nghiên cứu ảnh hưởng của cao chiết và vi bao cao chiết lá ổi rừng đến chất lượng sản phẩm bánh bao hấp

Tên khóa luận: Nghiên cứu ảnh hưởng của cao chiết và vi bao cao chiết lá ổi rừng đếnchất lượng sản phẩm bánh bao hấp.2.. Nhiệm vụ của khóa luận:- Tạo ra dòng sản phẩm bánh bao hấp bổ sun

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH

KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC VÀ THỰC PHẨM

BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

Họ và tên sinh viên: Lý Tự Cơ MSSV: 20116016

Ngành: Công nghệ thực phẩm

1 Tên khóa luận: Nghiên cứu ảnh hưởng của cao chiết và vi bao cao chiết lá ổi rừng đến

chất lượng sản phẩm bánh bao hấp

2 Nhiệm vụ của khóa luận:

- Tạo ra dòng sản phẩm bánh bao hấp bổ sung cao chiết và vi bao cao chiết từ lá ổi rừng đến đối tượng người mắc bệnh đái tháo đường, người có hàm lượng đường trong máu cao, người béo phì, vàng da, suy hô hấp,…

- Xác định sự biến đổi tính chất hóa lý, thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của sản phẩm bánh bao hấp bổ sung cao chiết và vi bao cao chiết từ lá ổi rừng

3 Ngày giao nhiệm vụ đồ án:

4 Ngày hoàn thành đồ án:

5 Họ và tên giảng viên hướng dẫn: GVC Ths Đặng Thị Ngọc Dung

Phần hướng dẫn: Toàn bộ khóa luận

Nội dung và yêu cầu khóa luận tốt nghiệp đã được thông qua bởi

Trưởng Bộ môn Công nghệ Thực phẩm

Tp Hồ Chí Minh, ngày , tháng , năm 2024

Trưởng Bộ môn Giảng viên hướng dẫn

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH

KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC VÀ THỰC PHẨM

BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

-🙞🙞🙞🙞🙞 -KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT VÀ

VI BAO CAO CHIẾT LÁ ỔI RỪNG ĐẾN CHẤT LƯỢNG SẢN

PHẨM BÁNH BAO HẤP

TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2024

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH

KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC VÀ THỰC PHẨM

BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM

-🙞🙞🙞🙞🙞 -KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT VÀ

VI BAO CAO CHIẾT LÁ ỔI RỪNG ĐẾN CHẤT LƯỢNG SẢN

PHẨM BÁNH BAO HẤP

TP Hồ Chí Minh, tháng năm 2024

LỜI CẢM ƠN

Lời đầu tiên, chúng em xin chân thành cảm ơn các quý thầy cô trường Đại học Sư Phạm Kỹ Thuật TP.HCM, xin cảm ơn các quý thầy cô khoa trong khoa Công nghệ Hóa học và Thực phẩm, đặc biệt là các thầy cô trong bộ môn Công nghệ Thực Phẩm đã truyền đạt cho chúng em những kiến thức cũng như những kỹ năng quý giá trong suốt 4 năm học vừa qua để có thể hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp, chuẩn bị hành trang cho tương lai Đặc biệt, chúng em xin phép gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Đặng Thị Ngọc Dung-Giảng viên Bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại học Sư Phạm Kỹ Thuật TP.HCM Cảm ơn cô đã luôn nhiệt tình hỗ trợ, chỉ bảo, truyền đạt cho chúng em những kiến thức, kinh nghiệm để có thể hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp này

Chúng em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến cô Hồ Thị Thu Trang – chuyên viên phòng thí nghiệm bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm, cũng như tất cả các thầy cô khoa Công nghệ Hóa Học và Thực Phẩm, đã tạo mọi điều kiện thuận lợi để chúng em có thể sử dụng các thiết bị, dụng cụ và cơ sở vật chất phục vụ cho mục đích thực hiện đồ án

Vì kiến thức chuyên môn và kinh nghiệm thực tiễn của chúng em còn hạn chế nên trong quá trình thực hiện khóa luận không tránh khỏi những sai sót Chúng em rất mong nhận được sự góp ý của quý thầy cô để bài báo cáo này được hoàn thiện hơn

Chúng em xin chân thành cảm ơn!

