Nghiên cứu đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống các loài địa lan bản địa khu vực miền núi phía bắc việt nam

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LƯƠNG THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÁC LOÀI ĐỊA LAN BẢN ĐỊA KHU VỰC MIỀN NÚI PHÍA BẮC VIỆT NAM LUẬN VĂN TH

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LƯƠNG THỊ HUYỀN

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÁC LOÀI ĐỊA LAN BẢN ĐỊA KHU VỰC MIỀN NÚI PHÍA BẮC VIỆT NAM

LUẬN VĂN THẠC SĨ LÂM NGHIỆP

Thái Nguyên, 2023

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LƯƠNG THỊ HUYỀN

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÁC LOÀI ĐỊA LAN BẢN ĐỊA KHU VỰC MIỀN NÚI PHÍA BẮC VIỆT NAM

Ngành: Lâm học

Mã số: 8 62 02 01

LUẬN VĂN THẠC SĨ LÂM NGHIỆP

Người hướng dẫn khoa học: 1 TS NGUYỄN TUẤN HÙNG

2 Th.S NGUYỄN THỊ TÌNH

Thái Nguyên, 2023

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan rằng:

Số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là hoàn toàn trung thực

và chưa từng được sử dụng hoặc công bố trong bất kì công trình nào khác

Mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã được cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được ghi rõ nguồn gốc

Thái Nguyên, Ngày… tháng…năm 2023

LỜI CẢM ƠN

Tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn đến các giảng viên trong khoa Lâm nghiệp tại Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên, người đã hỗ trợ và hướng dẫn tận tâm trong quá trình học tập và nghiên cứu để hoàn thành luận văn tốt nghiệp của tôi Đặc biệt, tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Tuấn Hùng

và ThS Nguyễn Thị Tình, người đã dành nhiều thời gian và tâm huyết để hướng dẫn và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình thực hiện nghiên cứu đề tài

và hoàn thiện luận văn Thạc sĩ của mình

Cuối cùng, tôi muốn bày tỏ lòng biết ơn đến gia đình và bạn bè, người đã luôn động viên, khích lệ, chia sẻ và hỗ trợ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu Trong quá trình này, không tránh khỏi những thiếu sót, do đó, tôi rất mong nhận được sự đóng góp ý kiến của các giảng viên để làm cho luận văn

của tôi trở nên hoàn thiện hơn Một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn!

Thái Nguyên, ngày tháng năm 2023

Tác giả luận văn

Lương Thị Huyền

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT v

DANH MỤC BẢNG vi

DANH MỤC HÌNH ẢNH viii

TRÍCH YẾU LUẬN VĂN ix

THESIS ABSTRACT xi

MỞ ĐẦU 1

1 Đặt vấn đề 1

2 Mục tiêu nghiên cứu 2

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn 2

3.1 Ý nghĩa khoa học 2

3.2 Ý nghĩa thực tiễn 3

4 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 3

4.1 Đối tượng nghiên cứu 3

4.2 Phạm vi nghiên cứu 3

5 Những đóng góp mới của luận văn 3

CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI 4

1.1 Giới thiệu chung về hoa lan 4

1.1.1 Đặc điểm thực vật học, phân loại và phân bố của chi địa lan kiếm bản địa 4

1.1.2 Phân loại và phân bố các loài lan kiếm ở miền núi phía bắc 7

1.1.3 Giá trị, thực trạng khai thác địa lan kiếm 10

1.2.1 Nghiên cứu về đặc điểm hình thái 15

1.2.2.Nghiên cứu nhân giống 15

1.3 Các kết luận qua phân tích tổng quan 25

CHƯƠNG 2

NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27

2.1 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 27

2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 27

2.2.2 Phạm vi nghiên cứu 27

2.3 Phương pháp nghiên cứu 28

2.3.1 Phương pháp kế thừa 28

2.3.2 Phương pháp điều tra, thu thập bổ sung mẫu giống địa lan 28

2.3.3 Đánh giá đặc điểm nông sinh học của loài địa lan kiếm bản địa 28

2.3.4 Phương pháp nhân giống 2 loài Kiếm Trắng Thái Nguyên và Bạch ngọc đuôi công bằng phương pháp tách chồi 29

2.4 Phương pháp phân tích số liệu 33

Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34

3.1 Đánh giá đặc điểm sinh học của hai loài lan địa lan kiếm khu vực miền núi

phía Bắc 34

3.1.1 Kết quả thu thập mẫu địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên và kiếm Bạch ngọc đuôi công khu vực miền núi phía Bắc 34

3.1.2 Đánh giá đặc điểm sinh học của hai loài địa lan kiếm khu vực miền núi phía Bắc 36

3.2 Kết quả nghiên cứu khả năng nhân giống của hai loài địa lan kiếm bằng phương pháp truyền thồng (tách mầm) 41

3.2.1 Nghiên cứu khả năng nhân giống của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên bằng phương pháp tách mầm 41

3.2.2 Nghiên cứu khả năng nhân giống của địa lan kiếm Bạch Ngọc đuôi công bằng phương pháp tách mầm 52

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 63

1 Kết Luận 63

2 Kiến nghị 64

PHỤ LỤC 77

DANH MỤC BẢNG

Bảng 3.1: Kết quả thu thập mẫu địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái

Nguyên và Bạch ngọc đuôi công tại khu vực miền núi phía Bắc 34 Bảng 3.2 Một số đặc điểm về hình thái địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên và địa lan kiếm Bạch ngọc đuôi công 36 Bảng 3.3 Ảnh hưởng của giá thể đến khả năng đẻ nhánh của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên bằng phương pháp tách mầm/chồi 42 Bảng 3.4 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều cao nhánh mới của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên bằng phương pháp tách chồi/thân 43 Bảng 3.5 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều dài lá của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên 45 Bảng 3.6 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều rộng lá mới của địa lan Kiếm

Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên 46 Bảng 3.7 Ảnh hưởng của phân bón đến khả năng đẻ nhánh của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên bằng phương pháp tách mầm/chồi 48 Bảng 3.8 Ảnh hưởng của phân bón đến khả năng sinh trưởng của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên 49 Bảng 3.9 Ảnh hưởng của phân bón đến chiều dài lá địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên 51 Bảng 3.10 Ảnh hưởng của phân bón đến chiều rộng lá địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên 52 Bảng 3.11 Ảnh hưởng của giá thể đến khả năng đẻ nhánh của địa lan Kiếm Bạch ngọc đuôi công bằng phương pháp tách mầm 53 Bảng 3.12 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều cao nhánh mới của địa lan Kiếm Bạch ngọc đuôi công bằng phương pháp tách mầm 54

Bảng 3.13 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều rộng lá của địa lan Kiếm Bạch

Ngọc đuôi công 55

Bảng 3.14 Ảnh hưởng của giá thể đến chiều dài lá của địa lan kiếm

Bạch ngọc đuôi công 56

Bảng 3.15 Ảnh hưởng của phân bón đến khả năng đẻ nhánh của địa lan

Kiếm Bạch ngọc đuôi công 58

Bảng 3.16 Ảnh hưởng của phân bón đến khả năng sinh trưởng của

Bạch ngọc đuôi công 59

Bảng 3.17 Ảnh hưởng của phân bón đến chiều rộng lá địa lan Kiếm Bạch ngọc đuôi công 60

Bảng 3.18 Ảnh hưởng của phân bón đến chiều dài lá địa lan Kiếm Bạch

ngọc đuôi công 61

TRÍCH YẾU LUẬN VĂN

Tên tác giả luận văn: LƯƠNG THỊ HUYỀN

Tên luận văn: Nghiên cứu đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống

các loài địa lan bản địa khu vực miền núi phía Bắc Việt Nam

Ngành khoa học của luận văn: Lâm sinh Mã số: 8620201

Tên đơn vị đào tạo: Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên Mục đích nghiên cứu:

Đánh giá đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống 2 loài địa lan kiểm bản địa là kiếm Bạch ngọc đuôi công và địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên thời phục vụ cho công tác phân loại, bảo tồn và chọn tạo giống

Phương pháp nghiên cứu:

Đề tài đã áp dụng phương pháp điều tra, đo đếm thực địa tại địa điểm nghiên cứu Sử dụng phương pháp thông thường trong nông nghiệp kết hợp thống kê bằng Excel và IRRISTAT 5.0 để phân tích dữ liệu

Kết quả chính của đề tài:

Thu thập được 119 mầu lan Kiếm Trắng Thái Nguyên tại Thái Nguyên và Hưng Yên, 142 mẫu Kiếm Bạch ngọc đuôi công tại Cao Bằng, Bắc Kạn và Lạng Sơn Hai loài này có khả năng thích nghi với nhiều điều kiện sống khác nhau

Hành giả của địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên có hình bầu dục màu xanh vàng, đường kính 2,80 ± 0,15 Hành giả của Kiếm bạch ngọc đuôi công có màu xanh vàng, gần tròn, đường kính giả hành nhỏ, giả hành có màu xanh, đường kính 2,80 ± 0,15

