Luận văn thạc sĩ Bảo vệ thực vật: Nghiên cứu tác nhân gây bệnh đen xơ trên mít thái (Srtocarpus heterophyllus Lam.) và khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano

Mục tiêu của nghiên cứu là xác định được tác nhân gây bệnh đen xơ mít Thái, khả năng gây hại của bệnh trên một số giống mít khác và đánh giá được khả năng phòng trừ của một sô vật liệu n

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LAM TP HO CHÍ MINH

3% 2 2 dị aK ee s 3š 2 9 oe 9k ie €3 sÉ 3€ oe ok ok ok

DINH THI THAO QUYEN

LUẬN VĂN THẠC Si KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HÒ CHÍ MINH

NGHIÊN CỨU TÁC NHÂN GÂY BỆNH ĐEN XƠ TRÊN

MIT THÁI (4rtocarpus heferophyllus Lam.)

VÀ KHẢ NĂNG PHÒNG TRỪ CỦA

MỘT SÓ VẬT LIỆU NANO

ĐINH THỊ THẢO QUYÊN

Hội đồng chấm luận van:

1 Chủ tịch: TS VÕ THỊ THU OANH

Hội Bảo vệ Thực vật

2 Thư ký: TS LÊ THỊ DIỆU TRANG

Trường Đại học Nông Lâm TP HCM

3 Phản biện 1: TS PHAN CÔNG KIÊN

Viện Nghiên cứu Bông và Phát triển Nông nghiệp Nha Hồ

4 Phản biện 2: TS NGUYÊN VŨ PHONG

Trường Đại học Nông Lâm TP HCM

5 Ủy viên: PGS TS NGUYEN BAO QUOC

LÝ LỊCH CÁ NHÂN

Tôi tên là Dinh Thị Thảo Quyên, sinh ngày 05 tháng 05 năm 1998 tai huyện

Cần Giuộc, tỉnh Long An

Tốt nghiệp PTTH tại Trường Trung học phổ thông Đông Thanh, tỉnh Long An

Thang 10 năm 2020 theo học Cao học ngành Bảo vệ thực vật tại trường Đại học

Nông Lâm, Thủ Đức, thành phố Hồ Chí Minh

Địa chỉ liên lạc: Ấp Trung, xã Đông Thạnh, huyện Cần Giuộc, tỉnh Long An

Điện thoại: 0793800139

Email: dttq1998@gmail.com

1

LỜI CẢM ƠN

Đề hoàn thành luận văn này, tôi xin chân thành cam ơn TS Võ Thị Ngọc Hà,

Khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh đã tận tìnhhướng dẫn và giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu này

Con Dinh Thị Thảo Quyên kính gửi lời cảm ơn chân thành đến cha mẹ đã chămsóc, yêu thương, động viên, tạo mọi điều kiện và giúp đỡ con trong suốt quá trình họctập và trưởng thành của con Cảm ơn anh Hai, anh Ba và em Út đã luôn bên cạnh tôi

Cảm ơn đến anh chị lớp Cao học BVTV 2020, Lab 105, các em sinh viên lớpBVTVI8 đã luôn giúp đỡ, hỗ trợ tôi trong suốt quá trình làm đề tai tại trường

Xin trân trọng cam ơn!

Tp Hồ Chí Minh,ngày tháng năm 2022

Dinh Thi Thảo Quyên

LỜI CAM ĐOAN

Tôi cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi.

Trong nội dung có sử dụng đữ liệu trong đề tài “Nghiên cứu tác nhân gây bệnhđen xơ mít tại một số tỉnh phía nam và đề xuất giải pháp phòng trừ” được sự đồng ýcủa giáo viên hướng dẫn, là chủ nhiệm đề tài

Các số liệu, kết quả nêu trong luận van là trung thực và chưa từng được ai công

bố trong bat kỳ công trình nao khác

Tp Hồ Chí Minh,ngày tháng năm 20222

Chủ nhiệm đê tài Người viet cam đoan

Võ Thị Ngọc Hà Dinh Thị Thảo Quyên

iv

TÓM TẮT

Đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu tác nhân gây bệnh đen xơ trên mít Thái(Artocarpus heterophyllus Lam.) và khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano”được tiến hành tai phòng thí nghiệm Bệnh cây, bộ môn Bảo vệ thực vật, trường Đạihọc Nông Lâm Thành phó Hồ Chi Minh, thời gian từ tháng 02 đến tháng 12 năm

2022 Mục tiêu của nghiên cứu là xác định được tác nhân gây bệnh đen xơ mít Thái,

khả năng gây hại của bệnh trên một số giống mít khác và đánh giá được khả năng

phòng trừ của một sô vật liệu nano.

Vi khuẩn được phân lập từ các mẫu mít Thái bị bệnh đen xơ thu tại các khuvực Lâm Đồng, Đồng Nai, TP Hồ Chí Minh, Long An và Tiền Giang Vi khuan gâybệnh được định danh bằng các đặc điểm hình thái, sinh hóa theo Gapasin va ctv(2014), và bằng kỹ thuật sinh học phân tử dựa trên trình tự vùng gen tổng hợp đường

đa (CPS) và vùng gen độc lực (HRP) Thí nghiệm đánh giá hiệu lực của các vật liệu

nano với bệnh den xơ mít Thái được tiến hành song song trong hai điều kiện, trongphòng thí nghiệm theo phương pháp khuếch tán đĩa thạch và ngoài đồng theo thínghiệm khối đầy đủ ngẫu nhiên

Kết qua phân lập được các dòng vi khuẩn Pantoea stewartii subsp stewariii,tạo ra mang sắc tố vàng hoặc trắng trên môi trường nuôi cấy, Gram âm, không diđộng, hình que ngắn, có hệ enzyme catalase, vi khuẩn không có hệ enzyme oxide,không sinh indole trong môi trường có bổ sung tryptone, thủy phan gelatin và tinh

bột nhưng không thủy phân tween 80, tạo ra axit từ glucose, sucrose va lactose va

không tao ra phan ứng man cảm với cây thuốc lá Kết quả định đanh bằng kỹ thuậtsinh học phân tử sử dụng cặp mỗi CPSL1/CPSR2c và HRP1d/HRP3c dé xây dựngcây phát sinh loài đã khang định các dòng vi khuân phân lập là Pantoea stewartii

đồng của AgNPs - CMC (0,008%), AgNPs - cts (0,004%), AgNPs - cts (0,008%) có

khả năng kiểm soát bệnh trên xơ và trên múi so với đối chứng và AgNPs - CMC

(0,004%).

VI

The research on "Research on the causative agent of jackfruit bronzing disease

on Thai jackfruit (Artocarpus heterophyllus Lam.) and prevention ability of some nanomaterials" was performed at the Laboratory and Experimental Camp, Department of Plant Protection, Faculty of Agronomy, Nong Lam University Ho Chi Minh City, from February to December 2022 The objective of the study was to accurately determine the causative agent of jackfruit bronzing disease, its ability to cause damage on other jackfruit varieties, and evaluate the prevention ability of some nanomaterials.

Bacteria were isolated from samples of Thai jackfruit with jackfruit bronzing disease collected in Lam Dong, Dong Nai, Ho Chi Minh City, Long An and Tien Giang province Pathogenic bacteria were identified by morphological and biochemical characteristics according to Gapasin et al, (2014), and by molecular

biology techniques based on the sequence of polycomplex sugar (CPS) and virulence

gene regions (HRP) The experiment to evaluate the efficacy of nanomaterials with Thai jackfruit bronzing disease was conducted in parallel under two conditions, in the laboratory by agar plate diffusion method and in the field by a randomized completely block design experiment.

