(Luận án tiến sĩ) Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Và Hoạt Tính Sinh Học Của Cây Dấu Dầu Lá Nhãn (Tetradium Glabrifolium (Benth.) Hartl)

Xu hướng đi sâu nghiên cứu và tìm kiếm các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao từ các loài thực vật làm dược phẩm chữa bệnh đang ngày càng thu hút được sự quan tâm của các nhà kh

Trang 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ

CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HOÁ HỌC

TRƯƠNG THỊ THU HIỀN

(Tetradium glabrifolium (Benth.) Hartl.)

LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA HỌC

HÀ N ỘI, 2014

Trang 2

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ

CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HOÁ HỌC

TRƯƠNG THỊ THU HIỀN

2 GS TS Nguyễn Văn Tuyến

HÀ N ỘI, 2014

Trang 3

L ỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan luận án này là công trình nghiên cứu của riêng tôi dưới sự

hướng dẫn khoa học của PGS.TS Phan Văn Kiệm và GS.TS Nguyễn Văn Tuyến

Các số liệu, kết quả trong luận án là trung thực và chưa được công bố trong bất kỳ công trình nào khác

Tác giả

Trương Thị Thu Hiền

i

Trang 4

L ỜI CẢM ƠN

Luận án này được hoàn thành tại Viện Hóa sinh biển và Viện Hoá học - Viện

Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Trong quá trình nghiên cứu, tác giả đã

nhận được nhiều sự giúp đỡ quý báu của các thầy cô, các nhà khoa học, các đồng nghiệp, bạn bè và gia đình

Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc, sự cảm phục và kính trọng nhất tới PGS

TS Phan Văn Kiệm và GS TS Nguyễn Văn Tuyến - những người Thầy đã tận tâm hướng dẫn khoa học, động viên, khích lệ và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong suốt thời gian thực hiện luận án

Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa sinh biển và Ban lãnh đạo Viện Hóa học cùng tập thể cán bộ của hai Viện đã quan tâm giúp đỡ và đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu

Tôi xin chân thành cảm ơn phòng Nghiên cứu cấu trúc - Viện Hóa Sinh biển, đặc biệt là TS Hoàng Lê Tuấn Anh, TS Nguyễn Xuân Nhiệm, TS Phạm Hải Yến,

TS Nguyễn Văn Thanh và CN Đan Thị Thúy Hằng về sự ủng hộ to lớn, những lời khuyên bổ ích và những góp ý quý báu trong việc thực hiện và hoàn thiện luận án

Tôi xin trân trọng cảm ơn Phòng Hợp chất tự nhiên, Đại học Osaka, Nhật

B ản đã giúp đỡ tôi trong việc sàng lọc và thử hoạt tính kháng lao

Tôi xin chân thành c ảm ơn tới các đồng nghiệp tại Bộ môn Độc học và phóng xạ quân sự - Học viện Quân Y và Ban Giám đốc Học viện Quân y đã ủng hộ

và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian làm nghiên cứu sinh

Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc nhất tới toàn thể gia đình, bạn bè và những người thân đã luôn luôn quan tâm, khích lệ, động viên tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu

Xin trân trọng cảm ơn!

Tác giả

Trương Thị Thu Hiền

ii

Trang 5

M ỤC LỤC

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi

DANH MỤC BẢNG viii

DANH MỤC HÌNH x

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 GIỚI THIỆU VỀ CHI TETRADIUM 3

1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Tetradium 3

1.1.2 Các nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Tetradium 4

1.1.2.1 Các hợp chất alkaloid 7

1.1.2.2 Các hợp chất triterpenoid 10

1.1.2.3 Các hợp chất limonoid 11

1.1.2.4 Các hợp chất flavonoid 13

1.1.2.5 Các hợp chất coumarin 14

1.1.2.6 Các hợp chất benzenoid 15

1.1.2.7 Các hợp chất sterol 16

1.1.2.8 Các hợp chất khác 16

Kết luận 17

1.1.3 Các nghiên cứu về hoạt tính sinh học của chi Tetradium 18

1.1.3.1 Tác dụng kháng ung thư 18

1.1.3.2 Tác dụng với hệ tim mạch 19

1.1.3.3 Tác dụng đối với hệ thần kinh 21

1.1.3.4 Tác dụng kháng viêm, giảm đau 21

1.1.3.5 Các tác dụng khác 22

Kết luận 26

1.2 Giới thiệu về cây dấu dầu lá nhẵn 27

1.2.1 Đặc điểm thực vật 27

1.2.2 Công dụng chữa bệnh 27

1.2.3 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 28

1.2.4 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam 29

Kết luận 29

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30

2.1 Mâu thực vật 30

2.2 Phương pháp phân lập các hợp chất 30

iii

Trang 6

2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa hoc 31

2.4 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học 32

CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 39

3.1 Phân lập các hợp chất từ cây dấu dầu lá nhẵn 39

3.1.1 Phân lập các hợp chất từ mẫu lá của cây dấu dầu lá nhẵn 39

3.1.2 Phân lập các hợp chất từ mẫu vỏ thân của cây dấu dầu lá nhẵn 41

3.2 Hằng số vật lý và dữ kiện phổ của các hợp chất phân lập được từ cây dấu dầu lá nhẵn 44

CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 50

4.1 Phân lập các hợp chất từ cây dấu dầu lá nhẵn 50

4.2 Xác định cấu trúc các hợp chất 51

4.2.1 Hợp chất TG1 (chất mới): Tetraglabrifolioside 51

4.2.2 Hợp chất TG2: 6-Acetonyl-N-methyldihydrodecarine 58

4.2.3 Hợp chất TG3: 6-Acetonyldihydrochelerythrine 64

4.2.4 Hợp chất TG4: Decarine 66

4.2.5 Hợp chất TG5: Iwamide 68

4.2.6 Hợp chất TG6: Rutaecarpine 72

4.2.7 Hợp chất TG7: 12α-Hydroxyevodol 74

4.2.8 Hợp chất TG8: Rutaevine 79

4.2.9 Hợp chất TG9: Lupeol 83

4.2.10 Hợp chất TG10: Friedelan-3-one 85

4.2.11 Hợp chất TG11: Phellamurin 90

4.2.12 Hợp chất TG12: Epimedoside C 95

4.2.13 Hợp chất TG13: Astragalin 97

4.2.14 Hợp chất TG14: Nicotiflorin 98

4.2.15 Hợp chất TG15: Trifoline 104

4.2.16 Hợp chất TG16: Quercetin 105

4.2.17 Hợp chất TG17: α-Tocopherol 106

4.2.18 Hợp chất TG18: (2E,4E) N-Isobutyltetradeca-2,4-dienamide 110

4.2.19 Hợp chất TG19: (2E,4E)-N-Isobutyldeca-2,4-dienamide 115

4.2.20 Hợp chất TG20: (2E,4E,8E)-N-Isobutyltetradeca-2,4,8-trienamide 117

4.2.21 Hợp chất TG21: Syringin 119

4.2.22 Hợp chất TG22: Saikolignannisode A 120

4.2.23 Hợp chất TG23: Picraquassioside D 122

iv

Trang 7

4.2.24 Hợp chất TG24: Stigmatsterol 123

4.2.25 Hợp chất TG25: Daucosterol 125

4.2.26 Hợp chất TG26: 5-Hydroxymethylfurfural 127

Kết luận: 128

4.3 Kết quả thử hoạt tính sinh học 131

4.3.1 Kết quả kiểm tra hoạt tính gây độc tế bào in vitro 131

4.3.2 Kết quả kiểm tra hoạt tính kháng lao 132

4.3.3 Kết quả kiểm tra hoạt tính chống oxi hóa 133

4.3.4 Kết quả kiểm tra hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 134

Kết luận: 135

KẾT LUẬN 137

KIẾN NGHỊ 138

CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 139

TÀI LIỆU THAM KHẢO 140 PHỤ LỤC I

Phụ lục 1 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG3 II Phụ lục 2 Phổ NMR của TG4 V

