(Luận án tiến sĩ) Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Và Hoạt Tính Sinh Học Của Nấm Hexagonia Tenuis, Phellinus Gilvus, Phellinus Baumii Và Ganoderma Australe Ở Vùng Bắc Trung Bộ

Ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt đã phân lÁp từ nÃm Phellinus gilvus.. Ngày nay, vßi să phát triển căa khoa hác kĩ thuÁt, nhiều hÿp chÃt có ho¿t tính kháng sinh, ho¿t tính chống khối

Bà GIÁO DĀC VÀ ĐÀO T¾O TR¯àNG Đ¾I HàC VINH

Đâ XUÂN H¯NG

NGHIÊN CĄU THÀNH PHÄN HÓA HàC

VÀ HO¾T TÍNH SINH HàC CĂA NÂM Hexagonia tenuis,

VÙNG BÂC TRUNG Bä

LUÀN ÁN TI¾N SĨ HÓA HàC

NGH Þ AN – 2020

Bà GIÁO DĀC VÀ ĐÀO T¾O TR¯àNG Đ¾I HàC VINH

Đâ XUÂN H¯NG

NGHIÊN CĄU THÀNH PHÄN HÓA HàC

VÀ HO¾T TÍNH SINH HàC CĂA NÂM Hexagonia tenuis,

L àI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cąu căa riêng chúng tôi Các số liáu, kÁt quÁ nêu trong luÁn án là trung thăc và ch°a từng đ°ÿc ai công bố trong bÃt kỳ công trình nào khác

Ký tên

Đâ XUÂN H¯NG

Tôi xin chân thành cÁm ¢n PGS TS Lê Đąc Giang, TS ĐÁu Xuân Đąc cùng tÃt

cÁ các thÅy cô thuác Vián S° ph¿m Tă nhiên - Tr°áng Đ¿i hác Vinh đã t¿o điều kián tốt nhÃt cho tôi trong quá trình làm luÁn án

Nhân dßp này, tác giÁ xin gÿi lái cÁm ¢n đÁn Ban Giám hiáu Tr°áng Đ¿i hác Vinh, Phòng Đào t¿o Sau đ¿i hác đã tÁn tình giúp đỡ tôi hoàn thành luÁn án này

Cuối cùng, tác giÁ xin dành tình cÁm đặc biát đÁn gia đình, ng°ái thân, đßng nghiáp và các ng°ái b¿n căa tác giÁ, nhāng ng°ái đã luôn đáng viên và tiÁp sąc cho tác giÁ để hoàn thành bÁn luÁn án này

Nghệ An, ngày 28 tháng 10 năm 2020

Đâ XUÂN H¯NG

M ĀC LĀC

LàI CAM ĐOAN i

LàI CÀM ¡N ii

MĀC LĀC iii

DANH MĀC CÁC KÍ HIàU, CÁC CHĀ CÁI VIÀT TÂT x

Mâ ĐÄU 1

Ch°¢ng 1 TàNG QUAN 5

1.1 Táng quan về chi Hexagonia 5

1.1.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 5

1.1.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 5

1.2 NÃm Hexagonia tenuis 6

1.2.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 6

1.2.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 6

1.3 Táng quan về chi Phellinus 7

1.3.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 7

1.3.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 7

1.4 NÃm Phellinus baumii 21

1.4.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 21

1.4.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 21

1.5 NÃm Phellinus gilvus 23

1.5.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 23

1.5.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 24

1.6 Táng quan về chi Ganoderma 25

1.6.1 Đặc điểm, phân bố và phân lo¿i 25

1.6.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 25

1.7 NÃm Ganoderma australe 26

1.7.1 Đặc điểm hình thái, phân bố 26

1.7.2 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác 27

Ch°¢ng 2: PH¯¡NG PHÁP NGHIÊN CĄU VÀ THĂC NGHIàM 29

2.1 Ph°¢ng pháp nghiên cąu 29

2.1.1 Ph°¢ng pháp lÃy m¿u 29

2.1.2 Ph°¢ng pháp chiÁt xuÃt, phân lÁp 29

2.1.3 Ph°¢ng pháp khÁo sát cÃu trúc các hÿp chÃt 29

2.1.4 Ph°¢ng pháp thÿ kháng vi sinh vÁt kiểm đßnh 29

2.1.5 Ph°¢ng pháp thÿ nghiám ho¿t tính gây đác tÁ bào ung th° 30

2.2 Hóa chÃt và thiÁt bß 31

2.2.1 Hoá chÃt 31

2.2.2 ThiÁt bß 31

2.3 Nghiên cąu các hÿp chÃt từ quÁ thể nÃm Hexagonia tenuis 32

2.3.1 Thu m¿u 32

2.3.2 Ngâm chiÁt và t¿o cao chiÁt 32

2.3.3 Phân lÁp các hÿp chÃt từ cao ethyl acetate 32

2.3.4 Xác đßnh cÃu trúc căa các hÿp chÃt 33

2.3.5 Nghiên cąu ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt 33

2.4 Nghiên cąu các hÿp chÃt từ quÁ thể nÃm Phellinus gilvus 35

2.4.1 Thu m¿u 35

2.4.2 Ngâm chiÁt và t¿o cao chiÁt 35

2.4.3 Phân lÁp các hÿp chÃt từ cao chiÁt ethyl acetate 37

2.4.4 Xác đßnh cÃu trúc phân tÿ căa các hÿp chÃt 37

2.4.5 Nghiên cąu ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt 38

2.5 Nghiên cąu các hÿp chÃt từ quÁ thể nÃm Phellinus baumii 38

2.5.1 Thu m¿u 38

2.5.2 Ngâm chiÁt và t¿o cao chiÁt 38

2.5.3 Phân lÁp các hÿp chÃt từ cao ethyl acetate 40

2.5.4 Xác đßnh cÃu trúc phân tÿ căa các hÿp chÃt 40

2.5.5 Nghiên cąu ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt 40

2.6 Nghiên cąu các hÿp chÃt từ quÁ thể nÃm Ganoderma australe 40

2.6.1 Thu m¿u 40

2.6.2 Ngâm chiÁt và t¿o cặn chiÁt 41

2.6.3 Phân lÁp các hÿp chÃt từ cao chiÁt ethyl acetate 41

2.6.4 Xác đßnh cÃu trúc phân tÿ căa các hÿp chÃt 43

Ch°¢ng 3: KÀT QUÀ VÀ THÀO LUÀN 44

3.1 Nghiên cąu thành phÅn hóa hác quÁ thể nÃm Hexagonia tenuis 44

3.1.1 Phân lÁp các hÿp chÃt 44

3.1.2 Xác đßnh cÃu trúc 44

3.2 Nghiên cąu thành phÅn hóa hác quÁ thể nÃm Phellinus gilvus 68

3.2.1 Phân lÁp các hÿp chÃt 68

3.2.2 Xác đßnh cÃu trúc các hÿp chÃt 68

3.3 Nghiên cąu thành phÅn hóa hác quÁ thể nÃm Phellinus baumii 74

3.3.1 Phân lÁp các hÿp chÃt 74

3.3.2 Xác đßnh cÃu trúc các hÿp chÃt 75

3.4 NÃm Ganoderma australe 86

3.4.1 Phân lÁp các hÿp chÃt 86

3.4.2 Xác đßnh cÃu trúc 87

3.5.1 Ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt phân lÁp từ nÃm Hexagonia tenius 95

