Hiện trạng sử dụng và sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh
Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Mở Đầu Thuốc trừ sâu sinh học, thuốc trừ sâu vi sinh bao gồm mầm bệnh, ký sinh trùng gây bệnh, cạnh tranh, công sâu hại Thuốc trừ sâu sinh học ức chế phát triển, sinh sản, truyền bệnh… Lịch sử thuốc trừ sâu sinh học chiết xuất thực vật nicotine để trừ bọ mận từ đầu kỷ 17 1956: Needham chứng minh môn Côn trùng học bắt nguồn từ Trung Quốc trồng dâu vào 4700 năm TCN, nuôi tằm 1200TCN, sử dụng thuốc trừ sâu năm 200, sử dụng kiến nghiên cứu sinh thái côn trùng năm 300, nuôi ong năm 400… Carson (1962): cảnh báo mùa xuân yên lặng sử dụng nhiều thuốc BVTV không tiếng chim hót, tiếng ve kêu tiếng côn trùng 1970 giới bắt đầu sử dụng biện pháp IBM 1835, Agostine Bassi tìm nấm bạch cương (Beauveria bassiana) gây bệnh tằm Tuy nhiên loại thuốc trừ sâu sử dụng rộng rãi Bacillus thuringiensis (Bt) 1901, Bt phân lập từ tằm nhà sinh vật học người Nhật Shigetane Ishiwata 10 năm sau, nhà khoa học người Đức Ernst phát BT gây bệnh mọt bột.Chủng e Bt phân loại năm 1911 đặt tên Bacillus thuringiensis Đầu năm 1920, người Pháp bắt đầu dùng Bt để làm thuốc trừ sâu sinh học Sản phẩm thuốc trừ sâu Bt sản xuất Pháp năm 1938 Tại Mỹ, năm 1950, thuốc trừ sâu Bt đưa vào sử dụng Cuối kỷ 20, nghiên cứu sản xuất sử dụng thuốc trừ sâu sinh học diễn tương đối chậm việc phát triển loại thuốc hóa học Trong giai đoạn này, số sản phẩm thuốc trừ sâu phát triển ứng dụng nơi mà thuốc hóa học không hiệu Ví dụ: 1956, Công ty Pacific Yeast Product phát triển dây chuyền lên men chìm Bt để sản xuất với quy mô lớn Năm 1973, Heliothis NPV coi thuốc trừ sâu virus đặt tên Elcar, công nhận năm 1975 Năm 1977, Bacillus thuringiensis var israelensis (trừ ruồi) tìm thấy năm 1983 chủng B tenebrionsis (diệt bọ hung).Năm 1979, US EPA đăng ký thuốc trừ sâu dạng pheromone Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Những sản phẩm thương mại đạt nhiều thành công khoảng năm 1980- 1990 bao gồm sản phẩm chứag Agrobacterium radiobacter, Pseudomonas fluorescencs phòng trừ bệnh cháy Từ năm 1995, có 100 loại thuốc trừ sâu sinh học đăng ký US EPA, có nhiều sản phẩm thương mại hóa Một số loại thuốc trừ sâu vi sinh phát triển năm gần đây: Agrobacterium radiobacter K84 Agrobacterium radiobacter K84 vi khuẩn phát triển đất vùng rễ dùng nhà kính để kiểm soát bệnh sưng rễ Bacillus spp.:Bacillus licheniformis, B pumilus, B subtilis xuất đất, phát triển mạnh thị trường thuốc trừ sâu vi sinh để xử lý hạt giống, bón lá, xử lý đất Coniothyrium minitans loại nấm dùng để kiểm soát bệnh mốc trắng cho Paecilomyces fumosoroseus lilacinus nấm dùng kiểm soát nhiều loại côn trùng nhà kính bướm trắng, nhện, rệp, tuyến trùng nhiều loại thực vật Trichoderma spp phát triển từ năm 1990, dùng để kiểm soát bệnh nhờ kích thích hệ miễn dịch chủ ký sinh nấm hại rễ Beauveria bassiana nấm kiểm soát nhiều loại côn trùng Cydia pomonella granulosis virus (CpGV) virus ký sinh bướm ăn trái, phát triển từ năm 1980 (Nguồn: Đại học Arkansas, Đại học Ohio, U.S EPA) Nội dung 2.1 Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Hiện trạng sử dụng loại thuốc hóa học bảo vệ thực vật Để đáp ứng nhu cầu lương thực, thực phẩm cung cấp cho người ngày tăng, trình sản xuất nông nghiệp ngày phát triển Đồng thời với trình phát triển sản xuất xuất dịch hại nguyên nhân gây bất ổn đến suất chất lượng nông sản, gây thiệt hại tới 20 - 30% sản lượng, cao Để phòng chống dịch hại bảo vệ trồng người sử dụng biện pháp khác nhau: biện pháp thủ công, biện pháp vật