(Luận án tiến sĩ) Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Và Hoạt Tính Sinh Học Của Loài Tacca Vietnamensis Và Loài Tacca Chantrieri Ở Việt Nam

Đánh giá ho¿t tính kháng viêm cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc tư뀀 hai loài Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri; 4.. Đánh giá ho¿t tính gây đác tế bào cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc tư

Trang 1

VÀ CÔNG NGHà VIàT NAM

HàC VIàN KHOA HàC VÀ CÔNG NGHà

-

Vũ Thß Quỳnh Chi

NGHIÊN CĄU THÀNH PHÀN HÓA HàC VÀ HO¾T TÍNH

SINH HàC CĂA LOÀI Tacca vietnamensis VÀ

LOÀI Tacca chantrieri â VIàT NAM

LU¾N ÁN TI¾N SỸ HÓA HàC

Hà N ội - 2018

Trang 2

Bà GIÁO DĀC VÀ ĐÀO T¾O VIàN HÀN LÂM KHOA HÞC

VÀ CÔNG NGHà VIàT NAM

HàC VIàN KHOA HàC VÀ CÔNG NGHà

-

NGHIÊN CĄU THÀNH PHÀN HÓA HàC VÀ HO¾T TÍNH

SINH HàC CĂA LOÀI Tacca vietnamensis VÀ

LOÀI Tacca chantrieri â VIàT NAM

Chuyên ngành: Hóa H ữu C¡

Mã s ố: 9.44.01.14

LU¾N ÁN TI¾N SỸ HÓA HàC

NG¯äI H¯âNG DÀN KHOA HÞC

1 TS Nguyßn Xuân Nhiám

2 TS Ph¿m H¿i Yến

Hà N ội - 2018

Trang 3

LàI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan luận án này là công trình nghiên cāu cÿa tôi d°ãi sự h°ãng dÁn khoa hßc cÿa TS Nguyßn Xuân Nhiám và TS Ph¿m H¿i Yến Các

số liáu, kết qu¿ trong luận án là trung thực và ch°a đ°ÿc công bố trong bÁt kỳ

công trình nào khác

Hà Nái, ngày tháng năm 2018

Tác giÁ lu¿n án

Trang 4

LàI CÀM ¡N

Luận án này được hoàn thành tại Viện Hóa sinh biển - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Trong quá trình nghiên cāu, tác giả đã nhận được nhiều sự giúp đỡ quý báu cÿa các thầy cô, các nhà khoa học, các đồng nghiệp, bạn

bè và gia đình

Tôi xin trân trọng bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới Ban lãnh đạo Viện Hóa sinh biển cùng tập thể cán bộ cÿa Viện về sự quan tâm, ÿng hộ to lớn và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cāu

Tôi xin chân thành cảm ơn Phòng Nghiên cāu cấu trúc - Viện Hóa sinh biển, đặc biệt là PGS TS Phan Văn Kiệm về sự quan tâm giúp đỡ, với những lời khuyên

bổ ích và những góp ý quý báu trong việc thực hiện và hoàn thiện luận án

Tôi xin cảm ơn, sự cảm phục và kính trọng nhất tới TS Nguyễn Xuân Nhiệm

viên, khích lệ và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong suốt thời gian thực hiện luận án

Tôi xin trân trọng cảm ơn Khoa Dược, Trường Đại học Quốc gia Chungnam

đánh giá hoạt tính sinh học

Tôi xin chân thành cảm ơn tới chỉ huy, lãnh đạo Trung tâm Quan trắc - Phân tích Môi trường biển và các đồng nghiệp đã ÿng hộ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian làm nghiên cāu sinh

Tôi xin chân thành cảm ơn Quỹ phát triển khoa học và công nghệ Việt Nam (NAFOSTED) đã tài trợ kinh phí theo mã số đề tài 104.01-2012.22

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc nhất tới toàn thể gia đình, bạn bè và những người thân đã luôn luôn quan tâm, khích lệ, động viên tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cāu

Xin trân trọng cảm ơn!

Trang 5

M ĀC LĀC

M ĀC LĀC I DANH M ĀC CÁC CHĀ VI¾T TÀT V DANH M ĀC BÀNG VII DANH M ĀC HÌNH VIII

M â ĐÀU 1

CH¯¡NG 1 TàNG QUAN 3

1.1 Gißi thiáu về chi Tacca 3

1.1.1 Đặc điểm thực vật của chi Tacca 3

1.1.2 Tình hình s ử dụng trong y học cổ truyền các loài thuộc chi Tacca 4

1.1.3 Tình hình nghiên c ứu về thành phần hóa học của chi Tacca 6

1.1.3.1 Các hợp chất taccalonolide 6

1.1.3.2 Các h ợp chất withanolide và withanolide glycoside 9

1.1.3.3 Các h ợp chất cholestan glycoside 10

1.1.3.4 Các h ợp chất spirostanol và spirostanol glycoside 12

1.1.3.5 Các h ợp chất furostanol glycoside 13

1.1.3.6 Các h ợp chất pregnane glycoside 15

1.1.3.7 Các h ợp chất diaryl heptanoid và diaryl heptanoid glycoside 17

1.1.3.8 Các h ợp chất khác 18

1.1.4 Ho ạt tính sinh học của chi Tacca 20

1.1.4.1 Tác d ụng hỗ trợ và điều trị ung thư 20

1.1.4.2 Ho ạt tính kháng viêm 21

1.1.4.3 Tác d ụng kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxi hóa và hạ huyết áp 21

1.1.5 Tình hình nghiên c ứu về chi Tacca ở Việt Nam 22

1.2 Gißi thiáu về loài Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri 23

1.2.1 Loài Tacca vietnamensis 23

1.2.2 Loài Tacca chantrieri 23

1.3 Gi ßi thiáu về ung th° 24

1.3.1 Ung thư và một số phương pháp điều trị bệnh 24

1.3.1.1 Các đặc tính cơ bản cÿa bệnh ung thư 24

1.3.1.2 Một số phương pháp điều trị bệnh ung thư 27

1.3.2 M ột số loại thuốc điều trị ung thư hiện nay có nguồn gốc từ tự nhiên 29

1.4 Gi ßi thiáu về kháng viêm 31

1.4.1 Sơ lược về viêm 31

Trang 6

1.4.1.2 Các giai đoạn cÿa quá trình viêm 31

1.4.1.3 Các yếu tố tham gia quá trình viêm 32

1.4.2 Các thu ốc kháng viêm 34

1.4.3 M ột số sản phẩm từ tự nhiên có hoạt tính kháng viêm 35

CH¯¡NG 2 THĂC NGHIàM VÀ K¾T QUÀ 37

2.1 Đßi t°ÿng nghiên cąu 37

2.1.1 Loài Tacca vietnamensis Thin et Hoat 37

2.1.2 Loài Tacca chantrieri André 37

2.2 Ph°¢ng pháp nghiên cąu 37

2.2.1 Phương pháp phân lập các hợp chất 37

2.2.1.1 S ắc ký lớp mỏng (TLC) 37

2.2.1.2 S ắc ký cột (CC) 37

2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc 37

2.2.2.1 Ph ổ khối lượng (MS) 38

2.2.2.2 Ph ổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS) 38

2.2.2.3 Ph ổ cộng hưởng từ nhân (NMR) 38

2.2.2.4 Ph ổ lưỡng sắc tròn (CD) 38

2.2.2.5 Điểm nóng chảy (Mp) 38

2.2.2.6 Độ quay cực ([³]) 38

2.2.2.7 Phương pháp xác định đường 38

2.2.3 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học 39

2.2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư 39

2.2.3.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng viêm 41

2.3 Phân l ¿p các hÿp ch¿t 43

2.3.1 Các h ợp chất phân lập từ loài T vietnamensis 43

2.3.2 Các h ợp chất phân lập từ loài T chantrieri 46

2.4 Thông sô v ¿t lý và dā liáu phá căa các hÿp ch¿t đã phân l¿p đ°ÿc 48

2.4.1 Các thông s ố vật lý của các hợp chất phân lập được từ loài T vietnamensis 48

2.4.1.1 H ợp chất TV1: Taccavietnamoside A (mới) 48

2.4.1.2 H ợp chất TV2: Taccavietnamoside B (mới) 48

2.4.1.3 H ợp chất TV3: Taccavietnamoside C (mới) 48

2.4.1.4 H ợp chất TV4: Taccavietnamoside D (mới) 49

2.4.1.5 H ợp chất TV5: Taccavietnamoside E (mới) 49

2.4.1.6 H ợp chất TV6: (24S,25R)-spirost-5-en-3β,24-diol3-O-³- L -rhamnopyranosyl-(1 →2)-[³-L -rhamnopyranosyl-(1 →3)]-β- D -glucopyranoside 49

