Mục tiêu của nghiên cứu nhằm xác định đặc điểm dịch tễ, bệnh lý của heo mắc bệnh dịch tả heo Châu Phi African swine fever – ASF và xây dựng chương trình giám sát sự lưu hành, xác định đặNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu LongNghiên cứu đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và sự lưu hành của virus dịch tả heo Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu Long
Giới thiệu
Đặt vấn đề
Bệnh dịch tả heo Châu Phi (ASF) là một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, gây ra bởi virus ASFV thuộc họ Asfarviridae, với tỷ lệ chết lên đến 95-100% Bệnh có khả năng lây lan nhanh chóng, biểu hiện qua triệu chứng sốt cao và xuất huyết ở nhiều cơ quan như lách, phổi, và hạch lympho ASF không chỉ ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe động vật và sinh kế của người dân, mà còn tác động lớn đến thương mại toàn cầu trong ngành chăn nuôi heo, trở thành mối đe dọa đối với an ninh lương thực toàn cầu.
Bệnh dịch tả heo châu Phi (ASF) xuất hiện lần đầu tại Châu Phi vào năm 1921 và nhanh chóng lan rộng ra Châu Âu, Trung và Nam Mỹ, gần đây đã xuất hiện tại Trung Quốc, Việt Nam, Mông Cổ, Campuchia, Lào và Hàn Quốc, trở thành mối đe dọa nghiêm trọng cho ngành chăn nuôi heo và kinh tế xã hội Việt Nam Từ năm 2019, các nghiên cứu cho thấy heo nhiễm ASF có triệu chứng đặc trưng như sốt cao, bỏ ăn, nôn ói và xuất huyết nghiêm trọng Nghiên cứu tại miền Bắc Việt Nam xác định rằng virus ASFV lưu hành thuộc kiểu gene II và kiểu huyết thanh 8, đồng thời ghi nhận sự hiện diện của chủng tái tổ hợp giữa kiểu gene I và II Hiện tại, vaccine phòng bệnh ASF đang trong giai đoạn đầu sử dụng thực địa, nhưng đối tượng tiêm còn hạn chế Theo thống kê, từ năm 2019, bệnh ASF đã xảy ra tại 8.527 xã thuộc 667 huyện, dẫn đến việc tiêu hủy gần 6 triệu con heo Tính đến tháng 10 năm 2024, cả nước ghi nhận 1.138 ổ dịch tại 47 tỉnh/thành phố, buộc tiêu hủy 69.095 con heo.
Tại Đồng bằng sông Cửu Long, ổ dịch bệnh ASF lần đầu tiên được phát hiện ở tỉnh Hậu Giang vào ngày 09/04/2019, và sau đó, bệnh đã lây lan nhanh chóng trong khu vực.
Sau thời gian dài chịu thiệt hại do dịch tả lợn châu Phi (ASF), nhiều cơ sở chăn nuôi tại 13 tỉnh/thành thuộc khu vực ĐBSCL đang thận trọng trong việc tái đàn Chi phí đầu tư lớn cùng với tâm lý lo ngại về khả năng dịch bệnh quay trở lại, đặc biệt khi vaccine phòng bệnh chưa đạt hiệu quả cao, khiến họ chần chừ trong quyết định phục hồi sản xuất.
Nghiên cứu và đề xuất hệ thống tiêu chí giám sát ASFV là rất quan trọng để kiểm soát dịch bệnh ASF tại địa phương Cần hiểu rõ các tiêu chí phù hợp với điều kiện dịch tễ như thời gian, khu vực có nguy cơ cao, và sự phối hợp giữa các tổ chức liên quan để tìm ra biện pháp phòng chống hiệu quả, giảm thiểu thiệt hại Tại ĐBSCL, một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng khoảng cách dưới 1 km đến đường giao thông chính, nguồn thức ăn và con giống từ bên ngoài, cùng với sự gần gũi với chợ và các trại chăn nuôi có dịch bệnh là những yếu tố làm tăng nguy cơ nhiễm bệnh ASF Tuy nhiên, vẫn chưa có nghiên cứu hệ thống về đặc điểm dịch tễ, bệnh lý và di truyền của virus ASF tại khu vực này Do đó, việc nghiên cứu đặc điểm dịch tễ và xác định chủng ASFV lưu hành tại các tỉnh ĐBSCL là cấp thiết để tìm ra các biện pháp phòng chống hiệu quả, giảm thiểu thiệt hại do bệnh ASF gây ra.
