THIẾT KỀ VECTOR MANG GEN MÃ HOÁ PROTEIN BỀ MẶT CỦA VIRUT H5N1 PHỤC VỤ NGHIÊN CỨU CHUYỂN GEN TẠO VACCINE THỰC VẬT
!"#$%&&%#'!()"!% *#+ ,$"-.%/)0 0%&1% 2- -34%&%5!$ %6 7 859 (%&-31% ":;%&859 3<=:> BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NCKH CẤP BỘ #?8@- #0 1-<%A=-%&%&1% 2- B%&C-$%DEF- 7EF-D):G%&)() %A=-%&*(! (! C-HDH!E-7% E-7%D%%&I #?8@- ! " # $% &''' ( ) * %+ %, - ./0123 4 & 56 7 8 9:;9 JKLKMNOO NPQRMSTNUVM.%/RW W OX Y Z[ O \ ]^' /#WXOXY <MQ_`RNOONPaRMSTNUV M.%/ <VOLb$OMSMNNOMQ_`R YONPaRMSTNUVM.%/ c%dOOXY <KLKONPaRMSTNUVM.%/ Me`RZ[Of\] < Z[ONPaRMSTNUM.%/gZ hQgZi]jkO #0 1-l%A=-%&%&1% 2- /] Nguyên liu thực vật &hO h Q Nicotiana tabacum mcn o )pO qO OKS\]< qOOr Ch&ng vi khu(n v) c*c nguyên liu DNA: < QVOLbE.coliAgrobacterium qO OrOsR < M R*<)< NO RMNM ZX WO ij`OsRSfMjtO8r&ljkOuh*v 7EF-D):G%&)()%&1% 2- c)jkORQROXY <w]) "lZ) " < QRjkORQRSKRhlxOi <MZ[OSyOLw]&Z < QRjkORQRZ[OOrgZZ[O 7EF-D):G%&)()%&1% 2- B%&C-$%DEF- 8UeLQOOZXVMzN$ Mô hình cấu trúc protein 3 chiều c&a HA Câu trúc protein Hemagglutinin [...]... wWw.SinhHoc.edu.vn Các dòng đậu tương chuyển gen thế hệ T0 Tài liệu chia sẻ luận wWw.SinhHoc.edu.vn Kết tại: và kiến nghị KẾT LUẬN 1.Bằng việc sử dụng nguồn gen HA của virus H5N1 phân lập ở Việt Nam, chúng tôi đã thiết kế thành công vector mang cấu trúc gen phù hợp biểu hiện ở thực vật 2 Đã thu được cây thuốc lá mang cấu trúc HAop đây là nguồn nguyên liệu cho phân tích khả năng biểu hiện gen chuyển và cơ sở cho biến... QUY TRÌNH SẢN XUẤT VACCINE THỰC VẬT Thiết kế vector chứa gen quan tâm Chuyển vector vào khuẩn Agrobacterium Chuyển gen quan tâm vào tế bào thực vâ ôt Phân tích biểu hiêôn gen trong cây •Kiểm tra khả năng miễn dịch ở đôông vâôt •Tinh sạch và sản xuất Tài liệu chia sẻ tại:KẾT QUẢ wWw.SinhHoc.edu.vn THIẾT KẾ VECTOR 8 Aug 2015 Tài liệu chia sẻTRÚC GEN NHÂN TẠO CẤU tại: wWw.SinhHoc.edu.vn... cơ sở cho biến nạp vào các cây trồng khác 3 Sử dụng phương pháp chuyển gen thông qua nách lá mầm nhờ vi khuẩn A.tumefacien, bước đầu đã thu được 8 dòng cây T0 mang gen HA.1 Đây là tiền đề quan trong cho việc tạo được các dòng đậu tương mang gen mã hoá cho các kháng nguyên của virus H5N1 làm vacine ăn đựơc cho gia cầm phòng chống bệnh H5N1 ở Việt Nam Tài liệu chia sẻ luận wWw.SinhHoc.edu.vn Kết tại:... chiavector tái tổ hợp chứa cấu trúc gen HAop Bước 1 :Thiết kế sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Tên mồi Trình tự XhoI-HA CCGCTCGAGATCTGCATTGGATACCACGCT HindIII-HA CCCAAGCTTGCAGATCCTGCACTGAAGAGAT 1.7kb Kết quả PCR nhân đoạn gen HAop bằng XhoI-HA/HindIII-HA Tài liệu chiavector tái