Thăm dò khả năng phòng và chữa ung thư của hoạt chất scuterbarbalactone vn từ cây bách chi liên trên chuột gây ung thư thực nghiệm

1 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ung thư bệnh nan y, gánh nặng bệnh tật toàn cầu gây tỉ lệ tử vong cao Theo báo cáo Hiệp hội Quốc tế chống ung thư (UICC) cho thấy bệnh ung thư nguyên nhân gây tử vong cho gần triệu người năm 2004 chiếm 12,5% tổng số người chết bệnh tật Con số người mắc bệnh ung thư tăng nhanh đạt tới số 16 triệu người vào năm 2020 dự đoán Tổ chức Y tế giới WHO [1] Do vậy, nhu cầu sử dụng thuốc để phòng ngừa chữa trị bệnh nan y đặc biệt bệnh ung thư tất yếu cần thiết, qua góp phần vào việc chăm sóc bảo vệ sức khoẻ cộng đồng quốc gia giới Hiện nay, hướng tìm kiếm thuốc phịng chữa trị ung thư có hiệu lực nhà khoa học quan tâm hướng tập trung vào hợp chất thiên nhiên có nguồn ngốc từ thực vật Theo đánh giá Tổ chức Y tế giới, 80% dân số giới tin dùng loại thảo dược cho việc chăm sóc sức khỏe ban đầu khoảng 60% tác nhân hoá trị liệu khác dùng điều trị ung thư có nguồn gốc từ hợp chất tự nhiên [54], [55], [56] Việt Nam nước nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa với khoảng 3/4 diên tích nước rừng núi trùng điệp thảm thực vật phong phú đa dạng Đây điều kiên thuận lợi để hướng nghiên cứu phát triển thuốc phòng chữa trị ung thư từ thực vật hồn tồn Theo hướng nghiên cứu này, Viên nghiên cứu ung thư quốc gia Hoa kỳ (National cancer Institute - NCI) hợp tác với nhiều quốc gia Bangladesh, Viêt Nam, Brazil, Costa Rica, Lào, Mêxicô, v.v… để nghiên cứu tìm kiếm hoạt chất từ thực vật có khả phòng chống chữa trị ung thư [33], [58], [59] Đến nay, số hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên chích thức sử dụng cho bệnh nhân ung thư Camptothecine chiết xuất từ Hạnh phúc (Camptotheca acuminata) [60], hai hoạt chất Vinblastine Vincristine chiết xuất từ Dừa cạn (Catharan thus roseus L G.Don) [61], Taxol chiết xuất từ Thông đỏ ( Taxus brevifolia) [62], v.v… Nổi bật năm 2006, Đỗ thị Thảo - Viện Công nghệ sinh học - Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam phát hiên hoạt chất Scuterbarbalactone VN (SBVN) hoạt chất lần phân lập, tách chiết từ Bán chi liên (Scutellaria barbata D.Don) chứng minh cấu trúc hố học có khả diệt ức chế nhiều loại tế bào ung thư phát triển điều kiện in-vitro, hoạt chất có hoạt tính mạnh diệt ức chế tế bào ung thư phát triển gây độc với tế bào thường Dù hoạt chất để phát triển thành thuốc chữa bệnh, sau chứng minh điều kiện in-vitro phải thử nghiêm mức độ in-vivo để tạo sở cho nghiên cứu tiền lâm sàng (Preclincal) thử nghiệm lâm sàng (Clinical trial) Vì thế, muốn tiếp tục nghiên cứu sâu khả phòng chữa ung thư hoạt chất SBVN mức in-vivo Qua đó, tạo sở cho nghiên cứu khoa học thử nghiêm tiền lâm sàng lâm sàng sau này, nhằm đến đích cuối làm thuốc phòng ngừa chữa trị ung thư có hiệu kinh tế an tồn cho nhân dân góp phần vào việc chăm sóc bảo vệ sức khoẻ cho cộng đồng, tiến hành nghiên cứu đề tài ''Thăm dò khả phòng chữa ung thư hoạt chất Scuterbarbalactone VN từ bán chi liên chuột gây ung thư thực nghiệm'' Mục tiêu nghiên cứu đề tài • Gây u thực nghiệm chuột BALB/c tế bào LLC (Lewis Lung Carcinoma) để tạo mơ hình cho nghiên cứu khả phòng chữa ung thư hoạt chất SBVN • Tìm hiểu chứng minh khả phòng chữa ung thư hoạt chất SBVN mức in-vivo • Thiết lập tiền đề cho thử nghiệm tiền lâm sàng lâm sàng hoạt chất tiềm SBVN Nội dung nghiên cứu đề tài • Gây ung thư thực nghiệm chuột nhắt trắng dịng BALB/c hố chất 7,12- dimethyl[a]anthracene (DMBA) dịng tế bào ung thư ni cấy in-vitro LLC • Kiểm tra xác định liều độc cấp tính gây chết 50% động vật thí nghiệm LC50 (lethal dose) hoạt chất SBVN • Dựa vào kết nghiên cứu độc tính in-vitro có liều độc cấp LC50, tiến hành xác định nồng độ SBVN sử dụng cho bước thử nghiệm invivo chuột • Thực