1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Khảo sát tác động của oligochitosan lên khả năng chịu mặn của cây mạ lúa (oryza sativa l )

73 0 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 73
Dung lượng 1,59 MB

Nội dung

I H C QU C GIA TP HCM TR NGă I H C BÁCH KHOA NGUY N TR NăPH KH OăSÁTăTÁCă NGăTHANH NG C A OLIGOCHITOSAN LÊN KH N NGăCH U M N C A CÂY M LÚA (Oryza sativa L.) Chuyên ngành: Công ngh sinh h c Mã s : 8420201 LU NăV NăTH CăS THÀNH PH H CHÍ MINH, tháng 07 n m 2022 I H C QU C GIA TP HCM TR NGă I H C BÁCH KHOA NGUY N TR NăPH KH OăSÁTăTÁCă NGăTHANH NG C A OLIGOCHITOSAN LÊN KH N NGăCH U M N C A CÂY M LÚA (Oryza sativa L.) Chuyên ngành: Công ngh sinh h c Mã s : 8420201 LU NăV NăTH CăS THÀNH PH H CHÍ MINH, tháng 07 n m 2022 Cơngătrìnhăđ Cán b h c hồn thành t i:ăTr ngă i h c Bách Khoa ậ HQG-HCM ng d n khoa h c: PGS.TS Lê Th Th y Tiên Cán b ch m nh n xét 1: TS Bùi Th M H ng Cán b ch m nh n xét 2: TS Tr n Th Thanh Hi n Lu năv năth căs ăđ c b o v t iăTr ngă i h căBáchăKhoa,ă HQGăTp.ăHCMă ngày 13 tháng n mă2022 Thành ph n H iăđ ngăđánhăgiáălu năv năth căs ăg m: PGS.TS Nguy n ThúyăH ng - Ch t ch TS Phan Th Thanh Nga - y viên th ăký TS Bùi Th M H ng - y viên ph n bi n TS Tr n Th Thanh Hi n - y viên ph n bi n PGS.TS Lê Th Th y Tiên - Th ăký Xác nh n c a Ch t ch H iăđ ngăđánhăgiáăLVăvƠăTr ngành sau lu năv năđưăđ CH T CH H Iă Nguy n ThúyăH ng Khoa qu n lý chuyên c s a ch a (n u có) NG ng TR NG KHOA I H C QU C GIA TP.HCM C NG HÒA Xà H I CH NGH AăVI T NAM c l p ậ T ậ H nh phúc I H C BÁCH KHOA NHI M V LU NăV NăTH CăS H tên h c viên: Nguy n Tr năPh ngăThanh MSHV: 1870594 NgƠy,ătháng,ăn măsinh:ă07/03/1995 N iăsinh:ăTp H Chí Minh Chun ngành: Cơng ngh sinh h c Mã s : 8420201 I TÊNă TÀI: Kh oăsátătácăđ ng c a oligochitosan lên kh n ngăch u m n c a m lúa (Oryza sativa L.) - Effects of oligochitosan on salt stress tolerance in rice seedlings (Oryza sativa L.) II NHI M V VÀ N I DUNG: ánhăgiáătácăđ ng h tr c aăphơnăđo n oligochitosan 5.994 Da n ngăđ 75 ppm lên s sinhătr ng phát tri n c a m lúaătrongăđi u ki n m n n ng đ mu i 0,6% III NGÀY GIAO NHI M V : 14/02/2022 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHI M V : 17/06/2022 V CÁN B H NG D N: PGS TS Lê Th Th y Tiên Tp HCM, ngày ầ tháng ầ n mă2022 CÁN B H NG D N (H tên ch ký) CH NHI M B MỌNă ÀOăT O (H tên ch ký) TR NG KHOA (H tên ch ký) i L I C Mă N Trong th i gian th c hi năđ tài đưănh năđ c s giúp d t nătìnhăvƠăđ ng viên t th y cơ, anh ch b năc ngănh ăt phíaăgiaăđình Tôi xin g i l i c mă năchơnă thƠnhăđ n ToƠn th th y, cô tr ng i h c Bách Khoa thƠnh ph H Chí Minh;ăđ c bi t lƠ th y cơ, cán b Ph̀ng thí nghi m Công ngh Sinh h c, B môn Công ngh sinh h c, Khoa K thu t H́a h căđư t oăđi u ki n vƠ giúpăđ su t trình h c t p, th c hi n lu năv năt t nghi p Cô Lê Th Th y Tiên đưăgi ng d y, t nătìnhăh ng d n, truy năđ t kinh nghi m vƠăluônăđ ng viên tơi q trình làm lu năv n Các th y, cô h iăđ ngăđưădƠnhăth iăgianăđ căvƠăđ́ngăǵpănhi u ý ki n cho lu năv n Cu i c̀ng, tơi xin bƠy t l̀ng bi tă năv iăgiaăđình, b n b̀, nh ngăng đ ng viên, giúpăđ iăđư cu c s ng vƠ xuyên su t trình