3.5.2 Ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt đã phân lÁp từ nÃm Phellinus gilvus 96

3.5.3 Ho¿t tính sinh hác căa các hÿp chÃt phân lÁp từ nÃm Phellinus baumi 97

KÀT LUÀN 98

DANH MĀC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐÀN LUÀN ÁN 100

TÀI LIàU THAM KHÀO 101

PHĀ LĀC 114

DANH SÁCH B ÀNG

BÁng 1.1 Các hÿp chÃt và ho¿t tính sinh hác căa loài nÃm H tenuis 6

BÁng 1.2 Các hÿp chÃt steroid và ho¿t tính sinh hác căa các loài nÃm thuác chi Phellinus 8

BÁng 1.3 Hÿp chÃt terpenoid đ°ÿc phân lÁp từ Phellinus 12

BÁng 1.4 Hÿp chÃt flavonoid đ°ÿc phân lÁp từ Phellinus 17

BÁng 1.5 Các hÿp chÃt styrylpyrone từ các loài Phellinus 18

BÁng 1.6 Các hÿp chÃt khác đ°ÿc phân lÁp từ chi Phellinus 20

BÁng 1.7 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác căa P baumii 22

BÁng 1.8 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác căa Phellinus gilvus 25

BÁng 3.1 Các hÿp chÃt đ°ÿc tách ra từ nÃm H tenuis 44

BÁng 3.2 Dā liáu phá 1H- and 13C-NMR căa HTM1 (500 MHz, CD3OD) 56

BÁng 3.3 Số liáu phá NMR căa hÿp chÃt HTM2 60

BÁng 3.4 Số liáu phá NMR căa hÿp chÃt HTM3 63

BÁng 3.5 So sánh các giá trß phá phá 1H NMR và 13C NMR căa hÿp chÃt HTM4 và Ergosterol 65

BÁng 3.6 Các hÿp chÃt đ°ÿc tách ra từ nÃm Phellinus gilvus 68

BÁng 3.7 So sánh các giá trß phá 1H NMR và 13C NMR căa hÿp chÃt PGE1 và hÿp chÃt 1,2,4,5-tetrachloro-3,6-dimethoxybenzene 70

BÁng 3.8 So sánh các giá trß phá 1H NMR và 13C NMR căa hÿp chÃt PGE4 và (E) – 4-(3,4-dihydroxyphenyl)but-3-en-2-one 73

BÁng 3.9 Các hÿp chÃt đ°ÿc tách ra từ nÃm Phellinus baumii 74

BÁng 3.10 Các giá trß phá căa hÿp chÃt PBE2 và aldehyde 3,4-dihydroxylbenzoic 76

BÁng 3.11 Các giá trß phá căa hÿp chÃt PBE3 và Methyl 3,4-dihydroxybenzoate 77

BÁng 3.12 Giá trß phá căa hÿp chÃt PBE4 và (E)-4-(3,4-dihydroxyphenyl)but-3-en-2-one 79

BÁng 3.13 Các giá trß phá căa hÿp chÃt PBE5 và inoscavin A 85

BÁng 3.14 Các hÿp chÃt đ°ÿc tách ra từ nÃm Ganoderma australe 87

BÁng 3.15 Số liáu phá NMR căa hÿp chÃt GAM1 88

BÁng 3.16 Số liáu phá 13C-NMR và DEPT căa hÿp chÃt GAM2 90

BÁng 3.17 Số liáu phá 13C-NMR và DEPT căa hÿp chÃt GAM3 91 BÁng 3.18 Số liáu phá NMR căa hÿp chÃt GAM4 93

BÁng 3.19 Ho¿t tính đác tÁ bào căa các hÿp chÃt HTM1-5 từ quÁ thể nÃm căa H tenuis

95BÁng 3.20 KÁt quÁ thÿ nghiám ho¿t tính kháng vi sinh vÁt kiểm đßnh căa các hÿp chÃt PGE và PGE1 96BÁng 3.21 KÁt quÁ thÿ nghiám ho¿t tính gây đác tÁ bào ung th° biểu mô KB căa cao chiÁt PGE và các hÿp chÃt PGE1-3 97 BÁng 3.22 KÁt quÁ nghiên cąu ho¿t tính gây đác tÁ bào căa các chÃt PBE1, PBE4 và PBE5 97

DANH SÁCH HÌNH

Hình 1.1 NÃm H tenuis mặt tr°ßc và sau 6

Hình 1.2 NÃm P gilvus trong tă nhiên (a) và nÃm P gilvus đ°ÿc thu hái và đã xÿ lí ã Viát Nam (b) 24