việc sử dụng hoạt chất SBVN làm chất bảo vệ để ngăn chặn phát triển diệt khối u ung thư thực nghiệm • Thu nhận kết quả, tiến hành xử lí số liệu thống kê hệ thống để phân tích liệu, thiết lập hình bảng minh hoạ, từ rút kết luận nghiên cứu Chƣơng TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 TÌNH HÌNH UNG THƢ TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM Ung thư bệnh nan y, gây tỉ lệ tử vong cao Theo báo cáo Tổ chức Y tế giới (WHO) bệnh ung thư dần vượt qua bệnh tim mạch để trở thành bệnh gây tử vong cao giới Trong năm từ 1998-2002, có 24,6 triệu người chết ung thư, riêng năm 2004 có triệu bệnh nhân ung thư tử vong thêm 11 triệu người mắc bệnh [52], [53] Trong tổng số 58 triệu người chết toàn giới năm 2005, bệnh ung thư nguyên nhân gây tử vong cho 7,6 triệu (hay 13% tổng số) người Các ca tử vong ung thư khơng ngừng tăng, với mức ước tính khoảng triệu người chết ung thư vào năm 2015 11,4 triệu người chết vào năm 2030 (http://www.benhungthu.net.vn) Các loại bệnh ung thư dẫn đến tỷ lên tử vong chung như: Bệnh ung thư Phổi khiến 1,3 triệu người chết năm Bệnh ung thư Dạ Dày khiến triệu người chết năm Bệnh ung thư Gan khiến 662.000 người chết năm Bệmh ung thư Đại Tràng khiến 655.000 người chết năm Bệnh ung thư Vú khiến 502.000 người chết năm Số người chết bệnh ung thư thường rơi vào quốc gia có thu nhập bình qn trung bình thấp (http://www.benhungthu.net.vn) Ung thư gánh nặng bệnh tật toàn cầu Ở Việt Nam, chưa có thống kê đầy đủ theo thơng tin từ bệnh viện K Trung ương, năm nước có thêm khoảng 150.000 ca mắc ung thư 75.000 ca tử vong bệnh ung thư (theo báo www.ungthu.net.vn) Theo dự báo Bộ Y tế Hội nghị sơ kết phòng chống ung thư tháng 7/2009, năm 2010 Việt Nam có khoảng 200.000 trường hợp mắc ung thư 100.000 người tử vong Tuy nhiên, điều đáng lo ngại số bệnh nhân mắc bệnh ngày trẻ hoá, tế bào ung thư có xu hướng ác tính thường cao thời gian để khối u có kích thước nhân ngắn (http://www.ungthu.net.vn) Như vậy, ung thư nguyên nhân hàng đầu gây tử vong Việt Nam Ung thư xảy nam nữ, nam giới, bệnh ung thư thường gặp như: phổi, gan, vòm họng nữ ung thư vú, ung thư cổ tư cung Đặc biệt, ung thư nữ thường xuất độ tuổi 40-50, ngồi ung thư cịn mối đe dọa với người già Ung thư có khả điều trị khỏi phát giai đoạn sớm Để hạn chế gia tăng bệnh này, việc tìm phương cách phòng chữa trị ung thư mối quan tâm thực cấp thiết Phương hướng tìm kiếm thảo dược lấy từ tự nhiên, để phòng chữa trị ung thư ưu sách 1.2 UNG THƢ HỌC, ĐẶC TÍNH CƠ BẢN, NGUYÊN NHÂN VÀ CÁC PHƢƠNHG PHÁP PHÒNG TRÁNH, CHỮA TRỊ Ung thư tên chung dùng để gọi nhóm bệnh 200 loại khác nguồn gốc tế bào phát sinh, khả di căn, tiên lượng cách thức điều trị có chung đặc điểm bật tăng sinh vô hạn, vô tổ chức khơng tn theo chế kiểm sốt phát triển của thể, di căn, tồn tại, xâm lấn phát triển tế bào ưng thư [3], [4], [32] Ung thư bênh tế bào, ung thư thường xuất phát từ tế bào ban đầu tổ chức thể vượt qua chế kiểm soát thể, phát triển, sinh sơi khơng ngừng, hình thành đám tế bào có chung đặc điểm phát sinh, phát triển vô tổ chức xâm lấn chèn ép vào mô, quan tổ chức xung quanh Như ung thư bệnh lý ''ác tính'' tế bào đa dạng ngun, cách phịng bệnh, chẩn đốn điều trị C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hippocrate, nhà y học Hy Lạp cổ đại xem người nhận dạng bệnh ung thư ông đặt tên cho bệnh ''karkino'' theo tiếng Hy lạp có nghĩa cua xâm lấn, phát triển khối u ác tính nhắc ơng nhớ tới hình ảnh ''con cua có tua tủa'' Ngày ung thư học giới biết đến với từ ''cancer'' theo tiếng anh có nghĩa cua tiếng la tinh [5], [17] 1.2.1 Các đặc tính bệnh ung thƣ  Ung thư bệnh tế bào Ung thư tế bào phải thời gian nhiều năm có khích thước đủ lớn xuất dấu hiệu nhận biết Thông thường, tế bào có tuổi thọ định tuân thủ chặt chẽ theo qui luật chung ''phát triển - già - chết'' Các tế bào