Châu Phi tại một số tỉnh Đồng bằng sông Cửu Long” được thực hiện.
Những đóng góp mới về khoa học
Nghiên cứu này đánh dấu lần đầu tiên tại Việt Nam thực hiện giải trình tự toàn bộ hệ gene của virus ASFV và công bố trên Ngân hàng gene, cung cấp tư liệu khoa học quan trọng về đặc điểm di truyền và sự biến đổi của virus, hỗ trợ nghiên cứu phát triển vaccine phòng bệnh ASF trong tương lai Đồng thời, đây cũng là nghiên cứu đầu tiên tại Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL) phân tích diễn biến ổ dịch ASF một cách hệ thống từ năm 2019 đến 2022, giúp xác định sự phân bố ổ dịch và các địa phương có nguy cơ cao, từ đó nâng cao hiệu quả các chiến lược phòng, chống bệnh ASF tại khu vực này.
Kết quả và đánh giá từ nghiên cứu sẽ là nguồn tham khảo khoa học quan trọng cho việc xây dựng chương trình giám sát ASFV tại ĐBSCL Nghiên cứu đã đề xuất các tiêu chí dựa trên kết quả chương trình giám sát ASF tại Thành phố Cần Thơ giai đoạn 2019 – 2022, kết hợp với kết quả nghiên cứu của luận án Từ đó, luận án đã phát triển chương trình giám sát sự lưu hành của ASFV nhằm kiểm soát hiệu quả dịch bệnh ASF tại các tỉnh/thành ĐBSCL và Việt Nam.
Mục tiêu nghiên cứu của đề tài
Xác định một số đặc điểm dịch tễ bệnh ASF tại một số tỉnh/thành ĐBSCL giai đoạn 2019 – 2022
Bài viết này nhằm xác định các đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh Dịch tả heo Châu Phi (ASF), bao gồm triệu chứng lâm sàng, tổn thương đại thể và vi thể, tại một số tỉnh/thành thuộc Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL) Việc nghiên cứu này không chỉ giúp nâng cao nhận thức về bệnh ASF mà còn hỗ trợ trong công tác chẩn đoán và quản lý dịch bệnh hiệu quả hơn trong khu vực.
Xác định kiểu gene và kiểu huyết thanh của các chủng ASFV tại ĐBSCL là cần thiết để hiểu rõ đặc điểm di truyền của chúng Đánh giá hiệu quả và xây dựng chương trình giám sát sự lưu hành của ASFV sẽ giúp ứng phó hiệu quả với dịch bệnh ASF, bảo vệ sức khỏe động vật và đảm bảo an toàn thực phẩm trong khu vực.
Ý nghĩa khoa học của luận án
Nghiên cứu này kết hợp các phương pháp nghiên cứu cơ bản và hiện đại, với quy mô lớn và độ tin cậy cao, là nghiên cứu đầu tiên mang tính hệ thống tại 10 tỉnh/thành ĐBSCL, diễn ra từ năm 2019 đến 2022 Áp dụng phương pháp "Dịch tễ học mô tả", nghiên cứu nhằm mô tả diễn biến không gian và thời gian của các ổ dịch, từ đó rút ra những đặc điểm dịch tễ quan trọng của bệnh ASF tại ĐBSCL Ngoài ra, các đơn vị quản lý như Chi cục Chăn nuôi và Thú y có thể áp dụng kết quả nghiên cứu này kết hợp với hệ thống WAHIS của Cục Thú y, nhằm nâng cao hiệu quả trong công tác báo cáo và phòng chống bệnh ASF cũng như dịch bệnh động vật nói chung.
Nghiên cứu về dịch tễ, bệnh lý và di truyền của ASFV tại ĐBSCL sẽ cung cấp cơ sở khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo về biến đổi di truyền và đặc điểm sinh học của virus này Đề tài cũng đóng góp thông tin quan trọng cho việc xây dựng chương trình giám sát sự lưu hành của ASFV, từ đó phát triển các biện pháp phòng, chống dịch bệnh hiệu quả, góp phần vào sự phát triển bền vững của ngành chăn nuôi heo tại ĐBSCL và Việt Nam.