Trang 7

2.4.1.7 H ợp chất TV7: (24S,25R)-spirost-5-en-3β,24-diol 3-O-³- L -rhamnopyranosyl-(1

→2)-[β-D -glucopyranosyl-(1 →4)-³- L -rhamnopyranosyl-(1 →3)]-β- D -glucopyranoside 49

2.4.1.8 H ợp chất TV8: Chantrieroside A 50

2.4.1.9 H ợp chất TV9: Plantagineoside A 50

2.4.2 Các thông s ố vật lí của các hợp chất phân lập được từ loài T chantrieri 51

2.4.2.1 H ợp chất TC1: Chantriolide D (mới) 51

2.4.2.2 H ợp chất TC2: Chantriolide E (mới) 51

2.4.2.3 H ợp chất TC3: Chantriolide A 51

2.4.2.4 H ợp chất TC4: Chantriolide B 51

2.4.2.5 H ợp chất TC5: Chantriolide C 52

2.4.2.6 H ợp chất TC6: (3R,5R)-3,5-Dihydroxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane 52

2.4.2.7 H ợp chất TC7: (3R,5R)-3,5-Dihydroxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane 3-O-β- D -glucopyranoside 52

2.4.2.8 H ợp chất TC8: (3R,5R)-3,5-Dihydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)heptane 3-O-β- D -glucopyranoside 53

2.4.2.9 H ợp chất TC9: (3R,5R)-3,5-Dihydroxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)-heptane 3-O- β- D -glucopyranoside 53

2.4.2.10 H ợp chất TC10: (6S,9R)-Roseoside 54

2.4.2.11 Hợp chất TC11: 2-hydroxyphenol-1-O-β- D -glucopyranoside 54

2.4.2.12 H ợp chất TC12: 1-O-syringoyl-β- D -glucopyranoside 54

2.4.2.13 H ợp chất TC13: Benzyl-O-β- D - glucopyranosyl (1→6)-O-β- D -glucopyranoside 55

2.5 K ¿t quÁ thÿ ho¿t tính sinh hác căa các hÿp ch¿t phân l¿p đ°ÿc 55

2.5.1 Ho ạt tính kháng viêm của các hợp chất phân lập được từ loài T vietnamensis 55

2.5.2 Ho ạt tính kháng viêm của các hợp chất phân lập được từ loài T chantrieri 57

2.5.3 K ết quả nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào ung thư các hợp chất phân lập được từ loài T chantrieri 58

CH¯¡NG 3 THÀO LU¾N K¾T QUÀ 60

3.1 Xác đßnh c¿u trúc căa các hÿp ch¿t phân l¿p đ°ÿc 60

3.1.1 Đặc trưng phổ của các hợp chất taccalonolide và withanolide 62

3.1.2 Đặc trưng phổ của hợp chất spirostanol saponin 63

3.1.3 Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được từ loài T vietnamensis 64

3.1.3.1 H ợp chất TV1: Taccavietnamoside A 64

3.1.3.2 H ợp chất TV2: Taccavietnamoside B 71

3.1.3.3 H ợp chất TV3: Taccavietnamoside C 78

ợp chất TV4: Taccavietnamoside D 85

Trang 8

3.1.3.5 H ợp chất TV5: Taccavietnamoside E 91

3.1.3.6 H ợp chất TV6: (24S,25R)-spirost-5-en-3β,24-diol 3-O-³- L -rhamnopyranosyl-(1 →2)-[³-L -rhamnopyranosyl-(1 →3)]-β- D -glucopyranoside 98

3.1.3.7 H ợp chất TV7: (24S,25R)-24-hydroxyspirost-5-en-3β-yl-O-³- L - rhamnopyranosyl(1→2)-O-[O- β- D -glucopyranosyl- (1→4)-³- L -rhamnopyranosyl- (1→3)]-β- D -glucopyranoside 101

3.1.3.8 H ợp chất TV8: Chantrieroside A 104

3.1.3.9 H ợp chất TV9: Plantagineoside A 107

3.1.4 Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được từ loài T chantrieri 108

3.1.4.1 H ợp chất TC1: Chantriolide D (mới) 108

3.1.4.2 H ợp chất TC2: Chantriolide E (mới) 115

3.1.4.3 H ợp chất TC3: Chantriolide A 121

3.1.4.4 H ợp chất TC4: Chantriolide B 123

3.1.4.5 H ợp chất TC5: Chantriolide C 125

3.1.4.6 H ợp chất TC6: (3R,5R)-3,5-dihydroxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane 127

3.1.4.7 H ợp chất TC7: 3,5-dihydroxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane 3-O-β- D -glucopyranoside 128

3.1.4.8 H ợp chất TC8: 3,5-dihydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)heptane 3-O-β- D -glucopyranoside 128

3.1.4.9 Hợp chất TC9: 3,5-dihydroxy-1-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)-heptane 3-O- β- D -glucopyranoside 129

3.1.4.10 H ợp chất TC10: (6S,9R)-roseoside 130

3.1.4.11 Hợp chất TC11: 2-hydroxyphenol-1-O-β- D -glucopyranoside 132

3.1.4.12 H ợp chất TC12: 1-O-syringoyl-β- D -glucopyranoside 133

3.1.4.13 H ợp chất TC13: Benzyl O-β- D -glucopyranosyl- (1→6)-O-β- D -glucopyranoside 133

3.2 Ho ¿t tính căa các hÿp ch¿t phân l¿p đ°ÿc 134

3.2.1 Ho ạt tính kháng viêm của các hợp chất phân lập được 134

3.2.2 Ho ạt tính gây độc tế bào ung thư của các hợp chất phân lập từ loài T chantrieri 136

K ¾T LU¾N 138

KI ¾N NGHÞ 139

DANH M ĀC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BÞ 141

TÀI LI àU THAM KHÀO 142

PH Ā LĀC 150

Trang 9

DANH M ĀC CÁC CHĀ VI¾T TÀT

13C-NMR Carbon -13 nuclear magnetic

resonance spectroscopy Phऀ cáng h°ơꄉng tư뀀 h¿t nhân

carbon 13

1H-NMR Proton nuclear magnetic

resonance spectroscopy Phऀ cáng h°ơꄉng tư뀀 h¿t nhân

proton A-431 Epidemoid carcinoma cell Tế bào ung th° biऀu mô A-549 Lung carcinoma cell Tế bào ung th° phऀi

BV2 Mouse microglial cell Tế bào tiऀu thần kinh đám

cÿa chuát

CD Circular dichroism spectroscopy Phऀ l°ỡng sắc tròn

COSY 1H-1H- correlation spectroscopy Phऀ 1H-1H COSY

DEPT Distortionless enhancement by

polarization transfer Phऀ DEPT DMSO Dimethyl sulfoxide

EDTA Ethylene diamine tetracetic acid

EGTA Ethylene glycol-bis(

β-aminoethyl

ether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid ESI-MS Electrospray ionization mass

stimulating factor HeLa Human cervical cancer cell Tế bào ung th° cऀ tử cung HEK 293 Human embryonic kidney 293