Hình 1.3 Ganoderma australe lâu năm 27

Hình 3.1 Phá HR-ESI-MS căa hÿp chÃt HTM1 44

Hình 3.2 Phá IR căa hÿp chÃt HTM1 45

Hình 3.3 Phá 1H NMR căa hÿp chÃt HTM1 46

Hình 3.4 Phá 1H NMR căa hÿp chÃt HTM1 46

Hình 3.5 Phá 1H NMR căa hÿp chÃt HTM1 47

Hình 3.6 Phá 13C NMR căa hÿp chÃt HTM1 47

Hình 3.7 Phá 13C NMR căa hÿp chÃt HTM1 48

Hình 3.8 Phá 13C NMR căa hÿp chÃt HTM1 48

Hình 3.9 Phá DEPT căa hÿp chÃt HTM1 49

Hình 3.10 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 49

Hình 3.11 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 50

Hình 3.12 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 50

Hình 3.13 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 51

Hình 3.14 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 51

Hình 3.15 Phá HMBC căa hÿp chÃt HTM1 52

Hình 3.16 Phá HSQC căa hÿp chÃt HTM1 53

Hình 3.17 Phá HSQC căa hÿp chÃt HTM1 53

Hình 3.18 Phá HSQC căa hÿp chÃt HTM1 54

Hình 3.19 Phá COSY căa hÿp chÃt HTM1 54

Hình 3.20 Phá COSY căa hÿp chÃt HTM1 55

Hình 3.21 Phá COSY căa hÿp chÃt HTM1 55

Hình 3.22 Phá COSY căa hÿp chÃt HTM1 56

Hình 3.23 Phá 1H NMR căa hÿp chÃt HTM4 64

Hình 3.24 Phá 13C-NMR căa hÿp chÃt HTM4 65

Hình 3.25 Phá 1H NMR căa hÿp chÃt PGE1 69

Hình 3.26 phá 13C NMR căa hÿp chÃt PGE1 69

Hình 3.27 Công thąc phá X-ray căa hÿp chÃt PGE1 70

Hình 3.28 Mát phÅn phá 1H NMR căa hÿp chÃt PGE4 72

Hình 3.29 Mát phÅn phá 13C NMR căa hÿp chÃt PGE4 72

Hình 3.30 Mát số t°¢ng tác H↔C trên phá HMBC căa hÿp chÃt PGE4 73

Hình 3.31 Phá GC-MS căa hÿp chÃt PGE5 74

Hình 3.32 Phá khối căa hÿp chÃt PBE5 80

Hình 3.33 Phá 1H–NMR giãn căa PBE5 81

Hình 3.34 Phá 13C–NMR giãn căa PBE5 82

Hình 3.35 Phá HSQC giãn căa PBE5 82

Hình 3.36 Phá HMBC giãn căa PBE5 83

Hình 3.37 Phá HMBC giãn căa PBE5 84

DANH M ĀC CÁC KÍ HIÞU, CÁC CHĊ CÁI VI¾T TÂT

13C-NMR Carbon-13 Magnetic Resonance

Spectroscopy

Phá cáng h°ãng từ h¿t nhân carbon-13

1H-NMR Proton Magnetic Resonance Spectroscopy Phá cáng h°ãng từ h¿t nhân

proton

DEPT Distortionless Enhancement by

Polarisation Transfer

Phá DEPT

ESI-MS Electron Spray Ionization-Mass

Spectroscopy

Phá khối l°ÿng phun mù đián tÿ

HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation Phá t°¢ng tác dß h¿t nhân qua

nhiều liên kÁt H→C HPLC High Performance Liquid

Chromatography

SÃc ký lỏng hiáu năng cao

HR-ESI-MS High Relution-Electron Spray Ionization

Mass Spectroscopy

Phá khối l°ÿng phân giÁi cao phun

mù đián tÿ HSQC Heteronuclear Single Quantum

Từ xa x°a, nÃm đã đ°ÿc sÿ dāng ráng rãi trong đái sống không chỉ bãi h°¢ng

vß, khẩu vß và thành phÅn dinh d°ỡng, mà còn bãi nhāng giá trß chāa bánh căa chúng Thăc tÁ, nÃm đ°ÿc sÿ dāng làm thuốc đ°ÿc tìm thÃy trong nhiều nền văn hoá x°a và nay nh° ã Trung Quốc, Hàn Quốc, NhÁt BÁn, Trung và BÃc Mỹ Ngày nay, vßi să phát triển căa khoa hác kĩ thuÁt, nhiều hÿp chÃt có ho¿t tính kháng sinh, ho¿t tính

chống khối u và nhiều đặc tính d°ÿc đáng lăc khác nāa đ°ÿc tìm thÃy trong các loài nÃm lßn [8; 58]

Thái gian gÅn đây, ngußn tài nguyên vô tÁn chąa các hÿp chÃt có tác dāng sinh

hác (PSK (polysaccharide-K), PSP (polysaccharide-K)&) dùng để điều trß bánh đ°ÿc các nhà khoa hác chú ý đÁn nhiều là các loài nÃm lßn [60] Să đa d¿ng về há sinh thái nÃm ã Viát Nam thể hián qua să xuÃt hián căa ít nhÃt 651 loài nÃm thuác 182 chi chąa các hÿp chÃt có ho¿t tính sinh hác [99], nhāng hÿp chÃt này cho các khÁ năng chống ung th°, diát virut HIV hay hß trÿ cho há mißn dßch căa c¢ thể con ng°ái [11; 19] Nhāng hÿp chÃt có khối l°ÿng phân tÿ nhỏ nh° triterpenoid, flavonoid,& có ngußn gốc từ nÃm lßn đã đ°ÿc ghi nhÁn có khÁ năng kháng ung th°, kháng khối u, kháng virut hay kháng khuẩn, kháng nÃm [129]

NÃm d°ÿc liáu ã Viát Nam phong phú, nhiều loài là thuốc quý trong y hác cá truyền, là ngußn tài nguyên vô cùng quý giá cho khoa hác và thăc tißn nh°ng ch°a đ°ÿc các nhà khoa hác nghiên cąu nhiều, chỉ chă yÁu nghiên cąu về să đa d¿ng sinh

hác [2; 3; 6]

Viát Nam thuác vùng khí hÁu nhiát đßi ẩm gió mùa, là điều kián rÃt thuÁn lÿi cho să phát triển căa nhiều lo¿i nÃm Cho đÁn nay, các nhà khoa hác đánh giá s¢ bá n°ßc ta có khoÁng 22,000 loài nÃm Từ lâu, ng°ái Viát đã biÁt cách sÿ dāng nÃm làm thăc phẩm bá d°ỡng nh° nÃm h°¢ng, nÃm mỡ& làm các d°ÿc liáu điều trß các lo¿i bánh nh° nÃm linh chi, phāc linh&

Ngày nay, cuác sống đ°ÿc cÁi thián nhiều nh°ng l¿i xuÃt hián nhiều bánh hiểm nghèo nh° ung th°& Do vÁy, viác nghiên cąu nÃm sÿ dāng trong y hác đ°ÿc đặc biát chú tráng Nhá să tiÁn bá căa khoa hác kĩ thuÁt mà các nhà khoa hác đã tìm ra nhiều hÿp chÃt có khÁ năng kháng ung th°, chāa bánh từ nÃm Trên thÁ gißi đã có rÃt nhiều

đề tài nghiên cąu về nÃm và thăc tÁ đã chỉ ra rằng trong nÃm có nhiều chÃt có ho¿t tính sinh hác có giá trß chāa bánh rÃt hāu hiáu â Hàn Quốc, NhÁt BÁn và Trung Quốc trong nhiều thÁ kỉ đã sÿ dāng nÃm để ngăn ngừa các bánh nh° rối lo¿n chąc năng, xuÃt huyÁt, tiêu chÁy và ung th°& [3; 7; 8]

Chính vì vÁy chúng tôi chán đề tài “Nghiên cąu thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác căa nÃm Hexagonia tenuis, Phellinus gilvus, Phellinus baumii và

Ganoderma australe ã vùng BÃc Trung Bå” bằng cách sÿ dāng các kỹ thuÁt hián đ¿i

để phân tích, phân lÁp và xác đßnh cÃu trúc KÁt hÿp thÿ nghiám các ho¿t tính sinh hác kháng khuẩn, kháng nÃm và gây đác tÁ bào ung th° căa các hÿp chÃt này

2 Đối t°ÿng nghiên cąu

Đối t°ÿng nghiên cąu căa luÁn án là quÁ thể bốn loài nÃm H tenuis, P gilvus, P

3 Nhi ßm vā nghiên cąu

- ChiÁt hßn hÿp các hÿp chÃt từ quÁ thể bốn loài nÃm H tenuis, P gilvus, P baumii

và G australe

- Sÿ dāng các ph°¢ng pháp sÃc ký để phân lÁp các hÿp chÃt từ dßch chiÁt căa bốn lo¿i nÃm trên