Luận án này thực hiện giải trình tự toàn bộ hệ gene của virus ASFV lưu hành tại Đồng bằng sông Cửu Long, mang lại một ý nghĩa khoa học sâu sắc Kết quả nghiên cứu cung cấp cái nhìn toàn diện về cấu trúc di truyền của virus, góp phần quan trọng vào việc hiểu biết và kiểm soát dịch bệnh.
4ASFV được công bố tại Việt Nam từ kết quả nghiên cứu của NCS (https://www.mdpi.com/2076-0817/11/7/797).
Nghiên cứu này, kết hợp với đánh giá chương trình giám sát ASFV tại TPCT giai đoạn 2019 – 2022, đã đề xuất các tiêu chí quan trọng nhằm xây dựng và thực hiện chương trình giám sát ASFV hiệu quả, phù hợp với điều kiện thực tế tại ĐBSCL.
Phương pháp nghiên cứu
Nội dung nghiên cứu
Nội dung 1: Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh ASF tại một số tỉnh/thành ĐBSCL giai đoạn 2019 – 2022
Nội dung 2: Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh ASF tại ĐBSCL
Nội dung 3: Xác định kiểu gene, kiểu huyết thanh và một số đặc điểm di truyền của các chủng ASFV lưu hành tại ĐBSCL
Nội dung 4: Xây dựng chương trình giám sát sự lưu hành của ASFV ứng phó dịch bệnh ASF
Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Thời gian khảo sát: Các nội dung nghiên cứu được thực hiện từ tháng 01 năm
Thời gian thực hiện đề tài: Nghiên cứu được thực hiện từ tháng 06 năm 2019 đến tháng 12 năm 2022.
3.2.2 Địa điểm nghiên cứu Địa điểm nghiên cứu: Vùng ĐBSCL bao gồm 13 tỉnh/thành Tuy nhiên, trong nghiên cứu được thực hiện tại 10 tỉnh/thành ĐBSCL bao gồm An Giang, Bạc Liêu, Cà Mau, Cần Thơ, Đồng Tháp, Hậu Giang, Kiên Giang, Sóc Trăng, Trà Vinh và Vĩnh Long (không bao gồm Tiền Giang, Long An và Bến Tre) Các tỉnh ĐBSCL trong nghiên cứu này được lựa chọn dựa theo đặc thù phân vùng của ngành về quản lý chuyên môn trong thú y và chẩn đoán, xét nghiệm bệnh động vật, sản phẩm động vật tại vùng theo quy định chức năng, nhiệm vụ, quyền hạn và cơ cấu tổ chức của của Cục Thú y, BNNPTNT. Địa điểm thu thập mẫu bệnh phẩm/DNA của ASFV: Số liệu thống kê về tình hình dịch bệnh ASF và chăn nuôi heo tại một số tỉnh/thành ĐBSCL được thu thập bằng điều tra hồi cứu tại Chi cục Thú y vùng VII và Chi cục Chăn nuôi và Thú y các tỉnh/thành ĐBSCL trong phạm vi nghiên cứu. Địa điểm thực hiện các chẩn đoán, xét nghiệm: Kỹ thuật real-time PCR phát hiện ASFV và ELISA phát hiện kháng thể kháng ASFV được thực hiện tại Chi cụcThú y Vùng VII Giải trình tự một phần đoạn gene ASFV bằng phương pháp Sanger được thực hiện tại Công ty TNHH Dịch vụ và Thương mại Nam Khoa, thành phố
Tại Công ty TNHH Khoa học KTest ở thành phố Hồ Chí Minh, Việt Nam, việc giải trình tự toàn bộ hệ gene của một số chủng ASFV đại diện đã được thực hiện bằng phương pháp giải trình tự thế hệ mới Illumina Quy trình kỹ thuật xử lý mẫu và thực hiện tiêu bản vi thể cho các mẫu bệnh phẩm của heo mắc bệnh ASF trong nghiên cứu này được tiến hành tại Bộ môn Giải phẫu Bệnh – Pháp y, Trường Đại học Y Dược Cần Thơ.
Vật liệu nghiên cứu
3.3.1 Dữ liệu dùng trong phân tích dịch tễ
Bộ số liệu thứ cấp về ổ dịch bệnh ASF, tình hình chăn nuôi heo và thông tin dịch tễ liên quan đến bệnh ASF tại các tỉnh/thành ĐBSCL cung cấp cái nhìn tổng quan về diễn biến dịch bệnh và tác động đến ngành chăn nuôi heo trong khu vực.
3.3.2 Dữ liệu dùng trong phân tích đặc điểm bệnh lý và sinh học phân tử
Phân tích đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh ASF tại ĐBSCL bao gồm việc xem xét triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể và vi thể của các thể heo được chọn đại diện ở ba tỉnh/thành phố Các triệu chứng lâm sàng thể hiện rõ ràng tình trạng sức khỏe của heo, trong khi bệnh tích đại thể và vi thể cung cấp cái nhìn sâu sắc về tổn thương tế bào và mô Việc nghiên cứu này giúp hiểu rõ hơn về sự phát triển và lây lan của bệnh ASF trong khu vực.
Phân tích đặc điểm di truyền của virus dịch tả heo châu Phi (ASFV) được thực hiện thông qua dữ liệu giải trình tự gene bằng phương pháp Sanger và công nghệ giải trình tự thế hệ mới Illumina Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích các đặc điểm di truyền của ASFV lưu hành tại các tỉnh và thành phố đại diện thuộc khu vực Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL).
3.3.3 Thiết bị và dụng cụ chính sử dụng trong nghiên cứu
Tủ đông âm sâu với nhiệt độ -20 oC và -80 oC, cùng với tủ lạnh thường từ 2 – 8 oC, là những thiết bị quan trọng trong phòng thí nghiệm Ngoài ra, tủ ấm 37 oC, bể điều nhiệt, và tủ an toàn sinh học cấp II (biosafety cabinet class II) cũng không thể thiếu Các thiết bị như máy ly tâm lạnh, máy trộn ống nghiệm (vortex mixer), máy ly tâm nhỏ (spindown), máy luân nhiệt (thermal cycler), và hệ thống real-time PCR đóng vai trò quan trọng trong các thí nghiệm sinh học phân tử Bộ điện di và hệ thống chụp hình ảnh gel điện di Analytik Jena TM, cùng với kính hiển vi quang học, máy xử lý mô, và máy cắt vi thể (Microtome) hỗ trợ trong việc phân tích mẫu Các dụng cụ như ống Eppendorf (Rnase/DNAse free), micropipette với các dung tích khác nhau, đầu tip cú lọc, cối chày sứ, và các dụng cụ thông thường như găng tay cao su, dao, kéo, và panh kẹp là cần thiết để xử lý mẫu bệnh phẩm một cách chính xác và an toàn.
3.3.4 Hóa chất và sinh phẩm chính sử dụng trong nghiên cứu
Cồn 80 o , phosphate-buffered saline (PBS), bộ kit chiết xuất QIAamp DNA MiniKit (Qiagene, Hilden, Đức), bộ kit real-time PCR Master mix Platinum ® QuantitativePCR SuperMix – UDG (Invitrogen, Anh), bộ kit PCR MyTaq TM Master Mix (Bioline,Anh), test kit INGENZIM PPA COMPAC mã số 11.PPA.K3, agarose điện di DNA,chất đệm TAE, thước chuẩn 100 bp (Bioline, Anh) và các loại hóa chất thông thường được sử dụng trong phòng thí nghiệm.
Theo nghiên cứu của Drury et al (2020), để điều chỉnh dung dịch formalin 10% về pH trung tính, cần thêm chất chống axit, chủ yếu là Natri phosphat Công thức đề xuất bao gồm: 100mL formalin (dung dịch gốc 30–40%), 900mL nước, 4g/L NaH2PO4 (monobasic), 6.5g/L Na2HPO4 (dibasic/anhydrous), cùng với parafin, xylene, và thuốc nhuộm Hematoxylin & Eosin.
Phương pháp nghiên cứu
3.4.1 Nội dung 1: Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh ASF tại một số tỉnh/thành ĐBSCL giai đoạn 2019 – 2022
Xác định một số đặc điểm dịch tễ bệnh ASF tại một số tỉnh/thành ĐBSCL giai đoạn 2019 – 2022. Đối tượng nghiên cứu:
Bộ số liệu thứ cấp ghi nhận các ổ dịch ASF xảy ra tại các tỉnh/thành ĐBSCL
Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL) bao gồm 10 tỉnh/thành: An Giang, Bạc Liêu, Cà Mau, Cần Thơ, Đồng Tháp, Hậu Giang, Kiên Giang, Sóc Trăng, Trà Vinh và Vĩnh Long Trong nghiên cứu này, "ổ dịch" được định nghĩa dựa trên các văn bản của cơ quan có thẩm quyền, cụ thể là theo quy định tại khoản 9, điều 3 và điểm b, khoản 2, Điều 26, Luật Thú y, cũng như hướng dẫn của Thông tư số 07/2016/TT-BNNPTNT Các tiêu chí xác định ổ dịch bao gồm sự xuất hiện của he
Nghiên cứu này sử dụng phương pháp điều tra hồi cứu dựa trên bảng số liệu thứ cấp về dịch bệnh ASF tại ĐBSCL trong giai đoạn 2019 – 2022, với dữ liệu được cung cấp bởi Chi cục Thú y Vùng VII và các Chi cục Chăn nuôi và Thú y địa phương Thông tin tổng hợp bao gồm tổng số ổ dịch, thời gian phát hiện và tiêu hủy, địa điểm xảy ra, cũng như số lượng lợn chết và tiêu hủy do nhiễm ASFV, được trình bày chi tiết trong Phụ lục 1 Kết quả nghiên cứu sẽ tổng hợp và thống kê tình hình dịch bệnh ASF tại các tỉnh ĐBSCL, đồng thời mô tả diễn biến các ổ dịch theo các yếu tố không gian và thời gian.
Thống kê và mô tả số tỉnh/thành, quận/huyện, xã có ghi nhận ổ dịch ASF
Thống kê, mô tả số ổ dịch và số con tiêu hủy tại một số tỉnh/thành ĐBSCL
Mô tả thời gian xảy ra ổ dịch ASF đầu tiên tại các tỉnh/thành ĐBSCL
Mô tả diễn biến số ổ dịch, xã xảy ra dịch bệnh ASF theo thời gian tại một số tỉnh/thành thuộc tỉnh ĐBSCL
Trong bài viết này, chúng tôi sẽ mô tả sự phân bố và đặc điểm dịch tễ của dịch bệnh ASF tại một số tỉnh/thành thuộc Đồng bằng sông Cửu Long trong thời gian khảo sát Nghiên cứu sẽ tập trung vào các yếu tố không gian và thời gian, nhằm cung cấp cái nhìn tổng quan về tình hình dịch bệnh, giúp các cơ quan chức năng có biện pháp phòng ngừa hiệu quả.
Lược đồ tóm tắt nội dung:
3.4.2 Nội dung 2: Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh ASF tại ĐBSCL
Bài viết tập trung vào việc xác định các đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh ASF, bao gồm triệu chứng, bệnh tích đại thể và vi thể Nghiên cứu được thực hiện tại một số tỉnh/thành thuộc Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL).
Heo được xác định nhiễm bệnh ASF tại một số tỉnh ĐBSCL (Hậu Giang, Vĩnh Long và Cần Thơ) trong thời gian nghiên cứu.
Ghi nhận thông tin ổ dịch
Để lựa chọn ổ dịch ASF cho khảo sát bệnh lý, nhóm nghiên cứu sẽ tập trung vào các ổ dịch tại Hậu Giang, Vĩnh Long và Cần Thơ, dựa trên thông tin từ Chi cục Chăn nuôi và Thú y địa phương Một ổ dịch ASF được xác định khi có heo trong đàn biểu hiện triệu chứng bệnh và các mẫu xét nghiệm được lấy để kiểm tra bệnh ASF, CSF, PRRS và Porcine Circovirus type 2 (PCV2) Kết quả xét nghiệm phải khẳng định âm tính với CSF, PRRS, PCV2 và dương tính với ASFV thông qua phương pháp real-time PCR.
Tiêu chí lựa chọn cá thể heo cho khảo sát bệnh lý bao gồm những con heo còn sống, biểu hiện triệu chứng và bệnh tích rõ ràng của bệnh dịch tả heo châu Phi (ASF), cùng với kết quả xét nghiệm dương tính với virus ASF (ASFV) thông qua phương pháp real-time PCR.
Vào ngày 20 tháng 8 năm 2022, 47 trong số 52 con heo tại một trang trại ở tỉnh Hậu Giang đã bị tiêu hủy hoặc chết Trong 6 ngày đầu, công nhân phát hiện một số heo có triệu chứng và chết Một con heo có biểu hiện lâm sàng nhẹ đã được chọn để thực hiện xét nghiệm real-time PCR, cho kết quả dương tính với ASFV Các triệu chứng và mổ khám đã được ghi nhận để nghiên cứu đặc điểm bệnh lý.
Vào ngày 28 tháng 12 năm 2022, tại một cơ sở chăn nuôi ở tỉnh Vĩnh Long, heo đã xuất hiện dấu hiệu lâm sàng với nhiều con có biểu hiện sốt cao từ 41°C đến 42°C Ngày 29 tháng 12, một số heo khác trong cùng cơ sở được ghi nhận bỏ ăn, xuất huyết ở hậu môn và có 3 trường hợp tử vong Chỉ hai ngày sau, dịch bệnh bùng phát với số lượng heo có triệu chứng bệnh tăng lên và được báo cáo cho cán bộ thú y khu vực Một con heo có triệu chứng lâm sàng trung bình đã được chọn để xét nghiệm khẳng định bằng real-time PCR, cho kết quả dương tính với ASFV, trước khi ghi nhận các triệu chứng và tiến hành mổ khám để nghiên cứu đặc điểm bệnh lý.
Vào ngày 20 tháng 11 năm 2022, một trang trại tại TPCT với 18 con heo bị nghi ngờ nhiễm bệnh ASF Những con heo đầu tiên có triệu chứng ủ rũ, sốt cao, xuất huyết mũi và đi phân bón màng nhày Sau một tuần, 4 con heo đã chết sau khi xuất hiện triệu chứng lâm sàng ngắn, chủ yếu là nôn mửa Trong trường hợp này, những con heo có triệu chứng nặng được chọn để khảo sát Quá trình khảo sát được thực hiện tương tự như hai trường hợp trước nhằm xác định đặc điểm bệnh lý của heo tại TPCT.
Thông tin về các ổ dịch được trình bày trong Bảng 3.1, bao gồm ngày phát hiện bệnh, tiến triển theo thời gian, và các triệu chứng bệnh tích đặc trưng trên heo nhiễm bệnh so với heo khỏe Phiếu ghi nhận thông tin, biểu hiện lâm sàng, bệnh tích và yêu cầu xét nghiệm cho ba trường hợp này có trong Phụ lục 2.
Bảng 3.1: Thông tin về ổ dịch thực hiện nghiên cứu về đặc điểm bệnh lý của heo nhiễm bệnh tại ĐBSCL
Trường hợp Tỉnh/thành phố
Năm Tổng đàn Ngày phát hiện
Ngày lấy mẫu Số heo chết
Quan sát, ghi nhận bệnh tích đại thể
Trước khi tiến hành mổ khám, cần ghi nhận và lưu hình ảnh các triệu chứng bên ngoài của heo nhiễm bệnh ở nhiều vị trí như toàn thân, tai, mũi, mõm, bẹn chân trước và chân sau, mặt bụng và hậu môn Sau đó, đánh giá và phân loại bệnh tích trên các cơ quan như gan, lách, và thận dựa vào hình dáng, màu sắc, thể chất và mức độ lan rộng của bệnh tích Tiếp theo, lấy từng cơ quan nội tạng ra khỏi xoang cơ thể, ghi nhận hình ảnh và mô tả bệnh tích đại thể, đồng thời cắt mẫu để làm tiêu bản vi thể Quy trình mổ khám này nhằm kiểm tra các biến đổi bệnh lý đại thể theo Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8402:2010.
Hình 3.1: Vị trí quan sát, ghi nhận các bệnh tích bên ngoài của heo nhiễm bệnh ASF
Theo TCVN 8400-41:2019, việc ghi nhận hình ảnh và đặc điểm bệnh tích của heo nhiễm bệnh dịch tả heo Châu Phi (ASF) là rất quan trọng Cần thực hiện quan sát và kiểm tra dựa vào các triệu chứng lâm sàng để xác định tình trạng sức khỏe của heo nhiễm bệnh ASF.