HepG2 Hepatocyte carcinoma cell Tế bào ung th° gan

HL-60 Human promyelocytic leukemia

HMBC Heteronuclear mutiple bond

correlation Phऀ t°¡ng tác dk h¿t nhân

qua nhi

HR-ESI-MS High resolution electrospray

ionization mass spectrum Phऀ khối l°ÿng phân gi¿i cao

phun mw đián tử HSQC Heteronuclear single quantum

correlation Phऀ t°¡ng tác dk h¿t nhân

qua 1 liên kết

IC50 Inhibitory concentration at 50% Nồng đá āc chế 50% đối

t°ÿng thử nghiám iNOS Inducible nitric oxide synthase Enzym t¿o ra oxit nit¡ tư뀀

Trang 10

amino L-arginine acid

KB Human epidemoid carcinoma Tế bào ung th° biऀu mô

ng°åi

LPS Lipopolysaccharide

LU-1 Lung carcinoma cell Tế bào ung th° phऀi

LNCaP Human prostatic carcinoma cell Tế bào ung th° tuyến tiMCF-7 Human breast carcinomacell Tế bào ung th° vú ng°åi MDA-MB-231 Metastatic breast cancer cell Tế bào ung th° vú ng°åi MDA-MB-435 Human melanoma cell Tế bào ung th° vú ác tính

ng°åi

concentration Nồng đá āc chế tối thiऀu MTT 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-

2,5-Diphenyltetrazolium bromide

NCI-H460 Human lung cancer cell Tế bào ung th° phऀi ng°åi

enhancement spectroscopy Phऀ NOESY NF-B Nuclear factor-kappa B Yếu tố nhân kappa B

NSAIDs Non-steroidal anti-inflammatory

steroid

PC-3 Prostate adenocarcinoma cell Tế bào ung th° tuyến tiPARP Poly (ADP-ribose) polymerase Protein PARP

PPARs

Peroxisomeproliferator-activated receptors

ROESY Rotating frame nuclear

overhauser effect spectroscopy Phऀ ROESY SF-268 (CNS) Central nervous system cancer

trung °¡ng SRB Sulforhodamine B

TLC Thin layer chromatography Sắc ký lãp m漃ऀng

TMS Tetramethylsilane

TNF Tumor necrosis factor Yếu tố ho¿i tử khối u

Trang 11

DANH M ĀC BÀNG

Bảng 1.1 Danh sách các loài thuộc chi Tacca ở Việt Nam 3

Bảng 1.2 Công dụng cÿa các loài thuộc chi Tacca ở Việt Nam 5

Bảng 1.3 Các hợp chất taccalonolide (1-32) từ chi Tacca 6

Bảng 1.4 Các hợp chất withanolide và withanolide glycoside (33-49) 9

Bảng 1.5 Các hợp chất cholestan glycoside (50-60) từ loài T chantrieri 10

Bảng 1.6 Các hợp chất spirostanol và spirostanol glycoside (61-72) từ chi Tacca 12

Bảng 1.7 Các hợp chất furostanol glycoside từ chi Tacca 13

Bảng 1.8 Các hợp chất pregnane glycoside (86-92) từ chi Tacca 15

Bảng 1.9 Các hợp chất diaryl heptanoid glycoside (93-104) 17

Bảng 1.10 Các hợp chất khác từ chi Tacca (105-115) 18

Bảng 2.1.% Āc chế sự sản sinh ra NO trong tế bào BV2 được kích thích bởi LPS cÿa các hợp ch ất TV1-TV9 tại nồng độ 80 µM 56

Bảng 2.2 Kết quả đánh giá hoạt tính āc chế sự sản sinh ra NO trong tế bào BV2 cÿa các hợp chất TV3-TV5 56

Bảng 2.3 % Āc chế sự sản sinh ra NO trong tế bào BV2 được kích thích bởi LPS cÿa các hợp ch ất TC1-TC13 tại nồng độ 80 µM 57

Bảng 2.4 Kết quả đánh giá hoạt tính āc chế sự sản sinh ra NO trong tế bào BV2 cÿa hợp chất TC1 và TC2 57

Bảng 2.5 Kết quả gây độc tế bào ung thư cÿa các hợp chất tại nồng độ 100 µM 58

Bảng 2.6 Kết quả đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư cÿa hợp chất 59

Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR cÿa hợp chất TV1 và hợp chất tham khảo 66

Bảng 3.3.Số liệu phổ NMR cÿa hợp chất TV3 và hợp chất tham khảo 79

Bảng 3.5.Số liệu phổ NMR cÿa hợp chất TV5 và hợp chất tham khảo 93

B ảng 3.8 Số liệu phổ NMR cÿa hợp chất TV8 và hợp chất tham khảo 105

Bảng 3.9 Số liệu phổ NMR cÿa hợp chất TC1 và hợp chất tham khảo 110

Trang 12

DANH M ĀC HÌNH

Hình 1.1 Hình ảnh một số loài thuộc chi Tacca 4

Hình 1.2 Ký hiệu viết tắt cÿa các phần đường và nhóm thế 7

Hình 1.3.Cấu trúc các hợp chất taccalonolide (1-32) từ chi Tacca 8

Hình 1.4 Cấu trúc cÿa các withanolide và withanolide glycoside (33-49) 10

Hình 1.5.Cấu trúc các hợp chất cholestan glycoside (50-60) từ loài T chantrieri 11

Hình 1.6 Cấu trúc các hợp chất spirostanol và spirostanol glycoside (61-72) 13

Hình 1.7 Cấu trúc các hợp chất furostanol glycoside (73-85) 15

Hình 1.8 Cấu trúc các hợp chất pregnane glycoside (86-92) 16

H ình 1.9 Cấu trúc các hợp chất diaryl heptanoid và diaryl heptanoid glycoside (93-104) 18

Hình 1.10 Cấu trúc các hợp chất khác (105-115) 19

Hình 1.11 Chu kỳ tế bào 25

Hình 1.12 Quá trình phát triển tế bào ung thư 26

Hình 1.13 Cấu trúc một số hợp chất đã được dùng làm thuốc chống ung thư 30

Hình 1.14 Cấu trúc một số hợp chất có hoạt tính kháng viêm 36

Hình 2.1 Sơ đồ phân lập các hợp chất từ loài T vietnamensis 45

Hình 2.2 Sơ đồ phân lập các hợp chất từ loài T chantrieri 47

Hình 3.1 Cấu trúc hóa học các hợp chất được phân lập từloài T vietnamensis 60

Hình 3.2 Cấu trúc hóa học các hợp chất được phân lập từ loài T chantrieri 61

Hình 3.3 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TV1 và taccasuboside C (65) 64

Hình 3.4 Phổ HR-ESI-MS cÿa hợp chất TV1 65

Hình 3.5 Các tương tác HMBC và ROE chính cÿa hợp chất TV1 67

Hình 3.6 Phổ 1 H- NMR cÿa hợp chất TV1 68

Hình 3.7 Phổ 13 C- NMR cÿa hợp chất TV1 68

Hình 3.8 Phổ DEPT cÿa hợp chất TV1 69

Hình 3.9 Phổ HSQC cÿa hợp chất TV1 69

Hình 3.10 Phổ HMBC cÿa hợp chất TV1 70

Hình 3.11 Phổ ROESY cÿa hợp chất TV1 70

Hình 3.12 Cấu trúc hóa học TV2 và hợp chất tham khảo TV1 71

Hình 3.13 Các tương tác HMBC và COSY chính cÿa hợp chất TV2 72

Trang 13

Hình 3.20 Phổ COSY cÿa hợp chất TV2 77

Hình 3.22 Cấu trúc hóa học cÿa TV3 và hợp chất tham khảo TV1 78

Hình 3.23 Các tương tác HMBC và ROE cÿa hợp chất TV3 80

Hình 3.32 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TV4 và hợp chất tham khảo TV3 85

Hình 3.33 Các tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TV4 86

Hình 3.39 Phổ NOESY cÿa hợp chất TV4 90

Hình 3.40 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TV5 và hợp chất tham khảo TV4 91

Hình 3.41.Các tương tác HMBC, COSY và ROE chính cÿa hợp chất TV5 92

Hình 3.50 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TV6 98

Trang 14

Hình 3.53 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC và COSY chính cÿa hợp chất TV9 107

Hình 3.54 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TC1 và hợp chất taccalonolide M (13) 108

