XÉT NGHIỆM NHANH CHLAMYDIA pot

XÉT NGHIỆM NHANH CHLAMYDIA TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tính giá trị của test nhanh bằng phản ứng miễn dịch men (EIA: Enzyme Immunoassay) trong chẩn đoán nhiễm Chlamydia trachomatis đường sinh dục so với phương pháp khuếch đại chuổi DNA. Thiết kế nghiên cứu: Thử nghiệm chẩn đoán. Phương pháp: Trong thời gian từ 3/8/2007 -10/8/2007, 203 thai phụ dến nạo hút thai trong 3 tháng giữa thai kỳ tại bệnh viện Từ Dũ được đưa vào nghiên cứu. Chúng tôi phỏng vấn để tìm các yếu tố nguy cơ, thu thập bệnh phẩm tại kênh cổ tử cung làm test nhanh EIA (One- Step Chlamydia ® ) để so sánh với PCR (Roche Amplicor ® ) do viện Pasteur thực hiện nhằm phát hiện tình trạng viêm cổ tử cung do Chlamydia trachomatis. Kết quả: Qua 203 trường hợp nghiên cứu tỷ lệ nhiễm C. trachomatis là 7,9%. So với PCR, test nhanh có độ nhạy 62,5%, độ đặc hiệu 99,5%, giá trị dự báo dương 90,9%, giá trị dự báo âm 96,9% với độ mạnh của chẩn đoán phù hợp (Kappa=0,723), diện tích của đường cong ROC là 0,9389 khá tốt. Các yếu tố liên quan nhiễm C. trachomatis như: dưới 25 tuổi, sống ở thành phố, không sử dụng bao cao su. Kết luận: Độ nhạy của tthử nghiệm nhanh trên nhóm đối tượng nguy cơ thấp còn hạn chế, nên sử dụng test này trong cộng đồng dân số nguy cơ trung bình và cao vì tính đơn giản và giá rẻ, phù hợp cho chẩn đoán và điều trị. ABSTRACT Objective: to compare the validity of rapid EIA test in the diagnosis of genital Chlamydia trachomatis infection with the PCR method. Design: diagnostic test. Materials and methods: available samples were taken from the patients come to the Family Planning Department – Tu Du Hospital, for first trimester abortion, from 3-10 August 2008. Risk factors were collected by face to face interview, collection of endocervical canal specimen for rapid EIA test (One-step Chlamydia®) and PCR test (Roche Amplicor®) analysed by Pasteur Institute with Roche laboratory kits. Results: 203 cases were recruited, and the rate of Chlamydia trachomatis infection is 7.9%. By comparison with the PCR test, the rapid EIA test has a sensitivity of 62.5%, a specificity of 99.5%, a positvie predictive value of 90.9%, a negative predictive value of 96.9% and the Kappa value of 0.723, the surface area under ROC curve is 0.9389 is quite good. The Chlamydia infection relevant factors include age under 25, citizen and without condom use. Conclusion: The sensitivity of the rapid EIA test in the low risk group is of limited value, it’s worth to be considered for use this test in the moderate to high risk community because of its ease and low cost for diagnosis and treatment. ĐẶT VẤN ĐỀ Nhiễm khuẩn lây qua đường tình dục (NKLTQĐTĐ) là bệnh lý phổ biến trên toàn thế giới, gây hậu quả xấu đến phát triển kinh tế và xã hội (Error! Reference source not found.) . Tác nhân của NKLTQĐTĐ rất đa dạng bao gồm virus, vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng (CDC 2005). Tùy theo phong tục