Results of isolation and selection of 69 strains of Pantoea stewartii subsp stewartii, the bacterrum produces yellow or white pigment in culture, Gram negative, non-motile, anaerobic short-rods, catalase positive, not produce enzyme oxidase, no indole production in medium supplemented with tryptone, hydrolyzes gelatin and starch but not tween 80, produces acid from glucose, sucrose and lactose and not produce

hypersensitivity to tobacco The results of identification by molecular biology

techniques using primer pairs CPSLI/CPSR2c and HRPId/HRP3c to build phylogenetic trees confirmed that the isolates Pantoea stewartii subsp stewartii were causes jackfruit bronzing disease When the strain on jackfruit variety La bang

showed more obvious disease symptoms than jackfruit To nu and jackfruit Nghe All nanomaterials were tested for poor potency The results were recorded when using the field of AgNPs - CMC (0,008%), AgNPs - cts (0,004%), AgNPs - cts (0,008%) effective in controlling the disease on fiber and on the fascia compared with the control and AgNPs - CMC (0,004%).

vill

Nhận xét của cán bộ hướng dẫn VTóm tắt VI

Summary 1X

Mục lục x

Danh sách chữ viết tắt xu

Danh sách các hình XxII Danh sách các bảng XV

MỞ ĐẦU |

1 TONG QUAN 31.1 Tổng quan về cây mít 3

1.1.1 Phân loại khoa học 3

1.1.2 Nguồn gốc, phân bồ và giống 31.1.2.1 Nguồn gốc và phân bố 31.1.2.2 Giống mít 41.1.3 Giá trị dinh dưỡng và giá trị kinh tế 4

1.1.3.1 Giá trị dinh dưỡng 4

1.1.5.4 Dinh dưỡng 9

1.2 Bệnh đen xơ mít

1.2.1 Tác nhân gây bệnh

1.2.2 Điều kiện phát sinh, phát hiện bệnh

1.2.3 Triệu chứng gây hại

1.2.4 Các biện pháp phòng trừ

1.3 Vật liệu nano

2 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian và địa điểm

2.2 Nội dung nghiên cứu

2.3 Vật liệu, dụng cụ nghiên cứu

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp thu thập mẫu bệnh đen xơ

2.4.2 Phương pháp phân lập vi khuẩn gây bệnh den xơ trên mít Thái

2 9

12

14 16

17

23 23 23

23 24

24 25

2.4.3 Định danh vi khuẩn gây bệnh đen xơ mít bằng các đặc điểm hình thái và phản

ứng sinh hóa

2.4.3.1 Nhuộm Gram xác định vi khuẩn Gram âm, Gram dương

2.4.3.2 Xác định Gram âm, Gram dương bằng dung dịch KOH 3%

2.4.3.3 Khả năng di động của vi khuẩn

2.4.3.4 Chủng bệnh trên mít theo quy tắc Koch

2.4.3.5 Thử nghiệm Catalase

2.4.3.6 Thử nghiệm Kovac’s Oxidase

2.4.3.7 Thử nghiệm Indole

2.4.3.8 Thủy phan tinh bột

2.4.3.9 Thuy phan Tween 80

2.4.3.10 Thuy phan Gelatine

2.4.3.11 Phan ứng oxi hóa carbohydrate (Glucose, Sucrose, Lactose)

2.4.3.12 Thử nghiệm độ man cảm với cây thuốc lá

2.4.4 Định danh vi khuẩn gây bệnh den xơ bang kỹ thuật sinh học phân tử

2.4.4.1 Phương pháp ly trích DNA

2.4.4.2 Phản ứng PCR

25

26 26

27

27

29

29 29 30 30 30 31

31 32

32 33

2.4.5 Đánh giá khả năng gây bệnh của các dòng vi khuẩn trên một số giống mít khác

trong phòng thí nghiệm 35

2.4.6 Đánh giá hiệu lực phòng trừ của một số vật liệu nano trong phòng thí nghiệm

và ngoài đồng 372.4.6.1 Đánh giá hiệu lực phòng trừ vật liệu nano trong phòng thí nghiệm bằng

phương pháp khuếch tán giếng thạch 372.4.6.2 Đánh giá khả năng phòng trừ của một số loại vật liệu nano đối với tác nhân

gay bệnh đen xơ mít ngoài đồng ruộng 38

3 KẾT QUÁ VÀ THẢO LUẬN 413.1 Định danh vi khuẩn gây bệnh đen xo mit bằng các đặc điểm hình thái và phản

3.2 Định danh vi khuẩn gây bệnh đen xơ mít bằng kỹ thuật sinh học phân tử 51

3.2.1 Đối với mồi CPSL1/CPSR2c 51

3.2.2 Đối với mồi HRP 1d/HRP3c 543.3 Đánh giá khả năng gây bệnh của dòng vi khuẩn Pantoea stewartii trên một số

giống mít 573.4 Kha năng phòng trừ của một số vật liệu nano trong điều kiện phòng thí nghiệm

và ngoài đồng 613.4.1 Khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano trong điều kiện phòng thi nghiệm

trên môi trường thạch 61

3.4.2 Kha nang phòng trừ của một số vat liệu nano trong điều kiện ngoài đồng 63KET LUẬN VA DE NGHỊ 67TAI LIEU THAM KHAO 68

PHU LUC 73

DANH SÁCH CHU VIET TAT

MLSA Multilocus sequence analysis

DOA Department of Agriculture of Malaysia

P stewartii Pantoea stewartii

NSKDT Ngay sau khi đậu trái

NPs Nanoparticles

CMC Carboxymethyl cellulose

TAE Tris Acetate EDTA

PCR Polymerase Chain Reaction

Xil

DANH SÁCH CÁC HÌNH

HÌNH TRANGHình 1.1 Vi khuẩn Pantoea stewartii trên môi trường nuôi cay (a) Nutrient Broth (b)

King’s B 11

Hình 1.2 Một số triệu chứng bat thường xuất hiện trên trái mít 14Hình 1.3 Các đốm bệnh xuất hiện trên mít 15Hình 1.4 Hoạt động kháng khuẩn của các hat nano bạc 18

Hình 2.1 Cac mức độ bệnh đen xo trên múi 28

Hình 2.2 Đánh giá cấp độ bệnh của múi mít 36Hình 2.3 Phương pháp khuếch tán giếng thạch bố trí thí nghiệm trên dia petri 39Hình 3.1 Hình mẫu bệnh thu được dựa trên các triệu chứng của bệnh đen xơ mít 42Hình 3.2 Khuan lạc vi khuân phân lập từ mẫu bệnh trên môi trường KingsB 43Hình 3.3 Kết quả chủng bệnh trên mít Thái siêu sớm của chủng TG04 44Hình 3.4 Khuan lạc phân lập từ chủng bệnh múi mít trên môi trường KingsB_ 44Hình 3.5 Mẫu mít thu tại vườn sau 14 ngày chủng bệnh 47Hình 3.6 Hình bên trong quả mít chủng bệnh, xuất hiện vết bệnh đen xơ so với mẫu

đối chứng 47Hình 3.7 Hình xơ và múi mít xuất hiện triệu chứng bệnh sau khi chủng bệnh so với

đối chứng 47

Hình 3.8 Khuẩn lac phân lập từ quả mít chủng bệnh trên môi trường KingsB_ 46Hình 3.9 Kết quả điện di DNA của các mẫu vi khuẩn Pantoea stewartii bằng cặp

môi CPSL1/CPSR2c 52Hình 3.10 Cây phát sinh loài mỗi CPSL1/CPSR2c của các dòng vi khuẩn phân lập

với một số dòng trên ngân hàng gen Các giá trị bootstrap sau 1000 lần lặp lại

là thể hiện dưới dạng phần trăm 53Hình 3.11 Kết quả điện di DNA của các mẫu vi khuẩn Pantoea stewartii bằng cặp

mỗi HRP1d/HRP3c 55

Hình 3.12 Cây phát sinh loài mồi HRP1d/HRP3c của các dong vi khuan phân lập

với một số dòng trên ngân hàng gen Các giá trị bootstrap sau 1000 lần lặp lại

là thé hiện dưới dạng phan trăm 56Hình 3.13 Cấp độ bệnh của giống mít tố nữ sau 14 ngày thử nghiệm 59Hình 3.14 Cấp độ bệnh của giống mít nghệ sau 14 ngày thử nghiệm 59Hình 3.15 Cấp độ bệnh của giống mít lá bàng sau 14 ngày thử nghiệm 60Hình 3.16 Khả năng phòng trừ của các vật liệu nano ở nồng độ 1000 ppm với vi

khuẩn Pantoea stewartii 62Hình 3.17 Kha năng phòng trừ của các vật liệu nano ở nồng độ 500 ppm với vi khuan

Pantoea stewartii 62

Hinh 3.18 Anh hưởng của các loại vật liệu nano đến mức độ hiện diện vết đen trên

mui 66Hình 3.19 Ảnh hưởng của các loại vật liệu nano đến mức độ hiện diện vết đen trên

XO 66

XIV

DANH SÁCH CÁC BANG

2

BANG TRANG Bang 2.1 Chu trình nhiệt của phan ứng PCR với primer CPSL1/CPSR2c 33 Bảng 2.2 Chu trình nhiệt của phản ứng PCR với primer HRP1d/HRP3c 33

