bài giảng về Rabies virus 2011

Lời cảm ơn Xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Bá Hiên, Trưởng môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y, Đại học Nông nghiệp Hà Nội dày công biên soạn bài giảng này! VIRUS DẠI (Lyssa virus –Rabies virus) I Giới thiệu chung  Sanskrit “rabhas” – tính bạo  Một số tai họa biết đến cổ theo tài liệu Hy Lạp cổ đại 2300 BC Ai cập cổ đại  Democritus 500 BC – Mô tả bệnh dại chó  Celsus mô tả chứng sợ nước 100AD • 1885 Rabies vaccine – Dr Louis Pasteur II Đặc tính sinh học virus dại 2.1 Phân loại, hình thái, cấu trúc: Virus dại thuộc họ Rhabdovirideae, gồm 200 loài gây bệnh cho loài động vật có xương sống không xương sống Loại gây bệnh cho người động vật máu nóng chia làm nhóm: Lyssavirus Vesiculovirus Lyssavirus gồm khoảng 80 loài khác có serotyp: Serotyp 1: VR dại cổ điển, thường thấy ĐV có vú chó, mèo, dơi hút máu Serotyp 2: Lagos bat, có dơi ăn trái châu Phi, mèo Zimbabwe  Serotyp 3: Mokola có chó Zimbabwe  Serotyp 4: Duvenhage có người dơi ăn côn trùng châu Phi Phân loại  Family Rhabdoviridae – ‘bullet’ shaped  Genus Lyssavirus      Rabies Lagos bat strain Mokola Duvenhage EBL-1 (European bat Lyssavirus)  EBL-2  ABLV (Australian bat lyssavirrus) Picture from Centers for Disease Control and Prevention www.cdc.gov/ncidod/dvrd/rabies Hình thái, cấu trúc Kích thước dài 180nm, Ø = 70 - 80nm Bullet Shaped Morphology Helical (xoắn ốc) RNP Core RNA Structure And Organization  Five proteins Envelope M protein G protein RNP core  Ribonucleoprotein (RNP) Core: Cross Sectional  Nucleocapsid protein G protein (N) RNA Envelope  Nucleocapsid (membrane phosphoprotein (NS or bilayer) M protein P) RNP  RNA polymerase (L)  Matrix protein (M) Illustrations from Centers for Disease Control and Prevention www.cdc.gov/ncidod/dvrd/rabies  Glycoprotein (G) Cấu trúc VR dại  Hình thái : Electron Microscope View Negatively Stained Rabies Virus  Virus dại gây bệnh tự nhiên gọi virus dại đường phố (Street virus), chủng cường độc gây bệnh cao cho động vật với thể: dại điên cuồng dại bại liệt  Thời gian nung bệnh: thỏ: 17 ngày, người 20 - 60 ngày ngày  vài năm  Nếu tiếp đời virus dại đường phố nhiều đời qua thỏ (133 đời), tính gây bệnh cho thỏ tăng độc lực virus cố định  Tiêm virus da cho người động vật không gây bệnh mà gây miễn dịch  Người ta gọi chủng virus virus dại cố định (Fixed virus), chủng dùng chế tạo vacxin *Thể Negri : Là dấu hiệu bệnh lý đặc trưng bệnh dại, Negri phát năm 1903 Là hạt nhỏ hình tròn, hình trứng, bầu dục, kích thước 0,5 – 30 mm, định vị bào tương nơron thần kinh, chủ yếu sừng Ammon tế bào tiểu não Bản chất tiểu thể Negri chưa rõ, tập hợp virus biến đổi tế bào nhiễm virus dại Nhuộm tiểu thể phương pháp Giemsa, chúng bắt màu đỏ tươi Thể Negri tìm thấy 80% trường hợp dại III Chẩn đoán bệnh dại 3.1 Chẩn đoán virus học:  Cần thiết làm nguy hiểm cho người xét nghiệm  Khi chó cắn việc nhốt chó lại theo dõi Nếu triệu chứng bệnh rõ không cần chẩn đoán  Chẩn đoán làm nghi ngờ Bệnh phẩm: Não Mổ não, áp kính vào vùng sừng Ammon  nhuộm Giemsa  tìm tiểu thể Negri (tế bào thần kinh màu xanh thẫm, tiểu thể Negri màu đỏ) Tiêm động vật thí nghiệm: dùng thỏ 3.2 Chẩn đoán huyết học: Thường dùng phản ứng miễn dịch huỳnh quang IF (ImmunoFluorescence test): - Direct ImmunoFluorescence (Trực tiếp) - Indirect ImmunoFluorescence (Gián tiếp) Nguyên lý: Chuẩn bị: (DIF) Kháng nguyên nghi: não, nước bọt vật nghi bệnh Dùng phiến kính áp lên não, để khô, cố định cồn tuyệt đối Kháng thể chuẩn: kháng thể dại chế thỏ nhuộm màu huỳnh quang (Izothiocyanat gamaglobulin antirabic) Tiến hành phản ứng : Nhỏ lên tiêu 1-2 giọt kháng thể dại nhuộm màu huỳnh quang để 37oC/30-60ph Rửa lần dung dịch đệm photphat pH = 7,2-7,4, tráng nước cất, làm khô Xem kính hiển vi huỳnh quang Phản ứng dương tính: Vết bôi tiêu phát sáng màu xanh KL: vật bị bệnh Phản ứng âm tính: Không có tượng phát sáng Chẩn đoán bệnh dại IV Phòng trị bệnh dại 4.1 Phòng bệnh : Tiêu diệt chó bị dại Hạn chế nuôi chó, nuôi không thả rông, mang chó đường phải rọ mõm Tiêm phòng triệt chó nuôi vacxin Vacxin chế môi trường tế bào: vacxin Defensor Tiêm bắp liều 1ml/chó, mèo tháng tuổi, sau năm tiêm nhắc lại Liều 2ml/ trâu, bò, cừu,1 năm tiêm nhắc lại 4.2 Điều trị bệnh dại  Với gia súc : Khi bị dại không điều trị phải tiêu diệt Với người: Khi bị chó dại cắn phải : Xử lý vết thương: rửa vết cắn nhiều lần với xà phòng đặc chất tẩy giặt, rượu, cồn, xịt nước phút vào vết cắn Sát trùng vết thương cồn iode, cồn 70 Tiêm kháng huyết dại: Không để muộn 72 h loại chế ngựa tiêm 40UI/1kgP Loại chế từ người tiêm 20 UI/1kgP Tiêm bắp quanh vết cắn Tiêm vacxin: + Vacxin fluenzalida : Chế não chuột nhắt ổ Vô hoạt Beta propriolacton Tiêm da, mũi ,cách ngày tiêm mũi Người lớn liều 0,2ml Trẻ em liều 0,1ml + Vacxin Verorab : Chế tế bào Vero (tế bào thận khỉ) Tiêm mũi vào ngày 0, 3, 7,14, 28 Vaccine dại chế môi trường tế bào  Vắc xin tế bào lưỡng bội người (1963) ( HDV) sản xuất chủng PM, thích nghi tế bào lưỡng bội người WI – 38 Vắc xin sản xuất Mỹ, Pháp Đức Ở Mỹ, người ta bất hoạt virút Tri – n – butylphosphat Vắc xin không sử dụng tính sinh miễn dịch thấp Tại Pháp Đức, vắc xin bất họat β – propiolacton, tinh chế sacharoza gradient ly tâm lạnh nên tính sinh miễn dịch cao Hiện sử dụng rộng rãi nước phát triển  Vắcxin nuôi cấy tế bào lưỡng bội bào thai khỉ (RDRV) Sản xuất từ chủng virút CVS – 11 nuôi cấy tế bào lưỡng bội phổi phôi khỉ, bất họat β – propiolacton, hấp thụ với phosphat nhôm 40C Vắc xin sản xuất Mỹ với số lượng hạn chế Vaccine dại chế môi trường tế bào  Vắc xin tế bào thận chuột đất vàng tiên phát + Ở Canada : Dùng chủng CVS – 11, sản xuất cho tời năm 1981 + Ở Liên Xô cũ: Dùng chủng Vnucovo – 32, vắc xin bất họat tia cực tím, sản xuất sử dụng rộng rãi CHLB Nga + Ở Trung Quốc : Dùng chủng Beijing, bất hoạt Formalin, hấp phụ hydroxit nhôm, vắc xin sử dụng rộng rãi dạng đông khô lỏng cô đặc từ năm 1981  Vắc xin tế bào thận chó tiên phát : Dùng chủng PM gây nhiễm tế bào thận chó, vắc xin bất hoạt β – propiolacton, thêm tá chất nhôm phosphat, vắc xin cô đặc tinh chế, sản xuất Hà Lan với số lượng hạn chế Vaccine dại chế môi trường tế bào  Vắc xin tế bào phôi gà tiên phát (KONDO):Được sản xuất sử dụng Nhật Bản từ 1965, dùng chủng Flury HEP thích nghi CEC, vắc xin bất họat β – propiolacton, cô đặc siêu lọc tinh chế phần siêu ly tâm Vắc xin có tính an tòan tính sinh miễn dịch cao  Vắc xin tế bào thường trực Vero (Verorab): sản xuất Viện Pasteur Merieux ( Pháp) từ năm 1984 Vắc xin sản xuất từ chủng PM thích nghi dòng tế bào thường trực Vero đời truyền 137, vắc xin bất hoạt, cô đặc, tinh chế, đông khô có tính an toàn, sinh miễn dịch cao Bài diễn văn hay thiên niên kỷ  Ông chủ có chó bị người hàng xóm giết chết.Ông ta mời luật sư tiếng kiện kẻ sát cẩu toà.Viên luật sư đọc phát biểu sau trước toà,tờ thời báo Newyork đăng lại cho nói tuyệt hay:  Thưa quý ngài hội thẩm! Người bạn tốt mà người có gian ngày hoá kẻ thù quay chống lại ta Con mà ta nuôi dưỡng với tình yêu thương lũ vô ơn Những người gần gũi , thân thiết với ta nhất,những người ta gửi gắm hạnh phúc danh dự trở thành kẻ phản bội,phụ bạc lòng tin cậy trung thành.Tiền bạc mà người có ,nó vào lúc mà ta cần nố nhất.Tiếng tăm mà người có tiêu tan phút chốc hành động dại giờ.Những kẻ phủ phục tôn vinh takhi ta thành đạt trở thành kẻ ném đá vào ta ta sa  Duy có người bạn hoàn toàn không vụ lợi mà người có đượctrong giới ích kỷ này, người bạn không bỏ rơi ta , không tỏ vô ơn hay tráo trở, chó ta.Con chó ta bên ta phú quý lúc bần hàn,khi khoẻ mạnh lẫn lúc ốm đau Nó ngủ đất lạnh dù gió đông cắt da cắt thịt hay bão tuyết lấp vùi,miễn cận kề bên chủ Bài diễn văn hay thiên niên kỷ  Nó hôn bàn tay ta dù ta không thức ăn cho Nó liếm vết thương ta trầy xước mà ta hứng chịu va chạm với đời tàn bạo Nó canh giấc ngủ cho Ta thể ta ông Hoàngdù ta có gã ăn mày.Dù ta tán gia bại sản, thân tàn danh liệt chó trung thành với tình yêu dành cho ta thái dương bầu trời  Nếu chẳng may mà số phận ném ta rìa xã hội, không bạn bè, vô gia cư chó trung thành xin ta ân huệ cho đồng hành, cho làm kẻ bảo vệ ta trước hiểm nguy,giúp ta chống lại kẻ thù Và trò đời hạ thần chết đến rước linh hồn ta đi, để lại thân xác ta lòng đất lạnh,khi mà tất thân quyến thuộc ddaxphuir tay sau nắm đất cuối quay để sống tiếp đời họ, bên nấm mồ ta chó cao thượng cua ta ,nằm gục mõm hai chân trước,đôi mắt ướt u buồn mở to cảnh giác , trung thành chân thực TA Đã CHếT RồI [...]... phải qua nhiều lần cấy truyền, tác dụng gây huỷ hoại tế bào của virus mới rõ 2.3 Sức đề kháng : Mẫn cảm với sức nóng ở 600C/5-10 phút; 700C chết ngay Nhiệt độ lạnh virus tồn tại khá lâu: 00C/1năm, -700C/nhiều năm Nhạy cảm với tác nhân hoá học, đặc biệt là cồn và các chất hoà tan mỡ Virus được bảo quản tốt trong dung dịch glyxerin 50% Virus bị bất hoạt nhanh bởi ánh sáng mặt trời và tia tử ngoại,... dơi hút máu, dơi ăn quả thường truyền virus  Nhưng mẫn cảm nhất là chó, chó sói, mèo Chó là loài mắc bệnh nhiều nhất  Người mắc bệnh là do chó, mèo cắn (90%), số ít lây qua đường hô hấp do hít phải virus trong không khí ở các hang động có nhiều dơi cư ngụ và một số người mắc dại do ghép phải giác mạc của người bị nhiễm virus dại Truyền lây, sinh bệnh Inoculated virus moves in nerve tissue, not blood...* TIỂU THỂ NEGRI TRONG NÃO CHÓ BỊ BỆNH Hình thái virus dại  2.2 Đặc tính nuôi cấy: Trên phôi gà: Dùng phôi 4- 7 ngày tuổi tiêm vào túi lòng đỏ hoặc phôi 13 ngày tuổi tiêm vào màng nhung niệu Virus nhân lên trong mô thần kinh và các mô khác của phôi Phôi chậm phát triển nhưng không chết, trong tế bào thần kinh có thể tìm... bệnh nhân vẫn tỉnh táo  Thể bại liệt: Gặp ở 20% số bệnh nhân thường liệt, chi, cơ vùng cổ, lưỡi, cơ hô hấp gây sặc rồi chết Trong phòng thí nghiệm: Dùng thỏ, chuột bạch, chuột lang Dùng thỏ: Tiêm virus vào não thỏ, sau 12 – 25 ngày thỏ có triệu chứng:     Co giãn đồng tử mắt Rối loạn hô hấp Liệt 4 chân Vật lả, kiệt sức và chết Khả năng gây bệnh LOÀI DƠI TRUYỀN BỆNH DẠI Ở NAM MỸ Khả năng gây... TRẮNG CHÓ CON BỊ BỆNH DẠI THỂ ẨN: NƯỚC DÃI CHẢY NHIỀU, MÀU TRẮNG, THÍCH TÌM CHỖ TỐI NẰM CHÓ CON BỊ BỆNH DẠI THỂ ẨN: MẶT BUỒN RẦU, MẮT LỜ ĐỜ NHÌN XA XĂM HA  HA III Chẩn đoán bệnh dại 3.1 Chẩn đoán virus học:  Cần thiết lắm mới làm vì nguy hiểm cho người xét nghiệm  Khi chó cắn việc đầu tiên nhốt chó lại theo dõi Nếu triệu chứng của bệnh rõ không cần chẩn đoán  Chẩn đoán chỉ làm khi nghi ngờ Bệnh ... www.cdc.gov/ncidod/dvrd /rabies Glycoprotein (G) Cu trỳc VR di Hỡnh thỏi : Electron Microscope View Negatively Stained Rabies Virus Virus di gõy bnh t nhiờn gi l virus di ng ph (Street virus) , l chng... Nu tip i virus di ng ph nhiu i qua th (133 i), tớnh gõy bnh cho th tng nhng c lc virus c c nh Tiờm virus ny di da cho ngi v ng vt khụng gõy bnh m gõy dch Ngi ta gi chng virus ny l virus di.. .VIRUS DI (Lyssa virus Rabies virus) I Gii thiu chung Sanskrit rabhas tớnh bo Mt s cỏc tai c bit n c nht theo