tập quán, điều kiện kinh tế xã hội, chế độ chẩn đoán và điều trị của từng nước mà tỷ lệ mắc NKLTQĐTĐ dao động khác nhau. Trong đó nhiễm lậu và Chlamydia trachomatis là hai tác nhân vi khuẩn thường gặp và đang có chiều hướng gia tăng (Error! Reference source not found.) . Theo Tổ chức y tế thế giới mỗi năm có thêm 90 triệu người mới mắc bệnh Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) trên toàn thế giới, trên 70% viêm cổ tử cung và chiếm 40-50% viêm niệu đạo không do lậu ở nam (Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) . Nhiễm C. trachomatis cùng lậu cầu là hai tác nhân gây viêm vùng chậu thường gặp nhất, có khoảng 80% nữ giới và 70% nam giới nhiễm C. trachomatis mà không có triệu chứng và chính họ là nguồn lây nhiễm cho bạn tình và từ đó lan truyền ra cộng đồng (Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) . Khởi đầu vị trí nhiễm khuẩn ở cổ tử cung, niệu đạo và trực tràng nếu không được điều trị C. trachomatis sẽ tồn tại trong nhiều tháng và gây nhiều biến chứng như viêm vùng chậu, vô sinh do tắc ống dẫn trứng, thai ngoài tử cung, viêm dính quanh gan (Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) . Tỷ lệ thay đổi từ 2-37% thai phụ bị nhiễm sẽ tăng nguy cơ sẩy thai, sanh non, nhiễm trùng hậu sản (Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) . Cũng như vậy ở phụ nữ nạo hút thai sẽ tăng nguy cơ nhiễm trùng sau hút nạo, viêm vùng chậu, vô sinh sau này do vi khuẩn di chuyển lên đường sinh dục trên trong quá trình sanh hay hút nạo và tái hoạt động do gặp môi trường thuận lợi cho sự phát triển (Error! Reference source not found.) . Trẻ sơ sinh sanh ngả âm đạo nếu mẹ bị nhiễm mà chưa điều trị có nguy cơ viêm kết mạc mắt (20-40%), viêm phổi(10-20%) (Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) . Chi phí cho việc điều trị biến chứng này rất lớn chỉ sau HIV, trong khi điều trị nhiễm vô cùng đơn giản (Error! Reference source not found.) . CDC 2005 khuyến cáo nên tầm soát bệnh lây truyền qua đường tình dục một cách thường qui mỗi năm cho những phụ nữ có quan hệ tình dục dưới 25 tuổi đặc biệt ở các đối tượng có nhiều bạn tình, có bạn tình mới trong vòng 3 tháng hay giao hợp không bảo vệ, thai phụ 3 tháng đầu hay 3 tháng cuối thai kỳ, những phụ nữ muốn chấm dứt thai kỳ trong 3 tháng đầu (8,19) . Nếu bị nhiễm nên điều trị luôn cả bạn tình của họ với cùng một phác đồ (Error! Reference source not found.) . Việc chẩn đoán nhiễm C. trachomatis chủ yếu dựa vào xét nghiệm cận lâm sàng, tùy theo phương pháp xét nghiệm và loại bệnh phẩm mà tính giá trị của chẩn đoán khác nhau (Error! Reference source not found.) . Chi phí cho các xét nghiệm cao và thời gian thực hiện lâu chưa đáp ứng nhu cầu chẩn đoán và điều trị đặc biệt ở nước ta thu nhập bình quân trên đầu người còn thấp. Năm 2001, tổ chức y tế thế giới (WHO) khuyến cáo nên sử dụng xét nghiệm nhanh (EIA) chẩn đoán nhiễm C. trachomatis cho các nước có nền kinh tế chưa phát triển và nhất là cho cộng đồng dân số có nguy cơ trung bình và cao bị nhiễm bệnh. Chúng tôi thực hiện nghiên cứu này trên các đối tượng đến phá thai trong 3 tháng đầu thai kỳ, nhằm sơ bộ khảo sát tính giá trị của test nhanh (EIA) so với phương pháp PCR, đồng thời cũng tìm hiểu tỷ lệ cũng như một số yếu tố liên quan đến viêm cổ tử cung do C. trachomatis ở đối tượng này. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Trong thời gian từ 1/8/2007 đến 10/8/2007, chúng tôi thực hiện một nghiên cứu cắt ngang trên 203 thai phụ đến nạo hút thai trong 3 tháng đầu thai kỳ từ ngày 3-10/8/2007 tại khoa kế hoạch hóa gia đình bệnh viện Từ Dũ. Mẫu được chọn theo kiểu không xác suất ở các khách hàng muốn chọn hút thai trong 3 tháng đầu thai kỳ. Mẫu được tính theo công thức: Z (1 - /2) = 1,96 ở độ tin cậy 95% p= độ nhạy là 86,5% (5) d = 5% (sai số cho phép) Tính ra n=180, chúng tôi đã tiến hành 203 trường hợp test nhanh và PCR. Mỗi khách hàng sẽ được phỏng vấn theo bảng câu hỏi được thiết kế sẵn, ước lượng tuổi thai, khám mỏ vịt xem tình trạng cổ tử cung và thu thập bệnh phẩm kênh cổ tử cung bằng 2 que gòn vô trùng. Sau khi lau sạch cổ ngoài bằng bông gòn hay gạc vô trùng, cho que gòn vào kênh cổ tử cung sâu 1- 1,5cm cho đến khi không thấy đầu que phết nữa, quay nhiều vòng trong 10- 30 giây để lấy tế bào, tránh chạm que gòn vào thành âm đạo (Error! Reference source not found.) . Test nhanh (One- Step Chlamydia) sẽ thực hiện ngay tại chổ, que còn lại sẽ được bảo quản trong môi trường chuyên chở, giữ trong tủ lạnh 4 độ C và chuyển tới viện Pasteur trong ngày. Số liệu được phân tích bằng phần mềm SPSS 15.0 và Stata 9.0. Nghiên cứu không vi phạm y đức vì thai phụ được giải thích rõ mục tiêu nghiên cứu, có đọc và ký tên vào bản đồng thuận, và không phải trả tiền xét nghiệm mà biết được có nhiễm C. trachomatis hay không để được điều trị thích hợp. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Trong 1 tuần lấy số liệu, có tất cả 203 phụ nữ hút thai 3 tháng đầu thai kỳ tại khoa kế hoạch hóa gia đình bệnh viện Từ Dũ, đa số không có triệu chứng lâm sàng nhiễm C. trachomatis với các đặc điểm được mô tả ở (bảng 1). Tuổi trung bình của phụ nữ hút thai trong nhóm nghiên cứu là 27,85  6,275 (18 đến 45 tuổi), chủ yếu dưới 30 tuổi chiếm 70,4%. 78,3% có địa chỉ ở thành phố, đang sống với chồng 81,8%, đa số có một bạn tình, đã sanh 1 lần, hầu hết là chưa hút thai trước đây, không có tình trạng mù chữ, đại học chiếm 19,2%, công việc trọn thời gian 69%, phần lớn có mức sống trung bình chiếm 65,5%. Bảng 1: Đặc điểm chung của đối tượng tham gia nghiên cứu Đặc điểm T ần suất Tỷ lệ(%) T ỷ lệ cộng dồn (%) Tuổi: 27,85  6,275 Lứa tuổi 18-25 26-35 36-45 86 87 30 42,4 42,8 14,8 42,4 85,2 100 Địa chỉ Thành phố Nông thôn 159 44 78,3 21,7 78,3 100 Hôn nhân Độc thân Đang ở với chồng Li thân 34 166 3 16,7 81,8 1,5 16,7 98,5 100 Tình trạng Cấp 1 Cấp 2 17 72 8,4 35,5 8,4 43,8 học vấn: Cấp 3 Đại học 75 39 36,9 19,2 80,8 100 Sinh viên 16 7,9 7,9 N ội trợ 35 17,2 25,1 Làm tr ọn thời