(Luận Văn) Phân Lập Và Tuyển Chọn Những Chủng Nấm Men Có Khả Năng Lên Men Rượu Cao Từ Bánh Men Thu Thập Tại Yên Phong Bắc Ninh

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MẪN VĂN HOẰNG Tên đề tài: a lu n PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN NHỮNG CHỦNG NẤM MEN n va CÓ KHẢ NĂNG LÊN MEN RƢỢU CAO TỪ BÁNH MEN THU tn to THẬP TẠI YÊN PHONG - BẮC NINH p ie gh oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC d a nv a lu u nf Hệ đào tạo ll : Chính quy m tz n oi Chuyên ngành : Công nghệ sinh học :CNSH & CNTP Khóa học : 2011 - 2015 z Khoa m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MẪN VĂN HOẰNG Tên đề tài: a lu n PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN NHỮNG CHỦNG NẤM MEN n va CÓ KHẢ NĂNG LÊN MEN RƢỢU CAO TỪ BÁNH MEN THU tn to THẬP TẠI YÊN PHONG - BẮC NINH p ie gh d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC a lu a nv Hệ đào tạo : Chính quy u nf : Công nghệ sinh học Chuyên ngành : 43 - CNSH n oi : CNSH & CNTP tz Khóa học m Khoa ll Lớp : 2011 - 2015 z Giảng viên hướng dẫn: TS Trần Văn Chí m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, 2016 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Được tạo điều kiện giúp đỡ, quan tâm thầy cô giáo bạn bè, thời gian vừa tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp phịng thí nghiệm khoa Cơng Nghệ Sinh Học & Công Nghệ Thực Phẩm – Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS.Trần Văn Chí giảng viên khoa Cơng Nghệ Sinh Học & Công Nghệ Thực phẩm trường Đại Học a lu Nông Lâm Thái Nguyên hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian thực n làm khóa luận tốt nghiệp va n Xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo khoa Công Nghệ Sinh tn to Học & Công Nghệ Thực Phẩm bảo, hướng dẫn tận tình kỹ p ie gh phịng thí nghiệm Động viên tình thần tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp oa nl w Cuối xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè động viên giúp đỡ tơi suốt thời gian hồn thánh khóa luận d a nv a lu Thái Nguyên, ngày tháng năm Ngƣời thực ll u nf m n oi tz Mẫn Văn Hoằng z m co l gm @ an Lu n va ac th si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ii DANH MC CC BNG Trang Bng 3.1 Thành phần lít mơi trường Hansen 30 Bảng 3.2 Thành phần lít mơi trường Malt – Cao Nấm Men - Peptone 30 Bảng 4.1 Kết đo giá trị OD 50 chủng nấm men phân lập 35 Bảng 4.2 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 50 chủng nấm men 37 Bảng 4.3 Kết thử khả lên men loại đường 40 Bảng 4.4 Kết thử khả lên men dịch chiết malt tỉ lệ 41 a lu Bảng 4.5 Kết chưng cất dịch tinh bột cơm dịch chiết malt 43 n n va p ie gh tn to d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh iii DANH MC CC HèNH Trang Hình 2.1 Cấu tạo tế bào nấm men [11] 17 Hình 3.1 Hình ảnh số khuẩn lạc 32 Hình 3.2 Ảnh kết việc quan sát qua kính hiển vi chủng 43.1 33 Hình 4.1 Kết thử khả lên men đường glucose số chủng 40 Hình 4.2 Hình ảnh kết thử khả lên men dịch chiết malt 41 Hình 4.3 Hình ảnh số chủng thử hoạt tính catalase 42 a lu Hình 4.4 Đồ thị kháo sát ảnh hưởng nồng độ đường tới phát triển n chủng nấm men 34.1 44 n va Hình 4.5 Đồ thị khảo sát ảnh hưởng nồng độ peptone đến phát triển tn to chủng nấm men 34.1 44 p ie gh Hình 4.6 Đồ thị khảo sát ảnh hưởng PH ban đầu đến sinh trưởng phát d oa nl w triển chủng nấm men 34.1 45 a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh iv MỤC LỤC Trang PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu đề tài 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài a lu 1.3.1 Ý nghĩa khoa học n n va 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn tn to PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU p ie gh 2.1 Sơ lược rượu 2.1.1 Phân loại rượu oa nl w 2.1.2 Quy trình sản xuất Rượu [9] 12 2.2 Nấm Men 16 d 2.2.1 Hình thái cấu tạo nấm men [2] 16 a lu a nv 2.2.2 Dinh dưỡng nấm men [2] 18 u nf 2.2.3 Sinh sản nấm men [2] 22 ll 2.2.4 Sinh trưởng nấm men [2] 23 m n oi 2.2.5 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa nấm men[2] 24 tz PHẦN ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 z 3.1 Đối Tượng Phạm Vi Nghiên Cứu 29 gm @ 3.1.1 Đối Tượng 29 l 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 29 m co 3.2 Thời gian địa điểm 29 an Lu 3.3 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất 29 n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh v 3.3.1 Thiết bị 29 3.3.2 Dụng cụ 29 3.3.3 Hóa chất 29 3.4 Nội dung nghiên cứu 30 3.5 Các phương pháp nghiên cứu 30 3.5.1 Phương pháp nghiền pha loãng mẫu [7] 30 3.5.2 Phương pháp phân lập [3] 31 3.5.3 Phương pháp cấy truyền giữ giống [3] 31 a lu 3.5.4 Phương pháp quan sát đặc điểm hình thái 31 n 3.5.5 Phương pháp dịch chiết malt [1] 33 n va tn to 3.5.6 Phương pháp đếm số lương tế bào buồng đếm hồng cầu [7] 33 3.5.7 Phương pháp xác định sinh khối nấm men phương pháp đo OD [7] 33 p ie gh 3.5.8 Phương pháp xác định khả lên men [1] 34 oa nl w 3.5.9 Phương pháp chưng chất xác định nồng độ rượu [8] 34 PHẦN KẾT QUẢ THẢO LUẬN 35 d 4.1 Kết phân lập 35 a lu 4.2 Tuyển chọn số chủng nấm men cá khả lên men rượu mạnh 39 a nv 4.2.1 Thử khả lên men loại đường 39 u nf ll 4.2.2 Thử khả lên men dịch chiết Malt 41 m n oi 4.2.3 Thử hoạt tính Catalase 42 tz 4.2.4 Xác định nồng độ cồn tuyển chọn 42 z 4.3 Tối ưu hóa điều kiện sinh trưởng phát triển chủng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 43 gm @ 4.3.1 Khả sử dụng nguồn carbon ( đường glucose) 43 l co 4.3.2 Khả sử dụng nguồn nitơ (peptone) 44 m 4.3.4 Ảnh hưởng PH 44 an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh vi 4.4 nh danh s 45 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 46 5.1 Kết luận 46 5.2 Đề nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh PHN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Nước ta nước nơng nghiệp, với nhiều nếp văn hóa truyền thống vùng miền khác Từ miền Bắc tới miền Nam lúa gắn bó lâu đời trở lên quen thuộc Xa hơn, từ thời trung cổ châu Âu việc trồng lúa phổ biến rộng rãi Cho lên sản phẩm từ lúa người tạo có bia, rượu Một loại đồ uống mà ưu chuộng sử dụng rộng rãi a lu Việc làm bia rượu lúc thô sơn đơn giản, nên chất lượng n n va chưa cao Vì lúc người chưa hiểu rõ chất việc Hiện sau nhiều kỉ, với tiến phát triển loài người p ie gh tn to sinh rượu điều kiện nắm nhiều kiến thức khoa học kỹ thuật Chất lượng rượu oa nl w nâng lên rõ dệt, người biết tuyển chọn lọc chủng vi sinh vật trình làm rượu Quá trình gọi lên men rượu, bia d Chủng vi sinh vật sử dụng lên men chủ yếu nấm men Mỗi a lu vùng miền khác lại có chủng nấm men khác chất lượng nv f an rượu khác Ở quy mơ sản xuất rượu nhỏ lẻ hộ gia đình oi lm ul vung quê nước ta, việc sử dụng chủng nấm men cịn mang tính dân dã theo kinh nghiệm Cho nên việc lên men rượu chưa at nh tối ưu hóa khả lên men chất lượng rượu chưa ổn định z Trước trạng đó, để góp phần nâng cao chất lượng rượu tối z @ ưu