Hình 3.55 Các tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TC1 110

Hình 3.56 Phổ HR-ESI-MS cÿa hợp chất TC1 111

Hình 3.57 Phổ 1 H- NMR cÿa hợp chất TC1 111

Hình 3.58 Phổ 13 C- NMR cÿa hợp chất TC1 112

Hình 3.59 Phổ DEPT cÿa hợp chất TC1 112

Hình 3.60 Phổ HSQC cÿa hợp chất TC1 113

Hình 3.61 Phổ HMBC cÿa hợp chất TC1 113

Hình 3.62 Phổ COSY cÿa hợp chất TC1 114

Hình 3.63 Phổ ROESY cÿa hợp chất TC1 114

Hình 3.64 Cấu trúc hóa học cÿa TC2 và hợp chất tham khảo plantagiolide I (46) 115

Hình 3.65 Các tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TC2 116

Hình 3.66 Phổ HR-ESI-MS cÿa hợp chất TC2 117

Hình 3.67 Phổ 1 H- NMR cÿa hợp chất TC2 118

Hình 3.68 Phổ 13 C- NMR cÿa hợp chất TC2 118

Hình 3.69 Phổ DEPT cÿa hợp chất TC2 119

Hình 3.70 Phổ HSQC cÿa hợp chất TC2 119

Hình 3.71 Phổ HMBC cÿa hợp chất TC2 120

Hình 3.72 Phổ COSY cÿa hợp chất TC2 120

Hình 3.73 Phổ ROESY cÿa hợp chất TC2 121

Hình 3.74 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TC3 121

Hình 3.75 Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TC4 123

Hình 3.76 Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC chính cÿa hợp chất TC5 125

Hình 3.77 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TC6 127

Hình 3.81 Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC cÿa hợp chất TC10 130

Hình 3.82 Phổ CD cÿa hợp chất TC10 132

Hình 3.83 Cấu trúc hóa học cÿa hợp chất TC11 và hợp chất tham khảo 132

Hình 3.86 Hoạt tính āc chế NO trên dòng tế bào BV2 kích thích bởi LPS cÿa hợp chất TV3-TV5, TC1 và TC2 136

Trang 15

M â ĐÀU

Đil¿i cho đÁt n°ãc Viát Nam mát há sinh thái thực vật phong phú Bên c¿nh đo, Viát Nam cũng là mát trong những quốc gia co nnhihßc, Viát Nam co kho¿ng 12.000 loài thực vật bậc cao Trong đo, h¡n 5.000 loài đ°ÿc sử dāng làm d°ÿc liáu và thuốc chữa bánh [1, 2] Vai trò cÿa nguồn tài nguyên cây thuốc ngày càng đ°ÿc nâng cao do có tinghiên cāu phát triऀn các lo¿i thuốc trong đikiếm các hÿp chÁt co ho¿t tính sinh hßc tư뀀 các cây thuốc truyvực đ°ÿc nhithành phần hóa hßc và tìm ra ho¿t chÁt thऀ hián ho¿t tính tác dāng chữa bánh và nâng cao sāc kh漃ऀe con ng°åi Cho đến nay, trên thế giãi đã tìm ra nhinguồn gốc tự nhiên sử dāng làm thuốc đऀ đi(taxol) tư뀀 cây Thông đ漃ऀ (Taxus brevifolia), vinblastine và vincristine tư뀀 cây Dư뀀a c¿n

(Catharanthus roseus) đ°ÿc sử dāng trong hóa trk, đi

Nam, tư뀀 kinh nghiám chữa trk sốt rét trong đông y, ho¿t chÁt artemisinin đ°ÿc chiết xuÁt tư뀀 cây Thanh hao hoa vàng (Artemisia annua L.) đã đ°ÿc s¿n xuÁt ơꄉ quy mô công nghiáp cung cÁp cho nhu cầu trong n°ãc và xuÁt kh¿u Tuy nhiên, còn có rÁt nhibánh nh° ung th° và các bánh viêm nhißm nh°ng ch°a đ°ÿc nghiên cāu mát cách khoa hßc đऀ làm rõ công dāng và phát triऀn trơꄉ thành thuốc Mát số loài cÿa chi

bánh nh° viêm loét d¿ dày, viêm ruát, viêm gan, v.v, , là mát trong những đối t°ÿng đã đ°ÿc các nhà khoa hßc trên thế giãi quan tâm và đã công bố nhitrình nghiên cāu Theo c¡ sơꄉ dữ liáu Scifinder hián co kho¿ng 60 công trình nghiên cāu công bố v

thuác chi Tacca æ Viát Nam, đã thống kê đ°ÿc 6 loài thuác chi Tacca Loài Tacca

dwng làm rau ăn Những nghiên cāu v

Trang 16

cÿa các loài thuác chi Tacca ơꄉ Viát Nam còn rÁt h¿n chế, mãi chỉ co 3 công trình

nghiên cāu vchúng tôi lựa chßn đ

của loài Tacca vietnamensis và loài Tacca chantrieri ở Việt Nam=

Māc tiêu căa lu¿n án:

Nghiên cāu thành phần hoa hßc chÿ yếu cÿa thân rß hai loài Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri ơꄉ Viát Nam

Đánh giá ho¿t tính gây đác tế bào và ho¿t tính kháng viêm cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc đऀ tìm kiếm hÿp chÁt co ho¿t tính sinh hßc

Nội dung lu¿n án bao gßm:

1 Phân lập các hÿp chÁt tư뀀 thân rß loài Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri

ơꄉ Viát Nam bằng các ph°¡ng pháp sắc ký;

2 Xác đknh cÁu trúc hoa hßc cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc bằng các ph°¡ng pháp vật lý và hoa hßc;

3 Đánh giá ho¿t tính kháng viêm cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc tư뀀 hai loài

Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri;

4 Đánh giá ho¿t tính gây đác tế bào cÿa các hÿp chÁt phân lập đ°ÿc tư뀀 loài

Tacca chantrieri

Trang 17

CH¯¡NG 1 TàNG QUAN 1.1. Gißi thiáu về chi Tacca

1.1.1 Đặc điểm thực vật của chi Tacca

Chi Tacca (Râu hwm) thuác hß Taccaceae (Râu hùm), bá Liliales (Hành), lãp

Liliopsida (Mát lá mầm), ngành Magnoliophyta (Mác lan) [1, 7]

Theo thống kê tư뀀 trang theplantlist.org, hián co 17 loài thuác chi Tacca trên

trên thế giãi, bao gồm: T ampliplacenta L Zhang & Q.J.Li, T ankaranensis BVauc T bibracteata Drenth, T borneensis Ridl, T celebica Koord, T chantrieri André, T ebeltajae Drenth, T integrifolia Ker Gawl., T lanceolata Spruce, T leontopetaloides (L.) Kuntze, T maculata Seem., T palmata Blume, T palmatifida Baker, T parkeri Seem, T plantaginea (Hance) Drenth, T reducta P.C Boyce & S Julia và T subflabellata P.P Ling & C.T

ard.-Ting

Á, Trung Quốc, Àn Đá, Australia, nhiD°¡ng,& [1, 2, 8]

æ Viát Nam, theo thống kê co 6 loài thuác chi Tacca [1, 7] Thông tin v loài đ°ÿc nêu trong Bảng 1.1

B ảng 1.1 Danh sách các loài thuác chi Tacca ơꄉ Viát Nam

1 T chantrieri André Râu hùm Tuyên Quang, Thái Nguyên, Bắc

Giang, Phú Thß, Hà Nái, Hòa Bình, Thư뀀a Thiên Huế, Qu¿ng Nam

2 T integrifolia Ker-Gawl Ng¿i rÿm Lào Cai, Phú Thß, Vĩnh Phúc, Hà

Nái, Hòa Bình, Qu¿ng Trk, Khánh Hòa, Đồng Nai

3 T leontopetaloides (L.)

-Vũng Tàu, An Giang, Kiên Giang

4 T palmata Blume N°a chân vkt Kiên Giang, Bà Rka - Vũng Tàu

5 T plantaginea (Hance.)

Drenth Hồi đầu Cao Bằng, L¿ng S¡n, Qu¿ng Ninh,

Bắc Giang, Thái Nguyên, Hà Nái, Hòa Bình, Ninh Bình, Thanh Hóa

6 T vietnamensis Thin et

Hoat Râu hwm lãn Hà Nái, Bắc K¿n, Thái Nguyên,

Bắc Giang, Vĩnh Phúc, Phú Thß, Thư뀀a Thiên - Huế và Qu¿ng Nam,

Ðà Nẵng

Trang 18

Râu hùm (Tacca chantrieri) Râu hùm lãn (Tacca vietnamensis)