Phụ lục 3 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG6 VIII Phụ lục Phổ NMR của TG9 XII

Phụ lục 5 Phổ NMR của TG12 XV Phụ lục 6 Phổ khối lượng và phổ NMR của TG13 XVIII Phụ lục 7 Phổ khối lượng và phổ NMR của TG15 XXII Phụ lục 8 Phổ NMR của TG16 XXVI Phụ lục 9 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG19 XXVII Phụ lục 10 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG20 XXXI Phụ lục 11 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG21 XXXIV Phụ lục 12 Phổ NMR của TG22 XXXVII Phụ lục 13 Phổ NMR của TG23 XLI Phụ lục 14 Phổ khối lượng và phổ NMR của TG24 XLIV Phụ lục 15 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG25 XLVI Phụ lục 16 Phổ khối lượng phân giải cao và phổ NMR của TG26 XLIX

Phụ lục 17 Kết quả xác định hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định LII

v

Trang 8

DANH M ỤC CHỮ VIẾT TẮT

13C-NMR Carbon-13 Nuclear Magnetic

Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

cacbon 13

1H-NMR Proton Nuclear Magnetic

Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân

proton 5-HT 5-hydroxytryptamine (hay

CCR CC chemokine receptor Thụ thể CC chemokine

CGRP Calcitonin gene related peptide Đối kháng thụ thể peptid liên

hệ đến gen calcitonin

trung gian sinh học prostanoid DEPT Distortionless Enhancement by

Polarisation Transfer Phổ DEPT DMSO Dimethyl sulfoxide

DPPH 1,1- diphenyl -2-picrylhydrazyl

EC50 Effective concentration at 50% Nồng độ gây ra tác động sinh

học cho 50% đối tượng thử nghiệm

ESI-MS Electron Spray Ionization Mass

HepG2 Human hepatocellular carcinoma Ung thư gan người

HMBC Heteronuclear mutiple Bond

Connectivity Phổ tương tác dị hạt nhân qua

nhiều liên kết HR-ESI-MS High Resolution Electronspray

Ionization Mass Spectrum Phổ khối lượng phân giải cao

phun mù điện tử HPLC High Performance Liquid

Chromatography Sắc ký lỏng hiệu năng cao HSQC Heteronuclear Single-Quantum

liên kết

IC50 Inhibitory concentration at 50% Nồng độ ức chế 50% đối tượng

thử nghiệm

ID50 Inhibitory dose at 50% Liều ức chế tối thiểu 50%

iNOS Inducible nitric oxide synthase Một enzyme tạo ra nitric oxide

từ amino L-arginine acid

KB Human epidemoid carcinoma Ung thư biểu mô người

vi

Trang 9

KH Ký hiệu

LNCaP Human prostatic carcinoma Ung thư tiền liệt tuyến người

LU Human Lung Carcinoma Ung thư phổi người

MIC Minimum Inhibitory Concentration Nồng độ ức chế tối thiểu, hay

nồng độ kiềm khuẩn tối thiểu NOS Nitric oxide synthases Các enzyme tổng hợp nitric

oxide

ROS Reactive oxygen species Các gốc tự do ôxy hóa

RP18 Reserve phase C-18 Silica gel pha đảo RP-18

PGE2 Prostaglandin E2 Có tác dụng giãn mạch trực tiếp,

giãn cơ trơn TCA Trichloracetic acid Trichloracetic acid

TGF-β Transforming growth factor β Yếu tố chuyển dạng tăng trưởng

β kiểm soát sự tăng sinh, biệt hóa tế bào

TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng

TMS Tetramethylsilane

TNF-α Tumor necrosis factor α Yếu tố hoại tử khối u α

TPH Enzyme tryptophan hydroxylase Enzyme thủy phân tryptophan

SC Scavenging capacity Khả năng bẫy các gốc tự do

SW480 Human colon adenocarcinoma cell

Xyl Xylopyranoside

UCP-1 Uncoupling protein-1 Protein tách cặp -1

vii

Trang 10

DANH M ỤC BẢNG

Bảng 1 Các hợp chất alkaloid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium 7

Bảng 2 Các hợp chất triterpenoid phân lập từ một số loài của chi Tetradium 10

Bảng 3 Các hợp chất limonoid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium 12

Bảng 4 Các hợp chất flavonoid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium 13

Bảng 5 Các hợp chất coumarin được phân lập từ một số loài của chi Tetradium 14

Bảng 6 Các hợp chất benzenoid được phân lập từ cây dấu dầu lá nhẵn 15

Bảng 7 Các các hợp chất sterol được phân lập từ một số loài của chi Tetradium 16

Bảng 8 Số liệu phổ NMR của TG1 và hợp chất tham khảo 53

viii

Trang 11

Bảng 34 Thống kê hợp chất phân lập được từ các bộ phận cây dấu dầu lá nhẵn 130

Bảng 35 Kết quả xác định hoạt tính gây độc tế bào in vitro 131

Bảng 36 Hoạt tính kháng lao trên chủng M bovis và M smegmatis 133

Bảng 37 Kết quả xác định hoạt tính chống oxi hóa 134

ix

Trang 12

DANH M ỤC HÌNH

Hình 1 Mẫu thực vật và mẫu tiêu bản khô của cây dấu dầu lá nhẵn 30

Hình 2 Sơ đồ phân lập các hợp chất từ mẫu lá cây dấu dầu lá nhẵn 40

Hình 3 Sơ đồ phân lập các hợp chất từ mẫu vỏ cây dấu dầu lá nhẵn 43

Hình 4 Cấu trúc và các tương tác HMBC chính của hợp chất TG1 51

Hình 5 Phổ HR-ESI-MS của TG1 51

Hình 6 Phổ 1H-NMR của TG1 54

Hình 7 Phổ 1H-NMR giãn (a) của TG1 54

Hình 8 Phổ 1H-NMR giãn (b) của TG1 55

Hình 9 Phổ 13C-NMR của TG1 55

Hình 10 Phổ DEPT của TG1 56

Hình 11 Ph ổ HSQC của TG1 56

Hình 12 Ph ổ HMBC của TG1 57

Hình 13 Sắc kí đồ của các dẫn xuất TMS của D-glucose, L-Glucose và TG1 57

Hình 14 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của TG2 58

Hình 15 Phổ HR-ESI-MS của hợp chất TG2 60

Hình 16 Phổ 1H-NMR của TG2 61

Hình 17 Phổ 1H-NMR giãn của TG2 61

Hình 21 Phổ HMBC của TG2 63

Hình 24 Cấu trúc hoá học và các tương tác HMBC chính của TG5 68

Hình 26 Phổ 1H-NMR giãn của TG5 70

Hình 29 Phổ HSQC của TG5 71

x

Trang 13

Hình 31 C ấu trúc hoá học và các tương tác HMBC chính của TG6 72

Hình 32 C ấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của TG7 74

Hình 34 Phổ 1H-NMR giãn của TG7 77

Hình 39 Cấu trúc hoá học và các tương tác HMBC chính của TG8 79

Hình 45 Cấu trúc hóa học của hợp chất TG9 83

Hình 56 Phổ 13C-NMR của TG11 93

Hình 62 Cấu trúc và các tương tác HMBC chính của TG14 98

xi

Trang 14

Hình 64 Phổ giãn 1H-NMR của TG14 (a) 101

Hình 65 Phổ giãn 1H-NMR của TG14 (b) 101

Hình 71 C ấu trúc hóa học của TG16 105

Hình 77 Cấu trúc và các tương tác HMBC chính của TG18 110

Hình 78 Phổ HR-ESI-MS của TG18 112

Hình 84 Ph ổ HMBC của TG18 115

Hình 87 Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của TG21 119

Hình 88 Cấu trúc và các tương tác HMBC chính của TG22 120

Hình 92 Cấu trúc hóa học của TG26 127

Hình 93 Các hợp chất được phân lập từ cây dấu dầu lá nhẵn 129

Hình 94 Kết quả thử hoạt tính các hợp chất phân lập từ cây dấu dầu lá nhẵn 136

xii

Trang 15

M Ở ĐẦU

Thế giới thực vật là nguồn tài nguyên phong phú và vô cùng quý giá về

những hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học Không chỉ các nước phương đông