hóa khả lên men số chủng nấm men địa phương gm tiến hành “Phân lập tuyển chọn chủng nấm men có khả om l.c lên men rượu cao từ bánh men thu thập Yên Phong- Bắc Ninh” nhằm tìm chủng nấm men tốt tối ưu hóa điều an Lu kiện sinh trưởng phát triển Phục vụ cho viêc nghiên cứu ứng n va dng vo thc t th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 1.2 Mc tiờu v yờu ca ti 1.2.1 Mục tiêu đề tài Từ mẫu bánh men thu thập địa phương, ta tiến hành phân lập tuyển chọn chủng có khả lên men rượu tốt tối ưu hóa điêu kiện nuôi cấy 1.2.2 Yêu cầu đề tài Phân lập chủng nấm nen từ mẫu bánh men Tuyển chọn nấm men có khả lên men rượu cao định danh a lu Tối ưu hóa điều kiện ni sinh trưởng chủng nấm n men n va 1.3 Ý nghĩa đề tài tn to 1.3.1 Ý nghĩa khoa học p ie gh Sơ đánh giá mẫu bánh men thu thập có loại vi sinh vật chủ yếu ý nghĩa loại vi sinh vật oa nl w trình lên men Tìm chủng nấm men có khả lên men tốt mẫu d a lu bánh men f an nv 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn oi lm ul Sau có kết đề tài ứng dụng vào quy mô sản xuất rượu nhỏ lẻ địa phương tiền đề để ứng dụng q trình lên at nh men rượu với quy mơ công nghiệp z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 33 a lu n n va p ie gh tn to Hình 3.2 Ảnh kết việc quan sát qua kính hiển vi chủng 43.1 3.5.5 Phương pháp dịch chiết malt [1] oa nl w Nghiền malt, sau cân lấy 100(g) Malt hịa 300ml nước cất Sau đem đun 450 30 phút Thêm 200 ml nước cất, tăng nhiệt d độ lên 700 khuấy Thử Lugol đến khơng cịn thấy a lu nv xuất màu xanh dừng lại Sau đem lọc, trùng 110 C f an vòng 30 phút, bảo quản tủ lạnh độ C để dùng dần oi lm ul 3.5.6 Phương pháp đếm số lương tế bào buồng đếm hồng cầu [7] Dàn tế bào nấm men giọt nước cất vô trùng buồng at nh đếm hồng cầu Đặt mép lamen sát với mép giọt canh trường sau z nghiêng lamen góc 450, hạ từ từ xuống cho giọt canh trường z tế bào kính hiển vi gm @ bị ép buồng đếm hồng cầu phiến kính Quan sát đếm số lượng [7] om l.c 3.5.7 Phƣơng pháp xác định sinh khối nấm men phng phỏp o OD an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 34 - Nguyờn lý: T bo nm men phát triển làm đục dịch nuôi cấy làm cho dịch nuôi cấy chuyển sang dạng huyền phù Độ đục dịch nuôi cấy tỉ lệ thuận với mật độ tế bào nấm men dịch nuôi cấy Dựa vào khả hấp phụ ánh sang bước song 550 – 620 nm nấm men Khả hấp phụ ánh sang cao mật độ tế bào nấm men cao, giá trị OD đo lớn - Tiến hành: Bật máy so màu chuyển sang bước song 620 nm Hút vào curvet 1- ml mấu đối chứng đưa vào giếng đo đợi máy hiển thị kết ghi lại giá trị OD đo a lu 3.5.8 Phương pháp xác định khả lên men [1] n - Cơ sở phương pháp: Trong trình lên men dịch đường n va nấm men sinh khí CO2 mà khí CO2 đẩy ống durhan lên tn to ống nghiệm Chủng có khả lên men mạnh tạo khí p ie gh đẩy ống Durhan lên thời gian ngắn - Tiến hành: cho 20ml dịch gồm môi trường sở – % loại oa nl w đường mà định thử khả lên men vào ống nghiệm có chứa sẵn ống durhan Thanh trùng 1210C 15 phút Để nguội cấy nếm men vào d a lu quan sát tính thời gian lên men chủng đẩy ống Durhan lên cao 5cm f an nv 3.5.9 Phương pháp chưng chất xác định nồng độ rượu [8] oi lm ul Tiền hành: lấy 100ml dịch sau lên men có nhiệt độ khoảng 200C cho vào bình định mức 100ml, rót dịch lên men vào định mức nh lên khoảng 300ml Tiến hành chưng cất lượng rượu thơ đạt at khoảng 100ml dừng lại đậy kín rượu thơ lại Dùng cồn kế để trực z z tiếp đọc giá trị đo phần lên cồn kế N1 = an Lu n va Trong N1: nồng