Tổ hợp và thăm dò tác dụng sinh học của 5Cloroisatin và dẫn chất

BỘ Y T Ẽ TRƯỜNG ĐẠI HỌC D ược HÀ NỘI OẩSD TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA 5-CL0R0ISATIN VÀ DẪN CHẤT (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược s ỉ Người thực Người hướng dẫn Nơi thực Thời gian thực ĐẠI HỌC KHOÁ 1995-2000) sv Đồng Thị Hoàng Yến PGS.TS Nguyễn Quang Đạt DS Trần Viết Hùng Phòng thí nghiệm tổng hợp hữu Từ 01/03/2000 đến 22/05/2000 HÀ NỘI 5-2000 £ jà i i ễ i Ổ n Với lòng ỉdhh trọng vầ biết ơn sâu sắc, xm chân thành cảm ơn cấc tììầỵ giáo PGS TS Nguyễn Quang Đ ạt DS Trần Viết Hùng tận tình hướng dẫn, giú p hoàn tììành khoấ luận tố t nghiệp nầỵ Tôi xin chân thành cảm ơn giú p đỡ n h iệt tình TS Đ ỗ N gọc Thanh (phòng th í nghiệm trung tâm), TS Chu Thị Lộc, KS Nguyễn Vàn Khanh cô Nguyễn Thị Sơn ( TỔ môn vi nấmkháng sừứi), cảc thầy cô giáo môn hoấ hữu quan tâm giú p đỡ, tạo m ọi điều kiện thuận lợ i cho hoàn ứiành khoả luận tố t nghiệp Hà N ội ngày 22 tháng năm 2000 Sừửi viên Đồng Thị Hoàng Yến MỤC LỤC Trang Phần — ĐẶT VẤN Đ Ể Phần — TỔNG Q U A N 2.1 Tácdụna dược lý dẫn chất isatin 2.1.1 Tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm 2.1.2 Tác dụns kháng virus 2.1.3 Tác dụng kháng lao 2.1.4 Tác dụng chống phân bào .5 Tác dụns chế men monoammooxydase (MAO) 2.2 Các phươns pháp tổng hợp isatin dẫn c h ấ t 2.2 Các phương pháp tổng hợp dị vòng isatin 2.2.2 Các phương pháp tổng hợp dẫn chất isatin 10 Phần — THỰC NGHIỆM VÀ KẾT Q U Ả 13 3.1 Nguyên vật liệu phương pháp thực nghiệm 13 3.2 Tổns hợp hoá h ọ c 13 3.2.1 Tổnơ hợp 5- cloroisatin 13 3.2.2 Tổng hợp số dẫn chất 5- cloroisatin 16 3.3 Kiểm tra độ tinh khiết xác đinh cấu trúc 22 3.3.1 Sắc ký lóp mỏng 2 3.3.2 Phân tích quang phổ hồng ngoại 23 3.3.3 Phân tích quang phổ tử ngoại 24 3.4 Thử tác dụng sinh học: tác dụng kháng khuẩn kháng nấm .25 Phần — KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 Phần ĐẶT VÂN ĐỂ Cùng với trình công nghiệp hoá, đại hoá đất nước, kinh tế có bước phát triển đinh, song kéo theo mô hình bệnh tật Vào năm 30, bệnh phổ biến lao, thương hàn đến thường phải đối đầu với bệnh khác : ung thư , tim mạch Để đáp ứn nhu cầu điều trị bệnh, nhà khoa học phải chạy đua với thời gian đê tìm loại thuốc mới, song chi phí cho việc tìm thuốc tốn Vì để nhanh chóng tạo thuốc có hiệu điều trị cao, độc tính thấp, nhà tổng hợp hoá dược nghiên cứu thay đổi cấu trúc chất có tác dụng dược lý biết trước, với mục đích tạo chất có tác dụns dược lý tương tự mạnh độc Isatin dẫn chất nhiều dãy chất hữu nghiên cứu có hệ thốn hoá học tác dụng dược lý Các công trình nghiên cứu công bố cho thấy dản chất isatin có hoạt tính sinh học phong phú, đa dạng : kháng vi rus, kháng khuẩn, kháng nấm, kháng lao, chống phân bào ức chế MAO nhiều tác dụng dược lý khác [3-8,11-15,17-19,21-23,26-28] Trong số dẫn chất isatin 5-cloroisatin số dẫn chất cho thấy có tác dụng sinh học đáng quan tâm [17] Với mong muốn góp phần nghiên cứu dãy chất 5-cloroisatin, khoá