Môi trường giá thể thích hợp nhất cho cây Kiếm Trắng Thái Nguyên sinh trưởng phát triển tốt là 30% vỏ thông + 10% đá nhỏ + 30% xơ dừa + 15% than củi + 15% đá thấm thủy Môi trường giá thể thích hợp nhất cho cây kiếm bạch

ngọc đuôi công sinh trưởng phát triển tốt là 30% vỏ thông + 10% đá nhỏ + 30%

xơ dừa + 15% than củi + 15% đá thấm thủy Loại phân bón phù hợp với cây Kiếm Trắng Thái Nguyên làm tăng khả năng phát triển, đẻ nhánh của cây Kiếm Trắng Thái Nguyên là phân Rapip Raiser được phun định kỳ theo hướng dẫn của nhà sản xuất Loại phân bón phù hợp với cây kiếm bạch ngọc đuôi công làm tăng khả năng phát triển, đẻ nhánh của cây kiếm bạch ngọc đuôi công là phân bón KickBack được phun định kỳ theo hướng dẫn của nhà sản xuất

THESIS ABSTRACT

Master of Science: LUONG THI HUYEN

Thesis title: Research on biological characteristics and propagation

ability of native Orchid species (Cymbidium aloifolium Species) in the mountainous region of Northern Vietnam

Major: Silviculture Code: 8620201

Educational organization: Thai Nguyen University of Agriculture and

Forestry-Thai Nguyen University

Research Objectives:

Evaluate the biological characteristics and ability to propagate two native Orchid species (Cymbidium aloifolium Species) to serve the work of classification, conservation and breeding

Materials and Method:

The thesis applied field investigation and measurement methods at the research location Using conventional methods in agriculture combined with statistics using Excel and IRRISTAT 5.0 to analyze data

Main findings and conclusions:

Collected 119 white sword orchids in Thai Nguyen and Hung Yen, 142 specimens of white jade peacock tail orchids in Cao Bang, Bac Kan and Lang Son These two species have the ability to adapt to many different living conditions

The white sword cymbidium's practitioner has a yellow-green oval shape, 2.80 ± 0.15 in diameter The peacock tail of the White Jade Sword is yellow-green in color, nearly round, the diameter of the pseudobulb is small, the pseudobulb is blue, the diameter is 2.80 ± 0.15

The most suitable substrate environment for the White Sword plant to grow well is 30% pine bark + 10% small stones + 30% coconut fiber + 15% charcoal + 15% permeable stone The most suitable substrate environment for the peacock's tail white jade sword to grow well is 30% pine bark + 10% small stones + 30% coconut fiber + 15% charcoal + 15% permeable stone The type

of fertilizer suitable for the White Sword plant that increases the growth and branching ability of the White Sword plant is Rapip Raiser fertilizer, sprayed periodically according to the manufacturer's instructions The type of fertilizer suitable for the peacock's tail white jade plant to increase the growth and branching ability of the peacock's white jade plant is KickBack fertilizer that is periodically sprayed according to the manufacturer's instructions

MỞ ĐẦU

1 Đặt vấn đề

Cây lan thuộc vào họ Orchidaceae, một họ thực vật có hoa, nằm trong

bộ Orchidales và thuộc lớp thực vật một lá mầm Đây là một trong những họ thực vật lớn với hơn 800 chi khác nhau và chúng có mặt trên toàn thế giới, trừ châu Nam Cực (Huang, Y., F Li, và CS 2010)

Chi địa lan kiếm (Cymbidium) phân bố khắp Đông Nam Á Các loài

thuộc chi địa lan kiếm thường có đặc điểm chung là hoa to và đẹp, thường sinh sống phụ thuộc vào thân cây khác hoặc trong các khe đá có mùn Được gọi là

“địa lan” do sự thích nghi này với các môi trường đặc biệt, chi địa lan kiếm hiện có khoảng 120 loài trên toàn thế giới Trong số này, có 52 loài được tìm thấy ở châu Á, và ở Việt Nam cũng có một phần quan trọng với tổng cộng 24 loài thuộc chi này (Averyanov, L V., và CS.2003; De, L C 2022)

Việt Nam thuộc vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa ẩm và có một hệ thống

đa dạng và phong phú của thảm thực vật Đất nước này là nơi tập trung nhiều loài lan rừng đẹp đẽ, thường được tìm thấy chủ yếu tại các khu vực miền núi phía Bắc, miền Trung và Tây Nguyên của Việt Nam Các loài lan kiếm ở Việt Nam đa dạng và nhiều trong số chúng có giá trị kinh tế cao, thậm chí có loài hiếm Tuy nhiên, mối đe dọa lớn nhất đối với các loài lan kiếm ở Việt Nam hiện nay là sự khai thác không kiểm soát và nạn phá rừng Điều này đã dẫn đến tình trạng tiêu diệt và biến mất nhanh chóng của nhiều loài lan kiếm khỏi môi trường sống tự nhiên của chúng Việc bảo vệ và quản lý bền vững các loài lan kiếm trở thành một ưu tiên cấp bách để bảo tồn sự đa dạng sinh học và giữ gìn

vẻ đẹp thiên nhiên của Việt Nam

Ngoài những điều kiện tự nhiên thuận lợi, địa lan kiếm ở Việt Nam đang đối diện với sự thiếu hụt nguồn gen do việc khai thác quá mức của người dân địa phương Đáng tiếc, nghiên cứu về địa lan kiếm chủ yếu tập trung vào việc

đánh giá và nhân giống một số loài lan cụ thể hoặc các loài có giá trị kinh tế Các nghiên cứu một cách có hệ thống về đặc điểm hình thái và phương pháp nhân giống ở Việt Nam chưa nhiều, nhiều loài địa lan kiếm có giá trị hiện còn đang bỏ ngỏ Chúng ta chưa tận dụng được toàn bộ tài nguyên gen quý mà thiên nhiên đã ban tặng, trong khi nguồn gen này đang đối diện với nguy cơ biến mất dần Do đó, việc xem xét kỹ về hình thái của một số loài chi địa lan kiếm cụ thể và nghiên cứu về nhân giống là một nhiệm vụ cực kỳ quan trọng để đảm bảo sự bền vững trong việc sử dụng nguồn gen địa lan kiếm địa phương trong khu vực miền núi phía Bắc Xuất phát từ thực tế trên, chúng tôi đã thực hiện

luận văn: “Nghiên cứu đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống các loài

địa lan bản địa khu vực miền núi phía Bắc Việt Nam”

2 Mục tiêu nghiên cứu

Mục tiêu của luận văn nhằm đánh giá đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống 2 loài địa lan kiểm bản địa là kiếm Bạch ngọc đuôi công và địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên thời phục vụ cho công tác phân loại, bảo tồn và chọn tạo giống

Nhân giống hai loài địa lan kiếm Bạch ngọc đuôi công và địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

3.1 Ý nghĩa khoa học

Kết quả của luận văn cung cấp thông tin khoa học có giá trị về các đặc điểm sinh học của hai loài địa lan kiếm có giá trị tại miền núi phía Bắc Việt Nam Đây là nguồn tài liệu tham khảo quý báu cho các hoạt động nghiên cứu, bảo tồn và phát triển nguồn gen địa lan kiếm trong khu vực miền núi phía Bắc Việt Nam

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

- Đánh giá việc nhân giống nguồn gen 02 loài địa lan kiếm quý, có giá trị kinh tế bằng phương pháp tách mầm/chồi góp phần bảo tồn những nguồn gen quý trước nguy cơ tuyệt chủng

- Ứng dụng kiến thức vào trong thực tiễn

- Biết về sự quan trọng của các loài thực vật quý hiếm, bao gồm cả các loài lan, là điều rất cần thiết

- Phục vụ bảo tồn, khai thác và phát triển các nguồn gen quý của một số loài địa lan

4 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu

4.1 Đối tượng nghiên cứu

Đánh giá đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống của 2 loài địa lan kiếm là Bạch ngọc đuôi công và địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên

4.2 Phạm vi nghiên cứu

Luận văn tập trung nghiên cứu đặc điểm sinh học và nhân giống địa lan kiếm Bạch ngọc đuôi công và địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên Thái Nguyên quý phục vụ công tác bảo tồn và phát triển

5 Những đóng góp mới của luận văn

- Luận văn là công trình đầu tiên nghiên cứu về đặc điểm sinh học và khả năng nhân giống của 2 loài địa lan kiếm có giá trị là Bạch ngọc đuôi công và Địa lan Kiếm Trắng Thái Nguyên bằng phương pháp truyền thống

CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU VÀ CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐỀ TÀI 1.1 Giới thiệu chung về hoa lan

Họ lan (Orchidaceae) là một họ thực vật có hoa, thuộc bộ lan (Orchidales) và lớp thực vật một lá mầm (Monocotyledoneae) Đây là một trong những họ thực vật lớn với khoảng 800 chi khác nhau, chúng phân bố trên toàn thế giới, trừ khu vực Nam Cực (Huang, Y., F Li, và CS 2010) Họ lan bao gồm nhiều chi khác nhau, trong đó có chi lan kiếm và chi lan hài Luận văn tập trung vào nghiên cứu về chi lan kiếm

Chi lan kiếm (Cymbidium) phân bố rộng rãi tại Đông Nam Á, và các loài trong chi này thường có hoa lớn, đẹp, và bền Chúng thường sống cùng với cây mục khác hoặc trên các khe đá có mùn, do đó thường được gọi là địa lan Dựa theo dữ liệu đã được công bố, chi lan kiếm trên toàn thế giới có khoảng 120 loài, trong đó có 52 loài tại châu Á và 24 loài tại Việt Nam (Averyanov, L V.,

và cs., 2003; De, L C., 2022) Các nghiên cứu gần đây về lan kiếm đã chỉ ra rằng các loài trong chi lan kiếm thường có bộ NST 2n = 2x = 40 (Chung, O., Kim, J và cs., 2022)

