(Luận văn thạc sĩ) khảo sát thành phần hóa học của loài địa y parmotrema sancti angelii

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC BỘ MƠN HĨA HỌC HỮU CƠ  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA h LOÀI ĐỊA Y PARMOTREMA SANCTI-ANGELII GVHD: ThS Dương Thúc Huy SVTH: Nguyễn Trường Diễm Tiên MSSV: K37.106.111 Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2016 LỜI CẢM ƠN Bằng tất trân trọng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến với: Thầy Dương Thúc Huy – người thầy đầy tâm huyết nhiệt tình Thầy khơng dạy cho em kiến thức chuyên môn với kinh nghiệm nghiên cứu quý báu mà giúp đánh thức niềm say mê nghiên cứu khoa học em suốt thời gian thầy hướng dẫn Tất q Thầy Cơ khoa Hóa, trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh tận tình truyền đạt kiến thức quý báu suốt thời gian em theo học hồn thành khóa luận Các anh chị học viên cao học bạn sinh viên mơn Hóa Hữu cơ, Khoa Hóa học, trường Đại học Khoa học Tự nhiên động viên, giúp đỡ suốt trình thực đề tài h Các bạn Trương Tấn Phát, Bùi Thị Lan Anh, Võ Ngọc Chung Tú, bạn sinh viên Khoa Hóa trường Đại Học Sư Phạm Thành phố Hồ Chí Minh tận tình cộng tác, giúp đỡ em trình nghiên cứu Và cuối xin cảm ơn gia đình – chỗ dựa vững tinh thần suốt thời gian theo học thực đề tài trường Đại Học Sư Phạm Thành phố Hồ Chí Minh (i) MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN (i) MỤC LỤC (ii) DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT (iv) DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ (v) DANH MỤC CÁC BẢNG (vi) DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC PHỔ (vii) LỜI MỞ ĐẦU (viii) CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ ĐỊA Y 1.1.1 Định nghĩa phân loại 1.1.2 Hoạt tính hợp chất địa y NHỮNG NGHIÊN CỨU HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI ĐỊA Y h 1.2 THUỘC CHI PARMOTREMA CHƯƠNG 2: 2.1 THỰC NGHIỆM 14 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ, DỤNG CỤ 14 2.1.1 Hóa chất 14 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ .14 2.2 NGUYÊN LIỆU .15 2.3 QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM .15 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .17 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT H3.79: 17 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT P2: 20 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT .21 4.1 KẾT LUẬN 21 4.2 ĐỀ XUẤT .21 (iii) TÀI LIỆU THAM KHẢO .22 PHỤ LỤC h (iii) DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT s : Mũi đơn (Singlet) d : Mũi đôi (Doublet) t : Mũi ba (Triplet) m : Mũi đa (Multiplet) NMR : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Spectroscopy) H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance 13 : Carbon Nuclear Magnetic Resonance J : Hằng số tương tác spin-spin ppm : Part per million UV : Tia cực tím (Ultra violet) EA : Ethyl acetate C : Chloroform Me : Methanol AcOH : Acetic acid H : Hexane Ac : Acetone CC : Sắc ký cột C-NMR h : (iv) DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Ba dạng địa y Hình 1.2 