Luận văn : ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN MBP-VT2eB TRÊN HEO part 6 pptx

37 37 PHẦN 6 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT 1. Bùi Thị Cẩm Thuý, 2002. Nghiên cứu thu nhận virus dại từ nuôi cấy tế bào vero dòng thường trực. Khoá luận cử nhân khoa học ngành Sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên TP. Hồ Chí Minh. 2. Nguyễn Ngọc Hải, 1999. Phân lập vi khuẩn E. coli gây bệnh phù trên heo cai sữa và khảo sát khả năng nhạy cảm của chúng đối với một số kháng sinh. Luận án thạc sĩ Khoa học Nông nghiệp. Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh . 3. Lê Thanh Hòa, 2004. Bài giảng miễn dịch học và ứng dụng. Viện công nghệ sinh học Hà Nội. 4. Lê Văn Hùng, 2002. Giáo trình miễn dịch học thú y. NXB Nông Nghiệp. 5. Đỗ Ngọc Liên, 1999. Miễn dịch học cơ sở. NXB Đại học Quốc Gia Hà Nội. 6. Trần Ngọc Phƣơng, 2003. Nghiên cứu các điều kiện tối ưu để sản xuất độc tố VT2eB tái tổ hợp. Khoá luận cử nhân khoa học ngành Công nghệ Sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên TP. Hồ Chí Minh. TIẾNG NƢỚC NGOÀI 7. Bosworth, B. T., Samuel J. E., Moon H. W., O’Brien A. D., Gordon V. M. and Whipp S. C., 1996. Vaccination with Genetically Modified Shiga-like Toxin-IIe prevents Edema Disease in Swine. Infec. Immun. p: 55-66. 8. Gentry and Dalrymple, 1980. Quantitative Microtiter Cytotoxicity Assay Shigella Toxin. J. Clin. Microbiol. p: 361-366. 9. Gordon V. M., Whipp S. C., Moon H. W., O’Brien A. D and Samuel J.E.,1992. An Enzymatic Mutant of Shiga-like toxin-II Variants Is a Vaccine Candidate for Edema Disease of Swine. Infect. Immun. p:485-490. 10. Guigo Grandi, 2004. Genomics, Proteomics and Vaccines. John Wiley & Sons, Ltd. p:7-11 11. James C. Paton and Adrienne W. Paton,1998. Pathogenesis and Diagnosis of Shiga Toxin-Producing Escherichia coli Infections. J. Clin. Microbiol, p:450- 479. 12. Konowalchuk J., Speirs J. I., and Stavric S., 1977. Vero Response to a Cytotoxin of Escherichia coli. Infect. Immun. 18. p:775-779. 38 38 13. Rebecca Sheets, 2000. History and Characterization of Vero Cell Line. A Report for the Vaccines and Related Biological Advisory Committee. 14. Salmuel J. E., Perera L. P., Ward S., O’ Brien A. D., Ginsburg V., and Krivan H.C., 1990. Comparision of the Glycolipid Receptor Specificities of Shiga- Like Toxin Type II and Shiga-Like Toxin II Variants. Infect. Immun. p: 611- 618. 15. Tizard Ian R . 1991. Immunology introduction. 3 rd edition, A Harcourt Brace Jovanovich, Florida, USA. 16. Tyler S.D., Jonhnson W.M., Lior H., Wang G., and Rozee K. R., 1991. Identification of Verotoxin Type 2 Variant B Subunit genes in Escherichia coli by the Polymerase Chain Reaction and Restriction Fragment Length Polymorphism Analysis. J. Clin. Microbiol. p: 1339-1343 Trang Web 16.http://www.brown.edu/courses/bio-160/projects-1999/vaccinesoverview/ vaccinesoverviewbody.html 17.http://avdi.allenpress.com 39 39 PHẦN 7 PHỤ LỤC Thành phần các hóa chất Môi trƣờng DMEM ( lƣợng glucose cao) AMINO ACID L-Glutamine 584mg/l L-Valine 94mg/l L-Tyrosine +2Na+ 2H 2 O 103,79mg/ml L-Tryptophan 16mg/ml L-Threonine 95mg/ml L-Serine 42mg/ml L-Phenylalanine 66 mg/ml L-Methyonine 30 mg/ml L-Lysine + HCl 146 mg/ml L-Isoleusine 105 mg/ml L-Leusine 105 mg/ml L-Histidine+HCl+H 2 O 42 mg/ml L-Cystine + 2HCl 62,6 mg/ml L-Arginine+HCl 84 mg/ml Glycine 30 mg/ml MUỐI VÔ CƠ CaCl 2 6400 mg/ml Sodium Phosphate MonobasicAnhydrous 109 mg/ml NaCl 400 mg/ml Magnesium sulphate anhydryous 97,67 mg/ml Ferric nitrate Nonanhydrate 0,1 mg/ml Calcium chloride dihydrate 265 mg/ml VITAMINS Thiamine+HCl 4mg/ml Riboflavin 0,4 mg/ml 40 40 Nicotiamide 4 mg/ml Myo-inositol 7,2 mg/ml