Hình 1.1 Hình ¿nh mát số loài thuác chi Tacca

Chi Tacca là lo¿i cây thân th¿o Lá đ¡n, hình bầu dāc thót, nhßn v

gốc h¡i lách, dài kho¿ng 25-65 cm, ráng 7-35 cm, lúc non co màu h¡i tím lá già mặt trên màu lāc sÁm, mặt d°ãi màu lāc nh¿t Cuống cām hoa dài h¡n cuống lá Bao hoa hình ống có nhid¿ng sÿi dài Hoa l°ỡng tính, thā phÁn nhå côn trùng Qu¿ n¿c có cánh, chāa nhih¿t [1]

1.1.2 Tình hình sử dụng trong y học cổ truyền các loài thuộc chi Tacca

Trên thế giãi, mát số loài thuác chi Tacca đ°ÿc sử dāng trong y hßc cऀ

truydāng đऀ trk viêm loét d¿ dày và tá tràng, viêm gan, huyết áp cao, b漃ऀng lửa, lơꄉ ngāa

Trang 19

Thân rß loài T plantaginea đ°ÿc dwng làm thuốc trk đau d¿ dày, viêm ruát, lao phऀi, đòn ngã tऀn th°¡ng, ung thũng Loài T integrifolia đ°ÿc dwng chữa viêm d¿ dày và

hành tá tràng, viêm d¿ dày mãn tính, s°ng đau vòm hßng; dwng ngoài đऀ trk mān

nhßt lơꄉ ngāa æ Àn Đá, rß cÿ cÿa loài T leontopetaloides th°ång đ°ÿc sử dāng đऀ chế biến mon ăn và sử dāng làm thuốc trk lỵ Ngoài ra, ơꄉ Nuven Caledoni, loài T leontopetaloides l¿i đ°ÿc dwng trk bánh ngoài da và các vết rắn cắn æ Indonexia,

phần cÿ loài T palmata đ°ÿc sử dāng đऀ làm lành vết th°¡ng và đắp vào vết rắn cắn;

thân giã nát đắp vào rốn đऀ trk đau d¿ dày [1, 2, 7, 9]

æ Viát Nam, theo thống kê các loài thuác chi Tacca co tác dāng chữa mát số bánh, ngoài ra mát số loài còn đ°ÿc sử dāng làm rau ăn (Bảng 1.2) [1, 2, 7, 9]

B ảng 1.2 Công dāng cÿa các loài thuác chi Tacca ơꄉ Viát Nam

Tác d āng chāa bánh theo kinh

nghi ám dân gian

1 T chantrieri André Râu hùm Thân

rß Co vk cay đắng, tính mát; co tác dāng thanh nhiát gi¿i đác, tiêu viêm chỉ thống, l°¡ng huyết tán ā Dùng ngoài chữa thÁp khãp

3 T leontopetaloides (L.)

tinh

Toàn cây Vk đắng, tính mát, co tác dāng lÿi d¿ dày và chữa th°¡ng

Bát cÿ Nếu chế biến kỹ dwng làm mon ăn và

thích hÿp vãi ng°åi bk bánh lỵ Cũng dwng tốt cho ng°åi đi tiऀu ra máu

4 T palmata Blume N°a

chân vkt Thân rß Chrÿm ữa đi

5 T plantaginea (Hance.)

Drenth

Hồi đầu Vk đắng, h¡i the, tính bình, co tác dāng

bऀ huyết, làm tan máu ā, thông kinh bế, tiêu viêm, đitiêu hóa nhuận tràng, lÿi mật

Th°ång dùng chữa tiêu hoa kém, đau

bāng, vàng da do viêm gan siêu vi trùng, ỉa ch¿y, thần kinh suy nh°ÿc, huyết áp cao, đau dây thần kinh tßa, thÁp khãp

6 T vietnamensis Thin et

Hoat

Râu hùm lãn Thân rß Có thऀ sử dāng nh° loài Râu hùm Lá có thऀ sử dāng làm rau ăn

Trang 20

1.1.3 Tình hình nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Tacca

Trong những năm gần đây, ơꄉ nhivực, đặc biát là Trung Quốc và Nhật B¿n, đã co nhihóa hßc và ho¿t tính sinh hßc mát số loài thuác chi Tacca Theo những công trình

đã đ°ÿc công bố cho thÁy, thành phần hóa hßc cÿa chi Tacca, bao gồm các nhóm

chÁt chính nh°: Taccalonolide, withanolide, withanolide glycoside, steroidal glycoside, pregnane glycoside, spirostanol saponin, furostanol glycoside, phenolic glycoside, steroidal saponin, sterol oligoglucoside, steroidal và diaryl heptanoid Đây là các chÁt thuác các lãp chÁt sterol, terpen, flavon, trong đo lãp chÁt sterol

là lãp chÁt khá phऀ biến trong các loài cÿa chi Tacca đã đ°ÿc nghiên cāu

Các nghiên cāu thành phần hóa hßc chÿ yếu tập trung nhi

chantrieri, T integrifolia, T leontopetaloide, T plantaginea, và T subflaellata Taccalonolide và spirostanol saponin đ°ÿc tìm thÁy hầu hết ơꄉ các loài thuác chi

Tacca Withanolide và withanolide glycoside tìm thÁy ơꄉ loài T chantrieri và T plantaginea; furostanol glycoside đ°ÿc phân lập tư뀀 3 loài T chantrieri, T integrifolia

và T plantaginea; cholestan glycoside phát hián có mặt ơꄉ loài T chantrieri

1.1.3.1 Các hợp chất taccalonolide

Theo các công trình đã công bố, có 32 hÿp chÁt taccalonolide (1-32) đã phân lập đ°ÿc tư뀀 các loài T chantrieri, T plantaginea, T paxiana, T paxiana và T subflabellata (xem B ảng 1.3, Hình 1.3)

B ảng 1.3 Các hÿp chÁt taccalonolide (1-32) tư뀀 chi Tacca

1 Taccalonolide A Thân rß T plantaginea [8, 10, 11]

2 Taccalonolide B Thân rß T plantaginea [8, 10]

3 Taccalonolide C Thân rß T plantaginea [8, 12]

4 Taccalonolide D Thân rß T plantaginea [12]

5 Taccalonolide E Thân rß T plantaginea [8, 13]

6 Taccalonolide F Thân rß T plantaginea [13]

7 Taccalonolide G Thân rß T plantaginea [14]

8 Taccalonolide H Thân rß T plantaginea [14]

9 Taccalonolide I Thân rß T plantaginea [14]

10 Taccalonolide J Thân rß T plantaginea [14]

11 Taccalonolide K Thân rß T plantaginea [8, 14]

12 Taccalonolide L Thân rß T plantaginea [8, 15]

13 Taccalonolide M Thân rß T plantaginea [15]

15 Taccalonolide O Thân rß T subflabellata [16, 17]

16 Taccalonolide P Thân rß T subflabellata [8, 16, 17]

Trang 21

KH Tên ch ¿t B ộ ph¿n Loài TLTK

17 Taccalonolide Q Thân rß T subflabellata [17]

18 Taccalonolide R Thân rß T paxiana, T integrifolia [6, 8]

23 Taccalonolide W Thân rß T plantaginea [18]

24 Taccalonolide X Thân rß T plantaginea [18]

25 Taccalonolide Y Thân rß T plantaginea [8, 18]

26 Taccalonolide AT Thân rß T chantrieri [8]

27 Taccalonolide AU Thân rß T chantrieri [8]

29 Taccalonolide AW Thân rß T chantrieri [8]

30 Taccalonolide AX Thân rß T chantrieri [8]

31 Taccalonolide AY Thân rß T chantrieri [8]

32 Taccasuboside A Thân rß T subflabellata [19]

Ký hiáu viết tắt cÿa các phần đ°ång và nhóm thế

Trang 22

Hình 1.3 CÁu trúc các hÿp chÁt taccalonolide (1-32) tư뀀 chi Tacca

Trang 23

1.1.3.2 Các hợp chất withanolide và withanolide glycoside

Tư뀀 hai loài T chantrieri và T plantaginea các nhà nghiên cāu đã phân lập đ°ÿc

17 hÿp chÁt withanolide và withanolide glycoside (33-49) (Bảng 1.4 và Hình 1.4)