mà các nước phương tây cũng tiêu thụ một lượng rất lớn dược liệu Theo thống kê,

ở các nước có nền công nghiệp phát triển, một phần tư số thuốc kê trong các đơn đều có chứa hoạt chất có nguồn gốc từ thảo mộc Nhiều hợp chất thứ cấp có hoạt tính sinh học tốt đã được phân lập và đưa vào sử dụng với mục đích chữa bệnh Xu hướng đi sâu nghiên cứu và tìm kiếm các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao từ các loài thực vật làm dược phẩm chữa bệnh đang ngày càng thu hút được sự quan tâm của các nhà khoa học bởi ưu điểm của chúng là độc tính thấp, dễ hấp thu

và chuyển hóa trong cơ thể hơn so với các dược phẩm tổng hợp

Việt Nam là một nước nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nên có hệ

thực vật đa dạng và phong phú Theo ước tính, nước ta có khoảng gần 13000 loài thực vật bậc cao trong đó có khoảng hơn 4000 loài được sử dụng làm thuốc Việc sử

dụng nguồn tài nguyên đó để phòng, chữa bệnh và nâng cao sức khoẻ cho con người đã có một quá trình lịch sử hàng nghìn năm và ngày càng trở nên quan trọng

Ngoài sự đa dạng về thành phần chủng loại, nguồn dược liệu Việt Nam còn

có giá trị to lớn ở chỗ chúng được sử dụng rộng rãi trong cộng đồng để chữa nhiều

loại bệnh khác nhau Các cây thuốc được sử dụng dưới hình thức độc vị hay phối

hợp với nhau tạo nên các bài thuốc quý giá Ngoài ra, hàng trăm cây thuốc đã được khoa học y - dược hiện đại chứng minh về giá trị chữa bệnh của chúng

Cây dấu dầu lá nhẵn (Tetradium glabrifolium (Benth.) Hartl.) là một cây thuốc thuộc họ Cam quýt (Rutaceae) thường được sử dụng trị một số bệnh như: trị

tổn thương do ngã, gãy xương, thấp khớp Thân và lá cây dùng để trị viêm thận, phù thũng, dùng ngoài chữa chấn thương, ngứa, eczema Lá cây được dùng nấu nước

tắm cho bà đẻ hoặc nấu nước đặc để rửa vết thương, tắm ghẻ lở Lá cây còn được giã chưng với giấm để đắp chống sưng, tắc tia sữa Quả và vỏ được dùng sắc uống

để lợi tiểu hoặc đại tiểu, chữa kiết lị, táo bón và thấp khớp Các nghiên cứu về thành phần hóa học của loài này đã chỉ ra sự có mặt của các lớp chất alkaloid,

1

Trang 16

triterpenoid, benzenoid và coumarin Nhiều hợp chất trong số đó đã thể hiện nhiều hoạt tính tốt như evomeliaefolin, rutaevinexic acid, isolimonexic acid

Nhằm mục đích nghiên cứu làm rõ thành phần hóa học và hoạt tính sinh học

của cây dấu dầu lá nhẵn (Tetradium glabrifolium), chúng tôi lựa chọn đề tài:

‘‘Nghiên c ứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học cây dấu dầu lá nhẵn

Tetradium glabrifolium (Benth.) Hartl.”

Mục tiêu của luận án: Nghiên cứu để làm rõ thành phần hoá học chủ yếu

của cây dấu dầu lá nhẵn nhằm tìm kiếm các hợp chất có hoạt tính sinh học, làm cơ

sở khoa học cho những nghiên cứu tiếp theo để tạo ra sản phẩm chăm sóc sức khỏe cộng đồng và góp phần giải thích được tác dụng chữa bệnh của vị thuốc này

Nội dung luận án bao gồm:

1 Phân lập các hợp chất từ lá và vỏ thân cây dấu dầu lá nhẵn bằng các phương pháp sắc ký;

2 Xác định cấu trúc hoá học các hợp chất phân lập được bằng các phương pháp vật lý và hóa học;

3 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào, hoạt tính kháng lao, hoạt tính chống oxi hóa và hoạt tính kháng vi sinh vật của các hợp chất phân lập được

2

Trang 17

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CHI TETRADIUM

1.1.1 Đặc điểm thực vật chi Tetradium

Họ Cam quýt (Rutaceae) hay còn gọi là họ Cửu lý hương là một họ thực vật trong bộ Bồ Hòn (Sapindales) với khoảng 161 chi với hơn 2070 loài, phân bố chủ

yếu ở vùng nhiệt đới và ôn đới ấm, đặc biệt là Nam Phi, châu Úc và châu Á [1]

Chi Tetradium là một chi trong họ Cam quýt (Rutaceae), phân bố từ vùng núi

Himalaya đến vùng nhiệt đới Đông Nam Á Trong các tài liệu cũ, các loài của chi

Tetradium thường bị xếp vào chi Euodia (nhiều tài liệu viết là Evodia), nhưng bắt đầu từ năm 1981, chi Euodia đã được chia thành 3 chi: Tetradium, Euodia và Melicope [1, 2]

Theo phân loại thực vật học, chi Tetradium bao gồm 12 loài, nhưng trong số

này mới chỉ có 8 loài được chấp nhận tên:

- Tetradium austrosinense (Handel-Mazzetti) T G Hartley, 1981;

- Tetradium calcicolum (Chun ex C C Huang) T G Hartley, 1981;

- Tetradium daniellii (Bennett) T G Hartley, 1981;

- Tetradium fraxinifolium (Hooker) T G Hartley, 1981;

- Tetradium glabrifolium (Champion ex Bentham) T G Hartley, 1981;

- Tetradium ruticarpum (A Jussieu) T G Hartley, 1981;

- Tetradium sambucinum (Blume) T.G Hartley, 1981;

- Tetradium trichotomum (Loureiro) Fl Cochinch, 1790

Các loài trong chi Tetradium thường có thân bụi hoặc thân gỗ, lá dài khoảng 14-38 cm hình lông chim hoặc hình elip, không có răng cưa, sáng bóng màu xanh đậm ở trên, nhạt màu và có lông bên dưới Hoa gồm các bông nhỏ, đơn tính, trong các cụm, màu trắng với bao phấn màu vàng Cánh hoa màu xanh lá cây, vàng hoặc

trắng Chùm hoa từ 8-16 cm, phân nhánh ở cuối các cành nhỏ Hoa có mùi thơm và xuất hiện vào giữa đến cuối mùa hè, dễ nhận thấy, rất hấp dẫn với ong Trái cây màu hồng hoặc gần như màu đen, có mỏ trong cụm lớn và sặc sỡ Hạt màu đen sáng bóng, quả chín vào cuối mùa hè và tồn tại qua mùa đông [1, 2]

3

Trang 18

1.1.2 Các nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Tetradium

Hiện nay, theo thống kê, trong 8 loài được công nhận tên của chi Tetradium,

mới có 5 loài đã được công bố về thành phần hóa học, bao gồm: T daniellii, T glabrifolium, T ruticarpum, T sambucinum và T trichotomum Các nghiên cứu về thành phần hóa học về chi Tetradium cho thấy sự có mặt của nhiều lớp chất, như: alkaloid, triterpenoid, flavonoid, coumarin, benzenoid, amide, tannin, sterol

Năm 1988, các nhà khoa học Nhật Bản đã phân lập từ loài Evodia rutaecarpa (tên khác của loài T ruticarpum) hai mươi hợp chất trong đó có chín hợp chất mới gồm bốn limonoid: 12α-hydroxylimonin (73), 12α-hydroxyevodol