độ cần tính om l.c gm @ Tính nồng độ cồn theo cơng thc th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 35 N2 : Nng độ cồn chưng cất V1: thể tích dịch đem chưng cất V2 thể tích rượu chưng cất từ V1 PHẦN KẾT QUẢ THẢO LUẬN 4.1 Kết phân lập Từ mẫu bánh men thu thập huyện Yên Phong Tỉnh Bắc Ninh phân lập 50 chủng nấm men Với giá trị OD đo thể sinh trưởng phát triển nấm men môi trường Hansen lỏng a lu Bảng 4.1 Kết đo giá trị OD 50 chủng nấm men phân lập đƣợc n Giá trị mật độ quang Ký hiệu 0h 6h 12h 18h 24h 30h 36h 21.1 0.438 1.116 1.258 1.450 1.497 1.519 1.538 21.2 0.436 1.392 1.452 1.546 1.518 1.583 1.645 21.3 0.510 1.407 1.447 1.553 1.569 1.622 1.652 22.1 0.527 1.380 1.373 1.456 1.473 1.448 1.444 22.2 0.555 1.305 1.285 1.49 1.523 1.596 1.607 22.3 0.583 1.349 1.485 1.485 1.506 1.540 1.563 25.3 0.572 1.263 1.561 1.600 1.649 1.730 1.680 24.2 0.575 1.535 1.528 1.595 1.669 1.704 1.670 24.1 0.536 1.545 1.539 1.699 1.775 1.792 10 25.1 0.553 1.656 oi lm 1.612 1.625 1.687 1.740 1.756 1.754 11 23.3 0.560 1.608 1.643 1.665 1.670 1.729 1.738 12 23.1 0.566 1.580 1.624 1.681 1.716 1.726 1.736 13 25.2 0.555 1.300 1.552 1.604 1.654 1.785 1.658 14 26.1 0.512 1.285 1.609 1.678 gm 1.769 1.751 15 23.2 0.570 1.586 1.653 1.655 1.657 1.767 1.720 16 26.2 0.773 1.237 1.547 1.669 1.666 1.670 1.670 17 26.3 0.693 1.345 1.549 1.738 1.761 1.770 n chủng tn to va STT p ie gh d oa nl w f an nv a lu ul at nh z z @ 1.728 om l.c an Lu 1.773 n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 36 1.592 1.743 1.752 1.778 1.783 19 29.1 0.833 1.344 1.575 1.676 1.694 1.689 1.687 20 29.2 0.571 1.205 1.406 1.625 1.655 1.634 1.612 21 29.3 0.542 1.293 1.476 1.672 1.676 1.677 1.677 22 29.4 0.323 1.353 1.558 1.611 1.599 1.570 1.552 23 27.1 0.642 1.411 1.617 1.710 1.735 1.153 1.740 24 27.2 0.942 1.406 1.630 1.672 1.701 1.710 1.709 25 30.1 0.557 1.172 1.331 1.641 1.558 1.639 1.556 26 30.2 0.583 1.287 1.408 1.654 1.668 1.647 1.643 27 30.3 0.600 1.142 1.227 1.636 1.680 1.712 1.742 28 30.4 0.545 1.310 1.417 1.654 1.676 1.658 1.657 29 28.1 0.610 1.343 1.613 1.637 1.722 1.707 1.706 30 28.2 0.432 1.165 1.317 1.619 1.656 1.647 1.658 31 28.3 0.593 1.240 1.386 1.649 1.684 1.676 1.730 32 28.4 0.612 1.291 1.429 1.672 1.702 1.671 1.684 33 27.3 0.602 1.278 1.376 1.648 1.659 1.664 1.624 34 27.4 0.423 1.060 1.472 1.701 1.800 1.731 1.729 35 32.1 0.647 1.305 1.456 1.600 1.698 1.690 1.700 36 32.2 0.587 1.280 1.342 1.410 1.529 1.523 1.644 37 32.3 0.430 1.223 1.435 1.514 1.599 1.555 1.634 38 32.4 0.487 1.255 1.341 1.499 1.657 1.521 1.667 39 34.1 0.673 1.454 1.511 1.500 1.481 1.487 1.477 40 3.3 0.556 1.272 1.481 1.622 1.849 1.869 1.890 41 4.2 0.440 1.320 1.225 1.566 1.562 1.590 42 4.4 0.457 1.158 1.366 1.442 1.550 1.645 1.688 43 3.7 0.400 0.595 1.00 1.215 1.340 1.358 1.328 44 5.8 0.512 1.440 1.458 1.500 1.605 1.634 1.641 45 5.3 0.531 1.240 1.420 1.527 1.651 1.683 1.689 46 5.2 0.610 1.320 1.420 1.602 1.716 1.765 1.808 47 11.3 0.543 1.517 1.613 1.674 1.682 1.700 1.733 p ie gh tn to 1.391 oi lm n va 0.760 d n 26.4 a lu 18 oa nl w f an nv a lu ul at nh 1,411 z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 37 48 3.5 0.478 1.418 1.425 1.456 1.472 1.472 1.437 49 4.3 0.357 1.032 1.525 1.587 1.611 1.301 1.305 50 12.3 0.482 1.380 1.614 1.649 1.693 1.718 1.737 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 50 chủng tơi trình bày bảng 4.2 Bảng 4.2 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 50 chủng nấm men STT Ký hiệu chủng Đặc điểm khuẩn lạc a lu n n va 21.