B ảng 1.4 Các hÿp chÁt withanolide và withanolide glycoside (33-49)

Trang 24

Hình 1.4 CÁu trúc cÿa các withanolide và withanolide glycoside (33-49)

1.1.3.3 Các hợp chất cholestan glycoside

Các công trình đã công bố cho thÁy, hÿp chÁt cholestan glycoside đ°ÿc phân lập duy nhÁt tư뀀 loài T chantrieri Theo các tài liáu có 11 hÿp chÁt cholestan glycoside đ°ÿc phân lập tư뀀 loài này (50-60) (Bảng 1.5, Hình 1.5)

B ảng 1.5 Các hÿp chÁt cholestan glycoside (50-60) tư뀀 loài T chantrieri

50 (24R,25S)-26-[(O- β-D-glucopyranosyl-(1→4)-O-β-D

-glucopyranosyl-(1→4)-O-β-D-glucopyranosyl-(1

→2)-O-[O- β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D

-glucopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranosyl)oxy]ergost-5-en-3β-yl β-D

-glucopyranoside

Thân rß [24]

51 (24R,25S)-26-[(O- β-D-glucopyranosyl-(1→4)-O-β-D

-glucopyranosyl-(1→2)-O-[O-β-D-glucopyranosyl-(1

-glucopyranosyl-(1→4)-O-β-D-glucopyranosyl-(1

→2)-O-[O- β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D

-glucopyranosyl-(1→6)]-β-D-glucopyranoside

Thân rß [24]

Trang 26

1.1.3.4 Các hợp chất spirostanol và spirostanol glycoside

Có 12 hÿp chÁt spirostanol và spirostanol glycoside (61-72) đã đ°ÿc các nhà khoa hßc phân lập và xác đknh cÁu trúc tư뀀 loài T chantrieri, T leontopetaloide, T

integrifolia, T subflabellata và T plantaginea (B ảng 1.6, Hình 1.6)

B ảng 1.6 Các hÿp chÁt spirostanol và spirostanol glycoside (61-72) tư뀀 chi Tacca

64 Taccasuboside B C¿ cây T subflabellata [19]

65 Taccasuboside C C¿ cây T subflabellata [19]

Trang 27

Hình 1.6 CÁu trúc các hÿp chÁt spirostanol và spirostanol glycoside (61-72)

Trang 29

Hình 1.7 CÁu trúc các hÿp chÁt furostanol glycoside (73-85)

1.1.3.6 Các hợp chất pregnane glycoside

Hÿp chÁt pregnane glycoside cũng đ°ÿc tìm thÁy trong mát số loài thuác chi

Tacca nh° T chantrieri, T integrifolia, T leontopetaloide và T subflabellata Có 7

hÿp chÁt pregnane glycoside đ°ÿc phân lập tư뀀 các loài trên (86-92) (Bảng 1.8, Hình

Trang 31

1.1.3.7 Các hợp chất diaryl heptanoid và diaryl heptanoid glycoside

Theo các công trình công bố đã co 12 hÿp chÁt diaryl heptanoid và diaryl heptanoid glycoside đ°ÿc phân lập tư뀀 loài T chantrieri và T plantaginea (93-104)

102 Plantagineoside A Thân rß T plantaginea [4]

104 Plantagineoside C Thân rß T plantaginea [4]

Trang 32

Hình 1.9 CÁu trúc các hÿp chÁt diaryl heptanoid và diaryl heptanoid glycoside (93-104)

1.1.3.8 Các hợp chất khác

Ngoài các chÁt đã nêu trên, tư뀀 mát số loài chi Tacca còn phân lập đ°ÿc 11 hÿp chÁt: Evelynin A, taccabulin A-E, evelynin B, evelynin, 4-[6-O-(4-hydroxy-3,5-dimethoxybenzoyl)-β-D-glucopyranosyloxy]-3-methoxybenzoic acid, roseoside

115 Gusanlungionoside D C¿ cây T plantaginea [36]

Trang 33

Hình 1.10 CÁu trúc các hÿp chÁt khác (105-115)

Nh° v¿y:

Đến nay đã co kho¿ng 35 bài báo đã công bố vthuác chi Tacca Các kết qu¿ nghiên cāu trên cho thÁy thành phần hoá hßc cÿa chi

loài thuác chi Tacca nh° mát số hÿp chÁt taccalonolide, withanolide và withanolide

y hßc cऀ truy

Trang 34

1.1.4 Hoạt tính sinh học của chi Tacca

1.1.4.1 Tác dụng hỗ trợ và điều trị ung thư

Ho¿t tính sinh hßc cÿa mát số hÿp chÁt đ°ÿc phân lập tư뀀 các loài thuác chi

Tacca có ho¿t tính gây đác tế bào ung th° in vitro trên các dòng tế bào ung th° máu (HL-60), ung th° gan (SMMC-7721), ung th° phऀi (A549), ung th° vú (MCF-7), ung th° cऀ tử cung (Hela) Mát số hÿp chÁt taccalonolide phân lập đ°ÿc tư뀀 chi

Tacca thऀ hián ho¿t tính ऀn đknh vi ống giống nh° paclitaxel, mát chÁt làm thuốc đi

cÿa chi Tacca [27, 29, 34, 36]

Akihito Yokosuka và các cáng sự đã đánh giá ho¿t tính gây đác tế bào ung

th° cÿa các hÿp chÁt phân lập tư뀀 loài T chantrieri Kết qu¿ thử nghiám cho thÁy

hÿp chÁt spirostanol glycoside (69 và 70) gây đác trên dòng tế bào ung th° HL-60 vãi giá trk IC50 lần l°ÿt là 2,1 µM và 1,8 µM [29] Hai diaryl heptanoid (93 và 94)

và bốn diaryl heptanoid glycoside (95, 97, 98 và 101) đ°ÿc phân lập tư뀀 loài T

chantrieri có ho¿t tính gây đác dòng tế bào ung th° HL-60 m¿nh vãi giá trk IC50

trong kho¿ng 1,8-6,4 µg/mL [34] Mát công bố khác cho thÁy hÿp chÁt evelynin

(112) phân lập tư뀀 T chantrieri thऀ hián đác tính trên 4 dòng tế bào, bao gồm ung

th° vú MDA-MB-43 và MDA-MB-231, PC-3 và ung th° cऀ tử cung HeLa, vãi giá trk IC50 t°¡ng āng là 4,1, 3,9, 4,7 và 6,3 µM [36]

Các hÿp chÁt taccasuboside A-D (32, 64, 65 và 89), taccasuboside C(65) và

taccaoside D (77) tư뀀 loài T subflabellata đã đ°ÿc đánh giá tác dāng gây đác trên 5

dòng tế bào ung th° HL-60, SMMC-7721, A549, MCF-7, và SW480 Kết qu¿ nghiên cāu cho thÁy hÿp chÁt taccaoside D (77) thऀ hián ho¿t tính trên c¿ 5 dòng tế bào trên vãi giá trk IC50 lần l°ÿt là: 4,63, 4,43, 3,00, 11,13 và 2,68 µM; hÿp chÁt taccasuboside C có kh¿ năng gây đác trên 5 dòng tế bào vãi giá trk IC50 t°¡ng āng

là 18,18, 25,08, 17,32, 18,14 và 15,73 µM [25]

Mát số chÁt đ°ÿc đánh giá có ho¿t tính gây đác trên các dòng tế bào ung th°

HepG2 và HEK293: Plantagiolide A (33) gây đác vãi dòng tế bào ung th° HEK293 vãi giá trk IC50 là 14,0 µM; tacclonolide A (1) gây đác trên c¿ hai dòng tế bào ung

th° HepG2 và HEK293 vãi giá trk IC50 lần l°ÿt là 13,2 và 16,3 µM [11]