lý, biện pháp hoá học, biện pháp sinh học Trong thời gian qua biện pháp hoá học coi biện pháp tích cực cho hiệu cao, nhanh, đơn giản, dễ sử dụng Nhưng biện pháp bộc lộ nhiều tồn Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Trong hệ sinh thái tự nhiên quan hệ đối kháng sinh vật với có tính tự điều chỉnh, nghĩa loài phát triển mức loài khác kìm hãm phát triển loài Sự xuất thuốc trừ sâu hoá học gây nhiều tác động tai hại: + Tác dụng gây độc không phân biệt, gây chết tất sinh vật có hại có lợi môi trường đất + Tác động trước mắt lâu dài người, động vật, môi trường + Hiện tượng kháng thuốc sâu bệnh + Tiêu diệt loài côn trùng có ích + Gây ô nhiễm môi trường, tồn dư lâu dài môi trường đất, nước; Sự đời thuốc trừ sâu sinh học, có thuốc trừ sâu vi sinh hạn chế vấn đề Theo kết nghiên cứu, khối lượng thuốc bảo vệ thực vật sử dụng Việt nam trung bình từ 0,5-1,0 kg /ha/năm, nhiều nơi phát dư lượng thuốc bảo vệ thực vật đất Nhiều trường hợp nông dân sử dụng thuốc danh mục thuốc BVTV phép sử dụng rau theo Quyết định số 19/2005/QĐ-BNN, ngày 24/3/2005 Bộ Trưởng Bộ Nông Nghiệp PTNT Cụ thể: - Về thuốc trừ sâu: sử dụng thuốc trừ sâu gốc lân hữu gốc Carbofuran, Chlorpyrifos Ethyl, Diazinon, Dimethoate, Profenofos, … để xử lý đất, tiêu diệt loại sâu hại khó phòng trị bọ nhảy rau cải, sâu xanh da láng hành lá, sâu đục hoa, đục trái rau ăn quả… - Về thuốc trừ bệnh: sử dụng nhóm thuốc gốc đồng (Cu) copper hydrocide, copper oxychloride, copper sulfate, copper hỗn hợp với gốc khác để phòng trừ bệnh hại cho rau xanh; Theo báo cáo Thanh tra Cục BVTV năm 2010, gần 40% nhãn thuốc BVTV lưu hành có sai phạm việc hướng dẫn sử dụng, không ghi ghi không rõ ràng tên nhà sản xuất, thiếu biểu tượng độc tố Thực kế hoạch tra, kiểm tra đánh giá chất lượng quản lý thuốc BVTV, quan chức thu giữ tổng cộng 1100kg 7500 lít thuốc BVTV vi phạm, số lượng thuốc tồn đọng cần tiêu huỷ gần 55.000kg Thanh tra Cục BVTV cho biết vi phạm việc sử dụng thuốc BVTV không nồng độ lên tới 50%, việc sử dụng thuốc BVTV có thời gian cách ly không đảm bảo chiếm 33% Theo báo cáo điều tra thị trường nhóm nhóm hiệ trạng sử dụng thuốc trừ sâu sinh học : Thuốc trừ sâu vi sinh bà nông dân sử dụng nhiều, đa phần hiểu chưa rõ sản phẩm Do nhiều bà chưa biết sử dụng thuốc cho đúng, nên hiệu thuốc chưa cao Các đại lý bán lẻ nắm chưa vững hiệu quy cách sử dụng sản phẩm để giới thiệu cho khách hàng Loại thuốc sử dụng nhiều : hóa học Thuốc trừ sâu: hóa học, vi sinh Thuốc diệt cỏ: hóa học Thuốc trị nấm: hóa học, vi sinh Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Một số thuốc trừ sâu vi sinh thường dùng: Biotit 32B FC, Lut 5.5 WDP ,Vimetazimm 95 DP, ViS, ViHa, Firibiotox P, Firibiotox C, Ometar, Biovip, TriB1 Đa số loại thuốc trừ sâu sinh học dạng lỏng dạng bột, số dạng cốm Acti No Vate 1SP đươc sử dụng cho dâu tây, bắp cải để trị bệnh phấn trắng, thối nứt trái vi khuẩn, thối thân Thuốc dang bột có thành phần Streptomyces lydicus WYEC108 1% Thuốc trừ sâu Nazomi WDG,… 2.2 - Một số nghiên cứu thuốc trừ sâu vi sinh Nhóm : Sự tăng cường độ độc Cry3Aa Cry3Bb Bacillus Thuringiensis ấu trùng cánh cứng đoạn độc tố kết hợp tác nhân kết dính tế bào côn trùng Các protein côn trùng Cry3Aa Cry3Bb Bacillus thuringiensis sử dụng thuốc trừ sâu sinh học biến đổi gen trồng để kiểm soát ấu trùng bọ cánh cứng ăn sâu đục rễ (rootworms) Các protein côn trùng Cry3Aa Cry3Bb Bacillus thuringiensis sử dụng thuốc trừ sâu sinh học biến đổi gen trồng để kiểm soát ấu trùng bọ cánh cứng ăn sâu đục rễ Tác nhân kết dính tế bào tập trung biểu mô ruột xác định quan thụ cảm