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng sữa, khơng có tâm 21.2 Trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 21.3 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng sữa, có tâm 22.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng sữa, khơng có tâm 22.2 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà, có tâm 22.3 Trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng sữa, có tâm 25.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm 24.2 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 24.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng,màu trắng ngà, có tâm 25.1 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 23.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm tn to p ie gh 12 23.1 13 25.2 14 26.1 Tròn, lồi bề mặt nhăn, màu trắng sữa, khơng có tâm 15 23.2 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 16 26.2 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 17 26.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm 18 26.4 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà, có tâm 19 29.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 20 29.2 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 21 29.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 22 29.4 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm d 11 oa nl w 10 nv a lu Hơi tròn, bề mặt nhăn, màu trắng ngà, có tâm f an Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 38 a lu n n va 27.1 Hi trũn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 24 27.2 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 25 30.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm 26 30.2 Trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà, có tâm 27 30.3 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 28 30.4 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 29 28.1 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm 30 28.2 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm 31 28.3 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 32 28.4 Trịn, lồi, màu trắng ngà, có tâm 33 27.3 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm 34 27.4 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 32.1 Trịn, bẹt, màu trằng sữa, khơng có tâm 36 32.2 Hơi trịn, bẹt, màu trắng sữa, khơng có tâm 37 32.3 Trịn, lồi, bề mặt nhăn màu trắng sữa, có tâm tn to 23 35 p ie gh oa nl w 39 40 3.3 41 4.2 42 4.4 Hơi tròn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm 43 3.7 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 44 5.8 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 45 5.3 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm 46 5.2 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 47 11.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm 48 3.5 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 49 4.3 Hơi trịn, bẹt, bề mặt bóng, màu trắng ngà có tâm 50 12.3 Trịn, lồi, bề mặt bóng, màu trắng sữa, khơng có tâm 38 Hơi trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, khơng có tâm 34.1 Trịn, bề mặt bóng, màu trắng ngà, có tâm d 32.4 nv a lu Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm f an Trịn, lồi, bề mặt bóng màu trắng ngà, khơng có tâm oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 39 T bng 4.1.Qua ỏnh giỏ sơ giá trị OD chọn ra chủng 22.1, 26.2, 28.2, 32.3, 32.4, 