(Luận văn) nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình thu nhận chế phẩm invertase từ nấm men bia

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM DƯƠNG THỊ HUYỀN Tên đề tài: lu NGHI£N CøU C¸C ỸU Tố ảNH HƯởNG ĐếN QUá TRìNH an n va THU NHËN CHÕ PHÈM INVERTASE Tõ NÊM MEN BIA p ie gh tn to d oa nl w KHãA LUËN TốT NGHIệP ĐạI HọC nv a lu H o to an : Chính quy fu : Cơng nghệ Thực phẩm ll Chuyên ngành : K42 - CNTP nh : CNSH - CNTP at : 2010-2014 z Khóa học oi Khoa m Lớp z gm @ Giảng viên hướng dẫn : ThS Nguyễn Hữu Nghị Giảng viên khoa CNSH - CNTP - Đại học Nông Lâm Thái Nguyên l.c om an Lu Thái Nguyên, 2014 n va ac th si LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực đề tài em nhận tạo điều kiện, quan tâm giúp đỡ thầy cô giáo, bạn bè gia đình Em hồn thành khóa luận tốt nghiệp phịng thí nghiệm Vi sinh khoa Cơng nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm - trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới Ths Nguyễn Hữu Nghị, giảng viên khoa Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm, trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên tận tình giúp đỡ hướng dẫn giúp em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp đại học lu an n va Em xin cảm ơn cô, chú, anh, chị làm việc công ty bia VICOBA - Thái Nguyên, thầy cô làm việc Viện Khoa học sống tạo điều kiện giúp đỡ em trình em thực đề tài tốt nghiệp p ie gh tn to Em xin gửi lời cảm ơn đến toàn thể thầy cô khoa Công nghệ Sinh học & Công nghệ Thực phẩm giảng dạy bảo cho em nhiều trình học tập thực đề tài w d oa nl Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến bố, mẹ, gia đình bạn bè động viên, giúp đỡ giành thời gian cho em để hồn thành khóa luận tốt nghiệp a lu nv Do trình độ điều kiện thời gian thực đề tài có hạn nên đề tài khơng tránh khỏi sai sót Em mong nhận góp ý thầy cô bạn để đề tài hoàn thiện an ll fu oi m Em xin chân thành cảm ơn! at nh z Thái nguyên, ngày 06 tháng 06 năm 2014 z gm @ Sinh viên thực đề tài l.c om Dương Thị Huyền an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Một số enzyme quan trọng nấm men 15 Bảng 4.1 Kết hoạt tình enzyme thu theo thiết kế Box- Behnken (BBD), cấp độ, nhân tố , điểm trung tâm, 27 thí nghiệm 34 Bảng 4.2 Kết phân tích ANOVA cho mơ hình hoạt tính enzyme 35 Bảng 4.3 Bảng điều kiện nhân tố để thu hoạt tính enzyme cao 37 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC HÌNH lu an n va p ie gh tn to Hình 2.1 Cấu tạo mặt cắt vi khuẩn gram âm gram dương có chứa periplasmic Hình 2.2 Cấu tạo tế bào nấm men Hình 4.1 Ảnh hưởng tỷ lệ nấm men dung mơi q trình tự phân đến hoạt tính enzyme 29 Hình 4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ tự phân đến hoạt tính enzyme 30 Hình 4.3 Ảnh hưởng pH ban đầu mẫu nấm men tự phân đến hoạt tính enzyme 31 Hình 4.4 Ảnh hưởng thời gian tự phân đến hoạt tính chế phẩm enzyme thu nhận từ nấm men bia 33 Hình 4.5 Hình ảnh 3D ảnh hưởng nhiệt độ tỷ lệ nấm men/ dung mơi đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân 39 Hình 4.6 Hình ảnh 3D ảnh hưởng thời gian nhiệt độ đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân 39 Hình 4.7 Hình ảnh 3D ảnh hưởng pH tỷ lệ nấm men/ dung mơi đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân 40 Hình 4.8 Hình ảnh 3D ảnh hưởng pH nhiệt độ đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân 40 Hình 4.9 Hình ảnh 3D ảnh hưởng thời gian tỷ lệ nấm men/ dung mơi đến hoạt tính enzyme invartse thu dịch tự phân 41 Hình 4.10 Hình ảnh 3D ảnh hưởng thời gian pH đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân 41 d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 DANH MỤC CÁC TỪ, CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT RNA : Ribonucleic acid GT : Giá trị BBD : Box- Behnken ĐVHT : Đơn vị hoạt tính lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 MỤC LỤC PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.1 Yêu cầu 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn lu PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Khái quát enzyme an n va p ie gh tn to 2.1.1 Khái niệm 2.1.2 Các đơn vị hoạt độ enzyme 2.1.3 Khu trú enzyme .4 2.1.4 Nguồn nguyên liệu thu enzyme .5 d oa nl w 2.2 Giới thiệu chung nấm men 2.2.1 Thành phần hóa học, hình dạng kích thước nấm men 2.2.2 Cấu tạo tế bào nấm men 2.2.3 Nguồn thức ăn chủ yếu cho nấm men 11 2.2.4 Sự hấp phụ chất dinh dưỡng tế bào nấm men 11 a lu nv 2.3 Nấm men công nghệ sản xuất bia 12 2.3.1 Nấm men chìm nấm men .12 2.3.2 Quá trình lên men đường tạo rượu ethylic CO2 13 2.3.3 Các hướng tận dụng nấm men bia 14 an ll fu m oi 2.3.4 Các enzyme thủy phân glucid đơn giản tế bào nấm men 15 2.4 Khái quát enzyme invertase .15 2.4.1 Enzyme invertase .15 at nh z z 2.4.2 Qúa trình chuyển hóa đường sucrose thành đường nghịch đảo 16 2.4.3 Invertase tế bào nấm men 17 2.4.4 Thu nhận chế phẩm enzyme invertase thô từ nấm men phương pháp tự phân 18 2.4.5 Ứng dụng invertase công nghệ thực phẩm 19 gm @ l.c om Lu 2.5 Tình hình nghiên cứu nước 20 an n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nước 20 2.5.2 Tình hình nghiên cứu giới 20 Phần 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Đối tượng, phạm vi nghiên cứu 22 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 22 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu .22 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 22 3.3 Hoá chất, thiết bị môi trường sử dụng .22 lu an n va p ie gh tn to 3.3.1 Hoá chất .22 3.3.2 Dụng cụ thiết bị 23 3.4 Nội dung nghiên cứu 23 3.5 Phương pháp nghiên cứu 23 3.5.1 Phương pháp thu nhận sinh khối nấm men chế phẩm invertase 23 3.5.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 24 3.5.3 Phương pháp phân tích 25 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 27 d oa nl w PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Ảnh hưởng tỷ lệ nấm men dung mơi q trình tự phân nấm men bia (w/w) 28 4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ tự phân nấm men bia 29 nv a lu 4.3 Ảnh hưởng pH ban đầu mẫu nấm men trình tự phân 31 4.4 Ảnh hưởng thời gian tự phân nấm men bia đến hoạt tính enzyme 32 4.5 Tối ưu hóa điều kiện tự phân bã nấm men bia để thu nhận chế phẩm invertase phương pháp bề mặt tiêu (4 nhân tố) 34 4.5.1 Xây dựng mơ hình hoạt tính enzyme 35 4.5.2 Tối ưu hóa điều kiện tự phân thu nhận chế phẩm enzyme .37 an ll fu oi m at nh z PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 5.2 Kiến