độc tố Cry bướm ấu trùng côn trùng hai cánh Trước đây, phát peptide tác nhân kết dính tế bào liên kết độc tố thể chức E.coli chất hỗ trợ cho độc tính Cry1A chống lại ấu trùng bướm độc tính Cry4 chống lại ấu trùng côn trùng hai cánh Ở báo cáo rằng, đoạn có chứa hầu hết tác nhân kết dính tế bào Cterminal lặp lặp lại lần (CR) từ tác nhân kết dính tế bào liên kết độc tố sâu đục rễ ngô miền Tây ( kết hợp độc tố) tăng cường độc tố Cry3 ấu trùng loài dễ bị tổn thương tự nhiên Đoạn tác nhân kết dính tế bào (CR8 đến CR10 [CR8-10]) sâu đục rễ ngô miền Tây Diabrotica virgifera virgifera thể E.coli thể vùi (thể ẩn nhập) Bằng khảo nghiệm vi sinh enzyme liên kết với chất hấp phụ miễn dịch, chứng minh CR8-10 peptide kết hợp với α_Chymotrypsin xử lý độc tố Cry3Aa Cry3Bb với lực cao (11,8 nM 1,4 nM tương ứng) Ấu trùng cánh cứng ăn phải CR8-10 dạng thể vùi làm tăng tính nhạy cảm độc tố Cry3Aa hay Cry3Bb Các hiệu ứng tăng cường độc tố Cry3 CR8-10 chứng minh cho cánh cứng khoai tây Colorado Leptinotarsa decemlineata, sâu hại rễ ngô miền Nam Diabrotica undecimpunctata howardi, sâu hại rễ ngô Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh miền Tây Phạm vi gia tăng độc tố Cry3 dao động từ đến 13 lần, có ứng dụng thực tế để kiểm soát côn trùng Thuốc trừ sâu sinh học chứa Cry3 mà bao gồm đoạn tác nhân kết dính tế bào cho hiệu Và ngô Bt (có nghĩa là, ngô xử lý với B thuringiensis để làm cho có khả kháng sâu bệnh) Cry3Bb CR8-10 đồng biểu tăng mức độ liều lượng hoạt tính độc tố côn trùng, làm giảm nguy kháng thuốc toàn diện Nhóm 4: Thiết kế quy mô sản xuất thuốc trừ sâu sinh học sử dụng bùn nước thải làm nguyên liệu: Các nghiên cứu tiến hành sản xuất thuốc trừ sâu sinh học dựa vào vi khuẩn Bacillus thuringiensis (Bt) để xác định hiệu suất trình lên men bình lắc, hai hình thức lên men tương tự (15 150 lít) sử dụng bùn nước thải làm nguyên liệu Kết cho thấy đạt vận chuyển oxy tốt nồi lên men công suất lớn Số lượng tế bào sống tăng 38-55% lò phản ứng so với bình lắc Số bào tử tăng 25% quan sát thay đổi từ bình lắc để lên men thí nghiệm.Số bào tử đếm không thay đổi quy mô nhỏ (15lít) quy mô thí điểm (5,3-5,5 e+08cfu / ml; 150 lít) Tăng 30% khả nâng cao tính độc sâu thu quy mô thí điểm Hoạt động phân giải protease tăng 2-4 lần quy mô nhỏ quy mô thí điểm, tương ứng, so với hoạt động tối đa đạt bình lắc Các hoạt động protease tối đa (4,1 IU/ml) thu quy mô thí điểm vận chuyển oxy tốt Quá trình lên men Bt sử dụng bùn thải làm nguyên liệu thu nhỏ thành công kết cho hiệu suất cao protein độc tố hoạt động protease Nhóm 5: Sự sản xuất bào tử nấm Beauveria bassiana ( kiểm soát sinh học sâu bướm ) phương pháp lên men xốp packed-bed biorector Bào tử nấm Beauveria bassiana CS -1, có tiềm kiểm soát sâu bướm (Plutella xylostella ) tạo trình lên men xốp (SSF) cách sử dụng packed-bed bioreactor với rơm cám lúa mì Khi mật độ gói chiều cao khối môi trường tăng lên sản xuất bào tử giảm Trong packed-bed Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh biorector hệ thống thông khí không bổ sung bọt polypropylene (PP) ( kiểm soát ) tổng số bào tử nấm trung bình 4.9.10 8g-1 Sự sản xuất bào tử nấm bị ảnh hưởng nhiều việc bổ sung bọt PP hỗ trợ trơ so với thông khí cưỡng xấp xỉ 23 lần kiểm soát Tổng số bào tử nấm trung bình sản xuất B.bassiana 1.1–1.2 1010g-1 Nhóm 6: Ảnh hưởng khí độ ẩm bề mặt hình thành bào tử Metarhizium anisopliae var.acridum Một loạt thí nghiệm thực để thiết lập thông khí tối ưu điều kiện ẩm độ để hình thành bào tử Metarhizium anisopliae IMI330189 trình lên men xốp (SSF) Canh tác thực lò phản ứng cột Các kết luận sau thu từ kết thực nghiệm thực hiện: (1) Sự sục khí bắt buộc quan trọng để hình thành bào tử M anisopliae IMI330189 (không có gia tăng hình thành bào tử đạt với gia tăng thông khí) (2) Sự thay đổi độ ẩm ảnh hưởng đến hình thành bào tử, tối ưu độ ẩm 57-58% (3) Không có tương tác hai yếu tố nghiên cứu theo dõi Nhóm 7: Sự truyền nhiễm rầy mềm có nguồn gốc từ Baculovirus Nghiên cứu chi tiết chép virus thuận lợi cấu trúc toàn chiều gen dòng vô tính virus Đến nay, điều không đạt phần thuộc họ dicistroviridae chứng minh cấu trúc baculovirus thể dicistrovirus bị lây nhiễm chất vật chủ Chúng ta chèn dòng vô tính cDNA RNA virus dicistrovirus lúa Rhopalosiphum (RhPV) vào vector chuyển gen baculovirus Hạt Virus có chứa RNA RhPV tích lũy hạt nhân Baculovirus nhiễm thể tế bào Sf21 RhPV dòng vô tính tái tổ hợp Những hạt bên bị nhiễm virus R lúa, rệp tồn nơi mang theo virus truyền nhiễm chủ yếu ngũ cốc Các virus tái tổ hợp truyền cách hiệu rệp vừng, bất chấp diện 119 210 vector sở trì ổn định 5’ kết thúc đầu 3’, tương ứng gen RhPV Việc sử dụng baculovirus thể virus RNA nhỏ mở đường cho điều tra nhân rộng dicistroviruses cho phép sản xuất quy mô lớn loại virus để sử dụng biopesticides Nhóm 8: Sản xuất hàng loạt Trichoderma harzianum để kiểm soát héo Fusarium chuối Trichoderma spp phân lập từ vùng rễ chuối (Musa sp.) từ khu vực khác Tamil Nadu, Ấn Độ đánh giá theo điều kiện invitro cho tiềm đối kháng chúng Fusarium oxysporum, tác nhân gây bệnh héo Fusarium chuối Trichoderma harzianum Th-10 cô lập có hiệu ức chế tăng trưởng sợi nấm Fusarium ống nghiệm Trong năm chất hữu khác (cám gạo, hạt thóc giống, phân bón đất trồng trọt, pseudostem chuối chuối khô) thử nghiệm, chuối khô vật liệu tốt vận chuyển để hỗ trợ tăng trưởng T harzianum Lọc Th-10 chuối khô vòng vài ngày sản xuất mật độ cao chồi (4,6 × 1032 cfu / g lá) Bổ sung đường nốt (10% w / v) vào chuối khô chất tồn > tháng làm tăng nhân lên T harzianum Khi áp dụng sấy khô, số lượng T harzianum Th-10 tăng 104-1013 cfu / g đất thời hạn 60 ngày Trong hai thử nghiệm, ứng dụng sấy khô đất T harzianum Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Th-10 kiểm soát héo Fusarium có hiệu so với hiệu tương đương với thuốc trừ nấm carbendazim - Xây dụng quy trình sản xuất loại thuốc trừ sâu vi sinh Chế phẩm vi khuẩn trừ sâu Loài vi khuẩn quan tâm nghiên cứu Baccillus thuringiensis Từ loài vi khuẩn này, người ta sản xuất thuốc trừ sâu Bt Vi khuẩn sử dụng để sản xuất chế phẩm trừ sâu vi khuẩn có tinh thể protein độc giai đoạn bào tử Tinh thể protein độc có hình trám hình lập phương Sau nuốt phải bào tử có tinh thể protein độc , thể sâu bọ bị tê liệt bị chết sau đến ngày Có phương pháp sản xuất chế phẩm Bt lên men xốp lên men chìm * Lên men xốp Đâylà công nghệ sử dụng hiệu thấp trình sản xuất hay gặp nhiễm tạp Trong công nghệ cần sử dụng hạt rắn với yêu cầu không hấp thu dinh dưỡng Người ta sử dụng loại hạt làm nguồn dinh dưỡng cho vi khuẩn cám lúa mì, bột ngô… b/ Lên men chìm Hiệu cao sản xuất lượng sinh khối lớn theo yêu cầu Các yếu tố quan trọng công nghệ bao gồm: Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh - Chọn lọc chủng Bt chuẩn có protein độc tố đặc chủng có hoạt tính cao để nhân, vào týp huyết - Chọn môi trường phù hợp để tạo nhiều bào tử tinh thể độc để giảm giá thành, người ta thường sử dụng phế phẩm nông nghiệp, công nghiệp chế biến Việc nghiên cứu phù hợp môi trường lên men với chủng vi khuẩn Thành phần môi trường lên men số nước trình bày bảng 6.2 Bảng 6.2 Thành phần môi trường lên men sử dụng để sản xuất Bt số nước (dẫn theo Phạm Thị Thùy, 2004) Ở Việt Nam sản xuất Bt thực số sở Viện Công nghiệp thực phẩm … từ năm 1989-1996 theo phương pháp lên men chìm, phần lớn chủng sản xuất từ nước (Phạm Thị Thùy, 2004) Trong trình sản xuất, việc chọn chủng có độc tính cao, khả tạo sinh khối lớn, yếu tố sau cân có quan tâm thích đáng: - Chế độ thông gió: 0,5-0,6 m3 môi trường/1 m3 không khí - Nhiệt độ: 29-300C - Tránh thóai hóa giống: Sau lên men 10-15 lần, cần thay chủng Bt đảm bảo chất lượng - Chú ý tránh nhiễm thực khuẩn thể - Đánh giá kết thông qua: + Mật độ bào tử, số lượng tinh thể độc δ endotoxin biểu thị đơn vị quốc tế (IU) theo tiêu chuẩn E-61 Viện Pasteur (Pháp), đạt 16000 IU 32000 IU, Tiêu chuẩn Việt Nam 3-10 tỉ bào tử/1 gam chế phẩm; + Chất khô 7-10% + pH 7-7,5 + Hiệu lực diệt sâu 70-90% sau ngày + Bảo quản 12 tháng Đối với dạng lỏng: kết thúc trình lên men, đem hỗn hợp với chất phụ gia, chất bám dính, chất chống thối để tạo chế phẩm Chế phẩm sau tách có độ ẩm 85% hiệu suất 100 kg/m3 dịch nuôi cấy với lượng bào tử 20.109/g Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Đối với dạng khô: sản phẩm tách nhờ máy ly tâm, làm khô đông lạnh xay khô máy sấy phun ly tâm sau trộn với phụ gia bột, lactoza, cao lanh… Khi đóng gói, hàm lượng chất khô tiêu chuẩn đạt 7-10% Kết luận Để hạn chế tác hại sâu bệnh, bảo vệ môi trường sức khoẻ người, thuốc trừ sâu sinh học coi biện pháp đầy tính khả thi Đây thành phần thiếu hệ thống IPM Việc ứng dụng thành tựu đã, vấn đề đáng ý nông nghiệp Việt Nam Giải pháp tích cực cho nông nghiệp Trong sản xuất nông nghiệp, loại sâu bệnh gây tác hại nghiêm trọng suất chất lượng nông sản Để bảo vệ mùa màng, người nông dân sử dụng thuốc hoá học (thuốc trừ sâu - TTS) có độ độc cao để phun phòng ngừa Bảo vệ môi trường sinh thái, bảo vệ sức khoẻ người, nâng cao sản lượng chất lượng nông sản - đòi hỏi nông nghiệp TTSSH đời biện pháp hữu hiệu đáp ứng yêu cầu nói Tài liệu tham khảo ThS : Hoàng Thị Tố Loan, Bài giảng tóm tắt thuốc trừ sâu vi sinh Nhóm : Abbott, W S 1925 A method of computing the effectiveness of an insecticide J Econ Entomol 18:265–267 Belfiore, C J., R K Vadlamudi, Y A Osman, and L A Bulla, Jr 1994 A specific binding protein from Tenebrio molitor for the insecticidal toxin of Bacillus thuringiensis subsp tenebrionis Biochem Biophys Res Commun 200:359–364 Bradford, M 1976 A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding Anal Biochem 72:248–254 Brownbridge, M., and J Margalit 1986 New Bacillus thuringiensis strains isolated in Israel are highly toxic to mosquito larvae J Invertebr Pathol 48:216–222 Nhóm 4: Abdel-Hameed A (2001) khuấy bể văn hóa vi khuẩn Bacillus thuringiensis 14-H cho sản xuất mosquitocidal toán học nghiên cứu nhân rộng -Nội độc tố: mô hình J giới Microbiol Biotechnol 17:857-861 Aiba S, Humphrey AE, Millis NF (1973) Sinh học kỹ thuật, tái lần Học tập, New York Anwar A, Saleemuddin M (1997) Alkaline proteases: xem xét lại Bioresour Page Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Technol 64:175-183 APHA, AWWA, WPCF (1989) tiêu chuẩn phương pháp để kiểm tra vùng nước nước thải, tái lần 17 Hiệp hội Y tế công cộng Mỹ, Washington DC Aronson Một hình thành bào tử (2002) Bacillus thuringiensis -Nội độc tố tổng hợp vi khuẩn Cell Mol Cuộc sống Khoa học 59:417-425 Avignone-Rossa C, Arcas J, Mignone C (1992) Bacillus thuringiensis, hình thành bào tử -Nội độc tố sản xuất văn hóa oxy hạn chế không hạn chế J giới Microbiol Biotechnol 8:301-304 Beegle CC (1990) BioAssay phương pháp định lượng vi khuẩn Bacillus thuringiensis -Nội độc tố Trong: Hickle LA, Fitch WL (biên soạn) phân tích hóa học vi khuẩn Bacillus thuringiensis Hội Hóa học Mỹ, Washington DC, trang 14-21 Braun S (2000) sinh trắc nghiệm Bacillus thuringiensis, 1D Trong: Navon A, Ascher KRS (biên soạn) Sản xuất thuốc trừ sâu Bacillus thuringiensis để sử dụng thử nghiệm Các sinh trắc nghiệm vi khuẩn entomopathogenic tuyến trùng CAB International, Wallingford, Anh, trang 49-72 Chang SW (1993) nghiên cứu điều kiện tăng trưởng ước tính tỷ lệ hấp thu dưỡng khí cho vi khuẩn Bacillus thuringiensis Luận văn, Đại học Illinois, p 95 Chu IM, Lee C, Li TS (1992) Sản xuất suy thoái protease kiềm 10 văn hóa hàng loạt subtilus Bacillus ATCC 14416 Enzyme Microb Technol 14:755-761 Page 10 Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Doran PM (1995) Xử Lý Sinh nguyên tắc kỹ thuật Học tập, San Diego 11 Flores EA, Perez F, De La Torre M (1997) Quy mô-up lên men vi khuẩn 12 Bacillus thuringiensis dựa chuyển oxy J men Bioeng 83:561-564 YL Hsu, Ngô WT (2002) Một phương pháp cho hệ thống rộng một-up lên 13 men Biochem Eng J 11:123-130 Humphrey A (1998) Lắc bình để lên men: có học? 14 Biotechnol Prog 14:3-7 Jin B, Leeuwen J, Doelle HW, Yu Q (1999) Sự ảnh hưởng hình học 15 đặc điểm thủy động lực khối lượng chuyển nhượng lò phản ứng không vận bên cho việc trồng nấm sợi J giới Microbiol Biotechnol 15:73-79 Ju LK, Chase GG (1992) chiến lược mở rộng quy mô cải tiến phản ứng 16 sinh học Xử Lý Sinh Eng 8:49-53 Juarez P, Orejas J (2001) chuyển oxy khuấy động lò phản ứng 17 quy mô phòng thí nghiệm Am Latin Res Appl 31:433-439 Kumar CG, Takagi H (1999) protease kiềm vi sinh vật: từ quan điểm 18 bioindustrial Biotechnol ADV 17:561-594 Kunitz M (1947) chất ức chế trypsin đậu nành tinh thể J tướng Physiol 19 30:291-310 Lachhab K, Tyagi RD, Valero JR (2001) Sản xuất biopesticides Bacillus 20 thuringiensis sử dụng bùn thải làm nguyên liệu: ảnh hưởng nồng độ chất rắn bùn truyền chất độc Quy trình Biochem 37:197-208 Page 11 Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Liu CM, Tzeng YM (2000) Mô tả đặc tính nghiên cứu động học hình thành 21 bào tử vi khuẩn Bacillus thuringiensis Biotechnol Bioeng 68:11-17 Meunier N (1999) đánh giá du potentiel de sản de protease bactériennes 22 partir de boues d épuration municipales Luận văn thạc sĩ, INRS-Eau, Université du Québec Parakulsuksatid P (2000) Sử dụng phân tán microbubble để tăng chuyển oxy 23 bánh quy mô thí điểm lên men nấm men đơn vị Luận văn thạc sĩ, Đại học Virginia Rowe GE, Margaritis A, Wei N (2003) biến thể cụ thể tỷ lệ hấp thu oxy 24 trình lên men phân loài vi khuẩn Bacillus thuringiensis kurstaki HD Biotechnol Prog 19:1439-1443 Sachdeva V, Tyagi RD, Valero JR (2000) Sản xuất biopesticides 25 phương pháp việc sử dụng bùn thải / xử lý Khoa học nước Technol 42:211-216 Sachidanadham R, Kumar IA, Krishnan MR, Jayaraman K (1999) Mô hình 26 toán học dựa dự toán hệ số chuyển oxy thể tích sản xuất enzyme phân giải protein Bacillus amyloliquefaciens Xử Lý Sinh Eng 2:319-322 Schell DJ, nông dân J, Hamilton J, Lyons B, McMillan JD, Saez JC, Tholudur 27 A (2001) Ảnh hưởng điều kiện hoạt động kích thước tàu chuyển oxy trình sản xuất cellulase Appl Biochem Biotechnol 91:627-642 Tirado-Montiel ML, Tyagi RD, Valero JR (2001) xử lý nước thải bùn 28 nguyên liệu để sản xuất vi khuẩn Bacillus thuringiensis biopesticides dựa Res nước 35:3807-3816 Tirado-Montiel ML, Tyagi RD, Valero JR, Surampalli RY (2003) Page 12 Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh 29 biopesticides sản xuất cách sử dụng bùn thải làm nguyên liệu: tác động trình tham số Khoa học nước Technol 48:239-246 Tyagi RD, Foko VS, Barnabe S, Vidyarthi AS, Valero JR (2002) đồng thời 30 sản xuất, kiềm protease Bacillus thuringiensis biopesticide sử dụng bùn thải làm nguyên liệu thô Khoa học nước Technol 46:247-254 Vidyarthi AS, Desrosiers M, Tyagi RD, Valero JR (2000) Foam kiểm soát 31 sản xuất biopesticide từ bùn cống J Ind Biotechnol Microbiol 25:86-92 Vidyarthi AS, Tyagi RD, Valero JR (2001) Ảnh hưởng chất hoạt động bề 32 mặt sản xuất cách sử dụng bùn thải biopesticides nguyên liệu thô Khoa học nước Technol 44:253-260 Vidyarthi AS, Tyagi RD, Valero JR, Surampalli RY (2002) nghiên cứu vi 33 khuẩn Bacillus thuringiensis sản xuất dựa biopesticides sử dụng bùn thải làm nguyên liệu Res nước 36:4850-4860 Yamamoto T (1982) Xác định chất độc entomocidal Bacillus 34 thuringiensis sắc ký lỏng hiệu cao J tướng Microbiol 129:2595-2603 XM Yang, Wang SS (1998) phát triển trình lên men Bacillus 35 thuringiensis kiểm soát trình từ quan điểm thực tế Biotechnol Appl Biochem 28:95-98 Zouari N, Jaoua S (1999) Sản xuất đặc tính metalloproteases tổng hợp 36 dùng đồng thời với nội độc tố-d Bacillus thuringiensis subsp Kurstaki giống trồng dựa phương tiện truyền thông cháo Enzyme vi sinh vật Technol 25:364-371 Nhóm 5: Fernandez S, Groden E, Vandenberg JD, Furlong MJ (2001) The effect of mode of exposure to Beauveria bassiana on conidia acquisition and host mortality of Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata J Invertebr Pathol 77: 217–226 Gowthaman MK, Raghavarao KSMS, Ghildyal NP, Karanth NG (1993) Gas concentration and temperature gradients in a packed bed solid-state fermentor Biotech Adv 11: 611–620 Harris RS, Harcourt SJ, Glare TR, Rose EA, Nelson TJ (2000) Susceptibility of Vespula vulgaris (Hymenoptera: Vespidae) to generalist entomopathogenic fungi and their potential for wasp control J Invertebr Pathol 75: 251–258 Lee JO, Yoon CS, Yoo JK, Lee YW, Lee SG, Moon KH, Sung GH (1997) Beauveria bassiana strain CS-1 isolated from domestic silkworm larvae and its utilization for DBM larvae control Republic of Korea Patent 51035 Mannion CM, McLane W, Klein MG, Moyseenko J, Oliver JB, Page 13 Hiện trạng sử dụng sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Cowan D (2001) Management of early-instar Japanese beetle (Coleoptera: Searabaeidae) in field-grown nursery crops J Econ Entomol 94: 1151–1161 Nhóm 6: Page 14 [...]... 28 nguyên liệu để sản xuất vi khuẩn Bacillus thuringiensis biopesticides dựa Res nước 35:3807-3816 Tirado-Montiel ML, Tyagi RD, Valero JR, Surampalli RY (2003) Page 12 Hiện trạng sử dụng và sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh 29 biopesticides sản xuất bằng cách sử dụng bùn thải làm nguyên liệu: tác động của quá trình tham số Khoa học nước Technol 48:239-246 Tyagi RD, Foko VS, Barnabe S, Vidyarthi AS, Valero... vi sinh vật: từ một quan điểm 18 bioindustrial Biotechnol ADV 17:561-594 Kunitz M (1947) chất ức chế trypsin đậu nành tinh thể J tướng Physiol 19 30:291-310 Lachhab K, Tyagi RD, Valero JR (2001) Sản xuất biopesticides Bacillus 20 thuringiensis sử dụng bùn thải làm nguyên liệu: ảnh hưởng của nồng độ chất rắn bùn và truyền chất độc Quy trình Biochem 37:197-208 Page 11 Hiện trạng sử dụng và sản xuất thuốc. . .Hiện trạng sử dụng và sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Doran PM (1995) Xử Lý Sinh nguyên tắc kỹ thuật Học tập, San Diego 11 Flores EA, Perez F, De La Torre M (1997) Quy mô-up lên men vi khuẩn 12 Bacillus thuringiensis dựa trên chuyển oxy J men Bioeng 