B GIÁO D O Ộ ỤC VÀ ĐÀO TẠ TRƯỜNG ĐẠ Ọ ỘI H C BÁCH KHOA HÀ N I Nguy n Trung Anh ễ “Nghiên cứ ảnh hưở ủ ạ ạu ng c a các h t nano kim lo i (coban, b c, s n quá trình chuy n gen ạ ắt và đồng) đế ể vào giố[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI - Nguyễn Trung Anh “Nghiên cứu ảnh hưởng hạt nano kim loại (coban, bạc, sắt đồng) đến trình chuyển gen vào giống đậu tương Việt Nam” LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Nguyễn Văn Đồng PGS.TS Đỗ Thị Hoa Viên Hà Nội – Năm 2017 1708330013030b52cb41d-e3f1-4cd3-a6a2-39363c25564e 1708330013030f9f7fda7-4290-4b2c-a7b4-acb3b448a31e 17083300130302e5e4999-eace-4d0f-9769-26fc1ab7a287 LỜI CAM ĐOAN u ca riêng tơi, kt qu nghiên cc trình bày lu bo v mt hc v ng mi s cho vic thc hin lu c n luc ch rõ ngun gc Hà Nội, ngày… tháng… năm 2017 Tác giả luận văn Nguyễn Trung Anh LỜI CẢM ƠN Trước tiên, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Văn Đồng, Giám đốc Phịng Thí nghiệm Trọng điểm quốc gia Công nghệ Tế bào thực vật, Viện Di truyền Nông nghiệp – người thầy kiên nhẫn hết lịng hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình tơi thực luận văn Tơi xin gửi tới PGS.TS Đỗ Thị Hoa Viên, Viện Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm lời cảm ơn chân thành, người hỗ trợ giúp đỡ để tơi hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc giúp đỡ nhiệt tình, ý kiến đóng góp q báu dẫn tận tình TS Hà Văn Chiến suốt q trình tơi thực hồn thành luận văn tập thể cán Phịng Thí nghiệm Trọng điểm Cơng nghệ Tế bào Thực vật – Viện Di truyền Nơng Nghiệp nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện tốt để tơi thực đề tài cách suôn sẻ thuận lợi Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Viện Di truyền Nông nghiệp Viện Công nghệ Môi trường hỗ trợ giúp đỡ để tơi hồn thành luận văn Cuối cùng, tơi xin gửi tới bố mẹ, anh chị, người thân bạn bè lời cảm ơn thân thương - người sát cánh, quan tâm dành cho tơi tình cảm chân thành suốt thời gian tơi học tập hoàn thành luận văn luôn bên cạnh ủng hộ sống Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Học viên cao học Nguyễn Trung Anh MỤC LỤC 11 1.1 cây 11 1.1.1 11 1.1.2 14 1.1.3 15 1.2 17 1.2.1 17 1.2.2 17 1.3 Gen bar 20 1.4 21 1.5 23 1.6 nano 25 - 27 2.1 27 2.2 27 27 28 29 29 30 grobacterium tumefaciens 30 32 2.3 32 33 34 35 36 g 36 36 grobecterium tumefaciens 44 3.2 Phân tích h 52 56 56 56 57 64 DANH MỤC BẢNG 12 13 29 33 36 39 42 45 47 50 53 DANH MỤC HÌNH 19 Hình 2.1 28 37 40 41 42 Hình 3.5: 43 Hình 3.6: trong trình 44 46 48 49 50 Hình 3.11: 51 52 Hình 3.13: gen T0 53 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT A.tumefaciens Agrobacterium tumefaciens ADN Axit deoxyribonucleic AS Acetosyringone BAP benzylaminopurine Bar Gen mã hóa cho enzyme phosphinothricin acetyl transferase Bii gen Bp Base pair CCM Cocultivation medium ng nuôi cy Cs Cng s dNTP Deoxynucleoside triphosphate Gi Gi DT84 Gi Gi EDTA Ethylene Diamine Tetra Acetic GA3 Gibberelic acid GM Germination medium ng ny mm ht IBA Indole-3-butyric acid Kb Kilo base OD Optical density PCR Polymerase chain reaction phn ng chui polymerase RM Rooting medium ng r SDS Sodium dodecysulfat SEM Shoot elongation medium ng kéo dài chi SIM T0 Shoot induction medium ng to i Cây chuyn gen TAE Tris acetate EDTA v/p vòng/phút YEP Yeast extract peptone GSO Tng cc Thng kê Vit Nam MỞ ĐẦU (Glycine max L Merr) [2] [26] (http://worldvegetableoil Ngày nay, công ngh c trin khai nghiên cu rng rãi phm vi toàn cu, nhi u to nhng sn phc ng di sng ca nguc bic nông nghip Mt s nhng nghiên cu ng dng h x lý ht ging nhm ci thin t ny mng, cht thu hoch ca nông sn [20] Công ngh c ng dng phân bón bao gm nguyên t ng cn thit tn phát trin ca trng Vic s dng công c h tr m bin, công ngh phát hin chng bnh vi sinh vt gây cho trng Trong nghiên cu ng dng ca ht nano nông nghi c s dng nhiu x lý ht ging trng vi hc trng Roghayyeh cng s u thy rng ht nano st (Fe) có ng m sinh hc u [49] Ngoài ra, ht nano sng (Cu) cho hiu qu ln x lý ht ging tr u Hin nay, vic to trng bii gen bng k thut chuy ng dng vào thc tin nht trng i li ích cho nn nông nghip vô quan trng Tuy nhiên, hiu sut chuyn gen vào ging ph bin ti Vit Nam hin ch i 1% [13] quy trình chuyo cm chi thơng qua ni cy in vitro nt mm ca mt vài gi u c trin khai mt s phịng thí nghiu cho kt qu Tuy nhiên git khó trng ph bin ti mùa v Vic biêt ti tnh thuc min Bc Vit