nghị 42 z gm @ TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Nấm men nhóm vi sinh vật đơn bào người sử dụng từ hàng nghìn năm để sản xuất đồ uống có cồn (rượu, bia,…), bánh mì nhiều ứng dụng khác Nấm men sinh sơi nhanh, tế bào có chứa hàm lượng protein cao, nhiều vitamin, acid amin không thay thế… Trong công nghệ sản xuất bia, nấm men sau mẻ lên men tăng lên sinh khối cách đáng kể, người ta thu hồi sử dụng lu an phần men để tiếp cho mẻ sau, phần lại thường dạng lỏng sệt n va thải ngồi mơi trường p ie gh tn to Lượng nấm men thải ngồi mơi trường có chứa lượng lớn tế bào nấm men, phân hủy gây ảnh hưởng đến môi trường sinh thái Việc thu hồi tận dụng lượng nấm men có ý nghĩa lớn mặt kinh tế mà cịn w giải vấn đề môi trường, vấn đề mang tính chất bền vững d oa nl Hiện nay, nấm men bia thường sử dụng để sản xuất bột chiết nấm men, dịch chiết nấm men, làm thức ăn gia súc…Sản xuất chế phẩm a lu invertase từ men bia hướng nghiên cứu Việt Nam [5] nv an Nấm men bia thuộc lồi Saccharomyces carlsbergensis có hoạt tính ll fu enzyme invertase Enzyme thường tập trung chủ yếu lớp không oi m gian chu chất tế bào nấm men, khoảng không gian thành tế bào nh màng nguyên sinh chất [22] Nấm men thu sau q trình lên men bia có at đặc điểm dễ bị tự phân Lúc vách tế bào khơng cịn khả tự bảo z z vệ bị phá hủy enzyme tế bào Chúng xúc tác phản @ invertase tế bào gm ứng phân giải chất có thành tế bào nấm men giải phóng enzyme l.c om Enzyme invertase (E C 3.2.1.26) thường sử dụng để thủy phân Lu đường sucrose tạo thành hỗn hợp đường glucose fructose [18] (đường an nghịch đảo) Dung dịch đường nghịch đảo có độ cao bị n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 tượng kết tinh đường so với đường sucrose nên sử dụng công nghệ sản xuất kẹo, nước giải khát… Việc nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng tìm điều kiện tối ưu cho trình thu nhận chế phẩm invertase từ nấm men bia có ý nghĩa khoa học thực tiễn Vì tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến trình thu nhận chế phẩm invertase từ nấm men bia” 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích lu Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến trình thu nhận chế phẩm invertase từ nấm men bia an n va 1.2.1 Yêu cầu p ie gh tn to - Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ nấm men dung môi trình tự phân nấm men bia - Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ tự phân nấm men bia d oa nl w - Nghiên cứu ảnh hưởng pH ban đầu mẫu nấm men trình tự phân nấm men bia - Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian tự phân nấm men bia nv a lu - Tối ưu hóa điều kiện tự phân nấm men bia để thu nhận chế phẩm invertase an ll fu 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài oi m 1.3.1 Ý nghĩa khoa học at nh Thực đề tài giúp sinh viên bổ sung kiến thức thực tiễn quan trọng cho lý thuyết học, có thêm kinh nghiệm tiếp cận với công tác nghiên cứu khoa học để phục vụ cho nghiên cứu công tác sau z z gm @ 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết thu đề tài sở cho nghiên cứu để tối ưu hóa điều kiện thu nhận chế phẩm invertase từ nấm men bia chủng nấm men khác Từ xây dựng quy trình cơng nghệ với hiệu suất thu