VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ THỰC PHẨM Môn: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ THỰC PHẨM Môn: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT ỨNG DỤNG KỸ THUẬT CHUYỂN GEN TRONG SẢN XUẤ
Trang 1VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ THỰC PHẨM
Môn: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT
VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ THỰC PHẨM
Môn: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT
ỨNG DỤNG KỸ
THUẬT CHUYỂN GEN
TRONG SẢN XUẤT
HOA HỒNG XANH
GVHD: Ths Nguyễn Trung Hậu
Trang 2 LÊ THỊ YẾN PHƯỢNG 10079391
DANH SÁCH NHÓM
Trang 3Phương pháp truyền
thống
Phương pháp truyền
thống
Kỹ thuật chuyển gen
Trang 4Năm 1984 nhiều cây trồng chuyển gene ra
đời
Trang 5Các gen được chuyển là gen kháng vi sinh vật, virus gây bệnh, kháng côn trùng phá hại, gen
có khả năng sản xuất những loại protein mới, gen chịu hạn, gen kháng thuốc diệt cỏ
Các gen được chuyển là gen kháng vi sinh vật, virus gây bệnh, kháng côn trùng phá hại, gen
có khả năng sản xuất những loại protein mới, gen chịu hạn, gen kháng thuốc diệt cỏ
Phương pháp hữu hiệu này cho phép các nhà tạo giống thực vật thu được giống mới nhanh hơn và vượt qua những giới hạn của kỹ thuật tạo giống truyền thống
Phương pháp hữu hiệu này cho phép các nhà tạo giống thực vật thu được giống mới nhanh hơn và vượt qua những giới hạn của kỹ thuật tạo giống truyền thống
Ứng dụng cây chuyển gen đã có
những lợi ích rõ rệt như sau:
- Tăng sản lượng
- Giảm chi phí sản xuất
- Tăng lợi nhuận nông nghiêp
- Cải thiện môi trường
Ứng dụng cây chuyển gen đã có
những lợi ích rõ rệt như sau:
- Tăng sản lượng
- Giảm chi phí sản xuất
- Tăng lợi nhuận nông nghiêp
- Cải thiện môi trường
Trang 6II Tổng quan tài liệu
Cây hoa Hồng có xuất xứ từ Trung Quốc, Ấn Độ, sau đó mới
du nhập qua Hà Lan, Pháp, Đức, Bungari, Châu Âu Hoa hồng du nhập vào Việt Nam từ Châu Âu
và từ Trung Quốc.
Cây hoa Hồng có xuất xứ từ Trung Quốc, Ấn Độ, sau đó mới
du nhập qua Hà Lan, Pháp, Đức, Bungari, Châu Âu Hoa hồng du nhập vào Việt Nam từ Châu Âu
và từ Trung Quốc.
Trang 7Đặc điểm thực vật học
Quả
Rễ
Thân
Hoa
Lá
Yêu cầu điều kiện ngoại cảnh
Nhiệt độ
Độ ẩm
Trang 8Kỹ thuật trồng và chăm sóc
Kỹ thuật trồng và chăm sóc
Thu hoạch và bảo
quản hoa
Thu hoạch và bảo
quản hoa
Phòng trừ sâu
bệnh
Phòng trừ sâu
bệnh
Các giống trồng
hiện nay
Các giống trồng
hiện nay
Trang 9Công nghi p m ệ ĩ
ph mẩ
Phòng
b nhệ
Thu cố
Th m mẩ ĩ
III ng d ng Ứ ụ
Trang 10IV PH ƯƠ NG PHÁP TH C HI N: Ự Ệ
1 Các nguyên t c sinh h c ắ ọ
c a k thu t chuy n genủ ỹ ậ ể
1 Các nguyên t c sinh h c ắ ọ
c a k thu t chuy n genủ ỹ ậ ể
Các cây khác nhau có ph n ng không ả ứ
gi ng nhau v i s xâm nh p cu m t ố ớ ự ậ ả ộ
gen ngo i laiạ
Các cây khác nhau có ph n ng không ả ứ
gi ng nhau v i s xâm nh p cu m t ố ớ ự ậ ả ộ
gen ngo i laiạ
Không ph i toàn b t ả ộ ế
bào đ u th hi n tính ề ể ệ
toàn năng (topipotency)
Không ph i toàn b t ả ộ ế
bào đ u th hi n tính ề ể ệ
toàn năng (topipotency)
Cây bi n n p ch có th tái sinh t ế ạ ỉ ể ừ
các t bào có kh năng tái sinh và kh ế ả ả
năng thu nh n gen bi n n p vào ậ ế ạ
genonme.
Cây bi n n p ch có th tái sinh t ế ạ ỉ ể ừ
các t bào có kh năng tái sinh và kh ế ả ả
năng thu nh n gen bi n n p vào ậ ế ạ
genonme.
Cây bi n n p ch có th tái sinh t ế ạ ỉ ể ừ
các t bào có kh năng tái sinh và kh ế ả ả
năng thu nh n gen bi n n p vào ậ ế ạ
genonme.
Cây bi n n p ch có th tái sinh t ế ạ ỉ ể ừ
các t bào có kh năng tái sinh và kh ế ả ả
năng thu nh n gen bi n n p vào ậ ế ạ
genonme.