th c hi n lu năv n M t l n n a, xinăđ c g i l i chúc s c kh e, l i c mă năchơnăthƠnhănh tăđ n th y cô, anh ch b n Chúc m iăng i g tăháiăđ c nhi u thành công! Tôi xin chân thành c mă n! Thành ph H Chí Minh, ngày 18 tháng n mă2022 H c viên th c hi n Nguy n Tr năPh ii ngăThanh C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TĨM T T Nghiên c u đ kíchăth c 5.994 Da c th c hi n v i m c tiêu đánh giá nhăh n ngăđ 75 ppm lên s sinhătr ng c a oligochitosan ng c a m lúa IR64 u ki n m n (NaCl 0,6%) in vitro Khi g p stress m n, s sinhătr ng c a b c ch đ ng th i kích ho t h th ng kháng m n c a S b sungăoligochitosanălƠmăt ngă kh n ngăch ng ch u c aăcơyăđ trì năđ nh ho tăđ ngăsinhătr ng c a Thông qua bi năđ i hình thái (s lá, s r , chi u dài lá, chi u r ng lá, chi uădƠiăthơnăt ng),ă sinhălỦă(c ngăđ quang h păt ng,ăhôăh p gi m),ăsinhăh́aă(t ngăhƠmăl t , protein, gi mă hƠmă l ngă proline,ă đ ng ch t khô, s c ng tan ho t tính enzyme ascorbate peroxydase) m căđ bi u hi năgeneăđápă ng m nă(t ngăm căđ bi u hi n gene P5CS r , P5CR stromal APX lá, cytosolic APX r , thylakoid bound ậ APX lá) iii Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn r , C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ASTRACT This study was investigated to evaluate the effect of oligochitosan size 5.994 Da at 75 ppm on the growth and salt tolerance of IR64 rice seedlings in in vitro under salinity stress at 0,6% NaCl Under saline conditions, the growth of plant is inhibited while activating the salt resistance system Oligochitosan treatment helped seedlings to increase their salt tolerance by significantly improving morphological traits (increase number of leaves, number of roots, leaves length, leaves width, stem length), physiologycal (increase photosynthesis intensity, reduced respiration), photosynthetic (increased content of dry weigth, pigments proteins, decreased proline content, soluble surgar and enzyme activity ascorbate peroxydase) and gene expression (increased levels of P5CS gene expression in leaves and roots, P5CR in leaves, cytosolic APX in leaves and roots, thylakoid bound - APX in leaves and roots, stromal APX in leaves) iv Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CỌNGăTRỊNHă C HOÀN THÀNH T IăTR BÁCH KHOA THÀNH PH H NGă IH C CHÍ MINH TơiăxinăcamăđoanăđơyălƠăcơngătrìnhănghiênăc u c aăriêngătơiăvƠăđ cs h ng d n khoa h c c a PGS TS Lê Th Th y Tiên Các n i dung nghiên c u, k t qu đ tài trung th căvƠăch aăcơngăb d i b t k hình th cănƠoătr căđơy.ăNh ng s li u b ng bi u ph c v cho vi c phân tích, nh năxét,ăđánhăgiáăđ c tác gi thu th p t ngu n khác có ghi rõ ph n tài li u tham kh o Ngoài ra, lu năv năc̀năs d ng m t s nh năxét,ăđánhăgiáăc ngănh ăs li u c a tác gi khác,ăc ăquanăt ch căkhácăđ u có trích d n thích ngu n g c N u phát hi n có b t k s gian l n tơi xin hồn tồn ch u trách nhi m v n i dung lu năv năc a Tr ng i h c Bách Khoa TP H Chí Minh khơng liênăquanăđ n nh ng vi ph m tác quy n, b n quy n gây trình th c hi n (n u có) Thành ph H Chí Minh, ngày 18 tháng n mă2022 Tác gi Nguy n Tr năPh ngăThanh v Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an