Bảng 2.3 Đặc điểm sinh trưởng của các giống mít được sử dụng cho thử nghiệm 37Bang 3.1 Kết quả của 69 dong vi khuẩn phân lập bằng các phản ứng sinhhóa 48Bảng 3.2 Các dòng vi khuẩn sử dụng định danh bằng kỹ thuật sinh học phân tử đối

với mỗi CPSL1/CPSR2c 51Bang 3.3 Các dòng vi khuẩn sử dụng định danh bằng kỹ thuật sinh học phân tử đối

với mỗi HRP1d/HRP3c 54Bảng 3.4 Đánh giá cấp bệnh của vi khuẩn Pantoea stewartii trên những giống mit

khác 58

Bang 3.5 Kha năng phòng trừ các nồng độ của vật liệu nano đối với vi khuân Pantoea

stewartii qua hai mức nồng độ thử nghiệm 63Bảng 3.6 Ảnh hưởng của một số loại vật liệu nano đến tỷ lệ đen xơ 64

Bảng 3.7 Anh hưởng của một sô vật liệu nano đên chỉ sô bệnh trên xơ vàmúi 65

MỞ ĐẦU

Đặt vẫn đề

Mit (Artocarpus heterophyllus Lam.) thuộc họ dau tam (Moraceae) có nguồngốc từ phía Tay, An Độ và được trồng phổ biến trên thế giới (Haq, 2006) Tại ViệtNam, mit được trồng phố biến từ Bắc vào Nam, trừ những vùng cao ở miền Bắc Diệntích mít cả nước năm 2020 là 59.705 ha, tăng 2,9 lần so với năm 2017 (Học việnNông Nghiệp Việt Nam, 2021) Các giống mít được trồng phổ biến hiện nay như mítNghệ, mít Tổ nữ, mít Mã Lai Mít Thái siêu sớm có nguồn gốc từ Thái Lan rất được

nông dân ưa chuộng và được trồng với quy mô lớn tại các tỉnh của ĐBSCL vì mít

Thái rất dé trồng, dé chăm sóc, ít tốn chi phí, thời gian sinh trưởng ngắn, nhanh cho

trái, năng suât cao, đậu trái quanh năm và mang lại hiệu quả kinh tê cao.

Tuy nhiên, trong thời gian gần đây bệnh đen xơ trên mít xuất hiện tại nhiều khuvực thuộc Đồng Bằng Sông Cửu Long Bệnh đen xơ khó phát hiện vì trái vẫn sinh

trưởng bình thường, nhưng khi thu hoạch trái và bé ra thì thấy xuất hiện vết bệnh màunâu đen ở xơ, múi và múi mít không ngọt Bệnh làm giảm phẩm chất trái dẫn đến

giảm giá mít thương phẩm (Cục Bảo vệ thực vật, 2021)

Đã có một số nghiên cứu về bệnh được thực hiện như Lê Văn Bé và ctv (2017)

đã nghiên cứu về biện pháp hạn chế đen xơ nhưng chưa xác định tác nhân gây bệnh

Năm 2021, Sở Khoa học và Công nghệ tỉnh Hậu Giang đã xác định bệnh đen xơ trên

mít Thái tại Hậu Giang là do vi khuan Pantoea stewartii nhưng chưa có nhiều nghiêncứu công bồ sâu hơn về đặc điểm sinh học, sinh hóa cũng như phương pháp phòng

trừ bệnh này.

Ngày nay, một số quốc gia phát triển và đang phát triển như Brazil, Mỹ, TrungQuốc, An Độ và Nam Mỹ có những chính sách hỗ trợ chiến lược cho các ứng dụng

công nghệ nano trong lĩnh vực nông nghiệp và thực phẩm (Chen va ctv, 2011) Vậtliệu nano trong nông nghiệp đang được sử dụng dưới nhiều dang khác nhau như phânbón nano, thuốc diệt cỏ nano, thuốc diệt nắm nano, thuốc trừ sâu nano và chất kíchthích sinh trưởng nano nhờ các tính chất sinh hóa ưu việt như hoạt tính sinh học cao,liều dùng nhỏ và độc tính thấp (Ranjan và ctv, 2017) Song các nghiên cứu ứng dụngtại Việt Nam còn hạn chế.

Xuất phát từ thực tiễn, đề tài “Nghiên cứu tác nhân gây bệnh đen xơ mít thái(Artocarpus heterophyllus Lam.) và khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano”được thực hiện nhằm có những hiểu biết thêm về bệnh den xơ cũng như hướng phòngtrừ, khắc phục thiệt hại mà bệnh gây ra

Mục tiêu đề tài

Xác định được tác nhân gây bệnh đen xơ mít Thái, khả năng gây hại trên các

giống mít khác và xác định được khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano

Yêu cầu đề tài

- Thu thập được các mẫu bệnh đen xơ mít Thái tại Thành phố Hồ Chí Minh vàcác tỉnh phía Nam như Lâm Đồng, Đồng Nai, Long An và Tiền Giang

- Phân lập và định danh được tác nhân gây bệnh đen xơ mít bằng đặc điểm sinh

hóa và kỹ thuật sinh học phân tử.

- Đánh giá khả năng gây hại của tác nhân gây bệnh trên một số giống mít khác

- Đánh giá được khả năng phòng trừ của một sô vật liệu nano trong điêu kiện

phòng thí nghiệm và ngoài đồng

Giới hạn đề tài

Chương Ï

TONG QUAN

1.1 Tong quan về cây mit

1.1.1 Phan loai khoa hoc

Giới (Kingdom): Plantae

Ngành (Divition): Magnoliophyta

Lớp (Class): Rosales

Ho (Family): Moraceae

Giống (Genus): Artocarpus

Loai (Species): A heterophyllus

Mit thuộc chi Artocarpus (ho Moraceae) là một trong những loại cây ăn qua

nhiệt đới Tên đồng nghĩa: A philippinensis Lam., A maxima Blanco., Soccus

arboreus major Rumph., Polyphema jaca Lour., A brasiliensis Gomez Trong đó

Artocarpus heterophyllus Lamk được chấp nhận và sử dung rộng rãi nhất (Shamsudin

và ctv, 2009).

1.1.2 Nguồn gốc, phân bố và giống

1.1.2.1 Nguồn gốc và phân bố

Mit có nguồn gốc trong các rừng mưa ở vùng Western Ghast của An Độ, sau đó

nó được trồng nhiều ở các quốc gia láng giềng Nam, Đông Nam Châu Á và miềnNam Trung Quốc (Haq, 2006)

Theo Haq (2006), cho rằng mít là cây trồng quan trọng của khu vực nhiệt đới

và cận nhiệt đới Cây mít là cây lâu năm, cây có kích thước trung bình lớn thường cao khoảng 10 - 20 m và cho trái quanh năm.

Ở Việt Nam, mít được trồng ở vùng núi dưới 1000 m và các tỉnh trung du, đồng

bằng va ven biển Cây ưa vùng khí hậu nhiệt đới nóng và 4m, nhiệt độ trung bình

khoảng 23 - 26°C, lượng mưa trung bình năm từ 1500 mm trở lên và mọc được trên

nhiều loại đất khác nhau (Cao Việt Hà và Nguyễn Thi Thu Hiền, 2021)

1.1.2.2 Giống mít

Mít được phân thành hai nhóm: nhóm có thịt quả mềm, nhiều nước và nhóm có

thịt quả chắc, giòn vả ít ngọt hơn Ngoài ra còn có các loại trung gian khác (Hossain

va ctv, 2006).

* Đặc điểm một số giống mít ở ĐBSCL

Theo Vũ Công Hậu (2000), đặc điểm của một số giống mít được mô tả như sau:Mit tố nữ: năng suất cao, trọng lượng trái trung bình 800 - 1.000 g/trái Cơm nhão, vingọt, béo, có mùi thơm đặc trưng Mit nghệ siêu sớm: có nguồn sốc Thái Lan Trai

khi chín nặng từ 10 - 15 kg có trái quanh năm Mít nghệ cao sản dòng M99 - 1: Năng

suất rất cao, chất lượng ngon, tỷ lệ cơm 40 - 48%, màu vàng tươi, thích hợp ăn tươihay chế biến Mít Mã Lai: Năng suất cao, trái có trọng lượng trung bình 2 - 3 kg/múithơm, cơm hơi nhão, vị ngọt Mít tứ quý da xanh có trái quanh năm, rất sai, từ gốcđến ngọn, da trái màu xanh Đặc biệt khi chín có mùi thơm phức Khi xẻ ra có màu

vàng cam, ít xơ, hạt nhỏ, vi ngọt lim và thơm rất hấp dẫn Mit Thái siêu sớm xuất xứ

từ Thái Lan, với nhiều ưu điểm như thời gian cho thu hoạch nhanh, năng suất cao,múi mọng, giòn ngọt, hạt nhỏ hơn mít nghệ Khi cắt ra sẽ thấy cùi mít to hơn cùi mít

nghệ, có mủ, nhưng khi gọt bỏ cùi thì múi mít không có mủ, khi ăn không dính tay

và miệng Độ Brix trung bình đo được khoảng 21,2% (Quan Thị Ái Liên, 2010).1.1.3 Giá trị dinh dưỡng và gia trị kinh tế

1.1.3.1 Giá trị dinh dưỡng

Các loại đường chủ yếu là fructose, glucose và sucrose có trong các bộ phận của

cây, trừ vỏ cây Các acid béo là acid capric, aicd myristic, aicd lauric, acid palmitic,

acid oleic, acid stearic, acid linoleic, acid arachidic có ở nhiều bộ phận của cây Thanhphần các chất của mít (APAARI, 2012) Ngoài ra, giá trị dinh dưỡng của mít có chứa

95 kcal năng lượng, 23,5 g carbohtdrate, protein là 1,72 g, chất béo là 0,64 g và chất

xơ là 1,5 g Mit còn cung cấp vitamin A, vitamin C, vitamin E, vitamin B9, vitaminB3, vitamin B6 và bé sung thêm một số nguyên tố thiết yếu khác như Na, K, Ca, Fe,

Mg, Mn, P, Se, Zn.

