõi axit nucleic capsid hợp lại tạo thành nucleocapsid Đối với số virus, nucleocapsid bao quanh vỏ lipit hay lipoprotein gọi bao ( envelope peplos) 3.3.1 Axit nucleic virus Mỗi hạt virus có hai loại axit nucleic ADN ARN Axit nucleic nằm hạt virus tạo thành lõi hay hệ gen virus Phân tử ADN virus phần lớn dạng ADN sợi có số dạng ADN sợi Parvoviridae Phân tử ARN virus đa số dạng ARN sợi, trừ số dạng ARN sợi Reoviridae Các axit nucleic chiếm 1-2% trọng lượng phân tử hạt virus có chức đặc biệt quan trọng : - Axit nucleic mang toàn mã thông tin di truyền đặc trưng cho virus - Axit nucleic định khả gây nhiễm trùng virus tế bào cảm thụ - Axit nucleic định chu kỳ nhân lên virus tế bào cảm thụ - Axit nucleic mang tính kháng nguyên đặc hiệu virus 3.2 Capsid Capsid cấu trúc bao quanh lõi axit nucleic Bản chất hóa học capsid protein Capsid cấu tạo đơn vị hình thái gọi capsomer bao gồm phân tử protein có xếp đặc trưng cho loại virus Các capsomer xếp theo trật tự không gian xác định tạo nên kiểu đối xứng capsid : đối xứng xoắn đối xứng khối đối xứng phức hợp Capsid virus có chức sau đây: - Vỏ protein có tác dụng bảo vệ axit nucleic virus - Protein capsid mang tính kháng nguyên đặc hiệu virus - Capsid đóng vai trò quan trọng giai đoạn bám xâm nhập tế bào virus - Capsid giữ cho hình thể kích thước virus luôn ổn định 3.3.3 Vỏ (envelope) Các virus Herpesviridae, Flaviviridae, Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae, có thêm lớp vỏ bao bọc capsid gọi envelope peplos Bản chất hóa học vỏ phức hợp lipid, protein gluxit Vỏ có nguồn gốc từ màng bào tương màng nhân cùa tế bào chủ bị virus cải tạo mang tính kháng nguyên đặc hiệu cho virus Vỏ bị dung môi hòa tan lipid (như ether, muối mật , ) phá hủy Vỏ virus có chức : - Tham gia vào bám virus vào tế bào cảm thụ - Tham gia vào giai đoạn lắp ráp giải phóng virus khỏi tế bào sau chu kỳ nhân lên Những virus vỏ gọi virus trần 3.3.4 Gai protein Trên vỏ số virus có mấu gai protein lồi lên có chức riêng biệt ngưng kết hồng cầu tố enzyme neuraminidase hoạt động 3.3.5 Một số enzyme Virus hệ enzyme chuyển hóa hoàn chỉnh vi khuẩn, thành phần cấu trúc số virus có vài loại protein có hoạt tính enzyme Phổ biến polymerase RNA polymerase, DNA polymerase, DNA polymerase phụ thuộc ARN (enzyme chép ngược) 3.4 Virion Hạt virus hoàn chỉnh có khả gây nhiễm trùng cho tế bào cảm thụ gọi virion Tùy theo loài virus, virion có capsid trần capsid có vỏ 3.5 Pseudovirion Hạt virus nhận vật liệu di truyền tế bào chủ trình chép thay cho axit nucleic virus gọi pseudovirion Những hạt pseudovirion quan sát kính hiển vi điện tử chúng giống hệt virion bình thường, chúng hoạt tính nhiễm trùng nhân lên Các hạt có khả chuyển gen tế bào từ tế bào chủ đến tế bào chủ khác 3.6 Viroid Viroid tác nhân nhiễm trùng nhỏ bé gây bệnh thực vật vài nhiễm trùng virus chậm động vật Tác nhân có axit nucleic (phân tử ARN dạng vòng kín, trọng lượng phân tử 70.000-120.000) lớp protein cấu trúc PHÂN LOẠI VIRUS Có nhiều cách để phân loại virus Hiện việc phân loại virus dựa theo tiêu chuẩn sau đây: - Loại axit nucleic (ADN ARN) cấu trúc chúng (số sợi) - Đối xứng capsid - Có vỏ (envelope) - Cấu trúc gen virus - Đường kính số lượng capsomer virus - Các enzyme - Nhạy cảm với ether - Tính kháng nguyên - Triệu chứng học Căn vào tiêu chuẩn để chia virus thành họ (tận đuôi viridae), giống (tận đuôi virus) Trong họ (Poxviridae, Herpesviridae, Paraviridae, Myxoparaviridae) chia thành phân họ (subfamilies), cho thấy chất phức tạp mối liên hệ virus với Đến năm 1995, ủy ban quốc tế về phân loại virus phân loại 4000 virus động vật virus thực vật thành 71 họ, 11 họ thứ cấp (subfamilies) 164 giống với hàng trăm virus chưa định loại Mới xác định 24 họ virus gây bệnh cho người động vật Các họ virus chứa ADN gồm có: - Parvoviridae - Papovaviridae - Adenoviridae - Herpesviridae - Hepadnaviridae - Poxviridae Các họ virus chứa ARN gồm có: - Picornaviridae - Astroviridae - Caliciviridae - Reoviridae - Arboviridae - Togaviridae - Flaviviridae - Arenaviridae - Coronaviridae - Retroviridae - Bunyaviridae - Orthomyxoviridae - Paramyxoviridae - Rhabdoviridae - Bornaviriae - Filoviridae - Viroids - Các virus khác Đặc điểm họ virus động vật cáo thành viên virus gây bệnh người Lõi Kiểu đối xứng acid vỏ bao nucleic (Capsidsymmetry) Màng bọc Không Đối với ether Kháng Hình khối 20 mặt DNA Có Hỗn hợp Phức tạp Nhạy Kích capsomere thước s (nm) 32 18 – 26 5–6 Đơn 72 45 – 55 5–8 Đôi, vòng Papovaviridae 252 80 – 110 40 – 48 36 – 38 Đôi Adenoviridae 3,2 Đôi, vòng Herpesviridae 124 – 235 Đôi Hepadnaviridae 130 – 375 Đôi Poxviridae 180 150 – 162 200 230 – Kháng 400 32 Hình khối 20 Không Kháng mặt Có Hỗn hợp, chưa biết rõ Có Nhạy Chuỗi virion acid nucleic 28-30 7,2-7,9 32 27-38 7,4-7,7 132 60-80 16-27 42 50-70 Nhạy Đơn Đơn Đơn Đôi, phân Parvoviridae Picornaviridae Astroviridae Caliciviridae Reoviridae 9,7-11,8 đoạn Đơn Đơn Togaviridae 45-60 9,5-12,5 Đơn, phân Flaviviridae 50-300 10-14 đoạn Arenaviridae 80-220 20-30 Đơn Coronaviridae 80-100 7-11 