hồi enzyme hiệu l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Khái quát enzyme 2.1.1 Khái niệm Enzyme chất xúc tác sinh học, có chất protein, hòa tan nước dung dịch muối lỗng Enzyme có phân tử lượng lớn từ 20.000 đến 1.000.000 dalton nên không qua màng bán thấm [8] lu Enzyme có nhiều tính chất ưu việt hẳn chất xúc tác hóa học an Enzyme có cường lực xúc tác lớn: điều kiện thích hợp hầu hết n va phản ứng có xúc tác enzyme xảy với vận tốc nhanh gấp 108 - 1011 lần so p ie gh tn to với phản ứng khơng có chất xúc tác Enzyme có tính đặc hiệu cao: enzyme xúc tác làm chuyển hóa w chất định theo kiểu phản ứng định Sự tác dụng có tính chất lựa chọn gọi tính đặc hiệu enzyme Enzyme d oa nl có tính đặc hiệu cao nên khơng tạo sản phẩm phụ a lu Enzyme tác dụng điều kiện “êm dịu” Enzyme thường tác dụng nv thích hợp nhiệt độ 30 - 50oC, pH trung tính áp suất thường, không cần an ll fu nồng độ acid hay nồng độ kiềm mạnh, áp suất cao, khơng địi hỏi oi m thiết bị chịu acid, kiềm chịu áp suất cao đắt tiền at nh Tất enzyme có nguồn gốc tự nhiên khơng độc Điều có ý nghĩa quan trọng công nghệ thực phẩm y học z z 2.1.2 Các đơn vị hoạt độ enzyme gm @ Các chế phẩm enzyme sản xuất từ nguồn nguyên liệu dễ kiếm, rẻ tiền l.c om Đơn vị hoạt độ enzyme coi lượng enzyme có khả an thời gian định điều kiện tiêu chuẩn [8] Lu xúc tác làm chuyển hóa lượng chất định đơn vị n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 41 tăng dần lên ta tỷ lệ nấm men/dung môi lên gần 1/7 (giá trị tối ưu thu 151/1050 (w/w)) Khi tăng lượng dung mơi khả khuếch tán enzyme từ xoang tế bào dễ dàng [5] lu an n va p ie gh tn to Hình 4.9 Hình ảnh 3D ảnh hưởng thời gian tỷ lệ nấm men/ dung môi đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân d oa nl w Hình 4.10 ảnh hưởng thời gian pH đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân Hoạt tính enzyme thu thấp 45 giờ, kéo dài thời gian tự phân hoạt tính enzyme thu tăng theo đạt cực đại 48,35 nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c Hình 4.10 Hình ảnh 3D ảnh hưởng thời gian pH đến hoạt tính enzyme invertase thu dịch tự phân om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 42 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu đề tài đến kết luận sau : Khi tiến hành khảo sát đơn nhân tố yếu tố ảnh hưởng đến trình tự phân thu chế phẩm invertase từ nấm men thu kết sau : - Tỷ lệ nấm men/ dung mơi thích hợp 1/6 (w/w) lu - Nhiệt độ 50oC an - pH 5,5 n va - Thời gian 50 p ie gh tn to Tiếp theo chúng tơi tối ưu hóa nhân tố: tỷ lệ nấm men/dung môi, nhiệt độ, pH, thời gian trình tự phân thu chế phẩm invertase từ nấm men bia phương pháp bề mặt tiêu, theo thiết kế Box- Behnken (BBD), cấp độ, nhân tố , điểm trung tâm, 27 thí nghiệm Kết cho thấy: w d oa nl - Tỷ lệ nấm men/dung môi tối ưu 151/1050 (w/w) - Nhiệt độ tối ưu 48,6oC a lu nv - pH tối ưu 5,065 an - Thời gian tối ưu 48,35 fu ll Ta thu hoạt tính enzyme 100,473 ĐVHT/ g sinh khối nấm men oi m 5.2 Kiến nghị nh at Thu nhận enzyme invertase từ nấm men bia Saccharomyces carlsbergensis hướng nghiên cứu Việt Nam Có ý nghĩa mặt kinh tế ý nghĩa tích cực mặt môi trường sinh thái Nhưng thời gian điều kiện phịng thí nghiệm có hạn nên dừng lại nghiên cứu