luận tốt nghiệp đề hai mục tiêu sau đây: - Tổng hợp 5- cloroisatin số dẫn chất - Thăm dò tác dụng sinh học (kháng khuẩn, kháng nấm) chất tổng hợp được, vói hi vọng tìm chất có hoạt tính sinh học cao rút nhận xét sơ mối liên quan cấu trúc-tác dụng dãy chất Phần TỔNG QUAN 2.1 Tác dụng dược lý dẫn chất isatin Các công trình nghiên cứu công bố tác dụng dược lý dẫn chất isatin mà tham khảo [3-8,11-15,17-19,21-23,26-28] cho thấy isatin dân chất có nhiều tác dụng dược lý đáng quan tâm như: -Tác dụns khán khuẩn, kháng nấm - Tác dụns khán virus -Tác dụns kháns lao -Tác dụns chốns phân bào -Tác dụng ức chế men monoaminooxydase ( MAO ) Ngoài số tác dụng khác: chống viêm, giảm đau 2.1.1 Tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm Năm 1980 tác giả D Maysinger, M Movrin M M Saric [ 17 ] nghiên cứu tổn hợp thử tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm 17 dẫn chất base N-Mannich hydrazon 5-cloroisatin 5-iodoisatin NRR = N[CH(CH ) ] Kết cho thấy chất có tác dụng tốt với vi khuẩn Gram (+) Staphylococcus aureus, Staphylococcus albus vi khuẩn Gram (-) Escherichia coli Klebsiella pneumoniae nồng độ khác Ngoài chất có tác dụng với nấm Candida monosa Cùng thời gian này, tác giả K c Joshi, V N Pathak S.K Jain [11] tổng hợp thử tác dụng kháng khuẩn dẫn chất 5-fluoroisatin cho thấy chúng có tác dụng tốt với vi khuẩn Gram (+) vi khuẩn Gram (-) : Staphylococcus albus, Escherichia coli nồng độ khác từ 42 |ug/ ml Năm 1998, Nsuyễn Quang Đạt, Trần Viết Hùng cộng [5] tổng hợp thử tác dụng sinh học 5-nitroisatin số dẫn chất Kết cho thấy 5-nitroisatin dẫn chất N- hydroxymethyl có tác dụng mạnh với chủns vi khuẩn Gram (+) Gram(-) Tiếp theo tác giả tổng họp thử thăm dò tác dụng kháng khuẩn N-hvdroxymethyl-5-brommoisatin [ ] nồng độ lmg/ml Kết cho thấy 5-brommoisatin, N-hydroxymethyl-5-brommoisatin có tác dụng với chủngvi khuẩn thử ndiiệm Gần Trần Viết Hùng, Nguyễn Quang Đạt, Nguyễn Thị Phượng [7] tổng hợp thừ tác dung kháng khuẩn, kháng nấm 5-fluoroisatin dẫn chất, kết thu tác dụng kháng khuẩn, chất cho tác dụns khán nấm chủng Candida albicans 2.1.2 Tác dụng kháng virus Dẫn chất isatin tổng hợp sử dụng làm thuốc kháng virus Methisazon (ị3-thiọsemicarbazon N-methylisatin) Methisazon dùng làm thuốc phòng bệnh đậu mùa từ năm 1960, điều trị biến chứng da sau chùng đậu [8,26] _^N — NH— c Công thức Methisazon: s I òh3 NH2 Tiếp tục nghiên cứu tổng họp thử tác dụng số thiosemicarbazon base- Mannich isatin dẫn chất thấy có tác dụng virus đậu mùa Ngoài chất có hiệu virus bại liệt virus cúm [ , , ], điển hình chất có công thức sau đây: 2 R' = - N(CH3)2 , R -CH3 - , - , Năm 1961, p.vv Sadler công bố kết tổng hợp thử hoạt tính kháng virus số dẫn chất N-alkylisatin-3-thiosemicarbazon cho thấy chất có tác dụng kháng vims cao [19] Điển hình chất 1- ethyl-5fluoroisatin-3-thiosemicarbazon CH,— CH3 2.1.3 Tác dụng kháng lao Với trực khuẩn lao Mycobacterium tuberculosis, số dẫn chất hydrazon isatin nghiên cứu, thử