LỜI CAM ĐOAN

Đề tài nghiên cứu này được thực hiện dưới sự định hướng, hỗ trợ kinh phí và hướng dẫn thực hiện bởi GVC ThS Đặng Thị Ngọc Dung

Chúng em xin cam đoan toàn bộ nội dung được trình bày trong Khóa luận Tốt nghiệp

là của riêng chúng em Chúng em xin cam đoan tất cả các nội dung được tham khảo trong khóa luận tốt nghiệp này được trích dẫn đầy đủ và chấp hành theo đúng quy định

TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2024

Sinh viên thực hiện

Lý Tự Cơ

Trương Xài Khị

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA NGƯỜI HƯỚNG DẪN

Điểm số: TP.HCM, ngày tháng năm …

GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN

(Ký và ghi rõ họ tên)

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA NGƯỜI PHẢN BIỆN

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA HỘI ĐỒNG XÉT BẢO VỆ

KHÓA LUẬN

Đề cương chi tiết NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

LỜI CẢM ƠN

LỜI CAM ĐOAN

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA NGƯỜI HƯỚNG DẪN

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA NGƯỜI PHẢN BIỆN

PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỦA HỘI ĐỒNG XÉT BẢO VỆ KHÓA LUẬN

DANH MỤC HÌNH

DANH MỤC BẢNG

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

TÓM TẮT KHÓA LUẬN

CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Bệnh đái tháo đường là sự rối loạn chuyển hóa carbohydrate do hormon insulin của tuyến tụy

bị thiếu hay giảm tác động trong cơ thể, nồng độ trong máu vượt quá ngưỡng chính là biểu hiện của bệnh (Bùi Tấn An và cộng sự, 2012) Có hai dạng đái tháo đường đó là đái tháo đường type

1 chiếm 10% và type 2 chiếm 90% Bệnh đái tháo đường type 1 không sản xuất insulin do tế bào

T mất khả năng dung thứ với kháng nguyên của tế bào β, từ đó tế bào T sẽ tấn công vào tế bào β, gây ra việc tăng lượng đường trong máu (Erika F Brutsaert, 2022) Bệnh đái tháo đường type 2

là một bệnh mãn tính có thể gây ra nhiều biến chứng nguy hiểm liên quan đến các bệnh về thần kinh, thận, gan, võng mạc, tim mạch ( Sales et al, 2012) Bệnh đái tháo đường type 2 đặc trưng bởi sự tăng glucose huyết, rối loạn chuyển hóa carbohydrat, protein và lipid do suy giảm bài tiết insulin (Kuzuyaa et al, 2002)

Bệnh đái tháo đường type 2 hiện nay được công nhận là bệnh “đại dịch” của thế kỷ 21, hàng trăm triệu người trên toàn thế giới đã bị ảnh hưởng bởi bệnh này Liên đoàn Đái tháo đường Quốc tế (IDF) thống kê rằng vào năm 2018: Trên thế giới có khoảng 425 triệu người trong độ tuổi 20-79 mắc bệnh đái tháo đường trong đó có trên 90% mắc đái tháo đường type 2 và có xu hướng ngày càng tăng ( International Diabetes Federat, 2018) Theo thống kê trong 10 năm qua tại Việt Nam ở bệnh viện nội tiết Trung ương: Số người mắc bệnh đái tháo đường ở nước ta tăng 211% từ 2,7 % dân số năm 2002 lên 5,7 % dân số năm 2012, Việt Nam nằm trong số quốc gia có tốc độ tăng người bệnh đái tháo đường cao nhất thế giới ( Bệnh viện Nội tiết Trung Ương, 2012) Theo ước tính của Liên đoàn Đái tháo đường Quốc tế (IDF) năm 2018, Việt Nam có khoảng 3,53 triệu người đang chung sống với bệnh đái tháo đường, theo dự đoán đến năm 2045, nước ta sẽ có tới 6,3 triệu người mắc căn bệnh này, tăng xấp xỉ 79% ( Gul, 2015)