Đơn, lưỡng 80-120 150-300 Nhạy Họ virus (kb/kbp) 7,2-8,4 80-120 Có acid nucleic 28-30 RNA Xoắn ốc Kích thước Số lượng 75 x 180 80-125 80 x 1000 Retroviridae bội Đơn, phân 11-21 đoạn Bunyaviridae 10-13,6 Đơn, phân Orthomyxoviridae 16-20 đoạn Paramyxoviridae 13-16 Đơn Rhabdoviridae 8,5-10,5 Đơn Bornaviriae 19,1 Đơn Filoviridae Đơn SỰ NHÂN LÊN CỦA VIRUS Virus trình trao đổi chất, khả tự nhân lên tế bào sống Vì nhân lên virus thực tế bào sống nhờ vào trao đổi chất tế bào chủ Điều cho thấy tính ký sinh virus tế bào sống bắt buộc Sự nhân lên virus trình phức tạp, axit nucleic virus giữ vai trò chủ đạo truyền đạt thông tin di truyền chúng cho tế bào chủ Virus hướng trình trao đổi chất tế bào chủ sang việc tổng hợp hạt virust Nói chung trình nhân lên virus tế bào chia thành giai đoạn: Hấp phụ Xâm nhập Tổng hợp thành phần cấu trúc Lắp ráp Giải phóng 5.1 Sự hấp phụ virus vào bề mặt tế bào Sự hấp phụ xảy cấu trúc đặc hiệu bề mặt virus gắn vào thụ thể (receptor) đặc hiệu với virus nằm bề mặt tế bào Do tính đặc hiệu mà loài virus hấp phụ gây nhiễm cho loại tế bào định gọi tế bào cảm thụ với chúng Ví dụ virus cúm gây nhiễm tế bào biểu mô đường hô hấp trên, virus HIV xâm nhập tế bào bạch huyết gọi tế bào lympho CD4 5.2 Sự xâm nhập virus vào tế bào Các virus động vật sau gắn vào thụ thể đặc hiệu bề mặt tế bào cảm thụ xâm nhập vào tế bào theo chế ẩm bào Khi lọt vào tế bào, capsid virus enzyme cởi vỏ (decapsidase) tế bào phân hủy, giải phóng acid nucleic virus Đó giai đoạn “cởi áo” Đối với phage, sau hấp phụ lên bề mặt tế bào bao đuôi co rút, lõi bên chọc thủng màng tế bào bơm axit nucleic vào tế bào casid nằm lại bên 5.3 Sự tổng hợp thành phần cấu trúc virus: Ngay sau acid nucleic virus giải phóng, virus bị khả lây nhiễm vào giai đoạn tiềm ẩn, giai đoạn không thấy virus tế bào Đây giai đoạn virus truyền đạt thông tin di truyền cho tế bào chủ bắt tế bào chủ chuyển hướng hoạt động sang việc tổng hợp thành phần virus Trước hết, acid nucleic virus nhân lên, sau protein virus tổng hợp Các acid nucleic virus xác định tính đặc hiệu protein Như cấu trúc kháng nguyên virus không bị phụ thuộc vào tế bào chủ mà acid nucleic virus định Cơ chế nhân lên DNA RNA virus có khác Dưới ví dụ ba loại virus có ba loại axít nucleic khác nhau: - Ở virus chứa DNA hai sợi: thông tin di truyền virus chép từ DNA sang RNA thông tin nhờ RNA polymerase phụ thuộc DNA Các RNA thông tin virus đóng vai trò truyền tin để tạo DNA protein virus - Ở virus chứa RNA sợi dương: thông tin di truyền virus mã hóa phân tử RNA chép sang RNA bổ sung nhờ có RNA polymerase phụ thuộc RNA từ chúng làm khuôn mẫu để tạo RNA virus Đồng thời RNA virus đóng vai trò RNA thông tin để tổng hợp nên protein virus - Ở virus chứa RNA có enzyme chép ngược: thông tin di truyền mã hóa RNA virus chép ngược để tạo DNA trung gian nhờ có enzyme chép ngược (reverse transcriptase; DNA polymerase phụ thuộc RNA).Từ DNA trung gian mã thông tin di truyền virus chép sang RNA thông tin, từ chúng tiếp tục chép để tổng hợp RNA virus protein virus 5.4 Sự lắp ráp thành phần virus: Sau thành phần virus tổng hợp tích lũy phong phú tế bào chủ bắt đầu trình lắp ráp Sự lắp ráp thành phần virion xảy tự phát kết tương tác phân tử đặc biệt cao phân tử capsid với acid nucleic virus để tạo thành virion Việc lắp ráp tạo virus hoàn chỉnh (các virion) lắp ráp sai tạo virus không hoàn chỉnh (hạt DIP) tạo virus giả (Pseudovirion) 5.5 Sự giải phóng hạt virus khỏi tế bào Virus thoát khỏi tế bào chủ theo nhiều kiểu khác tùy theo loài virus Nhiều virus giải phóng theo kiểu phá vỡ màng tế bào làm hủy hoại tế bào virus đồng loạt phóng thích Hoặc giải phóng nhờ xuất bào (exocytosis) qua rãnh đặc biệt mà không làm hủy hoại tế bào chủ Các virus có vỏ giải phóng theo kiểu nẩy chồi qua chổ đặc biệt màng tế bào chủ virus nhận phần màng tế bào chủ Thời gian nhân lên virus thường ngắn nhiều so với vi khuẩn.Ví dụ từ virus ban đầu, tế bào bị nhiễm virus cúm tạo hàng nghìn virus sau khoảng - HẬU QUẢ CỦA SỰ NHÂN LÊN CỦA VIRUS TRONG TẾ BÀO Khi virus xâm nhập nhân lên tế bào để tạo hệ virus gây nhiều hậu khác tùy thuộc vào bàn chất sinh học tế bào virus 6.1.Tế bào bị hủy hoại Sau virus xâm nhập nhân lên tế bào hầu hết tế bào bị phá hủy Do hoạt động bình thường tế bào bị ức chế , chất cần thiết cho tế bào không tổng hợp mà tổng hợp hạt virus tế bào bị chết Đây trường hợp hay gặp Ở nuôi cấy tế bào in vitro thấy tế bào bị nhiễm virus biến dạng, dính lại với nhau, ly giải 6.2 Tế bào bị tổn thương nhiễm sắc thể Virus làm cho nhiễm sắc thể tế bào chủ bị gãy, bị phân mảnh, bị đảo lộn trật tự xếp gây hậu như: 6.2.1 Dị tật bẩm sinh, thai chết lưu Ở phụ nữ có thai, đặc biệt ba tháng đầu thời kỳ mang thai, bị nhiễm virus làm sai lệch nhiễm sắc thể dẫn tới số thiếu hụt bẩm sinh trình hình thành bào thai gây trạng thái nhiễm virus cho bào thai 6.2.2 Tế bào tăng sinh vô hạn tạo khối u Các tế bào bị nhiễm số loại virus (chủ yếu virus gây khối u) có tượng ức chế tiếp xúc tế bào sinh sản nên tạo đám tế bào chồng chất lên 6.3 Tạo tiểu thể đặc trưng cho virus khác Trong tế bào nhiễm virus xuất thể vùi nhân (Adenovirus ), bào tương (tiểu thể Negri virus dại ), hai nơi (virus sởi ) Bản chất tiểu thể tích tụ virion thành phần virion hạt phản ứng tế bào nhiễm virus Các tiểu thể nhuộm soi thấy kính hiển vi quang học dựa vào chẩn đoán gián tiếp nhiễm virus tế bào 6.4 Tạo hạt virus không hoàn chỉnh (DIP: Defective interfering particles) Hạt virus không hoàn chỉnh virus có capsid, có không hoàn chỉnh acid nucleic Do hạt DIP khả nhân lên độc lập vào tế bào, có nghĩa hạt DIP khả gây nhiễm trùng cho tế bào Những hạt DIP giao thoa đặc hiệu với virus đồng chủng 6.5 Các hậu tích hợp genom virus vào ADN tế bào chủ Acid nucleic virus tích hợp vào DNA tế bào chủ dẫn tới hậu khác nhau: - Chuyển thể tế bào (transformation) gây nên khối u ung thư - Làm thay đổi kháng nguyên bề mặt tế bào - Làm thay đổi số tính chất tế bào - Tế bào trở thành tế bào sinh tan 6.6 Kích thích tế bào tổng hợp Interferon Interferon glycoprotein có trọng lượng phân tử khoảng 17.000 - 25.000 Daltons tế bào tổng hợp sau bị kích thích chất cảm ứng sinh interferon virus chất cảm ứng khác Có loại Interferon: Interferon-alpha, interferon-beta interferon-gama Các loại phân biệt kháng thể đặc hiệu Interferon-alpha thường tế bào bạch cầu sinh Interferon-beta sản xuất nguyên bào sợi Interferon-gama lymphokin tế bào lympho T sinh Một số tính chất interferon: - Tính kháng nguyên yếu - Xuất sớm (vài giờ) sau kích thích chất cảm ứng - Tính chất chống virus interferon mang tính đặc hiệu loài không đặc hiệu với virus: Interferon tế bào loài sinh có tác dụng ức chế nhân lên virus tế bào loài (ví dụ có interferon sản xuất từ tế bào có nguồn gốc từ người có tác dụng bảo vệ cho người) Trái lại, interferon có phổ tác dụng rộng ức chế nhân lên nhiều loại virus khác với virus cảm ứng sinh interferon - Interferon không tác động trực tiếp lên virus kháng thể mà phản ứng ức chế nhân lên virus xảy bên tế bào Cơ chế sinh interferon tế bào: Ở tế bào người có 15 gen khác mã hóa cho interferon-alpha, có gen mã hóa cho interferon-beta gen mã hóa cho interferon-gama Bình thưòng gen trạng thái ức chế không hoạt động Các chất cảm ứng sinh interferon có tác dụng giải ức chế cho gen làm cho chúng trở lại dạng hoạt động tế bào tổng hợp Interferon Chất cảm ứng quan trọng gen alpha beta virus, gen gama chất hoạt hóa lympho bào T Hai loại interferon-alpha interferonbeta có tác dụng chống virus mạnh so với interferon-gama Các interferon-gama có tác dụng điều hòa miễn dịch ức chế tế bào ung thư mạnh interferon-alpha interferon-beta Cơ chế tác dụng chống virus interferon: Interferon gắn vào thụ thể đặc hiệu dành cho interferon bề mặt màng tế bào, gây giải ức chế số gen mã hóa protein ức chế virus Dưới tác dụng kích thích interferon có gen tế 10 JCV gây bệnh não nhiều ổ tiến triển (Progressive multifocal leucoencephalopathy: PML) kèm lymphoma u ác tính Chẩn đoán virus nhuộm tổ chức bị tổn thương (thận, não), phân lập virus từ nước tiểu tổ chức bị bệnh, chẩn đoán huyết học tìm kháng thể đặc hiệu 1.2 Virus Papilloma người (human papilloma virus: HPV) Virus papilloma thuộc họ Papillomaviridae, cấu trúc virion virus papilloma tương tự virion polyoma lớn chứa phân tử DNA sợi Hiện có 60 type biết Những thành viên HPV tạo nên u nhú lành tính (mụn cóc) nhiều động vật kể người, mụn cóc người thường biến tự nhiên, phát triển thành ung thư biểu bì da, người có hệ thống miễn dịch bị tổn thương Virus papilloma typ 16 và18 coi gây ung thư quan sinh dục phụ nữ, thành âm đạo, âm đạo ngoài, cổ tử cung Ở nam giới, HPV gây ung thư dương vật Về chẩn đoán, kỹ thuật lai ADN thường dùng để xác định virus tổ chức tổn thương 1.3 Herpesvirus 1.3.1 Epstein-Barr virus (EBV) Được Epstein cộng phát năm 1964 nuôi cấy tế bào lymphoma Burkitt EBV Herpesvirus hướng tế bào lympho B người, phổ biến khắp nơi giới EBV xem nguyên bệnh ung thư khác nhau: - Lymphoma Burkitt: u tế bào lympho B, xảy đặc biệt trẻ em Đây bệnh tản phát Trung Phi New Guinea xảy lẻ tẻ khắp nơi giới In vitro, tế bào lymphoma phát triển thành dòng tế bào dạng nguyên bào lympho giữ đặc tính tế bào gốc ADN kháng nguyên nhân EBV tìm thấy tế bào u lympho Burkitt ADN kháng nguyên nhân EBV tìm thấy tế bào u lympho Burkitt, đoạn ngắn ADN EBV tích hợp, phần lớn ADN virus dạng vòng kín tồn nguyên sinh chất tế bào Điều khó khăn để chứng minh EBV gây ung thư người vùng dịch tể có tỷ lệ nhiễm EBV cao, tỷ lệ ung thư lại thấp Về bệnh sinh, nhiễm trùng EBV làm điều hòa miễn dịch, tăng sinh tế bào lympho B liên quan đến hoạt hóa gen c-myc Có chuyển dịch gen c-myc từ nhiễm sắc thể số đến nhiễm sắc thể số 14, 22 2, chuyển dịch đưa gen sinh khối u tế bào tới cạnh vị trí 88 khởi động (promoter) gen globulin miễn dịch, làm điều hòa gen, làm hoạt hóa c-myc đưa đến tăng sinh không biệt hóa tế bào lympho Burkitt - Tăng bạch cầu lympho nhiễm trùng: thường gặp trẻ 10 tuổi niên bị nhiễm virus tiềm tàng lúc nhỏ nước phương Tây, không gây thành dịch Một số trường hợp bệnh xãy trẻ lớn tuổi người trung niên nhiễm EBV tiên phát (chưa bị nhiễm EBV nhỏ) lây qua hôn (virus có tuyến nước bọt) đường truyền máu, ghép quan người cho bị nhiễm virus - U tế bào lympho người suy giảm miễn dịch: nhiễm trùng EBV tiềm tàng người có huyết dương tính kiểm soát chế miễn dịch qua trung gian tế bào Ở người ghép quan bị AIDS kiểm soát xãy tượng “nhiễm trùng tái hoạt” không triệu chứng, số trường hợp gây nên bệnh tăng sinh bạch cầu liên quan EBV - Bệnh Hodgkin: năm gần đây, người ta tìm chứng EBV đóng vai trò phần gây bệnh Hodgkin 60% bệnh nhân Hodgkin có ADN protein virus Reed-Sternberg tế bào lưới khối u Tuy nhiên chưa đủ để chứng minh EBV bệnh nguyên bệnh Hodgkin, cần nghiên cứu thêm mối liên hệ - U lympho bào T: ADN EBV tìm thấy với tỷ lệ thay đổi loại u lympho bào T khác Cho đến bây giờ, người ta thấy rõ EBV gây nhiễm trùng tế bào lympho T, vai trò virus chế bệnh sinh u lympho bào T bàn cãi - Carcinoma mũi hầu: loại ung thư thường gặp đàn ông vài nhóm sắc tộc Trung Quốc Bệnh nhân có chuẩn độ kháng EBV cao Khối u gồm có tế bào biểu mô thâm nhiễm lympho EBV diện tế bào biểu mô Nó cảm ứng lymphoma lúc tiêm vào khỉ sóc khỉ cú - Ngoài ra, gần có báo cáo mối liên quan EBV với số ung thư khác ung thư biểu mô tuyến ức, ung thư tuyến nước bọt, ung thư dày, đặc biệt ung thư trơn Tuy nhiên mối liên quan cần nghiên cứu thêm 1.3.2 Herpes simplex virus (HSV) HSV typ (HSV-2) coi virus gây ung thư cho người dựa hai loại chứng chính: - Về dịch tễ học: phụ nữ nhiễm trùng hệ tiết niệu HSV-2 có tỷ lệ ung thư cổ tử cung cao lô không nhiễm HSV-2 Những phụ nữ bị bệnh chuẩn độ kháng HSV thường tăng lô không nhiễm HSV-2 89 - Về sinh học phân tử: người ta tìm thấy ADN protein HSV-2 tế bào ung thư cổ tử cung HSV-2 gây chuyển dạng tế bào in vitro Phần lớn phát giải thích giả thuyết HSV-2 gây nhiễm trùng ẩn bệnh nhân có hoạt động tình dục sớm lúc tuổi nhỏ 1.4 Virus viêm gan B (hepatitis B virus: HBV) Ung thư biểu mô gan nguyên phát (hepatoma) thường gặp nhiều người nhiễm HBV người không nhiễm Mối liên quan rõ châu Phi châu Á, nơi có tỷ lệ nhiễm HBV ung thư gan nguyên phát cao HBV mở đường cho ung thư tế bào gan, số bệnh nhân ung thư tế bào gan chứng nhiễm HBV Có thể tìm thấy ADN HBV kháng nguyên bề mặt HBV tế bào ung thư gan Sự tích hợp ADN HBV có lẽ kích hoạt gen sinh ung thư tế bào Virus ARN sinh khối u: Retrovirus 2.1 Cấu trúc Retrovirus có đặc điểm chứa enzyme reverse transcriptase (enzyme chép ngược) biến đổi ARN thành ADN Nhiều Retrovirus gây sarcoma, bệnh bạch cầu, lymphoma carcinoma gà động vật có vú Ngoài ra, Retrovirus gồm thành viên không sinh khối u Về cấu trúc, Retrovirus mang nét đặc thù virus HIV Virion có vỏ bọc nhạy cảm với ete, đường kính khoảng 100 nm, capsid đối xứng hình khối chứa ARN sợi Genom phân tử gồm 8000 đến 10.000 nucleotit Nét đặc thù Retrovirus sau xâm nhiễm tế bào ARN sợi đơn mã thành ADN bổ sung sợi kép (complementary DNA: cDNA) Sau hình thành, ADN bổ sung tích hợp vào nhiễm sắc thể tế bào gọi provirus chứa gen cần thiết cho chep virus Virus chép đồng thời với nhiễm sắc thể nên genom virus truyền lại cho tế bào con, nhiễm trùng thể kéo dài suốt đời Lúc provirus biểu hiện, RNA thành phần protein virus xuất tế bào chất đến tập trung màng tế bào, virus hình thành, đâm chồi thoát khỏi tế bào Trái với nhiều virus khác, Retrovirus không giết chết tế bào lúc trình chép hoàn tất, thay vào qua biểu gen ngoại sinh thay đổi phenotyp tế bào vật chủ 2.2 Retrovirus gây khối u người Những virus gen cần thiết cho chép chứa thêm nhiều gen phụ Một gen phụ gọi tat (transacting transcriptional activator) mã 90 hóa protein làm kích động biến đổi gen khác virus vài gen tế bào Một đặc điểm khác Retrovirus người tính hướng lympho T4 hỗ trợ (CD4) Mặc dù tế bào khác bị nhiễm, T4 hỗ trợ ưu tiên chọn lựa chứng bệnh gây nên liên quan đến quần thể tế bào Đến người ta phân lập hai loại Retrovirus gây bệnh bạch cầu u lympho bào (human T cell leukemia virus, hay gọi là: human T cell lymphotropic virus : HTLV) người HTLV I HTLV II Cả hai bệnh virus liên quan đến bệnh bạch cầu (leuxemi) u lympho bào (lymphoma) 2.2.1 HTLV I (hay HTLV1) Phần lớn HTLV I cảm ứng bệnh bạch cầu lymphoma liên quan đến lympho T4: lympho T4 có dạng khổng lồ nhiều nhân nhiều tiểu thùy, số trường hợp thay đổi hình thái rõ rệt In vitro, nhiễm HTLV I làm cho lympho T bình thường biến đổi chức miễn dịch Bệnh bạch cầu lymphoma HTLV I gây nên thường mang hình thức ung thư đặc biệt gọi bệnh bạch cầu / lymphoma tế bào T trưởng thành (Adult T cell leukemia/lymphoma: ALT) có trình xâm nhiễm, thường tăng bạch cầu máu, nhiễm trùng hội, phân nửa trường hợp thâm nhiễm bạch cầu HTLV I liên quan đến bệnh bạch cầu/ lymphoma tế bào T có trình mạn tính (15-20%) Những trường hợp ALT điển hình luôn có HTLV I dương tính 2.2.2 HTLV II (hay HTLV 2) HTLV II phân lập từ dòng tế bào bệnh nhân với biến thể ung thư bạch cầu tua phân biệt với HTLV I miễn dịch phóng xạ cạnh tranh Sau đó, virus phân lập nhiều bệnh nhân với hình thức mãn tính ung thư tế bào Nhìn chung HTLV II có 55% tương đồng nucleotide với HTLV I có khác biệt tính chất sinh học Những test huyết phân biệt kháng thể virus Ở nhiều vùng nước Mỹ, virus HTLV chiếm ưu dân nghiện HTLV II 91 VIRUS HIV/ AIDS Mục tiêu giảng Mô tả đặc diểm virus học, chế suy miễn dịch virus HIV Trình bày dịch tễ học, chẩn đoán phòng thí nghiệm cách phòng ngừa điều trị nhiễm trùng HIV Virus HIV (gồm HIV-1 HIV-2) thuộc vào họ Retroviridae, giống Lentivirus Những virus có dạng hình cầu, có vỏ, kích thước hạt virus 80 - 100nm đường kính, genom chứa ARN chuỗi đơn Quá trình chép axit nucleic chúng (ARN) tạo chuỗi đôi cDNA (ADN bổ sung) qua trung gian enzyme reverse transcriptase Sự hình thành dạng tiền virus chromosom tế bào vật chủ bước bắt buộc chu kỳ phát triển chúng HIV-1: Phân lập năm 1983 HIV-2: Phân lập năm 1986 Trước chúng có nhiều tên gọi khác LAV (Lymphadenopathy- Associated Virus) HTLVIII (Human T Lymphotrophic Virus Type III) Do năm 1987 Tổ chức Y tế Thế giới thống tên gọi: HIV (Mỹ): Human Immunodeficiency Viruses VIH (Pháp): Virus d’Immunodeficiency Humaine AIDS: Acquired Immunodeficiency Syndrome I TÍNH CHẤT VIRUS HỌC Đặc điểm cấu tạo HIV có hình cầu, đường kính khoảng 100 nm Nhân chứa RNA, capsid hình khối có vỏ bọc Vỏ virus tạo 72 núm gai glycoprotein 120 (gp120) vỏ ngoài, thành phần receptor gắn vào receptor CD4+ tế bào protein xuyên màng glycoprotein 41 (gp 41) 1.1 Nhân: Bộ gen gồm hai chuỗi ARN giống nhau, có gắn men chép ngược (men RT: Reverse Transcriptase) Bộ gen HIV phức tạp virus Retro biết Có gen đực hiệu HIV GAG, POL ENV mã hóa phần cấu trúc virus Ngoài có năm gen khác nữa, gen điều hòa + GAG: Mã hóa lớp protein bên trong, quan trọng p24 + POL: Mã hóa vài loại protein bao gồm men RT, men Integrase men Protease 92 - Men RT: Giúp virus chép ngược từ RNA thành DNA - Men Integrase: Giúp DNA virus gắn vào DNA tế bào ký chủ - Men Protease: Giúp việc phân cắt tế bào khác virus 1.2 Capsid: Mang hai kháng nguyên quan trọng p17 p24 Kháng nguyên p24 kháng nguyên đặc hiệu nhóm tính biến đổi Kháng thể kháng p24 không trung hòa virus dấu hiệu huyết học quan trọng chẩn đoán theo dõi diễn tiến bệnh 1.3 Màng bọc: Mang hai kháng nguyên đặc hiệu týp: gp120 gp41 - gp120: Có dạng nhú gai lồi màng bọc, có nhiệm vụ nhận dạng bám lên bề mặt tế bào đích thụ thể CD4 Gen mã hóa cho gp120 đột biến nhanh gây nên nhiều biến đổi có tính kháng nguyên gp120 Kháng thể kháng gp120 có khả trung hòa HIV, biến đổi nhanh gp120 làm cho hiệu trung hòa kháng thể điều chế vaccine bị hạn chế khó khăn nhiều Tỉ lệ cao đột biến thiếu sót trình đọc chép ngược men RT - gp41: Xuyên qua màng bọc đóng vai tròtrung gian việc hòa màng màng bọc HIV màng bọc tế bào đích Cấu trúc chi tiết virus genom HIV hình sau Hình Hình ảnh minh hoạ cấu tạo virus HIV hoàn chỉnh Các protein HIV chức Các protein Kích thước Chức 93 Gag P24 Protein cấu trúc capsid P17 Protein P9/ P6 Protein kết hợp với RNA/ Giúp virus đâm chồi Polymerase (Pol) Protease Integrase Vỏ P66/p51 P10 P 32 gp120 tế bào enzyme chép ngược enzyme xử lý protein sau dịch mã enzyme gắn cDNA virus vào genôm tê bào Protein bề mặt vỏ Tat Rev Nef Vif Vpr Vpu( có HIV1 ) gp 41 p 14 p19 p27 p23 p18 p15 Protein xuyên màng vỏ Protein hoạt hóa Điều hòa biểu mRNA virus Cần cho chép virus Làm tăng tính nhiễm trùng virus Giúp cho chép virus Giúp phóng thích virus Vpx( có HIV2 ) Tev p26 Giúp cho virus nhiễm trùng Hoạt hóa gen Tat Rev Tính chất đề kháng HIV bị bất hoạt nhiệt độ 56 – 600 C khoảng 30phút, bị bất hoạt với hoá chất giết khuẩn thông thường dung dịch natri hypochlorid 0,5%, cồn etanol 70%, povidone - iodine, pH < > 10 bất hoạt HIV1 khoảng 10 phút Trong tổ chức nuôi cấy virus nhiệt độ phòng dạng HIV tự xác định đến 15 ngày, nhiệt độ 370 C đến 11 ngày Chu kỳ sinh học HIV tế bào Để xâm nhập vào tế bào, gp120 HIV gắn vào phân tử CD4 bề mặt tế bào Kế đến gp41 trung gian hòa màng virus vào tế bào Sau cởi áo ngoài, ARN sợi đơn virus mã ngược để trở thành ADN chuổi đôi qua trung gian men reverse transcriptase, ADN chuổi đôi tạo thành chuyển vào nhân tế bào tích hợp vào nhiễm sắc thể tế bào ký chủ, gọi tiền virus (provirus), gắn kết qua trung gian men integrase ADN virus chuyển mã thành mRNA nhờ men RAM polymerase tế bào ký chủ, tứ tạo số protein lớn Các protein lớn chẻ tách men protease để thành pritein cấu trúc virus proten lõi glycoprotein màng bọc 94 Sự tổ hợp hình thành virus xảy màng tế bào Ở ARN tạo thành virus gói protein lõi capsid Capsid tiếp nhận vỏ hạt virus qua màng tế bào phương thức đẩy từ từ hạt virus nảy chồi Nhiều virus tồn bên tế bào điều gây khó khăn cho kháng thể trung hòa Quá trình nhân lên virus tế bào tóm tắt sơ đồ sau Sự phát triển virus nuôi cấy tế bào tạo hiệu ứng tế bào bệnh lý tùy thuộc vào chủng phân lập, nhiều chủng tạo hợp bào điển hình (syncytium formation) gây chết tế bào, nhiên số chủng không tạo nên hình ảnh Tính chất tạo tế bào bệnh lý dùng để phân loai phân type sinh học HIV1 II CƠ CHẾ SUY MIỄN DỊCH VÀ DỊCH TỂ HỌC Cơ chế suy miễn dịch HIV HIV nhiễm vào thể qua ba giai đoạn * Giai đoạn 1: Xâm nhập vào thể HIV xâm nhập vào thể qua ba đường: Máu, sinh dục mẹ bị nhiễm HIV truyền sang thời kỳ chu sinh * Giai đoạn 2: Tấn công tế bào đích Các tế bào đích HIV bao gồm: + Tế bào lymphocyte T CD4+ (LT4) 95 - Bản chất lympho bào T giúp đỡ (T h) tế bào trung tâm giữ vai tró quan trọng đáp ứng miễn dịch người - Trên bề mặt LT4 mang “phân tử CD4” Phân tử CD4 thụ thể đặc hiệu với gp120 giúp HIV nhận dạng bám bề mặt LT4 Bên cạnh thụ thể CD4, có đồng thụ thể CXCR4 Chemokine giúp virus dễ dàng vào tế bào - Trong giai đoạn sớm HIV phân lập đại thực bào bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng tiến triển HIV phân lập nhiều LT4 - Thời gian bán hủy LT4 bị nhiễm HIV 1,6 ngày + Đại thực bào bạch cầu đơn nhân: - Đại thực bào bạch cầu đơn nhân đóng vai trò việc lan truyền sinh bẹnh học nhiễm HIV - Bên cạnh thụ thể CD4, có đồng thụ thể CXCR4 Chemokine - Bạch cầu đơn nhân tương đối khó bị tiêu diệt HIV virus tồn bên tế bào mà qua bạch cầu đơn nhân bị nhiễm virus xâm nhập quan khác thể não, phổi - Ở não, đại thực bào bạch cầu đơn nhân tế bào bị nhiễm HIV liên quan đến triệu chứng bất thường thần kinh bệnh nhân AISD - Ở phổi, đại thực bào phế nang liên quan đến viêm phổi kẽ + Tế bào cưa tế bào Langerhans + Cơ quan bạch huyết: - Cơ quan bạch huyết đóng vai trò trung tâm nhiễm HIV lympho bào có 2% máu ngoại biên, lại 98% lympho bào quan dạng bạch huyết - Trong trình nhiễm HIV, giai đoạn nhiễm trùng tiềm tàng, HIV chủ động chép mô bạch huyết * Giai đoạn 3: Sao chép bên tế bào đích gây hậu + Sự chết tế bào: Khi tế bào bị nhiễm virus, virus ức chế tổng hợp protein tế bào tổng hợp protein virus xảy ra; virus ức chế tổng hợp DNA RNA tế bào đích dẫn đến chết tế bào + Hiện tượng hợp bào (Syncytia): LT4 bị nhiễm HIV bề mặt xuất gp120 virus Các gp120 gắn với phân tử CD4 LT4 khác chưa bị nhiễm HIV tạo thành hợp bào Các hợp bào không 96 chức gp120 làm thay đổi bề mặt tính thấm màng hợp bào, cuối hợp bào chết + Hiện tượng ADCC (Antibody Dependent Cellular Cytoxicity): Trên bề mặt LT4 bị nhiễm HIV có mang kháng nguyên gp120 thể tạo kháng thể kháng gp120 Phần Fab kháng thể gắn lên bề mặt LT4 gp120, phần Fc lại kháng thể gắn lên bề mặt tế bào tiêu diệt (Killer cell) dẫn đến lympho bào T có gp120 bị tiêu diệt + Hiện tượng hoạt hóa bổ thể: Một số gp120 tự máu phóng thích từ LT4 nhiễm HIV gắn phân tử CD4 LT4 chưa nhiễm HIV Sau kháng thể kháng gp120 đến gắn vào gp120 tạo thành phức hợp miễn dịch Phức hợp miễn dịch hoạt hóa bổ thể, cuối LT4 bị ly giải + Hiện tượng siêu kháng nguyên (Superantigen): HIV hoạt động “siêu kháng nguyên” Chính siêu khàng nguyên hoạt hóa không chuyên biệt nhiều tế bào lympho T giúp đỡ dẫn đến chết chúng + Sự nhiễm HIV gây nên tượng chết tế bào có chương trình (apoptosis) + Tế bào bị nhiễm HIV chết phóng thich nhiều chất hòa tan có khả gây độc cho tế bào khác Miễn dịch học: + Bản chất LT4 lympho bào giúp đỡ, coi tế bào trung tâm hệ thống miễn dịch, giữ vai trò quan trọng đáp ứng miễn dịch người bao gồm: hoạt hóa đại thực bào, bạch cầu đơn nhân, tế bào T gây độc tế bào, tế bào diệt tự nhiên, lympho bào B, yếu tố hòa tan ảnh hưởng đến phát triển biệt hóa tế bào lympho, tế bào tạo máu HIV gây nhiễm tiêu diệt LT4 dẫn đến suy giảm miễn dịch mắc phải Hậu nhiễm trùng hội ung thư phát triển + Những tế bào bih nhiễm virus liên tục tạo HIV để trì tình trạng nhiễm trùng thể vĩnh viễn Do đó, người bị nhiễm HIV suốt đời + Khoảng 90% người bị nhiễm HIV có kháng tể chống virus Tuy nhiên, kháng thể lại không đủ khả trung hòa virus kháng thể virus tồn bên thể, Hiện tượng gọi miễn dịch không đầy đủ Có số trường hợp không tìm thấy kháng thể huyết Trường hợp để xác định người ta tìm kháng nguyên virus 97 + Bên cạnh miễn dịch dịch thể miễn dịch qua trung gian tế bào góp phần chống HIV Tuy nhiên, vấn đề chưa biết rõ hợp tác miễn dịch dịch thể miễn dịch qua trung gian tế bào đáp ứng miễn dịch người chống lại HIV diễn đáp ứng miễn dịch ký chủ giúp bảo vệ thể hay làm cho bệnh lý tiến triển trầm trọng + Sự sụt giảm lượng khàng thể chống p24 dấu hiệu quan trọng dự báo bắt đầu xuất triệu chứng lâm sngf AISD Dịch tễ học nhiễm trùng HIV Hội chứng suy giảm miễn dịch tìm thấy năm 1981 người nghiện chích thuốc 1983 L Montagnier Pháp phân lập virus gọi LAV (lymphadenopathyassociated virus), R Gallo Hoa kỳ thời gian nuôi cấy virus từ bệnh nhân bị suy giảm miễn dịch phân tích sinh học phân tử đặt tên virus HTLV III (Human T cell leukemia virus type III), virus giống Đến 1986 Uỷ ban quốc tế danh pháp virus thống tên gọi cho virus HIV ( Human immunodeficiency virus ) Hiện có khoảng 30 triệu người bị nhiễm HIV toàn giới, có týp virus gây bệnh HIV1 HIV2 HIV1 gây bệnh gặp khắp nơi giới, HIV2 gặp số nơi Tây phi HIV1 chia thành týp ( subtype) từ A - J týp O HIV2 thành týp từ A - G Nhiễm trùng HIV nước vùng địa lý thường vài týp bật Đường truyền bệnh HIV1 HIV2 hoàn toàn giống 3.1.Truyền qua tiếp xúc sinh dục Đường sinh dục đường mà virus HIV truyền từ bệnh nhân bị nhiễm HIV qua người lành, tế bào bị nhiễm virus virus tự dịch âm đạo tinh dịch có khả truyền bệnh Khả truyền phụ thuộc vào nhiều yếu tố gồm số lần tiếp xúc sinh dục với người bị nhiễm, có mặt bệnh nhiễm trùng sinh dục giang mai, lậu, nhiễm trùng herpes, viêm nhiễm xây xát đường sinh dục yếu tố làm tăng lây nhiễm HIV 3.2 Truyền qua máu Virus truyền qua máu dạng tự do, tế bào lymphocyte, đại thực bào Đường lây truyền thường gặp truyền máu, sản phẩm máu có virus, 98 tiêm chích, nhổ răng, tai biến nghề nghiệp vật sắc nhọn dao, kim tiêm, ống nghiệm có dính máu người bệnh Các tổn thương nông da đường vào virus tiếp xúc với máu bị nhiễm HIV 3.3 Truyền từ mẹ cho HIV truyền từ mẹ sang thời kỳ mang thai, sinh sau sinh HIV thường truyền qua giai đoạn sau thai kỳ Tuy nhiên, truyền qua thai nhi sớm khoảng tuần sau có thai khảo sát III CHẨN ĐOÁN PHÒNG THÍ NGHIỆM Phân lập virus: Việc phân lập HIV máu khó thực đòi hỏi phòng thí nghiệm trang bị đại trình độ kỹ thuật cao Do đó, phân lập virus HIV áp dụng cho nghiên cứu không phương pháp thường quy để chẩn đoán nhiễm HIV Thử nghiệm phát kháng thể HIV: Nhiều thử nghiệm dùng để phát kháng thể HIV huyết bệnh nhân Các thử nghiệm sau dùng rộng rải phòng thí nghiệm để xác định kháng thể với virus HIV 3.1 Phản ứng miễn dich hấp phụ gắn men (ELISA) ELISA có độ nhạy độ đặc hiệu 97,5 đến 100% Khi thử nghiệm ELISA dương tính cần phải dùng thử nghiệm Western blot để chẩn đoán khẳng định + Kết âm tính giả: Thường xuất xét nghiệm làm vài tuần nhiễm HIV Không thực “âm tính giả” kháng thể chưa thực hình thành giai đoạn bệnh (giai đoạn cửa sổ) + Kết dương tính giả: Do người xét nghiệm mắc bệnh tự miễn, bệnh thận, bệnh gan, đa thai dã chủng ngừa bệnh viêm gan B, cúm, dại 3.2.Thử nghiệm Western - Blot Thử nghiệm có gía trị khẳng định nhiễm trùng HIV Thử nghiệm Western - Blot nhằm phát kháng thể protein chủ yếu HIV: - Kháng nguyên lõi: p17, p24, p55 - Kháng nguyên polymerase: p31, p51, p66 - Kháng nguyên màng bọc: gp 41, gp 120 gp160 + Kết dương tính: Hai loại gp phát gp + p24 99 + Kết âm tính: Không có loại protein phát + Kết không xác định: Có vài protein phát không thuộc tiêu chuẩn kết dương tính Trong thực tế, thí nghiệm đơn lẻ không đủ để xác định kết HIV (+) mà cần phải tiến hành nhiều xét nghiệm bệnh nhân Tại Mỹ Châu Âu: Xác định HIV (+) ELISA Western-Blot dương tính Tại Châu Phi: Xác định HIV (+) hai ELISA dương tính Tại Việt Nam: Xác định HIV (+) ba ELISA dương tính Hiện có số xét nghiệm tìm khàng thể kháng HIV nước bọt nước tiểu có độ nhạy độ đặc hiệu cao Thử nghiệm phát kháng nguyên virus p24: Kháng nguyên p24 diện máu với số lượng lớn nhiễm HIV Tuy nhiên xét nghiêm tìm p24 không áp dụng cho chẩn đoán HIV thường quy Thử nghiệm phát kháng nguyên p24 có giá trị chẩn đoán nhiễm HIV cấp tính tiên lượng tình trạng bệnh Thử nghiệm phát RNA HIV: ARN HIV thường xuất với nồng độ cao bệnh nhân nhiễm HIV Thử nghiệm PCR để phát RNA HIV phương pháp tin cậy để chẩn đoán nhiễn HIV giai đoạn cửa sổ Khi xét nghiệm tìm kháng thể âm tính Ngoài PCR theo dõi đáp ứng bệnh nhân điều trị Do kỷ thuật phức tạp đắt tiền nên PCR không định rộng rãi Các xét nghiệm thường quy theo dõi tình trạng nhiễm HIV: Đếm số lượng LT4: Đếm số lượng LT4 xét nghiệm điểm tiên lượng tiến triển bệnh giá trị việc định điều trị lâm sàng - Khi số lượng LT4 giảm 350 tế bào.mm 3: Khởi đầu diều trị chống virus Retro Sau theo dõi số lượng LT4 – tháng lần - Khi số lượng LT4 giảm 200 tế bào/mm3: Khởi đầu điều trị nhiễm trùng hội Định lượng RNA HIV: Nồng độ RNA HIV phản ánh tiến triển nhanh bệnh dấu hiệu điểm tiên lượng nhiễm HIV theo dõi đáp ứng điều trị Xét nghiệm kháng nguyên p24: Có giá trị tiên lượng tình trạng bệnh Kháng nguyên p24 xuất sớm sau nhiễm HIV kháng nguyên thường không phát sau 100 kháng thể xuất Kháng nguyên p24 xuất trở lại tang cao dần dấu hiệu dự báo tiên lượng xáu cho bệnh nhân IV PHÒNG NGỪA VÀ ĐIỀU TRỊ Phòng ngừa Kiểm tra người cho máu, xử lý máu trước chuyền để loại trừ HIV Dụng cụ y tế đảm bảo vô trùng, bơm tiêm, kim tiêm nên dùng lần Cần khuyến cáo cho nhân viên trực tiếp làm việc với bệnh nhân với máu bệnh nhân nội quy an toàn, tránh lây nhiễm bất cẩn Ngăn cấm tiêm chích ma túy tệ nạn dâm, giáo dục an toàn tình dục Hiện chưa có vaccine hiệu để phòng bệnh Điều trị Việc nghiên cứu thuốc chống virus HIV nhằm vào khâu chu trình phát triển virus: ức chế gắn vùi virus vào màng tế bào, ức chế cởi áo vào bên tế bào nucleocapsid, ức chế trình mã ngược, ức chế gắn cDNA virus với chromosome tế bào (sự hình thành provirus), ức chế trình mã mRNA, trình dịch mã, ức chế tổ hợp virus, trình đẩy virus khỏi tế bào Nhiều chế phẩm sinh học kháng thể hóa chất thử nghiệm phòng thí nghiệm Hiện có ba nhóm thuốc điều trị chống HIV: - Các thuốc ức chế men sa chép ngược nucleoside (Nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors – NRTIs): NRTIs ức chế tổng hợp DNA HIV-1 men chép ngược Tác dụng phụ: Rối loạn tiêu hóa, biến chứng thần kinh, viêm tủy Các thuốc tiêu biểu thuộc nhóm này: Azidothymidine (AZT), dideoxycytidine, didanosine, lamuvidine