Trang 112 Các bước trong k thu t chuy n genỹ ậ ể
2 Các bước trong k thu t chuy n genỹ ậ ể
Xác định gen liên quan đến tính trạng cần quan tâm
Xác định gen liên quan đến tính trạng cần quan tâm
Phân lập gen
Phân lập gen
Gắn gen vào vector biểu hiện (exprssion vector) để
biến nạp
Gắn gen vào vector biểu hiện (exprssion vector) để
biến nạp
Biến nạp vào E coli
Biến nạp vào E coli
Tách chiết DNA plasmid
Tách chiết DNA plasmid
Biến nạp vào mô hoặc tế bào thực vật
Chọn lọc các thể biến nạp trên môi trường chọn
lọc
Chọn lọc các thể biến nạp trên môi trường chọn
lọc
Tái sinh cây biến nạp
Tái sinh cây biến nạp
Phân tích để xác nhận cá thể chuyển gen và đánh
giá mức độ biểu hiện của chúng
Phân tích để xác nhận cá thể chuyển gen và đánh
giá mức độ biểu hiện của chúng
Trang 13
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
Tìm hi u và xác đ nh y u t t o màu s c hoa h ngể ị ế ố ạ ắ ở ồ :
Tìm hi u và xác đ nh y u t t o màu s c hoa h ngể ị ế ố ạ ắ ở ồ :
• Yếu tố tạo ra màu xanh trên hoa hồng chính là gen delphinidin đã clone từ loài hoa păng-xê (Viola x wittrockiana) để tổng hợp trực tiếp màu xanh trên cây hoa hồng
• Yếu tố vai mượn chính là gen iris nhằm tạo ra enzyme DFR
• Gen này được tạo ra bởi nhóm các nhà di truyền học của công ty Suntory bằng một kỹ thuật mới là RNA interference, viết tắt là RNAi
• Enzyme chi phối cho cả 3 chu trình hình thành sắc tố trên cây trồng bao gồm: cyanidin,
pelargonidin và delphinidin.
Trang 14Khái ni m và vai trò c a RNAi trong t bàoệ ủ ế
Khái ni m và vai trò c a RNAi trong t bàoệ ủ ế
Các phân tử RNAi này có thể gây nên các hiệu ứng:
•Ức chế dịch mã đơn vị mRNA
•Ức chế sự phiên mã của gene ở trong nhân
•Phân giải mRNA
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
Khái niệm:
“RNA can thiệp” (RNAi) là một hệ thống bên trong các tế bào sống, giúp kiểm soát được các gene đang hoạt động
Trang 15Vai trò RNAi:
-Bảo vệ tế bào chống lại gene ký sinh trùng, virut và các yếu tố di truyền vận động (Transposon).
-Điều hoà biểu hiện gene.
-Điều khiển sự phát triển của tổ chức.
-Giữ gìn NST và tăng cường phiên mã.
Vai trò RNAi:
-Bảo vệ tế bào chống lại gene ký sinh trùng, virut và các yếu tố di truyền vận động (Transposon).
-Điều hoà biểu hiện gene.
-Điều khiển sự phát triển của tổ chức.
-Giữ gìn NST và tăng cường phiên mã.
Khái ni m và vai trò c a RNAi trong t bàoệ ủ ế
Khái ni m và vai trò c a RNAi trong t bàoệ ủ ế
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
Trang 16Dùng một loại
bông hồng
trắng trong đó
gene DFR đã bị
bất hoạt.
Dùng một loại
bông hồng
trắng trong đó
gene DFR đã bị
bất hoạt.
Sử dụng kỹ thuật RNAi nhằm ức chế chu trình cyanidin
Sử dụng kỹ thuật RNAi nhằm ức chế chu trình cyanidin
Sau đó chuyển gen delphinidin với một gen DFR hoàn toàn mới nhằm hoàn chỉnh chu trình tổng hợp delphinidin trong hoa
hồng
Sau đó chuyển gen delphinidin với một gen DFR hoàn toàn mới nhằm hoàn chỉnh chu trình tổng hợp delphinidin trong hoa
hồng
Hoa hồng không
có gen delphinidin để hình thành màu theo chu trình của n ó
Hoa hồng không
có gen delphinidin để hình thành màu theo chu trình của n ó
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
Các nhà nghiên cứu Florigene
Trang 17Bước 1 :T o m t gen nhân ạ ộ
t o đ ạ ượ c dùng cho k thu t ỹ ậ
RNAi nh m c ch gen DFR ằ ứ ế
c a hoa h ng làm cho hoa ủ ồ
h ng không bi u hi n màu ồ ể ệ
Bước 2 : chuy n gen ể delphinidin t loài hoa păng-xê ừ
và gen DFR t loài hoa iris s ừ ẽ
t o ra hoa h ng có hàm l ạ ồ ượ ng delphinidin r t cao trong cánh ấ hoa
Bước 3 : đi u ch nh đ pH ề ỉ ộ
t bào, pH t bào mang tính ế ế
ki m thì s c t c a ề ắ ố ủ anthocyanin th ườ ng tr nên ở xanh h n N ng đ pH t ơ ồ ộ ế bào cánh hoa th ườ ng mang tính di truy n ề
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
Công ty Suntory
Trang 183 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
3 T o hoa h ng xanh b ng k thu t RNAiạ ồ ằ ỹ ậ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
K thu t tao hoa h ng xanhĩ ậ ồ
Quy trình hình thành bông h ng xanh v i s h tr c a k thu t RNAi ồ ớ ự ỗ ợ ủ ỹ ậ
Trang 19V K T LU N Ế Ậ
Trang 20Thank for listening