1.1.3.2 Giá trị kinh tế

Theo APAARI (2012), ở Đông Nam Á mít được sản xuất nhiều ở các nước

Bangladesh, An Độ, Myanmar, Nepal, Thái Lan, Việt Nam, Trung Quéc, Philippines,

Indonesia, Malaysia va Sri Lanka Bên cạnh đó, mit cũng được trồng ở các quốc gia

khu vực Đông Phi và các quốc gia ở vùng Caribean như Jamaica Mít là một trong ba

loại quả mang ý nghĩa tốt lành của Tamil Nadu ở Ấn Độ cùng với xoài và chuối.Assam và Tripura là hai khu vực sản xuất mít lớn ở Ấn Độ, hàng năm tại bang Assam

có sản lượng ước tính khoảng 175.000 tấn

Tại Bangladesh, mít được công nhận là trái cây đại diện cho quốc gia VỚI tổngdiện tích trồng khoảng 79.000 ha mít, đạt sản lượng 1.352.084 tan (DAE, 2012) Năngsuất mỗi hecta là 17 tan, có thé tăng 3 - 5 lần nếu vườn được thương mại hóa và hoạt

động quản lí thích hợp và chuyên sâu Mít được sản xuất với quy mô lớn ở Dhaka,Gazipur, Tangail, Khagrachari, Rangamati, Mymensingh, Moulvibazar, Narsingdi,

Dinajpar va Rangpur Madhopur là trung tâm của khu vực trồng mít chất lượng tốtnhất (Hossain, 2013)

Theo Hoàng Quốc Tuấn (2011), mít được xem là loại trái cây đặc sản của vùngnhiệt đới Tại Việt Nam mít được trồng khắp cả nước nhưng tập trung và có hiệu quảkinh tế cao là ở miền Đông Nam Bộ và đồng bằng sông Cửu Long Cả nước có 10.300

ha trồng mít với sản lượng 109.600 tan Ở miền DNB có khoảng 4.620 ha điện tíchtrồng mít, có trên 67% có diện tích trồng mít nhỏ hơn 0,5 ha

Lê Văn Bé và ctv (2017) cho rằng mít Thái có nguồn gốc Thái Lan, đễ trồng,

năng suất cao, cho trái sớm (1 - 2 năm trồng), thịt trái có màu vàng đậm, chất lượng

tốt và giá cao, vì vậy diện tích mít Thái ngày càng mở rộng từ miền Đông Nam Bộ

đến ĐBSCL

Trước đây trái mít chủ yếu dùng dé ăn tươi Thời gian gần đây, mít được các

công ty chế biến dạng say khô, kẹo, trái cây đóng hộp, có thé được sử dụng dé sanxuất rượu vang hoặc được sử dụng như một hương liệu nên nhu cầu về mít ngày cảngtăng cao, nông dân đã trồng mít thành vườn chuyên canh tập trung với diện tích lớn

Do đó, công tác giống mít được quan tâm, phục vụ cho nhu cầu phát triển, mở rộngngày càng tăng (Nguyễn An Đệ và ctv, 2007; Lê Phương Thư, 2015)

Ngày nay, hầu hết mít được bán trên thị trường thường được đóng gói trong bao

bì trong suốt và được tiêu thụ trực tiếp các triệu chứng rõ ràng trên múi và xơ sẽ làmgiảm sự ưa thích của người tiêu dùng Nhu cầu và sự ưa chuộng đối với mít cũng íthơn khi người mua từ chối mua trái bị bệnh (Abidin và ctv, 2018)

1.1.4 Đặc tính sinh học

* Rễ: rễ cọc phát triển ngay từ nhỏ, đánh cây đi trồng dé làm chết cây con Ở cây già

bộ rễ phát triển mạnh có khi nổi lên mặt đất bám chắc, cho nên chóng gió bão tốt Vũ

“heterophyllus” (Vũ Công Hau, 2000).

elip hoặc tròn, với một đài hoa hình ống Hoa có thé thụ phan nhờ gió và côn trùng,nhờ vậy nên có tỷ lệ thụ phan chéo cao Trong điều kiện môi trường thích hợp, mít

có thể ra hoa quanh năm (Haq, 2006) Hoa đực hay cái sinh cùng một bao, chung mộtcuốn rất to khỏe Mỗi bao gồm nhiều hoa, không có cánh, dính vào nhau thành những

cum hoa gọi là “dai mít” có đực riêng, cái riêng Duc rụng sớm còn hoa cái sau khi

đã thụ phấn lớn lên thành một quả phức hợp, mỗi múi là một quả con Ở miền Bắc ra

hoa vào thang 3, 4 chín vào tháng 7, 8 nhưng cũng có cây ra hoa lai rai cả về mùa rét

gọi là “mít tứ thời” Ở miền Nam hiện trạng vào đầu mùa mưa (Vũ Công Hậu, 2000)

* Trái

Trái mít được mọc ra chủ yếu trên các thân cây và một phần của nhánh chính.Trái cây có thế trưởng thành trong 79 - 163 ngày hoặc có thé là 180 - 240 ngày saukhi xuất hiện của gai hoa Theo Tôn Thất Trình (2000), thì ba năm sau khi trồng thìcây mít đã ra trải, nhưng phải 10 năm trở đi năng suất cây mít mới cao Cơm múi mítkhi chín màu vàng, ngọt và tùy giống có nhiều hay ít nước, nát hay dai Trái trưởng

thành có thê được chia thành 10 giai đoạn, sự gia tăng kích thước trái và các bộ phận

khác nhau trong quá trình trưởng thành cho thấy tốc độ tăng trưởng từ giai đoạn đếngiai đoạn là ít thống nhất

Ngoài ra, Haq (2006) cho rằng trái mít thuộc nhóm cây hô hấp đột phát Sau khichín, mít chuyển sang màu nâu và giá trị cảm quan giảm nhanh chóng nên cần đượcbảo quản lạnh, tùy thuộc vào từng loại giống mít, nhiệt độ tối ưu dé tồn trữ mít 12 -14°C, có thê tồn trữ được từ 2 - 4 tuần Trái cây nhiệt đới thường không tồn trữ dưới13°C, do tiếp xúc với nhiệt độ thấp trái cây bị tổn thương, nên bị sam mau, ảnh hưởngđến chất lượng trái cây

* Hạt: Sự phát triển của những hạt xảy ra song song với sự phát triển của trái bat đầuvới sự thụ phần thành công của hoa Hạt được bao phủ bằng một lớp màu trắng, mỏng

Hạt và vỏ lụa có thé trở nên rất khác biệt hai tháng sau khi thụ phấn Hạt có thé trở

nên phát triển đầy đủ trong vòng bốn tháng sau khi thụ phấn (Haq, 2006)

* Múi: Trái chín chủ yếu lấy múi và làm hương liệu Múi mít tươi dùng làm món gia

vị dé tráng miệng hay làm thức ăn nhanh Nó còn được dùng làm thành dược liệu.Múi có kích thước 4 - 11 cm chiều dài, 2 - 4 em chiều rộng, trọng lượng từ 6 - 53 g.Mau sắc múi biến đổi tùy theo giống từ vàng, vàng cam hay tím đỏ (Morton, 1987).1.1.5 Yêu cầu sinh thái

1.1.5.1 Nhiệt độ và độ âm

Nhiệt độ trung bình tối đa 32 35°C, nhiệt độ trung bình cho cây mít là 24 28°C, nhiệt độ trung bình tối thiểu là 16 - 20°C (Elevitch va Manner, 2006) Nhiệt độdưới 5°C gây thiệt hại nghiêm trọng cho cây và sương sẽ ảnh hưởng đến chồi và trái,

-đôi khi cả nhánh chính (Paull và Duarte, 2012).

Luong mưa thích hợp cho mít từ 1.000 - 2.400 mm/nam Mit là cây chịu han

nhưng khi đó cây trái ít, trái nhỏ và ra hoa ít (Nguyễn Thị Ngọc Ân, 2001) Cây pháttriển tốt trong khí hậu âm áp không thích hợp với những vùng có khí hậu lạnh Nhất

là những nơi có sương mùi đột ngột, ké cả những cây trưởng thành cũng bi tap lá khôngọn (Nguyễn Thi Ngọc An, 2001) Ở nước ta, mít cũng được trồng ở vùng đồngbằng và vùng núi đến độ cao 1.000 m (Võ Văn Chi, 2003)

Bên cạnh đó, Nguyễn Mạnh Chinh và Nguyễn Đăng Nghĩa (2012) cũng chorang cây mít thích hợp ở vùng có khí hậu 4m áp, mưa nhiều, không chịu được ở những

nơi có nhiệt độ quá thấp Đặc biệt là những nơi có những trận sương muối đột ngột

điều này ảnh hưởng đến cả những cây trưởng thành gây nên hiện tượng cháy lá đồng

loạt, khô ngọn và chết cây con Nhưng mít lại có khả năng chịu hạn tốt nhờ bộ rễ phát

triển và ăn sâu trong đất nhưng khả năng chống úng kém

1.1.5.2 Ánh sáng

Ánh sáng là yếu tố quan trọng trong quá trình sinh trưởng và phát triển của cây

1.1.5.3 Đất đai

Mít phát triển tốt nhất ở đất thoát nước tốt, đất sâu vừa phải Phát triển tốt những

vùng đất có chất mùn phân hủy nhưng cũng có thể chịu đựng một loạt các loại đấtbao gồm cả đá vôi, cát và các chất đá nền pH đất thích hợp cho cây phát triển tốt từ

5,0 - 7,5 (Elevitch and Mamner, 2006) Nếu trồng mít ở vùng đất xấu, nghèo dinh

dưỡng thì cây cũng sinh trưởng kém, ít trái, trái nhỏ, dé biến chat và trái không ngon

Ở nơi đất tốt, sâu, xốp, đủ độ âm và thoát nước tốt thì mít sinh trưởng, phát triển

nhanh, bảo tồn được đặc tính của cây mẹ (Nguyễn Thị Ngọc Ấn, 2001)

1.1.5.4 Dinh dưỡng

Theo Nguyễn Mạnh Chinh và Nguyễn Đăng Nghĩa (2012), thì mít là loài cây

rat dé trồng và thích nghỉ với nhiều loại đất, nhưng yếu tố dinh dưỡng cũng rất quantrọng Lượng chất dinh dưỡng mà hàng năm cây mit lay di của đất rất là nhiều Tuy

vậy, nếu trồng mít nơi đất tốt và trồng rải rác thì nhu cầu bón phân cung cấp thêmdinh dưỡng nói chung không lớn, vì bộ rễ của cây mít rất phát triển Trường hợp đấtxấu, trồng nhiều và có mục dich dé kinh doanh, tăng thu nhập thì nên bón thêm đủ

phân NPK và phân hữu cơ.

1.2 Sơ lược về bệnh trên mít

1.2.1 Một số bệnh hại chính trên cây mít

* Bệnh thối hoa: Scot Nelson (2005), khi nghiên cứu về bệnh thối trái trên mít chorằng đối với bệnh có thé do ba chi nam xuất hiện chủ yếu vùng nhiệt đới Rhizopusoryzae, Rhizopus Artocarpi và Rhizopus stolonifer Chúng còn có thê tan công gây

hại trên trái.

* Bệnh thối thân, thối trái

Theo Haq (2006), bệnh do nắm Phytophthora palmivora và P.citrophthora gây

ra Triệu chứng ban dau là vùng gốc bị chảy nhựa màu đỏ nâu, khi bóc lớp vỏ ở chỗbệnh sẽ thấy phần gỗ ở phía dưới có màu hồng nhạt và có những đốm màu hơi tim,viền gon sóng Nếu không phát hiện sớm và trị kịp thời bệnh sẽ lan rộng ra xung

quanh, sau vai tháng có thé bao kín hết chu vị gốc, làm cho rễ thối, lá bị vàng và rụngNam tan công gây nên tốn thương trên bề mặt trái và có thé gây ra toàn bộ trái bị thối.

* Bệnh thối rễ

Theo Haq (2006) bệnh do nam Pythium spendens, Phytophthora sp., Fusariumsp., Rhizoctonia sp Nam tan công lên vùng rễ và gây chết cây ở giai đoạn chưa trưởngthành Phạm Văn Kim (2003), đã cho rằng khi bón nhiều phân đạm dưới dạngCo(NH›)›, cũng làm hạn chế khả năng đối kháng của nam Trichoderma ssp Một loạinam có lợi trong việc ức chế sự phát triển của Fusarium sp gây bệnh thối rễ

* Bệnh dom nau

Tác nhân gây hại là nắm Phomopsis artocarpina Triệu chứng bệnh chủ yếuxuất hiện trên lá, vết bệnh hình tròn, lúc đầu nhỏ, màu nâu, sau đó lớn lên, đườngkính 5 - 10 mm Ở giữa vết bệnh có màu xám tro, trên đó có những hạt nhỏ màu đenxếp thành các đường vòng đồng tâm, đó là các 6 bào tử Khi bệnh phát sinh nhiều,

tiễn hành trừ bệnh bằng cách phun các thuốc sốc đồng, Vimancoz, Zinc, Bendazol

(Nguyễn Mạnh Chinh và Nguyễn Dang Nghĩa, 2012).

* Bệnh nắm hồng

Tác nhân gây bệnh là nam Corticium salmonicolor Nam tạo thành những mangmàu trắng hoặc hồng trên cành làm lá vàng héo, cành khô Phòng trừ bệnh bằng cáchtỉa cành cho cây thông thoáng, phun lên cành và vết bệnh các loại thuốc Validacin,Viben C, Anvil (Nguyễn Mạnh Chinh và Nguyễn Đăng Nghĩa, 2012)

1.2.2 Tác nhân gây bệnh đen xơ trên mit

Năm 2006, Tổ chức Bảo vệ Thực vật Châu Âu (EPPO) tuyên bố rằng sự hiệndiện của P stewartii ở một số địa diém của Nam và Trung Mỹ, Châu Âu và Châu Á.EPPO (2016), đã công bố nghiên cứu về sự lây truyền của P stewartii subsp stewartiichủ yếu trên bệnh héo rũ ở ngô Vật trung gian chính đề truyền bệnh héo rũ là loài bọChaetocnema pulicaria Melsheimer, vi khuân P stewartii subsp stewartii sông trongruột của loài bọ này Khi bọ trưởng thành, vi khuẩn xuất hiện từ trang thai ngủ đông

và truyền bệnh qua vết thương của cây trồng P stewartii subsp stewartii cũng là tácnhân gây ra cháy lá trên mía và bệnh thối nhữn trên khóm (Orio và ctv, 2012; Cui vàctv, 2021) Gapasin và ctv (2014), xác định vi khuẩn Pantoea stewartii gây bệnh den

xơ trên mít tại Malaysia.

Zulperi và ctv (2017), đã thực hiện thí nghiệm bằng cách tiêm 10 ml dịch treo

vi khuẩn Pantoea stewartii ở nồng độ 108 CFU/ml vào các trái mít khỏe mạnh vàkhẳng định rằng bệnh đen xo mít do vi khuân Pantoea stewartii gây ra vì các triệuchứng biểu hiện tương đồng với các triệu chứng gây ra bởi loài vi khuẩn này

Gapasn va ctv (2014) va Abidin va ctv (2018), đã dùng đoạn moi

CPSL1/CPSLR2c va ES16/ESIG2c dé xác định vi khuẩn Pantoea stewartii gay bệnhđen xơ trên mit Ibrahim va ctv (2020), đã tiến hành giải trình tự ving 16S rRNA của

Pantoea stewartii subspecies stewartii chủng SQ T1 gây bệnh đen xơ mít ở Malaysia.

Hình 1.1 Vi khuân Pantoea stewartii trên môi trường nuôi cấy (a) Nutrient Broth

(b) King’s B (Nguồn: Abidin và ctv, 2014)

Gapasin và ctv (2014), đã mô tả vi khuan Pantoea stewartii gây bệnh den xơ là

vi khuẩn Gram âm với hình thái màu vàng, không hoặc có di động, không sinh bào

tử, các tế bao hình que thang và ngắn, kích thước khoảng 0,4 - 0,7 x 0,9 - 2,0 pm,

xuất hiện ở dang chuỗi đơn lẻ và ngắn Khi được nuôi cấy, các khuẩn lạc có màu vàng

kem, vàng chanh hoặc vàng cam và phẳng, lồi lên trên thạch dinh dưỡng - glucose

11

(Hình 1.1.) Vi khuẩn cho kết quả dương tính với phản ứng Catalase, thủy phân tinh

bột, thủy phân Gelatine, oxi hóa carbohydrate với 5 loại đường (Glucose, galactose,

fructose, maltose và sucrose) Kết qua âm tính với thủy phân tween 80 và không tao

ra phản ứng siêu mẫn cảm trên cây thuốc lá.

Lê Phương Thư (2015), đã tiền hành khảo sát hiện tượng xơ đen trên mít ChanRai tại Thành phố Cần Thơ và tỉnh Hậu Giang, tác giả cho rằng xơ đen là do ảnh

hưởng của sự thụ phấn, thụ tinh đã tiễn hành thí nghiệm bao trái, che trái non Kết quả cho thấy không xuất hiện xơ đen và nhận định thụ phấn, thụ tinh không phải là

nguyên nhân gây bệnh Tác gia còn đề xuất sử dụng Trichoderma spp dé hạn chế

bệnh nứt thân xì mủ ở cây.

Sở Khoa học và Công nghệ thông tin tỉnh Hậu Giang (2021), đã nhận định vi

khuẩn Pantoea stewartii là nguyên nhân gây bệnh xơ đen trên mít siêu sớm tại HậuGiang Mẫu sau khi được phân lập, sẽ tiến hành giải trình tự vùng 16S rRNA Truyxuất kết quả giải trình tự với công cụ tìm kiếm BLAST Đưa ra kết luận rằng Pantoeastewartii là vi khuẩn gây bệnh đen xơ trên mít trên mít Thái siêu sớm (Artocarpusheterophyllus Lamk.) và khả năng xâm nhập vào trái theo nước mưa bằng hai conđường: qua nướm hoa cái mở ra nhận phan và con đường thứ hai là giữa trái đơn cókhoảng hở, vi khuẩn theo nước mưa di vào

1.2.2 Điều kiện phát sinh, phát hiện bệnh

Theo Lâm Văn Thưởng (2013), với kết quả điều tra hiện tượng mít đen xơ tại

huyện Châu Thành, Hậu Giang cho rằng hiện tượng đen xơ xuất hiện từ tháng 6 - 10

âm lịch hàng năm, thời gian này trùng vào mùa mưa, ẩm độ cao và thời gian ra hoacủa cây mít Do vậy mà nhiều nhà vườn quy kết cho hiện tượng den xơ là do dự nước

và nam tấn công do âm độ cao Cùng quan điểm, Dao Văn Tùng (2014) cũng chorằng nguyên nhân là do nắm và không phân biệt được trái bị đen xơ ở các thời điểmcủa trái trừ khi bổ trái kiểm tra Ty lệ trái bị den xơ xuất hiện với tỷ lệ từ 30 - 70%trên cây Đặc điểm bên ngoài của mít đen xơ rất khó nhận dạng do hình dạng trái bìnhthường (thuôn, dài) chiếm 93%, kích thước bình thường chiếm 100%, màu sắc vỏ

(màu xanh) chiếm 90%, màu sắc cuống trái (xanh - vàng) chiếm 27,5% và 55% Hiệntượng này xuất hiện từ tháng 9 - 10 dương lịch hàng năm chiếm tỷ lệ 67,5% và 32,5%xuất hiện vảo tháng 1 - 2 dương lịch.

Sithlath (2017) và Sở Khoa học và Công nghệ tỉnh Hậu Giang (2021), cùng cho

rằng hiện tượng đen xơ trên mít thường xuất hiện mùa mưa (từ tháng 5 - 6 đươnglịch) Vào mừa mưa thời tiết 4m ướt tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của các

loại bệnh và hiện tượng đen xơ đang gây lo ngại cho các nhà vườn.

Lê Trí Nhân (2016), hiện tượng đen xơ xuất hiện nhiều và phổ biến trong mùamưa nhưng có tỷ lệ rất thấp trong mùa nắng Trong mùa mưa hiện tượng này xuấthiện chủ yếu ở giai đoạn từ 30 - 90 NSKĐT, trong đó tỷ lệ xuất hiện cao nhất ở 60

NSKĐT Việc nhận dạng trái có bị đen xơ hay không bằng cảm quan bên ngoai rất

khó Trái mít bị đen xơ có cuống trái, vỏ trái bình thường, gai trái nở đều và hìnhdạng trái thon dài không dấu hiệu bất thường

Về đặc điểm xâm nhiễm và lan truyền của bệnh, theo Lê Trí Nhân (2016) chorằng vệt đen xuất hiện có thé là do vi khuẩn xâm nhập vào hoa cái nhờ nước mưa

Nước mưa là yếu tố dé vi khuẩn lây lan và xâm nhiễm bên trong hoa cái Khi gặp

nước mưa, vi khuẩn đi vào cửa ngỏ là nướm, đi vào vòi nhụy và đến bầu noãn làmcho múi không thụ tinh và hột bị lép Con đường thứ hai mà vi khuẩn có thể xâmnhập là qua khẽ hỡ giữa các múi mít Đề xác định sự hiện diện của vi khuẩn bên trongtrái bằng cách lay những phan xơ bị đen của 9 trái 1 tháng sau khi thụ phan cấy lênmôi trường King’s B, kết qua cho thay khuẩn lac phát triển nhanh sau 12 giờ Têncủa chủng vi khuân chưa được xác định Cùng quan điểm, Lê Văn Bé và ctv (2017),

cũng cho rằng vi khuân xâm nhập vào trái non bằng hai con đường qua nướm nhụy

cái lúc nhận phan và qua khe hở giữa các múi mít khi có nước mưa Do hình dạngbên ngoài của mít lồi lõm nên vị trí lõm sẽ là nơi chứa nước mưa, có độ ẩm cao là

môi trường thuận lợi cho vi khuẩn phát triển, côn trùng chích hút vào cuốn, trái gây

vết thương hở tạo điều kiện cho vi khuẩn xâm nhập

1.2.3 Triệu chứng gây hại

Hiện tượng xo đen lam giảm phẩm chất và giá trị thương phẩm của mít Theocác cuộc khảo sát cho thay trái bị bệnh xơ đen có dang trái bị biến dang, bất thường(méo, không tròn đều, lỗi lõm), đầu trái nhỏ, cuống trái xanh bất thường, có hoặckhông có sự tôn thương về bên ngoài (Hình 1.2.) Khi bồ trái bị bệnh, phần xơ bêntrong bị đen, múi bị lép, hột không phát triển, vết đen trên xơ không có hình dạng

nhất định Hiện tượng xơ đen không xảy ra đồng loạt ở tất cả các cây trong vườn, đặc

biệt xuât hiện nhiêu vào mùa mưa và ít xuât hiện vào mùa năng (Lê Trí Nhân, 2016).

Abidin và ctv (2018), Gapasin và ctv (2014), cho rằng sau khi mầm bệnh xâmnhập vào sẽ làm cho quả mít xuất hiện những vết rách có màu vàng cam đến đỏ trên

phần thịt quả (Hình 1.3.) Khi mít bị bệnh đen xơ thì bề mặt bên ngoài không có triệu

chứng gì và bệnh thường tìm thấy trên những giống mít có độ Brix cao và hương vịthơm ngon Bệnh thường xuất hiện trong điều kiện âm ướt của các vùng nhiệt đới sẽthúc đây cho sự phát triển và phát tán của mầm bệnh

Sithlath (2017), đã tiến hành điều tra các triệu chứng của bệnh đen xơ và ghinhận trái không bị bệnh đen xơ: vỏ trái có màu xanh, gai mít phân bố đều và trái mít

có hình dạng thuôn dài, bề mặt không bị lồi lõm Tuy nhiên, một số trái không cóbiểu hiện của bệnh, khi bồ ra có xuất hiện các triệu chứng bệnh Do vậy, chưa xácđịnh được chính xác được những biểu hiện chuyên biệt để phân biệt trái bị bệnh đen

xơ Đào Văn Tùng (2014) và Lâm Văn Thưởng (2013), cũng cho rằng các dấu hiệu

bên ngoài của trái mít như: màu sắc cuống, vỏ, hình đạng trái và độ đồng đều của tráikhông có nhiều biểu hiện đặc trưng vì vậy không thê nhận biết được trái mít có bị đen

xơ hay không.

Đối với cùi trái, khi bị đen xơ cũng xuất hiện các đốm nâu nhạt khi bị nhẹ và

các đốm nâu sẽ lan rộng, san sùi khi bị nặng Đối với xơ, trên bề mặt xơ xuất hiệnnhững đốm có màu từ nâu tới nâu đen, các đốm này có hình dang và kích thước khácnhau, dùng tay chạm vào có cảm giác nhám, san sùi, đồng thời số lượng và kích thước

của các đốm đen giữa các xơ cũng khác nhau Đối với những xơ bị nặng, các đốm

nay có thé lan ra tạo thành một mảng lớn trên bề mặt xơ Khi bị nặng các xơ và múi

gần nhau sẽ bị dính lại, các đm đen này lan rộng, san sùi, rõ rệt trên bề mặt mũi làm

mat giá tri của trai mít (Sithlath, 2017; Lê Văn Bé va ctv, 2017).

15

1.2.4 Các biện pháp phòng trừ

* Các biện pháp canh tác

Hiện nay, trong nước chưa có nhiều tai liệu khoa học công bố về tác nhân gây

bệnh đen xơ trên mít Thái Theo Lê Văn Bé và ctv (2017), đã tiến hành bao trái nonnhằm hạn chế tiếp xúc với nước mưa Tuy nhiên, trái non được bao ít bị xơ đen nhưngtrái lại không thụ phan thụ tinh Tác giả tiếp tục tiến hành che trái vào lúc hoa cái

chưa thụ phấn Trái thụ phấn bình thường, trái tròn và giảm được bệnh đen xơ trênmit.

Theo kết quả điều tra nông dân, vườn mit thông thoáng thi không xuất hiện bệnhđen xơ (Lê Văn Bé và ctv, 2017) Ngoai ra, tác giả còn đề xuất các biện pháp hạn chế

đen xơ như: trồng thưa hợp li, cắt tỉa thông thoáng cho cây, có thé sử dụng vôi, thuốc

gốc đồng, thuốc có khả năng sat khuẩn phun vào lúc trước và sau khi hoa cái nở (LêPhương Thư, 2015).

Bệnh phát triển mạnh trong những thang mưa nhiều như thang 7, 8, 9, 10 hàngnăm, nên nhà vườn cần hạn chế dé trái trong thời gian này Khi xử lý ra hoa, ngườitrồng nên tỉa bớt các cành tăm đề tạo độ thông thoáng cho cây Ngoài ra, nên tuyênlựa những trái hình trụ, gai đều, cuống mập và tỉa bớt những trái méo mó, có cuống

dị dang, vì những trái này cho năng suất thấp và có nguy cơ nhiễm bệnh cao Nôngdân có thé phun một số loại thuốc phòng ngừa vi khuẩn vào toàn cây, đặc biệt vàocuống và mau trái, phun ít nhất 3 lần vào các thời điểm: có cya gà, trước va sau khi

ra trai (Sở Khoa hoc và Công nghệ tỉnh Hậu Giang, 2021).

* Các biện pháp hóa học, sinh học

Lê Trí Nhân (2016), đề xuất phun COC 85 định kì 15 ngày/lần trước khi ra hoađến khi thu hoạch có thé làm giảm bệnh đen xo mít Tác giả đã tiễn hành khảo sátkhả năng phòng trị bệnh của thuốc cho thấy thuốc không làm thay đổi đặc tính nông

học và phâm chât mít Thái siêu sớm.

Bộ Nông nghiệp Malaysia (DOA) đề xuất là sử dụng thuốc xịt phòng ngừa cóchứa gốc đồng oxychloride, đặc biệt trong mùa mưa cũng như các biện pháp chămsóc bao gồm cắt tỉa cành thấp, hạn chế số quả, khử trùng bao gói, tiêu hủy trái bị bệnh

và tránh làm tôn thương trái đang phát triển (Abidin và ctv, 2018)

Cục bảo vệ thực vật (2021), khuyến khích một số biện pháp tăng sức đề kháng

và phòng bệnh như: chế phẩm sinh học có chứa các vi sinh vật đối kháng như namTrichoderma, xạ khuan Steptomyces, VI khuẩn Bacillus, thao mộc và các vi sinh vật

cỏ nano, thuốc diệt nắm nano, thuốc trừ sâu nano và chất kích thích sinh trưởng nanonhờ các tính chất sinh hóa ưu việt như hoạt tính sinh học cao, liều ding nhỏ và độctính thấp Trong số các vật liệu nano ứng dụng cho nông nghiệp, nano bạc là mộttrong những vật liệu nano tiềm năng bởi tác dụng phòng trừ tốt các bệnh do nắm và

vi khuẩn gây ra như Rhizoctonia solani, Alternaria solani, Ralstonia solanacearum,

Xanthomonas campestris py campestris va Dickeya solani Ngoai ra, nano bac con

có khả năng kích thích, điều hòa sy tăng trưởng, phát triển của cây trồng vả tiêu diệt

côn trùng hiệu quả (Ali và ctv, 2015).

Tính kháng khuẩn của vật liệu nano bạc được nhiều công trình nghiên cứu và

công bô là có tính kháng khuân cao Vô hiệu hóa enzyme, các enzyme do vi sinh vat

17

sinh ra thường chứa các cầu nối disunfit (S - S), các cầu nối này đóng vai trò như một

công tac đóng, mở thuận nghịch dé tạo ra protein khi tế bao vi khuan gặp các phản

ứng oxy hóa Các hạt nano bạc liên kết các cầu nối nay trong cấu trúc tế bào của vi

sinh vật và giải phóng ion bạc từ các hạt nano bằng cách tương tác với các nhóm thiolcủa nhiều enzyme quan trong và vô hiệu hóa chúng nên có khả năng diệt vi khuẩn, vinam Phá vỡ thành tế bao, vật liệu nano bạc hỗ trợ quá trình tạo ra các oxy hoạt tínhtrong không khí hoặc trong nước, những oxy hoạt tính này phá vỡ màng tế bào hoặcthành tế bào của vi khuẩn bằng cách tạo ra các phản ứng oxy hóa Các phản ứng nàyhình thành các gốc bạc tự do làm cho màng tế bào bị xốp Ngăn cản sinh trưởng của

vi khuân, các hạt nano bạc có thê neo bám vào bê mặt tê bảo vi khuân 161 xuyên qua

“

1) Disrupt cell wall and 4) Disrupt membrane membrane by A: by reactive oxygen species 6) Denature membrane

by AgNPS

3) Interrupt ATP production

Cơ chê tác động của nano bạc đôi với vi khuan:

+ Nano bạc giải phóng các ion bạc tiêu diệt vi khuẩn: (1) Các ion bạc sau khigiải phóng tiễn hành bám hoặc đi qua thành tế bào và mang sinh chất tạo những 16hồng khiến hai bức tường thành bảo vệ vi khuẩn bị phá vỡ (2) Ion bạc gây biến tínhcác hạt ribosome bằng cách liên kết với chúng và gây ức chế quá trình tổng hợpprotein (3) Quá trình san xuất adenosine triphosphate (ATP) bi gián đoạn do ion bạc

Quá trình phá hủy hai bức tường bảo vệ của nano bạc còn được hỗ trợ bởi các sảnphẩm oxy được sinh ra của chuỗi chuyên điện tử: khi chuỗi chuyền điện tử bị phá vỡ

sẽ tạo ra các loại oxy phản ứng gây ra sự phá vỡ màng sinh chất (5) Ngăn cản quá

trình sao chép của axit deoxyribonucleic (DNA): các oxy phan ứng được tạo ra từ (4)

kết hợp với ion bạc tự do trong tế bào sau đó liên kết với DNA và ngăn chặn quá trìnhnhân đôi (6) Biến tính màng sinh chất: các hạt nano bạc ở bên ngoài bám lên các lỗcủa thành tế bào và gây biến tính màng (7) Thủng màng sinh chất: các hạt nano bạc

di chuyển trực tiếp qua thành tế bào và màng sinh chat chất, tạo lỗ hồng giải phóngcác bảo quan ra khỏi tế bào Tóm lại quá trình này vừa có khả năng ngăn chặn sự sinhsôi của tế bao (chống lại khả năng thuốc) vừa tiêu diệt vi khuẩn (Chaloupka va ctv,

2010).

+ Nano bạc trực tiếp thực hiện quá trình diệt khuẩn: Quá trình nano bạc trựctiếp tiêu diệt vi khuẩn bao gồm các bước sau: (1) Nano bạc tích tụ trên thành tế bảocủa vi khuẩn, virus, nam mốc nhờ các đầu nối disulfide HS - SH và gây biến tínhmang sinh chất khi chúng bám vào (2) Nano bạc đi xuyên qua thành tế bào đến màngsinh chat và gây biến đổi cấu trúc mang Cả hai sự thay đổi tính chat của mang sinhchất đều khiến cho các bảo quan bên trong tế bào bị vỡ ra dẫn đến ly giải tế bảo vikhuẩn (Cushing và ctv 2004)

+ Nano tác động lên quá trình truyền tín hiệu của vi khuẩn: Quá trình phosphorylhóa chất nền protein ảnh hưởng đến quá trình truyền tín hiệu của vi khuẩn, nano bạckhử gốc tyrosine trên peptide gây ra sự xáo trộn về cấu trúc của các chất nền Cácenzyme xúc tác không thực hiện được các chức năng đối với chất nền khiến quá trìnhphosphoryl hóa không thực hiện được dẫn đến sự gián đoạn trong quá trình truyền tínhiệu và dẫn đến thiết lập một quá trình khác - quá trình tự chết của tế bào vi khuẩn

(Cushing và ctv 2004).

Một số nghiên cứu trong nước đã nghiên cứu về hiệu quả của nano bạc: Nguyễn

Văn Hoàn (2017), đánh giá hiệu quả của nano bạc trên giống ca chua NH2746 cho

thấy mức độ ảnh hưởng của nano đến sự sinh trưởng và mức độ nhiễm bệnh và năngsuất của cà chua tại Nghị Phong, Nghị Lộc và Nghệ An Dương Tan Nhựt (2016),

19

cho thấy tác động nano bạc lên khả năng tăng trưởng của cây cúc trong hệ thống vithủy canh và sự thích nghi của cây trồng ở giai đoạn vườn ươm.

*Nano đồng

Nano đồng có khả năng xâm nhập qua thành tế bào và tương tác với các cấu

trúc nội bào nhờ kích thước hạt nhỏ và khả năng hoạt động bề mặt lớn, các hạt nano

đồng tác động trực tiếp lên màng tế bào vi khuẩn và phá vỡ cau trúc di truyền của tế

bào, từ đó làm cho vi khuẩn mắt sức sống và chết Vô hiệu hóa các cầu nối sunfittrong các enzyme bằng các tác nhân khử khiến enzyme bat hoạt Hạt nano đồng đóngvai trò quan trong trong lĩnh vực quang và điện tử, đồng thời là chất mới chống lại vi

sinh vật (Kanhed và ctv, 2014).

Hạt nano đồng có nhiều tính chất khác biệt so với vật liệu khối Ngoài các tínhchất chung của vật liệu nano kim loại như có độ dẫn điện cao, hoạt tính xúc tác, hiệuứng bề mặt, hiệu ứng kích thước và có mật độ điện tử tự do lớn, vật liệu nano đồngcòn có những đặc trưng nổi trội về tính kháng khuẩn, tinh chất điện Cơ chế diệt

khuẩn của hạt nano đồng được khái quát qua Hình 1.5 (A) Các hạt nano đồng tương

tác trực tiếp với màng ngoài vi khuẩn gây ra sự chênh lệch điện thế giữa bên trong vàbên ngoài tế bao dẫn đến vỡ bề mặt mang tế bào; (B) Màng tế bào bị vỡ dẫn đến rò ricác chất hòa tan và các chất dinh dưỡng cần thiết như kali, glutamate; (C) Các hạt

nano đồng di chuyền vào bên trong tế bào và tiếp tục kích thích phát triển các phản

ứng ức chế oxy hóa gây ra sự suy thoái chung của tế bảo; (D) Hệ gen ADN bị phânmảnh nhanh và giết chết tế bào (Grass vả ctv, 2011)

Hình 1.5 Cơ chế diệt khuân của nano đồngNguồn: Metallic copper as an antimicrobial surface (Grass và ctv, 2011)

* Tổ hợp Ag/SiO2: tổng hợp bang silica hình cầu kích thước micro, được tạo

thành từ tetraethyl orthosilicate (TEOS) thông qua phương pháp Stober, có mật độ

đính nano bạc dày đặc và phân bó đồng đều trên bề mặt silica Khả năng kháng khuẩncủa Ag/SiO› được đánh giá với vi khuẩn gây bệnh héo xanh cà chua chủng Ralstoniasolanacearum Kết quả cho thay nồng độ ức chế tối thiểu của Ag/SiO2 đối vớiRalstonia solanacearum 15 là 10 ppm, thấp hon so với nano bạc thông thường (20

ppm) Điều đó cho thấy, tổ hợp Ag/SiO› với hoạt tính kháng khuẩn cao và tính ổnđịnh cao trong các loại nước có pH khác nhau là thuốc bảo vệ thực vật nano tiềm

năng trong nông nghiệp (Bùi Thị Thu Thảo và ctv, 2018).

* Silica với những đặc tính nôi bật như 6n định nhiệt và hóa học cao, điện tích

bề mặt lớn (nhất là đối với nano silica dạng xốp) và khả năng tương thích sinh học

cao (Bùi Thị Thu Thảo và ctv, 2018).

* Chitosan (Cts) được biết là có nhiều hoạt tính sinh học như hoạt tính khángnam, kháng khuẩn, các tính chat của Cts như độ dé acetyl (DDA), sự phân bố điệntích và bản chất hoá học phân tử chi phối mạnh mẽ các hoạt động sinh học của nó(Jeon và Kim, 2000) Trong y tẾ, việc sử dụng vật liệu nano chitosan làm tăng hiệuquả của quá trình điều trị bệnh do khả năng hấp thụ thuốc cao và dễ đi vào trong cơthé do có kích thước nhỏ với vai trò chất mang và giải phóng thuốc đang được nghiên

cứu và ứng dụng khá rộng rãi.

* Alginate là một loại polysacarit thu được từ rong nâu, được áp dụng rộng rãi

làm chất mang cô định trong điều chế các hạt nano kim loại do tính tương hợp sinhhọc tốt và không độc hại của nó Nguyễn Thị Thanh Hải (2021), đã thu được các hạtnano đồng bằng cách điều chỉnh các thông số phản ứng, bao gồm nhiệt độ phản ứng,thời gian phản ứng và hàm lượng các tiền chất và chất bảo vệ (Alginate)

* Carboxymethyl cellulose (CMC) là một dẫn xuất của cellulose với các nhómcarboxymethyl (-CH2-COOH) liên kết với một số nhóm hydroxyl (-OH) của cácmonomer glucopyranose CMC gồm mạch chính là polysaccharide ky nước và nhiều

nhóm cacboxyl ưa nước, và do đó thê hiện các đặc tính lưỡng tính CMC tan tốt trong

21

nước và tạo thành dung dịch có độ nhớt cao nên thường được sử dụng như một tác

nhân ôn định cho các hạt nano.

Silica vô định hình (SiO2) có hoạt tính sinh học được tách ra từ tro trâu Khihoạt hóa silica trong môi trường kiềm, bề mặt hạt nano silica hình thành các nhóm -

OH có thể tương tác với ion Cu (II) Các hạt nano Cu, được hình thành sau quá trìnhkhử ion Cu (II) trong dung dich, được gắn trên bề mặt silica và tăng bề mặt tiếp xúccủa các hạt nano Cu Sự kết hợp các ưu điểm của CMC và hạt nano silica có thê tông

hợp các hạt nano đa thành phần mới dựa trên CuNPs (Nguyễn Thị Thanh Hải, 2021).

Chương 2

NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Thời gian và địa điểm

Thời gian: Thực hiện từ tháng 02 năm 2022 đến tháng 12 năm 2022

Địa điểm: Phòng thí nghiệm Bệnh cây, bộ môn Bảo vệ thực vật, khoa Nông học,

trường Đại học Nông Lâm, Thành phó Hồ Chí Minh

Các thí nghiệm chủng bệnh trên trái mít còn nguyên, đánh giá khả năng phòng

trừ của các vật liệu nano đối với tác nhân gây bệnh đen xơ mít trong điều kiện ngoàiđồng được thực hiện tại huyện Tân Phú, tỉnh Đồng Nai

2.2 Nội dung nghiên cứu

Phân lập và định danh vi khuẩn gây bệnh đen xơ mít bằng đặc điểm hình thái

và phản ứng sinh hóa.

Định danh vi khuẩn gây bệnh đen xơ mít bằng kỹ thuật sinh học phân tử

Đánh giá khả năng gây bệnh đen xơ mít trên một số giống mít khác

Đánh giá khả năng phòng trừ của một số vật liệu nano trong điều kiện phòng thínghiệm và ngoài đồng

2.3 Vật liệu, dụng cụ nghiên cứu

Vật liệu: Các mẫu mít có triệu chứng của bệnh đen xơ thu tại tỉnh Lâm Đồng,Đồng Nai, Long An, Tiền Giang va Thành Phố Hồ Chí Minh

Các vật liệu nano sử dụng để thử thuốc do Green Nano Lab, Trường Đại họcKhoa học Tự nhiên, Dai học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh cung cấp tổng hợp

theo phương pháp khử hóa học:

+ AgNPs - cts: Nano bạc sử dụng chất bảo vệ chitosan (cts)

23