1.2 Mục tiêu nghiên cứu

1.3 Nội dung nghiên cứu

1.4 Ý nghĩa khoa học, thực tiễn của đề tài

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN

2.1 Tổng quan về bánh bao

2.1.1 Định nghĩa về bánh bao

2.1.2 Phân loại bánh bao

2.1.3 Lịch sử hình thành

2.1.4 Lợi ích của bánh bao

2.2 Tổng quan về cây ổi và lá ổi

2.2.1 Tổng quan về cây ổi

2.2.1.1 Nguồn gốc

2.2.1.2 Đặc điểm hình thái

2.2.1.3 Thành phần hóa học

2.2.2 Tổng quan về lá ổi

2.2.2.1 Thành phần hóa học và dinh dưỡng

2.2.2.2 Công dụng của lá ổi

2.3 Tổng quan về nguyên liệu

2.4 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

2.4.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

2.4.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước

CHƯƠNG 3: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Nguyên liệu, hóa chất và thiết bị sử dụng

3.1.1 Nguyên liệu

3.1.2 Hóa chất sử dụng

3.1.3 Thiết bị sử dụng

3.2 Phương pháp nghiên cứu

3.2.1 Sơ đồ nghiên cứu

3.2.2 Quy trình sản xuất bánh bao bổ sung cao chiết/ vi bao cao chiết là ổi rừng

3.2.2.1 Quy trình sản xuất

3.2.2.2 Thuyết minh quy trình sản xuất

3.3 Nội dung nghiên cứu

3.3.1 Khảo sát sự ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến các tính chất của bột nhào bánh bao

3.3.2 Khảo sát sự ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến chất lượng bánh bao 3.3.3 Khảo sát sự ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến khả năng kháng oxy hóa của bánh bao

3.3.4 Khảo sát sự ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến bánh bao trong mô phỏng tiêu hóa in-vitro

3.3.5 Đánh giá chất lượng bánh bao bổ sung cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng

3.4 Phương pháp phân tích

3.4.1 Phương pháp xác định hàm lượng TPC

3.4.2 Phương pháp xác định hàm lượng TFC

3.4.3 Phương pháp đo khả năng thu nhặt gốc tự do ABTS

3.4.4 Phương pháp đo kháng a- amylase

3.4.5 Phương pháp phân tích cấu trúc

3.4.6 Phương pháp đo màu

3.4.7 Đánh giá cảm quan

CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

4.1 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến các tính chất của bột nhào bánh bao

4.1.1 Kết quả kháo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến độ ẩm bột nhào 4.1.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến kết cấu của bột nhào

4.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến chất lượng bánh bao

4.2.1 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến thành phần dinh dưỡng của bánh bao

4.2.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến cấu trúc của bánh bao

4.3 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến khả năng kháng oxy hóa của bánh bao

4.4 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến bánh bao trong mô phỏng tiêu hóa in-vitro

4.5 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của cao chiết/ vi bao cao chiết lá ổi rừng đến đánh giá cảm quan bánh bao

CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ

5.1 Kết luận

5.2 Kiến nghị

2.1 Nghiên cứu sự biến đổi thành phần hóa học của sản phẩm bánh bao hấp có bổ sung cao chiết/ vi bao cao chiết từ lá ổi rừng.

Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của tỉ lệ bổ sung cao chiết/ vi bao cao chiết từ lá ổi

rừng đến sản phẩm bánh bao hấp

Mẫu

Thông số

Bột mì đa dụng

(g)

220 220 220 220 220 220

Đường (g) 60 60 60 60 60 60

Sữa tươi không

đường (g)

130 130 130 130 130 130

Cao chiết (%) 0.5 0.75 1 - -

-Vi bao cao chiết

(%)

Mục đích: Xác định tỉ lệ cao chiết/ vi bao cao chiết đến sản phẩm bánh bao hấp

Thông số cần đo:

Chỉ tiêu Đơn vị Thể tích %

Phương pháp sử dụng:

+ Thể tích -> AACC 10-05 01 (AACC 2000)

+ Hàm lượng ẩm -> AACC 44-16.01 (AACC 2000)

+ Hàm lượng tro -> AACC 08-03.01 (AACC 2000)

+ Hàm lượng lipid -> theo phương pháp Soxhlet - TCVN 9936:2013 (ISO 3188:1978)

+ Hàm lượng protein -> Theo phương pháp Kjeldahl - TCVN 8099-1:2015 (ISO 8968 1:2014)

2.2 Nghiên cứu sự biến đổi hoạt tính sinh học của sản phẩm bánh bao hấp có bổ sung cao chiết/ vi bao cao chiết từ lá ổi rừng.