bước đầu yếu tố ảnh hưởng đến trình thu nhận chế phẩm invertase thô Từ hạn chế chúng tơi đề nghị tiếp tục nghiên cứu vấn đề sau : z z gm @ l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 43 - Đánh giá hiệu suất thu enzyme invertase nấm men lên men thu từ công ty bia so với nấm men ni cấy phịng thí nghiệm chủng nấm men khác - Nghiên cứu tinh enzyme invertase từ chế phẩm invertase thơ - Nghiên cứu xây dựng quy trình hồn thiện q trình thu nhận enzyme invertase từ nấm men bia lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nv a lu an ll fu oi m at nh z z gm @ l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Mai Ngọc Dũng (2007), ‘‘Thủy phân Saccharose invertase cố định hạt Calcium Alginate’’, Tạp chí phát triển KH&CN Nguyễn Thị Hiền (2007), Khoa học công nghệ malt & bia, NXB Khoa Học Kỹ Thuật Nguyễn Đức Lượng (2000), Công nghệ vi sinh tập 1, NXB Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh lu Lê Thanh Mai , Nguyễn Thị Hiền, Phạm Thu Thủy, Nguyễn Thanh Hằng, Lê Thị Lan Chi (2009), Các phương pháp phân tích ngành cơng nghệ lên men, NXB Khoa Học Kỹ Thuật an n va p ie gh tn to Lê Văn Việt Mẫn, Trần Thẩm Minh Hoàng, Nguyễn Ngọc Tuyết Sương (2006), ‘‘Nghiên cứu trình tự phân bã nấm men bia để thu nhận chế phẩm invertase’’, Tạp chí phát triển KH & CN w Lương Đức Phẩm (2005), Nấm men công nghiệp, NXB Khoa Học Kỹ Thuật, Hà Nội d oa nl Lê Ngọc Tú, Lê Doãn Diên, Phạm Quốc Thăng, La Văn Chứ (1977), Hóa sinh học công nghiệp, NXB Đại học THCN Hà Nội nv a lu Đặng Thị Thu, Lê Ngọc Tú, Tô Kim Anh, Phạm Thu Thủy, Nguyễn Xuân Sâm (2004), Công nghệ enzyme, NXB Khoa Học Kỹ Thuật Hà Nội an Tiếng Anh fu ll Antonio Martins oliveiva and Pedro de Oliva Neto (2001), ‘‘Improvement in RNA Extraction from S cerevisiae by optimization in the atolysis and NH3 hydrolysis’’, Brazilian archives of Biology and Technology, Vol 54 1007 - 1018 oi m at nh z z 10 Breddam and T Beenfelt (1991), ‘‘Acceleration of yeast autolysis by chemical method for production of intracellular enzyme’’, Appl Microbial Biotech 35: 323 - 329 gm @ l.c om 11 Catalina Valencia, Gabriela Espinosa, Jayme Giralt, Francesc Giralt (2006), ‘‘Optimization of invertase production in a fed - batch bioreactor an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 45 using simulation based dynamic programming coupled with a neural classifier’’, Compyters and Chemical Engneering 31, 1131 - 1140 12 C N Khobragade & S G Chandel (2002), ‘‘Comparative study of catalytic activity of immobilized invertase in sodium agrinate gel on sucrose hydrolysis’’, Indian Jounal of chemical, vol 9, 535 - 539 13 Csilla Katalin Dezsi (2011), ‘‘Optimization of invertase production by yeast strains from the genus saccharomyces’’, FOOD TECHNOLOGY, Vol XV (2011), no lu 14 F Parra, P Herrero, F Moreno S Gascon (1980), ‘‘Secretion of intermedia molecular form of invertase by Saccharomyces carlsbergensis G - 517 treated with 2- deoxy- D- glucose’’ an n va p ie gh tn to 15 Fredericka Dodyk and Aser Rothstein (1964), ‘‘Factors Influencing the Appearance of Invertase in Saccharomyces cervisiae’’, Archives of biochemistry and biophysics 104, 478 - 486 d oa nl w 16 Hideo Tanaka, Takuji Kamogawa, Hideki Aoyagi, Isao Kato, and Ryoichi Nakajima (2000), ‘‘Invertase Production by Saccharomyces cerevisiae Protoplasts Immobilized in Strontium Alginate Gel Beads’’, Journal of Bioscience and Bioenineering Vol 89, No 5, 498 - 500 nv a lu 17 Huu Nghi Nguyen, Tzu - Ching Wang, Ta - Chen Lin and Jia - Hsin Guo, (2012), ‘‘Optimal condition for mycelia biomass and extracellular polysaccharide of Grifola frondosa: effect of agitation speed, inocolum ratio and initial pH’’, African Journal of Biotechnology Vol 11 (23), pp 6317 - 6326 an ll fu m oi 18 J S D Bacon (1953), ‘‘The Oligosaccharides Produced by the Action of Yeasts Invertase Preparations on Sucrose’’, Department of Biochemistry - The University of Sheffield at nh z z 19 L Bowski, R Saini, D Y Ryu and W R Vieth (1971), ‘‘Kinetic Modeling of the Hydrolysis of Sucrose by invertase’’, Biotechnology and bioengineering, Vol XIII, 641 - 656 gm @ l.c om 20 Lynferd J Wickerham (1958), ‘‘Evidence of the Production of Extracellular Invertase by Certain Strains of Yeast’’, Archives of biochemistry and biophysics 76, 439 - 448 an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 46 21 M F Islam and J O Lampen (1961), ‘‘Invertase secretion and sucrose fermentation by saccharomyces cerevisiae protoplasts’’, Biochimica et Biophysica acta, 58, 294 - 302 22 ManFred Zech and Helmut Gorisch ( 1995), ‘‘Invertase from Saccharomyces cerevisiae: Reversible inactivation by components of industrial molasses media’’, Enzyme and Microbial Technology 17, 41- 46 23 Mihele Vitolo and Walter Boani ( 1983), ‘‘Measurement of invertase activity of cell of saccharomyces cerevisiae’’, Analytical biochemystry 130, 469 - 470 lu 24 Nam Sun Wang, enzyme kinetics of invertase via initial rate determination, Department of Chemical & Biomolecular Engineering University of Maryland an n va p ie gh tn to 25 Robert G Dworschack and Lynferd J Wickerham (1961), ‘‘Production of Extracellular and Total Invertase by Candida Utilis, Saccharomyces cerevisiae, and Other Yeasts’’, Applied and Environmental Microbiology w d oa nl 26 S Boonraeng, P Foo Trakal, W Kanlay yakrit and C Chetanachita (2000), ‘‘ Effects of chemical, Biochemical and Physical Treatments on the Role of some Endogenous Enzyme action of Baker’s yeas lysis for Food Grate yeast extract production’’, Kasetsart J (Nat Sci) 34 210 - 278 a lu nv 27 T Shanka, P Thangamathi, R Rama T Sivakumar (2013), ‘‘Optimization of invertase production using Saccharomyces Cerevisiae MK under varying cultural conditions’’, International Jounal of Biochemistry and Biophysics 1, 47 - 56 an ll fu oi m at nh Nguồn tài liệu khác z 28 Murli Dharmadhikari, Yeast autolysis, http://www.extension.iastate.edu z 30 http://en.angelyeast.com/ gm @ 29 Lecture 3- cell structure and Function, http://202.204.115.67/jpkch/ jpkch/2008/ wswx/chapter%203.htm l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA ĐỀ TÀI a) b) lu an n va p ie gh tn to w d oa nl c) d) nv a lu an ll fu oi m at nh z e) f) a) Chuẩn bị mẫu nấm men dung dịch đệm b) Tự phân nấm men tủ ấm c) Dung dịch chứa enzyme invertase sau ly tâm d) Dung dịch Fehling A + Fehling B e) Dung dịch trước sau đun f) Lọc Cu2O giấy lọc z