Các hợp chất cô lập từ địa y thuộc chi Parmotrema 10 Hình 2.1 Tản địa y Parmotrema sancti-angelii 15 Hình 3.1 Cấu trúc hóa học zeorin H3.79 18 Hình 3.2 Cấu dạng hợp chất H3.79 .18 Hình 3.3 Cơng thức hợp chất P2 20 Hình 4.1 Hai hợp chất P2 H3.79 cô lập từ địa y Parmotrema sancti-angelii .21 Sơ đồ 2.1 Qúa trình ly trích lập địa y Parmotrema sancti-angelii .16 h (v) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Hoạt tính điều tiết tăng trưởng thực vật bậc cao Bảng 1.2 Hoạt tính kháng virus ức chế enzyme virus Bảng 1.3 Hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm Bảng 1.4 Hoạt tính gây độc tế bào kháng đột biến Bảng 1.5 Các loại enzyme bị ức chế hợp chất địa y Bảng 3.1 Dữ liệu phổ NMR hợp chất zeorin H3.79 19 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ NMR hợp chất atranol P2 20 h (vi) DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC PHỔ Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất H3.79 dung môi Acetone-d Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất H3.79 dung môi Acetone-d Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất P2 dung môi Accetone-d h LỜI MỞ ĐẦU Cùng với phát triển Y học nói chung Y học dân tộc nói riêng xu hướng quay sản phẩm thuốc có nguồn gốc từ tự nhiên, vừa mang lại hiệu cao vừa tác dụng phụ Nghiên cứu hợp chất thiên nhiên đóng góp thành tựu quý báu cho ngành Hóa học ngành Sinh học Y dược học Sự kết hợp chứng khoa học từ lĩnh vực nghiên cứu hợp chất thiên nhiên hoạt tính sinh học góp phần củng cố phát triển Y học cổ truyền Ngay từ thời trung đại, nhiều người làm nghề y sử dụng loài địa y làm thuốc chữa bệnh Y học cổ truyền Trung Quốc sử dụng 71 loài địa y 17 chi (9 họ) với mục đích làm thuốc chữa bệnh Địa y thuộc họ Parmeliaceae, Usneaceae, Cladionaceae sử dụng nhiều hết Một vài loại cao điều chế từ địa y sử dụng để trị bệnh khác Lobaria pulmonaria chữa bệnh phổi, Xanthoria parientina chữa bệnh vàng da, chi Usnea để dưỡng tóc, Cetraria islandica h (được gọi Irland moss) chữa nhiễm khuẩn tiêu chảy Ngồi cơng dụng chữa bệnh, địa y cịn sử dụng làm thực phẩm, mỹ phẩm, xà phòng, nước hoa.[9] Theo tác giả Huneck (1999),[13] Muller (2001),[23] Boustie (2007),[2] từ xưa có khoảng gần 000 hợp chất địa y cô lập thử nghiệm hoạt tính sinh học kháng khuẩn, kháng virus, chống oxy hóa, kháng ung thư, kháng viêm, kháng enzyme … Đi từ ứng dụng Y học quý giá kế thừa nghiên cứu có địa y ngồi nước, chúng tơi tiến hành nghiên cứu loài địa y Parmotrema sancti-angelii (vi) Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 KHÁI QUÁT VỀ ĐỊA Y 1.1.1 Định nghĩa phân loại Địa y, dạng thực vật bậc thấp đặc biệt, kết cộng sinh nấm (mycobiont) thành phần quang hợp (photobiont) thường tảo (green alga) hay vi khuẩn lam (cyanobacterium) Khoảng 17 000 loài địa y biết Địa y thường chia làm ba dạng: dạng khảm (crustose), dạng phiến (foliose) dạng sợi (frucose).