Folic acid 4 mg/ml D-Ca pantothenate 4 mg/ml Choline chloride 4 mg/ml Pyrodoxal + HCl 4 mg/ml CÁC THÀNH PHẦN KHÁC Pyruvic acid.Na 110 mg/ml Phenol red 15,9 mg/ml D-Glucose 4500 mg/ml Đệm Borat Axit boric: 1,2336g H 2 O: 200ml pH: 8,5 Đệm PBS (phosphate buffer salin) NaCl: 8g NaH 2 PO 4 .2H 2 O: 0,4g NaHPO 4 .12H 2 O: 2,5g H 2 O: 1000ml 41 41 Bảng phân tích biến lƣợng tăng trọng heo thí nghiệm One-Way Analysis of Variance Data: TLG.tlg Level codes: TLG.lo Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f. Mean square F-ratio Sig. level Between groups 1.056429 4 .2641071 .195 .9374 Within groups 21.661667 16 1.3538542 Total (corrected) 22.718095 20 Table of means for TLG.tlg by TLG.lo Stnd. Error Stnd. Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 1 5 6.7400000 .3906405 .5203564 5.9597925 7.5202075 2 3 7.0666667 .4630815 .6717773 6.0594231 8.0739102 3 4 6.6250000 .7962150 .5817762 5.7527015 7.4972985 4 5 7.1200000 .3484250 .5203564 6.3397925 7.9002075 5 4 6.5750000 .7792892 .5817762 5.7027015 7.4472985 Total 21 6.8238095 .2539079 .2539079 6.4431072 7.2045118 Multiple range analysis for TLG.tlg by TLG.lo Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 5 4 6.5750000 X 3 4 6.6250000 X 1 5 6.7400000 X 2 3 7.0666667 X 4 5 7.1200000 X contrast difference limits 1 - 2 -0.32667 1.80181 1 - 3 0.11500 1.65507 1 - 4 -0.38000 1.56041 1 - 5 0.16500 1.65507 2 - 3 0.44167 1.88438 2 - 4 -0.05333 1.80181 2 - 5 0.49167 1.88438 3 - 4 -0.49500 1.65507 * denotes a statistically significant difference. 42 42 ĐC (*) 0.898 (1) 0.939 (2) 0.752 (3) 0.798 (4) 1/2048 0.9 1.02 0.882 0.825 0.852 1.022 1/1024 0.915 0.968 0.945 0.886 0.931 1.036 1/512 0.855 0.928 0.96 0.877 0.922 0.927 1/256 0.894 0.912 0.89 0.388 0.91 1 1/128 0.901 0.956 0.922 0.842 0.592 0.852 1/64 0.818 0.838 0.879 0.054 0.549 0.504 1/32 0.535 0.821 0.412 0.044 0.389 0.045 1/16 1 0.048 0.506 0.044 0.403 0.046 1/8 0.199 0.044 0.045 0.085 0.356 0.055 ¼ 0.276 0.046 0.048 0.058 0.388 0.044 ½ 0.482 0.098 0.234 0.219 0.266 0.071 Mẫu (*) 88.5D 89.5D 90.4D 92.1A 92.2D 93.2D Bảng 3. Kết quả đo OD620nm đối với mẫu có sodium azid (1) Đối chứng âm phiến 1. (2) Đối chứng dƣơng phiến 1. (3) Đối chứng âm phiến 2. (4) Đối chứng dƣơng phiến 2 (*) 88.5D, 89.5D,90.4D, 92.2D, 93.2D là các mẫu của lô 5, 92.1A là lô đối chứng. 43 43 ĐC (*) 0.667(1) 0.212 (2) 0.704 (3) 0.138 (4) 1/128 0.136 0.13 0.112 0.124 0.131 0.1 0.098 0.165 0.155 0.138 0.173 1/64 0.154 0.158 0.102 0.111 0.131 0.131 0.11 0.164 0.142 0.165 0.143 1/32 0.139 0.134 0.144 0.12 0.116 0.134 0.11 0.143 0.112 0.071 0.111 1/16 0.142 0.163 0.133 0.105 0.151 0.104 0.11 0.172 0.119 0.047 0.145 1/8 0.133 0.174 0.16 0.107 0.157 0.133 0.171 0.165 0.091 0.062 0.094 ¼ 0.152 0.18 0.107 0.101 0. 136 0.164 0.154 0. 152 0.114 0.194 0.093 ½ 0.157 0.157 0.127 0.088 0.09 0.106 0.121 0.159 0.118 0.481 0.1 Mẫu A14 A24 B64 B54 C44 C54 D44 A44 B14 B34 B44 Bảng 4. Kết quả đo OD620nm đối với mẫu không có sodium azid (5) Đối chứng âm phiến 1. (6) Đối chứng dƣơng phiến 1. (7) Đối chứng âm phiến 2. (8) Đối chứng dƣơng phiến 2 . 5 6. 7400000 .39 064 05 .5203 564 5.9597925 7.5202075 2 3 7. 066 666 7 . 463 0815 .67 17773 6. 0594231 8.0739102 3 4 6. 6250000 .7 962 150 .5817 762 5.7527015 7.4972985 4 5 7.1200000 .3484250 .5203 564 6. 3397925. 5 4 6. 5750000 X 3 4 6. 6250000 X 1 5 6. 7400000 X 2 3 7. 066 666 7 X 4 5 7.1200000 X contrast difference limits 1 - 2 -0.3 266 7 1.80181 1 - 3 0.11500 1 .65 507 1 - 4 -0.38000 1. 560 41 1. 92.2D 93.2D Bảng 3. Kết quả đo OD620nm đối với mẫu có sodium azid (1) Đối chứng âm phiến 1. (2) Đối chứng dƣơng phiến 1. (3) Đối chứng âm phiến 2. (4) Đối chứng dƣơng phiến 2 (*) 88.5D, 89.5D,90.4D,