1.1.1 Đặc điểm thực vật học, phân loại và phân bố của chi địa lan kiếm bản địa

1.1.1.1 Phân loại

Chi lan kiếm (Cymbidium) thuộc họ lan (Orchidaceae), bộ măng tây (Asparagales), lớp thực vật một lá mầm (Monocotyledoneae), và ngành thực vật hạt kín (Mongoliophyta) Tại Việt Nam, đã được ghi nhận tồn tại 24 loài thuộc chi lan kiếm (Arif, I A., Bakir, và cs., 2010) Theo nghiên cứu của giáo

sư Trần Duy Quý, trong số 24 loài lan kiếm tại Việt Nam, có 13 loài sống cùng với cây, 5 loài thường mọc trên mặt đất hoặc bám vào đá, 5 loài có khả năng tồn tại trên cây hoặc trên đá, và có 1 loài không phát triển lá và tồn tại chủ yếu trong mùn nhờ vào hệ thống rễ phát triển mạnh (Trần Duy Quý, 2005)

1.1.1.2 Phân bố

Chi lan kiếm (Cymbidium) có sự phân bố rộng khắp trên toàn thế giới,

từ Triều Tiên, Nhật Bản, Trung Quốc, dãy núi Himalaya, Philippines, Đông Nam Á, Tân Ghi Nê cho đến Australia Các loài trong chi này thể hiện sự đa dạng và phong phú trong hình thái, thích nghi với điều kiện địa hình khác nhau Theo báo cáo, chi lan kiếm thường được tìm thấy ở độ cao từ 1500 đến 2000 mét so với mực nước biển (Brieger, F., và cs., 1971) Châu Á đóng vai trò quan trọng trong việc phân bố chi lan kiếm, với khoảng 52 loài tập trung chủ yếu ở các khu vực có khí hậu nhiệt đới và cận nhiệt đới Trong số này, Trung Quốc nổi bật với sự đa dạng vượt trội, đặc biệt là ở các thảm rừng núi của 16 tỉnh miền Trung và Nam Trung Quốc Trong lãnh thổ này, có tổng cộng 49 loài chi lan kiếm, trong đó có 19 loài độc đáo (Brieger, F., và cs., 1971)

Tại Việt Nam, các nghiên cứu điều tra đã xác định tồn tại 6 khu vực phân

bố chính cho chi lan kiếm, gồm (1) khu vực phía Tây Bắc Bộ, (2) khu vực phía Đông Bắc Bộ và trung tâm Bắc Bộ, (3) khu vực Bắc Trung Bộ, (4) khu vực Trung Bộ, (5) khu vực Tây Nguyên, và (6) khu vực Nam Trung Bộ và Nam Bộ Trong số này, chi lan kiếm chủ yếu phân bố tại vùng núi Đông Bắc và các tỉnh xung quanh như Quảng Ninh và Hưng Yên Nguyên nhân chính của phân bố này có liên quan đến các điều kiện khí hậu thích hợp, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển và sinh trưởng của các loài lan kiếm (Lưu Chấn Long, 2003)

1.1.1.3 Đặc điểm thực vật học

Lan kiếm được coi là một trong những loài lan phổ biến và hấp dẫn nhất trong họ lan, thường thu hút sự chú ý bởi vẻ đẹp tinh tế và mùi hương quyến rũ của hoa (Lal, N., và cs., 2020) Thường thì hoa lan kiếm nở vào mùa đông (Matsuda, Y., và cs., 2019), mặc dù cũng có loài nở vào mùa xuân và mùa thu Đáng chú ý, loài Cymbidium ensifolium thường nở vào các tháng 2, 6, 10, và

12 Hoa lan kiếm có sự đa dạng màu sắc, bao gồm màu trắng, xanh, vàng-xanh,

kem, vàng, nâu, hồng, và đỏ Đặc biệt, một số loài có khả năng biến đổi màu theo thời gian trong ngày Điều đáng chú ý khác là hoa lan kiếm có tuổi thọ lâu, đẹp, có thể giữ được khoảng 10 tuần nhờ sự bảo vệ của lớp sáp trên bề mặt hoa,

và thường có mùi thơm quyến rũ (Lưu Chấn Long, 2003) Các đặc điểm thực vật học của chi lan kiếm được thể hiện qua những đặc điểm này:

Các củ lan thường nối với nhau thông qua một thân ngầm, và thân ngầm này thường là một phần ngắn Các củ lan thực chất là các cành ngắn của thân ngầm, và khi chúng được tách ra khỏi củ già, chúng có khả năng phát triển thành các phần mới của thân ngầm Từ những phần thân ngầm mới này, cây có thể phát triển ra những cây con Vì vậy, Cymbidium thường được phân loại vào nhóm lan đa thân (Trần Duy Quý, 2005)

- Củ lan (hay còn gọi là giả hành) thường có hình dạng đa dạng như hình

ô van, hình cầu, hình bầu dục, hoặc hình trứng v.v Kích thước của củ lan có thể dao động từ 1 đến 10 cm và thường được bao phủ bởi các lớp lá xếp chồng lên nhau (Trần Duy Quý, 2005)

- Rễ của lan có cấu trúc rất đặc biệt, thuộc loại rễ thịt, có hình dạng to và thô, thường có màu trắng ngà hoặc có một chút màu vàng nhạt bên trong Trong

rễ lan, có một lõi chất gỗ dạng sợi ở phần trung tâm, và đây là điểm khác biệt quan trọng giữa lan và cỏ (Theo Lưu Chấn Long, 2003)

- Lá: Lá của cây lan kiếm mang nhiều dạng khác nhau như dạng mũi kiếm, dạng dải, dạng phiến, và có thể có đầu lá nhọn hoặc song đỉnh, tùy thuộc vào loại cây Kích thước của lá lan kiếm thay đổi rất lớn, với chiều rộng biến động từ 0,5 cm đến 6 cm và chiều dài từ 10 cm đến 150 cm Lá thường mọc rộng và được xếp xít trên thân, đôi khi có thể rủ xuống hoặc xếp cách đều đặn trên thân Mỗi loài lan kiếm có thể có dạng phiến lá đặc trưng riêng biệt (Nguyễn Tiến Bân, 1997; Lưu Chấn Long, 2003)

- Hoa: Cấu trúc cơ bản của hoa lan kiếm bao gồm 3 cánh đài và 2 cánh tràng, trong đó cánh môi thường có màu sắc sặc sỡ hơn, tạo nên vẻ đẹp thanh

nhã của hoa lan kiếm Góc giữa của 3 cánh đài thường là 120 độ, tuy nhiên, một số loài có thể có biến dạng, với hai cánh tràng dưới nằm ngang 180 độ hoặc

có thể hơi uốn lên Nhánh hoa của lan kiếm, còn được biết đến với tên gọi

“tiễn,” thường xuất phát thẳng từ thân của củ giả đã phát triển hoàn toàn Thông thường, mỗi phần thân củ giả chỉ mang một nhánh hoa, tuy nhiên, khi được chăm sóc đúng cách, có thể có thêm từ 2 đến 3 nhánh hoa phát triển Số lượng hoa và màu sắc của hoa có sự biến đổi tuỳ thuộc vào từng loại cây, có thể từ 8 đến hơn 20 hoa trên một ngọn (Trần Duy Quý, 2005)

Nhiều loài lan kiếm thường có cánh môi rộng, sặc sỡ về màu sắc, và chúng thường có các hình dạng độc đáo, phân biệt hoàn toàn với các cánh hoa khác

Ở phần trung tâm của hoa, tồn tại một đường gợn sóng được biết đến với tên

“Đường dẫn mật,” thường bắt đầu từ phía ngoài của môi hoa và kéo dài tới phần trung tâm của bông hoa Phía trên của môi hoa, có một cột hoa, nằm ở trung tâm của hoa và chứa cả các bộ phận sinh sản đực và cái của hoa Phấn hoa nằm ở gốc của cột hoa, và các hạt phấn hoa thường liên kết với nhau thông qua một chất sáp, hình thành các khối phấn hoa cứng Mỗi bông hoa thường mang từ 2 đến 8 khối phấn Phấn hoa nằm ở đỉnh cột hoa và được bảo vệ bởi một lớp màng bảo vệ được gọi là bao phấn (Trần Duy Quý, 2005)

1.1.2 Phân loại và phân bố các loài lan kiếm ở miền núi phía bắc

Khu vực miền núi phía Bắc của Việt Nam bao gồm cả khu vực Đông Bắc

và Tây Bắc, bao gồm các tỉnh Bắc Giang, Bắc Kạn, Cao Bằng, Lạng Sơn, Quảng Ninh, Hà Giang, Lào Cai, Phú Thọ, Thái Nguyên, Tuyên Quang và Yên Bái Miền núi phía Bắc có đặc điểm địa hình đa dạng với bốn cánh cung chính, gồm cánh cung Sông Gâm, cánh cung Ngân Sơn, cánh cung Bắc Sơn và cánh cung Đông Triều Những cánh cung này hội tụ tại vùng Tam Đảo Đây là khu vực với địa hình đồi núi chủ yếu, tuy nhiên, cũng có một số đỉnh núi cao vượt qua mốc 2000 mét, đặc biệt ở khu vực thượng nguồn sông Chảy Địa hình đồi núi giảm dần từ phía Tây Bắc xuống phía Đông Nam Mặc dù nằm trong vùng

khí hậu nhiệt đới gió mùa ẩm, nhưng do địa hình cao với nhiều dãy núi hình cánh cung ở phía Bắc và tập trung về Tam Đảo, vùng này thường trải qua mùa Đông với gió Bắc mạnh và lạnh, trong khi mùa Hè thì mát mẻ Do đó, khu vực này thường có khí hậu cận nhiệt ẩm Miền núi Đông Bắc nổi tiếng với thực vật

đa dạng và phong phú, trong đó có nhiều loài lan kiếm quý hiếm

Theo Trần Hợp, chiếm hơn 50% tổng số loài lan kiếm trong tự nhiên của Việt Nam trong những năm gần đây, các loài lan kiếm trong khu vực miền núi Đông Bắc bao gồm:

Lan Kiếm lô hội (Cymbidium aloifolium (L.) Sw): Loài lan sống phụ sinh, đôi khi mọc trên đất, thường mọc thành bụi Nguồn gen lan Kiếm lô hội phân bố ở độ cao từ 600 - 1000m, thời gian nở hoa là vào tháng 5 - 6 (Trần Hợp, 2007)

Lan Kiếm Thanh ngọc (Cymbidium ensifolium (L.) Sw): Loài lan đất, mọc thành bụi dày, phân bố ở độ cao từ 500 - 1000m, thời gian nở hoa là vào tháng 2 - 3

Lan Trần mộng xuân (Cymbidium lowianum Rchb.f.): Loài lan đất, có thời gian nở hoa từ tháng 1 - 3 Nguồn gen lan kiếm Trần mộng xuân phân bố

ở độ cao khoảng 1400 - 1600m

Lan Kiếm Bạch ngọc (Cymbidium eburneum Lindl.): Lan sống phụ sinh, thường mọc trong các khu rừng già ở độ cao từ 1500 - 2000m Thời gian nở hoa là từ tháng 10 - 11

Lan Kiếm Bạch ngọc Xuân (Cymbidium longifolium): Lan sống phụ hoặc có thể trồng dưới đất, thời gian nở hoa là từ tháng 1 - 3 Lan Kiếm Bạch ngọc Xuân phân bố trong rừng già ẩm ướt ở độ cao từ 1200 - 1700m

Lan Kiếm Hồng Hoàng (Cymbidium iridioides D.Don): Loài lan sống phụ sinh, thường mọc trên vách đá hoặc trên các cây gỗ lớn Lan Kiếm Hồng Hoàng phân bố trong các khu rừng già ẩm ướt ở độ cao từ 1100 - 1600m Thời gian nở hoa là từ tháng 10 - 11

Lan Kiếm rủ (Cymbidium atropurpureum Lindl): Loài lan sống phụ sinh,

có thể trồng dưới đất, thường phân bố ở khu vực ven suối nơi ẩm mát và có nhiều cây gỗ cổ thụ Thời gian nở hoa là từ tháng 10 - 11

Lan Kiếm thu (Cymbidium tracyanum L Castle.): Loài lan sống phụ sinh, có thể trồng dưới đất Nguồn gen lan kiếm thu phân bố trong các khu rừng già ở độ cao từ 1300 - 2000m Thời gian nở hoa là từ tháng 10 - 12

Lan Kiếm lục (Cymbidium hookerianum Reichb.f.): Loài lan sống phụ sinh hoặc có thể trồng dưới đất, thích ẩm thường mọc trong rừng già ở độ cao

từ 1700 - 2400m và có thể mọc trên cây, đất mùn ẩm hoặc đá Thời gian nở hoa

là từ tháng 10 - 12

Hồng lan (Cymbidium sanderae Reichb): Loài sống phụ sinh trên đá hoặc dưới đất Nguồn gen Hồng lan thường mọc trong các khu rừng già ẩm ướt, phân bố ở độ cao từ 700 - 1700m Thời gian nở hoa kéo dài từ tháng 1 - 3

Lan Kiếm gấm (Cymbidium floribundum Lindl): Loài sống phụ sinh, sống dưới đất mùn ẩm hoặc trên đá Thường phân bố trong các khu rừng già

ẩm ướt hoặc ven suối ở độ cao 800 - 1700m Đây là một loài có khả năng thích nghi cao với môi trường, do đó, chúng ta có thể dễ dàng tìm thấy trong các khu rừng già Thời gian nở hoa là từ tháng 3 - 5

Lan Kiếm Lá giáo (Cymbidium lancifolium Hook.f): Loài lan đất thường sống trên vùng núi đá vôi với đất mùn tơi xốp và ẩm mát, có thể sống phụ sinh trên các thân cây gỗ ven suối nơi có điều kiện ẩm mát (ánh sáng 30 - 40%) Phân bố ở độ cao từ 1200 - 1700m Thời gian nở hoa là từ tháng 3 - 4

Lan Kiếm mỡ gà lá dài (Cymbidium elegans Lindl): Loài sống phụ sinh, thường phân bố trong các khu rừng già ở độ cao 1500 - 2000m và thích môi trường thoáng mát Thời gian nở hoa là từ tháng 9 - 10 (Trần Hợp, 2007)

Dựa trên số liệu được Trần Hợp (2007) công bố, khu vực núi Đông Bắc Việt Nam đã ghi nhận sự tồn tại của 13/24 loài lan kiếm, chiếm hơn 50% tổng

số loài lan kiếm trong cả nước Tuy nhiên, trong khoảng thời gian gần đây, khoảng 6 năm trở lại đây, do nhu cầu trồng hoa lan tăng cao và việc khai thác quá mức từ tự nhiên, số lượng và đa dạng của các loài lan kiếm trong khu vực miền núi Đông Bắc đang giảm sút và không rõ ràng

1.1.3 Giá trị, thực trạng khai thác địa lan kiếm

1.1.3.1 Giá trị của các loài lan kiếm

Chi địa lan kiếm được ưa chuộng trên thị trường nhờ hoa đẹp, bền, và hương thơm quyến rũ Nhiều loài lan kiếm trong họ này có giá trị thương mại quan trọng và đáp ứng nhu cầu trồng cây cảnh và cây hoa của cộng đồng yêu thú cảnh, cũng như phục vụ cho ngành công nghiệp hoa cắt cành toàn cầu [53] Hoa lan được thu hoạch, chăm sóc và tiếp thị cho nhiều mục đích khác nhau, bao gồm trồng làm cây cảnh, dược phẩm và thực phẩm Hiện nay, hoạt động kinh doanh hoa lan, bao gồm cả loại lan kiếm, đã được thiết lập trên phạm vi toàn cầu, tập trung vào việc thu hái các loài thực vật từ môi trường tự nhiên (Hinsley, A., và cs., 2017) Sự phát triển này là kết quả của giá trị sâu sắc mà những loài thực vật này mang lại cũng như tiềm năng lớn để phát triển ngành công nghiệp hoa lan trên toàn cầu và tại Việt Nam

a) Giá trị kinh tế

Hoa địa lan đã lâu trở thành một loại cây cảnh thương mại phổ biến trong trang trí sân vườn và được ưa chuộng bởi người tiêu dùng Hoạt động thương mại này tập trung chủ yếu vào các loài hoa địa lan có ngoại hình đẹp, độc đáo, hiếm có và có hương thơm quyến rũ Hoa địa lan luôn nằm trong danh sách những loại hoa phổ biến nhất trong nhóm cây cảnh trồng trong chậu trên toàn cầu (FloraHolland facts and figures 2015), chiếm khoảng 10% tổng số hoa tươi được giao dịch trên thị trường quốc tế (De, L 2015) Điều này thể hiện sự quan trọng của hoa địa lan trong mặt kinh tế

Theo báo cáo từ FloraHolland, chỉ riêng việc xuất khẩu địa lan từ Hà Lan vào năm 2015 đã đạt trị giá gần 500 triệu euro (FloraHolland facts and figures 2015) Các vùng sản xuất hoa lan lớn trên toàn cầu bao gồm Thái Lan, Đài Loan, Hà Lan và Nhật Bản, và họ tập trung vào việc sản xuất hoa lan trong các chậu cũng như hoa cắt cành với quy mô ngày càng mở rộng (Hanks F 2015)

Hàng năm, ngành xuất khẩu lan của Việt Nam đạt giá trị trên 4 triệu USD Trong đó, Mỹ và Nhật Bản là hai quốc gia hàng đầu nhập khẩu hoa lan

từ Việt Nam Tuy nhiên, tỷ trọng xuất khẩu của Việt Nam trong ngành hoa lan vẫn còn rất nhỏ so với Hà Lan và Thái Lan, hai quốc gia có sự thống trị mạnh

mẽ trên thị trường này Sự gia tăng giá trị xuất khẩu của ngành hoa lan tại Việt Nam vẫn chưa rõ ràng qua những năm qua, chủ yếu là do sản phẩm trong nước chưa đa dạng và thị trường xuất khẩu của Việt Nam chỉ tập trung vào vài quốc gia châu Á thường xuyên

Trong khoảng thời gian từ 2013 đến 2017, giá trị nhập khẩu hoa trong nước đã tăng từ mức 5,5 triệu USD vào năm 2014 lên gần 13 triệu USD vào năm 2018 Trong khi đó, giá trị xuất khẩu hoa lan của Việt Nam trung bình chỉ đạt 4 triệu USD, và Thái Lan chiếm hầu hết thị phần nhập khẩu của Việt Nam, đạt khoảng 100%

Sự chênh lệch cân cân thương mại lớn trong ngành hoa lan tại Việt Nam

là một vấn đề đáng chú ý Trong khi xu hướng xuất khẩu và phát triển ngành hoa lan trên toàn cầu giai đoạn 2014 – 2018 luôn ở mức cao, Việt Nam lại ghi nhận sự chênh lệch cân cân xuất-nhập khẩu lớn Giá trị nhập khẩu thường cao hơn gấp 3 lần so với giá trị xuất khẩu, điều này cho thấy nhu cầu trong nước về hoa lan trồng trong chậu là rất lớn và ngành hoa lan trong nước chưa đáp ứng

đủ nhu cầu của thị trường nội địa

b) Giá trị dược liệu

Chi lan kiếm có vai trò quan trọng trong các hệ thống y học cổ truyền trên toàn cầu, từ việc làm sinh kế cho đến khai thác thương mại dưới dạng các

sản phẩm truyền thống và thực phẩm bổ sung sức khỏe (Brinkmann JA 2014) Gần đây, nghiên cứu khoa học đã xác định sự tồn tại của các hợp chất sinh học

có tiềm năng trong một số loài lan, trong bối cảnh y học cổ truyền Cụ thể, loài Cymbidium aloifolium (L.) Sw, còn gọi là Kiếm lô hội, có các bộ phận khác nhau được sử dụng trong y học truyền thống Thân và rễ của cây Kiếm lô hội được chế biến thành bột và dùng làm thuốc bổ Gốc cây Kiếm lô hội thường được sử dụng để chữa trị các bệnh phong thấp và các rối loạn thần kinh Hạt giống của loài này cũng được sử dụng để điều trị vết thương, trong khi lá của cây Kiếm lô hội thường được áp dụng để chữa trị mụn nhọt và giảm sốt Toàn

bộ cây Cymbidium aloifolium được sử dụng trong việc điều trị suy nhược của mắt, chữa trị bỏng và lở loét, cũng như giúp giảm đau kinh nguyệt (Lal, N., và cs., 2020) Sắc đặc nước cây Cymbidium devonianum Paxton được sử dụng để điều trị ho và cảm; Bột từ rễ được dùng để chữa trị nhọt Nước cốt tươi của Cymbidium elegans Lindl được áp dụng để chữa làm mờ vết thương, điều trị rối loạn thần kinh Nước sắc từ rễ cây Cymbidium ensifolium được sử dụng trong y học cổ truyền để chữa trị bệnh lậu, trong khi nước sắc từ hoa của cây này thường được dùng để điều trị các vấn đề liên quan đến đau mắt (Lal, N., và

CS 2020) Cây Cymbidium hookerianum Rchb.f được biết đến với khả năng cầm máu vết thương Dịch tươi từ lá của cây Cymbidium iridioides D Don, còn gọi là Hồng hoàng lưỡi hổ, thường được sử dụng làm thuốc cầm máu cho vết thương (Lal, N., và CS 2020) Giả hành và rễ có thể sử dụng làm thuốc bổ,

và cũng có thể ăn khi gặp tiêu chảy; Nước chiết từ cây Cymbidium macrorhizon Lindl được dùng để điều trị mụn nhọt

Vì vậy, ngoài giá trị kinh tế và thẩm mỹ, chi lan kiếm còn cung cấp một nguồn tài nguyên dược liệu đa dạng Giá trị của các loài lan này thay đổi theo thời gian, sự quan tâm của người dân và độ hiếm có của từng loài

1.1.3.2 Thực trạng khai thác chi địa lan kiếm

Hoạt động thương mại hoa lan trên thế giới và tại Việt Nam hiện nay bao gồm cả việc thu thập các loại cây hoa dại, thường diễn ra không đúng quy định

Điều này có thể liên quan đến việc thu hoạch quy mô nhỏ để sử dụng trong gia đình (Hinsley A 2011), nhưng cũng có thể thực hiện ở quy mô thương mại Trước đây, hoa lan nhiệt đới đã được thu thập với số lượng hàng trăm nghìn tấn để xuất khẩu sang châu Âu, bắt đầu từ thời kỳ cơn sốt hoa lan Victoria Hoạt động mua bán và trao đổi quốc tế của các loài lan hoang dã đã lan rộng trước khi Công ước CITES được thành lập vào năm 1970 (Cribb PJ, và CS 2003) Tuy nhiên, hoạt động buôn bán thương mại cây hoa hoang dã vẫn tiếp tục tồn tại Mặc dù có hạn chế về thông tin chính thức về việc thu thập và buôn bán không hợp pháp, nhưng việc thu hái lan rừng để buôn bán và nuôi trồng lan hoang dã vẫn diễn ra ở nhiều quốc gia, bao gồm Costa Rica, Madagascar, Malaysia, Philippines, Venezuela, Việt Nam và nhiều quốc gia khác (Cribb PJ,

và CS 2003) Hiện nay, có 2 thách thức quan trọng liên quan đến bảo tồn trong thương mại hoa lan toàn cầu gồm:

a) Hoạt động khai thác không bền vững và bất hợp pháp

Hoạt động khai thác và buôn bán không hợp pháp đã gây ra những tác động tiêu cực đối với các quần thể hoa lan hoang dã Ở khu vực Đông Nam Á, việc buôn bán hoa lan đã ảnh hưởng đến các quần thể hoang dã trong khu vực này, dẫn đến sự suy giảm nghiêm trọng của quần thể hoa lan Ở Việt Nam, mặc

dù loài lan hài Paphiopedilum canhii Aver vừa mới được phát hiện, nhưng đã

có 99,5% quần thể của loài này bị thu hẹp do mục đích thương mại (Averyanov,

Nghiên cứu gần đây của Phạm Anh Tám (2021) đã chỉ ra rằng nhiều loài lan quý hiếm ở Việt Nam đã biến mất trong tự nhiên Những loài này thường được liệt kê trong danh sách CITES về các loài cây rừng nguy cấp và quý hiếm, dẫn đến việc nghiêm cấm việc mua bán và khai thác chúng Đặc biệt, các loài lan hải đang đối diện với nguy cơ nghiêm trọng Ngoài ra, các loài lan có giá trị trong các vườn cây cảnh cũng đang trải qua quá trình thoái hoá về giống

Nghiên cứu của Nguyễn Văn Kết (2009) đã tìm thấy rằng Vườn quốc gia Cát Tiên là nơi tập trung lớn của các loài lan quý hiếm ở Việt Nam Tại đây, có khoảng 100 chi lan và gần 400 loài lan, chiếm một phần quan trọng trong tổng

số 152 chi và 897 loài lan ở cả nước Tình trạng khai thác trái phép đã diễn ra liên tục trong nhiều năm và không có kế hoạch tái trồng, đã đưa nhiều loài lan

ở Vườn quốc gia Cát Tiên vào tình trạng nguy cơ tuyệt chủng

Trước tình hình này, nhóm nghiên cứu của Nguyễn Văn Kết (2009) đã thành công trong việc nhân giống in vitro gần 30 giống lan đặc hữu của Vườn quốc gia Cát Tiên Trong số các loài lan đã được nhân giống thành công, có nhiều loài vô cùng quý hiếm như kim hải, vân hải, lan gấm và nhiều loài khác Việc thành công trong việc nhân giống các loài lan đặc hữu không chỉ giúp bảo tồn các nguồn gen quý hiếm bằng cách tái trồng chúng tại Vườn quốc gia Cát Tiên mà còn tạo điều kiện thuận lợi để mở rộng sự phân bố của các giống lan quý ở các địa phương khác

Năm 2009, Giáo sư Trần Duy Quý đã thu thập và lưu trữ nguồn gen của nhiều loài lan rừng thuộc 10 chi khác nhau, bao gồm Hài vệ nữ, Hồ điệp, địa lan Kiếm, Hoàng thảo, Quế lan hương, Vanda, Catalan, Phượng vĩ, Hạc đính

và Đai châu Những loài lan này được lưu trữ tại hai địa điểm: Vùng núi Tam Đảo và vùng đồng bằng Hà Nội, với quy mô 2.000 chậu trên diện tích 1.500m2 vườn nuôi trồng (Trần Duy Quý 2009)

Năm 2021, Phạm Anh Tám đã phát triển thành công quy trình nhân giống Hài vân bắc, lan Hài lông và lan Thủy tiên hường nhằm bảo tồn các nguồn gen quý hiếm này và lưu trữ chúng tại khu bảo tồn thiên nhiên Xuân Liên Bảo tồn

và khai thác bền vững nguồn gen của chi lan kiếm (Cymbidium.sp) địa phương tại khu vực miền núi Đông Bắc Việt Nam đã trở thành một vấn đề cấp bách trong bối cảnh tình trạng khai thác quá mức và nguy cơ tuyệt chủng của nhiều loài lan, bao gồm cả chi lan kiếm.1.2 Tình hình nghiên cứu chi địa lan kiếm trên thế giới và Việt Nam

1.2.1 Nghiên cứu về đặc điểm hình thái

Phương pháp đặc điểm hình thái là việc mô tả các đặc điểm bên ngoài của thực vật, bao gồm cấu trúc của thân, kích thước và hình dáng của lá, cũng như các đặc điểm của hoa như màu sắc, số lượng, kích thước và thời gian ra hoa

Phân loại sinh vật bằng cách sử dụng các đặc điểm hình thái đã được áp dụng từ lâu, và nguyên tắc cơ bản là rằng những đơn vị phân loại (taxon) có nhiều đặc điểm chung sẽ có mối quan hệ gần gũi hơn Sự khác biệt giữa các cá thể được nghiên cứu, tuy vậy, không phải tất cả các đặc điểm đều thích hợp để

sử dụng trong quá trình phân loại Đặc điểm phân loại thường là những đặc điểm ổn định, biến đổi chậm và liên quan đến cấu trúc cơ bản của cơ thể Các biến đổi nhanh hoặc liên quan đến cơ chế sinh sản thường được áp dụng để phân biệt các cấp độ phân loại thấp hơn Khi kết hợp nhiều đặc điểm, độ tin cậy của kết quả phân loại sẽ được tăng cường

1.2.2.Nghiên cứu nhân giống

1.2.2.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống chi lan kiếm trên thế giới

Nhân giống lan kiếm có hai hình thức như sau nhân giống hữu tính và nhân giống vô tính Phương pháp nhân giống hữu tính là quá trình chậm và gặp nhiều hạn chế do hạt lan kiếm có ít nội nhũ, làm cho quá trình nảy mầm khó

khăn Trong tự nhiên, để hạt lan nảy mầm cần có sự hiện diện của nấm mycorrhiza, điều này là điều kiện tiên quyết (Alghamdi, S.A 2019; Jacquemyn, H., & và CS 2019); Li, Y - Y., và CS 2022; Liu, Q - G., và CS 2020) Hạt giống lan kiếm thường không thể dự trữ độc lập hoặc tiến hành quá trình nảy mầm một cách chậm rãi Chúng không thể phân giải các phân tử lớn như tinh bột hoặc cellulose, vì vậy quá trình nảy mầm chỉ tiến triển đến giai đoạn protocorm ban đầu, sau đó chúng sẽ chờ đợi nguồn cung cấp đường từ bên ngoài thông qua sự hỗ trợ của nấm mycorrhiza (Liu, Q - G., và CS 2020; Miura, C., và CS 2018) Ngay cả khi có nấm cộng sinh, các hạt giống phải mất một thời gian dài cho sự nảy mầm với yêu cầu cao về điều kiện môi trường, chỉ một thay đổi nhỏ cũng có thể gây hủy hoại cho toàn bộ số lượng cá thể (Miura,

C và CS 2018) Phương pháp nhân giống vô tính thông thường, như tách mầm,

đã được áp dụng để nhân giống lan kiếm trong tự nhiên Tuy nhiên, phương pháp này đòi hỏi nhiều thời gian và khó khăn để đạt được số lượng cây giống mong muốn

Việc nhân giống và trồng hoa lan đã trải qua sự cách mạng sau khi phát hiện môi trường Knudson (Knudson, L 1922) Khi thử nghiệm sự nảy mầm của hạt lan, Lewis Knudson đã công thức hóa môi trường và thành công trong việc nảy mầm hạt lan Cattleya, Laelia, Epidendrum (Knudson, L 1922; Knudson, L 1925) Ông kết luận rằng nấm không cần thiết cho quá trình nảy mầm của hạt lan Sau thành công của môi trường Knudson B và C (Knudson,

L 1922; Knudson, L 1946), các phương pháp nảy mầm không cộng sinh của hạt lan đã được phát triển Năm 1964, Morel đã đạt thành công khi sử dụng đỉnh chồi của cây Cymbidium để thực hiện trong môi trường in vitro, đánh dấu một bước tiến quan trọng trong công nghệ nuôi cấy mô lan kiếm (Krishnan, V.,

và CS 2011)

Với sự ra đời của môi trường Knudson, một loạt các môi trường cải tiến

đã được chuẩn hóa và trở nên có sẵn trên thị trường Các môi trường phổ biến

nhất được sử dụng cho việc nuôi cấy lan là môi trường Knudson C (Knudson,

L 1927; Knudson, L 1946) Môi trường MS (Murashige, T., & và CS 1962); môi trường Vacin & Went và nhiều môi trường khác nhau bao gồm từ dung dịch 3 muối đơn giản đến hỗn hợp có chứa 20 muối hoặc nhiều muối đa lượng

và vi lượng (Chang 2000) Một số môi trường được thiết kế cho các chi cụ thể, trong khi một số khác được sử dụng rộng rãi Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật như auxin và cytokinin được thêm vào môi trường để tăng sự nảy mầm của hạt ở một số loài lan (Castillo - Pérez, và CS 2021; Lal, N., và CS 2020; Liu, Yang Zhang, và CS 2017) Nhiều chất phụ phức tạp đã được sử dụng trong các môi trường nuôi cấy lan kiếm khác nhau, và điều này đã thể hiện ảnh hưởng của chúng đối với quá trình nảy mầm của hoa lan Tỷ lệ nảy mầm của hạt, sự hình thành protocorm và sự phát triển của cây con đều bị ảnh hưởng bởi kiểu gen, độ chín của hạt và điều kiện nuôi cấy (Lal, N., và CS 2020)

Sau những nghiên cứu ban đầu của Knudson, phương pháp nhân giống thương mại hoa lan đã trải qua sự tiến triển đáng kể Mặc dù việc nuôi cấy hạt giống để nhân giống in vitro gặp một số hạn chế, đặc biệt khi cây khó thụ phấn

và khó tạo quả chứa hạt, nhưng để có được dòng vô tính tương tự từ cây mẹ ưu việt, sự tái sinh từ các bộ phận khác nhau của cây trưởng thành trở nên rất cần thiết Morel đã phát triển phương pháp nhân bản vô tính bằng cách nuôi cấy đỉnh chồi, từ đó sản xuất số lượng lớn Cymbidium không bị nhiễm virus Kỹ thuật này đã trở thành phương pháp chính để sản xuất các giống lan thương mại trên toàn thế giới (Morel, G M 1964) Các phương thức khác nhau đã được

phát triển để nhân rộng quy mô một số loài lan thông qua việc nuôi cấy in vitro

các bộ phận khác nhau bao gồm các đoạn chồi (Burkhan, H., Rajan, K S., và

CS 2022), cuống hoa, nụ hoa, giả hành, hạt trưởng thành (Castillo - Pérez, L.J., và CS 2021; De, L C 2022), hạt chưa trưởng thành (Meera Chettri Das,

và CS 2007), pseudobulbs, protocorms (Corrie S, T.P 1993), PLBs (Begum,

A T., và CS 1994), lớp tế bào mỏng (TCL) của PLBs và hạt nhân tạo dựa trên PLBs (Duong Tan, N và CS.2018)

Phương pháp nhân giống bằng nuôi cấy mô đã đạt thành công ở nhiều loài lan kiếm Chẳng hạn, vào năm 1991, các nhà nghiên cứu đã thành công trong việc tái sinh loài Cymbidium goeringii từ nụ hoa trong ống nghiệm Năm 1998, Chang và đồng nghiệp đã thành công trong việc tái sinh Cymbidium ensifolium var misericors bằng cách sử dụng các phần của giả hành, thân rễ và rễ của cây mẫu Để thực hiện quá trình nhân nhanh in vitro của Cymbidium ensifolium, có thể sử dụng một trong ba con đường hình thái khác nhau, bao gồm nuôi cấy mô sẹo từ thân rễ, chồi hoặc phôi hạt Quá trình nhân giống hàng loạt có thể được thực hiện thông qua sự tăng sinh của rễ và hình thành phôi (Chang, W 1998)

Năm 2004, quá trình nhân giống in vitro lan kiếm từ mô sẹo đã được công bố (Huan, L V T và CS 2004) Mô sẹo là một khối tế bào phát triển không có định hướng, thường có màu trắng Trong môi trường phù hợp, mô sẹo có khả năng tái sinh thành cây hoàn chỉnh Phương pháp nuôi cấy mô sẹo thường được áp dụng cho những loài thực vật không thể nhân giống thông qua đỉnh sinh trưởng hoặc khi mẫu nuôi cấy không thể tạo ra chồi trực tiếp Cây tái sinh từ mô sẹo thường thừa hưởng đặc tính giống hệt với cây mẹ Bằng cách sử dụng mô sẹo, có thể tái sinh đồng thời nhiều chồi hơn so với việc nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Tuy nhiên, trong quá trình nuôi cấy mô sẹo, mức độ biến dị của tế bào soma (tế bào không phải là tế bào sinh dục) thường rất cao

Năm 2007, Meera và cộng sự tái sinh thành công loài lan kiếm Cymbidium devonianum Paxt, một loài lan hiếm và bị đe dọa tuyệt chủng

ở Đông Bắc Ấn Độ thông qua tái sinh protocorm từ hạt Hạt giống từ quả Cymbidium devonianum được nuôi cấy trên môi trường MS, phát triển thành protocorms Cây con thu được từ protocorms đem rèn luyện đã sống sót trên giá thể chứa gạch, than, rác phân hủy (1: 1: 1) với một lớp rêu phủ trên bề mặt Quy trình tái sinh protocorm thành công đã cho phép nhân

giống và bảo tồn nhanh chóng loài Cymbidium devonianum Paxt quý hiếm (Miura, C và CS 2018)

Năm 2008, Malabadi và cộng sự đã vi nhân giống thành công loài lan kiếm Cymbidium bicolor Lindl thông qua sự hình thành PLBs bằng cách

sử dụng các lớp tế bào mỏng (TCL) khi nuôi cấy trên môi trường cơ bản bổ sung 24 - epibrassinolide (24 - epiBL), tỷ lệ tái sinh PLBs đạt 86% đã được ghi nhận khi sử dụng 3,0 μM 24 - epiBL Tất cả các PLB mới được hình thành đều sống sót sau 12 tuần, các PLB hình thành các chồi khỏe mạnh Chồi Cymbidium bicolor Lindl ra rễ khi nuôi cấy trên cùng một môi trường

cơ bản bổ sung 2,0 μM triacontanol Các chồi, rễ tốt đã được chuyển đến các chậu chứa dăm than, vỏ dừa và gạch vỡ (2: 2: 1) cho tỷ lệ sống 100% Đây là báo cáo thứ hai về việc sử dụng 24 - epiBL, một loại steroid steroid thực vật, trong quá trình vi nhân giống hoa lan (Malabadi RB, T d S J.,

và CS 2008)

Năm 2010, Quy trình nhân giống in vitro loài lan kiếm Cymbidium giganteum Wall ex Lindl từ hạt đã được nghiên cứu thành công Trong đó, hạt Cymbidium giganteum nảy mầm tạo PLBs Bốn môi trường dinh dưỡng

là Murashige và Skoog (MS), Phytamax (PM), Mitra et al (M) và Knudson 'C' (KC) đã được sử dụng để đánh giá sự nảy mầm của hạt và phát sự triển protocorm Ngoài ra, tác dụng của peptone, than hoạt tính (AC) và hai chất điều hòa sinh trưởng thực vật BAP và 2,4 - D cũng đã được nghiên cứu Kết quả cho thấy, môi trường M và PM khi được bổ sung 2,0 g/L peptone hoặc 1,0 mg/ l BAP cho 100% hạt giống nảy mầm Môi trường được bổ sung 2,0 g/L than hoạt tính có thể tạo ra các protocorm lớn (đường kính 1,6

± 0,1 mm) Mặc dù các protocorm tăng sinh mạnh mẽ trong môi trường lỏng, chúng không phát triển thêm nữa trừ khi được chuyển sang môi trường đông đặc agar trong vòng 6 đến 8 tuần PLBs khi chuyển sang môi trường 1/2PM hoặc 1/2M bổ sung 0,5 mg/ l axit indole - 3 - acetic cho chất lượng

chồi và rễ tốt nhất Các cây tái sinh có rễ tốt đã được rèn luyện trong nhà kính với tỷ lệ sống 95% [60] Ngoài ra, Cymbidium giganteum cũng được tái sinh in vitro từ mẫu khởi động bằng hạt với các chất điều hòa sinh trưởng TDZ, 2,4 - D, BAP, IAA…cho tỉ lệ tái sinh và sống sót cao (Ghosh, A và

CS 2014)

Năm 2012, Pant và cộng sự đã thành công khi nhân giống lan kiếm Cymbidium iridioides D Don từ hạt trên môi trường MS Cây con hoàn chỉnh được tạo ra từ hạt nảy mầm trên môi trường MS bổ sung BAP 1 mg/L + NAA 1 mg/L sau tám tuần nuôi cấy Ở giai đoạn nhân nhanh, Pant đã sử dụng chồi được lấy từ trong ống nghiệm để nhân giống Môi trường MS được bổ sung BAP 0,5 mg/L cho hệ số nhân chồi tối đa (8,25 chồi) Để tạo

rễ của chồi, Môi trường MS bổ sung 1mg/L indole - 3 - butyric acid là điều kiện lý tưởng cho sự hình thành rễ Các cây con hoàn chỉnh phát triển tốt trong điều kiện tự nhiên sau một thời gian ngắn làm quen với khí hậu Cùng thời điểm này, Mohanty và cộng sự đã vi nhân giống thành công loài lan kiếm Cymbidium mastersii từ hạt Bốn môi trường dinh dưỡng là Murashige và Skoog (MS), 1/2MS, Knudson 'C' (KC), Vacin & Went (VW)

đã được sử dụng để đánh giá sự nảy mầm của hạt và phát sự triển protocorm Ngoài ra, tác dụng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật BAP, Kinetin, NAA và IBA đã được nghiên cứu riêng lẻ và kết hợp để đánh giá ảnh hưởng của chúng đến khả năng tái sinh Cymbidium mastersii Kết quả cho thấy, môi trường cơ bản MS cho tỷ lệ nảy mầm hạt tối đa (93,58 ± 0,56) sau 8 -

9 tuần nuôi cấy Sự kết hợp của nhóm cytokinin (BAP và Kinetin) và auxin (NAA và IBA) làm tăng các protocorm thứ cấp Tỷ lệ protocorm thứ cấp/protocorm ban đầu đạt cao nhất (20,55 ± 0,62) trong môi trường MS

bổ sung 5,0 mM BAP + 2,5 mM NAA Cây con Cymbidium mastersii thích nghi một cách hiệu quả (tỷ lệ sống 88%) trong nhà kính trên giá thể gạch

và than vô trùng nghiền nát (1: 1) kết hợp phân trùn quế (phân lá + phân

bò, tỉ lệ 1: 1) (Mohanty, P và CS 2012)

Năm 2018, phương pháp vi nhân giống trực tiếp từ thân rễ Cymbidium goeringii hình thành chồi đã được Park và cộng sự công bố Các phần thân rễ thu được từ nuôi cấy hạt giống in vitro của Cymbidium goeringii được đặt trên môi trường MS bổ sung 5, 10, 20 hoặc 40 μM 2,4 -

D và 1, 2, 4, hoặc 8 μM BA hoặc TDZ Môi trường MS kết hợp với 20 μM 2,4 - D cho hệ số nhân rễ cao nhất Sau đó, các đoạn rễ được sử dụng để tái sinh chồi tạo cây hoàn chỉnh trên môi trường MS bổ sung 20 μM 2,4 - D và

2 μM TDZ Khoảng 97% cây con được sản xuất trong ống nghiệm thích nghi trong nhà kính Như vậy, một phương thức nhân giống in vitro hiệu quả sử dụng thân rễ đã được phát triển cho loài lan kiếm Cymbidium goeringii

Năm 2019, Pau và cộng sự nghiên cứu nhân giống in vitro loài lan kiếm Cymbidium aloifolium, sử dụng môi trường MS bổ sung BAP hoặc NAA để đánh giá sự nảy mầm của hạt và sự phát triển sớm của protocorm

Tỷ lệ nảy mầm tối đa của hạt Cymbidium aloifolium đạt 98% trên môi trường MS bổ sung 0,5 mg/L BAP và 0,5 mg/L NAA sau ba tuần nuôi cấy

Hệ số nhân chồi đạt 9,6 lần trên môi trường MS bổ sung 1,0 mg/L BAP và 0,5 mg/L NAA Nguồn auxin hiệu quả nhất để ra rễ tạo cây con hoàn chỉnh

là 1,0 mg/L IBA kết hợp với 0,5 mg/L BAP, với hệ số nhân rễ đạt 3,2 rễ / chồiTóm lại, trong khoảng thời gian gần 100 năm qua, nghiên cứu nhân giống chi lan kiếm in vitro trên toàn cầu đã sử dụng nhiều phương pháp khác nhau

Đa số các phương pháp này bắt đầu bằng việc sử dụng hạt lan kiếm làm mẫu khởi động và sau đó nhân nhanh thông qua sự hình thành cụm chồi Một số loài lan kiếm cũng đã sử dụng nụ hoa hoặc đoạn chồi làm mẫu khởi động Gần đây,

đã phát hiện phương pháp vi nhân giống Cymbidium goeringii bằng cách sử dụng rễ, cho phép tái sinh tạo cây in vitro hoàn chỉnh với tỉ lệ thành công cao

1.2.2.2 Nghiên cứu nhân giống chi lan kiếm tại Việt Nam

Tại Việt Nam, việc nhân giống in vitro lan kiếm đã nhận được sự quan tâm lớn do nhu cầu về cây giống ngày càng tăng trong thị trường hoa cảnh trong nước Năm 2004, tại Phân viện Sinh học Đà Lạt, dưới sự chỉ đạo của Dương Tấn Nhựt, đã đạt thành công trong việc phục tráng và nhân nhanh nhiều loài lan kiếm Cymbidium, bao gồm Tím hột, Xanh miretta, Trắng bà rịa, Xanh chiều, Xanh thơm, Xanh nandy, Tím nghĩa và Vàng ba nâu, thông qua phương pháp tạo Protocorm-like Bodies (PLB) từ đỉnh sinh trưởng Kết quả công bố cho thấy, môi trường nuôi cấy có bổ sung 0,2 mg/L NAA và 2 mg/L BA thích hợp cho quá trình nhân nhanh PLB, kỹ thuật cắt PLB theo chiều gốc ngọn tạo nhiều PLB nhất, môi trường bổ sung 0,5 mg/L NAA thích hợp cho việc tạo rễ

in vitro cây lan kiếm, cây mô khi xử lý thuốc nấm Zineb 20/00 sau đó trồng vào khay lớn, ánh sáng trực tiếp dưới 30% kết hợp phun nước và phun dinh dưỡng qua lá thích hợp cho tỷ lệ sống đạt 95% (Dương Tấn Nhựt, và CS 2004)

Năm 2007, Dương Tấn Nhựt đã tiến hành nghiên cứu về tạo hạt nhân tạo

từ PLBs 3 tháng tuổi lan kiếm (Cymbidium spp) Hạt được bao bọc bằng dung dịch sodium alginate ở các nồng độ khác nhau, sau đó gieo trên các hệ thống nuôi cấy in vitro khác nhau Khi bảo quản trong vòng 1 năm, hạt vẫn duy trì khả năng sống sót khi nuôi cấy in vitro Nghiên cứu cũng tập trung vào việc khảo sát khả năng nảy mầm trực tiếp của hạt sau khi được bao bọc bằng chitosan

và khả năng phát triển ex vitro của cây con có nguồn gốc in vitro trên giá thể dớn không được khử trùng Kết quả cho thấy tỷ lệ sống sót của hạt nhân tạo khi nuôi trong điều kiện in vitro là 100%, và khả năng tái sinh cũng rất cao Hạt nhân tạo không mất khả năng sống sót sau khi được bảo quản trong môi trường lỏng không chứa đường sucrose trong vòng một năm Tỷ lệ sống sót của hạt là 35,5% và tỷ lệ tạo chồi là 45,8% khi chuyển hạt trực tiếp sang giá thể dớn không khử trùng sau khi được bọc lớp vỏ chitosan Cây con tạo ra từ những hạt nhân tạo này đều sống sót sau 6 tháng ngoài nhà kính

Năm 2013, Trần Thị Ngọc Lan và đồng nghiên cứu tiến hành nghiên cứu

về sinh trưởng và phát triển của cây từ hạt nhân tạo trong vườn ươm so sánh với cây nuôi cấy vi nhân giống thông thường Kết quả cho thấy không có biến đổi về kiểu hình nào được ghi nhận từ các cây này, các chỉ tiêu chiều cao chồi, chiều dài rễ, hình dạng, màu sắc lá và rễ gần như tương đương nhau sau 270 ngày nuôi trồng, hạt nhân tạo lan kiếm bảo quản 180 ngày ở 4°C cho tỷ lệ sống sót cao nhất là 78,3% khi được tiền xử lý (nuôi cấy phôi trong môi trường MS + 0,5 mg/L ABA trong 5 ngày rồi bọc phôi bằng alginate) và đạt tỷ lệ nảy mầm

là 63% khi nuôi cấy trong điều kiện in vitro Hạt nhân tạo 2 lớp vỏ sau bảo quản

180 ngày cũng trong điều kiện tương tự cho tỷ lệ nảy mầm là 23,3% khi nuôi trồng trong điều kiện ex vitro

Năm 2014, một nhóm nghiên cứu thuộc Trung tâm Nghiên cứu và Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao TP Hồ Chí Minh đã thành công trong việc phát triển phương pháp nhân giống in vitro lan kiếm Hương cát cát (Cymbidium golden elf) Trong nghiên cứu này, chồi non có chiều dài 7 - 8 cm được sử dụng làm vật liệu khởi đầu Sau khi khử trùng, mẫu được nuôi trên môi trường MS

có bổ sung BA 1,5 mg/L để tạo chồi ngủ Khi chồi ngủ đạt kích thước 2 cm, tách lấy đỉnh chồi để bố trí thí nghiệm Kết quả cho thấy, tỉ lệ mẫu tái sinh PLBs cao nhất khi nuôi cấy đỉnh chồi trên môi trường MS bổ sung BA 2,5 mg/L và NAA 0,2 mg/L Môi trường MS có bổ sung BA 1mg/L cho tỉ lệ PLBs tái sinh chồi cao Môi trường khoáng KC bổ sung 20 g/L chuối, 1 g/L than hoạt tính thích hợp cho sự phát triển của cây Khi cây đạt chiều cao 4 - 5 cm, có 3 - 4 rễ được chuyển ra vườn ươm, cây thích ứng với môi trường tự nhiên tốt và có tỉ

lệ sống 100% sau 30 ngày theo dõi (Phạm Định Dũng, và CS 2014)

Năm 2017, nhóm nghiên cứu của Trần Thị Ngọc Lan đã nghiên cứu sự hình thành mô sẹo phát sinh phôi sinh dưỡng và cây con từ nuôi cấy đỉnh sinh trưởng giống lan kiếm lai Vàng hoàng hậu (Cymbidium hybrid “fx750”) Kết quả cho thấy, mô sẹo được hình thành từ nuôi cấy chồi đỉnh, giống lan kiếm

FX750 trên môi trường MS bổ sung 0,2 mg/L α - NAA, 2 mg/L BA, 10% nước dừa (CW), 30 g/L sucrose, 1 g/L than hoạt tính (AC), 8 g/L agar với tỷ lệ đạt 46,67% và được nhân nhanh trên môi trường tương tự, bổ sung 0,5 g/L casein thủy phân (tỷ lệ nhân nhanh đạt 10,87 lần) Mô sẹo biệt hóa thành PLB trên môi trường không bổ sung chất điều hòa sinh trưởng thực vật, tái sinh thành cây khi chúng được chuyển sang môi trường MS bổ sung 0,5 mg/L α - NAA, 0,5 mg/L BA, 10% CW, 30 g/L sucrose, 1 g/L AC, 8 g/L agar Quan sát giải phẫu cho thấy mô sẹo có khả năng phát sinh phôi Sau 6 tháng trồng cây trong nhà kính, 100% cây thích nghi tốt trong tự nhiên, không có các sai hình nào được ghi nhận từ những cây này

Năm 2008, nhóm nghiên cứu của Hoàng Thị Nga đã tiến hành nhân nhanh mẫu giống lan kiếm Hồng hoàng (Cymbidium iridioides) nhằm thiết lập một phương pháp nhân giống hiệu quả loài lan này Các chồi non có kích thước

từ 4 - 6 cm hoặc hạt được sử dụng làm mẫu cấy, môi trường tối ưu để khởi động mẫu chồi là: MS + 2% Saccarozo + 0,65% agar + 1,5 ppm BA, môi trường thích hợp để nuôi cấy lát mỏng đã xác định là: MS +1 ppm K + 2% Saccarozo Môi trường thích hợp để nhân nhanh được xác định là: MS + 2% Saccarozo + 1,0 ppm Kinetin (hoặc 0,5 ppm BA) + 0,65% agar Nghiên cứu đã xác định được môi trường tối thích để tạo cây hoàn chỉnh là MS + 0,1% than hoạt tính + 2,5% Saccarozo

Năm 2013, Ngô Thị Nguyệt và đồng nghiên cứu đã tiến hành nhân nhanh mẫu giống lan kiếm Trần mộng và lan kiếm Hoàng vũ nhằm thiết lập một quy trình nhân giống hiệu quả loài lan này Các chồi non được khử trùng bằng Ca(OCl)2 5% trong 15 phút + HgCl2 0,1% trong 3 phút tỷ lệ mẫu sống bật chồi 73,3%, đạt 2,48 chồi/mẫu, chiều cao trung bình chồi 1,03 cm trên môi trường

MS + 30 g/L đường Saccarozo +5 g/L agar, giai đoạn nhân nhanh trên môi trường MS + 2,0 mg/L BAP +30 g/L đường Saccaroza + 5 g/L agar hệ số nhân chồi đạt 2,96 lần, giai đoạn nâng cao số lượng, chất lượng chồi trên môi trường

MS+2,0 mg/L BAP+1,2 mg/L Kinetin +30 g/L đường Saccaroza + 5 g/L agar

hệ số nhân chồi đạt 3,01 lần, chiều cao chồi 1,93 cm, chồi mập có màu xanh đậm Giai đoạn ra rễ môi trường 1/2 MS + 1,5 mg/L α - NAA + 20 g/L đường Saccarozo + 5 g/L agar, tỷ lệ ra rễ đạt 100%, có 3,1 rễ/chồi, chiều dài trung bình rễ 1,3 cm, chất lượng rễ tốt

Lịch sử nghiên cứu về nhân giống chi lan kiếm in vitro đã kéo dài gần

100 năm trên toàn thế giới, với nhiều phương thức và đối tượng nghiên cứu khác nhau Tuy nhiên, tại Việt Nam, sự quan tâm và nghiên cứu về nhân giống

in vitro của chi lan kiếm mới được tập trung trong khoảng 20 năm gần đây Kết quả của các nghiên cứu nhân giống in vitro ở Việt Nam vẫn còn hạn chế, với

số lượng loài được nghiên cứu ít và chưa tương xứng với nguồn gen phong phú trong nước

Các nghiên cứu nhân giống in vitro tại Việt Nam thường tập trung vào một số loài địa phương có giá trị kinh tế như Trần mộng xuân, kiếm Hồng hoàng, Thanh ngọc và một số loài nhập nội như Hương cát cát, Vàng hoàng hậu Phần lớn quá trình vi nhân giống sử dụng hạt hoặc đỉnh sinh trưởng để tạo mẫu khởi động và nhân nhanh thông qua PLBs tạo cụm chồi Chưa có bất kỳ công bố nào sử dụng mẫu khởi động là các bộ phận khác như rễ, giả hành, nụ hoa và các loài khác trong chi lan kiếm như Bạch ngọc, Bạch ngọc đuôi công,

Tứ thời, kiếm Lá giáo, Xích ngọc vẫn chưa được nghiên cứu và quan tâm đúng mức, mặc dù chúng có nguy cơ bị khai thác cạn kiệt trong tự nhiên Việc nghiên cứu nhân giống vô tính của hai loài lan kiếm Bạch ngọc và Bạch ngọc đuôi công

là cần thiết để bảo tồn nguồn gen quý hiếm của khu vực miền núi Đông Bắc

1.3 Các kết luận qua phân tích tổng quan

Hiện tại, trong nước, nhu cầu về hoa lan trồng trong chậu đang tăng lên đáng kể, và ngành công nghiệp hoa lan trong nước hiện chưa đủ khả năng đáp ứng tình hình này Việc nghiên cứu và phát triển các loài lan đặc hữu, có bản

quyền tại Việt Nam đang tiến triển chậm rãi Vẫn còn thiếu sự hiểu biết về cách tận dụng một cách tối ưu các nguồn gen quý hiếm mà thiên nhiên đã tạo ra Điều đáng lo ngại hơn là những nguồn gen quý này đang bị khai thác trái phép

và dần mất đi trong thiên nhiên do diện tích sống của chúng ngày càng thu hẹp Vì vậy, nghiên cứu về sự đa dạng di truyền và nhân giống các nguồn gen có giá trị kinh tế, nhằm góp phần vào bảo tồn nguồn gen của lan kiếm (Cymbidium) ở khu vực miền núi phía Bắc trở nên cấp thiết Mục tiêu là khai thác các nguồn gen này một cách hiệu quả và đáp ứng nhu cầu về hoa

cảnh cả trong và ngoài nước