- Xác đßnh cÃu trúc hóa hác căa nhāng hÿp chÃt phân lÁp đ°ÿc

- Thÿ ho¿t tính sinh hác căa mát số hÿp chÃt phân lÁp đ°ÿc

4 Ph°¢ng pháp nghiên cąu

- Ph°¢ng pháp phân tích, tách các hßn hÿp và phân lÁp các chÃt: sÿ dāng các ph°¢ng pháp sÃc ký cát th°áng (CC), sÃc ký lßp mỏng phân tích (TLC), sÃc ký cát nhanh (FC) vßi pha tĩnh là silica gel, sÃc ký lỏng hiáu năng cao (HPLC) phân tích trên các cát silica gel pha đÁo và pha th°áng

- Ph°¢ng pháp khÁo sát cÃu trúc các hÿp chÃt: CÃu trúc hoá hác căa các hÿp chÃt đ°ÿc xác đßnh bằng các ph°¢ng pháp vÁt lý hián đ¿i nh° phá tÿ ngo¿i (UV), phá hßng ngo¿i (IR), phá khối l°ÿng phun mù đián tÿ (ESI-MS), phá khối l°ÿng phân giÁi cao (HR-ESI-MS), phá cáng h°ãng từ h¿t nhân mát chiều (1D-NMR) và hai chiều (2D-

NMR) vßi các kỹ thuÁt khác nhau nh° H-NMR, C-NMR, DEPT, H- H COSY, HSQC và HMBC

- CÃu trúc lÁp thể t°¢ng đối căa các hÿp chÃt này đ°ÿc xác đßnh bằng ph°¢ng pháp phá NOESY

- Thÿ các ho¿t tính kháng vi sinh vÁt kiểm đßnh, ąc chÁ tÁ bào ung th°

5 Nh ċng đóng góp mßi căa luÁn án

- Đây là nghiên cąu đÅu tiên có há thống ã Viát Nam về thành phÅn hóa hác căa quÁ thể bốn loài nÃm Hexagonia tenuis, Phellinus gilvus, Phellinus baumii và

- 02 hÿp chÃt sterol: Ergosterol, ergosterol peroxide

- CÁ năm hÿp chÃt đều có khÁ năng ąc chÁ tÁ bào khối u SK-LU-1 (ung th° phái), HepG2 (ung th° gan), Hep3B (ung th° gan), SW480 (ung th° ruát kÁt) và MCF-7 (ung th° vú) Đây là các ho¿t tính lÅn đÅu tiên đ°ÿc khÁo sát đối vßi các hÿp chÃt này

2 Từ dßch chiÁt quÁ thể Phellinus gilvus phân lÁp đ°ÿc 5 hÿp chÃt:

- 03 hÿp chÃt phenolic: 1,2,4,5-tetrachloro-3,6-dimethoxybenzene;

(E)-4-(3,4-dihydroxyphenyl)but-3-en-2-one; bi(cyclohexane)]-3,39,6,69-tetraene-2,29,5,59-tetraone

4,49-dihydroxy-3,39,6,69-tetramethyl-[1,19 02 hÿp chÃt sterol: Ergosterol, ergosterol peroxide, các chÃt này đều có khÁ năng gây đác tÁ bào KB (ung th° biểu mô)

3 Từ dßch chiÁt quÁ thể nÃm Phellinus baumii phân lÁp đ°ÿc 5 hÿp chÃt:

- 05 hÿp chÃt polyphenol: 1,2,4,5-tetrachloro-3,6-dimethoxybenzene; aldehyde 3,4-dihydroxylbenzoic; methyl 3,4-dihydroxybenzoate; (E)-4-(3,4-

4 Từ dßch chiÁt quÁ thể nÃm Ganoderma australe phân lÁp đ°ÿc 6 hÿp chÃt:

- 04 hÿp chÃt triterpenoid: Ganoderic acid Sz, ganoderic acid Y, ganoderal A, ganoderol B;

- 02 hÿp chÃt sterol: Ergosterol, ergosterol peroxide

6 C Ãu trúc căa luÁn án

LuÁn án bao gßm 115 trang vßi 30 bÁng số liáu, 49 hình và 4 s¢ đß vßi 129 tài liáu tham khÁo KÁt cÃu căa luÁn án gßm: Mã đÅu (4 trang), táng quan (25 trang), ph°¢ng pháp và thăc nghiám (14 trang), kÁt quÁ và thÁo luÁn (60 trang), kÁt luÁn (1 trang), danh māc công trình công bố (1 trang), tài liáu tham khÁo (9 trang) Ngoài ra còn có phÅn phā lāc gßm 90 trang công thąc cÃu t¿o và phá căa các hÿp chÃt chán lác

Ch°¢ng 1 TàNG QUAN 1.1 Táng quan về chi Hexagonia

1.1.1 Đặc điểm hình thái, phân bố

Hián nay, theo Index Fungorum ghi nhÁn să tßn t¿i căa 41 loài nÃm thuác chi

không cuống, chia đôi, hình bán nguyát, luôn dai, bề mặt th°áng tr¢n tru; thân nÃm th°áng mỏng, có ba màu chă đ¿o: màu nâu, tối, hoặc vàng; lß chân lông lāc giác lßn, th°áng có mát màu sÃc nhẹ h¢n; bào tÿ trong suốt, hình trā, dài h¢n 12 µm, mßn, mỏng, và có các bào tÿ ngÃn h¢n loài Coriolopsis [8]

Phân bố chă yÁu ã vùng nhiát đßi Châu Á, Châu Phi, mát số loài ã Châu Âu â Châu Á gặp ã Trung Quốc, Viát Nam, Philippin [23; 58]

1.1.2 Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học

Số l°ÿng các công trình nghiên cąu về thành phÅn hóa hác căa chi Hexagonia

còn ch°a nhiều Mặc dù, ho¿t tính sinh hác căa các loài trong chi này cũng rÃt đáng quan tâm khi chúng thể hián mát lo¿t các ho¿t tính sinh hác nh° khÁ năng chống oxy hóa, kháng nÃm, kháng khuẩn, kháng khối u,

Trong các năm 2009-2011, loài nÃm H speciosa là loài đÅu tiên đ°ÿc tiÁn hành nghiên cąu thành phÅn hóa hác bãi nhóm Jiang M Y và cáng să, đã phân lÁp từ dßch chiÁt ethyl acetate đ°ÿc 21 hÿp chÃt cyclohexanoid từ loài này Chúng có ho¿t tính chống oxy hóa cao, ho¿t tính kháng khối u bao gßm speciosin A-T, 59-O-acetylaporpinon A và aporpinon A [46; 47]

Khi nghiên cąu thành phÅn hóa hác căa quÁ thể nÃm H tenuis năm 2014, nhóm nghiên cąu Akemi Umeyama đã phân lÁp đ°ÿc 3 hÿp chÃt triterpenoid là hexatenuin A-C Các hÿp chÃt này có ho¿t tính chống ung th° [113]

â Viát Nam, công trình luÁn án tiÁn sĩ căa Nguyßn Thß Bích Ngác (2015) đã báo cáo về thành phÅn dßch chiÁt quÁ thể nÃm H apiaria gßm có 7 hÿp chÃt

triterpenoid hexagonin A-E, hexatenuin A, ursolic acid và hai hÿp chÃt sterol phá biÁn trong các loài nÃm là ergosterol, ergosterol peroxide Các hÿp chÃt này đều có khÁ năng kháng viêm [5; 110]