[30] h Xanthoria sp (địa y khảm) Xanthoparmelia cf lavicola (địa y phiến) Hypogymnia cf tubulosa (địa y sợi) Hình 1.1 Ba dạng địa y Thành phần tảo địa y sản sinh carbohydrate q trình quang hợp, cịn thành phần nấm sản sinh hợp chất tự nhiên (để chống tia UV, ngăn chặn sâu bọ loài động vật ăn cỏ, …), cung cấp nước khoáng chất Kết từ cộng sinh giúp địa y sinh trưởng sống sót điều kiện khắc nghiệt, chủ yếu vùng vĩ độ cao, vùng nhiệt đới, diện khắp nơi đá, đất, cây, thân cây, kim loại, thủy tinh.[21] Để hiểu chất địa y giải thích nguồn gốc chúng, nhà thực vật học thử tổng hợp địa y từ tảo nấm Mặc dù hai thành phần nuôi cấy riêng rẽ việc tổ hợp lại thành phần địa y gặp nhiều khó khăn Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT H3.79: Hợp chất H3.79 (4.9 mg) thu từ phân đoạn H1.5 địa y Parmotrema sancti-angelii với đặc điểm sau: • Là chất bột vơ định hình màu trắng • Phổ 1H-NMR (500 MHz, Acetone-d6): Phụ lục • Phổ 13C-NMR (125 MHz, Acetone-d6): Phụ lục  Biện luận cấu trúc hợp chất H3.79: Phổ 1H-NMR cho thấy nhóm methyl mũi đơn δ 1.19 (3H, s, H-23), 1.02 (3H, s, H-24), 0.91 (3H, s, H-25), 1.09 (3H, s, H-26), 1.07 (3H, s, H-27), 0.81 (3H, s, H-28), 1.26 (3H, s, H-29), 1.13 (3H, s, H-30), hai nhóm oxymethine δ 3.93 (1H, m, H-6) 4.06 (1H, ddd, J=11.5, 9.5, 4.5 Hz, H-16) Phổ 13C-NMR cho thấy diện 30 carbon, bao gồm nhóm oxymethine δ C 65.8 (C-16) 67.1 (C-6), carbon tứ cấp, nhóm methine, nhóm methylene nhóm methyl Dữ liệu phổ 1H 13C- h NMR H3.79 cho thấy có tương đồng với liệu zeorin vòng A, B, C, E So sánh liệu phổ NMR H3.79 zeorin khác biệt chúng xuất nhóm oxymethine (δ H 4.06, ddd, J=11.5, 9.5, 4.5 Hz) thay cho nhóm methylene C-16 hợp chất zeorin Nhóm methine H-5 (δ H 0.87, d, J = 10.5 Hz) cho tương tác spin spin 1H-1H nhị trục với nhóm methine (δ H 3.93, m, H6), giúp tái khẳng định vị trí 6α nhóm hydroxyl Ngồi ra, phân tích số ghép H-16 cho thấy proton ghép cặp với hai proton khác vị trí trục với giá trị J aa = 11.5 Hz 9.5 Hz, xác nhận định hướng β nhóm 16-OH Từ kết phân tích nêu trên, kết hợp với tài liệu tham khảo,[4] H3.79 xác định leucotylin (Hình 3.1) 17 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp 20 12 25 18 26 14 OH 28 16 Zeorin 29 30 22 27 OH 23 24 20 H3.79 12 14 28 OH 16 23 OH 24 29 h 30 26 25 22 27 OH Hình 3.1 Cấu trúc hóa học zeorin H3.79 20 26 25 CH3 CH3 H 24 CH3 H3 C 23 H 22 OH 14 CH3 16 18 12 HO CH 27 28 H Hình 3.2 Cấu dạng hợp chất H3.79 18 H3 C 29 30 CH3 OH Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.1 Dữ liệu phổ NMR hợp chất zeorin H3.79 H3.79 zeorin H3.79 δC δC δH δH 10 11 12 13 14 15 40.5 18.6 43.9 33.7 61.2 69.5 45.5 43.0 49.9 39.5 20.8 24.1 49.6 42.0 34.5 41.1 18.3 43.7 33.4 60.0 67.1 41.1 43.5 49.1 40.0 20.9 23.3 48.6 42.5 43.9 0.82 (d, 11.0) 3.96 (td, 10.8, 4.0) 0.87 (d, 10.5) 3.93 (m) 16 21.2 65.8 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 54.1 44.2 41.4 26.7 51.2 74.4 36.9 22.2 17.2 18.4 17.2 16.2 28.8 30.9 60.9 45.4 40.0 26.3 50.9 nd 36.5 21.6 16.5 17.6 16.5 17.6 27.0 30.3 N h zeorin 4.06 (ddd, 11.5, 9.5, 4.5) 1.48 (m) 2.17 (1H, m) 2.50 (1H, m) 1.19 (3H, s) 1.00 (3H, s) 0.85 (3H, s) 1.03 (3H, s) 0.96 (3H, s) 0.75 (3H, s) 1.14 (3H, s) 1.19 (3H, s) 1.02 (3H, s) 0.91 (3H, s) 1.09 (3H, s) 1.07 (3H, s) 0.81 (3H, s) 1.26 (3H, s) 1.18 (3H, s) 1.13 (3H, s) 19 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT P2: Hợp chất P2 (3 mg) thu từ phân đoạn H1.5 địa y Paemotrema sancti-angelii với đặc điểm sau: • Chất bột vơ định hình màu trắng • Phổ 1H-NMR (500 MHz, Acetone): Phụ lục : 2.23 (3H, s),  Biện luận cấu trúc hợp chất P2: Phổ 1H-NMR cho thấy diện hai proton vòng thơm δ 6.26 (2H, s), độ dịch chuyển hóa học cho thấy proton chịu ảnh hưởng nhóm –OR đẩy electron, đồng thời giúp phát P2 hợp chất đối xứng hai proton phải vị trí meta Ngồi phổ 1H-NMR cịn cho thấy nhóm methyl thơm tín hiệu δ 2.23 (3H, s) nhóm aldehyde δ 10.26 (1H, s) Từ liệu phổ kết hợp với tài liệu tham khảo[14] hợp chất P2 xác định atranol (Hình 3.2) CH3 h HO OH H O Hình 3.3 Cơng thức hợp chất P2 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ NMR hợp chất Atranol P2 N Atranol, δ H P2, δ H N 6.25 (3H, s) 6.26 (3H, s) Atranol, δ H P2, δ H 6.25 (3H, s) 6.26 (3H, s) 10.27 (1H, s) 10.26 (1H, s) 2.23 (3H, s) 2.23 (3H, s) 20 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 KẾT LUẬN Từ mẫu địa y Parmotrema sancti-angelii thực phương pháp sắc ký cô lập hai hợp chất P2 H3.79 Sử dụng phương pháp phổ nghiệm đại kết hợp với so sánh tài liệu tham khảo xác định cấu trúc hợp chất hữu H3.79 P2 Đây hai hợp chất lần đầu tìm thấy loài địa y Parmotrema sancti-angelii CH3 20 HO 25 CH3 H 24 CH3 OH 23 H 18 12 22 OH 14 CH3 16 HO CH3 27 28 H H3 C 29 30 CH3 OH h H CH3 H3 C O 26 Hình 4.1 Hai hợp chất P2 H3.79 cô lập từ địa y Parmotrema sancti-angelii 4.2 ĐỀ XUẤT Vì điều kiện thời gian vật chất không cho phép, nên phạm vi đề tài này, khảo sát phân đoạn H1.5 Trong thời gian tới, có điều kiện tiến hành khảo sát phân đoạn cao cịn lại Đồng thời chúng tơi tiến hành thử nghiệm số hoạt tính sinh học loại cao hợp chất cô lập 21 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Ana C M., Beatriz A., Lima E P., Honda N K (2009), “Chemical constituents of Parmotrema lichexanthonicum Eliasaro & Adler – Isolation, structure modification and evaluation of antibiotic and cytotoxic activities”, Química Nova, 32, 12-20 [2] Boustie J., Grube M (2007), “Lichens - a promising source of bioactive secondary metabolites”, Plant Genetic Resources, 3, 273-287 [3] Boustie J., Tomashi S., Grube M (2010), “Bioactive lichen metabolites: alpine habitats as an untapped source”, Phytochemistry Review [4] Brahmachari G and Chatterjee D (2002), Triterpenes from Adiantum lunulactum, Fitoterapia, 73(5), 363-368 [5] Bugni T S., Andjelic C D., Pole A R., Rai P., Ireland C M., Barrows L R (2009), “Biologically active components of a Papua New Guinea analgesic and anti- h inflammatory lichen preparation”, Fitoterapia, 80, 270-273 [6] David F., Elix J A., Binsamsudin M W (1990), “Two new aliphatic acids from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale”, Aust J Chem, 43, 1297-1300 [7] Duong Thuc Huy, Huynh Bui Linh Chi, Ha Xuan Phong, Ton That Quang, Nguyen Kim Phi Phung (2011), “Some phenolic compounds of the lichen Parmotrema planatilobatum (Hale) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp Chí Phát Triển Khoa Học Công Nghệ, 14(6), 5-10 [8] Duong Thuc Huy, Huynh Bui Linh Chi, Ha Xuan Phong, Tuong Lam Truong, Ton That Quang, Joel Boustie, Nguyen Kim Phi Phung (2012), “New diphenyl ether from lichen Parmotrema planatilobatum (Hale) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp chí Hố Học, 50(4A), 199-202 [9] Egan R S., Harms R., Widhelm T (2005), “Studies on the lichen Parmotrema rigidum s.lat from North and South America”, The Bryologist, 108(3), 402-405 22 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp [10] Fazio A T., Bertoni M D., Adler M T (2009), “Culture studies on the mycobiont isolated from Parmotrema reticulatum (Taylor) Choisy: metabolite production under different conditions”, Mycological Progress, 8(4), 359-365 [11] Ha Xuan Phong, Chemical constituents of lichen Parmotrema sancti-angelii collected in Vienam, A thesis for Master of Science, University of Science, Nation University-Ho Chi Minh City, 2012 [12] Honda N K., Pavan F R., Coelho R G., Andrade Leite S R., Micheletti A C., Lopes T I B., Misutsu M Y., Beatriz A., Bruma R L., Leite C Q F (2009), “Antimycobacterial activity of lichen substances”, Phytomedicine, 1-5 [13] Huneck S (1999), “The significance of lichens and their metabolites”, Naturwissenschaften, 86, 559–570 [14] Huneck S., Yoshimura I (1997), Identification of lichen substances, Springer Verlag Berlin, 169 [15] Huynh Bui Linh Chi, Chemical constitients of the lichen Parmotrema prasorediosic (Nyl.) Hale, A thesis for Doctor of Philosophy, University of Science, Nation University-Ho Chi Minh City, 2014 h [16] Huynh Bui Linh Chi, Duong Thuc Huy, Takao Tanahashi, Nguyen Kim Phi Phung (2010), “Contribution to the study on chemical constituents of the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp chí Hố Học, 48(4B), 332-337 [17] Huynh Bui Linh Chi, Duong Thuc Huy, Takao Tanahashi, Nguyen Kim Phi Phung (2011), “Two new compounds from the lichen Parmotrema praesorediosum (Nyl.) Hale (Parmeliaceae)”, Tạp chí Khoa Học Cơng nghệ, 49(5B), 430-435 [18] Javaprakasha G K., Rao L J (2000), “Phenolic constituents from the lichen Parmotrema stuppeum (Nyl.) Hale and their antioxidant activity”, Znaturforsch[C], 55, 1018-1022 [19] Keogh M F (1977), “Malonprotocetraric acid from Parmotrema conformatum”, Phytochemistry, 16(7), 1102 [20] Kharel M K., Rai N P., Manandhar M D., Elix J A., Wardlan J H (2000), “Dehydrocollatolic acid, a new depsidone from the lichen Parmotrema nilgherrense”, Aust J Chem, 53, 891-892 23 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp [21] Kim D S (1997), “Anticomplementary activity of ergosterol peroxide from Naematoloma fasciculare and reassignment of NMR data”, Archives of Pharmacal Research, 20(3), 201-205 [22] Le Hoang Duy, Chemical study of common lichens in the south of Vienam, A thesis for Doctor of Philosophy, Kobe Pharmaceutical University, 2-8, 2012 [23] Muller K (2001), “Pharmaceutically relevant metabolites from lichens”, Applied