chết lại thay tế bào Cơ thể có chế kiểm sốt qui luật nghiêm gặt trì số lượng tế bào quan, tổ chức mức ổn định Bệnh ung thư bắt đầu có tế bào vượt qua chế kiểm soát thể, phát triển, sinh sơi khơng ngừng, hình thành đám tế bào (khối u) có chung đặc điểm phát triển vô tổ chức, xâm lấn chèn ép vào quan, tổ chức xung quanh gây tử vong cho người bệnh [12], [21]  Bệnh ung thư gồm nhiều giai đoạn Quá trình phát triển từ tế bào ung thư ban đầu thành khối u ung thư đe dọa tính mạng người bệnh trải qua nhiều giai đoạn [32] Giai đoạn đầu trình hình thành tế bào ung thư khởi phát ảnh hưởng tác nhân nội bào hay ngoại bào Tiếp theo q trình phân chia liên tục không ngừng tế bào ung thư để thành khối u gọi trình phát triển bệnh Các tế bào ung thư khối u tiếp tục tăng sinh, tự phụ cảm nhận biết giới hạn với tế bào lân cận sản xuất ạt cytokine (cell signals) enzym protease dẫn tới phá huỷ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an màng đệm lót mơi trường ngoại bào bao quanh, khiến chúng liên kết lỏng lẻo, dễ dàng bứt khỏi khối u mẹ, theo mạch máu mạch bạch huyết di chuyển tới tổ chức quan mới, bám lại tiếp tục tăng sinh vơ tổ chức Q trình gọi di (metastatic process) Các tế bào ung thư chèn ép hay di vào quan giữ chức sống thể não, tim, phổi, gan, thận v.v khiến bệnh nhân tử vong [1], [21], [57] Như vậy, trình hình thành phát triển bệmh ung thư tóm tắt hình Tế bào bình thường Tác nhân nội bào ngoại bào Tế bào ung thư Quá trình tăng sinh phát triển U ác tính Di xâm lấn Tử vong Chữa trị Sống sót Hình Sơ đồ hình thành phát triển ung thư 1.2.2 Khái quát tế bào ung thƣ  Phân loại ung thư theo nguồn gốc tế bào Theo nguồn gốc phát sinh, ung thư nhà khoa học phân chia gồm [27], [32], [57] - Carcinoma (nguồn gốc biểu bì): dạng ung thư phổ biến nhất, phát sinh từ tế bào có nguồn gốc từ phơi phơi ngồi Như ung thư phổi, ung thư vú, ung thư trực tràng, v.v… - Sarcoma (ung thư liên kết): dạng ung thư gặp, phát sinh từ tế bào có nguồn gốc phơi tế bào thuộc vào hệ thống chống đỡ cho thể xương, sụn, mỡ, mô liên kết Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Lymphoma (ung thư hạch): dạng ung thư gặp phát sinh từ hạch bạch huyết mô thuộc hệ thống miễn dịch thể ung thư Lymphoma Burkitt - Leukemia (ung thư máu - bệnh bạch cầu): dạng ung thư nguy hiểm biểu bệnh sớm, trẻ em người trẻ tuổi, phát sinh từ mô tạo máu, tế bào máu non thuộc tuỷ xương có xu hướng tích tụ thành số lượng lớn hệ máu trường hợp ung thư bạch cầu cấp tính (Human Acute Leukemia)  Các đặc tính tế bào ung thư Nhìn chung, tế bào ung thư biệt hoá so với tế bào bình thường phân chia nhanh chóng diễn liên tục [21] Trong q trình phân chia, đặc tính tiềm ẩn chúng thay đổi bất thường nhanh theo thời gian Ví dụ, tế bào ung thư gan khả sản xuất vài loại enzym đặc trưng so với tế bào gan bình thường khác qua nhiều lần phân chia bất thường, chúng chí hẳn chức đặc trưng tế bào gan Kiểu bất thường biến đổi nhanh chóng hệ gien tế bào ung thư Các tế bào ung thư thường có nhiều nhiễm sắc thể bất thường không ổn định Hình thái, tế bào ung thư có tỉ lệ nhân/tế bào chất cao, nhân to, bờ nét không rõ, xuất nhiều sợi phân bào so với tế bào bình thường khác [17], [21], [32] Do đó, tế bào ung thư có đặc tính riêng như: - Khả xâm lấn di tế bào ung thư Đây tính đặc trưng nguy hiểm tế bào ung thư riêng tế bào ung thư có Các tế bào ung thư khơng khu trú chỗ mà chúng tăng cường xâm lấn vào quan, tổ chức sống lân cận, xâm nhập vào hệ thống tuần hoàn bạch huyết để di chuyển tới vị trí cách xa nơi tế bào ung thư Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an phát sinh Tại vị trí mới, tế bào ung thư lại tiếp tục tăng sinh tạo khối u mới, chèn ép vào tổ chức mang chức sống thể gây tử vong cho bệnh nhân Hiện nay, đặc thù tế bào ung thư chưa hoàn toàn sáng tỏ sở khoa học [17], [21], [57] Khả di tế bào