M CL C DANH M C B NG viii DANH M C HÌNH NH ix M U CH NGă1:ăT NG QUAN 1.1 Cây lúa 1.1.1 căđi m sinh h c c aăcơyălúaăn c 1.1.2 Gi ng lúa IR64 1.2 C ngăth ng mu i 1.2.1 nhăngh aă 1.2.2 Tác h i c aăc ngăth ng mu i lên lúa 1.3 C ăch kháng m n lúa 1.4 Các nghiên c u kh c ph c lúa b nhi m m n 13 1.5 Chitosan ậ Oligochitosan 16 1.5.1 C u trúc ậ Tính ch t 16 1.5.2 Tácăđ ng c a Chitosan ậ Oligochitosan lên kh n ngăkhángăm n 17 1.5.3 Các nghiên c u v Chitosan ậ Oligochitosan 18 CH NGă2:ăV T LI UăVÀăPH NGăPHÁP 21 2.1 V t li u 21 2.1.1 Gi ng lúa IR64 21 2.1.2 Oligochitosan 21 2.2ăPh ngăphápănghiênăc u 21 2.2.1 T o h t lúa n y m m in vitro 23 2.2.2 Thí nghi m kh o sát nhăh ng c a oligochitosan lên kh n ngăđápă ng v i stress m n c a m lúa in vitro 23 2.2.2.1 M c tiêu 23 2.2.2.2ăPh ngăphápă 23 vi Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.2.3ăPh 2.3ăPh CH ngăphápăth c hi n 24 ngăphápăphơnătíchăth ng kê 30 NGă3:ăK T QU VÀ BÀN LU N 32 3.1 K t qu 32 3.1.1 S bi n đ i hình thái c aăcơyălúaătrongăđi u ki n m n 32 3.1.2 Các bi năđ i sinh lý c a m lúaătrongăđi u ki n m n 34 3.1.3 Các bi năđ i sinh hóa m lúaătrongăđi u ki n m n 35 3.1.3.1ăHƠmăl ng ch t khô 35 3.1.3.2ăHƠmăl ng sác t quangăh pă 35 3.1.3.3ăHƠmăl ng proline 36 3.1.3.4ăHƠmăl ngăđ 3.1.3.5ăHƠmăl ng protein 37 ng tan 37 3.1.3.5 Ho t tính c a enzyme ascorbate peroxydase 38 3.1.4 Ch tiêu phân t 38 3.2 Bàn lu n 40 3.2.1 nhăh ng c a stress m n lên s sinhătr 3.2.2ăTácăđ ng c a oligochitosan lên s sinhătr ng c a lúa 40 ng c a m lúa trongăđi u ki n m n 41 3.2.3ăTácăđ ng c a oligochitosan lên s bi u hi n gene 42 CH NGă4:ăK T LU N VÀ KI N NGH 43 4.1 K t lu n 43 4.2 Ki n ngh 43 TÀI LI U THAM KH O 44 PH L C 50 vii Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [19] B Gupta and B Huang,ă “Mechanismă ofă Salinityă Toleranceă ină Plants:ă Physiological, Biochemical, and Molecular Characterization,”ăinăInternational Journal of Genomics, vol 2014, April 2014 Doi: 10.1155/2014/701596 [20] N.ă V.ă ă Ti nă andă V.ă N.ă Sinh,ă “S ă nôngă nghi p thành ph H Chíă Minh,”ă Internet: http://www.sonongnghiep.hochiminhcity.gov.vn/tintuc/Lists/Posts, March 31st, 2016 [21] C Qu c,ă“Tu i tr ,” Internet: https://tuoitre.vn/trong-lua-o-mien-tay-chiu-manchi-bang-ne-man-20180320193426965.htm, March 21st, 2018 [22] M Kumar el at., “Over-expression of dehydrin gene, OsDhn1, improves drought and salt stress tolerance through scavenging of reactive oxygen species ină riceă (Oryzaă sativaă L.),”ă Journal of Plant Biology, vol 57, pp 383ậ393, November 2015 Doi: 10.1007/s12374-014-0487-1 [23] L Yongchang, J Sun and Y.ăWu,ă“ArabidopsisăATAF1ăenhancesătheătoleranceă to salt stress and ABA in transgenic rice,”ăJournal Plant Research, vol 129, pp 955-962, September 2016 Doi: 10.1007/s10265-016-0833-0 [24] P Salachana el at.,ă “Oligo-Alginate with Low Molecular Mass Improves Growth and Physiological Activity of Eucomis autumnalis under Salinity Stress,”ă Molecules, vol 23, p 812, April 2018 Doi: 10.3390/molecules23040812 [25] L S Peykani and M F Sepehr,ă “Effectă ofă chitosan on antioxidant enzyme activity, proline, and malondialdehyde content in Triticum aestivum L and Zea maizeăL.