(65), 6α-acetoxy-5-epilimonin (70) và 6β-acetoxy-5-epilimonin (71); năm

quinolone alkaloid: 1-methyl-2-[(Z)-6′-undecyl]-4(1H)-quinolone (37),

1-methyl-2-[(Z)-6 ′-pentadecenyI]quinolone (38), 1-methyl-2-[(Z)-10′-pentadecenyl]

-4(1H)-quinolone (40), 1-methyl-2-[(4′Z,7′Z)-4,7-tridecadienyl]-4(1H)-quinolone (41),

1-methyl-2-[(6′Z,9′Z)-6,9-pentadecadienyl]-4(1H)-quinolone (42) và bảy limonoid đã

biết là: evodol (66), rutaevine (67), rutaevine acetate(68), graucin A (69), limonin (72), obacunone (78) và jangomolide (79); bốn hợp chất quinolone alkaloid đã biết:

1-methy1-2-undecyl-4(1H)-quinolone (28), dihydroevocarpine (31), pentadecyl-4(1H)-quinolone (33) và evocarpine (39) [3]

1-methyl-2-Năm 1990, Abdul Quader và đồng nghiệp tại Khoa Dược, Đại học Strathclyde, Vương quốc Anh đã phân lập từ thân cây và vỏ câyT trichotomum hai alkaloid là: α-allocryptopine (6), dictamnine (17) và ba limonoid là: calodendrolide

(56), limonexic acid (64) và limonin (72) [4]

Năm 1991, Miyake và cộng sự tại Viện nghiên cứu Sinh học nông nghiệp Wakayama, Momoyama, Nhật Bản đã phân lập được ba hợp chất limonoid mới từ

quả loài T rutacarpum, gồm: limonin 17β-D-glucopyranoside (74), limonin

diosphenol 17-O- β-D-glucopyranoside (75), 6β-hydroxy-5-epilimonin

17-O-β-D-glucopyranoside (76) và ba h ợp chất limonoid đã biết là: limonin diosphenol (62), rutaevine (67) và limonin (72) [5]

Năm 2002, nhóm nghiên cứu của GS Trần Văn Sung và cộng sự tại Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã phân lập được 3 hợp

4

Trang 19

chất alkaloid từ cây Tứ chẻ ba (T trichotomum) là: rutaecarpine (7), evodiamine

(10) và nauclefin (13) [6]

Năm 2003, Stevenson và các đồng nghiệp thuộc Trung tâm Nghiên cứu quốc

tế Jealott's Hill, Vương quốc Anh đã phân lập từ phần dịch chiết quả sấy khô của

loài T daniellii một furanocoumarin mới là

5-(6-hydroxy-3,7-dimethylocta-2,7-dienyloxy) psoralen (97) và sáu hợp chất furanocoumarin đã biết là xanthotoxin

(94), bergapten (95), isopimpinellin (96), dienyloxy) psoralen (98), 5-geranyloxypsoralen (99) và 8-geranyloxypsoralen (100) Các hợp chất này đều thể hiện hoạt tính tốt ngăn chặn sự phát triển ấu trùng

5-(7-hydroxy-3,7-dimethylocta-2,5-Spodoptera littoralis và Heliothis virescens [7]

Năm 2006, nhóm nghiên cứu của Komala Ismiarni tại trường Đại học Putra,

Malaysia đã nghiên cứu thành phần hóa học lá loài T sambucinum, đã phân lập

được bốn hợp chất, bao gồm: decarine (1), rutaecarpine (7), aurantiamide acetate (15) và umbelliferone (7-hydroxycoumarin) (92) [8]

Năm 2007, các nhà khoa học Hàn Quốc đã phân lập từ dịch chiết quả của

loài T ruticarpum sáu hợp chất quinolone alkaloid gồm:

1-methyl-2-nonyl-4(1H)-quinolone (27), 1-methyl-2-undecyl-4(1H)-1-methyl-2-nonyl-4(1H)-quinolone (29), dihydroevocarpine (31),

2-[(Z)-6′-undecenyl]-4(1H)-quinolone (37), evocarpine (39) và

1-methyl-2-[(6′Z,9′Z)-6′,9′-pentadecadienyl]-4(1H)-quinolone (42) [9]

Vào năm 2010, Tzu-Ying Wang và đồng nghiệp tại Đại học Y khoa Đài

Trung, Đài Loan đã phân lập từ quả của loài T ruticarpum một quinolone alkaloid

mới là: 1-[(6′Z,9′Z)- 6′,9′-pentadecadienyl]-4(1H)-quinolin (42) và mười một hợp

chất đã biết gồm sáu hợp chất alkaloid: rutaecarpine (7), evodiamine (10),

14-formyldihydrorutaecarpine (11), skimmianine (20), dihydroevocarpine (31) và evocarpine (39); một hợp chất limoloid là evodol (66); bốn hợp chất sterol là: β-

sitosterol (121), stigmasterol (123), 3β-hydroxystigmast-5-en-7-one (124) và

Trang 20

là [7′-hydroxy-(E)-9′-tridecenyl]-4(1H)-quinolone (43),

1-methyl-2-[(Z)-4′-nonenyl]-4(1H)-quinolone (34) và 1-methyl-2-[(1′E,5′Z)-1′,5′-undecadienyl]

-4(1H)-quinolone (45); một hợp chất mới phân lập từ tự nhiên là

1-methyl-2-[(E)-1′-undecenyl]-4(1H)-quinolone (46) cùng với mười ba hợp chất quinolone alkaloid

đã biết là: 1-methyl-2-nonyl-4(1H)-quinolone (27), quinolone (28), 1-methyl-2-undecyl-4(1H)-quinolone (29), 1-methyl-2-dodecyl- 4(1H)-quinolone (30), dihydroevocarpine (31), 1-methyl-2-tetradecyl-4(1H)-

1-methyl-2-decyl-4(1H)-quinolone (32), 1-methyl-2-pentadecyl-4(1H)-1-methyl-2-decyl-4(1H)-quinolone (33), undecenyl-4(1H)-quinolone (37), 1-methyl-2-[(Z)-6′-pentadecenyl]-4(1H)-quinolone (38), evocarpine (39), 1-methyl-2-[(Z)-10′-pentadecenyl]-4(1H)-quinolone (40), 1-

[(Z)-6′-methyl-2-[(4′Z,7′Z)- 4′,7′-tridecadienyl]-4(1H)-quinolone (41), [(6′Z,9′Z)- 6′,9′-pentadecadienyl]-4(1H)-quinolone (42) Tuy nhiên, 43 là một hợp

1-methyl-2-chất không ổn định trong môi trường tự nhiên nên biến đổi thành một hợp chất nhân

tạo mới là 1-methyl-2-[7′-cacbonyl-(E)-9′-tridecenyl]-4(1H)-quinolone (44) [11]

Gần đây nhất, năm 2013, các nhà khoa học Trung Quốc nghiên cứu dịch

chiết từ quả loài T ruticarpum được thu thập ở tỉnh Chiết Giang (Trung Quốc), đã

phân lập được hai mươi alkaloid trong đó có chín hợp chất mới, gồm năm

quinolone alkaloid mới là euocarpine A-E (47-51) và bốn hợp chất mới là: methyl- 2-ethyl-4(1H)-quinolone (23), 1-methyl-2-octyl-4(1H)- quinolone (26), 1-

1-methyl-2-[(Z)- 5′-dodecenyl]-4(1H)-quinolone (35), 1-methyl-2-[(Z)-5′-pentadecenyl]

-4(1H)-quinolone (36), cùng mười hợp chất đã biết là:

1-methyl-2-pentyl-4-(1H)-quinolone (24), 1-methyl- 2-heptyl-4(1H)-1-methyl-2-pentyl-4-(1H)-quinolone (25), quinolone (27), 1-methyl-2-decyl-4(1H)-quinolone (28), 1-methyl-2-undecyl- 4(1H)-quinolone (29), 1-methyl-2-dodecyl-4-(1H)-quinolone (30), dihydroevocarpine (31), 1-methyl-2-tetradecy-4-(1H)-quinolone (32), 1-methyl-2-pentadecenyl-4(1H)- quinolone (33), evocarpine (39) và 1-methyl-2-[(6′Z, 9′Z)-6′, 9′-pentadecadienyl]-

1-methyl-2-nonyl-4(1H)-4(1H)-quinolone (42) [12]

Dựa theo việc phân loại các lớp hợp chất tự nhiên, 135 hợp chất được phân

lập từ các loài thuộc chi Tetradium được thống kê theo các lớp chất sau đây:

6

Trang 21

1.1.2.1 Các h ợp chất alkaloid

Các công bố nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Tetradium cho thấy,

hầu hết các loài của chi này đều chứa các hợp chất alkaloid Cho đến hiện tại, tổng

cộng có 53 hợp chất alkaloid được phân lập từ chi này (Bảng 1)

Bảng 1 Các hợp chất alkaloid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium

Trang 22

23 1-Methyl-2-ethyl-4(1H)-quinolone T ruticarpum [12]

24 1-Methyl-2-pentyl-4(1H)-quinolone T ruticarpum [12]

25 1-Methyl-2- heptyl-4(1H)- quinolone T ruticarpum [12]

26 1-Methyl-2-octyl-4(1H)- quinolone T ruticarpum [12]

44 1-Methyl-2- [7′-cacbonyl -(E)- 9′ -

tridecenyl ]-4(1H)-quinolone T ruticarpum [11]

45 1-Methyl-2-[(1′E,5′Z)- undecadienyl]-

Trang 23

OCH3

N

O O

14

N H

N

N O

N

N O

13

H N O

OCOCH3O

15

O O N

N

COOCH3

N H

N

O

CH3

22 21

9

Trang 24

26

27 28 29 30 31 32 33 34

37 36 35

42 43 44 45

6'

9'

7' 8' 9'

4'

7' 8' 9'

10' 11'

O O

46 47 48 49

8'

6'

7' 6' 8'

5'

7'

8' 5'

10' 9'

1' 1'

N

CH3

R O

50

N

52

O OCH3

CH3

N

CH3

C9H19OH

53

O OH OCH3

1' 1' 1'

1'

1' 1'

1'

1.1.2.2 Các hợp chất triterpenoid

Theo các nghiên cứu, đã có tám hợp chất triterpenoid được phân lập từ hai

loài T glabrifolium và T trichotomum c ủa chi Tetradium [4, 109, 111] Bảng 2

Bảng 2 Các hợp chất triterpenoid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium

Trang 25

O O

H

OH

O O

Theo các công trình công bố, đã có mười tám hợp chất limonoid được phân

lập từ các loài của chi Tetradium[3, 4, 5, 109, 110, 111]:

O

O O

O O HO

OH

O

O O

R

65 OH

66 H

11

Trang 26

Bảng 3 Các hợp chất limonoid được phân lập từ một số loài của chi Tetradium

62 Limonin diosphenol T rutacarpum [5]

63 Limonexic acid T trichotomum [4]

64 Isolimonexic acid T glabrifolium [110]

68 Rutaevine acetate T rutacarpum [3]

OH

12

Trang 27

76

O

COOH OH

OH

O O

78

O

O O

O

O O

O

79

O

1.1.2.4 Các hợp chất flavonoid

Các nghiên cứu về thành phần hóa học trong chi Tetradium cho thấy, có chín

hợp chất flavonoid được phân lập từ hai loài T.glabrifolium và T rutacarpum:

O HO

OGlc

O HO

OH O

OH

OGlc(1→6)Rha R

81 Kaempferol-3-O-β-D-xylopyranoside T glabrifolium [111]

82 Hyperoside (hyperin) T rutacarpum [58]

83 Quercetin-3-O- α-L-arabinopyranoside T rutacarpum [58]

Trang 28

1.1.2.5 Các h ợp chất coumarin

Coumarin là một lớp chất thiên nhiên có tác dụng dược lý cao, thể hiện nhiều hoạt tính hữu ích, như: kháng nấm, chống khối u, chống đông máu, kháng virut HIV, trị bệnh cao huyết áp, chống loãng xương … thường phân lập được trong các loài thuộc họ Đậu (Fabaceae), Hoa tán (Apiaceae), Cam quýt (Rutaceae) …Các hợp

chất coumarin được tìm thấy trong hầu hết các loài của chi Tetradium Theo các tài

liệu đã thông báo [7, 8, 109, 111]có mười hai hợp chất coumarin đã được phân lập:

O O

O

(A)

(C) (B)

Trang 29

1.1.2.6 Các h ợp chất benzenoid

Theo thống kê từ các tài liệu đã công bố, có hai mươi hợp chất benzenoid

trong chi Tetradium đều phân lập từ loài T.glabrifolium [109, 111]:

Bảng 6 Các hợp chất benzenoid được phân lập từ cây dấu dầu lá nhẵn

H

O

CH3

OH O

CH2OH O

OH OCH3

15

Trang 30

O O

OH

HO OH

OCH 3

H 3 C O HO

120 119

GlcO

O

OH OH

COOCH 3

OH HO

121 β-Sitosterol T glabrifolium, T ruticarpum [10, 109]

122 Sitosteryl glucoside T glabrifolium [109]

124 3β-Hydroxystigmast-5-en-7-one T ruticarpum [10]

125 3β-Hydroxystigmasta-5,22- dien-7-one T ruticarpum [10]

1.1.2.8 Các hợp chất khác

Ngoài ra, theo hai công trình của Wu và cộng sự (ĐH Quốc gia Cheng Kung,

Đài Loan) từ loài T glabrifolium còn phân lập được năm hợp chất amide:

hortiamide (126), cis-N-p-coumaroyltyramin (127), trans-N-p-coumaroyltyramin (128), cis-N-feruloyltyramin (129), trans-N-feruloyltyramin (130) [109]; hai hợp

chất tanin: corilagen (131), ellagic acid (132) [111]; một hợp chất đường: myo

inositol (133) [111]; một hợp chất lignan: (-)-matairesinol (134) [109] và một hợp

chất nucleosid: adenosine (135) [111]:

16

Trang 31

OH

NH O HO

OH

NH O

HO HO

N H O

H H

OH OCH3

HO

N H O

H H

OH OCH3

O

OH OH O

OH OH

OH O

O

O HO

O O

O

OH

OH HO

N

N N

N

NH2

O

OH OH HO

K ết luận:

Theo các nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Tetradium trong các loài

đã được công bố về thành phần hóa học (T daniellii, T glabrifolium, T ruticarpum,

T sambucinum và T trichotomum) đã phân lập được 135 hợp chất, cho thấy sự có

mặt rất đa dạng của các lớp chất trong tự nhiên (12 lớp chất), gồm: 53 alkaloid, 8 triterpenoid, 18 limonoid, 9 flavonoid, 12 coumarin, 20 benzenoid, 5 amide, 2 tannin, 5 sterol, 1 đường, 1 hợp chất lignan và 1 hợp chất nucleoside

17

Trang 32

1.1.3 Các nghiên cứu về hoạt tính sinh học của chi Tetradium

1.1.3.1 Tác dụng kháng ung thư

Trong các lớp chất phân lập được từ chi Tetradium, các hợp chất limonoid có

rất nhiều hoạt tính thú vị Gần đây, nhiều công trình nghiên cứu đã chứng minh được rằng các limonoid thể hiện hoạt tính với các mức độ khác nhau trên nhiều loại

tế bào ung thư như: ung thư phổi, ung thư đại tràng, ung thư vòm họng, ung thư da, ung thư vú và ung thư dạ dày [14, 15, 16, 17, 18]