Mát số hÿp chÁt phân lập tư뀀 loài này đã đ°ÿc công bố có ho¿t tính gây đác tế

bào ung th° HeLa Cā thऀ khi hÿp chÁt taccasuboside C (65) có ho¿t tính gây đác

Trang 35

trên dòng tế bào HeLa vãi giá trk IC50 là 1,2 µM Hÿp chÁt taccaoside D (77) có giá trk IC50 là 1,5 µM Hÿp chÁt chantrieroside A (67), (25S)-26-[(O-β-D-glucopyranosyl-(16)-β-D-glucopyranosyl)oxy]-22β-methoxyfurost-5-en-3β-yl O-

³-L-rhamnopyranosyl-(12)-O-[O-³-D-glucopyranosyl-(14)-³-

L-rhamnopyranosyl-(13)]-β-D-glucopyranoside (82) và (3β,22R,25R)-26-(β-Dglucopyranosyloxy)-22-hydroxyfurost-5-en-3-yl ³-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β- D-glucopyranosyl-(1→4)-³-L-rhamnopyranosyl-(1→3)]-β- D-glucopyranoside (74)

-gây đác tế bào ung th° HeLa vãi giá trk IC50 t°¡ng āng là 3,0, 3,5 và 4,0 µM [27]

Các vi ống tham gia vào chu trình tế bào, cā thऀ là phân chia các nhißm sắc thऀ vđích quan trßng trong viác phát hián ra các thuốc đihÿp chÁt có nguồn gốc tư뀀 thực vật làm ऀn đknh các vi ống là mát trong những lo¿i thuốc đang sử dāng phऀ biến hián nay đऀ đi

chÁt taccalonolide đ°ÿc phân lập tư뀀 các loài thuác chi Tacca là mát lãp chÁt mãi

cũng co tác dāng ऀn đknh vi ống [2] Hÿp chÁt taccasuboside C (65) đ°ÿc Htay Htay

Shwe và các cáng sự phân lập tư뀀 loài T integrifolia đánh giá co ho¿t tính ऀn đknh vi

ống trên thử nghiám in vitro [27]

1.1.4.2 Hoạt tính kháng viêm

Nghiên cāu vho¿t đáng phiên mã NF-»B cÿa mát số hÿp chÁt phân lập tư뀀 tự nhiên Kết qu¿ nghiên cāu cho thÁy, mát số hÿp chÁt phân lập tư뀀 loài T plantaginea có tác dāng āc chế đáng kऀ ho¿t đáng phiên mã NF-»B gây bơꄉi TNF-α trên dòng tế bào ung th° gan HepG2 bao gồm 4 hÿp chÁt diarylheptanoid glycoside: (95), (97), (100) và

plantagineoside C (104) vãi giá trk IC50 trong kho¿ng 0,9 đến 9,4 µM [4, 5] Hÿp

chÁt chantriolide A (43), là mát withanolide glycoside, thऀ hián ho¿t tính āc chế

ho¿t đáng phiên mã NF-»B gây ra bơꄉi TNF-³ trung bình trên dòng tế bào HepG2 vãi IC50 giá trk 9,0 µM [4, 5]

1.1.4.3 Tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxi hóa và hạ huyết áp

Nghiên cāu công bố năm 1988 cho thÁy hÿp chÁt 1 có tác dāng diát loài vi khu¿n Plasmodium berghai [10] Nghiên cāu cÿa Lerluck cho biết dkch chiết thân rß

loài T chantrieri thऀ hián ho¿t tính thu dßn gốc tự do in vitro DPPH m¿nh vãi giá

Trang 36

leontopetaloides, Habila và cáng sự đã phát hián dkch chiết loài này thऀ hián kh¿

năng āc chế sự phát triऀn 7 lo¿i vi khu¿n và nÁm: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogene, Salmonella typhi, Escherichia coli, Shigellia dysenteriae, Proteus vulgaris và Candida albicans ơꄉ māc đá trung bình [38]

Tiamjan đã tiến hành nghiên cāu tác dāng h¿ huyết áp cÿa các dkch chiết tऀng ethanol và dkch chiết phân đo¿n butanol cÿa thân rß loài T chantrieri Kết qu¿ cho thÁy dkch chiết tऀng ethanol và dkch chiết phân đo¿n butanol đgi¿m lực và tốc đá cÿa các c¡n co thắt trong tâm nhĩ chuát bk cô lập và có tác dāng h¿ huyết áp cÿa chuát ơꄉ māc li

Nh° v¿y:

Các nghiên cāu vchi này thऀ hián nhih¿ đ°ång huyết, Những kết qu¿ này góp phần đknh h°ãng quan trßng trong viác

1.1.5 Tình hình nghiên cứu về chi Tacca ở Việt Nam

Theo các tài liáu đã công bố, chi Tacca ơꄉ Viát Nam có hai loài là T chantrieri

và T plantaginea đã đ°ÿc nghiên cāu v

Trong công bố năm 2003, GS Trần Văn Sung và cáng sự đã phân lập tư뀀 loài T

chantrieri 10 hÿp chÁt trong đo co 5 hÿp chÁt mãi là taccalonolide R-V (17-21), và 5 hÿp chÁt đã biết taccalonolide A (1), taccalonolide B (2), taccalonolide E (5),

taccalonolide K (11), và taccalonolide N (14) [6]

Năm 2012, tác gi¿ Trần Hồng Quang và cáng sự đã công bố 16 hÿp chÁt

đ°ÿc phân lập tư뀀 loài T plantaginea trong đo co 5 hÿp chÁt mãi bao gồm, hai hÿp

chÁt withanolide glucoside: Plantagiolide I (46), plantagiolide J (47) và ba hÿp chÁt

diarylheptanoid glycoside: Plantagineoside A (102), plantagineoside B (103), plantagineoside C (104) Tác gi¿ cũng đã công bố các nghiên cāu v

tính mát số hÿp chÁt phân lập đ°ÿc tư뀀 T plantaginea bao gồm ho¿t tính kháng viêm

āc chế ho¿t đáng phiên mã NF-κB [4, 5].

Nh° vậy, ơꄉ Viát Nam mãi co 03 công bố v

sinh hßc cÿa 2 loài trong số 6 loài thuác chi Tacca ơꄉ Viát Nam bao gồm: 1 công bố

v

ho¿t tính kháng viêm loài T plantaginea

Trang 37

1.2. Gißi thiáu về loài Tacca vietnamensis và Tacca chantrieri

1.2.1 Loài Tacca vietnamensis

Đặc điểm thăc v¿t

Tên khoa h ác: Tacca vietnamensis Thin et Hoat

Tên th°áng gái: Râu hùm lãn

Đặc điểm mô tÁ

Cây thân th¿o co thân cÿ hình trā h¡i cong khi lên kh漃ऀi mặt đÁt, dài kho¿ng

20-25 cm hay h¡n, đ°ång kính 3-4,5 cm Lá đ¡n, hình bầu dāc thot, nhßn vgốc h¡i lách, dài 25-65 cm, ráng 12-35 cm, lúc non co màu h¡i tím Cuống cām hoa dài h¡n cuống lá, co màu lāc nh¿t, h¡i hồng dài 40-45 cm Tán hoa co lá bắc t¿o thành bao chung; 2 cái ngoài hình bầu dāc, hình mác hay hình trāng nhßn đầu, 2 cái trong rÁt lãn, m漃ऀng d¿ng màng, hình thận hay hình qu¿t lách, đỉnh tròn hay tw, co màu hồng tím; các lá bắc con d¿ng sÿi dài 15-25 cm, màu hồng nh¿t; mßi tán co 4-6 hoa Qu¿ n¿c co cánh, dài cỡ 5 cm, đ°ång kính 3 cm, chāa nhi

Phân bß

Loài T vietnamensis °a sống n¡i ¿m và ít nắng, mßc phऀ biến d°ãi tán cây

rư뀀ng trong các khu rư뀀ng ¿m, dßc theo các khe suối, thung lũng, núi đÁt cũng nh° núi đá vôi ơꄉ mi(Ba Vì); và mi