83:561-564 YL Hsu, Ngô WT (2002) Một phương... thời 30 sản xuất, kiềm protease do Bacillus thuringiensis biopesticide sử dụng bùn thải làm nguyên liệu thô Khoa học nước Technol 46:247-254 Vidyarthi AS, Desrosiers M, Tyagi RD, Valero JR (2000) Foam kiểm soát 31 trong sản xuất biopesticide từ bùn cống J Ind Biotechnol Microbiol 25:86-92 Vidyarthi AS, Tyagi RD, Valero JR (2001) Ảnh hưởng của chất hoạt động bề 32 mặt về sản xuất bằng cách sử dụng bùn... isolated from domestic silkworm larvae and its utilization for DBM larvae control Republic of Korea Patent 51035 Mannion CM, McLane W, Klein MG, Moyseenko J, Oliver JB, Page 13 Hiện trạng sử dụng và sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Cowan D (2001) Management of early-instar Japanese beetle (Coleoptera: Searabaeidae) in field-grown nursery crops J Econ Entomol 94: 1151–1161 Nhóm 6: Page 14 ... dụng và sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Liu CM, Tzeng YM (2000) Mô tả đặc tính nghiên cứu về động học hình thành 21 bào tử của vi khuẩn Bacillus thuringiensis Biotechnol Bioeng 68:11-17 Meunier N (1999) đánh giá du potentiel de sản de protease bactériennes à 22 partir de boues d épuration municipales Luận văn thạc sĩ, INRS-Eau, Université du Québec Parakulsuksatid P (2000) Sử dụng phân tán microbubble... lên men của nấm men đơn vị Luận văn thạc sĩ, Đại học Virginia Rowe GE, Margaritis A, Wei N (2003) các biến thể cụ thể tỷ lệ hấp thu oxy 24 trong quá trình lên men của phân loài vi khuẩn Bacillus thuringiensis kurstaki HD Biotechnol Prog 19:1439-1443 Sachdeva V, Tyagi RD, Valero JR (2000) Sản xuất biopesticides như là một 25 phương pháp mới của vi c sử dụng bùn thải / xử lý Khoa học nước Technol 42:211-216... chất hoạt động bề 32 mặt về sản xuất bằng cách sử dụng bùn thải biopesticides như một nguyên liệu thô Khoa học nước Technol 44:253-260 Vidyarthi AS, Tyagi RD, Valero JR, Surampalli RY (2002) nghiên cứu về vi 33 khuẩn Bacillus thuringiensis sản xuất dựa biopesticides sử dụng bùn thải làm nguyên liệu Res nước 36:4850-4860 Yamamoto T (1982) Xác định các chất độc entomocidal của Bacillus 34 thuringiensis... triển của quá trình lên men Bacillus 35 thuringiensis và kiểm soát quá trình từ một quan điểm thực tế Biotechnol Appl Biochem 28:95-98 Zouari N, Jaoua S (1999) Sản xuất và đặc tính của metalloproteases tổng hợp 36 dùng đồng thời với nội độc tố-d của Bacillus thuringiensis subsp Kurstaki giống trồng trên dựa trên phương tiện truyền thông cháo Enzyme vi sinh vật Technol 25:364-371 Nhóm 5: Fernandez S, Groden... hình 26 toán học dựa trên dự toán của hệ số chuyển oxy thể tích trong sản xuất các enzyme phân giải protein trong Bacillus amyloliquefaciens Xử Lý Sinh Eng 2:319-322 Schell DJ, nông dân J, Hamilton J, Lyons B, McMillan JD, Saez JC, Tholudur 27 A (2001) Ảnh hưởng của điều kiện hoạt động và kích thước tàu chuyển oxy trong quá trình sản xuất cellulase Appl Biochem Biotechnol 91:627-642 Tirado-Montiel ML, ... trình sản xuất loại thuốc trừ sâu vi sinh Chế phẩm vi khuẩn trừ sâu Loài vi khuẩn quan tâm nghiên cứu Baccillus thuringiensis Từ loài vi khuẩn này, người ta sản xuất thuốc trừ sâu Bt Vi khuẩn sử dụng. .. cách sử dụng sản phẩm để giới thiệu cho khách hàng Loại thuốc sử dụng nhiều : hóa học Thuốc trừ sâu: hóa học, vi sinh Thuốc diệt cỏ: hóa học Thuốc trị nấm: hóa học, vi sinh Page Hiện trạng sử dụng. .. nhóm hiệ trạng sử dụng thuốc trừ sâu sinh học : Thuốc trừ sâu vi sinh bà nông dân sử dụng nhiều, đa phần hiểu chưa rõ sản phẩm Do nhiều bà chưa biết sử dụng thuốc cho đúng, nên hiệu thuốc chưa