34.1 có khả tăng sinh mạnh, nên chủng sử dụng cho thí nghiệm 4.2 Tuyển chọn số chủng nấm men có khả lên men rƣợu mạnh Để tuyển chọn số chúng có khả lên men rượu mạnh, từ chủng mà chọn thông qua đánh giá sơ Tơi tiến hành thí nghiệm để chọn chủng có khả lên men rượu mạnh a lu 4.2.1 Thử khả lên men loại đường n Dựa vào chất trình lên men chuyển hóa loại n va đường có dịch đường nấm men thành rượu ethylic, CO tn to sản phẩm bậc Chủng nấm men có khả lên men mạnh p ie gh tạo khí thời gian ngắn Glucose loại đường mà tất chủng nấm men sử dụng oa nl w được, thử với D – glucose cho kết dương tính ta thực tiếp với loại đường d a lu Tiến hành: cho 20 ml dịch (môi trường sở – 2% loại đường f an nv định thử khả lên men) vào ống thủy tinh có sẵn ống Durhan Thanh oi lm ul trùng dịch 1210C 15 phút Để nguội cấy cấy 100ml nấm men (đã tăng sinh môi trường Hansen lỏng ) vào môi trường Tiến hành nh quan sát theo dõi thời gian chủng sinh khí CO2 đẩy ống Durhan lên at cao 5cm Thời gian theo dõi vòng 30 z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 40 a lu n n va tn to Hình 4.1 Kết thử khả lên men đƣờng glucose p ie gh số chủng Các loại đƣờng d a lu Chủng oa nl w Bảng 4.3 Kết thử khả lên men loại đƣờng Glucose Lactose Saccarose Nổi sau 18 nv Nổi sau 18 Khổng 26.2 Nổi sau 30 Nổi sau 34 Khổng 28.2 Nổi sau16 32.3 f an 22.1 Nổi sau30 Không Nổi sau 34 32.4 Nổi sau 27 Không Nổi sau 30 34.1 Nổi sau 12 Nổi sau 20 at Nổi sau 19 nh oi lm ul Nổi sau 25 z z gm @ Nổi sau 21 om l.c Từ bảng 4.3 ta tiếp tục chọn chủng 22.1, 28.2, 34.1 ba chủng có khả lên men mạnh thời gian đẩy Durhan n va sử dụng vào thí nghiệm an Lu chủng lên thời gian ngắn Nên ba chủng tụi th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 41 4.2.2 Th kh lên men dịch chiết Malt Tiến hành cho 20ml dịch chiết malt vào ống thủy tinh có sẵn ống Durhan.Thanh trùng 1210C 15 phút Sau để nguội cấy nấm men vào (đã dược tăng sinh môi trường Hansen lỏng) Theo dõi thời gian tạo khí CO2 đẩy ống Durhan lên cao 5cm a lu n n va p ie gh tn to Hình 4.2 Hình ảnh kết thử khả lên men dịch oa nl w chiết malt Lưu ý dịch chiết malt đặc lên ta pha loãng dịch chiết malt d a lu với nước cất theo tỉ lệ 9:1, 8:2, 7:3 để đánh giá f an nv Bảng 4.4 Kết thử khả lên men dịch chiết malt tỉ lệ oi lm ul khác Các tỉ lệ pha loãng Tỉ lệ 8:2 Tỉ lệ 7:3 at nh Tỉ lệ 9:1 Thời gian Thời gian z Thời z Chủng gian(giờ) Chủng (giờ)nổi ống Chủng @ Durhan 22.1 12 22.1 21 22.1 25 28.2 12 28.2 15 28.2 34.1 34.1 12 34.1 Durhan om l.c gm ống Durhan (giờ) ni ng 15 an Lu 13 n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 42 Qua bng 4.4 tụi thy tỉ lệ pha lỗng 9:1 chủng 34.1 có khả lên men dịch chiết malt mạnh nhất, thời gian làm ống Durhan tỉ lệ pha loãng ln ngắn 4.2.3 Thử hoạt tính Catalase Cơ sở: dựa vào đặc tính nấm men lồi sinh kỵ khí tùy tiện Do tơi tiến hành việc thử hoạt tính Catalase đánh giá chủng có phải thuộc vi sinh vật kỵ khí tùy tiện hay không Tiền hành: lấy chút sinh khối chủng lên kính, nhỏ trực tiếp vài giọt H2O2 vào Quan sát thấy có tượng sủi bọt khí a lu Kết luận chủng thuộc loại vi sinh vật kỵ khí tùy tiện n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul Hình 4.3 Hình ảnh số chủng thử hoạt tính catalase nh at 4.2.4 Xác định nồng độ cồn tuyển chọn z Thực việc xác định nồng độ cồn nhằm tuyển chọn chủng z om l.c dịch tinh bột cơm dịch chiết malt gm @ có khả lên men tạo rượu ethylic mạnh Bng vic chng ct