tìm hiểu về cây Bồ Kết

Bồ kết

(Fructus Gleditsiae australis, Fabaceae)

g ộ i đầ u m ượ t tóc

ch ứ a saponin

CAM TH Ả O: chuy ể n pH

B Ồ K Ế T: thay đổ i dung môi TAM TH Ấ T: l ắ c phân b ố

Bồ kết

• Gleditsia australis, Fabaceae

B ồ k ế t kích ứ c m ạ nh niêm m ạ c, đườ ng tiêu hóa -> ko nên n ế m b ồ k ế t

• Obtain total extract by methanol under reflux

• Precipitate (kết tủa) in other solvent (acetone)

saponin tan t ố t trong methanol, ethanol

s ẽ k ế t t ủ a trong dung môi khác (acetone)

Đặ c tính

Weigh 20 g powder in

500 ml round flask

Add 150 ml ethanol 70%

extract under reflux

Filter by cotton wool into

500 ml bowl (1 ml to eppendorf for TLC)

Evaporate on water bath

to residue (cô đến cắn)

cân 20g b ộ t b ồ k ế t đ un h ồ i l ư u ethanol 70%(vì nó

là dung môi t ố i ư u chi ế t saponin t ố t)

đ un h ồ i l ư u v ớ i sinh hàn 30p

l ọ c nóng = bông cô đế n c ắ n/cô quay đế n c ắ n

Redissolve residue with

10 ml EtOH

Dropping into 250 ml beaker containing 100 ml

acetone

Wait until total precipitation

hòa v ớ i 10ml c ồ n 96/tuy ệ t đố i

nh ỏ t ừ t ừ d ị ch c ắ n đ ã pha vào becher ch ứ a s ẵ n 100ml acetone

t ủ a bông

ch ờ -> l ọ c áp su ấ t

Weigh the round filter

paper (m1)

Filter the precipitation by

Buchner funnel

Put the filter paper in the petri disk, dry at 40 °C

for 30 minutes

Weigh again and caculate the extraction yield

(hiệu suất)

Lost of drying (1 g)

cân gi ấ y l ọ c l ọ c áp su ấ t + r ừ a 3 l ầ n

30ml acetone/l ầ n

s ấ y c ả gi ấ y l ọ c cân l ạ i -> thu đ c m2

cân s ấ y ẩ m

0.5g c ắ n +

• Plate: Silica gel F254 10×2,5 cm (Merck)

• Mobile phase: n-Butanol – water – Acid acetic (4:5:1, upper layer) x5

• Test sample (prepare in Eppendorf):

⚬ Crude saponin (0.1 g) in 1 ml MeOH

⚬ Total extract

• Develop for the length of 8.5 cm

• Visualize: soak with 10 % H2SO4/ EtOH, dry and heat at 110 °C

Compare the crude saponin and

total extract by TLC

CH Ấ M SKLM -> để kt xem thu đ c j và lo ạ i đ c nh ữ ng j

d ị ch ban đầ u

d ị ch th ử

H Ệ NÀY CH Ạ Y R Ấ T CH Ậ M

h ệ tách l ớ p -> l ắ c bình l ắ ng

g ạ n -> b ỏ l ớ p n ướ c

d ướ i, l ấ y l ớ p trên

saponin toàn ph ầ n

d ị ch chi ế t:

=Rf

saponin

ch ấ t kém phân

c ự c

ả ứ ạ ọ

• Dissolve about 0.1 g of crude saponin into water

• Shake well (30 times)

• Estimate the foam test (15, 30, 60 minutes)

Nh ữ ng ph ả n ứ ng đị nh tính saponin

• Inorganic acid: diluted HCl, H2SO4

ascorbic acid

Products: aglycone and sugars

để đị nh tính khung genin -> c ắ t lk glycosid đ i = cách

th ủ y phân saponin glycoside

To 0.1 g of crude saponin

to the 150 ml erlene

Add 10 ml of 10% HCl, heat in water bath for 30 minutes under reflux

Cool down the hydrolysis solution, place into separation funnel

Add 10 ml of CHCl3,

shake well

0,1g saponin thô vào erlen 10ml HCl 10% trong n ướ c 30p

-> th ủ y phân đườ ng và aglycone

đườ ng tan trong n ướ c aglycone tan t ố t trong chloroform

để ngu ộ i -> vào bình l ắ ng g ạ n -> thêm 10ml chloroform -> l ắ c

chloroform

Lower layer CHCl3

to the bowl

Evaporate to the residue

on water bath

Dissolve residue to 2 ml CHCl3 và 2 ml Ac2CO, transfer to a dry test

tube

Add 2 ml H2SO4

Compare with total

extract (review p28)

0.5 g powder + 5 ml EtOH

l ấ y d ị ch chloroform vào chén s ứ -> cô đế n c ắ n

b ỏ vào t ủ hút

quan sát màu l ớ p trên l ớ p d ướ i