Bai giang cnlm2 p2

Trang 1 Giữ giống trên môi trường thạch nghiêngGiữ giống dưới lớp dầu khoángGiữ giống trong cátGiữ giống trên gelatin Trang 2 Thuần khiết chủng VSV trên môi trường agar ở đĩa petriC

BẢO QUẢN GIỐNG VI SINH VẬT Giữ giống môi trường thạch nghiêng Giữ giống lớp dầu khoáng Giữ giống cát Giữ giống gelatin Giữ giống môi trường Thạch nghiêng Thuần khiết chủng VSV môi trường agar đĩa petri Chọn khuẩn lạc điển hình cấy lên mơi trường thạch nghiêng thích hợp Ni cấy tủ ấm để VSV phát triển bình thường Lấy ống giống cho vào tủ lạnh giữ 4oC Hàng tháng cấy chuyền lại vào môi trường Giữ giống môi trường Thạch nghiêng Thêm vào môi trường 0,1M citrat natri 0,3M oxalate để chống nhiễm thực khuẩn thể (Bacteriophage) Ưu điểm: đơn giản, dễ làm Nhược điểm: tốn công sức, môi trường, thời gian, không ổn định Giữ giống lớp dầu khoáng Khử trùng dầu khoáng 121oC/30 phút, để nguội Đổ khoảng cm lên bề mặt thạch nghiêng có VSV phát triển tốt Đậy nút dán parafin lại Giữ điều kiện lạnh điều kiện thường Giữ giống lớp dầu khoáng Bảo quản 73% nấm mốc, 100% xạ khuẩn, 80% nấm men 73% vi khuẩn Ưu điểm Đơn giản, hiệu cao Môi trường khơng bị nước Có thể bảo quản giống khoảng 12 tháng, đỡ tốn công cấy chuyền phương pháp thạch nghiêng có nguy bị thối hóa nhiễm tạp Giữ giống cát/đất Cát rây kỹ, chọn hạt cỡ Ngâm HCl H2SO4 Rửa đến trung tính Sấy khơ, trùng Đổ cát vào ống thạch nghiêng chứa VSV (có nhiều bào tử), lắc Rót cát có lẫn VSV bào tử sang ống nghiệm vô trùng, đậy nút Sấy 40oC – ngày Dán parafin Bảo quản 4oC Giữ giống cát/đất Bảo quản VSV tạo bào tử Thời gian bảo quản năm Giữ giống gelatin Mơi trường Cấy giống Sấy khơ • Nước thịt + 10% gelatin + 5% inosit • Nước thịt + 10% gelatin + 0,25% acid ascorbic • Cấy vi sinh vật mơi trường • Ni đến đạt 1x1010 tế bào/ml • Nhỏ giọt lên miếng giấy nến đĩa petri • Sấy tủ hút chân khơng, dùng P2O5 hấp thu nước • Trong ống nghiệm 5oC Bảo quản Sử dụng • Lấy gelatin cho vào 1ml mơi trường lỏng thích hợp, ni 37 o, 24 • Cấy vào mơi trường agar, chọn khuẩn lạc điển hình Phương pháp đơng khơ VSV • Huyền phù VSV mơi trường dịch thể thích hợp • Làm lạnh mơi trường chân khơng • Thiết bị đông khô hút nước cuối mẫu làm khơ đến mức định • Hàn kín mơi trường chứa mẫu chân khơng Có hiệu bảo quản nấm sợi, nấm men, vi khuẩn số virut, dùng tảo, động vật nguyên sinh tế bào động vật Phương pháp đông khô dịch thể trực tiếp  Dịch huyền phù vi sinh vật làm khô nhanh chế độ chân khơng thích hợp mà mẫu khơng cần làm lạnh từ trước  Phương pháp đặc biệt có ý nghĩa nhóm vi khuẩn khơng có khả sống nhiệt độ thấp giai đoạn tiền đông  Các thông số quan trọng cần quan tâm o Tuổi vi sinh vật bảo quản o Thành phần dịch huyền phù tế bào vi sinh vật o Tốc độ đông khô o Nhiệt độ đông khô thấp o Khoảng thời gian làm khô mẫu độ ẩm cuối mẫu  Phương pháp nhanh thuận lợi cho đợt bảo quản số lượng lớn mẫu, vi sinh vật bảo quản từ 10-20 năm