Nh° vÁy cho đÁn nay, mßi chỉ có ba loài nÃm H speciosa, H tenuis và H

yÁu là cyclohexanoid, triterpenoid và steroid Chúng có ho¿t tính sinh hác chă yÁu là chống oxi hóa, kháng u và kháng viêm

Phân bố: Châu Á và mát số đÁo ã Thái Bình D°¢ng và Úc [23; 58]

1.2.2 Thành phần hóa học và hoạt tính sinh học

Công trình đÅu tiên về thành phÅn hóa hác căa loài nÃm H tenuis do Akemi M

và cáng să thăc hián vào năm 2014, cho thÃy să hián dián căa 3 hÿp chÃt antitrypanosomal là hexatenuin A-C Các hÿp chÃt này biểu hián khÁ năng chống ung th°, đây là tiềm năng để phát triển d°ÿc liáu từ sÁn phẩm thiên nhiên [113]

BÁng 1.1 Các hÿp chÃt và ho¿t tính sinh hác căa loài nÃm H tenuis

1.3 Táng quan về chi Phellinus

1.3 1 Đặc điểm hình thái, phân bố

1.3.1.1 Gißi thiáu chi Phellinus

Há: Hymenochaetaceae

Chi: Phellinus

Cho đÁn nay, trên thÁ gißi đã tìm thÃy 41 chi thuác há Hymenochaetaceae và

138 loài nÃm thuác chi Phellinus [16] Mát số loài nÃm Phellinus đã đ°ÿc sÿ dāng trong các bài thuốc cá truyền ã Trung Quốc, Hàn Quốc, NhÁt BÁn, Trung và BÃc Mỹ Nhiều loài thuác chi Phellinus đã đ°ÿc nghiên cąu và sÿ dāng làm thuốc chāa bánh

điển hình nh°: P igrliurius, P linteus, P baumii, P rhabarbarinus, P pini&[3; 8;

19]

Chi Phellinus phân bố chă yÁu ã các vùng nhiát đßi châu Mỹ, châu Phi và

Đông Á [3; 8]

1.3.2 Thành ph Ån hóa hác và ho¿t tính sinh hác

Theo các nghiên cąu căa các nhà khoa hác trên toàn thÁ gißi, hián nay có khoÁng 12 loài (P igniarius, P rhabarbarinus, P linteus, P pini, P adamantinus, P

tremulae, P tuberculosus, P pomaceus, P gilvus, P torulosus, P ribis, P baumii) đ°ÿc nghiên cąu về thành phÅn hóa hác Các hÿp chÃt đ°ÿc tìm thÃy chă yÁu căa các loài nÃm thuác chi Phellinus là các hÿp chÃt steroid, terpenoid, flavonoid, polysaccharide và protein-polysaccharide, styrylpyrone, furane và polychlorinate [72; 74; 128]

1.3.2.1 Steroid

Theo các tài liáu nghiên cąu về các loài nÃm thuác chi Phellinus cho thÃy thành

phÅn hóa hác căa chúng có nhiều hÿp chÃt steroid Năm 1969, Efimenko đÅu tiên công

bố phân lÁp đ°ÿc ergosterol từ P pini [24] Trong các nghiên cąu tiÁp theo về thành

phÅn hóa hác căa các loài trong chi này cũng cho thÃy cÃu trúc khung căa các steroid chă yÁu là ergostane và pregnane

Năm 2006, phellinol đ°ÿc nhóm nghiên cąu căa Đặng Ngác Quang phân lÁp từ mát loài thuác chi Phellinus, cùng vßi senexonol và ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one [97]

Năm 2007, các steroid tiÁp tāc đ°ÿc phân lÁp và xác đßnh cÃu trúc từ loài P

6-O-methyl cerevisterol [86]

Năm 2009, 5³-ergosta-7,22-dien-3-one đ°ÿc công bố phân lÁp từ loài P gilvus

bãi Liu và các cáng să [80]

Năm 2010-2015, sáu hÿp chÃt steroid là thành phÅn hóa hác căa loài P

và ba d¿n xuÃt căa heptanorergosterane phellinignincisterol A-B, tetrahydroxy-4³-methylpregn-8-ene và 3³,12³,17³,20-tetrahydroxy-4³-methylpregn-

3³,17³,19,20-8-ene [120; 124]

Năm 2016, Liu tiÁp tāc phân lÁp đ°ÿc năm steroid là

(22E,24R)-ergosta-5,7,22-trien-3β-ol, 5³,6³-epoxyergosta-8-(14),22-dien-3β,7³-diol,

(22E,24R)-3 β,5³,9³-trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one từ loài P rhabarbarinus [25]

BÁng 1.2 Các hÿp chÃt steroid và ho¿t tính sinh hác căa các loài nÃm thuác chi

25 Ergosterol peroxide

Gây đác tÁ bào ung th° c¢ vân, kháng vi khuẩn

tā cÅu vàng

Staphylococcus aureus

ergosta-triol) đ°ÿc tìm thÃy lÅn đÅu tiên từ P adamantinus t¿i v°án quốc gia Cúc Ph°¢ng do

nhóm nghiên cąu Lê Mai H°¢ng và cáng să đã phân lÁp [42]

Nh° vÁy, cho đÁn nay có khoÁng h¢n 26 hÿp chÃt steroid đ°ÿc xác đßnh phân lÁp từ các loài thuác chi Phellinus (P linteus, P gilvus, P igniarius, P rhabarbarinus,

1.3.2.2 Terpenoid

Sesquiterpenoid, diterpenoid và triterpenoid là các lßp chÃt terpenoid phân lÁp chă yÁu từ chi Phellinus Năm 1986, javeroic acid và phellinic acid đ°ÿc công bố tßn t¿i trong loài P pomaceus [32] Ngoài ra, Gonzalez cũng đã phân lÁp đ°ÿc pomacerone (23,26-dioxo-lanosta-8(9),23,25-trien-3,22-dione) là mát furanoid triterpene [33]

Khung tramulen là d¿ng khung chă yÁu thu đ°ÿc khi nghiên cąu thành phÅn hóa hác căa P igniarius, 9 hÿp chÃt khung tramulene đã đ°ÿc công bố bao gßm (+)-

(3S,6S,7S,10S)-tremulene-10,11,12-triol, diol, (+)-(3S,6R,7R)-tremulene-6,11,12-triol, (+)-(1R,6S,7S)-tremul-2-ene-12(11)- lactone), (+)-(3S,6R,7R,10S)-tremulene-6,10,12-triol, (-)-(2S,3S,6S,7S,9S)-tremul- 1(10)-ene-11,12,15-triol, (-)-(2S,3S,6S,7S,9R)-tremul-1(10)-ene-11,12,14-triol, (-)-

(+)-(2S,3R,6S,7S)-tremul-1(10)-ene-2,12-(2R,3S,6S,7S,9R)-tremul-1(10)-ene-11,12,14-triol,