ung thư phụ thuộc vào tiềm phát triển chúng vị trí bị bao quanh tế bào hoàn toàn khác biệt mặt chức hình thái Tiềm có nhờ xuất số protein tế bào ung thư Ví dụ, số enzym tế bào ung thư tiết làm thoái hoá phân tử collagen hay số protêin màng đệm lót khác proteolycan, glycosaminoglycan để chúng xâm nhập, tồn phát triển tổ chức, quan mà chúng vừa di chuyển tới [21], [50], [57] - Khả sinh sản khơng thể kiểm sốt tế bào ung thư Trong thể người, phút có tới 10 triệu tế bào sinh sơi Q trình phân chia diễn theo trình tự khn mẫu kiểm sốt chặt chẽ Khi tế bào bình thường trở thành tế bào ung thư, phân chia bất thường Q trình phân chia bất thường diễn nhanh bình thường tế bào cháu sinh không trưởng thành chết tế bào bình thường khác Ngược lại, chúng tiếp tục trình phân chia vô tổ chức ngày trở nên khác biệt di truyền với tế bào mẹ ban đầu [11], [50], [57] -Khả vượt qua kiểm soát hệ miễn dịch tế bào ung thư Tế bào ung thư có khả vượt qua kiểm sốt hệ miễn dịch để tồn phát triển Trong hệ máu thể có tế bào “giết tự nhiên” (Natural Killer Cell) nhận dạng tiêu diệt tế bào lạ xâm nhập hay xuất thể Tuy nhiên, điều đáng ngạc nhiên Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 10 tế bào ung thư có thay đổi đáng kể khác lạ với tế bào bình thường lại thoát khỏi phát tiêu diệt hệ miễn dịch [65] Có lẽ tế bào ung thư che dấu để vượt qua nhận biết tế bào Lympho Kết hệ miễn dịch thể phát tế bào ung thư tiêu diệt chúng Tế bào ung thư tế bào thể bệnh nhân bị biến chất, thoái hoá nguy làm hệ miễn dịch không nhận biết [21] 1.2.3 Nguyên nhân gây bệnh ung thƣ Đến nay, chưa thể xác định rõ loại nguyên nhân chung cho loại ung thư, loại ung thư có nguyên nhân riêng biệt, tác động theo nhiều chế khác chia làm nhóm tác nhân lớn: Tác nhân mơi trường tác nhân sinh học [3], [4]  Tác nhân môi trường: gồm tác nhân hoá học, vật lý Tác nhân hoá học gây ung thư khói thuốc lá, thành phần hoá học thuốc trừ sâu, sản phẩm phụ gia dùng cho bảo quản thực phẩm, tạo mầu khơng đạt tiêu chuẩn, chất A-mi-ăng Trong khói thuốc xem mối nguy hại tiềm ẩn lớn cho sức khoẻ cộng đồng với 20 chất hố học có khả gây bệnh ung thư như: ung thư phổi, quản, thực quản, v.v… Ngồi khí đốt xăng dầu, động cơ, khí thải nhà máy công nghiệp, v.v… xem độc hại gây ôi nhiễm môi trường nguyên nhân gây bệnh ung thư cao cho người [4], [21], [36], [57] Tác nhân hoá học gây ung thư theo cách: * Tác động trực tiếp đến hệ gen gọi nhóm carcinogen dẫn xuất nitrosamin có nhiều thành phần thuốc lá, alcohol rượu, polycyclic hydrocarbon (PAH), polyvinyl chloride (PVC), thuốc trừ sâu chứa DDT, aflatoxin nấm mốc v.v… [4], [21] Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Theo quy trình tách chiết tác giả Đỗ thị Thảo, tách chiết 8,2 gram chất tinh SBVN phục vụ cho nghiên cứu Hiệu suất gây u chuột DMBA 70%, tế bào LLC 97,5% Hoạt chất SBVN thể tính độc thấp cho động vật thí nghiệm nên khơng xác định liều độc cấp liều gây chết 50% động vật thí nghiệm (LD50) Hoạt chất SBVN không độc cho uống bán trường diễn tháng Uống SBVN liều 2500 mg/kgP/ngày 3000 mg/kgP/ngày khả diệt khối u 100% Uống liều 2000 mg/kgP/ngày (uống bắt đầu xuất u sơ cấp) khả ức chế phát triển khối u so với đối chứng dương 95,33% Hoạt chất SBVN có khả kéo dài tuổi thọ chống khối u di cho động vật nghiên cứu tất lơ thí nghiệm KIẾN NGHỊ Với kết nghiên cứu trên, mong tiếp tục nghiên cứu sâu chế phân tử hoạt tính dược động học hoạt chất SBVN để sử dụng hiệu họat chất để chữa bệnh ung thư tương lai Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Global Action Against Cancer Updated Edition 2005 UICC/WHO Booklet Nguyễn Tiến Bân (1996), Sách đỏ Việt Nam phần thực vật, Tập 1, Nxb Khoa học kỹ Thuật, Hà nội Đái Duy Ban, Lữ thị Cẩm Vân (1995), Hỏi đáp bệnh ung thư, Nxb Y học, Hà nội Đái Duy Ban, Lữ thị Cẩm Vân, Đái thị Ngân Hà, Đái thị Hằng Nga (2000), Phòng bệnh ung thư, Nxb Y học, Hà nội Đỗ Văn Bằng, Nguyễn Hoàng, Vũ Đoan Trang, Nguyễn thị Thu Hằng (1997), "Bước đầu nghiên cứu Trinh nữ hồng cung (Crinum latifolium L.) thuốc có khả chữa số bệnh ung thư", Tạp chí Dược học số 2, tr.7-9 Võ Văn Chi, 1996 Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà nội Công ước CITES (Convention on Interna Trade in Endangered Species of Wild Fâun and Flora), http:// www.cites org/eng/appendi Nguyễn Văn Đàn, Ngô Ngọc Khuyến (1999), Hợp chất thiên nhiên dùng làm thuốc, Nxb Yhọc, Hà nội Đỗ Huy Bích cộng (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc”, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, tr 172-173 10 Đỗ thị Thảo (2006),“Nghiên cứu xác định khả phòng chống ung thư chất hoá học thuốc Việt nam”, Luận án Tiến sĩ Sinh học Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 11 Nguyễn Thanh Đậm, Hà Phan Hải An, Nguyễn Hữu Bài, Đoàn Lực (2002), Ứng dụng phương pháp miễn dịch phóng xạ ung thư học, Nxb Y học, Hà nội 12 Hiệp hội quốc tế chống ung thư UICC (1993), Ung thư học lâm sàng, Nxb Y học, Hà nội 13 Đỗ Trung Đàm (1995), Thuốc chữa trị ung thư, Nxb Y học, Hà nội 14 Hoàng Thanh Hương, Hà Việt Bảo, Trần Quỳnh Hoa, Hà Việt Hải (2003),“Thăm dò khả chống ung thư thành phần flavoids chiết xuất từ diếp cá”, Tạp chí dược học số 10, tr 9-10 15 Đỗ Tất Lợi (2000), Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật 16 Nguyễn thị Ngọc Trâm, Kamenarska Z., Bankova V , Popov S., Zvetkoza E., Katzarovo E., Lê Mai Hương (2001), “Hoạt tính gây độc tế bào phân đoạn alcaloid từ Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.)”, Tạp chí Dược học số 11, tr 21-23 17 Nguyễn Chấn Hùng (1994), Tìm hiểu bệnh ung thư, Nxb Thành phố Hồ Chí minh 18 Trần Văn Kỳ (1994), Đông Y trị ung thư, Nxb Thành phố Hồ Chí Minh 19 Nguyễn thị Thu Hà (2008), “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học chất có Thuẫn Râu (Scutellaria barbata D Don) ”, luận văn thạc sỹ Sinh học Tài liệu tiếng Anh 20 Kizu H., Imoto Y., Tomimori T., Kikuchi T., Kadota S and Tsubo K., 1997 Studies on the Constituents of Scutellaria Species XVIII Structures of neoclerodane-Type Diterpenoids from the Whole Herb of Scutellaria rivularis Wall., Chem Pharm Bull, Vol 45(1), 152 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 21 Darnell J., Losdish H., Baltimore D (1990), Molecular cell biology, Sci entific American Books, 2nd Edition, Chapter 24, pp 954-1002 22 Chapman A R., Frankel M S (1999) Stem cell research and applications monitoring the frontiers of biomedical research American Association for the Advancement of Science and Inst for Civil Society 23 Crews P.O (2002), “Novel cytotoxic natural products from marine sponges” Computer retrieval of information on scientific projects – CRISP Grant No 5R01CA047135-13 24 Blyszczuk P., Asbrand C., Rozzo A., Kania G., ST-Onge L, Rupnik M., Wobus A.M (2004) “Embryonic stem cells differentiate into insulinproducing cells without selection of nestin-expressing cells”, Int.J Dev Biol 48, pp.1095-1104 25 Kosmeder J W.II, Pezzuto J M (2002), “Novel plant-derived anticarcinogens, Nutrition and Lifestyle: Opportunities for cancer prevention”, I ARC Scientific Publication 156, pp.343-347 26 Devon T.K and Scott A I., ''Hand Book of Naturally Occurring Compounds'', Vol I&II (1972) (Terpenes and Steroids), Vol I&II (1975) (Acetogenins, Shikinates and Carbohydrates), Academic Press 27 Block G (1992), “Fruit vegetables, and cancer prevention: a review of the epidemiologic evidence”, Nutr Cancer 18., pp 1-29 28 Block C W., Kelloff G J., Malone W E (1990), “Idenfication of candidate cancer chemopreventive Agents and their evaluation in animal models and human clinical trals: A Review”, Cancer Res., 50, pp 2-9 29 Kinghorn A D., Su B N., Jang D S., Lee D H., Gu J Q., Blanco E C., Pawlus A D., Lee S K., Park E J., Cuendet M., Gill J G., Bhat K., Park H S., Greenwood E M., Song L L., Jang M., Pezzuto J M (2004), “Natural inhibitors of carcinogenesis”, Planta Med 70, pp 691-705 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 63 30 N Currier, S.E Solomon, E.G Demicco, D.L.F Chang, M Farago, H Ying, I Dominguez (2005) Oncogenic signaling pathways activated in DMBA-induced mouse mammary tumors Toxicologic Pathology, 33 726 31 Ames B N (1979), “Identifying environment chemicals cauing mutatios and cancer”, Science 240, pp 587-593 32 Hanahan D., Weinberg R A (2000), “The hallmrks ofcancer”,Cell,100(1), pp 57-70 33 Lee K H (1999), “Novel antitumor agents from higher plants”, John Wiley & Sons, Inc Med Res Rev., 6(19), pp 569-596 34 Chaudhry A (2005) Cell culture http: www.bioteach.ubc.ca/Bioengineering/Cellculture 35 Mehta R G., Pezzuto J.M (2002), “Discovery of cancer preventive agents from natural products: from plants to prevention”, Current Oncology Reports 4, pp.478-486 36 Pezzuto J M (1995), “Natural product cancer chemopreventive agents”, Phytochemistry of Medicinal Plants, Plenum Press, New York, Chapter 2, pp.19-45 37 Pezzuto J M., Park E I., (2002), “Autoxidation and antioxidants” Encyciopedia of Pharmaceutical Technology Marcel Dekker, Inc., pp 97-113 38 Talalay P., Long M J D., Prochaska H J (1988), “Identification of a commo chemical signal regulating the induce of enzymes that protect against chemical carcinogenesis”, Proc Natl Acad Sci USA 85, pp 8261-8265 39 Weinberg L W (1997), “An overview of chemoprevention: Current status and future prospects”, The Soc For Exp Bio And med 216, pp 53-63 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 64 40 Swan D., Ford B (1997) “Chemoprevention of cancer: Review of the Literature”, ONF 24(4), pp 719-727 41 Taylor L (2000), Plant based drugs and medicines Raintree Nutrition Inc 42 Xuan L T., Huong L M., Tri M V (2000), “Biological evaluation of plants of Cuc Phuong national park”, Advances in natural sciences, 1(1), pp 63-72 43 Ueda J Y., Tezuka Y., Banskota A H., Tran Q L., Tran Q.K., Harimaya Y., Saiki Y., Kadota S (2002), “Antiproliferative activity of Vietnamese medicinal plants”, Bio Pharm Bull, 25(6), pp 753-760 44 Yu J., Lei J., Yu H., Cai X., Zou G (2004), “Chemical composition and antimicrobial activiy of the essential oil of Scutellaria barbata”, Phytochem 65, pp 881-884 45 Yin X., Zhou J., Jie C., Xing D., Zhang Y (2004), “Anticancer activity and mechanism of Scutellaria barbata extract on human lung cancer cell line A549”, Life Sci., 75(18), pp 2233-2244 46 Hollingshead M G., Alley M C., Camalier R F., Abbott B J., Mayo J G., Malspeis L., Grever M R (1995), “In vivo cultivation of tumor cells in hollow fibers”, Life Sci 2(57), pp 131-141 47 Sims P (1980), “The metabolic activation of chemical carcinogens”, Brit Med Bull 36, pp 11-18 48 Wattenberg L W (1985), “Chemoprevention of cancer”, Cancer Res., 45, pp 1-8 49 Croce C M., Erikson J., A., Aden A., Nishikura K (1984), “Translocated c-myc oncogene of Burkitt Lymphoma is transcribed in plasma cells and repressed in lymphoblastoid cells”, Proc Natl Acad Sci USA 81, pp 3170-3174 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 65 50 Weinberg R A (1998), “One renegade cell: how cancer begins” New York: Basic Science 51 Sporn M B., Dunlop N M., Newton D L., Smith J M (1976), “Prevention of chemical carcinogenesis by vitamin A and its synthetic analogs (retinoids)”, Fed Proc 35, pp 1332-1338 52 UICC – Annual Review 2003, http:// www.uicc org/ 53 UICC/WHO Booklet (2005), “Global action against cancer now” Updated Edition http:// www.uicc.org/ 54 David, P J (2001), “Phytochemistry and medicinal plants”, Phytochemistry, 56(3), 237-243 55 ISAAC Cohen (2007), “Scutellaria barbata extract for the treatmente of the cancer”, Patent Application Publiication, No: US 2007/0110632 A1 56 Newman, D J., Cragg, G M., Snader, K M (2003), “Natural products as sources of new drugs over the periode 1981-2002”, J Nat Prod., 66, 1022-1037 57 National Cancer Institute (NCI) (2005), Understanding cancer series http://www.cancer.gov/cancertopics/understandingcancer 58 Cragg G M., Boyd M R., Cardellina J H., Newman D J., Snader K M., McCloud T G (1994), “Ethonodotany and drug discovery: the experience of the US National Cancer Institute”, Ciba Found Symp 185, pp 178-196 59 D I Kim, T K Lee, Lim Kim H., Y C Lee, C H Kim, Regulation of IGF-I production and proliferation of human leiomyomal smooth muscle cell by Scutellaria barbata D Don in vitro: isolation of flavonoids of apigenin and luteolin as acting compounds., Toxicol Appl Pharmacol 205(3), 213 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 66 60 Fox B M., X., Antony S., Kolhagen G., Pommier Y., Staker B L., Stewart L., Cushman M (2003), “Design, synthesis, and biological evaluation of cytotoxic 11-Alkenylindenoisoquiline Topoisomerase I inhibitors and Indenoisoquinoline-Camptothecin hybrids”, J Med Chem 46, pp 3275-3282 61 Noble R L (1990), “The discovery of the vinca alkaloids – chmotherapeutic agents against cancer”, Biochem Cell Biol 68(12),pp 1344-1351 62 Tan G T., Angehofer C K., Pezzuto J M (2000), “Assay useful for the discovery and characterization of natural products”, Advances in natural sciences, 1(1), pp 45-62 63 J H Kim, E O Lee, H J Lee, J S Ku, M H Lee, D C Yang, S H Kim (2007) Caspase activation and extracellular signal-regulated kinase/Akt inhibition were involved in luteolin-induced apoptosis in Lewis lung carcinoma cells Ann N Y Acad Sci 1095-598 64 H, T, Chan, P M Tang, P M Hon, S W Au, S K Tsui, M M Wayee, S K Kong, T C Mak, K P Fung (2006) Pheophorbide, a major antitumor component purified from Scutellaria barbata, induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells Planta Med 72(1), 28 65 S J Dai, J Y Sun, Y Ren, K Liu, L Shen (2007) Bioactive entclerodant from Scutellaria barbata, Planta Med 73 (11), 1217 66 S J Dai, G F Wang, M Chen, K Liu, L Shen (2007) Five new neoclerodane diterpenoid alkaloids from Scutellaria barbata with cytotoxic activities Chem Pharm Bull, 55(8), 1218 67 H Rugo, E Shtivelman, A Perez, C Vogel, S Francop, E Tan Chiu, M Melisko, M Tagliaferri, M I Cohen, M Shoemaker, Z Tran, D (2007) Tripathy, Phase I trial and antitumor effects of BZL101 for patients with advanced breast cancer, Breast Cancer Res Treat 105(1) 17 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 67 68 Dai, S J., Chen, M., Liu, K., Jiang, Y T., Shen, L (2006), “NeoClerodane diterpenoids from Scutellaria barbata with cytotoxic activities”, Phytochemistry, 67(13), 1326-1330 69 Tsukada K, Matsumoto T, Aizawa K, Tokoro A Naruse, R, Suzuki S, Suzuki M (1990) Antimetastatic and Growth-inhibitory Effects of NAcetylchitohexaose in Mice Bearing Lewis Lung carcinoma, Jpn J Cancer Res, 81, 259 – 265 70 Masaaki Iigo, Akio Hoshi, Hioyuki Kadosawa, Masao Fujigaki (1991) Antitumor Activity and Metabolism of a New Anthracycline- containing Fluorine (ME2303) in Lewis Lung carcinoma- bearing Mice Jpn J Cancer Res, 82, 1317–1321 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn tơi nhận hướng dẫn tận tình TS Trần Đình Quang Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy Tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu, nhiệt tình PGS.TS Đỗ Khắc Hiếu, TS Đỗ thị Thảo chị Viện Công Nghệ sinh học - Viện Khoa học Việt Nam giúp đỡ tơi tìm hiểu phương pháp nghiên cứu phân tích số hóa sinh Tơi xin chân thành cảm ơn Trung tâm hỗ trợ nghiên cứu Châu Á Giáo dục cao học Hàn Quốc hỗ trợ tài để tơi hồn thành luận văn Nhân dịp tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới người thân gia đình, bạn bè động viên, chia sẻ, ủng hộ tơi q trình thực đề tài Vinh, 1/2010 Tác giả Trần Thị Mai Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu đề tài Nội dung nghiên cứu đề tài Chƣơng TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 TÌNH HÌNH UNG THƢ TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM 1.2 UNG THƢ HỌC, ĐẶC TÍNH CƠ BẢN, NGUYÊN NHÂN VÀ CÁC PHƢƠNHG PHÁP PHÕNG TRÁNH, CHỮA TRỊ 1.2.1 Các đặc tính bệnh ung thư 1.2.2 Khái quát tế bào ung thư 1.2.3 Nguyên nhân gây bệnh ung thư 10 1.2.4 Khả phòng chữa bệnh ung thư 14 1.3 MỘT SỐ HỢP CHẤT TỰ NHIÊN CÓ TÁC DỤNG PHÕNG CHỐNG VÀ CHỮA TRỊ BỆNH UNG THƢ 17 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TÌM KIẾM THUỐC PHÕNG CHỐNG VÀ CHỮA TRỊ UNG THƢ TRONG NƢỚC 20 1.4.1 Tổng quan Bán chi liên (Scutellariabarbata D Don) 21 1.4.2 Quy trình tách chiết, phân lập cấu trúc hóa học SBVN 26 1.5 MƠ HÌNH GÂY UNG THƢ THỰC NGHIỆM TRÊN ĐỘNG VẬT 29 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 32 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Phương pháp nuôi cấy tế bào in-vitro 33 2.2.2 Phương pháp gây ung thư thực nghiệm chuột dòng BALB/c 34 2.2.3 Phương pháp thử độc tính cấp hoạt chất SBVN 36 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.4 Phương pháp thử độc tính bán trường diễn 36 2.2.5 Phương pháp xác định khả phòng chữa ung thư SBVN chuột u thực nghiệm 38 2.2.6 Phương pháp sử lý số liệu 40 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 41 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 41 3.1.1 Kết gây u cho chuột thực nghiệm hoá chất DMBA 41 3.1.2 Kết gây u cho chuột thực nghiệm tế bào ung thư LLC nuôi cấy in-vitro 43 3.1.3 Kết thử độc cấp tính SBVN 48 3.1.4 Kết thử độc bán trường diễn 49 3.1.5 Khả phòng chữa ung thư SBVN chuột gây u thực nghiệm 52 3.2 BÀN LUẬN 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN Tên viết tắt Tên đầy đủ - SBVN: Scuterbarbalactone VN - HHPCUT: Hóa học phịng chống ung thư - TBUT: Tế bào ung thư - ADN: Axit Deoxyribonucleic = Deoxyribonucleic acid - ARN: Axit Ribonucleic = Ribonucleic acid - CS: Cộng - PCUT: Phòng chống ung thư - LLC: Lewis Lung Carcinoma - DMSO: Dimethyl Sulfoxide - DMBA: 7,12 - dimethyl[a]anthracene Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH TRONG LUẬN VĂN Bảng Danh mục 15 hoạt chất từ thực vật sử dụng để điều trị ung thư 18 Bảng Các hợp chất phòng, chống ung thư phổ biến 19 Bảng Tốc độ tăng trọng chuột thí nghiệm (gram) tỉ lệ chuột sống/chết lơ thí nghiệm (n = 10 chuột) gây u hóa chất DMBA 42 Bảng Kết tạo khối u tuyến vú u nội tạng chuột hoá chất DMBA 43 Bảng Mức độ tăng trọng chuột thí nghiệm (g) tỉ lệ chuột sống/ chết lơ thí nghiệm (n = 10 chuột) gây u tế bào LLC 45 Bảng Kết tạo khối u chuột dòng tế bào LLC 46 Bảng Độc tính cấp SBVN chuột BALB/c theo đường uống 48 Bảng Mức tăng trọng lượng chuột uống SBVN bán trường diễn 50 Bảng Ảnh hưởng SBVN lên tiêu huyết học chức gan thận chuột uống SBVN 51 Bảng 10 Mức tăng trọng lượng (gram) khối u lô nghiên cứu 52 Bảng 11 Sự thay đổi thể tích (mm3) khối u lơ nghiên cứu 53 Hình Sơ đồ hình thành phát triển ung thư Hình Cây Bán chi liên (Scutellaria barbata D Don) 21 Hình (A) Cấu trúc hóa học hoạt chất SBVN; (B) Hình ảnh tinh thể hoạt chất SBVN 28 Hình Biểu đồ tăng trọng chuột thí nghiệm 46 Hình (A) U di xuất tuyến tiền liệt; (B) U di xuất tuyến vú; (C) U di xuất thận 47 Hình Đồ thị tăng trọng chuột uống SBVN bán trường diễn 50 Hình (A) U di xuất phổi - lô 1; (B) U di xuất dày gan - lô 9; (C) U di xuất dày - lô 9; (D) U di xuất thận - lô 56 Hình (A) Ảnh tiêu tế bào đùi chuột thí nghiệm bị ung thư; (B) Ảnh tiêu tế bào bình thường đùi chuột; (C) Ảnh tiêu tế bào ung thư mô thận; (D) Ảnh tiêu tế bào bình thường mơ thận 56 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn