Tóm tắt luận văn Thạc sĩ Khoa học: Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong lá cây sống đời tại Đà Nẵng

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRẦN CAO THANH HẢI NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG LÁ CÂY SỐNG ĐỜI TẠI ĐÀ NẴNG Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60 44 27 TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Đà Nẵng - 2011 Cơng trình hoàn thành ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Người hướng dẫn khoa học: GS.TS ĐÀO HÙNG CƯỜNG Phản biện 1: PGS.TS Phạm Văn Hai Phản biện 2: TS Trịnh Đình Chính Luận văn ñược bảo vệ Hội ñồng chấm Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ hóa học họp Đại học Đà Nẵng vào ngày 25 tháng năm 2011 * Có thể tìm hiểu luận văn tại: - Trung tâm thông tin - Học liệu, Đại học Đà Nẵng - Thư viện trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng MỞ ĐẦU Đặt vấn ñề Cây sống đời có tên khoa học Kalanchoe pinnata (Lamk.) Pers, họ Crassulaceae Các tên gọi khác thuốc bỏng, trường sinh, diệp sinh căn, ñà Trên giới có nhiều nghiên cứu thành phần, cơng dụng sống đời, nhiên Việt Nam chưa có nghiên cứu mang tính hệ thống sống đời Để góp phần vào nguồn tư liệu lồi sống đời phát triển tác dụng chữa bệnh tuyệt vời nó, tơi lựa chọn đề tài “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học sống ñời Đà Nẵng” Đối tượng nghiên cứu Lá sống ñời hái P Hoà Hải, Q Ngũ Hành Sơn, TP Đà Nẵng Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần axit hữu sống ñời Phương pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết: Thu thập, tổng hợp tài liệu, tư liệu, sách báo ngồi nước Đồng thời trao đổi kinh nghiệm với chun gia, thầy giáo đồng nghiệp 4.2 Phương pháp thực nghiệm - Phương pháp phân tích xác định đại lượng vật lí - Chiết phương pháp chưng ninh chiết soxhlet - Phương pháp quang phổ hồng ngoại kiểm tra nhóm chức axit - Phương pháp GC - MS nhằm phân tách xác định thành phần hoạt chất dịch chiết Ý nghĩa khoa học thực tiễn ñề tài 5.1 Ý nghĩa khoa học - Cung cấp thông tin khoa học quy trình chiết tách, xác định thành phần hóa học số axit hữu sống ñời - Cung cấp thông tin, tư liệu làm sở khoa học cho nghiên cứu sau 5.2 Ý nghĩa thực tiễn - Giúp cho việc ứng dụng sống ñời phạm vi rộng cách khoa học - Giải thích cách khoa học số kinh nghiệm, thuốc dân gian, ứng dụng sống ñời Bố cục luận văn Mở ñầu Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 2: Các phương pháp thực nghiệm Chương 3: Kết thảo luận Kết luận kiến nghị CHƯƠNG - TỔNG QUAN 1.1 Tên gọi, phân loại khoa học 1.1.1 Tên gọi Tên Khoa học: Kalanchoe pinnata(Lamk.) Pers.1805 (CCVN, 1:967) [2] Tên Tiếng Việt: Thuốc bỏng, sống đời, trường sinh lơng chim, lạc địa sinh căn, bơng, trường sinh, diệp sinh căn, đà 1.1.2 Phân loại khoa học [12] Ngành: Magnoliophyta Lớp : Magnoliopsida Bộ : Saxifragales Họ : Crassulaceae Chi : Kalanchoe 1.2 Phân bố [10] Cây sống ñời loại tự nhiên khu vực châu Á, Thái Bình Dương vùng Caribe 1.3 Đặc điểm sống đời [13] Cây sống đời dễ trồng, có thân thảo rỗng, cao 0,5-1 mét; có hai loại lá: loại to loại nhỏ Lá mọc đối thành hình chữ thập, dày có khí ngun; mép có cưa tù, to, mặt bóng có cuống dài từ 2-5 cm Hoa mọc kẽ lá, màu tím hồng, rủ chúc xuống ñèn lồng 1.4 Công dụng sống ñời [2],[6] Lá vỏ thuốc bổ ñắng, chất làm se cho ruột, giảm đau, tống ruột, hữu ích điều trị tiêu chảy ói mửa Nó ứng dụng để chữa trị bên ngồi lẫn bên trong, ñiều trị cho tất loại ñau viêm, nhiễm vi khuẩn, virus bệnh nấm, nhiễm trùng, leishmaniasis, đau tai, nhiễm trùng hơ hấp trên, viêm lt dày, cảm cúm sốt, Ở Việt Nam, sống ñời ñược sử dụng nhiều thuốc dân gian say rượu, viêm họng, sữa, ngủ, viêm xoang mũi, trĩ nội, kiết lỵ (viêm ñại tràng 1.5 Các hoạt ñộng dược lý [6] 1.5.1 Thuốc bổ thảo dược 1.5.2 Kháng Leishmanial hoạt ñộng 1.5.3 Bảo vệ gan thận 1.5.4 Hoạt động dược lí thần kinh học 1.5.5 Hoạt ñộng chống tác nhân gây ñột biến 1.5.6 Hoạt ñộng chống loét 1.5.7 Hoạt ñộng kháng khuẩn 1.5.8 Hoạt ñộng chống ñái tháo ñường 1.5.9 Tác ñộng ức chế miễn dịch 1.5.10 Hoạt ñộng hạ huyết áp 1.5.11 Giảm ñau, chống viêm vết thương chữa bệnh hoạt ñộng 1.5.12 Làm co rút tử cung 1.5.13 Độc hại cho gia súc 1.5.14 Hoạt ñộng ñộc hại vật lý, độc hại với nấm chống trùng 1.6 Axit hữu 1.6.1 Khái niệm Một axit hữu hợp chất hữu với tính axit Các axit hữu phổ biến axit cacboxylic, tính axit chúng có liên quan đến nhóm cacboxyl (-COOH), sulfonic axit (-SO2OH) 1.6.2 Đặc điểm Nhìn chung, axit hữu axit yếu không phân ly hồn tồn nước axit vơ mạnh Những axit hữu có khối lượng phân tử thấp axit formic, axit lactic tan tốt nước, axit hữu có khối lượng phân tử cao axit benzoic lại khó tan Mặt khác, hầu hết axit hữu dễ hịa tan dung mơi hữu 1.6.3 Ứng dụng Axit hữu ñơn giản formic axit axetic sử dụng cho phương pháp kích thích giếng dầu, giếng khí Các bazơ liên hợp axit hữu xitrat lactat thường ñược sử dụng dung dịch ñệm sinh học Axit xitric axit oxalic ñược sử dụng ñể loại bỏ rỉ sét Hệ thống sinh học tạo nhiều axit hữu phức tạp axit L-lactic, axit citric, axit D-glucuronic có chứa hydroxyl nhóm carboxyl Trong máu nước tiểu người có chứa axit hữu sản phẩm trình phân huỷ axit amin, chất dẫn truyền thần kinh, hoạt ñộng vi khuẩn ñường ruột vào thành phần thực phẩm Ứng dụng thực phẩm: axit hữu ñược sử dụng bảo quản thực phẩm hiệu ứng chúng với vi khuẩn Axit lactic muối natri lactat kali lactat ñược sử dụng rộng rãi kháng sinh sản phẩm thực phẩm, thịt, ñặc biệt, gia cầm thịt giăm bơng xúc xích 1.6.4 Chu trình axit xitric [12] Chu trình axit xitric-cịn gọi chu trình axit tricacboxylic, chu trình Krebs, chu trình Szent-Grgyi-Krebs, loạt enzyme, xúc tác phản ứng hóa học quan trọng tế bào sống để tác dụng với oxi q trình hơ hấp Chu trình axit xitric thể qua hình 1.2 Hình 1.2 Chu trình axit citric CHƯƠNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu Lá sống đời hái phường Hồ Hải, Ngũ Hành Sơn, TP Đà Nẵng 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp trọng lượng Áp dụng phương pháp trọng lượng ñể xác ñịnh yếu tố sau: 2.2.1.1 Xác ñịnh ñộ ẩm nguyên liệu w w ω = ⋅1 0 % = ⋅1 0 % m mo + w Trong đó, m: khối lượng chung nguyên liệu m0: khối lượng chất khô tuyệt đối (khơng có ẩm) W: khối lượng nước chứa nguyên liệu 2.2.1.2 Xác ñịnh hàm lượng tro nguyên liệu: % Tro = m3 − m4 × 100% ; m2 ∑ % Tro % Tro trung bình = Trong đó, m3 (gam): Khối lượng bì chén sứ mẫu sau xác định độ ẩm m4(gam): Khối lượng chén sứ mẫu sau tro hóa m2 (gam): Khối lượng sống đời ban ñầu 2.2.2 Phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử (AAS) [1] 2.2.3 Phương pháp chiết tách [5] 10 2.2.3.1 Phương pháp chưng ninh: Lá sống ñời tươi ñược cắt nhỏ cho vào bình cầu có gắn sinh hàn hồi lưu, chưng ninh với nước 900C, áp suất thường để chiết tách lượng axit hữu có mẫu với dung môi nước Tiến hành chưng ninh với tỉ lệ rắn lỏng 10 gam tươi/100ml, 200ml, 300ml nước thời gian chiết 4, 6, 8, 10 2.2.3.2 Phương pháp chiết soxhlet: Lá sống đời phơi khơ, xay nhỏ thành bột, cho vào chiết soxhlet, tiến hành chiết nhiệt độ sơi dung mơi C2H5OH 960, axeton, metanol, khảo sát hàm lượng axit tổng theo dung mơi thời gian chiết 2.2.4 Phương pháp chuẩn độ (TCVN 4589-88) [1] 2.2.5 Phương pháp quang phổ hồng ngoại (IR) [1] 2.2.6 Phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) [1] 12 3.1.2 Xử lí nguyên liệu 3.1.2.1 Nguyên liệu Lá sống ñời tươi, thu hái vào khoảng tháng 8-9, hái vào buổi sáng, từ sáng đến Chọn hái tươi, khơng bị vàng, úng, khơng bị hư, sâu, có kích thước ñều nhau, dài từ 10-12 cm, rộng từ 5-6 cm 3.1.2.2 Làm nguyên liệu Sau hái cho vào chậu nước lớn, cho nước ngập lá, ngâm khoảng phút, dùng tay khuấy vớt rá bụi bẩn sau nước Tiến hành rửa lần cho hoàn toàn 3.1.2.3 Hong khô Lá sau rửa sạch, dùng tay vẩy mạnh liên tiếp rá đựng Làm khơ tự nhiên nhiệt độ phịng, sau tiếp tục làm khơ tủ sấy khoảng 50-600C cho ñến bề mặt làm khơ hồn tồn 3.1.2.4 Xay ngun liệu thành bột Lá sau ñược lựa chọn kĩ lượng ñược xay nhỏ máy xay gia ñình 3.2 Xác ñịnh ñộ ẩm, hàm lượng tro hàm lượng kim loại nặng 3.2.1 Xác ñịnh ñộ ẩm - Độ ẩm mẫu: ω % = (m1 + m ) − m3 × 100% (3.1) m2 13 - Độ ẩm trung bình ωTB (%) = ∑ ω (%) (3.2) Trong đó, m1(gam) : Khối lượng bì chén sứ m2 (gam): Khối lượng mẫu sống ñời m3(gam) : Khối lượng chén sứ mẫu sống ñời sau sấy ω (%) : Độ ẩm mẫu ω TB (%) : Độ ẩm trung bình Kết khảo sát độ ẩm tươi ñộ ẩm tương ñối ngun liệu bột trình bày qua bảng 3.1 bảng 3.2 Bảng 3.1 Kết khảo sát ñộ ẩm sống ñời tươi STT m1(gam) m2 (gam) m3 (gam) ω (%) 103,68 6,01 104,19 91,51 104,07 106,37 6,00 6,02 104,58 106,88 91,50 91,53 ω tb (%) 91,51 Bảng 3.2 Kết khảo sát ñộ ẩm tương ñối nguyên liệu bột STT m1 (gam) m2 (gam) m3 (gam) ω (%) ω tb (%) 108,03 6,00 113,11 15,33 15,33 105,26 6,01 110,35 15,25 102,35 6,02 117,44 15,41
Nhận xét: Độ ẩm sống ñời tươi 91,51 ± 0,1% Từ kết cho thấy sống đời có hàm lượng nước cao cao nhiều so với nhiều loại khác 14 3.2.2 Xác ñịnh hàm lượng tro H=
Cách tính kết quả: Trong ñó: m1 100% m0 (3.3) m0 (gam): khối lượng mẫu sống đời tươi trước tro hố m1 (gam): khối lượng tro H (%) : hàm lượng tro sống ñời Kết khảo sát hàm lượng tro sống đời trình bày bảng 3.3 sau: Bảng 3.3 Kết xác ñịnh hàm lượng tro sống ñời tươi TT m1 (gam) m2 (gam) m3 (gam) m4 (gam) mtro (gam) H(%) 51,784 56,809 5,025 51,839 0,055 1,095 51,757 56,807 5,050 51,812 0,055 1,089 47,255 52,281 5,026 47,311 0,056 1,114 Htb(%) 1,099 Trong m0: khối lượng cốc m1: khối lượng cốc mẫu trước tro hoá m3: khối lượng mẫu m4: khối lượng cốc mẫu sau tro hoá H : hàm lượng tro sống ñời
Nhận xét: Hàm lượng tro trung bình sống đời tươi 1,099 ± 0,01% 15 3.2.3 Xác ñịnh hàm lượng kim loại nặng Kết ñược thể bảng 3.4 Bảng 3.4 Kết hàm lượng kim loại nặng sống ñời TT Tên kim loại Phương pháp thử (AAS) Pb Cu Zn As TCVN 6626: 2000 TCVN 6626: 2000 TCVN 6626: 2000 TCVN 6193:1996 Kết (mg/l) Tiêu chuẩn CODEX STAN (mg/Kg) [7] Kết (mg/kg) Hàm lượng cho phép (mg/kg) [4] 0,0519 0,0333 0,1094 0,0037 0,3 5,0 5,0 0,2 2,582 1,657 5,443 0,184 30 40
Nhận xét: Hàm lượng kim loại Cu, Zn, As nằm khoảng cho phép, riêng Pb cao mức cho phép 3.3 Chiết tách axit hữu 3.3.1 Chiết tách axit hữu 3.3.1.1 Phương pháp chưng ninh 3.3.1.2 Phương pháp chiết soxhlet: 3.3.2 Đánh giá cảm quan dịch chiết Để xác định xác tổng lượng axit dịch chiết ứng với ñiều kiện khảo sát khác nhau, ta dùng phương pháp chuẩn ñộ, sử dụng dung dịch NaOH 0,01N, thị phenolphtalein 3.4 Ảnh hưởng ñiều kiện chiết tách ñến tổng lượng axit phương pháp chưng ninh chiết soxhlet 3.4.1 Ảnh hưởng thể tích dung mơi thời gian chiết ñến tổng lượng axit phương pháp chưng ninh 16 Kết khảo sát trình bày bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết xác ñịnh tổng lượng axit sống ñời tươi phương pháp chưng ninh Kí hiệu mẫu M (g) V nước (ml) Thời gian (giờ) Thể tích dịch chiết pha (ml) L1 9,99 100 250 L2 10,01 100 250 L3 10,01 100 250 L4 10,00 100 10 250 L5 10,01 200 250 L6 10,00 200 250 L7 10,00 200 250 L8 9,99 200 10 250 Thể tích mẫu hút chuẩn độ (ml) Thể tích NaOH 0,01N(ml) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 14,50 14,30 14,60 15,50 15,70 15,80 4,90 5,10 5,00 0,35 0,35 0,40 13,35 13,40 13,50 17,90 17,50 18,10 7,00 6,10 6,60 3,30 3,20 3,20 Thể tích NaOH trung bình 0,01N (ml) 14,47 15,70 5,00 0,37 13,42 17,83 6,.65 3,23 17 0,40 0,46 0,50 0,50 1,30 L10 10,01 300 250 1,21 1,15 1,20 0,50 L11 10,00 300 250 0,5 0,50 0,50 0,60 L12 9,99 300 10 250 0,53 0,50 0,50 Từ bảng số liệu thực nghiệm ta có sơ đồ phụ thuộc thể L9 10,00 300 250 tích dung môi thời gian chiết phương pháp chưng ninh Thể tích NaOH 0,01N chuẩn độ (ml) thể qua hình 3.4 sau: 20 15 17.83 15.7 14.47 13.42 100 ml 10 200 ml 6.65 5 3.23 1.21 0.46 0.5 0.37 0.53 300ml 10 Thời gian chiết (giờ) Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng tổng lượng axit vào thể tích dung mơi thời gian chiết phương pháp chưng ninh
Nhận xét: - Từ kết bảng 3.5 mơ tả đồ thị hình 3.4 cho thấy phương pháp chưng ninh, chiết với thể tích nước 18 200 ml thời gian chiết thu ñược tổng lượng axit lớn 3.4.2 Ảnh hưởng dung mơi thời gian chiết đến tổng lượng Sau chuẩn ñộ dịch chiết dung mơi khác nhau, kết thu được thể bảng 3.6 ñồ thị biểu diễn ảnh hưởng dung mơi hình 3.12 sau: Bảng 3.6 Kết khảo sát ảnh hưởng tổng lượng axit sống ñời vào dung môi thời gian chiết m STT (g) Dm Cồn 96 Thời V dịch V mẫu hút V NaOH gian chiết chuẩn ñộ 0,01N (giờ) pha (ml) (ml) (ml) C1 10 250 C2 10 250 C3 10 10 250 C4 10 12 250 C5 10 14 250 C6 10 16 250 A1 10 250 A2 10 250 Axeton 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 10,6 10,8 11,1 15,5 15,5 15,5 21,8 21,7 21,8 26,0 25,9 25,8 26,5 26,6 26,7 23,2 23,0 23,1 8,6 8,7 8,8 9,0 8,8 8,9 V NaOH 0,01N trung bình (ml) 10,8 15,5 21,8 25,9 26,6 23,1 8,7 8,9 19 A3 10 10 250 A4 10 12 250 A5 10 14 250 A6 10 16 250 M1 10 250 M2 10 250 M3 10 10 250 M4 10 12 250 M5 10 14 250 M6 10 16 250 Metanol 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 15,4 15,1 15,0 10,0 9,9 10,2 2,4 2,2 2,3 1,4 1,2 1,3 2.8 2.8 2.9 2.9 3.2 3.1 3.2 3.2 3.3 3.8 4.1 3.8 5.3 5.2 5.4 4.7 4.8 4.9 15,2 10,0 2,3 1,3 2.8 3.1 3.2 3.9 5.3 4.8 Để dễ dàng cho việc so sánh dung môi thời gian chiết, ta tiến hành thiết lập ñồ thị biểu diễn phụ thuộc yếu tố vào ñồ thị hình 3.8 sau: Thể tích NaOH 0,01N trung bình (ml) 20 30 26,6 25,9 25 23,1 21,8 20 15,5 15 10 Cồn 96 15,2 10,8 Axeton 10 8,9 8,7 5,3 3,05 2,83 3,23 4,8 3,88 2,3 1,3 Metanol 10 12 14 16 Thời gian chiết (giờ) Hình 3.10 Đồ thị biễu diễn ảnh hưởng tổng lượng axit thu vào dung mơi chiết thời gian chiết phương pháp chiết
Nhận xét: So sánh giá trị ñược biểu diễn đồ thị hình 3.8 ta thấy sử dụng phương pháp chiết soxhlet với dung môi cồn 960 thời gian chiết 14 thu ñược tổng lượng axit lớn 3.5 Kiểm tra dịch chiết phổ IR Kiểm tra dịch chiết axit phương pháp chưng ninh phổ IR, phổ ñồ ñược thể hình 3.5 Hình 3.11 Quang phổ hồng ngoại (IR) dịch chiết axit 21 Hình 3.12 Quang phổ IR axit adipic tinh khiết
Nhận xét: So sánh phổ IR dịch chiết hình 3.11 với phổ IR axit adipic tinh khiết hình 3.12 ta thấy pic phổ gần giống Mặt khác, phổ IR hình 3.5 ta thấy xuất nhiều pic có xuất pic vị trí 3397,6 cm-1 1726,7 cm-1 tần số đặc trưng nhóm –OH, –C=O ñó kết luận dịch chiết sống ñời tươi chưng ninh nước có axit hữu 3.6 Este hoá axit hữu [2] Dịch chiết axit cồn 960 sau sử lý este hóa chạy sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) 3.7 Xác ñịnh thành phần phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) Kết ñịnh danh thành phần sống đời sau este hố dịch chiết phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) thể hình 3.16 định danh bảng 3.7 22 Hình 3.16 Quang phổ GC-MS dịch chiết axit sau este hoá Bảng 3.7 Thành phần hoá học dịch chiết axit 23
Từ kết hình 3.16 bảng 3.7, ta định danh ñược 13 cấu tử, ñó có xuất hợp chất có hoạt tính sinh học quý mà giới ñang quan tâm Lupeol sống đời
Để xác định rõ có mặt Lupeol, tơi tiến hành xây dựng sơ đồ phân mảnh Lupeol với giá trị M= 426; 411; 315; 234; 218; 161; 81 theo 07 giai ñoạn sau: * Hướng từ M= 426 ñến 234 CH2 CH2 H 3C H 3C (1) CH3 CH3 CH3 + CH3 CH2 CH3 HO [A] H 3C CH3 Formula Weight CH3 HO CH3 H 3C + Formula Weight [A ] = 411.6823314 = 426.7174 CH H3C + CH CH (2) O + CH CH HO H 3C CH + Formula Weight [A ] = 411.6823314 H 3C + CH - CH Formula Weight [A ] ++- = 315.5121514 + - O CH2 CH3 + CH2 + CH2 (3) + CH2 CH3 H3C ++Formula Weight [A2] = 315.5121514 H3C CH3 ++ Formula Weight [A3] = 234.4190028 24 * Hướng từ M= 426 ñến 81 CH2 H3C (4) CH3 + H2C CH3 H2C + [B] CH3 ++ CH3 HO CH3 H3C Formula Weight [A] = 426.7174 Formula Weight = 218.3765428 + H2C + CH (5) + H2C + H2C + H2C +++ ++ Formula Weight [C] = 161.2617342 Formula Weight [B] = 218.3765428 + H2C + CH (6) H3C + CH + H2C + +++ Formula Weight [D] = 135.2255514 Formula Weight[C] = 161.2617342 H3C + CH + CH (7) + [E] + Formula Weight [D] = 135.2255514 Formula Weight = 81.1351114
Nhận xét: Từ sơ đồ phân mảnh cơng thức cấu tạo Lupeol phù hợp với phổ MS ño ñược, ñó xác ñịnh có hợp chất Lupeol thành phần dịch chiết 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN - Xác ñịnh số ñại lượng vật lí như: độ ẩm sống ñời tươi 91,51 ± 0,1%; ñộ ẩm tương ñối nguyên liệu bột 15,33 ± 0,053%; hàm lượng tro trung bình sống đời tươi 1,099 ± 0,01%; hàm lượng kim loại nặng Cu, Zn, As nằm khoảng cho phép, riêng Pb cao mức cho phép - Điều kiện chiết tách cho kết tổng lượng axit cao phương pháp chưng ninh với tỉ lệ R/L là: 10 gam nguyên liệu/200ml nước, với thời gian chưng ninh khoảng - Điều kiện chiết tách cho kết tổng lượng axit cao phương pháp chiết soxhlet với dung mơi cồn 96o chiết khoảng thời gian 14 - Định danh chất sống ñời phương pháp GC-MS xác định 13 cấu tử có số axit như: axit cinamic, axit stearic, axit añipic, axit hexadecen–9–noic, axit octadecanoic ñồng thời xác ñịnh ñược số chất khác như: Muristoyl pantetheine , Lupeol Lupeol xem chất có hoạt tính sinh học quý mà giới Việt Nam ñang quan tâm KIẾN NGHỊ Đề tài cần ñược phát triển thêm - Nghiên cứu hoạt tính sinh học dịch chiết sống ñời - Nghiên cứu chiết tách xác ñịnh thành phần hố học khác, 26 đặc biệt Lupeol hoạt tính sinh học sống ñời mở rộng nghiên cứu thân rễ sống ñời