tác dụng kháng lao thu kết tốt Theo s Kochimora cộng [15] 3-oxim, 3-hydrazon, 3- phenylhydrazon 3- thiosemicarbazon có tác dụng kháng lao nồng độ nhỏ (1/40000-1/20000) Các tác giả A.B Tomchin cộng [28] thử tác dụng kháng lao isonicotmoyLhydrazon isatin Kết cho thây chất có tác dụng ức chế Mycobacterium tuberculosis nồng độ Ịi /ml, đặc biệt loại trực khuẩn bền vững với Rimiíon 2 Streptomycin 2.1.4 Tác dụng chống phân bào ưng thư bệnh hiểm nghèo, có tỷ lệ tử vong cao, việc nghiên cứu để tìm thuốc chống ung thư nhà khoa học quan tâm nhiều họp chất thiên nhiên, tổng họp bán tổng hợp nghiên cứu thử tác dụng chống phân bào, có dẫn chất isatin Kết nghiên cứu cho thấy số dẫn chất hydrazon base Mannich isatin có tác dụng ức chế phân bào Nhà nshièn cứu nsười Mỹ F.D Pop [18] phát tác dụng chống khối u 3-o-nitrophenvlhydrazon isatiii Các tác giả R.s Varma Nobles [22] thử tác dụng tế bào ung thư số base Mamiich isatin Kết chất độc đối vói tế bào un thư có tác dụng chống ung thư mạnh R=- , - o » "~KD R=—H, —€H3 Gần đây, Nsuvễn Quang Đạt cộng [3,4] tổng hợp thử tác dụng chống phân bào mô phân sinh rễ Raphanus Sativus L dẫn chất isatin số hydrazon, môt số base Mannich 5-bromo 5sulíamido, azometin 5- nitroisatin Kết thu chúng kìm hãm mô phân sinh thực vật cao 2.1.5 Tác dụng ức chê men monoamiìiooxydase ( MAO ) Năm 1984 D.G Xedere, B.A Grinberg cộng [28] nghiên cứu thử tác dụng 25 dẫn chất isatin việc sử dụng chế phẩm men ty lạp thể gan lợn chất tyramin hydroclorid Kết dẫn chất 5-brommoisatin cộ tác dụng kìm hãm MAO mạnh Năm 1990 Grinberg, B Mazylis cộng thử tác dụng ức chế MAO gan lọn cúa 18 dẫn chất isatin, kết cho thấy chất có tác dụng ức chế MAO dịch đồng gan [10] Bảng 1: Tóm rắt tác dụng dược lý dẫn chất isatin STT Côns thức hoá học R = F Cl Br, I, -NO , £ = H,-CH OH, -CH-,NRjR Y = , N-B Tác dụng p K' Kháng khuẩn, kháng nấm, chống phân bào 2 k R = H Br, F, n ĩ suiionamia c Trvno ri aixyi R - alkyl, - CH NRjR 1 111 2 xx°1 \ K ^ ^N-nh-c-nh R’ B = - OH, - NH2, - n h c 6h „ - n h c s n h 2, - c 5h 4n R = Br, - N Rj = H, - CH2OH Y = - NNHAr R^ Y ( ^ Tài liêu [3,4, 5, 7, 11, 17, 18, ] 2 Kháng virus Kháng lao [19, 21, 22,26] [15, 28] H UA Ri Kháng khuẩn, ức chế MAO [5, , 28] 2.2 Các phương pháp tổng hợp isatin dẫn chất 2.2.1 Các phương pháp tổng họp dị vòng isatin 2.2.1.1 Oxy hoá Ịndiẹo Isatin tên bắt ngụồn từ chàm Châu Âu Isatis tinctoria Laurent Erdmant tìm năm 1841 Các tác giả tổng hợp isatin bằns cách oxy hoá indigo với tác nhân oxy hoá Na Cr [24] 2 Sơ đồ phản ứns sau: Nhiều năm sau đó, số tác giả tiến hành tổng họp isatin phương pháp khác Sau số phương pháp tổng hợp 2.2.1.2 Phản íaig CLAISEN SHADWELL (1879) [25] Đi từ nguyên liệu ban đầu o-nitrobenzoylclorid, phản ứng qua ba giai đoạn tạo acid o-aminoarylglyoxylic, chất tác dụng acid đóng vòng tạo chất isatin vòng benzen COCI COCOOH 3.4.5 - Kết nhận xét -Về tác dung kháng khuắn + nồng độ mg/ml: số dẫn chất isatin (I-VI) thử nghiệm có chất I (5-cloroisatin ) có tác dụng với chủng vi khuẩn (trừ chủng Pseudomonas aeruginosa) chất n có tác dụng yếu vói chủng vi khuẩn Các chất lại tác dụng So sánh với Nitrofurazon tác dụng chất tổng hợp hon + nồng độ 4mg/ml: Chất I n có tác dụng mạnh với chủng vi khuẩn (trừ chủng Pseudomonas aeruginosa) thể tác dụng mạnh so với nồng độ 2mg/ml Các chất m , V, VI có tác dụng với chủng vi khuẩn, chất IV có tác dụng với chủng vi khuẩn, nồng độ 2mg/ml chất tác dụng -Về tác dung kháng nấm + Ở nồng độ 2mg/ml: có chất I n có tác dụng ức chế phát triển Candida albicans, chất I có tác dụng mạnh so với chất n So sánh với nitrofurazon tác dụng chất tổng hợp + nồng độ 4mg/ml: chất (I-V) có tác dụng kháng Candida albicans mạnh, chất I có tác dụng mạnh Còn lại chất VI có tác dụng Nhân xét sơ bố vê mối liên quan cấu trúc tác dung: -Các kết nêu cho thấy, số chất tổng hợp chất I ( -cloroisatin ) có tác dụng kháng khuẩn kháng nấm mạnh nhất, điều chứng tỏ đưa nguyên tử clo vào vị trí nhân isatin đưa lại hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm đáng ý -5 dẫn chất I (II-VI) có tác dụng I, điều cho thấy việc tạo dẫn chất nhóm carbonyl (>c=0) vị trí (oxim, hydrazon) chất I làm giảm tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm chất I Sự giảm hoạt tính 29 cấu trúc phân tử tính chất lý hoá dẫn chất làm cho chúng khó thấm qua màng tế bào vi khuẩn vi nấm -Trong số dẫn chất I dẫn chất oxim(II) có tác dụng cả, điều tính chất lý hoá nhóm oxim (>N-OH) tạo thuận lợi cho việc qua màng tế bào vi sinh vật so với dẫn chất hydrazon (ƯIVI) Hình 15 Vòng vô khuẩn chất I, II chủng Staphylocococcus aureus 30 Hình 16 Vòng vô khuẩn chất I, II, III chủng Proteus mirabilis Hình 17 Vòng vô khuẩn chất I, II chủng nấm Cưndida albicans Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT Từ kết nghiên cứu trình bày trên, rút số kết luận sau: - Chúng tồi tổng hợp chất gồm: 5-cloroisatin (I) dẫn chất oxim hydrazon ĩ (II-VI), chất (II-VI) chưa tìm thấy tài liệu tham khảo - Trong qua trình tổng họp theo dõi phản ứng SKLM để xác đinh thời gian tối ưu cho phản ứng - Đã kiểm tra độ tinh khiết chất tổng họp SKLM, xác đinh cấu trúc bằn£ đo quang phổ hồng ngoại tử ngoại - Đã thử tác dụng kháng khuẩn chất tổng hợp với chủng Gram(+) (Bacillus cereus, Bacillus pulmilus, Bacillus subtilis, Sarcina lutea, Staphylococcus aureus), chủng vi khuẩn Gram (-) (Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Shigella ílexneri) Kết thu nồng độ 2mg/ml chất I có tác dụng với chủng vi khuẩn, chất n có tác dụng yếu với chủng vi khuẩn, chất lại tác dụng; nồng độ 4mg/ml chất I n có tác dụng mạnh với chủng vi khuẩn, chất rn, V, VI có tác dụng với chủng vi khuẩn chất IV có tác dụng với chủng vi khuẩn - Đã thử tác dụng kháng nấm chất tổng hợp với chủng Candida albicans Kết qủa cho thấy nồng độ mg/ml có chất I, n có tác dụng ức chế Candida albicans, chất lại (HI-VI) tác 32 dụng; nồng độ 4mg/ml chất (I-V) có tác dụng Candida albicans mạnh, chất VI có tác dụng hon Từ kết cho dãy chất nghiên cứu sâu thêm tác dụng kháng khuẩn kháng nấm chất I (5-cloroisatin ) thử sàng lọc dụng sinh học khác như: kháng lao, chống phân bào chất để đánh giá đầy đủ tác dụng sinh học chúng, để định hướng cho việc tiếp tục nghiên cứu tổng hợp sàng lọc tác dụng sinh học dãy chất 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ môn Hoá hữu - Hoá học hữu tập I; Trường đại học dược Hà Nội; 1990, tr.204-205 Dược điển Việt Nam n tập — Nhà xuất Y học; 1994, tr.504 Nguyễn Quang Đạt, Bùi Kim Liên — Nghiên cứu chất chống phân bào — Thông báo khoa học; Đại học Dược Hà Nội; 1977, số 27, tr 97103 Nguyễn Quang Đạt, Nguyễn Xuân Thuỷ, Phan Minh Tâm — Tóm tắt báo cáo khoa học hội nghị hoá học toàn quốc, 1981, tr 37 Nguyễn Quang Đạt, Trần Viết Hùng cộng — Tổng hợp tác dụng sinh học sô dẫn chất isatin- Tạp chí Dược học; 1998, sô 12, tr Trần Viết Hùng, Nguyễn Quang Đạt — Tổng hợp tác dụng sinh học N-Hydroxymethyl-5-brommoisatin dẫn chất- Tạp chí dược học; 1999, SỐ10, tr 4-5 TrầnViết Hùng, Nguyễn Quang Đạt, Nguyễn Thị Phượng- Tổng hợp tác dụng sinh học 5-fluoroisatin dẫn chất; Tạp chí dược học; 1999, số 1 , tr 4-5 S.Bauer-Brit.I.Pharmacol; 1960, p 5,101; The Merck index, l l tb ed, 1989, p 943 T.A.Foglia, D.Swem - Reactìon o f N,N-diclorouretan with indole and derivatives- The joumal of organic chemistry;1968, Vol 33, 4440-4442 10 B.A Grinberg, B Mazylis — Isatin and related compounds potential monoamỉneoxìdase- Chemija 1990, 2, 87-92; CA 1991,vol 114, 199062X 11 K.C.Joshi, V.N Pathak, S.K.Jain- Synthesis and antibacterial activity o f sorrie new ỷluorine containing indole-2,3- dion derivatives - Die Pharmazie, 1980,N°, p.677 — 680 34 12 K.C.Joshi, V.N.Pathak, P.Chand — Synthesis and pharmacological activity o f some isatin derivatives- Chemie, 1980, N2, p 314-321; CA 1980, Vol 93, 220704h 13 K.CJoshi,V.N.Pathak, S.K.Jain - Synthesis and antibacterial, ỷungicidal and antiviraỉ of some new isatin derivatives, J Indian Chem Soc 1980, 57(12), p 1176-118 j; CA 1981,Vol 95, 43046y 14 K.CJoshi,VJain, S.Nishyth — Synthesis and insecticidal ơctỉvỉty o f some new fluorine containinq isatin derivatives’, J.Indian Chem Soc.1990, , p 490 - 492; CA 1991,Vol 114, 101965h 15 L.s Kochimora, A Hamada — The tuberculostatic activity o f some isatin derivatives; J Phar Soc Japan 1954, 74, p 419- 422; CA 1955, Vol 69, 9166a 16 c s Marvel ,G.S.Hiers- Organic synthese, Collective, 1956,Voi 1, p 327-330 17 D Maysinger, M.Movrin, M.M.Saric — Structural analogues o f isatỉn and their antimicrobial activity; Die Pharmazie 1980, 35(1), p 14- 16 18 F D Pop — Synthesis o f potential antineoplastic agents; J.med.Chem, 1969 12(5), p 182 19 p w Sadler- Antiviral chemotherapy with isatin Ị5-thiosemicarbazone\ CA 1969 Vol.55, 11432C 20 R M Silverstein, G c Bassler, J c Morrill — Spectrometric identi/ication of organic compouds 4th ed- John Wiley, New york 1981 21 R s Varma, W.L.Nobles — Synthesis and antỉvỉral o f certain Ndialkylaminomethyl isatin /3-thiosemỉcarbazone; J.Med.Chem 1967, Vol 10(5), p 972- 973 22 R s Varma, w L Nobles — Antiviral, antibarterial and antiỷiingal activity o f isatin N- Mannich base; J Pharm Sci, 1975, 64(5), p 181182 35 23 S.Yang, Y.P; Li., Antileukemia activity o f indirubin and its derivatives International Pharmacy Journal, 1987, l,p 11-15; 24 Grignard- Trai té de Chimie organique — Masson et ie, Editeurs, Paris;1953, Tome XIX p 337- 346 £ K ỏ b a u s y p o r Jí M u Uẩì zh k o , \Aw u w \a íl (kiKưỷLLu, Ậ OpicưtunexKDÌi XuRu.u , XLÍMU9L^Mc>ck.&CLj'iSì6 £6 *n 1/1 5Kyrt.tum^ , H A Ọzxrty, v\ỵxrun u £*o t'UẦruunai(xị^'l9 ff T LXeọepe/ 5* A Tpunổepv - OSpciTuMirib urttuổuĩopoc PLonocuuu.rtocuọaS) (si b p&tylý UHạoAẢArtOrtM, -Xuh - ộapM y a * ,5 ,5 5 $ 2,8 A b ToMun A Aoốpero A KTuPLaKpoắoKĩipuGiAb, n a i CLKTU&HOCTb ' l y p a $ r t o & o C -C Ị U K ia p ế o ftUAbHWJC coe^Lư-tmuit, Xum ộapM .}ỈC 196?-, 40(2/) , 45-48 36 PHỤ LỤC CÁC PHỔ ĐỒ HỒNG NGOẠI VÀ TỬNGOẠI (HÌNH 6-16) 4GQ0 ,0 100.0 35G0 30GG 2500 2000 Hình : P//Ổ hồng ngoại chất ỉ 1500 1D00 500 400 MEMORV e p€dk table Upper X 100 Lower : ,0 ISO cin-1 y,T No crr-t 31Q0.0 1751.0 28.0 1615.0 1468.0 14.9 < 1271.0 1295.0 40,2 10 1167.0 11 1120.0 13 64.0 896.0 14 843.0 16 701.0 17 655,0 46.6 4Ố2-0 42.1 19 •20 418.0 Depth i 5.0 Xĩ No cn-1 9.1 1707.0 29,8 "1449.0 37.2 120(9.0 42.3 12 1058.0 34,6 745; 15 50.6 18 583.0 62.7 13.5 24.8 33.3 56.3 46.5 60.9 Hình : Phổ hồng ngoại chất II cn-L -Pecik table upper : 100 Lower : 0.0 No cn-J y l No Ctt-l 3174.0 1707.0 ỡ 1440,0 30,6 1325,0 1178,0 46 Í0é6,0 890 Đ 52.7 10 11 772.0 13 54.9 661.0 14 ỔI 3.0 16 485.0 67.2 17 432.0 MEMORV 'ÍT Depth : XT No cm-1 13.3 1609*0 46,6 1254.0 0 1023.0 47.1 12 709.0 543.0 47.7 15 67,7 yj 25.6 53,1 27.4 -53.8 59.9 0 yj 100 Q Hình 8: Phổ hồng ngoại chất III CWH -Peak tajble upper : 100 Loj{J€F ĩ ,0 No cn-1 *T No cm-t 3374,0 26.4 3206.0 1594.0 25,7 1479.0 1395.0 1313.0 41,6 10 IL11.0 42.0 11 964.0 13 826.0 14 56*0 767.0 16 528.0 17 496.0 34*8 MEMORV Depth ' 5.0 y.r Mơ crr-1 23.9 1694.0 SG.7 Ổ í 441.0 1195.0 41-0 56,1 865.0 12 54,7 ■ 15 635.0 41.6 kĩ Y.T 15.9 36.1 29,1 61.7 36.-9 ABS ABS ABS ABS ABS 04603 16182 1.56447 1.79588 1.43254 NM NM NM NM NM 430.000 295.556 253 333 247.778 211.111 % !? •**% - 0 ftBS _ Basel ine QFF snu Paqẹ | V pr20e0 5 0 _ NM ABS : 0.0000 -> 2.0000 NM : 200.00 -> 550.00 Basel ine Erase Ụieu Re-scale Zoon yrrSTrri Label More Use the qraphics cnrsor, track, slopẹ ABS ABS ABS 0.07585 0.35161 1.74272 NM NM NM 386.667 285.556 256.667 2' íl% - 0 flBS _ Basel ine 0FF SBU Paqẹ ftBS : 0.8888 -> 2.0808 TH o T>1 * ' lÔ tlC n s ° ọ i chất Ị ị Y pr 2000 5 0 _ hH , 1- HH 280.89 -> 558.00 BaselineErase Ụieu Re-scale Zoon ISHTTiB Label More Use the qraphics cursor track slopẹ _ _ _ Hình 10: Phổ tử ngoại chất II 0.09310 0.65052 52047 60168 ABS ABS ABS ABS 0.0001 M S fìBS Basel i ne ABS ABS ABS ABS - ABS 398.889 317.778 275.556 253 333 Yen-Mau 3/EtOH Ga in 53 B asel ine _QFF 17 fìpr 2000 SBU Paqẹ 0 0 -> 1.5008 ựi eu R e -sc a le Zoom Erase 2.24210 1.44197 1.27856 3.05092 n n n q tJ O O U NM NM NM NM NM NM NM NM 366 67 277.778 238 89 205.556 Yen-Hau 4/EtOH Gain 84 B a s e lin e 0FF SBU Paqe 8 -> 0 f)BS B a s e lin e Erase U ieu R e -s c a le Zoom Use th e Graphics c u r s o r tr a c k s lọ p ẹ 2.0 NM Label 0 0 m _ 288 -> More 0 Hình 11: Phổ tử ngoại chất III 17 Apr 2000 MM Label 5 0 nn 208 BB -> More 5 B9 Hình 12: Phổ tử ngoại chất IV ABS ABS ABS ABS ABS B 0.57447 0.75339 0.72424 1.50723 -0.0009 ftBS m m m NM NM ^ *T ■» 267*778 260 0 243 389 214.444 ?en-ỉ1au 5/EtOH Ga in 84 Basel ine _QFF SBU Paqẹ 17 Apr 2000 2.9 ABS 0.0000 -> 2.0000 B aseline Erase ựieu R e-scale Zoon Use the Graphics cursor track slopẹ _ ABS ABS ABS ABS 09886 0.21469 0.29869 5780 NM NM NM NM 401.111 353 33 326.567 274.444 -0.0044 E 1au6' Et” i BS Basel ine QFF SBU Paqẹ Hf Label 550.00 MỊ1 289.88 -> More 55B■00 Hình 13: Phổ tử ngoại chất V |V pr 2800 550.00 _ MỊ1 ABS : 0.0000 -> 0.6000 m : 200.80 -> 550.00 Baseline Erase Uieu Re-scale zõõĩn Label riore Usfr the qraphics cursor, track, slopẹ _ Hình 14: Phổ tử ngoại chất VI [...]... quả thu được là ở nồng độ 2mg/ml chất I có tác dụng với 9 chủng vi khuẩn, chất n có tác dụng yếu với 5 chủng vi khuẩn, các chất còn lại không có tác dụng; ở nồng độ 4mg/ml chất I và n có tác dụng khá mạnh với 9 chủng vi khuẩn, các chất rn, V, VI có tác dụng với 5 chủng vi khuẩn và chất IV có tác dụng với 4 chủng vi khuẩn 5 - Đã thử tác dụng kháng nấm của các chất tổng hợp được với chủng Candida albicans... chú ý -5 dẫn chất của I (II-VI) đều có tác dụng kém hơn I, điều đó cho thấy việc tạo dẫn chất của nhóm carbonyl (>c=0) ở vị trí 3 (oxim, hydrazon) của chất I đã làm giảm tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm của chất I Sự giảm hoạt tính 29 này có thể do cấu trúc phân tử và tính chất lý hoá của các dẫn chất đó làm cho chúng khó thấm qua màng tế bào vi khuẩn và vi nấm -Trong số 5 dẫn chất của I thì dẫn chất oxim(II)... có tác dụng với 9 chủng vi khuẩn (trừ chủng Pseudomonas aeruginosa) và chất n có tác dụng yếu vói 5 chủng vi khuẩn Các chất còn lại không có tác dụng So sánh với Nitrofurazon thì tác dụng của các chất tổng hợp kém hon + ở nồng độ 4mg/ml: Chất I và n có tác dụng khá mạnh với 9 chủng vi khuẩn (trừ chủng Pseudomonas aeruginosa) và thể hiện tác dụng mạnh hơn so với nồng độ 2mg/ml Các chất m , V, VI có tác. .. có tác dụng với 5 chủng vi khuẩn, chất IV có tác dụng với 4 chủng vi khuẩn, trong khi ở nồng độ 2mg/ml các chất này không có tác dụng -Về tác dung kháng nấm + Ở nồng độ 2mg/ml: chỉ có chất I và n có tác dụng ức chế sự phát triển của Candida albicans, trong đó chất I có tác dụng mạnh hơn so với chất n So sánh với nitrofurazon thì tác dụng của các chất tổng hợp được kém hơn + ở nồng độ 4mg/ml: 5 chất (I-V)... Trong phần tổng hợp hoá học chúng tôi đã tổnghợp được 6 chấtgồm 5- cloroisatin (I) và 5 dẫn chất của (I) là các chất (n-VI) 2 