gian 140 69,0 94,1 Ngh ề nghiệp Làm bán thời gian 12 5,9 100 Kinh t ế gia đình: Giàu Khá Trung bình 1 69 65,5 0,5 34,0 65,5 0,5 34,5 100 KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM: Bảng 2: Tính giá trị của test nhanh EIA qua 203 trường hợp nghiên cứu Độ nhạy Độ chuyên Độ tiên đoán Dương âm 62,5% 99,5% 90,9% 96,9% Nhận xét: Qua 203 trường hợp nghiên cứu có 16 phụ nữ viêm cổ tử cung do C. trachomatis. Về mặt thống kê, test nhanh có tương quan rõ rệt với viêm cổ tử cung do C. trachomatis với p=0,000 (kiểm định Fisher). So với PCR, test nhanh có độ nhạy 62,5%, độ đặc hiệu 99,5%, giá trị dự báo dương 90,9%, giá trị dự báo âm 96,9%, khả năng mắc bệnh trước test nhanh (tần suất bệnh) là 7,9%, khả năng mắc bệnh sau test nhanh (+): 90,91%, khả năng mắc bệnh sau test nhanh (-): 3,125%. Với độ mạnh của chẩn đoán phù hợp ở mức độ vững chắc (chỉ số Kappa = 0,723)(bảng 2). Khảo sát một số yếu tố liên quan độc lập với viêm cổ tử cung do C. trachomatis ở phụ nữ hút thai. (Bảng 3) Bảng 3: Yếu tố nguy cơ độc lập khi chẩn đoán viêm CTC do C. trachomatis bằng PCR Yếu tố nguy cơ PR (prevalence ratio) và 95% CI Giá trị p Tuổi 18-25 Hôn nhân Sống tại th ành 4,581 (1,423- 14,744) 0,007 0,421 0,004 [...]... cấp Test nhanh (EIA) là xét nghiệm sắc ký miễn dịch dùng kháng thể đơn hay đa dòng được đánh dấu bằng enzyme, phát hiện kháng nguyên LPS chọn lọc C trachomatis trong cổ tử cung và niệu đạo có kết quả nhanh trong vòng 15 phút đã được áp dụng nhiều nơi trên thế giới và tại Việt Nam đã sử dụng nhiều trong những năm gần đây Qua nghiên cứu trên 203 trường hợp hút thai 3 tháng đầu thai kỳ test nhanh đã phát... chuyên dương âm Chlamydiazyme(Error! 416(p=20,4) 87,8% 84,6% 100% 99,6% 965(p=4,5) 74,4% 99,6% 88,9% 98,8% Reference source not found.) Chlamydiazyme (Error! Reference source not found.) 965(p=4,5) ClearviewChlamydia(Error! 376(p=17,5) 79% 99,6% 93,5% 99% 89,5% 99% 95,4% 98,7% Reference source not found.) 1694(p=11,6) 72,9% 97,4% ClearviewChlamydia(Error! Reference source not found.) TestPack Chlamydia( Error!... hợp viêm cổ tử cung do C trachomatis, 1 trường hợp dương tính giả Tính giá trị của test nhanh là độ nhạy 62,5%, độ đặc hiệu 99,5%, giá trị dự báo dương 90,9%, giá trị dự báo âm 96,9%, khả năng mắc bệnh trước test nhanh (tần suất bệnh) là 7,9%, khả năng mắc bệnh sau test nhanh( +): 90,91%, khả năng mắc bệnh sau test nhanh( -): 3,125% Với độ mạnh của chẩn đoán phù hợp ở mức độ vững chắc (chỉ số Kappa = 0,723)... của người tham gia nghiên cứu Bảng 4: So sánh tính giá trị của một số xét nghiệm EIA so với PCR: Test EIA so vớiCỡ PCR mẫu tầnĐộ Giá trị tiên đoán Độ suất(%) nhạy chuyên dương âm Optical 787(p=8,4) 50% 100% 100% 91,7% immunoassay(19) 1384(p=10,7 64,2% 99,1% 89,6% 95,9% One-Step 203(p=7,9) 62,5% 99,5% 90,9% 96,9% ClearviewEIA(11) Chlamydia( PVĐ) Bảng 5: So sánh giá trị của EIA với nuôi cấy: Giá Test... dương tính của Phamatech OneStep Chlamydia test® là 107 CFU/ml (CFU: colony forming unit) Còn với