Xoang ngực: Xuất huyết hoặc tích nước xoang ngực, màng bao tim
Xoang bụng: Xuất huyết hoặc tích nước xoang bụng
Phổi: Viêm, có nhiều chất bã đậu, màng phổi viêm dính sườn
Thận: Xuất huyết, bể thận ứ máu
Lách: Sưng, dễ vỡ, đỏ sậm hoặc đen
Hạch: Mang tai và amidan
Thực hiện tiêu bản vi thể và đọc kết quả
Quy trình làm tiêu bản mô học theo hướng dẫn của Bộ môn Giải phẫu Bệnh – Pháp y, Trường Đại học Y Dược Cần Thơ, bắt đầu bằng việc lấy mẫu bệnh phẩm từ các cơ quan nội tạng như hạch, lá lách, thận, tim phổi, gan, ruột, và dạ dày Các mẫu này được ngâm trong dung dịch formol 10% từ 24 đến 48 giờ, sau đó cắt thành các mảnh nhỏ kích thước 1cm × 0,5cm × 0,3cm và cho vào khay cassette Tiếp theo, mẫu tiếp tục được cố định trong dung dịch formol cho đến khi chuyển đổi hoàn toàn, sau đó được xử lý qua hệ thống cồn và xylene, và cuối cùng nhúng vào paraffin để tạo thành khối Mảnh mẫu được cắt mỏng với độ dày 3µm và nhuộm bằng Hematoxylin và Eosin (HE) để quan sát tổn thương vi thể dưới kính hiển vi quang học Quy trình chi tiết được trình bày ở Phụ lục 3.
Triệu chứng lâm sàng của heo nhiễm bệnh ASF
Bệnh tích đại thể của heo nhiễm bệnh ASF
Bệnh tích vi thể của heo nhiễm bệnh ASF
So sánh sự thay đổi về đặc điểm triệu chứng, bệnh tích đại thể và vi thể so với mẫu cơ quan được lấy trên heo khỏe mạnh.
Lược đồ tóm tắt nội dung :
3.4.3 Nội dung 3: Xác định kiểu gene, kiểu huyết thanh và một số đặc điểm di truyền của các chủng ASFV lưu hành tại ĐBSCL
Xác định kiểu gene, kiểu huyết thanh và một số đặc điểm di truyền của các chủng ASFV lưu hành tại một số tỉnh/thành thuộc ĐBSCL.
Giải trình tự và phân tích toàn bộ hệ gene của các chủng ASFV đại diện cho những biến thể đang lưu hành tại một số tỉnh/thành thuộc Đồng bằng sông Cửu Long là nội dung nghiên cứu chính Nghiên cứu này nhằm cung cấp cái nhìn sâu sắc về sự đa dạng di truyền của virus, từ đó hỗ trợ công tác phòng chống dịch bệnh hiệu quả hơn.
Các mẫu DNA dương tính với ASFV, được xác định qua phản ứng real-time PCR tại Chi cục Thú y Vùng VII, có giá trị Ct < 30, cho thấy tải lượng virus cao Những mẫu DNA này được chiết xuất từ bệnh phẩm thu thập từ các ổ dịch tại một số tỉnh/thành thuộc ĐBSCL và từ chương trình giám sát dịch bệnh ASF trong khu vực này.
Thu thập DNA các mẫu đại diện cho các tỉnh/thành
Xử lý số liệu
Số liệu dịch tễ được tổng hợp và phân tích bằng phần mềm Microsoft Excel 2010, trong khi dịch tễ học không gian các ổ dịch tại các tỉnh khảo sát được thực hiện trên phần mềm QGIS phiên bản 3.18 Phần mềm R phiên bản 4.3.1 được sử dụng để xử lý thống kê, vẽ hình và phân tích tin sinh học trong nghiên cứu di truyền Để thể hiện đa hình bộ gene giữa các chủng khảo sát tại khu vực ĐBSCL so với chủng tham chiếu Georgia 2007/1 (Genbank NC_044959.2), phần mềm Geneious Prime 4.2.2 được áp dụng.
Phần mềm Genetyx phiên bản 10.1 hỗ trợ kiểm tra tín hiệu giải trình tự Sanger theo phương pháp thủ công, đồng thời thực hiện xử lý, căn chỉnh và đánh giá mức độ tương đồng với các trình tự có sẵn Bên cạnh đó, phần mềm Bioedit phiên bản 7.2.6.1 chuyên dùng để căn chỉnh và so sánh dữ liệu trình tự sinh học trên các vùng trình tự, trong khi phần mềm MEGA cũng đóng vai trò quan trọng trong phân tích dữ liệu sinh học.
7.0 được sử dụng để xây dựng cây di truyền phát sinh loài từ đó xác định kiểu gene và kiểu huyết thanh của các chủng lưu hành Phương pháp so sánh thẳng hàng MAFFT được sử dụng để thực hiện căn chỉnh các trình tự hệ gene nghiên cứu trong luận án.