(-)-(2S,3S,4S,6S,7S)-tremul-1(10)-ene- 4,11,12-triol [120] Năm 1993, Ayer và cáng să đã công bố phân lÁp mát nhóm các tremulane thuác lßp chÃt sesquiterpenoid bao gßm tremulenolide A, tremulenolide

B, tremulenedial, tremulenedial dibenzyl acetal, tremulenediol A và B, tremulenediol

C, tremuladienol mßi từ P tremulae [13]

Năm 2014, các hÿp chÃt tremulane sesquiterpene căa chi Phellinus tiÁp tāc

đ°ÿc Yin và cáng să công bố khi phân lÁp đ°ÿc 5 hÿp chÃt trihydroxytremul-1(10)-ene, 11,12-dihydroxyl-7ò-peroxy-hydroxyl-tremul-1(10)-ene, 6ò,12-dihydroxytremulene, 10ò,12-dihydroxy-tremulene và 12,15-dihydroxy-tremulene [123] Điều này chąng tỏ các hÿp chÃt tremulane sesquiterpene đặc tr°ng

6ò,11,12-cho các loài Phellinus

Ngoài ra, các hÿp chÃt sesquiterpenoid có cÃu trúc khung drimane nh° phellinuin A-G tiÁp tāc đ°ÿc Liu và cáng să phân lÁp đ°ÿc từ P tuberculosis, cho thÃy lo¿i khung này cũng là thành phÅn chă yÁu căa Phellinus [37]

Să đa d¿ng cÃu trúc khung căa hÿp chÃt sesquiterpenoid trong thành phÅn căa

12-hydroxy-³-cadinol, 3³,12-dihydroxy-·-cadinol, 3³,6³-dihydroxyspiroax-4-ene,

eudesm-1β,6³,11-triol từ P igniarius [104; 124], và phellinuin J, sulphureuine A từ P

thẳng cũng đ°ÿc tìm thÃy nh° phellinuin H, phellinuin I; dien-3,6,7-triol; 3,7,11-trimethyldodeca-2,10-dien-1,6,7-triol; 2,3,6,7,10,11-pentaol, 3,7-dimethyl-6-octen-1,2,3-triol; 3,7-dimethylocta-1,6-dien-3,8-diol [39] 8,14-labdadien-13-ol và dehydroabietic acid đã đ°ÿc phân lÁp từ quÁ thể căa P pini [45]

3,7,11-trimethyldodeca-1,10-Ngoài ra, các hÿp chÃt sesquiterpenoid là 3ò,11,12-trihydroxydrimene, trihydroxydrimene, 11,12-O-isopropyldrimene cũng đã đ°ÿc phân lÁp từ loài P

11,12,13³-tuberculosus [38]

Năm 2016, các hÿp chÃt phellibarin A-C đã đ°ÿc Feng và cáng să phân lÁp thành công từ quÁ thể nÃm P rhabarbarinus [25] CÃu trúc khung lanostane cũng đ°ÿc tìm thÅy bãi Wang và cáng să khi nghiên cąu thành phÅn căa P iginarius, đã phân lÁp

đ°ÿc igniaren A-D [115] Các lanostane-triterpenoid đ°ÿc phân lÁp từ P gilvus bao gßm các gilvsin A–D [80] Ba triterpenoid bao gßm natalic, torulosic, albertic acid và các d¿n xuÃt methyl hóa căa chúng đã đ°ÿc phân lÁp từ loài nÃm P torulosus [34]

Trong nghiên cąu căa nhóm Nguyßn Ngác TuÃn đã xác đßnh đ°ÿc 2 hÿp chÃt triterpenoid là gilvsin A và gilvsin B Hai triterpenoid này lÅn đÅu tiên phân lÁp đ°ÿc

từ loài nÃm P pini [4]

Năm 2018, Nguyßn Tân Thành và cáng să đã phân lÁp đ°ÿc mát triterpenoid

đặt tên là igniarine từ dßch chiÁt methanol căa quÁ thể nÃm P igniarius [111]

BÁng 1.3 Hÿp chÃt terpenoid đ°ÿc phân lÁp từ Phellinus

[25]

Năm hÿp chÃt flavonoid đ°ÿc phân lÁp từ P igniarius bao gßm naringenin,

sakuranetin, aromadendrin, folerogenin và eriodictyo [91] Hai hÿp chÃt flavonoid là phelligrin A và B cũng đã đ°ÿc phân lÁp từ loài P igniarius [90]

BÁng 1.4 Hÿp chÃt flavonoid đ°ÿc phân lÁp từ Phellinus

chống đông tā tiểu cÅu, chống oxi hóa và trß bánh tiểu đ°áng [18; 22]

BÁng 1.5 Các hÿp chÃt styrylpyrone từ các loài Phellinus

[12], [31], [49], [95], [96], [102], [118]

[26], [31], [49], [77], [118]

[49], [53], [118]

10

Phelligridin E-J P igniarius Chống oxi hóa,

gây đác tÁ bào

[66], [89], [117], [116]

12 Inoscavin A P igniarius, P linteus Chống oxi hóa,

chống tiểu đ°áng

chống tiểu đ°áng, kháng viêm

Bốn d¿n xuÃt furane (phellinone, phellinusfuran A và B, inotilone) đã đ°ÿc phân lÁp từ quÁ thể nÃm Phellinus linteus [75; 88; 122]

Từ dßch chiÁt n°ßc chąa polysaccharide (PIP) căa sÿi nÃm P igniarius CÃu trúc căa PIP1 đ°ÿc xác đßnh gßm các monosaccharide căa glucose, galactose, và mannose Tỉ lá mol là 3.70:4.06:1.00 Khối l°ÿng phân tÿ 17 kD Từ quÁ thể nÃm P

17.1 kDa và thành phÅn gßm L-fucose, D-glucose, D-mannose, D-galactose và Me-D-galactose vßi tỉ lá 1:1:1:2:1 [121] β-D-glucan, mát polysaccharide cũng đ°ÿc phân lÁp từ P baumii [81] Các polysaccharide phân lÁp từ P linteus, P igniarius biểu hián khÁ năng điều hòa há mißn dßch rÃt cao và khÁ năng hß trÿ điều trß cao [94]

3-O-Từ dßch chiÁt n°ßc căa quÁ thể P ribis đã phân lÁp đ°ÿc mát polysaccharide là PRP [82] Ngoài ra, từ dßch chiÁt n°ßc căa P igniarius còn phân lÁp đ°ÿc mát heteropolysaccharide là PISP1 Nó có thành phÅn bao gßm fucose, galactose, mannose, và 3-O-Me-galactose vßi tỉ lá 1:2:1:2 [121]

Ngoài các lßp chÃt trên, các hÿp chÃt chuyển hóa bÁc hai đ°ÿc sÁn sinh từ

d¿n xuÃt căa indole [105], courmarin [91] và carboxylic acid &

BÁng 1.6 Các hÿp chÃt khác đ°ÿc phân lÁp từ chi Phellinus

1.4 1 Đ¿c điểm hình thái, phân bố

Tên khoa hác là nÃm Phellinus baumii, có kích th°ßc khá lßn, có bề mặt màu vàng t°¢i, khá mßn, còn bề ngoài thân nÃm thì sÅn sùi, vỏ gß rÃn chÃc nh° thân cây lâu

năm NÃm P baumii sinh tr°ãng và phát triển lâu năm trong rừng, th°áng mác trên

cây gß lßn hay trên nhāng xác cây đã chÁt [8]

Viát Nam trong điều trß bánh tiểu đ°áng [7; 8] & Trong tă nhiên, chúng th°áng đ°ÿc tìm thÃy trong các khu rừng nguyên sinh

1.4.2 Thành ph Ån hóa hác và ho¿t tính sinh hác

Trong các nghiên cąu để tìm ra các sÁn phẩm d°ÿc liáu từ các loài nÃm, các nhà khoa hác trên toàn thÁ gißi đã nghiên cąu về ho¿t tính kháng tÁ bào ung th°, gây đác tÁ bào căa các ho¿t chÃt có trong nÃm P baumii [81] Theo nghiên cąu này, mát

polysaccharide đßng nhÃt (PPB) đ°ÿc tinh chÁ từ nÃm P baumii và tiÁn hành thÿ các

ho¿t đáng chống ung th°, điều hòa mißn dßch trên tÁ bào HeLa (ung th° tÿ cung), SGC-7901 (ung th° d¿ dày) KÁt quÁ cho thÃy, PPB ąc chÁ să gia tăng căa các tÁ bào HeLa và SGC-7901 mát cách đáng kể, và các nghiên cąu trên tÁ bào tiÁt lá rằng PPB

có thể làm trung gian cho chu kỳ tÁ bào trong các pha G0/G1 và S H¢n nāa, PPB có thể làm khuÁch đ¿i să tăng tr°ãng và thăc bào căa các tÁ bào RAW264.7, kích ho¿t să

bài tiÁt các cytokine nh° TNF- ³ và IL-6, từ đó chỉ ra rằng PPB có đác tính thÃp KÁt quÁ cho thÃy PPB là mát chÃt bá trÿ tiềm năng trong trß liáu ung th°

Nhóm nghiên cąu Lee I K đã phân lÁp đ°ÿc đ°ÿc các chÃt có tính oxi hóa tă nhiên từ nÃm P baumii Trong đó, có mát styrylpyrone mßi là baumin, cùng vßi nhāng hÿp chÃt đã biÁt là davallialactone, hispidin, hypholomine B, interfungin A,

inoscavin A và phelligridin D đã phân lÁp từ các loài nÃm P ignarius, P linteus [63]

Bên c¿nh đó, báo cáo thành phÅn hóa hác từ nÃm P baumii căa Wu C S và cáng să [119] đã công bố să tßn t¿i căa các hÿp chÃt phenolic có khÁ năng ąc chÁ NF-

kB (Nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B) là hispidin,

phellibaumin A-E Benzyl dihydroflavone epimeric, methylphelligrin A, methylphelligrin A, methylphelligrin B và epi-methylphelligrin B, cùng vßi năm hÿp

chÃt khác bao gßm interfungin B, phelligridin H, phelligridimer A, phelligrin A và phelligrin A Phellibaumin A là d¿n xuÃt căa hispidin vßi đ¢n vß 3,4-dihydroxybenzofuran duy nhÃt Các hÿp chÃt này thể hián ho¿t tính ąc chÁ NF-kB vßi giá trß IC50 t°¢ng ąng là 52,96 μM, 41,40 μM, 52,92 μM, 36,44 μM và 22,46 μM Các

epi-hÿp chÃt benzylate dihydroflavone còn đ°ÿc phân lÁp từ loài P baumii bao gßm (+) methylphelligrin A, (-) epi-methylphelligrin A, methylphelligrin B, epi-

1.5 1 Đặc điểm hình thái, phân bố

cây sống NÃm có màu nâu, cąng, d¿ng gß [54] NÃm mác quanh năm, th°áng mác trên cây gß cąng, phát triển m¿nh sau m°a, có chu kì ngÃn, chỉ khoÁng 3 tháng NÃm tr°ãng thành th°áng có chiều dài khoÁng 5-15 cm, dày khoÁng 1,5-3,0 cm, th°áng có hình qu¿t, và mác chßng chéo nhau nÁu phát triển lâu năm, màu vàng đÁn vàng nâu, hoặc nâu tối Thân nÃm th°áng mÃp mô, nhiều vÁt lßi lõm và có lông màu vàng đÁn đỏ hoặc nâu [16]

Hàn Quốc, NhÁt BÁn, Trung Quốc, các vùng rừng từ thÃp đÁn cao ã Đài Loan, vùng Nam Á nh° Pakistan, America hay các vùng thuác châu Mỹ nh° Mexico, Mỹ, Uruguay& [15; 16; 80]

(a)

(b)

Hình 1.2 NÃm P gilvus trong tă nhiên (a) và nÃm P gilvus đ°ÿc thu hái và đã xÿ lí ã

Viát Nam (b)

1.5.2 Thành ph Ån hóa hác và ho¿t tính sinh hác

Theo các nghiên cąu đã công bố, các dßch chiÁt thu đ°ÿc từ quÁ thể nÃm P

gilvus là có khÁ chÃt ąc chÁ viêm phái [44] Các công trình nghiên cąu về nÃm P

Polysaccharide đ°ÿc phân lÁp từ nÃm P gilvus có khÁ năng ąc chÁ bánh viêm

phái, ngăn ngừa să tiêu huỷ tÁ bào beta tuyÁn tuỵ và các bánh liên quan đÁn viêm nái t¿ng Macrophage đ°ÿc biÁt đÁn nh° mát tác nhân có khÁ năng tốt trong viác làm lành các vÁt th°¢ng trên da, trong khi đó, polysaccharide thúc đẩy ho¿t đáng căa macrophage Do đó, polysaccharide có khÁ năng làm lành các vÁt th°¢ng trên da ã nhāng ng°ái bß bánh tiểu đ°áng, nâng cao khÁ năng mißn dßch c¢ thể, có tác dāng chống phóng x¿, giÁi đác, nâng cao chąc năng gan, tuỷ x°¢ng, máu, tăng sinh táng hÿp các thành tố: DNA, RNA, protein, kéo dài tuái thá, chống u ác tính [15; 16]

Ngoài ra trong P gilvus còn chąa ergosterol mát lo¿i tiền vitamin D2, hß trÿ hÃp thā canxi, có thể ngăn ngừa chąng loãng x°¢ng Theo tài liáu [80], Hui-Kang Liu

và cáng să đã phân lÁp đ°ÿc các hÿp chÃt triterpenoid từ nÃm P gilvus: 24-methylenelanost-8-en-3-one (d¿ng tinh thể), 3β,22R-dihydroxy-24-

22-hydroxy-methylenelanost-8-en-28-oic acid, one, 22(R)-hydroxy-24-methylene-3-norlanost-8-en-oic acid hay trametanolic acid, 24-

22(R)-hydroxy-24-methylene-29-norlanost-8-en-3-methylenelanost-8-en-3β,22-diol và 5³-ergosta-7,22-dien-3-one [72]

BÁng 1.8 Thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác căa Phellinus gilvus

1.6 Táng quan về chi Ganoderma

1.6 1 Đ¿c điểm, phân bố và phân lo¿i

1.6.2 Thành ph Ån hóa hác và ho¿t tính sinh hác

GÅn nÿa thÁ kỷ qua, viác nghiên cąu thành phÅn hóa hác và ho¿t tính sinh hác

căa chi này, đã tìm thÃy đ°ÿc h¢n 400 các hÿp Các hÿp chÃt chuyển đái bÁc hai đ°ÿc phân lo¿i nh° sau:

+ Triterpenoid (chă yÁu là khung lanostane (ganoderic, aldehyde, alcohol, ester, glycoside, lactone, ketone), meroterpenoid, farnesyl hydroquinone (meroterpenoid))

Các nhà khoa hác tÁp trung chă yÁu nghiên cąu thành phÅn hóa hác căa căa

loài G lucidum Ngoài ra, mát số loài nh° G applanatum, G colossum, G sinense, G

Các ąng dāng chính căa nÃm linh chi nh° chāa bánh: Tăng cholesterol máu, tiểu đ°áng, ung th°, x¢ vāa đáng m¿ch, bánh trĩ, viêm gan, mát mỏi mãn tính, giÁm b¿ch cÅu, suy giÁm mißn dßch, viêm phÁ quÁn, mÃt ngă và chóng mặt do suy nh°ÿc

thÅn kinh, và cao huyÁt áp [17; 27; 28; 84; 103]

Thành phÅn hóa hác căa nÃm G lucidum bao gßm hai nhóm chính: Lanosterol (ganoderic acid và các d¿n xuÃt căa chúng) và các polysaccharide [21] Ngoài ra, loài nÃm này còn chąa các peptide có khối l°ÿng phân tÿ thÃp và các protein có ho¿t tính sinh hác đa d¿ng [106; 107]

Dßch chiÁt n°ßc căa nÃm linh chi đã đ°ÿc chąng minh có hiáu quÁ trong viác

ąc chÁ să phát triển căa sarcoma Trong khi các dßch chiÁt không phân căc là không có khÁ năng này, chúng có ho¿t tính m¿nh là chống să oxi hóa lipid, cũng nh° thu dán các gốc tă do [48]

1.7 NÃm Ganoderma australe

1.7.1 Đ¿c điểm hình thái, phân bố

Há: Ganodermataceae

Chi: Ganoderma Loài: Ganoderma australe

Tên th°áng gái: Cá linh chi QuÁ có d¿ng hình dÃu ngoặc, không có cuống, th°áng gÃn trăc tiÁp vào cây Kích th°ßc chiều ngang từ 7-60cm, ráng 5-25 cm, dày 3-30 cm, bề mặt phía trên dày, cąng, lßi lõm có nốt, phân thành các vòng trÅn, có vỏ dai chÃc Màu quÁ thể th°áng màu xám hoặc màu nâu Đối vßi nhāng quÁ thể già th°áng có các vòng rõ ràng từ màu nâu xám chuyển sang màu nâu đen và các bào tÿ th°áng có màu đỏ nâu Viền quÁ thể phßng lên có màu kem hoặc h¢i vàng [8]

Hình 1.3 Ganoderma australe lâu năm

Th°áng mác đ¢n, sống lâu năm, không ăn đ°ÿc Chúng th°áng ký sinh trên các cây gß, gây ra bánh thối trÃng, giÁt chÁt cây chă, và có thể sống vài năm nāa trên gốc cây đã chÁt [7]

này mßi chỉ đ°ÿc ghi nhÁn là phân bố ã v°án quốc gia Pù Mát-Nghá An, dãy Tr°áng S¢n thuác tỉnh Thừa Thiên HuÁ [8]

1.7.2 Thành ph Ån hóa hác và ho¿t tính sinh hác

Hián nay, số l°ÿng nghiên cąu về thành phÅn hóa hác loài G australe còn rÃt

ít Đây có thể là nghiên cąu đÅu tiên về loài này ã Viát Nam

Năm 1984, Amolak C J và cáng să đã phân lÁp đ°ÿc 4 hÿp chÃt từ loài nÃm này ã Ân Đá gßm 3 steroid là ergosterol, ergosterol palmitate, ergosta -7,22-dien-3-one và mát lanostane triterpenoid là lanosta-7,9(11),24-trien-3ò,21-diol [9]

Khi nghiên cąu hàm l°ÿng acid béo (fatty acid) từ quÁ thể, bào tÿ và sÿi nÃm căa loài G australe, Martinez A T và cáng să thÃy rằng hàm l°ÿng lipid v¿n chiÁm 5-6% tráng l°ÿng khô, trong đó hàm l°ÿng acid béo chiÁm 6-14% lipid toàn phÅn [51]

Năm 2000, 5 triterpenoid là applanoxidic acid A, C, F, G, và H cùng 3 steroid

là 5³-ergost-7-en-3ò-ol, 5³-ergost-7,22-dien-3ò-ol và 5,8-epi-dioxy-5

³,8³-ergost-6,22-dien-3ò-ol đã đ°ÿc phân lÁp từ loài này [29]

Năm 2007, Albino S và cáng să đã tách đ°ÿc từ loài G australe ã Brazil hai

ho¿t chÃt là methyl australate và australic acid [29]

Năm 2018, 20-hydroxy-3,12,15,23-tetraoxolanosta-7,9(11),16-trien-26-oic acid, methyl australe, applanoxidic acid và applanoxidic acid đã đ°ÿc phân lÁp từ loài này, chúng cho thÃy khÁ năng kháng khuẩn Plasmodium falciparum K1, Bacillus cereus,

Escherichia coli [43]

Năm 2019, khi khÁo sát thành phÅn hóa hác và ho¿t tính chống oxi hóa, khÁ

năng ąc chÁ ³-glucosidase căa loài Ganoderma australe đã xác đßnh đ°ÿc 7 hÿp chÃt

bao gßm mát cyclic dipeptide (6-methoxyl-cyclo-(Phe-Ile)), applanoxidic acid A methyl este, ergosta-7,22E-dien-3β-ol, cinnamic acid, 5³,8³-epi-dioxy-(20S,22E,24R)-

ergosta-6,22-diene-3β-ol, 1-(3, 4-dihydroxyphenyl) ethanone, salicylic acid and

benzoic acid [126; 127]

Tóm l¿i, các công trình nghiên cąu thành phÅn hóa hác căa loài này cũng còn nhiều h¿n chÁ (1984- 2019) mßi có khoÁng h¢n 11 công trình công bố Các hÿp chÃt chă yÁu thu đ°ÿc là các triterpenoid, steroid, cyclic dipeptide& Các hÿp chÃt này thể hián ho¿t tính chă yÁu là kháng vi sinh vÁt, chống oxi hóa và ąc chÁ ³-glucosidase