Một số nghiên cứu đã chứng minh rằng, các hợp chất limonoid làm tăng hoạt

độ enzyme glutathione S-transferace và quinine reductase là các enzyme có tác

dụng chuyển hóa và loại trừ tác hại của nhiều tác nhân hóa học độc hại, xúc tác cho quá trình liên kết giữa glutathione với nhiều hợp chất có khả năng gây ung thư có ái

lực điện tử trong tự nhiên Hàm lượng các enzyme này tăng tương quan với khả năng ức chế ung thư gây ra do các tác nhân hóa học [19, 20]

Trong các công trình nghiên cứu về bệnh ung thư vòm họng trên chuột

hamster, Miler và các cộng sự cũng đã chứng minh được rằng limonin (72) hoạt

động như một tác nhân bẫy, bắt và ngăn chặn các hợp chất benzo[a]pyrene và chất gây đột biến khác trước khi chúng gắn với các tế bào trong cơ thể động vật thí

nghiệm Limonin (72) ức chế mạnh 7, 12-dimethylbenzo[a]anfliracene là một tác

nhân gây ra ung thư vòm họng và có tác dụng ngăn sự hình thành ung thư mặt trước

của dạ dày và ung thư đại tràng trên chuột thực nghiệm Các nghiên cứu chỉ ra rằng

hệ vòng trong nhân và nhóm furan có trong limonoid là yếu tố quan trọng trong hoạt tính chống ung thư [21, 22, 23]

Nhóm nghiên cứu của Jie Yang chứng minh evodiamine (10) có tác dụng ức

chế in vitro bộ chuyển đổi tín hiệu và kích hoạt phiên mã 3 (STAT3) và khối u của

các tế bào ung thư biểu mô gan người HepG2 bằng cách ngăn chặn phương thức tín

hiệu STAT3 liên quan đến sự tồn tại, phát triển, hình thành và ức chế miễn dịch của các tế bào ung thư biểu mô tế bào gan trên mô hình động vật thực nghiệm [24].

Hợp chất rutaecarpine (7) là một trong những alkaloid góp phần thể hiện

nhiều hoạt tính quan trọng của các loài trong chi Tetradium Các nghiên cứu của

nhóm nghiên cứu Yang và cộng sự đã xác định khả năng ức chế sự phát triển các

18

Trang 33

dòng tế bào ung thư (GI50) của hợp chất 7 Cụ thể dòng tế bào ruột kết HT-29 (31,6

μM), ung thư phổi A-549/ATCC (14,5 μM), ung thư buồng trứng OVCAR-4 (18,9 μM) ung thư vú HS-578T (22,6 μM) [25, 26]

Decarine (1) được phân lập từ loài T sambucinum thể hiện hoạt tính độc tế

bào đối với dòng tế bào ung thư cổ tử cung HeLa (IC50 là 14,6 µg/mL) [8]

Năm 2012, các nhà khoa học Trung Quốc đã phân lập được mười bảy hợp

chất quinolone alkaloid từ loài T ruticarpum là: 27-34, 37-43, 45, 46 Các hợp chất

này được đánh giá hoạt tính gây độc tế bào trên bốn dòng tế bào ung thư người là ung thư bạch cầu HL-60, ung thư dạ dày N-87, ung thư phổi H-460 và ung thư gan HepG2 Kết quả cho thấy các hợp chất này đều có hoạt tính gây độc tế bào trên cả bốn dòng tế bào thử nghiệm ở mức độ độ trung bình (IC50 từ 14 µM và 22 µM) [11]

1.1.3.2 Tác d ụng với hệ tim mạch

Một số alkaloid phân lập được từ chi Tetradium có nhiều tác dụng tích cực

đến hệ tim mạch Trong một nghiên cứu của Chiou và cộng sự về tác động giãn cơ

trơn động mạch chủ của ba quinazoline alkaloid phân lập từ loài T ruticarpum đã

chứng minh là rutaecarpine (7), evodiamine (10) và dehydroevodiamine (14) có tác

dụng giãn mạch trên động mạch chủ của chuột thực nghiệm [27]

Nhiều nghiên cứu trên chuột thực nghiệm đã chứng minh rutaecarpine (7) có

tác dụng giãn mạch [28, 29], cải thiện chức năng của hệ tim mạch và ức chế của nhịp xoang tim nhanh khi sử dụng kháng nguyên gây sốc phản vệ chấn thương tim

[30], ức chế sự co mạch gây ra do sốc phản vệ [31], gây giãn mạch các đoạn động mạch mạc treo nuôi cấy của chuột thí nghiệm khi sử dụng tác nhân phenylephrine gây co mạch [32] Tác dụng hạ huyết áp của rutaecarpine trên chuột cao huyết áp

theo cơ chế kích thích sự tổng hợp và phóng thích CGRP-là một chất bảo vệ nội sinh trong bệnh tăng huyết áp [33, 34] Tác động bảo vệ hệ tim mạch do thiếu máu cục bộ gây ra chấn thương cơ tim của rutaecarpine là do sự kích hoạt thụ thể vanilloid để phóng thích CGRP trên chuột thực nghiệm có mức huyết áp bình thường [35] hoặc huyết áp cao tự phát [36] Rutaecarpine cũng có tác dụng hạ huyết

19

Trang 34

áp và giảm phì đại động mạch mạc treo trong chứng tăng huyết áp thận trên chuột thí nghiệm [37, 51].

Tác dụng chống tạo huyết khối của rutaecarpine do ức chế tập kết tiểu cầu

gây ra các nút tắc mạch [38, 39] Tác dụng chống huyết khối của rutaecarpine thể hiện tương đương với thuốc chống huyết khối aspirin Khi tiêm tĩnh mạch, rutaecarpine kéo dài đáng kể thời gian trễ sự hình thành nút tắc tiểu cầu trong các tĩnh mạch nhỏ mạc treo Thời gian trễ kéo dài gấp khoảng 1,5 lần so với nhóm đối chứng và gấp gần hai lần so với thuốc aspirin [40, 41] Trên mô hình động vật thực nghiệm, rutaecarpine có hiệu quả trong việc giảm tỷ lệ tử vong do tắc mạch cấp tính

ở phổi do huyết khối gây ra Những kết quả này cho thấy rutaecarpine (7) có tác

dụng chống tập kết tiểu cầu và có thể là một tác nhân trị liệu tiềm năng cho huyết

khối động mạch [40, 41]

Rang và cộng sự đã nghiên cứu và kết luận về cơ chế chống sốc phản vệ tim

và chống thiếu máu cục bộ cơ tim ở chuột lang của hợp chất evodiamine (10) là do kích thích sự phóng thích CGRP [42] Evodiamine (10) cũng được nhóm nghiên

cứu của Chious chứng minh là có tác dụng giãn cơ không phụ thuộc nội mạc và đã được thử nghiệm như một tác nhân có tiềm năng để điều trị rối loạn chức năng cương cứng ở động vật thực nghiệm [43] Trong nghiên cứu tiếp theo, nhóm nghiên cứu của Chiou cũng đã chứng minh tác dụng giãn mạch của dehydroevodiamine

(14) là do tác động vào nội mạc và phong bế thụ cảm thể 1α-adrenoceptor, kích

hoạt kênh K+ và phong bế kênh Ca2+[44]

Trong y học cổ truyền, loài T ruticarpum đã được sử dụng rộng rãi ở Trung

Quốc hàng trăm năm nay để điều trị bệnh cao huyết áp [45] Từ một phân đoạn dịch chiết của methanol từ quả của loài T ruticarpum các nhà khoa học Hàn Quốc đã

phân lập được các quinolone alkaloid là: 39, 41 và 42 là các tác nhân có tác dụng

chẹn các thụ thể angiotensin II, vì vậy các quinolone alkaloid này là những thành

phần chính của dịch chiết có tác dụng điều chỉnh huyết áp [46]

20

Trang 35

1.1.3.3 Tác d ụng đối với hệ thần kinh

Trong các nghiên cứu nhằm mục đích phát triển các loại thuốc chống thiếu máu não mới từ các sản phẩm tự nhiên, Yamahara và cộng sự đã được chứng minh

dịch chiết từ quả của loài T ruticarpum có tác dụng tốt trong mô hình thiếu oximáu

não do kali cyanua gây ra ở chuột thực nghiệm Phân tích sâu hơn các thành phần

hoạt tính đã chỉ ra rằng rutaecarpine (7) và evodiamine (10) là hai hợp chất chính có

tác động này [47, 48]

Trong một nghiên cứu sàng lọc về cây thuốc, Kim và các cộng sự (Hàn

Quốc) tìm ra T ruticarpum có tác dụng bảo vệ hệ thần kinh và và ngăn ngừa các mảnh đầu cacbon của β-amyloid là tiền chất protein gây độc thần kinh nên có thể

hữu ích trong việc điều trị các bệnh thoái hóa thần kinh và bệnh Alzheimer [49]

Năm 1996, Park và cộng sự tại khoa Dược, Đại học Seoul, Hàn Quốc đã phát hiện khả năng ức chế enzyme acetylcholinesterase và tác dụng cải thiện trí nhớ của

dehydroevodiamine (14) từ loài T rutaecarpa Tác dụng của dehydroevodiamine

được chứng minh mạnh hơn tacrine là loại thuốc điều trị bệnh Alzheimer được chấp thuận bởi FDA [50] Nhiều công trình nghiên cứu đã chứng minh,

dehydroevodiamine (14) còn có tác dụng bảo vệ thần kinh và chống mất trí nhớ do

có tác động đến sự phóng thích và hấp thu glutamate trên các tế bào não do đó có vai trò quan trọng trong trí nhớ và học tập [51, 52, 53]

Sáu hợp chất quinolone alkaloid, 27, 29, 31, 37, 39 và 42 được phân lập từ

loài T ruticarpum đã thể hiện hoạt tính ức chế enzyme monoamine oxidase B là

một flavoenzyme có tác dụng trong việc điều trị bệnh Alzheimer và bệnh Parkinson

với các giá trị IC50 lần lượt là 9,2 μM, 55,2 μM, 33,2 μM, 67,1 μM và 15,2 μM [9]

1.1.3.4 Tác dụng kháng viêm, giảm đau

Viêm là một phản ứng của cơ thể nhằm bảo vệ cơ thể sống khỏi các tác nhân gây hại cho cơ thể như: hóa học, vật lý, sinh vật, các yếu tố độc hại của môi trường, thiếu máu cục bộ hoặc một tương tác của các kháng nguyên - kháng thể [54]

Năm 2009, Liu và nhóm nghiên cứu thuộc trường Dược, Trường đại họcY, Đại học Quốc gia Đài Loan đã chứng minh được tác dụng và cơ chế kháng viêm

của hai hợp chất rutaecarpine (7) và evodiamine (10) phân lập từ loài T ruticarpum

21

Trang 36

là do ức chế quá trình tổng hợp PGE2 Thêm vào đó, cơ chế kháng viên của

evodiamine còn do ức chế cả enzyme COX-2, iNOS và yếu tố NF- κB [55, 56]

Hợp chất evodiamine (10) làm giảm nồng độ cơ bản và nồng độ phóng thích angiotensin II của aldosterone trong tế bào glomerulosa thượng thận và giảm hoạt

độ của enzyme 11β -hydroxylase [57] Hai hợp chất chính là rutaecarpine (7) và evodiamine (10) có tác dụng kích thích phóng thích CGRP [58] Evodiamine (10)

cũng có tác dụng ức chế sự đau của thần kinh cảm giác nội tạng gây ra bởi acetic acid [59] và ức chế kênh thụ thể chuyển tiếp vanilloid loại 1 lớn hơn khoảng 3-19 lần so với capsaicin trên chuột thực nghiệm [60] và có tác dụng tương đương với capsaicin trên phế quản và tâm nhĩ cô lập của chuột lang [61]

Rutaecarpine (7) bảo vệ và chống viêm loét niêm mạc dạ dày gây ra bởi acetylsalicylic acid và stress [62] và bảo vệ niêm mạc dạ dày chống lại tổn thương

do uống rượu [63] đều có liên quan đến sự kích thích phóng thích CGRP nội sinh thông qua hoạt hóa thụ thể vanilloid loại 1 Nhiều nghiên cứu khác cũng đã chứng

minh được rằng rutaecarpine (7) [64], evodiamine (10) [65] và limonin (72) [64] có tác dụng kháng viêm giảm đau trên mô hình động vật thực nghiệm

Thang thuốc nổi tiếng có tên Wuzhuyu (Trung Quốc) bao gồm quả của loài

T rutacarpum, gừng, nhân sâm và táo được sử dụng để điều trị chứng đau nửa đầu Tác dụng chữa chứng đau nửa đầu của đơn thuốc đông y này là do kích thích tryptophan hydroxylase 2, một enzyme kiểm soát tốc độ sinh tổng hợp 5-HT trong não và xúc tác cho quá trình tổng hợp và giải phóng 5-HT trong não [66]

Aurantiamide acetate (15) có tác dụng giảm đau của chuột thực nghiệm trên

mô hình đĩa nóng làm tăng thời gian trong quá trình phản ứng kích thích nhiệt ở chuột Hợp chất này cũng ức chế các cytokine gây viêm, TNF-α và Interleukin-2 nên có tác dụng giảm đau khi tiêm dưới da ở mô hình chuột bị viêm khớp chân [67]

1.1.3.5 Các tác dụng khác

+ Tác d ụng dưỡng da

Năm 2012, Jérôme Grousson và cộng sự đã tìm ra dịch chiết từ quả của loài

T ruticarpum có tác dụng thúc đẩy quá trình tuần hoàn vi mạch máu làm cho tăng

22

Trang 37

độ sáng của da Nghiên cứu đã chứng minh dịch chiết từ trái cây T ruticarpum làm

giãn mạch máu do kích thích vi tuần hoàn ở da bằng cách điều chỉnh nồng độ phóng thích nitric oxide ngoại bào trên da của các tình nguyện viên [68]

Dịch chiết của loài T ruticarpum có tác dụng chống tia cực tím B trên da

[69] Hỗn hợp gồm rutaecarpine (7), evodiamine (10) và dehydroevodiamine (14)

đã được chứng minh có tác dụng ngăn tia cực tím gây ra sự phóng thích PGE2 từ các tế bào sừng và ban đỏ trên da người [70] Rutaecarpine (7) ức chế tia cực tím A

gây ra các loại phản ứng oxi hóa và ngăn chặn UVA trên tế bào sừng HaCaT của người [71]

Rutaecarpine và evodiamine cũng có tác dụng điều trị viêm da dị ứng và viêm mũi do ức chế globulin miễn dịch E trên chuột thí nghiệm [72]

+ Tác dụng điều nhiệt cơ thể

Trong số các hợp chất alkaloid chính được phân lập từ quả của loài T ruticarpum, hợp chất evodiamine (10) ngăn chặn tác dụng hạ nhiệt độ cơ thể chuột

thực nghiệm do hợp chất gây sốt ngoại sinh chlorpromazine gây ra [73]

Khi tiêm dehydroevodiamine (14 ) hoặc evodiamine (10) vào màng bụng

chuột thí nghiệm, các hợp chất này đã làm giảm nhiệt độ cơ thể chuột Thêm vào

đó, cả hai hợp chất 10 và 14 có tác dụng giảm sốt khi tiêm ở vùng dưới đồi của

chuột thực nghiệm, gây sốt bởi chlorpromazine [74]

+ Tác dụng chống béo phì

Nhiều nghiên cứu đã chứng minh tác dụng chống béo phì của evodiamine

(10) và rutaecarpine (7) Evodiamine có các tác dụng chống tạo mỡ [75, 76, 77]