gm @ l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Kết xử lý số liệu yếu tố ảnh hưởng đến trình thu nhận chế phẩm enzyme invertase từ nấm men bia Phụ lục 1: Ảnh hưởng tỉ lệ nấm men/ dung mơi đến hoạt tính chế phẩm enzyme invertase DATASET NAME DataSet2 WINDOW=FRONT ONEWAY VAR00002 BY VAR00001 /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway lu [DataSet0] an ANOVA n va Hoat tinh E p ie gh tn to Sum of Squares df Mean Square Between Group 6696.776 1674.194 Within Groups 326.873 10 32.687 w 7023.649 14 Total d oa nl Sig 51.218 000 Hoat tinh E a lu Subset for alpha = 0.05 nv an N ll fu Ty le dung moi/nam men F 1.4 1.5 1.6 1.7 37.5667 oi 1.3 m Duncana at nh 49.9667 65.1333 z z 88.3667 @ gm 91.8333 l.c om Means for groups in homogeneous subsets are displayed an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable:Hoat tinh E (I) Ty le (J) Ty le Mean dung dung Difference (I- Std Error moi/nam moi/nam J) men men Sig Lower Bound Upper Bound -12.40000* 4.66814 024 -22.8013 -1.9987 1.5 -27.56667* 4.66814 000 -37.9679 -17.1654 1.6 -50.80000* 4.66814 000 -61.2013 -40.3987 1.7 * 4.66814 000 -64.6679 -43.8654 1.3 12.40000 * 4.66814 024 1.9987 22.8013 1.5 -15.16667* 4.66814 009 -25.5679 -4.7654 1.6 -38.40000* 4.66814 000 -48.8013 -27.9987 1.7 -41.86667* 4.66814 000 -52.2679 -31.4654 1.3 27.56667 * 4.66814 000 17.1654 37.9679 15.16667 * 4.66814 009 4.7654 25.5679 1.6 -23.23333 * 4.66814 001 -33.6346 -12.8321 1.7 -26.70000* 4.66814 000 -37.1013 -16.2987 1.6 1.3 50.80000* 4.66814 000 40.3987 61.2013 1.4 38.40000 * 4.66814 000 27.9987 48.8013 23.23333 * 4.66814 001 12.8321 33.6346 -3.46667 4.66814 475 -13.8679 6.9346 4.66814 000 43.8654 64.6679 4.66814 000 31.4654 52.2679 4.66814 000 16.2987 37.1013 at lu 1.4 w LSD 95% Confidence Interval 475 -6.9346 13.8679 1.3 an 1.4 n va p ie gh tn to 1.5 -54.26667 1.4 d oa nl fu 1.3 54.26667* 1.4 41.86667* 1.5 * oi m 26.70000 3.46667 nh 1.6 ll 1.7 an 1.7 nv a lu 1.5 4.66814 z z * The mean difference is significant at the 0.05 level gm @ Homogeneous Subsets l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Phụ lục Ảnh hưởng nhiệt độ tự phân đến hoạt tính enzyme invertase NEW FILE DATASET NAME DataSet3 WINDOW=FRONT ONEWAY VAR00002 BY VAR00001 /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway [DataSet1] lu ANOVA an Hoat tinh E va Sum of Squares df Mean Square F Sig n p ie gh tn to Between Groups Within Groups Total 1217.191 304.298 134.067 10 13.407 1351.257 14 22.697 000 w Homogeneous Subsets d oa nl a lu Hoat tinh E N an 50 81.1667 90.7000 z 45 73.3333 z at 55 71.5333 nh 3 64.3333 oi 40 m ll 35 fu Duncana nv Nhiet Subset for alpha = 0.05 gm @ l.c Means for groups in homogeneous subsets are displayed om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable:Hoat tinh E 95% Confidence Interval (I) (J) Mean Nhiet Nhiet Difference (I- Std Error do J) 35 lu an n va 40 p ie gh tn to -7.20000* 2.98961 037 -13.8613 -.5387 45 -16.83333* 2.98961 000 -23.4946 -10.1721 50 -26.36667* 2.98961 000 -33.0279 -19.7054 55 -9.00000* 2.98961 013 -15.6613 -2.3387 35 7.20000* 2.98961 037 5387 13.8613 45 -9.63333* 2.98961 009 -16.2946 -2.9721 50 -19.16667* 2.98961 000 -25.8279 -12.5054 55 -1.80000 2.98961 561 -8.4613 4.8613 35 16.83333* 2.98961 000 10.1721 23.4946 40 9.63333* 2.98961 009 2.9721 16.2946 50 -9.53333* 2.98961 010 -16.1946 -2.8721 55 7.83333* 2.98961 026 1.1721 14.4946 26.36667* 2.98961 000 19.7054 33.0279 19.16667* 2.98961 000 12.5054 25.8279 45 9.53333* 2.98961 010 2.8721 16.1946 55 17.36667* 2.98961 000 10.7054 24.0279 35 9.00000* 013 2.3387 15.6613 40 1.80000 2.98961 561 -4.8613 8.4613 45 -7.83333* 2.98961 026 -14.4946 -1.1721 50 -17.36667* 2.98961 -24.0279 -10.7054 ll fu oi m nh 2.98961 at 55 an 40 nv 35 a lu 50 Upper Bound 40 d oa nl w 45 Lower Bound gm LSD Sig z z @ l.c * The mean difference is significant at the 0.05 level .000 om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Phụ lục : Ảnh hưởng pH ban đầu mẫu tự phân đến hoạt tính enzyme invertase NEW FILE DATASET NAME DataSet1 WINDOW=FRONT ONEWAY VAR00001 BY ph /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway [DataSet2] lu ANOVA an Hoat tinh E va Sum of Squares df Mean Square F Sig n p ie gh tn to Between Groups Within Groups Total 2742.523 685.631 217.747 24.194 2960.269 13 28.339 000 w Homogeneous Subsets d oa nl Hoat tinh E an 56.0000 60.8000 ll fu nv Duncana N a lu pH Subset for alpha = 0.05 74.6000 86.5333 91.9000 at nh 5.5 oi m 4.5 z z @ gm Means for groups in homogeneous subsets are displayed l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable:Hoat tinh E 95% Confidence Interval Mean Difference (I) pH (J) pH Std Error (I-J) lu an 4.5 n va p ie gh tn to 4.01614 001 -27.6851 -9.5149 -30.53333* 4.01614 000 -39.6185 -21.4482 5.5 -35.90000* 4.01614 000 -44.9851 -26.8149 -4.80000 4.49018 313 -14.9575 5.3575 18.60000 * 4.01614 001 9.5149 27.6851 -11.93333* 4.01614 016 -21.0185 -2.8482 5.5 -17.30000* 4.01614 002 -26.3851 -8.2149 13.80000* 4.49018 013 3.6425 23.9575 30.53333* 4.01614 000 21.4482 39.6185 4.5 11.93333* 4.01614 016 2.8482 21.0185 5.5 -5.36667 4.01614 214 -14.4518 3.7185 25.73333 * 4.49018 000 15.5758 35.8908 35.90000 * 4.01614 000 26.8149 44.9851 17.30000* 4.01614 002 8.2149 26.3851 4.01614 214 -3.7185 14.4518 4.49018 000 20.9425 41.2575 4.49018 313 -5.3575 14.9575 013 -23.9575 -3.6425 4.49018 000 -35.8908 -15.5758 000 -41.2575 -20.9425 d oa nl w -18.60000* nv a lu 4.5 an 5.36667 fu 31.10000* ll m 4.80000 oi Upper Bound 4.5 5.5 Lower Bound z LSD Sig 4.49018 -25.73333* -31.10000 4.49018 * The mean difference is significant at the 0.05 level gm @ 5.5 * z -13.80000* at nh 4.5 l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Phụ lục 4: Ảnh hưởng thời gian tự phân đến hoạt tính chế phẩm enzyme invertase ONEWAY VAR00002 BY VAR00001 /MISSING ANALYSIS /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway [DataSet3] ANOVA Hoat tinh E lu Sum of Squares an Between Groups va Within Groups n p ie gh tn to Total df Mean Square 2216.016 554.004 623.160 10 62.316 2839.176 14 F Sig 8.890 002 Homogeneous Subsets w Hoat tinh E Subset for alpha = 0.05 d oa nl Thoi gian 24 59.0667 74.5000 81.2000 81.2000 87.0667 87.0667 94.8667 oi m at nh Sig ll 50 fu 48 an 36 nv 60 a lu Duncana N z Means for groups in homogeneous subsets are displayed z gm @ l.c om an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99