Công d āng

Lá co thऀ sử dāng làm rau ăn, cÿ đ°ÿc dwng chữa bánh nh° T chantrieri [1]

1.2.2 Loài Tacca chantrieri

Đặc điểm thăc v¿t

Tên khoa h ác: Tacca chantrieri André

Tên th°áng gái: Râu hùm

Trang 38

rß, có phiến hình trái xoan nhßn, dài 25-60 cm, ráng 7-20 cm, màu lāc bóng, mép nguyên l°ÿn sóng, cuống lá dài 10-30 cm Hoa màu tím đen mßc tā hßp thành tán trên mát cán thẳng hay cong dài 10-15 cm; bao chung cÿa tán có 4 lá bắc màu tím nâu, các lá bắc ngoài hình trái xoan, nhßn mũi, các lá bắc trong hình trái xoan, thuôn nhßn ơꄉ gốc, các sÿi bÁt thā dài tãi 25 cm Hoa có cuống đài, 6 nhk, bầu d°ãi

có lối đính noãn bên Qu¿ không tự mơꄉ; h¿t có 3 c¿nh, màu đ漃ऀ tím [1]

Tư뀀 tऀng quan tài liáu trong n°ãc và trên thế giãi cho thÁy loài T chantrieri là

loài co phân bố phऀ biến ơꄉ các n°ãc Đông Nam Á và đã co nhicác n°ãc công bố các nghiên cāu vloài này t¿i n°ãc b¿n đka æ Viát Nam, nghiên cāu vchế, mãi nghiên cāu ơꄉ goc đá thành phần hoa hßc ch°a co nghiên cāu nào vtính sinh hßc

Nh° vậy, căn cā trên những āng dāng trong y hßc cऀ truy

cāu vcāu vđ°ÿc lựa chßn là nghiên cāu ho¿t tính gây đác tế bào ung th° và ho¿t tính kháng

và đknh h°ãng tiếp theo trong nghiên cāu āng dāng y d°ÿc hián đ¿i

1.3 Gißi thiáu về ung th°

1.3.1 Ung thư và một số phương pháp điều trị bệnh

1.3.1.1 Các đặc tính cơ bản cÿa bệnh ung thư

* Động lực học tế bào: C¡ thऀ con ng°åi đ°ÿc cÁu t¿o bơꄉi hàng tỷ các tế

bào Bình th°ång, tế bào sinh ra, phát triऀn và chết đi, tuân theo quy luật tự nhiên

Trang 39

đ°ÿc xác đknh trong chu kỳ tế bào Trong quá trình phát triऀn, nếu tế bào bk tác đáng bơꄉi các tác nhân gây tऀn th°¡ng, biến đऀi các vật chÁt di truybào, chāc năng cÿa tế bào bk ¿nh h°ơꄉng, chúng co thऀ không tuân theo quy luật tự nhiên, không đáp āng đ°ÿc vai trò mà phát triऀn quá māc, thành bánh ung th° [40-42] Chu kỳ cÿa tế bào nh° hình sau:

G0: Giai đo¿n tế bào nghỉ (không tham gia vào quá trình phân bào) G1: Giai đo¿n tr°ãc tऀng hÿp DNA S: Giai đo¿n tऀng hÿp DNA

G2: Giai đo¿n sau tऀng hÿp DNA M: Giai đo¿n phân bào

Hình 1.11 Chu kỳ tế bào

Thåi gian nhân đôi là thåi gian cần thiết cho mát tế bào sống hoàn thành mát chu kỳ trong phân chia tế bào, t¿o ra 2 tế bào con Các tế bào ác tính th°ång co thåi gian nhân đôi ngắn h¡n tế bào lành cÿa các mô t°¡ng tự và co rÁt ít tế bào tồn t¿i ơꄉ giai đo¿n nghỉ (không tham gia vào quá trình phân bào-G0)

æ giai đo¿n đầu, khối u phát triऀn theo cÁp số nhân Khi khối u phát triऀn, chÁt dinh d°ỡng đ°ÿc cung cÁp bơꄉi sự khuếch tán trực tiếp tư뀀 máu l°u thông Các tế bào ác tính xâm lÁn vào các tऀ chāc xung quanh nhå co các enzim (protease) giúp tiêu diát các mô lân cận Khối u phát triऀn đ°ÿc còn nhå tế bào u s¿n sinh ra các yếu

tố tăng sinh m¿ch máu thúc đ¿y hình thành các m¿ch máu mãi đऀ cung cÁp dinh d°ỡng và các chÁt liáu cần thiết cho sự phát triऀn cÿa khối u Trong quá trình hình thành và phát triऀn, tế bào u co thऀ phát tán vào dòng máu l°u thông Đa số các tế bào này sẽ chết đi trong khi vận chuyऀn, nh°ng mát số tế bào co thऀ xuyên qua các nái m¿c m¿ch máu, khu trú vào các mô xung quanh và t¿o ra các khối u mãi đác lập

và ơꄉ xa khối u ban đầu (hián t°ÿng di căn) Cā nh° vậy, những khối u này l¿i tiếp tāc phát triऀn và co thऀ tiếp tāc t¿o các di căn khác& [43]

Tính chÁt đặc tr°ng cÿa tế bào ác tính: Tránh đ°ÿc sự chết theo ch°¡ng trình (apoptosis); kh¿ năng phát triऀn vô h¿n; tự cung cÁp các yếu tố phát triऀn; không nh¿y c¿m vãi các yếu tố chống tăng sinh; tốc đá phân bào gia tăng; thay đऀi kh¿ năng biát hoa tế bào; không co kh¿ năng āc chế tiếp xúc; kh¿ năng xâm lÁn mô xung quanh; kh¿ năng tăng sinh m¿ch máu và kh¿ năng di căn đến n¡i khác

Trang 40

Mát tế bào thoái triऀn thành tế bào khối u th°ång không co tÁt c¿ đặc điऀm này cwng mát lúc, tuy nhiên, thế há sau cÿa chúng sẽ đ°ÿc chßn lßc đऀ co các đặc tính đo Quá trình này đ°ÿc gßi là phát triऀn theo dòng (clonal evolution) [40]

* Sinh học phân tử ung thư: Sinh hßc phân tử ung th° là quá trình rối lo¿n

sự phân chia cÿa tế bào do DNA bk tऀn th°¡ng Do đo ung th° là mát bánh lý vgen Thông th°ång, mát tế bào bình th°ång đऀ chuyऀn d¿ng sang tế bào ung th° ph¿i tr¿i qua mát vài đát biến ơꄉ mát số gen nhÁt đknh Quá trình này liên quan đến c¿ há thống gen tiprotein tham gia vào quá trình hình thành những chÁt truychÁt truynhững tế bào khác Do vậy, khi bk đát biến, các gen tiđáng biऀu hián quá māc các tín hiáu phân chia tế bào và làm các tế bào tăng sinh không kiऀm soát, lúc này trơꄉ thành những gen ung th° [41-43]

Khác vãi gen ung th°, các gen āc chế ung th°

mã hóa cho các chÁt hoa hßc truy

nhằm gi¿m hoặc ngư뀀ng quá trình phân chia cÿa

tế bào khi phát hián thÁy co sai h漃ऀng v

Đo là các enzyme đặc biát co thऀ phát hián các

đát biến hay tऀn th°¡ng DNA và đồng thåi kích

ho¿t quá trình phiên mã cÿa há thống enzyme

sửa chữa DNA Đi

kh¿ năng các sai h漃ऀng này đ°ÿc truy

há tế bào kế tiếp Thông th°ång, các gen āc chế

ung th° sẽ đ°ÿc kích ho¿t khi co tऀn th°¡ng

DNA x¿y ra, nh°ng mát số đát biến co thऀ bÁt

ho¿t protein āc chế ung th° hoặc làm mÁt kh¿

năng truy

đo¿n hoặc ngư뀀ng c¡ chế sửa chữa DNA, khi đo

những tऀn th°¡ng DNA đ°ÿc tích lũy l¿i dần

dần hình thành ung th°

Hình 1.12 Quá trình phát triऀn

tế bào ung th°

Định dạng
Số trang	164
Dung lượng	5,93 MB