mẫu nước tiểu đầu dòng ngưỡng của PCR là 2EB/ml (EB: elementary bodies) trong khi với ChlamydiaEIA và miễn dịch huỳnh quang là 2x103EB/ml(Error! Reference source not found.) Am tính giả trong nghiên cứu này 6/16 cao hơn trong nghiên cứu của Jones và cộng sự sử dụng test EIA (Chlamydiazyme®) trên 416 đối tượng... chích xác Fisher thấy có mối liên quan giữa viêm cổ tử cung do C.trachomtis với việc không sử dụng hay không dùng thường xuyên bao cao su trong quan hệ với (p=0,01) Trong nghiên cứu của chúng tôi có làm xét nghiệm đếm công thức bạch cầu và CRP để chẩn đoán nhiễm trùng hiện tại, kết quả là có 3 trường hợp nhiễm C trachomatis có dấu nhiễm trùng trên cận lâm sàng, ngoài ra không có trường hợp nào khác có CRP... trachomatis rất quan trọng và có ảnh hưởng dư hậu sinh sản về sau, mà việc điều trị di chứng này rất tốn kém mà đôi khi không hiệu quả So với PCR, test nhanh có độ nhạy 62,5%, độ đặc hiệu 99,5%, giá trị dự báo dương 90,9%, giá trị dự báo âm 96,9% Test nhanh EIA đơn giản, phuc vụ cho nhu cầu chẩn đoán và điều trị trên lâm sàng mà giá thành thấp phù hợp điều kiện kinh tế trong nước Tuy nhiên độ nhạy chưa... có độ nhạy thấp 50-80% so với khuếch đại, mặc dù có độ đặc hiệu của phương pháp nuôi cấy là 100% nhưng khó áp dụng thường quy trên lâm sàng do kỹ thuật chưa được chuẩn hóa, khác nhau giữa các phòng thí nghiệm, đòi hỏi trình độ kỹ thuật viên, điều kiện vận chuyển nghiêm ngặt, thời gian kết quả lâu (3-5 ngày)(Error! Reference source not found.,Error! Reference source not found.) Tuy vậy các phương pháp... với cùng phương pháp khuếch đại DNA cho thấy không có sự khác biệt giữa nghiên cứu của chúng tôi với các tác giả khác (bảng 4) Khi sử dụng khuếch đại DNA làm tiêu chuẩn chẩn đoán thì độ nhạy của test nhanh (EIA) sẽ giảm hơn so với phương pháp nuôi cấy do độ nhạy của phương pháp này kém hơn PCR (bảng 5) Trong nghiên cứu của ClearviewEIA® so với nuôi cấy trên các cộng đồng khác nhau cho thấy: với p=5%... quan 0,799 hệ 0,01 Số bạn tình 0,754 Không dùng bao 0,188 cao su (0,052-0,206 0,682) 0,102 Số lần sanh 0,000 Số lần hút thai Tiền căn viêm chậu 0,813 CRP+ (0,642- 1,028) Kiểm định chính xác Fisher Nhận xét: Dùng phép kiểm định chính xác fisher với p>0,05 cho thấy không có mối liên quan giữa viêm cổ tử cung do C trachomatis với tình trạng hôn nhân, học vấn, nghề nghiệp và kinh tế gia đình, tuổi bắt đầu . XÉT NGHIỆM NHANH CHLAMYDIA TÓM TẮT Mục tiêu: Xác định tính giá trị của test nhanh bằng phản ứng miễn dịch men (EIA: Enzyme Immunoassay) trong chẩn đoán nhiễm Chlamydia trachomatis. dựa vào xét nghiệm cận lâm sàng, tùy theo phương pháp xét nghiệm và loại bệnh phẩm mà tính giá trị của chẩn đoán khác nhau (Error! Reference source not found.) . Chi phí cho các xét nghiệm cao. 34,5 100 KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM: Bảng 2: Tính giá trị của test nhanh EIA qua 203 trường hợp nghiên cứu Độ nhạy Độ chuyên Độ tiên đoán Dương âm 62,5% 99,5% 90,9% 96,9% Nhận xét: Qua 203 trường