THÔNG TIN TÀI LIỆU
Tr-ờng đại học vinh KHOA HOá HọC === === TRầN THị HUYềN THƯƠNG Xác định hàm l-ợng sudan thực phẩm ph-ơng pháp sắc ký lỏng hiệu suất cao KHóA LUậN TốT NGHIệP ĐạI HọC chuyên ngành: hãa thùc phÈm Vinh – 2011 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến giảng viên Thạc sĩ Hồng Văn Trung giao đề tài hết lịng hướng dẫn bảo truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho tơi suốt q trình hồn thành khố luận Tôi xin chân thành cảm ơn thầy giáo tổ mơn hố thực phẩm, kỹ thuật viên phịng thí nghiệm khoa hố trường Đại học Vinh tạo điều kiện giúp đỡ em q trình hồn thành khố luận tốt nghiệp Cuối xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến bố mẹ, anh chị bạn bè quan tâm động viên tơi hồn thành khố luận Trần Thị Huyền Thƣơng MỤC LỤC Trang LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 PHỤ GIA 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Vai trò, chức phụ gia 1.1.2.1 Phân loại theo tính chất cơng nghệ 1.1.2.1.1 Chất bảo quản 1.1.2.1.2 Chất cung cấp dinh dƣỡng 1.1.2.1.3 Chất màu 1.1.2.1.4 Chất tạo mùi 1.1.2.1.5 Các chất tác động đến tính chất vật lý sản phẩm 1.1.2.1.6 Các chất dùng chế biến thực phẩm 1.1.2.1.7 Hóa chất điều chỉnh độ ẩm sản phẩm 1.1.2.1.8 Các chất điều khiển pH sản phẩm 1.1.2.1.9 Các chất khác 1.1.2.2 Phân loại theo cấu trúc hóa học độc tính 1.2 CHẤT MÀU VÀ CÁCH XÁC ĐỊNH CHẤT MÀU 1.2.1 CHẤT MÀU 1.2.1.1 Định Nghĩa 1.2.1.2 Vai trò chất màu 1.2.1.3 Phân loại chất màu 10 1.2.1.3.1 Các chất màu tổng hợp 11 1.2.1.3.2 Các chất màu vô 15 1.2.1.3.3 Các chất màu tự nhiên 16 1.2.1.3.4 Các chất màu hình thành trình chế biến 26 1.2.2 PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 27 1.2.2.1 Cơ sở phƣơng pháp sắc ký khí 27 1.2.2.2 PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG 28 1.2.2.2.1 Nguyên lý 28 1.2.2.2.2 Các dạng sắc ký lỏng hiệu cao 29 1.2.2.3 Máy sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 29 1.3 PHẨM MÀU SUĐAN 31 CHƢƠNG : THỰC NGHIỆM 34 2.1 Nguyên tắc 34 2.2 Phạm vi áp dụng 34 2.3 Thiết bị dụng cụ 34 2.3.1 Thiết bị 34 2.3.2 Dụng cụ 34 2.4 Hóa chất, dung dịch chuẩn 34 2.4.1 Chất chuẩn 34 2.4.1.1 Chuẩn gốc 34 2.4.1.2 Dung dịch chuẩn gốc Sudan I (Hãng cung cấp labochema – Czech độ tinh khiết 99%) 34 2.4.2 Hoá chất 35 2.5 Tiến hành thí nghiệm 35 2.5.1 Chuẩn bị dung dich chuẩn 35 2.5.2 Chuẩn bị mẫu 36 2.5.2.1 Ớt ( Capsicum frutescens L ) 36 2.5.2.2 Bột Điều 37 2.5.3 Thực Nghiệm 38 2.5.3.1 Mẫu ớt khô 38 2.5.3.2 Mẫu Bột Điều 39 2.5.4 Xác định sắc ký lỏng ( HPLC ) 39 CHƢƠNG : TÍNH KẾT QUẢ 41 3.1 Xác định khoảng tuyến tính 41 3.2 khảo sát hàm lƣợng Sudan1 độ thu hồi 43 KẾT LUẬN 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC BẢNG VÀ HÌNH Bảng 1: Liều lƣợng chất màu thực phẩm 10 Bảng 2: Liều lƣợng sử dụng số chất màu tổng hợp 12 Bảng 3: Các chất màu tổng hợp thƣờng dùng thực phẩm 13 Bảng 4: Các chất màu vô cho phép sử dụng thực phẩm tính chất chúng 15 Bảng 5: Các chất màu tự nhiên 17 Bảng : Các chất màu tự nhiên rau 17 Bảng 7: Các dạng anthocyanins 18 Bảng 8: Sự thay đổi màu anthocyanins theo pH 19 Bảng : Diện tích pic chuẩn gốc Sudan I 43 Bảng 10: Kết xác định hàm lƣợng Sudan I thu lại sau phân tích 46 Hình 1: Sự thay đổi màu sắc antoxian theo pH 19 Hình 2: Cấu trúc Betalein 21 Hình 3: Cấu tạo chlorophyl a b 23 Hình 4: Sơ đồ chuyển hóa Chlorophy II 24 Hình 5: Cấu trúc Hemoglobin 25 Hình 6: Sơ đồ chuyển hoá Hemoglobin 25 Hình : Sơ đồ sắc ký lỏng hiệu cao 29 Hình 8: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 1ppm 41 Hình 9: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 10 ppm 41 Hình 10: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 100 ppm 42 Hình 11: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 200 ppm 42 Hình 12: Đƣờng chuẩn Sudan I 43 Hình 13: Sắc đồ mẫu ớt bột thêm chuẩn (M1) 44 Hình 14: Sắc đồ mẫu ớt bột khơng thêm chuẩn (M2) 44 Hình 15: Sắc đồ mẫu bột điều thêm chuẩn (M3) 45 Hình 16: Sắc đồ mẫu bột điều không thêm chuẩn (M4) 45 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an LỜI MỞ ĐẦU Trƣớc thực phẩm nhằm mục đích thỏa mãn nhu cầu dinh dƣỡng sở thích ngƣời Nhƣng gần mối quan tâm hàng đầu chất lƣợng thực phẩm vấn đề vệ sinh an toàn thực phẩm Bởi hàng ngày hàng giới xảy vụ ngộ độc liên quan đến thực phẩm, đặc biệt nƣớc phát triển nhƣ Việt Nam Ngộ độc thực phẩm nhẹ gây ảnh hƣởng đến sức khỏe, nặng gây tử vong ảnh hƣởng đến kinh tế Tại Việt Nam, theo thống kê Cục An toàn Vệ sinh Thực phẩm năm 2006, cho biết vụ ngộ độc thực phẩm, nguyên nhân chủ yếu thực phẩm nhiễm vi sinh vật (38,8%), hóa chất độc hại (10,9%), thực phẩm chứa chất độc hại (25,4%) Hậu việc vệ sinh an tồn thực phẩm chắn biết Nó gây nhiều bệnh nguy hiểm cho ngƣời đặc biệt bệnh đƣờng ruột điển hình bệnh tiêu chảy cấp Mất vệ sinh an tồn thực phẩm cịn gây vơ số hậu khác Nó nguyên nhân gây ô nhiễm môi trƣờng, ảnh hƣởng đến hệ sinh thái Trong thực phẩm, màu giữ địa vị quan trọng Nó làm cho sản phẩm bắt mắt hơn, gây ý cho ngƣời mua gây ảnh hƣởng tốt phẩm chất hàng Có hai loại màu: màu tổng hợp màu thiên nhiên Về phƣơng diện độc hại, màu tổng hợp nhạy cảm cho da, làm nứt da, tạo vảy nến, hay làm dị ứng nhƣ nghẹt mũi theo báo cáo Ủy ban Khoa học Thực phẩm cho ngƣời EU (CSAH) Tuy nhiên, nhà sản xuất không sử dụng màu thiên nhiên khơng bền Do họ thƣờng dùng phẩm màu tổng hợp kỹ nghệ nhuộm thực phẩm có màu tƣơi bền Trên thị trƣờng thực phẩm gần Việt Nam nhƣ quốc gia phƣơng Tây Bắc Mỹ xuất nhiều mặt hàng thực phẩm sản xuất từ Việt Nam Trung Quốc có chứa loại Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an phẩm màu dùng kỹ nghệ Đó phẩm màu có tên Sudan Đây chất nhuộm màu công nghiệp, nguy hại tới sức khoẻ ngƣời, Sudan I đƣợc xếp vào loại hóa chất gây chuyển đổi nhiễm sắc thể di truyền thuộc loại có nguy gây ung thƣ loại Rất nhiều sản phẩm có chứa phẩm màu đƣơc bày bán rộng rải thị trƣờng ảnh hƣởng tới sức khoẻ ngƣời tƣơng lai xã hội lựa chọn đề tài “Xác định sudan1 số loại gia vị kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu cao ” Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 PHỤ GIA 1.1.1 Định nghĩa Theo FAO: Phụ gia chất không dinh dƣỡng đƣợc thêm vào sản phẩm với ý định khác Thơng thƣờng chất có hàm lƣợng thấp dùng để cải thiện tính chất cảm quan, cấu trúc, mùi vị nhƣ bảo quản sản phẩm Theo WHO: Phụ gia chất khác thực phẩm diện thực phẩm kết số mặt: sản xuất, chế biến, bao gói, tồn trữ Các chất không bao gồm nhiểm bẩn Theo Ủy ban Tiêu chuẩn hóa thực phẩm quốc tế (Codex Alimentarius Commisson - CAC): Phụ gia chất có hay khơng có giá trị dinh dƣỡng, khơng đƣợc tiêu thụ thông thƣờng nhƣ thực phẩm không đƣợc sử dụng nhƣ thành phần thực phẩm Việc bổ sung chúng vào thực phẩm để giải mục đích cơng nghệ sản xuất, chế biến, bao gói, bảo quản, vận chuyển thực phẩm, nhằm cải thiện kết cấu đặc tính kỹ thuật thực phẩm Phụ gia thực phẩm khơng bao gồm chất ô nhiễm chất độc bổ sung vào thực phẩm nhằm trì hay cải thiện thành phần dinh dƣỡng thực phẩm Theo TCVN: Phụ gia thực phẩm chất không đƣợc coi thực phẩm hay thành phần chủ yếu thực phẩm, có khơng có giá trị dinh dƣỡng, đảm bảo an toàn cho sức khỏe, đƣợc chủ động cho vào thực phẩm với lƣợng nhỏ nhằm trì chất lƣợng, hình dạng, mùi vị, độ kiềm axít thực phẩm, đáp ứng yêu cầu công nghệ chế biến, đóng gói, vận chuyển bảo quản thực phẩm Nhƣ vậy, phụ gia thực phẩm thực phẩm mà đƣợc bổ sung cách chủ ý trực tiếp gián tiếp vào thực phẩm, cải thiện tính chất đặc tính kỹ thuật thực phẩm Phụ gia thực phẩm tồn thực Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an phẩm nhƣ thành phần thực phẩm với giới hạn tối đa cho phép đƣợc quy định Với phát triển khoa học công nghệ giới hạn phụ gia sử dụng thực phẩm ngày xác đảm bảo an tồn cho ngƣời sử dụng thực phẩm Phụ gia đƣợc sử dụng hầu hết sản phẩm thực phẩm, chất tạo vị, gia vị sử dụng bữa ăn ngày phụ gia Do đó, cần phải nắm vững kiến thức phụ gia thƣờng xuyên cập nhật phát triển phụ gia thực phẩm để đảm bảo an toàn bổ sung phụ gia vào thực phẩm 1.1.2 Vai trò, chức phụ gia Phụ gia dùng bảo quản chế biến thực phẩm có vai trị, chức ln thay đổi tùy vào loại sản phẩm Việc phân loại phụ gia gặp nhiều khó khăn, phân loại phụ gia theo tính chất cơng nghệ theo cấu trúc hố học độc tính 1.1.2.1 Phân loại theo tính chất công nghệ 1.1.2.1.1 Chất bảo quản Các chất phụ gia thuộc nhóm đƣợc bổ sung vào thực phẩm với mục đích kéo dài thời gian sử dụng thực phẩm cách ngăn chặn hay kìm hãm biến đổi thân thực phẩm qúa trình biến đổi sinh học, hoá học, vật lý vi sinh vật Các chất bảo quản đƣợc chia thành bốn nhóm chủ yếu sau: - Chống vi sinh vật - Chống biến đổi thành phần hoá học thực phẩm - Chống biến đổi tính chất vật lý sản phẩm - Chống trùng Tiêu biểu nhóm acid bezoic muối Na, K, Ca Các este metylic, etylic propilic acid parahydroxybenzoic, acid sorbic… Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 1.1.2.1.2 Chất cung cấp dinh dưỡng Các chất đƣợc sử dụng với mục đích cơng nghệ nhƣng chúng có giá trị dinh dƣỡng định Ví dụ Riboflavin vừa chất màu vừa vitamin Phụ gia dinh dƣỡng thƣờng dạng bột, nhũ hoá dầu đƣợc bảo vệ phụ gia bảo quản, chúng đƣợc sử dụng riêng lẻ hay dùng chung với phụ gia dinh dƣỡng khác Phụ gia dinh dƣỡng đƣợc chia thành nhóm sau: - Vitamin - Khống chất - Acid amin - Các chất cung cấp lƣợng 1.1.2.1.3 Chất màu Chất màu thực phẩm nhóm phụ gia đƣợc bổ sung vào thực phẩm với mục đích cải thiện màu sắc thực phẩm nhằm làm tăng giá trị cảm quan thực phẩm Chúng chất màu tự nhiên đƣợc chiết tách từ thực vật hay hợp chất màu tổng hợp - Chất màu tự nhiên: chất đƣợc chiết xuất từ nguyên liệu hữu thực vật hay động vật có sẵn tự nhiên Ví dụ: Caroten tự nhiên đƣợc chiết xuất từ loại rau có màu vàng, Curcumin đƣợc chiết xuất từ nghệ, Caramen đƣợc tạo từ đƣờng, nhiên nhóm màu tự nhiên có nhƣợc điểm độ bền kém, sử dụng với lƣợng lớn nên giá thành sản phẩm cao - Chất màu tổng hợp: chất màu đƣợc tạo phản ứng tổng hợp hố học Ví dụ: Amaranth (Màu đỏ), Brilliant blue (Màu xanh), Sunset yellow (Màu vàng cam), Tartazine (Màu vàng chanh) hợp chất màu đƣợc tổng hợp từ phản ứng hoá học Các chất màu tổng hợp có độ bền cao, với lƣợng nhỏ đạt đƣợc màu sắc yêu cầu nhƣng dễ bị ngộ độc sử dụng hợp chất màu không nguyên chất Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG : THỰC NGHIỆM 2.1 Nguyên tắc Sudan I đƣợc hoà tan từ mẫu với methanol, dịch đƣợc lọc, ly tâm, lấy dung dịch xác định máy sắc kí lỏng với detector UV - VIS bƣớc sóng 480nm 2.2 Phạm vi áp dụng Xác định Sudan I tƣơng ớt, bột ớt, nƣớc sốt cari, bột điều 2.3 Thiết bị dụng cụ 2.3.1 Thiết bị Máy sắc ký lỏng hiệu cao ( HPLC ) detector UV – VIS Cột pha đảo RP C18 Symetry, m (150mm x 4,6mm) 2.3.2 Dụng cụ - Cân phân tích : Độ xác 0.0001 gam - Cân kỹ thuật : 0.01 gam - Ống đong 100ml - Bình định mức 100, 1000ml - Pipet định mức 1, 2, 5, 10 ml - Pipet - Ống ly tâm - Giấy lọc thƣờng - Màng lọc dung môi 0,45 m 2.4 Hóa chất, dung dịch chuẩn 2.4.1 Chất chuẩn 2.4.1.1 Chuẩn gốc Chuẩn gốc dạng rắn : Sudan1 2.4.1.2 Dung dịch chuẩn gốc Sudan I (Hãng cung cấp labochema – Czech độ tinh khiết 99%) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Dung dịch chuẩn gốc Sudan I 1000ppm: Cân 0,1000g Sudan I vào bình định mức 100ml định mức đến vạch methanol, lắc kỹ hỗn hợp bảo quản lạnh, dung dịch dùng tháng 2.4.2 Hoá chất -Nƣớc cất -Methanol ( MeOH ) -Axetonnitril ( ACN ) -Axit foocmic( H-COOH ) loại PA ( Các dung môi đạt độ tinh khiết dùng cho HPLC ) Dung dịch axit foocmic 1% : Hoà tan 10ml axit foocmic vào bình định mức 1000ml, định mức nƣớc cất đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc dung môi 0,45 m, dung dịc dùng làm pha động 2.5 Tiến hành thí nghiệm 2.5.1 Chuẩn bị dung dich chuẩn Dung dịch Sudan I chuẩn làm việc Pha dung dịch Sudan I 200ppm : Hút 20ml dung dịch chuẩn 1000ppm vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch methanol, lắc kỹ hỗn hợp, bảo quản lạnh - 80C, dung dịch dùng 15 ngày Pha dung dịch Sudan I 100ppm : Hút 10ml dung dịch chuẩn 1000ppm vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch methanol, lắc kỹ hỗn hợp, bảo quản lạnh – 80C, dung dịch dùng 15 ngày Pha dung dịch Sudan I 10ppm : Hút 10ml dung dịch chuẩn 100ppm vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch methanol, lắc kỹ hỗn hợp, bảo quản lạnh – 80C, dung dịch dùng ngày Pha dung dịch Sudan I 1ppm : Hút 10ml dung dịch chuẩn 10ppm vào bình định mức 100ml, định mức đến vạch methanol, lắc kỹ hỗn hợp, bảo quản lạnh – 80C, dung dịch dùng ngày Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 35 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.5.2 Chuẩn bị mẫu Tiến hành với mẫu ớt bột bột điều đỏ, sản phẩm đƣợc bày bán nhiều thị trƣờng mà đƣợc kiểm tra tính an tồn sản phẩm 2.5.2.1 Ớt ( Capsicum frutescens L ) Ớt cay đƣợc xem gia vị nên có mức tiêu thụ ít, gần ớt trở thành mặt hàng có giá trị kinh tế ớt khơng gia vị tƣơi mà cịn sử dụng cơng nghiệp chế biến thực phẩm Thành phần hóa học ớt : gồm thành phần nhƣ nƣớc (91 %), protein (1,3 %), glucid (5,7 %), chất xơ (1,4 %), vitamin C (250 mg/100 gam ớt), caroten (10 mg/ 100 gam ớt), số chất khoáng (5,17 %)…năng lƣợng cung cấp khoảng 29 -30 calo/100 gam ớt Thành phần tạo vị cay quan trọng ớt capsisina, capsaicine, capsanthiac chiếm khoảng 12,5 % Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.5.2.2 Bột Điều Là gia vị đƣợc sử dụng nhiều ăn, nhằm làm tăng màu đỏ cho thực phẩm Màu đỏ hợp chất apocarotenoids bixin ( 9‟z-6,6‟-dioate) quan trọng ( tổng carotenoids apocarotenoids đạt đến 7% trọng lƣợng hạt khô ( phytochemistry ,41,1201,1996), tan tốt dầu, mỡ nóng Lá đƣợc ngƣời Brazil sắc uống trị bệnh tim, bao tử, có tính nhuận tràng nhẹ Dịch đƣợc dân vùng Amazone nhỏ trị bỏng mắt Tro dùng trị sốt sốt rét Peru Dầu Annatto(Bixin) chất chống tia cực tím chống oxy hoá giúp bảo vệ gan thƣờng đƣợc sử dụng bệnh viện Cây cao 5-10m, dang bụi, trái mọc chùm, hình tim, đỏ tƣơi đến nâu khơ chín, mang đến 50 hạt / trái Hạt khô chứa 40_45% cellulose; 3,5_5,5% sucorose; 0,3_0,9% tinh dầu; 3% fixed; 4,5_5,5 sắc tố 13_16% protein, có nhiều alpha- beta-carotenoids Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.5.3 Thực Nghiệm 2.5.3.1 Mẫu ớt khô Trộn nghiền kĩ máy nghiền thực phẩm - Mẫu đƣợc bảo quản kín túi bạc tránh ánh sáng phân tích Mẫu 1: Cân 2,5 (g) mẫu ớt khơ vào cốc nút nhám dung tích 250ml, thêm 30ml methanol, ta thêm 1ml/100ppm chuẩn lắc 30 giây, để yên 30 phút, Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an lắc nhẹ, chuyển mẫu vào bình định mức 50ml, tráng cốc methanol định mức tới vạch, lắc mạnh dung dịch, lọc qua giây lọc thô, ly tâm, bơm vào máy sắc ký ( M1) Mẫu 2: Cân 2,5122 (g) mẫu ớt khô vào cốc nút nhám dung tích 250ml, thêm 30ml methanol, lắc 30 giây, để yên 30 phút, lắc nhẹ, chuyển mẫu vào bình định mức 50ml, tráng cốc methanol định mức tới vạch, lắc mạnh dung dịch, lọc qua giây lọc thô, ly tâm, bơm vào máy sắc ký ( M2 ) 2.5.3.2 Mẫu Bột Điều - Mẫu đƣợc bảo quản kín túi bạc tránh ánh sáng phân tích Mẫu 1: Cân 2,5145 (g) mẫu bột điều vào cốc nút nhám dung tích 250ml, thêm 30ml methanol, ta thêm 1ml/100ppm chuẩn lắc 30 giây, để yên 30 phút, lắc nhẹ, chuyển mẫu vào bình định mức 50ml, tráng cốc methanol định mức tới vạch, lắc mạnh dung dịch, lọc qua giây lọc thô, ly tâm, bơm vào máy sắc ký ( M3 ) Mẫu 2: Cân 2,5043 (g) mẫu bột điều vào cốc nút nhám dung tích 250ml, thêm 30ml methanol, lắc 30 giây, để yên 30 phút, lắc nhẹ, chuyển mẫu vào bình định mức 50ml, tráng cốc methanol định mức tới vạch, lắc mạnh dung dịch, lọc qua giây lọc thô, ly tâm, bơm vào máy sắc ký ( M4 ) 2.5.4 Xác định sắc ký lỏng ( HPLC ) - Điều kiện tiến hành sắc ký: + Cột sắc ký C18 (15cm x 4,6 mm), kích thƣớc hạt m tƣơng đƣơng + Pha động : ACN : % axit foocmic nƣớc = 90:10 +Detector UV-VIS: bƣớc sóng 480nm + Nhiệt độ cột 300C + Tốc độ dịng : 1ml/phút +Thể tích bơm : 60 l Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 39 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Cân pha động qua hệ thống sắc ký khoảng 30 phút đƣờng ổn định tiến hành chạy phân tích Đo chuẩn Sudan I ( 1ppm ) lần lấy chiều cao trung bình Đo mẫu lần lấy chiều cao trung bình Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 40 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG : TÍNH KẾT QUẢ 3.1 Xác định khoảng tuyến tính Kết đo phổ chuẩn Sudan nồng độ khác Hình 8: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 1ppm Hình 9: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 10 ppm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 41 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 10: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 100 ppm Hình 11: Sắc đồ chuẩn Sudan1 nồng độ 200 ppm Từ pích chuẩn Sudan I có nồng độ từ: ;10 ;100 ;200 mg/L( ppm ) vẽ đƣờng chuẩn với tƣơng quan nồng độ diện tích pic đƣợc thể bảng 9, hình 11 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 42 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng : Diện tích pic chuẩn gốc Sudan I Diện tích pic Nồng độ ( g / mL ) 81.93894 782.8493 100 7642.146 200 15467.90 Area 10 Đƣờng chuẩn Suđan1 18000 16000 y = 77.2015x - 6.9635 14000 12000 10000 8000 6000 4000 2000 0 50 100 150 Amount(ppm) 200 250 Hình 12: Đƣờng chuẩn Sudan I Khoảng tuyến tính chuẩn từ 1- 200 ppm với hệ số tƣơng quan là: R2: 0,9998 3.2 khảo sát hàm lượng Sudan1 độ thu hồi Xử lý mẫu theo quy trình tiến hành đo phổ thu đƣợc kết nhƣ sau: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 43 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 13: Sắc đồ mẫu ớt bột thêm chuẩn (M1) Hình 14: Sắc đồ mẫu ớt bột không thêm chuẩn (M2) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 44 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 15: Sắc đồ mẫu bột điều thêm chuẩn (M3) Hình 16: Sắc đồ mẫu bột điều không thêm chuẩn (M4) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 45 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng 10: Kết xác định hàm lượng Sudan I thu lại sau phân tích nồng độ sudan1 Số lần thí Độ thu hồi trung mẫu ban đầu(ppm) nghiệm bình(%) Mẫu M1 5.03574 83,84% Mẫu M2 2.52069 Mẫu M3 5.93442 Mẫu M4 3.09214 Mẫu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 46 94,74% C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN Căn nhiệm vụ nghiên cứu đề tài kết thu đƣợc rút kết luận nhƣ sau: - Đã xây dựng đƣợc phƣơng trình đƣờng chuẩn sudan1: y = 77,2015x - 6,9635 - Đã khảo sát đƣợc giới hạn phát sudan thực phẩm - Đã xác định đƣợc hàm lƣợng sudan 1có số đối tƣợng thƣc phẩm - Đã khảo sát đƣơc hiệu suất thu hồi 80% Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 47 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn
Ngày đăng: 22/08/2023, 00:37
Xem thêm: