Virus dịch tả lợn Pestis suum virus

Đặc tính nuôi cấy: Có thể nuôi cấy VR trong tổ chức sống của lợn như tuỷ xương, thận, dịch hoàn, thai lợn… - Trên môi trường tế bào : +Tế bào thận lợn thường được sử dụng.. LỢN BỊ BỆNH

Virus Dịch tả lợn (Pestis suum virus)

DTL

Lời cảm ơn

Xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn

Bá Hiên, Trưởng bộ môn Vi sinh vật –

Truyền nhiễm, Khoa Thú y, Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã dày công biên soạn bộ bài giảng này!

I Giới thiệu chung.

 Bệnh dịch tả lợn ( Pestis suum – Classical swine fever – Hog cholera – pig plague ) một bệnh truyền nhiễm rất lây lan của loài lợn do một VR gây ra Bệnh thường biểu hiện chứng bại huyết, tụ máu xuất huyết, hoại tử và loét ở nhiều cơ quan phủ tạng.

 Bệnh được phát hiện đầu tiên ở Mĩ năm 1810, sau đó người ta phát hiện bệnh ở khắp nơi trên thế giới Đến năm 1968 bệnh đã giảm và được thanh toán ở một số nước như Mĩ, Canada,Thuỵ sỹ, Đan Mạch, Australia.

 Ở Việt Nam, bệnh được phát hiện đầu tiên năm 1923 ở các tỉnh miền Bắc, sau đó thấy ở hầu khắp các tỉnh trong cả nước, gây ra tổn thất rất lớn cho ngành chăn nuôi lợn.

II Đặc tính sinh học của virus

2.1 Hình thái và phân loại:

 Virus Dịch tả lợn thuộc họ Flaviviridae , giống

Hình thái virus

+ Nhóm độc lực vừa là những chủng phân lập từ lợn

bị bệnh ở thể mạn tính.

 Nếu tiêm truyền VR liên tiếp trên 150 đời qua thỏ, VR

sẽ độc với thỏ nhưng không độc với lợn, gọi là giống virus nhược độc DTL qua thỏ, dùng để chế Vac xin.

2.3 Đặc tính nuôi cấy:

 Có thể nuôi cấy VR trong tổ chức sống của lợn như tuỷ xương, thận, dịch hoàn, thai lợn…

- Trên môi trường tế bào :

+Tế bào thận lợn thường được sử dụng VR nhân lên ở NSC nhưng không gây bệnh tích

tế bào, VR lan truyền giữa các tế bào qua cầu nối NSC và tồn tại lâu trong tế bào.

2.4. Sức đề kháng.

 VR DTL có sức đề kháng yếu với sức nóng đun

60oC/10ph, máu nhiễm VR đã khử fibrin ở 68oC/30ph,đun 100oC chết ngay

 Bền vững trong khoảng pH: 5-10

 Mẫn cảm với tia cực tím

 Vì có lớp vỏ ngoài chứa lipit nên các chất hoà tan mỡ nhưete, clorofooc

 Trong chuồng nuôi, trong phân lợn ốm - 2 ngày

 Trong thịt lợn bệnh và các sản phẩm của nó đem đônglạnh,VR có thể tồn tại lâu, đây là nguồn reo rắc mầm bệnhnguy hiểm

 Các chất sát trùng thông thường diệt VR nhanh

2.5 Khả năng gây bệnh :

*Trong tự nhiên: chỉ có loài lợn mắc bệnh DTL.

- Lợn nhà, lợn rừng ở mọi lứa tuổi đều cảm thụ nhưng mắc nặng nhất và chết nhiều là lợn con đang bú sữa.

- Người và các loài động vật khác không mắc.

- Bệnh thường lây trực tiếp từ con ốm sang con khoẻ.

- Lợn có chửa nhiễm VR truyền VR sang con qua nhau thai.

*Trong phòng thí nghiệm:

Lợn con rất cảm thụ, gây bệnh cho lợn con

Bệnh phát ra giống như bệnh trong tự nhiên.

 Dùng lợn con 10-15 kg, đúng tiêu chuẩn.

 Lấy 1ml máu hoặc 0,5g lách của lợn nghi bệnh pha thànhhuyễn dịch rồi tiêm vào dưới da cho lợn

 Nếu trong bệnh phẩm có VR thì sau tiêm 3 ngày:

lợn kém ăn

sốt cao 41-42oC, giữ vững 4-5 ngày

lợn bỏ ăn, đi táo

viêm kết mạc mắt có dử và nước nhờn chảy ra

 Sau một tuần lễ, con vật đi tháo, phân lẫn máu mùi hôi

Niêm mạc miệng, lưỡi, lợi tụ máu, loét

Dạ dày, ruột tụ máu, loét, van hồi manh tràng, ruột già

có nốt loét trông như những cúc áo

Lách ít sưng,có nhồi huyết

Vỏ thận xuất huyết lấm tấm, bể thận ứ máu

Hạch ruột sưng tụ máu tím bầm ,xuất huyết như đá hoavân

Da xuất huyết như muỗi đốt ở các vùng da mỏng.

 Kết luận : bệnh phẩm có VR DTL.

ĐÀN LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ:

BẨN THỈU DO TIÊU CHẢY, CÓ HIỆN TƯỢNG CO GIẬT

Lợn mẹ bị bệnh dịch tả lợn: Sảy thai, tiêu chảy

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ

TRÊN DA CÓ NHỮNG NỐT XUẤT HUYẾT, ĐÁM XUẤT HUYẾT MÀU ĐỎ THẪM

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ

TRÊN DA CÓ NHỮNG NỐT XUẤT HUYẾT, ĐÁM XUẤT HUYẾT MÀU ĐỎ THẪM

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ

TRÊN DA CÓ NHỮNG NỐT XUẤT HUYẾT, ĐÁM XUẤT HUYẾT MÀU ĐỎ THẪM

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ:

MẮT SƯNG, XUNG HUYẾT, CÓ DỬ Ở ĐUÔI MẮT

LỢN CON ĐẺ RA TỪ LỢN MẸ BỊ BỆNH DỊCH TẢ:

CÓ HIỆN TƯỢNG RUN RẨY, CO GIẬT

•BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

THANH QUẢN XUẤT HUYẾT LẤM TẤM

BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

HOẠI TỬ TẬP TRUNG Ở HẠCH AMIDAN

Bệnh dịch tả lợn:

Xuất huyết và gan hóa ở phổi

Bệnh dịch tả lợn:

Xuất huyết và gan hóa ở phổi

Phổi xuất huyết nặng

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ :

NHỒI HUYẾT TRÊN BỀ MẶT VÀ RÌA LÁCH

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ :

NHỒI HUYẾT TRÊN BỀ MẶT VÀ RÌA LÁCH

CÁC NỐT LOÉT TRÒN, DẠNG CÚC ÁO TRÊN RUỘT GIÀ

Loét cúc áo ở van hồi manh tràng

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

XUẤT HUYẾT LẤM TẤM TRÊN BỀ MẶT THẬN

Cục máu đông trong bể thận

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

XUẤT HUYẾT Ở TƯƠNG MẠC RUỘT NON

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

HẠCH MÀNG TREO RUỘT XUẤT HUYẾT, CÓ MÀU ĐỎ THẪM

BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

MẶT CẮT HẠCH MÀNG TREO RUỘT XUẤT HUYẾT, DẠNG VÂN ĐÁ HOA

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

XUẤT HUYẾT Ở NIÊM MẠC BÀNG QUANG

LỢN BỊ BỆNH DỊCH TẢ LỢN :

XUẤT HUYẾT VÀ LOÉT TRÊN BỀ MẶT NIÊM MẠC DẠ DẦY

Tiêu huỷ lợn chết bệnh dịch tả lợn



3.2 Chẩn đoán huyết thanh học

*Phản ứng trung hoà trên thỏ:

 Chủng VR nhược độc DTL không độc với lợn nhưng độcvới thỏ, nếu tiêm cho thỏ sẽ sốt

 Dùng bệnh phẩm nghi bệnh DTL tiêm cho thỏ, nếu BP có

VR cường độc DTL, thỏ sẽ được miễn dịch, trong máu sẽ

có KT trung hoà VR DTL

 Tiêm tiếp cho thỏ bằng VR nhược độc DTL, VR sẽ bị KTtrung hoà có trong máu thỏ trung hoà di nên không gâyđược bệnh cho thỏ nữa

 Kết quả 2 thỏ này không sốt

 Lấy máu 2 thỏ này tiêm cho 2 thỏ khoẻ khác, thỏ này cũngkhông sốt

 Chứng tỏ VR nhược độc đã bị trung hoà

 Lô đối chứng: 2 thỏ

Tiêm huyễn dịch hạch lách lợn khoẻ

10 ngày sau tiêm VR nhược độc DTL: 2 thỏ này

có sốt.

DTL.

*Phản ứng miễn dịch huỳnh quang:

 Tiến hành: Nhỏ lên tiêu bản 1 – 2giọt KT DTL, để 1 giờ

rồi rửa nước, làm khô

 Đọc kết quả trên KHV hùynh quang, nếu có phát sáng thì

phản ứng +

*Phản ứng kết tủa khuyếch tán trên thạch:

 KN nghi: là bệnh phẩm, nghiền với nước sinh lý, pha thêm1-2% axit phenic, ly tâm lấy nước trong

 KN âm: Chế bằng hạch, lách lợn khoẻ

 KT chuẩn : Kháng huyết thanh DTL

 Phản ứng làm trên đĩa thạch với hệ thống 6 lỗ

 Nguyên lý: trong môi trường Gel, KN và KT ở cách nhau 1 khoảng trong thạch, chúng sẽ khuếch tán về phía nhau và gặp nhau Nếu

KN và KT tương ứng chúng sẽ kết hợp với nhau tạo thành đường tủa có thể quan sát bằng mắt thường or có thể nhuộm màu để thấy rõ hơn.

 Thực chất của p/ư là p/ư kết tủa trong thạch kép, dễ làm, hay được sử dụng, gọi là AGP(agar gell precipitation) or AGID(agar gell immuno diffusion).

Phản ứng kết tủa khuếch tán trên thạch (tiếp)

 Chuẩn bị và tiến hành phản ứng:

 1phiến kính or 1 hộp lồng petri> đổ 1lớp thạch agar1% dày 1-2cm> khi thạch đông đục các lỗ Φ4-5mm,khoảng cách từ lỗ ở trung tâm đến các lỗ xung quanh5-6cm> nhỏ vào mỗi lỗ 1 vài giọt thạch để bịt phầnphiến kính trên lỗ, tạo ra các lỗ xq toàn là thạch

 KN đã biết được nhỏ ở lỗ trung tâm

 KT đã biết và các KT nghi nhỏ ở các lỗ xq

 Khi KN gặp KT tương ứng sẽ tạo ra đường tủa

 Có thể dùng 1hỗn hợp KT để phát hiện nhiều KNtrong dd, tạo nhiều đương tủa, mỗi đường là 1cặpKN-KT tương ứng=> 2 KN giống nhau> 2 đường tủanỗi liền; 2 KN khác nhau> 2 đường tủa cắt nhạu

Tiến hành phản ứng kết tủa khuếch tán trên thạch (cách 2)

 1phiến kính or 1 hộp lồng petri> đổ 1lớp thạch agar 1% dày 1-2cm> khi thạch đông đục các lỗ Φ4-5mm, khoảng cách từ lỗ ở trung tâm đến các lỗ xung quanh 5-6cm> nhỏ vào mỗi lỗ 1 vài giọt thạch để bịt phần phiến kính trên lỗ, tạo ra các lỗ xq toàn là thạch.

 Kháng thể đã biết được nhỏ ở lỗ trung tâm.

 Kháng nguyên đã biết và các Kháng nguyên nghi nhỏ ở các lỗ xq.

 Khi KN gặp KT tương ứng sẽ tạo ra đường tủa.

Phản ứng kết tủa khuếch tán trên thạch AGP (Agar Gell Precipitation Test) hay AGID (Agar gell immuno diffusion test)

Phản ứng miễn dịch huỳnh quang

IV Phòng chống Dịch tả lợn

4.1 Vệ sinh phòng bệnh.

Khi chưa có dịch: tiêm phòng triệt để cho những lợn ở

diện tiêm phòng, cho lợn ăn uống tốt Chuồng trại hợp vệsinh, tăng cường kiểm dịch ở chợ, lò mổ, lợn mới mua vềphải cách ly 15 ngày

Khi dịch xảy ra: chẩn đoán chính xác, công bố dịch, cách

ly lợn ốm hoặc nghi lây Cấm vận chuyển lợn ra vào ổ dịch

Cấm bán chạy lợn ốm hoặc mổ thịt bừa bãi, xác lợn chếtphải chôn sâu giữa hai lớp vôi, tiêu độc kỹ chuồng trại,dụng cụ CN bằng nước vôi 10%

Xử lý triệt để phân rác, thức ăn thừa,chất bài xuất của lợn

ốm, chết

Tiêm thẳng vacxin vào ổ dịch.

Công bố hết dịch 15 ngày sau khi con ốm cuối cùng chếthoặc khỏi và đã thực hiẹn đủ các biện pháp vệ sinh tiêuđộc

 Lợn con tiêm phòng lần đầu vào lúc 30-35 ngày tuổi.Tiêm nhắc lại sau 5 tháng

 Lợn nái và đực giống mỗi năm tiêm 1 lần

 Định kì tiêm phòng 1 năm 2 lần vào tháng 3-4, tháng 10

9- Không nên tiêm VX cho lợn nái trong thai kỳ

 Một số nơi têm vacxin nhập ngoại: VX nhược độc Pestifa,

sử dụng theo hướng dẫn của nhà sản xuất