tổ hợp chứa cấu trúc gen HAop sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Bước 1 :Thiết kế Tài Bước 1 :Thiết kế vector tái tổ hợp chứa cấu trúc gen. .. Kháng nguyên HA Câu trúc protein Hemagglutinin Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Kháng nguyên NA(neuraminidase) Cấu trúc protein neuraminidase Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Đặc tính kháng nguyên của virut cúm A Kháng nguyên NA cùng với kháng nguyên HA của virus là các đích chủ yếu của cơ chế bảo hộ miễn dịch của cơ thể với virus cúm A, và là cơ sở điều chế các vaccine phòng cúm hiện... 2: Thiết kế wWw.SinhHoc.edu.vn Tài liệu chia sẻ tại :vector đặc trưng trong hạt TàiBước 2: Thiết kế vector đặc trưng trong hạt liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Điện di kiểm tra vector tái tổ hợp pPhaso-HAop bằng PCR (A)và cắt bởi enzyme hạn chế EcoRI (B) M: Thang chuẩn 1 Kb; 1, 2, 3: mẫu vector tái tổ hợp tách từ các dòng khuẩn lạc Tài liệu chia nạptại: wWw.SinhHoc.edu.vn Bước 3: Biến sẻ vector. .. tumefaciens CV58 mang gen biến nạp bằng PCR Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Kết quả biến nạp cấu trúc gen vào cây thuốc lá Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Kết quả biến nạp cấu trúc gen vào cây thuốc lá Kiểm tra gen chuyển HAop trong cây thuốc lá M: Thang chuẩn 1 Kb; 1: mẫu cây thuốc lá không chuyển gen; 2, 3, 4, 5, 6 và 7: mẫu cây thuốc lá chuyển gen HAop Tài liệu... SIM-Km75/4 tuần Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Kết quả chuyển các cấu trúc HA1 vào nách lá mầm giống đậu tương ĐT12 LôTN Số mẫu biến Số mẫu tạo nạp chồi Số chồi kéo Số chồi ra dài rễ Số cây sống trên giá thể 1 250 80 30 16 12 2 220 70 25 25 10 3 180 55 20 14 10 Tổng 650 205 65 45 32 Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn Kết quả chuyển các cấu trúc HA1 vào nách lá mầm giống đậu tương... CTC ATC TCT ACT ATG AAC AAC CTC ACT AAA GTC ACT TAC TTC AAG AAC GTC TGT GGG GAC TGC GAG ACT CAG GAC AAG GAC TAC CTC GAA GCA CTT GAG GTG ACC ACT CTC CCA AGA CTC GCT TGC AGC GAG TTG CCA GAG GGa AAg TGA Protein CTC GCT TCT GAG ATG GCT GTT CCA AGG ATC AAC TCC GAA TTC GGC GGT AGC AAG GACCCAG MANKLFLVCAALALCFLLTNALDAPQSITELCSEYRNTQIYTINDKILSYTESMAGKREMVIITFKSGATFQVEVPGSQHIDSQ KKAIERMKDTLRITYLTETKIDKLCVWNNKTPNSIAAISMENSDPHVPNLDLEEFEWSYIVEKANPVNDLCYPGGGECPKYVKS . 2- B%&C-$%DEF- 8UeLQOOZXVMzN$ Mô hình cấu trúc protein 3 chiều c&a HA Câu trúc protein Hemagglutinin QOOZX$ Câu trúc protein Hemagglutinin QOOZX%${MN| . 1-l%A=-%&%&1% 2- /] Nguyên liu thực vật &hO h Q Nicotiana tabacum mcn o )pO qO OKS]<