ăunderăsaltăstressăcondition,”ăPlant Physology, vol 9, pp 2661-2670, January 2019 Doi: 10.22034/ijpp.2018.545906 [26] M Namphueng and P Wattana,ă“Pretreatmentăwithădifferentămolecularăweightă chitosansă encouragesă droughtă toleranceă ină riceă (Oryzaă sativaă L.)ă seedling,”ă Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca, vol 48, pp 2072-2084, December 2020 Doi: 10.15835/nbha48412018 [27] G Zhang el at.,ă“ExogenousăApplicationăofăChitosanăAlleviateăSalinityăStressă inăLettuceă(LactucaăsativaăL.),”ăHorticulturae, vol 7, p 342, September 2021 Doi: 10.3390/horticulturae7100342 47 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [28] A Hidangmayum el at.,ă “Application of chitosan on plant responses with specialăreferenceătoăabioticăstress”,ăPhysiology and Molecular Biology of Plants, vol 25, pp 313-326, January 2019 Doi: 10.1007/s12298-018-0633-1 [29] R Sharif el at., “TheăMultifunctionalăRoleăofăChitosanăin Horticultural Crops; Aă Review,”ă Molecules, vol 23, pp 872, April 2018 Doi: 10.3390/molecules23040872 [30] R Songlin and X Qingzhong,ă “Effectsă ofă Chitosană Coatingă onă Seedă Germination and Salt-toleranceăofăSeedlingăinăHybridăRiceă(OryzaăsativaăL.),”ă Zuo Wu Xue Bao, vol 28, pp 803-808, January 2002 [31] L Ma el at.,ă “Alleviationă ofă exogenousă oligochitosană onă wheată seedlings growthăunderăsaltăstress,”ăProtoplasma, vol 249, pp 393ậ399, May 2011 Doi: 10.1007/s00709-011-0290-5 [32] L M González el at., “Effectăofăseedătreatmentăwithăchitosanăonătheăgrowthăofă rice (Oryza sativa L.) seedlings cv INCA LP-5ă ină salineă medium,”ă Cultivos Tropicales, vol 36, no 1, pp 134-150, January 2015 [33] Y Zhang el at.,ă“Chitooligosaccharideăplaysăessentialărolesăin regulating proline metabolismă andă coldă stressă toleranceă ină riceă seedlings,”ă Acta Physiologiae Plant, vol 41, 2019 Doi: 10.1007/s11738-019-2864-3 [34] P Carillo and Y Gibon, “ResearchGate,”ă Internet:ă https:/www.researchgate.net/publication/211353600_PROTOCOL_Extraction _and_determination_of_proline, October 16th, 2016 [35] J Coombs el at.,ă“Measurementăofăstarchăandăsucroseăinăleaves,”ăin Techniques in Bioproductivity and Photosynthesis, 2nd ed., vol 17, Pergamon, 1985, pp 219 ậ 228 [36] C G Jones, J D Hare, and S J Compton,ă“Measuringăplantăproteinăwithătheă Bradfordăassay,”ăJounal of Chemical Ecology, vol 15, 1989, pp 979-992 Doi: doi.org/10.1007/BF01015193 [37] N J Kruger, “TheăBradfordăMethodăforăProteinăQuantitation,”ăin Methods in Molecular Biology, vol 32, 1994, pp 9-15 Doi: 10.1385/0-89603-268-X:9 48 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [38] J Hartmann and F.ă Asch,ă “Extraction,ă Storageă Duration,ă andă Storageă Temperature Affect the Activity of Ascobate Peroxidase, Glutathione Redustase,ăandăSuperoxideăDismustaseăinăRiceăTissue,”ăBiology (Basel), vol 8, no 4, pp.70, December 2019 Doi: 10.3390/biology8040070 [39] M.ăW.ăPfaffl,ă“Relativeăquantification,”ăReal – time PCR, pp 63 ậ 82, 2001 [40] Ư Çelik, B C Çakốr and Ç Atak,ă “Identificationă ofă theă antioxidantă defenseă genesă whichă mayă provideă enhancedă saltă toleranceă ină Oryzaă sativaă L.,”ă Physiology and Molecular Biology of Plants, vol 25, pp 85 ậ 99, October 2018 Doi: 10.1007/s12298-018-0618-0 [41] A.ăM.ăReza,ă“EffectăofăSalinity Stress on Growth, Sugar Content, Pigment, and EnzymeăActivityăofăRice,”ăInternational Journal of Botany, vol 7, pp 73-81, January 2011 Doi: 10.3923/ijb.2011.73.81 [42] H Zang, Y Zhao and J.-K Zhu, "Thriving under Stress: How Plants Balance Growth and the Stress Response," Developmental of Cell, vol 55, pp 529-543, December 2020 Doi: 10.1016/j.devcel.2020.10.012 [43] M G Kibria, M Hossain, and M A Hoque,ă“AntioxidantăDefenseăMechanismsă ofăSalinityăToleranceăinăRiceăGenotypes,”ăRice Science, vol 24, pp 155-162, May 2017 Doi: 10.1016/j.rsci.2017.05.001 [44] D.W Kim el at., "Gene Transcription in the Leaves of Rice Undergoing Saltinduced Morphological Changes (Oryza sativa L.)," Molecules and Cells, vol 24, pp 45-59, August 2007 [45] J S Koo el at.,ă “Responsesă ofă Photosynthetică Efficiencyă andă Ascorbateă PeroxidaseăInducedăbyăSaltăStressăinăRiceă(OryzaăsativaăL.),”ă Journal of Life Science, vol 20, pp 1173-1180, August 2010 Doi: 10.5352/JLS.2010.20.8.1173 [46] V T Sang el at., “Theă beneficială propertiesă ofă marineă polysaccharidesă ină alleviationăofăallergicăresponses,”ăMolecular nutrition & food research, vol.59, pp 219 ậ 238, January 2015 Doi: 10.1002/mnfr.201400412 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [47] S.ă C.ă Rathă Pichyangkura,ă “Biostimulantă activityă ofă chitosană ină horticulture,”ă Scientia Horticulturae, vol 196, pp 49-65, November 2015 Doi: 10.1016/j.scienta.2015.09.031 [48] M N Abdelaziz el at.,ă“RelationshipăofăSalinityăToleranceătoăNa+ Exclusion, ProlineăAccumulation,ăandăAntioxidantăEnzyme,ăActivityăinăRiceăSeedlings,”ă Agriculture, vol 8, p 116, November 2018 Doi: 10.3390/agriculture8110166 [49] S Negrão el at., "Recent updates on salinity stress in rice: From physiological to molecular responses," Plant Sciences, vol 30, pp 329 -377, 2011 Doi: 10.1080/07352689.2011.587725 50 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PH L C NGăPHÁP PHÂN TệCH PH L C 1: CÁCăPH Ch tiêuăđánhăgiáăm căđ ch u m n c a lúa SES (Standard Evaluation System of Rice, 2013) B ng 1: Thang đáng giá m c đ ch ng ch u m n (SES) C păđ Quanăsátăđánhăgiáăsinhătr ng lúa Sinhătr Sinhătr ng g nănh ăbìnhăth ngănh ngăćăm t s gi m kh n ngă đ nhánh m t s b b c màu, h iătr ng h iăcu n l i Sinhătr ngăvƠăđ nhánh gi m; h u h t b đ i màu, tr ng cu n l i, ch có m t s có th m c dài S t ngătr ch t H u h t t t c cácăcơyăđ u ch t ho c khô Ph ngăvƠăđ nhánh g nănh ăbìnhăth ng ng hồn tồn ch m d t; h u h t khô; m t s ngăpháp phân t́ch hƠmăl ng s c t quang h p: cătínhătốn,ăquyăđ i d a Các h s công th c (2.2, 2.3, 2.4)ăđưăđ giá tr h s t t phân t c a phân t s c t dung môi ethanol 96% B ng 2: Giá tr h s t t phân t c a s c t dung môi ethanol 96% B c sóng (nm) Di p l c t a Di p l c t b Carotenoid 470 83,83 23,11 - 649 24,57 46,84 - 665 2,05 114,75 2450 ng chu n proline: B ng 3: N ng đ proline chu n d ng đ N ngăđ proline dung d ch chu n (mM) ng chu n Blank - 0,5 0,2 Thu c th ninhydrin (µL) Dung d ch proline chu n (µL) Ethanolă:ăN c (70:30 v/v) (µL) 1000 100 100 100 100 100 500 400 400 400 400 400 51 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PROLINE 0,18 0,16 0,14 0,12 0,1 0,08 0,06 0,04 0,02 y = 0,0167x + 0,0818 R² = 0,9813 Hình 1: 4 ng chu n proline ng chu n D-glucose: B ng 4: N ng đ D-glucose d ng đ ng chu n Blank N ngăđ D-glucose (µg/mL) - 10 25 50 75 100 150 200 Dung d ch D-glucose chu n (mL) - 1 1 1 1 - - - - - - - - Phenol 5% (v/v) (mL) 1 1 1 1 H2SO4 đ c ngu i 95% (mL) 5 5 5 5 N c c t (mL) D-glucose 1,6 1,4 1,2 y = 0,0067x + 0,0075 R² = 0,9974 0,8 0,6 0,4 0,2 0 50 100 Hình 2: 150 200 ng chu n D-glucose 52 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 250 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ng chu n protein: B ng N ng đ albumin d ng đ ng chu n Blank N ngăđ Albumin (µg/mL) - 10 20 30 40 50 Dung d ch Albumin chu n 0,1 mg/mL (mL) 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 5 5 5 N c c t (mL) Thu c th Bradford (mL) ALBUMIN 0,4 0,35 0,3 0,25 y = 0,0038x + 0,1492 R² = 0,9949 0,2 0,15 0,1 0,05 0 10 20 Hình 3: 30 40 ng chu n albumin 53 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 50 60 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PH L C 2: K T QU THÍ NGHI M K t qu th ng kê: 1.1 Hình thái m lúa Hình 1.2 S r Hình 1.1: S Hình 1.5: Chi u dài thân 54 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 1.3: Chi u dài r Hình 1.4: Chi u dài 1.2 Các bi n đ i sinh lý m lúa u ki n m n Hìnhă1.5:ăC ngăđ quang h p Hìnhă1.6:ăC 55 ngăđ hơ h p Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 1.3 Các bi n đ i sinh hóa m lúa u ki n m n 56 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hìnhă1.6:ăHƠmăl ng ch t khơ Hìnhă1.7:ăHƠmăl ng di p l c t a Hình 1.9:ăHƠmăl ng carotenoid Hìnhă1.8:ăHƠmăl ng chlorophyll b Hìnhă1.10:ăHƠmăl ng proline Hìnhă1.11:ăHƠmăl 57 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn ng proline r C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hìnhă1.12:ăHƠmăl ngăđ Hìnhă1.14:ăHƠmăl ng protein ng Hìnhă1.13:ăHƠmăl ngăđ ng r Hình 1.15: Ho t tính enzyme APX Hình 1.16: Ho t tính enzyme APX r 58 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an K t qu ch y Realtime PCR: 2.1 Ảene liên quan đ n sinh t ng h p proline Hình 2.1: Hình bi u di n m i P5CS- Hình 2.2: Hình bi u di n m u r m i P5CS-F/R F/R Hình 2.3: Hình bi u di n m i P5CR- Hình 2.4: Hình bi u di n r m i P5CRF/R F/R 59 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2 Ảene liên quan đ n ho t tính c a enzyme ascorbate peroxdase Hình 2.5: Hình bi u di n m i Hình 2.6: Hình bi u di n r Cytosolic-APX-F/R Cytosolic-APX-F/R m i Hình 2.7: Hình bi u di n m i Hình 2.8: Hình bi u di n r Thylakoid_bound-APX-F/R Thylakoid_bound-APX-F/R m i Hình 2.9: Hình bi u di n m i Stromal- Hình 2.10: Hình bi u di n r APX-F/R Stromal-APX-F m i 60 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn

Ngày đăng: 27/08/2023, 20:39

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w