Microbiology and Biotechnology, 56, 9-16 [24] Neeraj V., Behera B C., Parizadeh H., Bo S (2011), “Bactericidal activity of some lichen secondary compounds of Cladonia ochrochlora, Parmotrema nilgherrensis and Parmotrema sancti-angelii”, International Journal of Drug Development and Research, 3(3), 222-232 [25] O’Donovan D G., Robert G., Keogh M F (1980), “Structure of the β- orcinol depsidones, connorstictic acid and consalazinic acid”, Phytochemistry, 19, 2497-2499 [26] Ramesh P., Shere E., Baig A (1994), “Chemical investigation of South Indian lichen: Parmelia praesorediosa (Nyl.) and Parmelia reticulate (Tayl.)”, Indian h Journal of Heterocyclic Chemistry, (3), 211-212 [27] Sakurai A., Goto Y (1987), “Chemical studies on the lichen I The structure of isolecanoric acid, a new ortho-depside isolated from Parmelia tinctorum Despr.”, Bulletin of the Chemical Society of Japan, 60, 1917-1918 [28] Santos L C., Honda N.K., Carlos I Z., Vilegas W (2004), “Intermediate reactive oxygen and nitrogen from macrophages induced by Brazilian lichens”, Fitoterapia, 75, 473-439 [29] Vũ Thị Kiều Trang, Khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate lồi địa y Parmotrema sp thu hái tỉnh Bình Thuận, Khóa luận Tốt nghiệp, Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh, 2014 [30] Yit Heng Choi, Generic potential of lichen-forming fungi in polyketide biosynthesis, A thesis for Doctor of Philosophy, RMIT University, 2008, 10-15 24 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp h 25 Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp PHỤ LỤC h Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp NHẬN XÉT CỦA HỘI ĐỒNG h Nguyễn Trường Diễm Tiên Khóa luận tốt nghiệp h 4.2 4.0 3.8 3.6 3.4 3.2 3.0 2.8 2.4 2.6 f1 (ppm) 2.2 2.0 1.8 2.88 2.80 2.71 5.52 3.19 3.09 2.73 16 1.37 16 1.26 1.09 1.00 h 3.956 3.936 3.915 4.089 4.080 4.069 4.065 4.061 4.056 4.046 4.038 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất H3.79 dung môi Acetone-d6 1.6 1.259 1.192 1.124 1.087 1.066 1.023 0.909 0.884 0.878 0.863 0.813 1.478 2.087 2.523 2.504 2.482 2.463 2.402 4.089 4.080 4.069 4.065 4.061 4.056 4.046 4.038 3.936 3.915 3.598 3.587 1H spectrum of (16) H.3.79 - ACETONE - 1H 350 300 250 200 23 29 24 30 1.4 1.2 26 27 1.0 150 25 28 100 17 50 21 0.8 13C spectrum of (16) 18.262 17.616 16.519 23.282 21.553 20.881 26.954 26.320 30.255 33.412 36.478 45.396 43.906 43.720 42.502 41.083 39.989 50.878 49.141 48.603 60.876 59.970 67.126 65.839 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất H3.79 dung môi Acetone-d6 69.770 H.3.79 - ACETONE - 13C 26 28 17 11 12 19 29 10 23 24 20 30 13 25 27 15 h 21 18 16 14 80 78 76 74 72 70 68 66 64 62 60 58 56 54 52 50 48 46 f1 (ppm) 44 42 40 38 36 34 32 30 28 26 24 22 20 18 16 2.232 6.266 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất P2 dung môi Acetone-d6 10.264 P2 – ACETONE – 1H CH3 HO OH H O h 12.0 11.5 11.0 10.5 2.00 1.10 10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 f1 (ppm) 3.30 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0