BÀI GIẢNG VI SINH Y HỌC PGS.TS. Lê Hồng Hinh
ĐAI CƯƠNG VIRUS
Định nghĩa: - Đơn vị sinh học - Biệu thi những tính chất cơ bản của sự sống trong tế bào - Có đủ những điều kiện cần thiết cho sự nhân lên
Những đặc điểm sinh học cơ bản của virus 1. Hình thể và kích thước Đa dạng: Cầu,que, sợi, khối, chuỳ. Rất bé nhỏ (nm)
2. Cấu trúc 2.1. Cấu trúc cơ bản: gồm 2 thành phần: 2.1.1. Acid nucleic (AN): ADN hoặc ARN Chức năng: - Mang mọi mật mã di truyền của virus - Quyết định khả năng gây nhiễm trong tế bào - Quyết định chu kỳ nhân lên của virus - Mang tính bán kháng nguyên đặc hiệu của virus
2.1.2. Capsid Bao quanh AN, bản chất là protein Tạo bởi nhiều đơn vị cấu trúc – capsomer Capsomer luôn sắp xếp trật tự, đối xứng. Căn cứ vào sự đối xứng có thể chia thành 2 loại: - Đối xứng hình khối - Đối xứng hình xoắn Ngoài ra còn có cấu trúc hỗn hợp có ở Phage
Cấu trúc đối xứng hình khối
Cấu trúc đối xứng hình xoắn
Cấu trúc đối xứng hình xoắn
Chức năng của capsid: - Bảo vệ cho AN không bị enzym nuclease và các yếu tố khác phá huỷ. - Tham gia vào sự bám của virus lên tế bào. - Mang tính kháng nguyên đặc hiệu của virus. - Ổn định được hình thái của virus.
2.2. Cấu trúc riêng Chỉ có ở một số loài virus - Bao ngoài ( envelop ) Bao phủ ngoài capsid Bản chất là phức hợp lipoprotein hoặc glycoprotein - Ngưng kết tố hồng cầu (hemagglutinin) - Enzym sao chép ngược (Reverse transcriptase)
Cấu trúc hình khối Không bao ngoài Có bao ngoài
Cấu trúc hình xoắn Không bao ngoài Có bao ngoài
Virus không có enzym chuyển hoá và hô hấp nên: - Phải ký sinh tuyệt đối vào tế bào cảm thụ để phát triển và nhân lên. - Kháng sinh không có tác dụng với virus
Sự nhân lên của virus trong tế bào cảm thụ 1. Định nghĩa: Sự nhân lên của virus là quá trình nhân lên trong tế bào cảm thụ, xuất hiện nhiều virus mới có đầy đủ tính chất như virus ban đầu.
2. Các giai đoạn nhân lên 2.1. Hấp phụ của virus lên bề mặt tế bào Nhờ các thụ thể (receptor) đặc hiệu trên bề mặt tế bào và cấu trúc bề mặt virus. 2.2. Xâm nhập vào bên trong tế bào - Theo cơ chế ẩm bào - Bơm acid nucleic vào tế bào
3. Tổng hợp các thành phần cấu trúc AN của virus điều khiển mọi hoạt động của tế bào, bắt TB tổng hợp nên AN và capsid (protein) của virus. 4. Lắp ráp Nhờ enzym cấu trúc của virus => virus mới
5. Giải phóng virus ra khỏi TB - Phá vỡ TB - Nảy chồi
Hậu quả của sự tương tác virus và tế bào 1. Huỷ hoại tế bào Cytopathic effect: CPE 2. Làm sai lạc nhiễm sắc thể của tế bào: - Dị tật bẩm sinh, thai chết lưu - Sinh khối u 3. Tạo hạt virus không hoàn chỉnh Hạt virus không có AN chỉ có capsid > hạt DIP: Defective interfering particle
4. Tạo ra tiểu thể nội bào ( Negri ) Các hạt nhỏ trong tế bào 5. Chuyển thể tế bào (transformation) Do gen của virus tích hợp vào gen của TB làm TB xuất hiện các tính trạng mới. 6. Biến tế bào thành tế bào tiềm tan Gen của virus ôn hoà trở thành virus độc lực gây ly giải tế bào 7. Tạo interferon Interferon là protein ức chế sự nhân lên của virus
CHẨN ĐOÁN VIRUS 1. Chẩn đoán trực tiếp 1.1. Bệnh phẩm: - Tuỳ bệnh mà lấy BP: phân, dịch họng nũi, máu, nước não tuỷ… - Lấy càng sớm càng tốt - Bảo quản lạnh, đưa ngay đến phòng xét nghiệm. 1.2. Phân lập virus - Gây nhiễm vào tế bào nuôi: + Tế bào nguyên phát: tế bào thận khỉ, TB thai: người, lợn, chó, gà… + Tế bào thường trực: Vero, Hep 2, C6/36, Hela…
- Gây bệnh thực nghiệm trên động vật: Chuột nhắt mới sinh, khỉ, bào thai gà, muỗi… 1.3. Xác định virus Bằng các kỹ thuật miễn dịch thích hợp, dựa vào kháng thể mẫu
2. Chẩn đoán gián tiếp 2.1. Bệnh phẩm - Lấy máu 2 lần, để đông chắt huyết thanh: Lần 1 lấy khi BN mới vào viện, lần 2 sau lần 1: 7ng - Bảo quản ở -20OC, xét nghiệm cùng điều kiện. 2.2. Các phản ứng huyết thanh tìm kháng thể: - Mac-ELISA tìm KT IgM - Gac- ELISA tìm KT IgG - Huỳnh quang gián tiếp - Trung hoà - Kết hợp bổ thể - Ức chế ngưng kết HC …
2.3. Nhận định kết quả: - Mac-ELISA: có KT là (+) - Các pứ khác chỉ khi nào hiệu giá KT máu 2 gấp 4 lần trở lên so với máu 1 mới kết luận (+) 3. Các phương pháp phát hiện virus khác - Quan sát dưới kính hiễn vi điện tử - Khuếch đại gen: PCR