AZT có tác dụng giảm thiểu bệnh nhiễm trùng hội, kéo dài thời gian sống cho bệnh nhân không loại trừ hoàn toàn HIV Hiện xuất dòng HIV kháng với AZT bệnh nhân không dung nạp AZT tác dụng phụ AZT hạn chế nhiều đến hiệu thuốc Những trường hợp thay thuốc khác - Các thuốc ức chế men chép ngược không nucleoside: (Non-Nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors – NNRTIs): Tác dụng chống men chép ngược HIV-1 101 Tác dụng phụ: Phát ban, viêm gan Các thuốc tiêu biểu thuộc nhóm này: Efavirenz (EFV), Nevirapin (NVP)… - Các thuốc ức chế protease (Protease Inhibitors – PIs): Tác dụng chống men protease HIV-1 Tác dụng phụ: Rối loạn tiêu hóa, rối loạn lipid Các thuốc tiêu biểu thuộc nhóm này: Saquinavir, Ritonavir, Indinavir Sự phối hợp thuốc làm giảm lượng virus máu nhanh, kéo dài đời sống bệnh nhân, hạn chế biến chủng virus kháng thuốc 102 [...]... nguyên Virus Paramyxo Nhiễm á cúm 1 – 4, bệnh hô Hình xoắn ốc Có Nhỏ hơn (8 0 – 120 nm) Có Có ở mọi virus H và N trên những gai khác nhau Không Thể nội bào Nhân tế bào Thường xảy ra Cao Hình xoắn ốc Có Lớn hơn (1 50 – 300 nm) Có Có ở một số virus H và N trên cùng một gai Có Màng bào tương Bào tương tế bào Hiếm khi Thấp VIRUS CÚM (Influenzavirus) Mục tiêu học tập 1 Trình bày được các tính chất của virus. .. protein liên kết tế bào (gây ra các hợp bào), tính vững bền của các kháng nguyên Họ Paramyxoviridae được phân chia thành 3 giống: - Paramyxovirus: virus á cúm và virus quai bị - Morbillivirus: virus sởi - Pneumovirus: virus hợp bào đường hô hấp I VIRUS Á CÚM 1 Các tính chất chung của virus Virus á cúm có nhiều hình thái như hình cầu, hình bầu dục, kích thước 100 - 250nm Chứa ARN 1 sợi Virus nhân lên tốt... globulin đặc hiệu chống sởi để điều trị, có tác dụng rất tốt IV VIRUS HỢP BÀO ĐƯỜNG HÔ HẤP (Respiratory syncytial virus: RS virus) 1 Các tính chất chung của virus Virus hợp bào đường hô hấp (virus RS) là một virus chứa ARN 1 sợi, có kích thước khoảng 65 - 300nm, nhạy cảm với ete và có một cấu trúc giống như cấu trúc của các virus á cúm và sởi Virus RS có tất cả đặc tính chủ yếu của các Paramyxoviridae,... khuyến cáo như sau: Vaccine Liều lượng Đường tiêm chủng Trong da (thường ở cánh tay Tuổi tiêm chủng Sơ sinh hoặc bất kỳ lúc nào sau đó Sơ sinh và lúc 2,3,4 tháng tuổi BCG (phòng lao) 0,1 ml Sabin (phòng bại liệt) DPT (phòng bạch hầu, 2 giọt trái) Uống 0,5 ml Tiêm bắp (thường ở đùi) 0,5 ml Dưới da (thường ở cánh tay trái) ho gà, uốn ván) Sởi Lúc 2,3,4 tháng tuổi Lúc 9 tháng tuổi hoặc sớm nhất sau đó... 25 Myxovirus Myxovirus là một nhóm virus lớn (virus cúm, sởi, quai bị ) có khả năng tấn công glycoprotein ở thụ thể bề mặt tế bào hô hấp và gây bệnh đường hô hấp Thuật ngữ “myxovirus” có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp “myxa””, nghĩa là viêm niêm mạc tiết nhầy Dựa vào sự khác biệt nhau cơ bản về cấu trúc và khả năng gây bệnh mà các virus này được chia làm hai phân nhóm riêng biệt – virus Orthomyxo và virus. .. bệnh ở người Bộ gen virus Cấu trúc RNA Polymerase của RNA Đường kính vòng Virus Orthomyxo Cúm loại A, B và C hấp hợp bào, sởi, quai bị Sợi đơn RNA Không phân đoạn Có 18 nm Sợi đơn RNA Chia 8 đoạn Có xoắn 9 nm ribonucleoprotein Capsid Màng bọc (envelope) Kích thước virion Hemagglutinin (HA) Neuraminidase (NA) Các gai bề mặt Tạo tế bào khổng lồ Virus hợp nhất với tế bào Sao chép RNA virus Tái tổ hợp di... nhiễm virus cúm sau khoảng 12 giờ phần lớn là sinh ra các hạt virus hoàn chỉnh (virion), nhưng đôi khi có thể sản sinh ra một loại virus ở trạng thái không hoàn chỉnh (hạt DIP: Defective interfering particles) Những hạt virus không hoàn chỉnh chứa rất ít 27 hoặc không có ARN, mất khả năng gây xâm nhiễm, nhưng vẫn giữ được khả năng ngưng kết hồng cầu 3 Sức đề kháng với các tác nhân lý hóa học - Hạt virus. .. được khả năng gây bệnh của virus 3 Trình bày được các phương pháp chẩn đoán phòng thí nghiệm và phòng bệnh 26 Virus cúm là thành viên của họ Orthomyxoviridae Các virus này là những tác nhân gây bệnh cúm ở người và động vật Các virus gây bệnh cho người được phân biệt thành 3 type A, B và C Có nhiều tác nhân virus khác nhau như virus cúm, virus á cúm, virus hợp bào hô hấp, virus adeno đều có thể gây... virus mà động vật thí nghiệm là vật chủ nhạy cảm duy nhất hoặc vật chủ được chọn lưạ 8.2 Phôi gà: Thường dùng trứng gà đã ấp 9 - 12 ngày, lúc đó phôi đã tạo thành, khoang ối và khoang niệu phát triển đầy đủ Tùy theo mục đích: phân lập, thử nghiệm, sản xuất vaccine và tùy theo loài virus, có thể tiêm nhiễm vào màng niệu đệm (virus đậu mùa, đậu vaccine, Herpesvirus),vào khoang ối (virus cúm, quai b ), ... bệnh viêm gan B - Nhiễm virus tiềm tàng: virus tồn tại dai dẵng, không có triệu chứng nhưng không thải virus ra môi trường xung quanh Trong nhiễm virus tiềm tàng virus có thể ở dưới dạng tiền virus, acid nucleic của virus có thể tích hợp vào bộ gen của tế bào chủ Trong một vài trường hợp do ảnh hưởng của một hay nhiều tác nhân như chấn thương, stress, giảm miễn 11 dịch, v.v , tiền virus có thể được hoạt