Đã khảo sát thông số về thời gian phản ứng bằng SKLM tìm thời gian phản ứng tối ưu của các chất (n-VI) 3 Kiểm tra độ tinh khiết của các chất tổng hợp được bằmg SKLM và xác đinh nhiệt độ nóng chảy của chúng 4 Các chất tổng hợp sẽ được xác đinh cấu trúc bằng phổ hồng ngoại và phổ... chỉ có chất I, n có tác dụng ức chế đối với Candida albicans, các chất còn lại (HI-VI) không có tác 32 dụng; ở nồng độ 4mg/ml 5 chất (I-V) có tác dụng đối với Candida albicans khá mạnh, chất VI có tác dụng kém hon Từ các kết quả trên chúng tôi cho rằng đối với dãy chất này có thể nghiên cứu sâu thêm về tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm của chất I (5-cloroisatin ) và thử sàng lọc các dụng sinh học khác... giá tác dụng sinh học với hy vọng tìm ra được chất có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm trong số các chất đã tổng hợp được, chúng tôi tiến hành thử tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm tại phòng thí nghiệm của tổ môn vi nấm - kháng sinh trường Đại học Dược Hà Nội 3.4.1 - Nguyên tắc Các chất tổng họp được thử bằng phương pháp khuyếch tán trên thạch với kỹ thuật đục lỗ thạch Dựa vào sự khuyếch tán của chất. .. - Áp dụng quá trình biến đổi hoá học để tổng hợp các sản phẩm đã dự kiến - Xác định độ tinh khiết của các sản phẩm tổng hợp bằng SKLM, đo nhiệt độ nóng chảy - Xác định cấu trúc của các chất tổng hợp dựa trên kết quả phân tích phổ ưv, ER - Thử tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm của các chất tổng hợp dựa trên phương pháp khuyếch tán trên thạch theo qui định của Dược điển Việt Nam 3.2 - Tổng hợp hoá học 3.2.1... 4mg/ml: 5 chất (I-V) có tác dụng kháng Candida albicans khá mạnh, trong đó chất I có tác dụng mạnh nhất Còn lại chất VI có tác dụng kém hơn Nhân xét sơ bố vê mối liên quan cấu trúc tác dung: -Các kết quả nêu trên cho thấy, trong số 6 chất tổng hợp được thì chất I ( -cloroisatin ) có tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm mạnh nhất, điều này 5 chứng tỏ khi đưa nguyên tử clo vào vị trí 5 của nhân isatin đã đưa... về hoạt tính sinh học của các chất Kết quả thực nghiệm của chúng tôi được ghi ở bảng 27 6 6 : Kết quả thử tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm của 6 chất (ỉ-VI) ở nồng độ ci(2mgìmì) và C2 (4mg/mỉ) - kết quả âm tính Ghi chú: ± kết quả không rõ ràng Bảng ... tác dụng sinh học Để đánh giá tác dụng sinh học với hy vọng tìm chất có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm số chất tổng hợp được, tiến hành thử tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm phòng thí nghiệm tổ. .. cộng — Tổng hợp tác dụng sinh học sô dẫn chất isatin- Tạp chí Dược học; 1998, sô 12, tr Trần Viết Hùng, Nguyễn Quang Đạt — Tổng hợp tác dụng sinh học N-Hydroxymethyl-5-brommoisatin dẫn chất- ... albicans, chất I có tác dụng mạnh so với chất n So sánh với nitrofurazon tác dụng chất tổng hợp + nồng độ 4mg/ml: chất (I-V) có tác dụng kháng Candida albicans mạnh, chất I có tác dụng mạnh Còn lại chất