an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 43 Bng 4.5 Kt qu chng ct dịch tinh bột cơm dịch chiết malt Loại dịch chƣng cất Dịch tinh bột cơm Dịch malt Chủng Độ rượu(%) Chủng Độ rượu(%) 22.1 10,5 22.1 1.75 28.2 10,15 28.2 34.1 11,55 34.1 Qua bảng 4.5 thơi chủng 34.1 có khả lên men mạnh, sau a lu lên men thu rượu với độ rượu cao chủng 22.1 chủng 28.2 n Vậy dựa vào kết từ thử nghiệm, tơi chọn chủng 34.1 n va có khả lên men rượu mạnh sử dụng vào thí nghiệm tn to tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy p ie gh 4.3 Tối ƣu hóa điều kiện sinh trƣởng phát triển chủng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 oa nl w 4.3.1 Khả sử dụng nguồn carbon ( đường glucose) Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ đường tới sinh trưởng d f an nv a lu phát triển chủa chủng nấm men 34.1 thể qua hình sau oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 44 Hỡnh 4.4 th khỏo sát ảnh hƣởng nồng độ đƣờng tới phát triển chủng nấm men 34.1 * Kết luận: Qua biểu đồ ta kết luận nồng độ đường tối thích cho chủng 34.1 3% 4.3.2 Khả sử dụng nguồn nitơ (peptone) Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng peptone thể qua đồ thị sau Hình 4.5 Đồ thị khảo sát ảnh hƣởng nồng độ peptone đến a lu phát triển chủng nấm men 34.1 n n va p ie gh tn to d oa nl w a lu f an nv * Kết luận : Qua đồ thị khảo sát ta kết luận nồng độ peptone tối thích cho chủng 43.1 10 g/l oi lm ul 4.3.4 Ảnh hưởng PH Kết nghiên cứu ảnh hưởng PH đến sinh trưởng phát nh at triển chủng nâm men 34.1 thể qua hình sau z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 45 Hỡnh 4.6 Đồ thị khảo sát ảnh hƣởng PH ban đầu đến sinh trƣởng phát triển chủng nấm men 34.1 a lu * Kết Luận: Dải PH tối thích cho chủng nấm men 34.1 PH =6 n n va 4.4 Định danh sơ tn to Trên sở phân lập chủng đặc điểm hính thái p ie gh khuẩn lạc, đặc điểm sinh hóa hình thái tế bào Thơng qua thí nghiệm khả lên men, xác định nồng độ cồn chọn oa nl w chủng 34.1 có khả lên men rượu tốt sơ định danh chủng 43.1 thuộc giống Sacchoromyces cerevisiae d f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh 46 PHN KT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Quá trình thực đề tài “Phân lập tuyển chọn chủng nấm men có khả lên men rượu cao từ bánh men thu thập Yên Phong – Bắc Ninh” Tôi thu kết quả: Phân lập tuyển chọn sơ chủng từ 50 chủng nấm men phân lập từ mẫu bánh men thuốc Bắc thu thập Yên Phong – Bắc Ninh Từ chủng tuyển chọn sơ tiến hành tuyển chọn qua a lu nhiều thí nghiệm, tơi chọn chủng 34.1 chủng nấm men có khả n sinh rượu cao Với độ cồn đạt 11,55%, qua thí nghiệm định n va danh sơ chủng thuộc chủng Sacchoromyces cerevisiae thời đặt tn to tên chủng Saccharomyces cerevisiae 34.1 Qua trình khảo khát tìm p ie gh điều kiện tối thích cho chủng tơi thấy nồng độ đường tối thích cho chủng nảy 3% Nồng độ peptone tối thích 10 g/l, PH = dải oa nl w PH thích hợp 5.2 Đề nghị d a lu Vì điều kiện phịng thí nghiệm cịn hạn chế nên việc đánh giá f an nv định danh sơ phương pháp truyền thống Đề nghị oi lm ul tương lai có thêm nghiên cứu chủng Sacchoromyces cerevisiae 34.1 để ứng dụng vào quy mô sản xuất rượu công nghiệp at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh ac si (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh (Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh(Luỏưn.vn).phÂn.lỏưp.v.tuyỏằn.chỏằãn.nhỏằng.chỏằĐng.nỏƠm.men.c.khỏÊ.nng.lên.men.rặỏằÊu.cao.tỏằô.bĂnh.men.thu.thỏưp.tỏĂi.yên.phong.bỏc.ninh