Shi và cộng sự đã tìm ra cơ chế tác dụng là do giảm hoạt độ của neuropeptide Y và tăng mức độ lưu hành của leptin [78, 79],tương tự như capsaicin

do tác động đến UCP-1 là một protein trong ty thể của các mô mỡ nâu, có tác dụng đốt cháy năng lượng (tức là đốt mỡ trắng), dẫn đến giảm trọng lượng hay giảm lượng mỡ trong cơ thể [80, 81]

+ Tác dụng chống bệnh tiểu đường

Bak và cộng sự đã nghiên cứu hoạt tính kháng tiểu đường của evodiamine

(10); evodiamine ph ối hợp với thuốc rosiglitazone; một loại thuốc trị bệnh tiểu

đường nhưng tác dụng phụ như tăng nguy cơ nhồi máu cơ tim, tạo mỡ trong cơ thể,

23

Trang 38

tăng cân và nhiễm độc gan Khi sử dụng phối hợp, evodiamine giảm các tác dụng phụ của rosiglitazone mà không làm ảnh hưởng tới tác dụng chính của thuốc Tuy

nhiên, hợp chất 10 cũng có tác dụng giảm lượng đường và nồng độ insulin huyết

tương và có tác dụng cải thiện sức đề kháng insulin tương đương với thuốc rosiglitazone [82]. Hydroxyevodiamine (12) được phân lập từ T ruticarpum có khả

năng ức chế hoạt tính enzyme aldose reductase [83]

Hợp chất skimmin (89) cũng được chứng minh giảm đáng kể hàm lượng ure

máu, làm tăng bài tiết albumin niệu và creatinine huyết thanh trên chuột Điều trị

bằng skimmin (89) có thể cải thiện đáng kể chức năng thận và ngăn chặn sự lắng

đọng IgG cũng như sự phát triển của tổn thương thận trên chuột thực nghiệm viêm cầu thận màng [84, 85]

Umbelliferone (92) và glibenclamid làm giảm hàm lượng insulin và đường huyết trên chuột thực nghiệm mắc bệnh tiểu đường Ngoài ra, umbelliferone (92) có

tác dụng bảo vệ thành phần màng tế bào acid béo của gan và thận và có tác dụng hỗ trợ chống oxi hóa và chống tăng lipid huyết [86]

+ Tác dụng kháng vi sinh vật

Trong nghiên cứu sàng lọc 300 mẫu chiết xuất từ thảo dược, Zheng và cộng

sự đã phát hiện dịch chiết của loài T ruticarpum được xếp loại thứ tám trên mười

mẫu thể hiện hiệu quả tác dụng ức chế kháng nguyên bề mặt viêm gan B [87] Ngoài ra, các hợp chất quinolone alkaloid 10, 29, 31, 33, 41 và 42 phân lập từ loài

T ruticarpum được phát hiện có khả năng ức chế quá trình hô hấp và tiêu diệt vi

khuẩn Helicobacter pylori gây bệnh dạ dày [88, 89, 90] Cũng từ dịch chiết của loài này, Thuille và cộng sự tìm thấy khả năng diệt tụ cầu khuẩn gram dương,

Pseudomonas aeruginosa và Candida albicans [91]

Năm hợp chất quinolone alkaloid: 29, 37, 39, 41, 42 từ loài T ruticarpum có

hoạt tính kháng lao, trên cả ba chủng lao thử nghiệm là: Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium smegmatis và Mycobacterium phlei Hợp chất evocarpine (39) có

hoạt tính mạnh nhất với giá trị MIC là 2 µg/mL trên cả ba chủng lao Trên chủng

lao M fortuitum, hoạt tính của evocarpine mạnh gấp tám lần so với ethambutol và

24

Trang 39

tương đương với isoniazid Trên chủng lao M smegmatis, hợp chất 39 có hoạt tính

lớn gấp hai lần so với isoniazid, nhưng tác dụng kém ethambutol hai lần [92, 93]

+ Tác dụng đối với hệ tiêu hóa

Dịch chiết của T ruticarpum có tác dụng ức chế sự co thắt đường ruột và

điều trị bệnh tiêu chảy gây ra do dầu thầu dầu trên chuột thực nghiệm [94] và bảo

vệ các tổn thương trong dạ dày chuột do ethanol gây ra [95, 96]

Evodiamine (10) ức chế quá trình co bóp thắt trong hệ tiêu hóa ở chuột thực

nghiệm theo cơ chế liên quan đến sự phóng thích cholecystokinin và kích hoạt thụ thể cholecystokinin 1 [97] Tác dụng chống nôn của dịch chiết ethanol của thang thuốc Wuzhuyu là do ức chế 5-HT và thụ thể histamin [98]

Khi điều trị bằng skimmianine (20) đã làm giảm số cơn đau trên chuộc thực

nghiệm bị gây đau quặn bằng acetic acid so với nhóm đối chứng Ngoài ra,

skimmianine (20) là tác nhân ức chế sự vận chuyển thức ăn trong hệ tiêu hóa [99]

Ngoài ra một số hợp chất khác như skimmianine (20) và isopimpinellin (59)

cũng có hoạt tính này với giá trị EC50 lần lượt là 7,41 và 0,67 µg/mL [101]

+ Tác d ụng chống say rượu

Dịch chiết từ quả của loài T ruticarpum có tác dụng giảm nồng độ cồn trong

máu do tác dụng đến các enzyme alcohol dehydrogenase (ADH), aldehyde dehydrogenase (ALDH), Cu–Zn superoxide dismutase (Cu–Zn SOD), glutathione peroxidase type 5 (GPX5) và catalase (CAT) Tác dụng chống say rượu của T

25

Trang 40

ruticarpum có tác dụng tương tự thuốc chống say khác đã được thương mại trên thị trường [102]

+ Tác dụng co tử cung

King và cộng sự đã thử nghiệm và chứng minh được hai alkaloid phân lập từ

dịch chiết của quả của loài T ruticarpum là: rutaecarpine (7) và dehydroevodiamine

(14) có tác dụng gây co tử cung in vitro trên tử cung chuột cô lập Sự có mặt của

rutaecarpine (7) trong quả của T ruticarpum là thành phần quan trọng trong các đơn

thuốc y học cổ truyền Trung Quốc để điều trị rối loạn sinh sản nữ [103, 104]

+ Tác d ụng chống côn trùng

Một số limonoid và các dẫn xuất của limonin như limonin (72) và limonin diosphenol (62) có tác dụng kiểm soát côn trùng bọ cánh cứng Colorado

(Leptinotarsa decemlineata ) trên khoai tây và ấu trùng Spodoptera frugiperda

[105].Ngoài tác dụng kiểm soát côn trùng gây hại, các limonoid cũng được sử dụng trong kiểm soát ấu trùng của muỗi rất hiệu quả, điển hình như hợp chất

calodendrolide (56) [106]

Trong bảy furanocoumarin từ trái cây sấy khô của loài T.daniellii có bốn

hợp chất là: 94, 95, 96 và 99 thể hiện hoạt tính diệt hai loài ấu trùng bướm đêm

Spodoptera littoralis và Heliothis virescens [7]

Kết luận:

Các hợp chất phân lập được từ chi Tetradium đã thể hiện nhiều hoạt tính đa

dạng và hữu ích như: hoạt tính kháng ung thư (phổi, đại tràng, vòm họng và da và các tế bào ung thư vú và ung thư dạ dày ), tác dụng đối với hệ tim mạch, hệ thần kinh, tác dụng kháng viêm giảm đau, dưỡng da, trị bệnh tiểu đường, kháng HIV,

giảm béo và tác dụng điều nhiệt Tuy nhiên, phần lớn các hợp chất thể hiện các hoạt tính và tác dụng này trong các loài của chi Tetradium phần lớn đều thuộc lớp

chất alkaloid như: decarine (1), rutaecarpine (7), evodiamine (10), evodiamine (15) và một số hợp chất quinolone alkaloid ; hoặc lớp chất limonoid như: limonin (68), skimmin (84), umbelliferone (87)

dehydro-26

Định dạng
Số trang	221
Dung lượng	7,35 MB