Bố trí thí nghiệm: bảng 2.1

Mục đích: Xác định tỉ lệ tối ưu đến hoạt tính sinh học của sản phẩm bánh bao hấp có bổ sung

cao chiết/ vi bao cao chiết từ lá ổi rừng

Thông số cần đo

Kháng oxy hóa (DPPH) µg/100g Kháng oxy hóa (ABTS) µg/100g Kháng α-Amylase µg/100g Kháng α-Glucosidase µg/100g

* Xử lí mẫu bổ sung cao chiết: Bánh bao được sấy trong máy sấy trong vòng 24h ở nhiệt độ 40oC (Ibrahim, et al., 2018) Sau đó bánh bao sẽ được ghiền thành bột bằng máy xay Methanol được sử dụng trong quá trình chiết xuất theo phương pháp Yu và cộng sự (2013) với một số sửa đổi

+ 2g mẫu bột thu được sau quá trình ghiền được trộn với 10ml dung môi methanol; sử dụng máy khuấy từ trong 45 phút sau đó đem đi lọc và thu được dịch chiết

* Xử lí mẫu bổ sung vi bao cao chiết:

* Cách thực hiện:

TPC:

Thí nghiệm được thực hiện dựa trên phương pháp của Nguyễn Quang Vinh và Eun (2011) được

bố trí như sau:

Bước 1: Dựng đường chuẩn gallic acid

1 ml dung dịch gallic acid được chuẩn bị với methanol ở các nồng độ lần lượt là 0.1 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 mg/ml Hút lấy 0.5mL từ dung dịch ở các nồng độ

đã pha trộn với 2.5ml thuốc thử Folin – Ciocalteu 10% (được pha loãng 10 lần) Tiếp đó thêm 2ml Na2CO3 2% và lắc đều Sau 30 phút ủ trong bóng tối, tiến hành xác định độ hấp thu bằng máy đo quang phổ UV-VIS tại λ=765nm Từ đó xây dựng được đường chuẩn và phương trình tương quan nồng độ gallic và độ hấp thu

Bước 2: Xác định độ hấp thụ của dịch chiết bánh bao

Tương tự, dựng đường chuẩn với dịch chiết banh bao, thay 0.5mL dung dịch gallic aicd bằng dịch chiết bánh bao

Tổng hàm lượng polyphenol của dịch chiết bánh bao được xác định qua giá trị tương đương với gallic aicd (gallic acid equivalents - GAE) dựa vào đường chuẩn Và được tính theo công thức nêu trên

TFC:

Thí nghiệm được thực hiện dựa trên phương pháp của Nguyễn Quang Vinh và Eun (2011) được

bố trí như sau:

Bước 1: Dựng đường chuẩn quercetin

1 ml dung dịch quercetin được chuẩn bị với methanol ở các nồng độ lần lượt là 0.1 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 mg/ml Hút lấy 0,5mL dung dịch từ các nồng độ trên tiếp đó thêm vào 2.5mL nước cất và 0.15mL NaNO2 5% Sau 5 phút, bổ sung 0.3mL AlCl3 10% Sau 6 phút bổ sung 1mL NaOH 1M và 0.55mL nước cất rồi sử dụng máy UV-VIS để đo ở

λ = 510nm Xây dựng đường chuẩn và phương trình tương quan giữa nồng độ quercetin và độ hấp thụ

Bước 2: Xác định độ hấp thụ của dịch chiết bánh bao

Độ hấp thụ của dịch mẫu được xác định tương tự như trên với 0.5mL dịch chiết bánh bao Tổng hàm lượng flavonoid được xác định giá trị tương đương với quercetin (quercetin equivalent – QE) dựa vào đường chuẩn và xác định theo công thức:

F = f × V

m ×100

Với: F là hàm lượng flavonoid tổng (mgQE/100g dịch chiết bánh bao)

f là nồng độ tương ứng với đường chuẩn quercetin (mg/mL)

V là thể tích mẫu (mL)

m là khối lượng mẫu (g)

ABTS:

Phương pháp được thực hiện dựa trên nghiên cứu của You Luo và cộng sự (2019), được

bố trí như sau:

Chuẩn bị dung dịch ABTS làm việc gồm hỗn hợp ABTS 7 mM và Kali Persulfate 2.45

mM được chuẩn bị và bảo quản 16 giờ trong bình tối Dung dịch ABTS được pha loãng với nước cất để đạt nồng độ làm việc với độ hấp thụ 0.7 ± 0,02 ở bước sóng 734 nm Cho 0.2 mL dung dịch ABTS làm việc vào ống nghiệm chứa 0.05 mL dịch chiết bánh bao Lắc đều, để phản ứng 6 phút trong bóng tối Độ hấp thụ được xác định sau 10 phút phản ứng trong bóng tối ở bước sóng

734 nm Trolox được sử dụng làm đối chứng dương Khả năng ức chế gốc tự do ABTS được tính theo mg trolox equivalent (mg TE/g chất khô) Hoạt tính kháng oxy hóa được tính theo công thức:

% Kháng oxy hóa = [(AĐC – AM)/AĐC] x 100

Với: AĐC và AM: độ hấp phụ màu của mẫu đối chứng và dịch chiết bánh bao

DPPH:

Phương pháp được thực hiện dựa trên nghiên cứu của You Luo và cộng sự (2019), được

bố trí như sau:

Chuẩn bị dung dịch làm việc bằng cách pha loãng dung dịch DPPH gốc với methanol

(0.24 g/L) để thu được độ hấp thụ 1.1 ± 0.02 ở bước sóng 515 nm.

Sau đó hút 0.1 ml dịch chiết bánh bao với 0.2 ml dung dịch DPPH sau khi pha loãng lắc đều và phản ứng ở nhiệt độ phòng trong bóng tối, sau 30 phút độ hấp thụ của dung dịch sẽ được đo ở bước sóng 515 nm Trolox được sử dụng làm chất đối chứng dương Kết quả sẽ được thể hiện hoạt tính bất hoạt gốc tự do DPPH xách định thông qua IC50 Với IC50 là nồng độ dịch chiết có khả năng dập tắt 50% gốc tự do DPPH

% Kháng oxy hóa = [(AĐC – AM)/AĐC] x 100

Với: AĐC và AM: độ hấp phụ màu của mẫu đối chứng và dịch chiết bánh bao

Kháng α-amylase:amylase:

Sử dụng phương pháp của Quang Vinh Nguyen và cộng sự (2022) như sau:

Hút 200•L của dung dịch được chuẩn bị từ dịch chiết với các nồng độ khác nhau, kết hợp với 200•L dung dịch đệm natri phosphate 0,02M (pH= 6,9 với natri clorua 0,006M) và 300•Ldung dịch α – amylase (0.5 mg/mL) được ủ ở nhiệt độ 37°C trong 10 phút Bổ sung 400

•L dung dịch tinh bột 1% trong đệm phosphate, tiếp tục ủ ở 37°C trong 20 phút Phản ứng kết thúc bằng cách bổ sung 0.2 mL dinitrosalicylic acid (DNS) làm thuốc thử màu Sau đó, dung dịch phản ứng ủ thêm 10 phút trong nước sôi và làm nguội đến nhiệt độ phòng Hỗn hợp sau đó được tiến hành đo độ hấp thụ ở λ = 540nm bằng máy đo UV-VIS

Kết quả được so sánh với mẫu kiểm chứng chỉ chứa 500 •L dung dịch đệm, 400 •L dung dịch tinh bột và 2 mL dinitrosalicylic acid Đo độ hấp thụ ở λ = 540 nm bằng máy đo UV-VIS

% ức chế (%) = [(A0 – A1)]/A0 *100

Trong đó: A0 là độ hấp thụ của mẫu đối chứng

A1 là độ hấp thụ của mẫu thí nghiệm

Kháng α-amylase:glucosidase:

Sử dụng phương pháp của Quang Vinh Nguyen và cộng sự (2022) như sau:

Hút 50•L mẫu bánh bao và 100•L dung dịch α – glucosidase được ử trong 96 giếng ở 37oC trong 10 phút Sau đó 50 •L p-nitro- phenyl-α-Dglucopyranoside 5mM có chứa đệm phosphate 0,1 M (pH 6.9) được thêm vào Tiếp đó hỗn hợp được ủ ở nhiệt độ 37oC trong 15 phút, thêm 1000 •L natri cacbonat 0,2 M để dừng phản ứng

Giá trị độ hấp thụ được ghi lại ở bước sóng 405 nm bằng máy đọc độ hấp thụ ELISA (Bio-Rad, USA) Các mẫu được hòa tan trong DMSO và tất cả các thuốc thử khác trong dung