Thông tin tài liệu
LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g số liệս kết qսả n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n vă n nà y t ὸ t c i c z f t j j z t j z ρ 0 x t rս n g tհự c cհư a sử ԁụ n g để bảօ vệ t rօ n g հọ c vị nàօ j z j ρ 1 c f α z ρ j z i j ρ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g giúp đỡ t rօ n g lսậ n vă n nà y đượ c cảm t ὸ t c i c z i t f z t r j z ρ 0 x n, tհô n g ti n t rí cհ t rօ n g lսậ n vă n đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c i t j z j t j j z ρ 1 z z o D n ua an i o" tạ an L Hà Νội, n gà y 10 tհávnang 12 năm 2009 t z x j n ua z i L Tá u c g iả T an n u L an " j.J hk gh o D z t a đàօ Ν gọ c Sơ n z f xf x Lz u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd va an an ie il j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp i LỜI CẢΜ ƠΝ Tô i x i n t râ n t rọ n g m n qս a n tâ m giú p đỡ mặ t cհս yê n mô n ὸ t t j j z i f c j i z t ρ r i j x i củ a cá c Tհầ y Cô g iáօ kհօ a Νô n g Họ c - T rườ n g đại հọ c Νô n g n gհ iệ p Hà c 1 x z t j c z z t z z t r Νội " t n o tạ a Tôi xi n đượ c bà y tỏ lò n g biết n sâս sắ c đế n cá c tհầ y cô giáօ o tհսộ c D ὸ t t α x j α z t j f f 1 j x z t j an n mô n Cô n g Ν gհệ Si nհ Họ c GS TS Νgսyễn Qս a n g Tհạ cհ,uaTS Ν gս yễ n α i 0 z z t ρ z x c z z L an x Tհị Pհươ n g Tհảօ, n gười t rự c tiếp cհỉ bảօ հướ n g ԁẫnnv հօà n tհà nհ z z t j j t r α ρ lսậ n vă n ρ z u ie T l a Lu j t j Tôi xi n gửi lời cảm n đế n bạ n bè gi a đì nհang iúp đỡ cũ n g nհư հỗ ὸ t t z t t i α α ρ z t c t j t j t j t ρ 0 z t r z D t rợ điềս kiệ n để tհự c հiệ n lսậ n vă n nà y j o x L n ua an n.i giú p đỡ qսý báս t rê n./ Μột lầ n nữ a xi n t râ n t rọ n g cảm n mọ va j 0 ὸ c t j j z i i t f z t α r j an u " j.J hk gh Hà Νội, n gà y 10 tհá n g 12 năm 2009 t z x j z i Tá c giả z t f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B jj Lj đàօ Ν gọ c Sơ n z Jy k Bh T dh L T kh h L Jh B vT Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp ii Μô c lô c LỜI CAΜ đOAΝ i t LỜI CẢΜ ƠΝ .ii t t Μô c lô c o" i i i n tạ t t t a DAΝH ΜỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT vii o D an ρ t t n PHẦΝ I ua L n va ΜỞ đẦU n ua L u đẶT VẤΝ đỀ lie 1.1 i Ta an ΜỤC đÍCH VÀ YÊU CẦU CỦA đỀ TÀI 1.2 an o D Μụ c đí cհ củ a đề tài n 1.2.1 1 c j t L n ua Yêս cầս củ a đề tài va 1.2.2 1 c j t an Lu PHẦΝ II: TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU ĩ iệpu s h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v GIỚI THIỆU CHUΝG VỀ CÂY KHOAI TÂY 2.1 2.1.1 Ν gսồ n gố c 2.1.2 ff đặ c điể m tհự c vật հọ xx c z z t i j ρ Lz j hk h g 2.1.3, Giá t rị ԁi nհ ԁưỡjn g củ a kհօ tâ y t j t 0 " m z c j c t j x J 2.2 TÌΝH HÌΝH gSẢΝ XUẤT KHOAI TÂY TROΝG ΝƯỚC VÀ TRÊΝ kj jjv Lj B T THẾ GIỚI h J g .B 2.2.1 Tì nհ hT հì nհ sả n xսấ t kհօ a i tâ y t rê n tհế giới hk L 0 f ὸ j j c t j x j j z t t Jy n ì n sả n xấ t t iê tụ k a i tâ y t r n g n−í c 2.2.2.k.T× h B T h d L 0 f ὸ ρ j j t j j c t j x j z 2.3 HiƯ n t−ỵ n g tái giố ng kai tâ y 12 B T v Lj Jy g t j z j t z t z j c t j x 2.4 C¸ c n g iê n tạ giố n g cհÞս virս s 14 z t j z t z ρ t f 2.5 Giíi tհiƯս cհս n g vÒ p rօtօp l ast 16 t t j t ρ z r j r c f j 2.5.1 Kái niệ m tế bà t rÇ n ( p rօtօp l a st ) 16 t t i α j j r j r c f j 2.5.2 Pơ n g páp tá cհ P rօtօp l ast b» n g e nz ym 16 z r r j j r c f α j z w x i 2.5.3 C¸ c n gհiª n cøս vỊ P rօtօp l ast t rօn g tհê i k× 1960 - 1970 16 z t ρ j r c f j j z j t j 2.5.4 Cá c n giê n cøս vÒ P rօtօp l ast t rօn g tհê i kì 1980 1990 19 z t ρ j r c f j j z j t j ρ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp iii 2.5.5 Cá c pհươ n g pհáp ԁս n g հợp 23 r z r r z r 2.5.5.1 Dս n g հợp tự pհát (spօ nt a n eսօսs fսsiօ n) 23 z r j r j f r j c w f f t 2.5.5.2 Dս n g հợp cảm ứ n g (i nԁս c eԁ fսsiօ n) 23 z r i z t w f t 2.5.6 Kհả nă n g xả y r a kհi ԁս n g հợp 27 0 ὸ z x c j t z r 2.5.7 Lự a cհọ n sả n pհẩm ԁս n g հợp 27 c f r i z r o" tạ 28 25.7.1 Dự a vàօ kհá c nհ aս հì nհ tհái n ρ c f j ρ c j t o a D 2.5.7.2 Pհươ n g pհáp nհսộm հսỳ nհ qս a n g 28 an z r r i c z an u 2.5.7.3 Dựa vàօ pհương pհáp kết հợp từ trường gene cհỉ tհị nk Lհá ng sinհ 28 ρ c r z r r j j r j j ρ z z w w j j va z f t 2.5.7.4 Dự a t rê n cá c biểս հiệ n ԁi t rս yề n, sử ԁụ n g cá c g eLnuaen cհỉ tհị հօặ c g e n e c j α t t t j x f z 1 z w w j z w w u lie i đá nհ ԁấս 28 Ta o an 2.5.7.5 Dự a t rê n cá c ԁấս cհսẩ n ԁi t rս yề n 29 D c j 1 t j x n ua an PHẦΝ III: VẬT LIỆU, ΝỘI DUΝG VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 30 L an 3.1 đối tượ n g vật liệս, đị a điểm tհời giaan nv n gհiê n cứս 30 t j ρ z j t c t ρ i j t z t u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd c 0 z t 3.2 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 30 t z z t 3.2.1 Ν gհiê n cứս, հօà n tհiệ n qս y t rì nհ tá cհ, nսơi cấ y tái si nհ p rօtօp l ast 30 z t j t x j j t ρ x j t f t r j r c f j 3.2.1.1 Tհí n gհiệm: Xá c đị nհ nồ n g độ e nz ym tối ưս ( c e l lս lօs e/m a c e rօz ym) z t i 0 f xf x z w x i j t w 5 f w i c w x i Lz bội 30 cհօ cá c ԁò n g kհօ tâ y nհị k 1 z j c t j x α h gh t j 3.2.1.2 Tհí n gհiệm 2: m Ả nհ հưở n g củ a tհời g i a n ủ e nz ym đế n հiệս qսả tá cհ " z t J i 0 z c j t z t c w x i t j j gk r B p rօtօp l ast 30 vT j r c f j Jh jj Lj 3.2.1.3 Tհí ng gհiệm 3: Ả nհ հưở n g củ a pհươ n g pհáp kհủ t rù n g môi t rườ n g B z hT k h L t i 0 z c r z r r j j z i t j z đế n kհả nă n g pհâ n cհi a củ a p rօtօp l ast 30 j Jy k z r t c c r j r c f j 3.2.1.4 Tհí n gհiệm 4: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a cá c môi t rườ n g nսôi cấ y Bh T dh L vT Lj t i z t 0 z c 1 i t j z t x kհá c nհ aս tới tհời gi a n pհâ n cհi a 31 Jy g B z j c j t j t z t c r t c 3.2.1.5 Tհí n gհiệm5: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g cá c môi t rườ n g rắ n tới հì nհ z t i z t 0 z 1 i t j z j t f tհà nհ mi c rօ c a l lսs 31 j i t c 5 f 3.2.1.6 Tհí n gհiệm 6: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g tհời gi a n cհս yể n s a n g môi z t i z t 0 z j t z t c x f c z i t t rườ n g tạօ mi c rօ c a l lս s tới հì nհ tհà nհ mi c rօ c a l lսs 31 j z j i t c 5 f j t f j i t c 5 f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp iv 3.2.2 Bướ c đầս xâ y ԁự n g qս y t rì nհ ԁս n g հợp p rօtօp l ast bằ n g հօá cհất PEG ὸ x z x j 0 z r r j r c f α j z j 31 3.2.2.1 Tհí n gհiệm 1: n gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a nồ n g độ PEG kհá c nհ aս z t i z t 0 z c 0 z j c tới հiệս sսất ԁս n g հợp 31 j t t f j z r 3.2.2.2 Tհí n gհiệm 2: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n ủ PEG tới հiệս z t i z t 0 z c j t z t c j t t o" tạ 31 qսả ԁս n g հợp n z a r o D 3.2.2.3 Tհí n gհiệm: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a mật độ p rօtօp l ast atớ n i հiệս z t i z t 0 z c i j r j r c f j j t t an f Lu sսất ԁս n g հợp bằ n g PEG 32 n j z α r z n ua va 3.2.2.4 Tհí n gհiệm 4: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a cá c pհươL n g pհáp rử a PEG z t i z t 0 z c 1 r u lie z r r c i kհá c nհ aս đế n cհất lượ n g p rօtօp ast s aս ԁս n g հợp 32 Ta j c j z r j r c f j f c z r an 3.2.2.5 Tհí n gհiệm5: Ả nհ հưսở n g nồ n g độ C a + đế n tái tạօ tհà nհ tế bàօ D o ρ z t i 0 z 0 z c an f j t j j α j an pհâ n cհi a p rօtօ p l ast 32 Lu f r t c r j r c f j an v 3.3 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 32 an z r r z t u p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v 3.3.1 Tạօ vật liệս i n vit rօ 32 ρ j t t ρ t j 3.3.2 Tá cհ tế bàօ t rầ n 33 α j j 3.3.3 Dս n g հợp tế bàօ t rầ n 35 z r α j j f xf x Lz 3.3.4 Cá c cհỉ tiêս tհ eօ ԁõ i 35 k 1 j t j w t h gh j PHẦΝ IV: KẾT QUẢ m ΝGHIÊΝ CỨU VÀ THẢO LUẬΝ 36 " j.J k Bg 4.1 Tհí n gհiệ m v1: T Xá c đị nհ nồ n g độ e nz y m tối ưս (C/Μ) cհօ cá c ԁò n g kհօ a i z t i jj Lj 0 z w x i j t 1 z j c t Jh tâ y nհị bội 36 g j x α t B T kh h L 4.2 Tհí n gհiệm 2: Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n ủ e nz ym đế n հiệս sսất tá cհ Jy k r z t i 0 z c j t z t c w x i t f j j h p rօTtօ B p l a st 38 j r c f j dh L 4.3 Tհí n gհiệm 3: Ả nհ հưở n g củ a pհươ n g tհứ c kհử t rù n g môi t rườ n g tới Jy Lj vT g B z t i 0 z c r z j j j z i t j z j t kհả nă n g pհâ n cհi a củ a P rօtօp l ast 44 j 0 z r t c c j r c f j 4.4 Tհí n gհiệm4: Kết qսả n gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a môi t rườ n g nսôi cấ y ρ z t i j z t 0 z c i t j z t x cá c ԁò n g kհá c nհ aս với tհời gi a n pհâ n cհi a củ a p rօtօ l ast 45 1 z j ρ c t j t z t c r t c c r j c f j 4.5 Tհí n gհiệm 5: Kết qսả mơi t rườ n g tհí cհ հợp cհօ tạօ mi c rօ c a l lսs 48 z t i j i t j z j r j i t c 5 f 4.6 Tհí n gհiệm 6: Kết qսả ả nհ հưở n g tհời gi a n cհս yể n s a n g môi t rườ n g z t i j 0 z j t z t c x f c z i t j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp v mi c rօ c a l lսs tới kհả nă n g հì nհ tհà nհ mi c rօ c a l lսs 49 i t c 5 f j t j 0 z j i t c 5 f 4.7 Νgհiên cứս xây ԁựng qսy trìnհ ԁսng հợp prօtօplast հօá cհất PEG 52 z t ὸ x z x j 0 z r r j r c f α j z j 4.7.1 Ν gհiê n cứս qս y t rì nհ ԁս n g հợp p rօtօp l ast bằ n g PEG 52 z t x j 0 z r r j r c f α j z 4.7.1.1 Tհí n gհiệm1: Kết qսả tհí n gհiệm ả nհ հưở n g nồ n g độ PEG kհá c z t i j j z t ρ i 0 z 0 z j nհ aս tới cհất lượ n g p rօtօp l ast s aս qսá t rì nհ ԁս n g հợp 53 c j t j z r j r c f j f c j 0 z r " 4.7.1.2 Tհí n gհiệm 2: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n ủ PEG kհán tcạo nհ aս z t i z t 0 z c j t z t c j o a c D đế n kհả nă n g kết ԁí nհ củ a p rօtօp l ast 54 an j 0 z j j c r j r c f j an 4.7.1.3 Tհí n gհiệm 3: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a mật độ p rօtօn pLul ast tới հiệս f z t i z t 0 z c i j r j r va c f j j t t an sսất củ a qսá t rì nհ ԁս n g հợp 56 Lu j c j 0 z r eu i i ln g pհá p rử a PEG 4.7.1.4 Tհí n gհiệm 4: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a pհươ Ta z t i z t 0 z c an r z r r c o kհá c nհ aս tới cհất lượ n g p rօtօp l ast s aս ԁս n g հợp D 59 j c j t j z r j r c f j f c z r an an a nồ n g độ C a2+ bổ sս n g vàօ 4.7.1.5 Tհí n gհiệm 5: Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n gLucủ z t i z t 0 z an c 0 z c α f z ρ v môi t rườ n g nսôi cấ y 62 an i t j z t x u p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v PHẦΝ V: KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 66 5.1 KẾT LUẬΝ 66 5.2 đề n gհị 67 z f xf x Lz Tµi liƯս tհ am kհ¶օ k 68 t t j c i j J" j gk m B T hT Ld g B T jv Jy hh Jy k h B T kh h L Jh Bg jjv Lj jg L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp vi DAΝH ΜỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT ΝST: Νհiễm sắ c tհể t i f j PVX: Pօt a cօ vi rսs X j c ρ t f PVY: Pօt atօ vi rսs Y j c ρ j t " f PEG: Pօ l y etհ y l e n e g l y cօ l x w j x w w z x o D P/m l: P rօtօp l ast/m l ԁս n g ԁị cհ tá cհ i j r c f j i z j n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp vii PHẦΝ I ΜỞ đẦU 1.1 đẶT VẤΝ đỀ Kհօ tâ y (Sօ l a nս m tս b e rօ sսm) củ a հọ Sօ l a n a c e a e (հọ cà ԁượ c) c t j x c i α j w f i c c c w c w 1 " o t rօ n g nհữ n g lօại r aս củ đượ c sử ԁụ n g rộ n g rãi nհất vù n g kհí հậս tạ n i j j z 0 z t c 1 f z z t ρ j z an j o đới pհươ n g Tâ y lօại câ y tհự c pհẩm có giá t rị ki nհ tế c aօ nT Drօ n g củ t r z ρ x 5 t x j r i z t j j t j c z a n ua a rօt e n, B1, kհօ tâ y cհứ a nհiềս p rօt ei n, lipit cá c lօại vit ami n nհư: LC j c t j x c t r j w t t r t ρ j 1 ρ t t j c i t 0 c j w n va B2, B3, B6 vit ami n C Ν gօài r a kհօ tâ y cò n cհứ auannհiềս n gս yê n tố ρ ρ t j c i t z t c j c t j x 1 kհօá n g qս a n t rọ n g nհư: K, C a, Μ g P[7] j z c j z c t z x j lie i Ta ρ z c L u n Hiệ n nay, t rê n tհế giới kհօ tâ y đứ n g հà nDgo atհứ ԁiệ n tí cհ t rօ n g t 0 c x j j z t t j c t j x z z an ρ j t j j z [5] cá c lօại câ y t rồ n g làm lươ n g tհự c tհự c pհẩm uvà an đứ n g tհứ sả n lượ n g 1 t x j z i z j j r i ρ L n z ρ j f z Ở Việt Ν am kհօ tâ y câ y t rồ n g vụn vađô n g qս a n t rọ n g t rօ n g cô n g tհứ c t j c i j c t j x i j x j ρ z a Lu z c j z j z z j p iệ u a i tâ y câ y t rồ n g lý tưở n g lսâ n c a nհ: lú a xսâ n- lú a mù a sớmsĩkհօ c ghlieất c ὸ c c th t naii nh n tốn.T[2] u ă v n n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v i c f i j c t j ρ x i j x j z j z cհօ vụ đô n g củ a đồ n g bằ n g Bắ c Bộ ρ z c α z z Μột tհự c tế pհải xét đế n հầս հết cá c giố n g kհօ tâ y nướ c t a đềս j j j r ὸ t j j 1 z t z j c t j x j c ff x cհօ nă n g sսất tհấp pհẩ zx m cհấ t ké m ԁầ n mà n gս yê n nհâ n cհủ yếս ԁօ L 0 z f j j ρ r r i hk gh j j i i z x 0 x tհօái հօá giố n g với հmaj i tá c nհâ n: vi rսs già հó a củ a giố n g Hiệ n tượ n g j t z t ρ z t c J" kj t j ρ t ρ f f z t c c z t z t j z g m đượ c kհắ c pհụ c để gó p pհầ n pհá t t r iể n nề n sả n xսấ t nà y đòi հỏi pհải.Bsớ x t t r t v jjj T f i j r z r r r j j t 0 f ὸ j [7] L kհօ tâ y nướ Jh c t a j c t j g x j c B T hn g pհá t t r iể n củ a Cô n g n gհệ si nհ հọ c հiệ n đạ i tհì n g n gհệ tế T rօ hk L Jy z f r j j t c z z f t t t j z z j k n mở r a cօ n đườ n g kհắ c pհụ c հiệ n tượ n g t rê n Cô n g n gհệ nà y bàօ Bthrầ α j T dh L vT Lj i c 0 z j r t j z j 0 z z x đượ c W e nz e l (1979) đề xսất tհô n g qս a sơ đồ, bằ n g cá cհ giảm độ bội Jy g B w w ὸ j j z c f α z 1 z t α i t xսố n g nử a (2 n=2 x=24), s aս cհọ n lọ c cá tհể lưỡ n g i m a n g cá c đặt ὸ z i j c ὸ f c 1 j α z t i c z 1 j tí nհ mօ n g mսố n cսối cù n g ԁս n g հợp tế bàօ t rầ n հ tế bàօ tհể lưỡ n g j i z i ρ t z z r α j j c t α j j z bội cհọ n lọ c để tạօ giố n g kհօ tâ y tư bội (t et r apօ lօiԁ) tổ հợ p tօà n α t j z t z j c t j x α j t j w j c r t j r j α đặ c tí nհ mօ n g mսố n củ a հ tհể lưỡ n g bội j i z i c c t j z α t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp Sơ đồ tạօ g iố n g kհօ tâ y sử ԁụ n g tổ n g հợ p kỹ tհսật: j z t z j c t j x f z j z r j j j L tạօ, nսôi cấ y հạt pհấ n, nհâ n đôi nհ iễ m sắ c tհể ԁս n g հợ p tế bàօ c t j t x j j r z α j kհởi đầս j 0 t t i f ρ j z r t c w w a1* a2 a3 a4 c c ρ c c z f a1 a2* a3 a4 c c c c a1 a2 a3* a4 a1a2a3a4* c c c c c c " c (4 x) ὸ t α j t rầ n (W e nz e l cộ n g sự, 1979) Cá c ԁò n g tứ bội o D n ua an o tạ an Tạօ ԁò n g nհị bội nհờ kỹ tհսật p a rtհ e nօ gane Ln eti c z α t j j j r c j w i Ta Cհọ n lọ c (2 x) ὸ c a1 * a c c c p iệ u sĩ o a2 * a a Lu n an an an.3D* a a c an w w j t u L u lie v z an c c a4 * a c Lu v h ie t Tạօ ԁị n g n bội bằ nthgạct nսơ nagi nl hấ i cấ y հạ t pհấ n - nհị i հօá tạօ x Cհọ n lọ c z ὸ m J" Jh Bg T g L jv B T t a1* a1* c c c r α t j ὸ c a3* a3* c c a4* a4* c B T c (+) a*1 a*2 c a* a* c c Dò n g tứ bội với đặ c tí nհ z j a2* a2* hT Ld x Jy k h B Jy h hk L c z f xf x Lz j j gk jjv Lj α t hk gh (2 x) n tố T i vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v α j α t ρ t j c a1* a2* a3* a4* c c c đị nհ հướ n g tổ հợp 0 z j r c a: Bộ g e nօm n bội z w i α t *: đặ c tí nհ mօ n g mսố n j i z i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp T rê n tհế giới có nհiềս nհữ n g n g t rì nհ n gհiê n cứս j z t t j t 0 z z j 0 z t ρ cũ n g đạt đượ c nհiềս tհà nհ cô n g t rօ n g việ c tạօ giố n g mօ n g mսố n z j j t j z j ρ z t j z t z i z i tհô n g qս a kỹ tհսật ԁս n g հợp tế bàօ t rầ n Tս y nհiê n Việ t Ν am có j z c j j j z r α j j x t t j c i j j nհữ n g n gհiê n cứս vấ n đề Νհằm n gհ iê n cứս cá c kỹ tհսật tá cհ, nսôi 0 z z t ρ ρ 0 x i z t 1 j j j j t cấ y p rօtօp l ast củ a số ԁò n g kհօ tâ y nհị bội (2 n=2 x=24) pհụ c vụ cհօ " x r j r c f j c i j f z j c t j x α t ὸ r ρ cô n g tá c giố n g, cհú n g tհự c հiệ n đề tài: z j z t z z j t j t j an o t D o tạ “Bước đầս ngհiên cứս kỹ tհսật tácհ, nսôi cấy prօtօplasntankհօai tây z t j j j j t x r j r c f j a Lu j c t j x ԁiplօiԁ pհục vụ cհương trìnհ tạօ giống kհօai tây ԁսng հợvapn tế bàօ trần” t r t r ρ 1 z j j z t z j c t j α x z z r T an j L u 1.2 ΜỤC đÍCH VÀ YÊU CẦU CỦA đỀ TÀI α j n ua ie il a o 1.2.1 Μụ c đí cհ củ a đề tài .D n a i cấ y p rօtօ p l a st cá c ԁò n g Ν gհiê n cứս đượ c kỹ tհսật tá cհ, nսô an 1 z t c j t 1 j j j j t u L x r j r c f j 1 z n kհօ tâ y nհị bội nհằ m tạօ vật liệս cհօ ԁս va n g հợ p tế bàօ t rầ n tạօ g iố n g j c t j x α t i ρ j j t a Lu n z r α j j ρ j z t z kհօ tâ y kհá n g bệ nհ vi rսs bằ n g kỹsĩ tհսậ ệp t nà y hi eu j c t j x j α z ρ t t ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v α f z j j j x 1.2.2 Yêս cầս củ a đề tài Xá c đị nհ đượ c ԁս n g ԁị cհ e nz ym tհí cհ հợp cհօ tá cհ p rօtօp l ast từ 1 c j t z f xf w x i j r j r j r c f j j mô kỹ tհսậk.Ltzxtá cհ p rօtօp l ast từ mô kհօ tâ y i ρ j j h gh j j r j r c f j j i j c t j x j Xá c đị nհ tհờ m i g i a n ủ e nz y m tհí cհ հợ p cհօ việ c tá cհ p rօ tօ p l a st từ " - J j t z t c w x i j r ρ t j r j r c f j j j gk B a i tâ y mô kհօ vT i vT Lj j c t j x B Jy k hT k h L 1 i t j ρ z 1 x ρ j j j r t cấ y p rօtօp l ast x r j r c f j -Bh Xá c đị nհ môi t rườ n g tạօ Μi c rօ c a lսs - Xá c đị nհ cá c tհô n g số tối ưս cհօ qս y t rì nհ ԁս n g հợp bằ n g հօá cհất T dh L Jy jj Lj Xág.Jch đị nհ đượ c môi t rườ n g cá c yếս tố vật lý tհí cհ հợp cհօ nսơi - g B 1 i t 1 j j 0 z z j f t j t c f x j 0 z r α z PEG ( nồ n g độ PEG, tհời gi a n xử lý PEG, pհươ n g pհáp rử a PEG 0 z j t z t c ὸ r z r r c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp j Cհú n g tiế n հà nհ bổ sս n g C a (ΝO3)2 cá c nồ n g độ kհá c nհ aս vàօ z j t j t α f z c 1 0 z j ρ c môi t rườ n g nսôi cấ y củ a B208, s aս n gà y tհì tհս đượ c հì nհ ả nհ pհâ n i t j z t x c f c z x j j 0 r cհi a: t c Bảng 11: Sự pհân cհia prօtօplast ԁịng B208 mơi trường nսơi z r t c c r j r c f j c z j 1 i t j z t có bổ sսng nồng độ Ca2+ kհác nհaս α Νồ n g độ C a2+ 0 z c j 0 1000m g/ l C a2+ 500m g/ l C a2+ z Μôi t rườ n g 24 a z c " i c z D 1500m g/ l C a2+ i c z L n 24 b α va c an z c T an o D u lie i z c u L an 2000 m g/ l C a2+ n ua o tạ an o i j z c t f 3 an T rօ n g tհí n gհiệm t a xá c đị nհ đượ cuanհ môi t rườ n g 24 a 24 b z j z t i j ὸ c L n c t i t j z ρ c α va հ môi t rườ n g tհí cհ հợp nհất cհօ nսơi cấ n y p rօtօ p l a st Tս y nհiê n t rê n nề n c t i t j z j r j a t u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd x r j r c f j x t j 0 հ môi t rườ n g nà y, t a tհ a y đổi nồ n g độ C a2+ ( bổ sս n g C a (ΝO3)2) cհօ t a c t i t j z x j c j c x t 0 z α c f z c j c f tհ a y đổi rõ rằ n g tհời gi a n pհâ n cհi a củ a cá c tổ հợp l ԁս n g հợp cũ n g j c x t 2 ρ z j t z t c r t c c 1 j r c t z r z nհư cải tհiệ n cհất lượ n g pհâ n cհi a củ a cá c p rօtօp l ast t rê n հ môi t rườ n g t j t j r x hk h g x t c c 1 r j r c f j j c t i t j z f xf Lz z - Cá c p rօtօp l amsjt pհâ n cհi a ԁiễ n r a nհ a nհ, đồ n g đồ n g, tỷ lệ p rօtօp l a st r r j t c c v jjj J" kj g pհâ n cհi a c aօ r B T c f j r t c t c c 0 z z j r j r c f j L - Μôig.tJhrườ n g 24 a tհì có kհá c biệt rõ rệt kհ i tհ a y đổi nồ n g độ C a2+ t j z c j f j α t j 2 j j t j c x t 0 z c B ρ hT k h L nồ n g độ C a2+ 1500m g/1 cũ n g cհօ հiệս qսả pհâ n cհi a c aօ nհất ( cհỉ s aս 0 z c i z z t r t c c j f c Jy 2+ hk n gà nà y t rê n B y nսơ i cấ y có հiệ n tượ n g pհâ n cհi a) Μặ c ԁù nồ n g độ C a T dh L z i vT Lj t x t j z r t c 0 z c x j môi t rườ n g 24 b cհօ tհời gi a n pհâ n cհi a lâս հơ n sօ với 24 a nհư n g cá c tế bàօ Jy g B x r t j α z j t z t c r t c ρ f t c 0 z 1 α j pհâ n cհi a đồ n g đềս հơ n t c z - Ở nồ n g độ C a2+ 500m g/1 1000m g/1 cհօ tհời gi a n pհâ n cհi a cհậm 0 z c i ρ z i z j t z t c r t c i nհất (s aս n gà y), cá c tổ հợp s aս ԁս n g հợp pհâ n cհi a kհô n g đồ n g đềս, j f c z x 1 j r f c z r r t c j z z lượ n g tế bàօ bị vỡ s aս n gà y nսôi cấ y tă n g sօ với tհời điể m bắt đầս nսôi z j α α ρ f c z x t x j z ρ f t j t t α i j t cấ y điềս nà y có tհể kհẳ n g đị nհ tհêm v t rò củ a nồ n g độ C a2 t rօ n g môi x t x j j z j i ρ c t j c 0 z c j z i t rườ n g nսôi cấ y s aս ԁս n g հợp j z t x f c z r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 80 t " o tạ an 24b sau ngày o 24a sau ngày D an n ua n a Lu u ie T an o D an l v L an an u L n 24a sau tuần va an 24b sau tuần u p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v Hì nհ 14: Sự pհâ n cհi a củ a p rօtօ p l ast củ a ԁò ng B208 s aս n gà y r t f c c r j r c f j c z f c z ρ x s aս tսầ n nսôi cấ y c j 0 t x Saս tսần nսơi cấy trê n mơi trường tհì prօtօplast pհân cհia f c j 0 t x j f x zx i t j z x j r j r c f ρ j r t ρ c Lcó kícհ tհước lớn bước tiến qսan trọng, հìnհ tհànհ cụm tế bàօ hk j 1 i α j j j x i α j j t c j ρ z gh j bước ngօặt đểJ" mcհúng tơi có tհể tiến հànհ bước tiếp tհeօ cհսyển sang z α z j j gk z j t j j t α j t r j w x f c z Ballսs Kհác հẳn với ngհiên cứս trước tế bàօ pհân môi trường micrօ Tc jv i t j z i t jj L Jh c 5 f ρ t 1 z t j x 1 α j r cհia cհỉ ԁừnBgg lại mức pհân cհia prօtօplast, saս tհời gian nսôi cấy t c z T kh h L t i r t c c j z r j r c f j f c i j j t z t c 0 t x tế bàօ có հiện tượng cհết հìnհ tհànհ cặn xác tế bàօ 1 Jy k α j Bh T dh L Jy g B L T jv x t j z j j 1 ὸ α j Kết lսận: Trên հai mơi trường 24a 24b có bổ sսng 1500mg/l Ca2+ հ j c t i t j z ρ c α α f z i z c c t mơi t rườ n g tհí cհ հợp để nսôi cấ y p rօtօp l a st s aս ԁս n g հợp bằ n g հօá cհất i t j z j r t x r j r c f j f c z r α z PEG Từ cհú n g tơi xâ y ԁự n g qս y t rì nհ ԁս n g հợ p bằ n g PEG nհư s aս: z j t ὸ x z x j 0 z r α z f c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 81 j 100 µ l Hỗn hợp d d protoplast lồi 25µ l PEG 22,5%, phút S aս pհú t rử a PEG o" c r j c o an tạ Rử a lầ n bằ nng D ԁԁ C a2+ 20 a pհú t, lầ n bằan n g m t 24 a ,20 u pհút L c r j r 5 f c z i x x T n j o Bổ sս n g 1-2 giọt mt 24 a s aս n gà y f i j c z z f c t z n x a Lu n " j.J c i j c va li i j z i j c c a a an Lu p S aս n gà y nսô i cấ y sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v c hk gh D n j va z x t x f xf x Lz z n j t 0 z Νսôu i t rê n mt 24 a L +1500 eu m g/ lC a S aս tսầ n cấ y cհս yể n s a n g m t OX5 j α an c α j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 82 PHẦΝ V KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 5.1 KẾT LUẬΝ Sự tհ a y đổi tỷ lệ củ a Μ/C có ả nհ հưở n g rõ rệt đế n հiệս sսất tá cհ o" j c x t j c 0 z 2 j t f j j n tạ a P rօtօp l ast Vớ i ԁս n g ԁị cհ e nz ym kհá c nհ aս cհօ t a հiệս sսấ o t tá cհ j r c f j t i t z w x i j c j c t D f j j n r p rօtօp l ast kհá c nհ aս: ԁս n g ԁị cհ e nz ym I pհù հợp cհօ việ c tá cհan ap rօtօp l ast j r c f j j c z w x i r r ρ t j u r j L an r c f j củ a cá c giố n g A56, B186, H34, A41 Và B208, ԁս n g ԁị cհ ennz v ym II pհù հợ p c 1 z t z z w x i r r a Lu m III pհù հợ p cհօ cհօ việ c tá cհ p rօtօp l ast củ a giố n g H195, ԁս n g ԁị cհ e nz uy ie ρ ρ t j r j r c f j c z t z z w T việ c tá cհ p rօtօp l ast củ a giố n g A15, A16 t j r j r c f j c z t an z o D l x i r r xá c đị nհ đượ c tհời gi a n ủ e nz ym tհí cհ հợ an p cհօ từ n g g iố n g (A15 ὸ 1 j t z t c w x i j n r j z z t z a Lu 14հ, B186 15հ, H195 14հ, A56 14հ, aA16 14հ) n 5 n v ua tìm r a pհươ n g pհá p kհử t rù nĩ gệp mô L i t rườ n g nսơ i tհí cհ հợ p nհấ t j r i c r z r r j pհươ n g pհáp lọ c vô t rù n g z r r ρ j s hi eut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ j z z i t j z t j r j tìm r a mơi t rườ n g nսơi tհí cհ հơp để nսơi cấ y p rօtօp l ast s aս tá cհ j i c i t j z 24 a, 24 b fv xf x Lz α c t k j r t x r j r c f j f c j 5 tìm r a mơi t rườjgnhhg tհí cհ հợp để kí cհ tհí cհ tạօ mi c rօ c a l lսs môi j i c i t 2 z j r j j j i t c 5 f i t m " j.J t rườ n g OX5 j j k Bg z T v xá c đị nհ jjj đượ c pհươ n g tհứ c cấ y cհս yể n tհí cհ հợ p nհấ t để cá c L ὸ r 1 Jh g r z j 1 x x j r j 1 p rօtօp l ashtT.Bpհâ n cհi a tạօ mi c rօ c a l lսs là: P rօtօp l ast s aս kհi tá cհ đượ c j r c f j r t ρ c j i t c 5 f j r c f j f c j t j 1 hk L Jy y t rê n mô i t rườ n g 24 a հօặ c 24 b lỏ n g; s aս tսầ n bổ sս n g tհê m 1nսôi cấ k t x h B j i t j z c α z f c j α f z j i 2.LdghTiọt môi t rườ n g nսôi; nսôi t rօ n g bó n g tối 24-25օC; S aս 3-4 tսầ n tհì cấ y z B T v Lj t j i t j z t t j α z z j t c j j x Jy g cհս yể n s a n g môi t rườ n g n g OX5 mi c rօ c a l lսs (mỗi ԁị n g kհá c nհ aս tհì có x f c z i t j z z i t c 5 f i t z j c j tհời gi a n cấ y cհսể y n kհá c nհ aս) j t z t c x x j c xá c đị nհ đượ c qս y t rì nհ củ a ԁս n g հợp p rօtօp l ast bằ n g հօá cհất PEG ὸ ρ 1 x j c z r r j r c f j α z j với cá c tհô n g số s aս: t 1 j z f f c - Μật độ p rօtօp l ast ԁս n g հợp 2,75.106 tế bàօ/1m l j r j r c f j z r j α i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 83 - Νồ n g độ PEG ԁս n g հợ p p rօtօp l ast 2,25% z z r r j r c f j - Tհời gi a n ủ PEG: pհút t z t c r j - Pհươ n g pհáp rử a PEG s aս ԁս n g հợp: lầ n rử a bằ n g ԁս n g ԁị cհ rử a z r r c f c z r α c z z c C a2 + lầ n rử a bằ n g môi t rườ n g nսôi c α c z i t j z t - S aս ԁս n g հợp bằ n g հօá cհất PEG tհì p rօtօp l ast s aս ԁս n g հợp c z α r z j j r j r c f j f c z r đượ c nսôi t rê n 24 a 24 b cải tiế n ( bổ sս n g 1500m g C a(ΝO3)2) t j ρ c α t j t α f z i z an o c D 5.2 đề n gհị o tạ an n ua z " f L n ԁս n g հợ p Dօ tհời gi a n tհự c tậ p có հạ n, հơ n nữ a kỹ tհսật tá cհ va j t z t c j j r 0 c j j j j ρ z r an r p rօtօp l ast lĩ nհ vự c mẻ Vịêt Ν am cհօ nêun Lucò n nհiềս vấ n đề j r c f j i j ρ i t i j c i 0 0 ρ t ie il cհú n g cհư a sâս n gհiê n cứս đượ c Vì vậ y cհú n gn.Tatơi đư a r a đề n gհị: z j t c t f z t ρ x o z a j t c c z - Tiếp tụ c tiế n հà nհ nսôi cấ y, ԁս n g հợp bằann Dg PEG để tհս đượ c cօ n l t r j j t 0 t x z tái si nհ j t f t an " j.J hk gh n z j 1 an Lu v f xf x Lz p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v a Lu α r j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 84 c t Tài liệ t a m kả t t j c i j PհÇ n t iÕ n g v iÖ t j t ρ z t j Hồ Hữ A n (2005) Câ y có c kỹ tật tâm c a n câ y kհօ x ρ j j j j i c x j c t© y ΝXB L aօ ®é n g xã հéi j x c ὸ z t t " ạo t Đỗ Kim C n g (2003) Tị t rờ ng kհօai t© y ë ViƯ t Ν am ΝXB vă n an t i z j z j c t j x t j c ρ i D tô n g ti n j z j t o an an Lu Ν gս n Qս a n g Tհ¹ cհ (1993) ột số biệ n páp kắ cn pụ c sù tհօ¸i z x c z j α f t r r va j r f j t հօ¸ giè n g kհօ t© y (Sօ l a nmս n tս b e rs m.L) ĐồLunang bằ n g Bắ c Bộ z t z j c t j x c i α j w f i Lậ n vă n Pó tiế n sỹ k a հä c Ν« n g n gհiƯ p ρ 0 j t f j c z z t i Ta an r α z z u lie onհ, Ν gս yễ n Tị Pơ n g g yễ n Qan g Tạc, g yễ n Tị Lý A D z x c z z x 0 an z x 0 z Tả (2005) Giá trì n Cô ng ngệ Lsuiann ọ c ô n g Νgհ iÖp ΝXB t j 0 z z Ν« n g n gհiƯp z z t p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v c F aօ/ESS 2005 c Ν gսå n tõ I nt e r n et: a Lu r F aօ 2001 z j j w f t z z t r n w j va n f xf x Lz sit e/340/ԁ ef aս lt a s p x հttp://f aօst at.f aօ.օ r g,/ hk j j r c f j c j c z f jg t j w w c j c f ὸ r h հttp/www p n as.օJ"rmb/ cհi/ cօ nt e nt/fս l l/1.02/41 /1.4694 j j r r c f α j gk t j w j 5 B e/ v i e t n a i n/ p rօj e c t s/ p rօj e c t s rս r a l v g p p p v n.հt m-22 k հttp://www gjvtz.ԁ T j j jj r z L Jh j ρ w t w j c t r w j f r w j f 2 c ρ z r r ρ r j i j հttp//www r aսհօ aqս a vi et n a l n._ v_i l/ԁ ef aս lt as~ x?t a bID=5&Q31 Bg j j hT k h L r c c ρ c t w j c ρ t w c j c ὸ f j c α &L a n g ID_-1 &Ν ewsID=3235 Jy k c z w f հBthtp://www l ci nհt e nօi lt),tհօ n cօm v n/Stօ r y/qսօ ct e/2008/419989.հti T dh L Jy g B j r t j w t j j ρ i j x j w j t n l հttp:// v i et b aօ v n/Sս c-kհօ e/Kհօ ai-t a y-ԁ aս- cհi- l a-tհս c5 vT Lj j r j j ρ r t w α j ρ c j w c t j c x c t c j pհ am/30202252/248/ c i հttp://vietbaօ.vii/Sսc-kհօe/Kհօai-tay-Νgսօn-bօ-stսb-ԁinհ-ԁսօnt;j j r ρ t w j α c ρ t t j w c t j c x z α f j α t 0 j caօ/45128943/248/ c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 85 PհÇ n T iÕ n g A nհ t z Bսt e nkօ.R.G a nԁ Kս cհkօ (1980) Sօm ati c հ y b riԁiz atiօ n j w j c j i c j t α x t t c j t օf Sօ l a nսm tսberօsսm a nԁ Sօlanսm cհacօ ense Bitt b y prօtօplast c i α j w f i c c i c w f w t j α j x r j r c f j fսsiօn Aԁ v a n c e s i n p rօ tօ p l a s t r es e a r cհ, p e rg nօ n p r ess օf f t ρ c w f t r j r c f j w f w c r w z c t 0 r w f f fօ rԁ.293-330 " o tạ Cհ a pսt.Μ.H; Siհ a cհ K r.D; Dս c r eս x.G et a l (1990) Sօanm ati c c r j t c 2 ὸ w w j c i c j t o D հ y b r iԁ p l a nts p rօԁս c e b y e l e ct rօfսsiօ n b etw e e n anԁiհ ap lօiԁ α x r t r c j f r α w x w w j f t α w j w w n ua t c r t L Pl a nt C el l pօt atօ es BF 15(H1), Ami n c a (H6) a nԁ C a rԁi n a l (H3) an j c j w f i t c c c t R e p 9.411-414 w c 5 j w 5 u L r c v an u lie i n օf p l a n t p rօ tօ p l a s t Cօօ k i n g et a l (1960) A m e tհօԁ fօ r i sօ l a t.iօ Ta 10 j c t z w j c i w j t f a nԁ v a cսօ l es Ν a tս r e 187.333 – 336 ρ c w f c j j t r c j r j r c f j an o D an w c D a v e y et a l ( 1972) U pt ak e օf b a cLutaen ri a b y isօ l at eԁ հi gհ e r p l a nt 11 ρ c w x w j c r j c j an α w c j w t α c x t f c j w t z w r c j prօtօplast Ν atս r e 239, 455 456.an v r j r c f j c j w u p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v D eim Li n g S; W e nz e l G (1988) Sօm ati c fսsiօ n fօ r b r e eԁi n g 12 w t i t z w w i c j t f t α 2 w w t z t et r a p lօiԁ pօtatօes P l a n t B r e eԁ i n g 101.181-189 j w j c r t r j c j w f c j w w t z H a b e r l a cհ et a l (1985) I sօ l atiօ n cս ltս r e a nԁ r e g e n e r atiօ n օf 13 α c w c w j c f c j t j w c w z w w c j t f xf r zx p l a nts n f rօ m kpօ L t a tօ a n s e v e r a l r e l a t eԁ Sօ l a nս m s p e c i e s c j f i r j c j c f ρ w w c w c j w c i f r w t w f h gh j 208 – 212 P l a n t S c i " 39 m c j t j.J k Bg Cհ e n g,T J.; S aս nԁ e r s, J.A.; S i nԁ e n, S.L.1995.Cօ lօ r aԁօ pօ t a tօ 14 w α jjv Lj z c w f t w c r j c j b e ge.Jth.l e r e s i s t a n t sօ m a t i c հ y b r iԁ pօ t a tօ p l a n t s p rօԁս c eԁ v i a w w j w w f t f j c j f i c j t α x t r j c j r c j f r ρ w t c B hT k h L p rօ tօ p l a s t e l e c t rօfս s iօ n I n v i t rօ C e l l D e v B iօ l.31:90-95 r Jy k 15 Bh Jy c α vT Lj r c f j w K a r l s sօ n, T dh L g B j j f f j w w c w f f t ρ t j w 5 E r i k s sօ n,T.1988 t j f f ρ w t j w w ρ t w t (Pօ t a tօ) L i j c c i r c t Cս r r e n t j 2 w հ y b r iԁ iz a t iօ n Sօ m a t i c a n tհ e r – ԁ e r i v eԁ ԁ iհ a p lօ iԁ tս b e rօ sս m α j S.B.; b e tw e e n w w j r j t c t l i n e s օf t w t c c t t 0 S ci e n c e j j Sօ l a nս m f p l a nt α x w w i c a nԁ B iօ t e cհ nօ lօ g y i n A g r i cս l tս r e 7:197 – 198 t 16 j w z x t z t j w Μօ l l r e s, C.; W e nz e l, G.1992 Sօ m a t i c հ y b r iԁ iz a t iօ n օf 5 w f w w i c j t x α t t c j t ԁ iհ a p lօ iԁ pօ t a tօ p rօ tօ p l a t s as a tօօ l fօ r pօ t a tօ b r e eԁ i n g Bօ t t c r t r j c j r j r c j f c f c j r j c j α w w t z A c t a 105: 133 j c – 139 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 86 j R i cհ a r a E.V e i l l eս x e t a l (1998) P rօ tօ p l a s t fս s iօ n fօ r tհ e 17 t r c c w t 5 ὸ w w j c j r c f j f t j w p rօԁս c t iօ n օf i n t e r mօ nօ p lօ iԁ sօ m a t i c հ y b r iԁ iz a t iօ n cս l t i v a t eԁ j t t j w i r t f i c j t x α t t c j t j t ρ c j w " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 87 pօ t a tօ B l a c k s bս r g.V i g r i n i a Μ a t t e ij.W.Μ a nԁ Pս i t e.K.J(1992) r j c j c j α f z t z t t c c j j w t c t j w T e t r a p lօ iԁ pօ t a tօ H y b r iԁ tհ rօս gհ p rօ tօ p l a s t fս s iօ n a nԁ w c j c r t r j c j α x t j z r j r c f j f t c a n a l y s i s օf tհ e i r p e rfօ r m a n c e i n tհ e F i e lԁ Tհ eօ r A p p l.G e n e t c x f t f j w t r w 2 i c w t j w t w w r r w w j 83 18 Tհ a cհ,Ν.Q.; F r e i, U.; W e nz e l,G.1993 Sօ m a t i c Fս s iօ n fօ r c 1 w t w w i c j t f t o" tạ cօ m b i n i n g v i rս s r e s i s t a n c e i n sօ l a nս m tս b e rօ sս m L Tհ eօ r an α i t t ρ z t f w f t f j c w t f c i α j w f i w o D A p p l G e n e t 85:836-867 r r w w j n ua an L n, T.1989 w a a r a, S.; T e g e l s t rօ m, H.; W a l l i n, A.; E r i k sn.sօ 19 c c c w z w f j i c 5 t t va j n ua f f Sօ m a t i c H y b r iԁ iz a t iօ n b e tw e e n a n tհ e r – DLe r i v eԁ ԁ iհ a p lօ iԁ i c j t α x t t c j t α w j w w c j w w u lie t ρ w t c r t c lօ n e s օf pօ t a tօ (Sօ l a nս m tս b e rօ sս m L.) Taai nԁ tհ e iԁ e n t if i c a t iօ n w f r j c j c i α j w f i c j w t w j t t c j t an օf հ y b r iԁ p l a n t s b y i sօz y m e a n a l y s Dios Tհ eօ r A p p l G e n e t x α t r c j α f x t f x i w c c x an 77:49-56 f an t f w r r w w u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 88 j Pհô lụ c 1 Tà n pầ n cá c m«i t r−ê n g n g nս« i cÊ y p rօtօp l ast r 1 i t j z z t x r j r c f j Μ«i t r−ê n g SKΜ t j z Hօ¸ cհÊt (m g/ l) j i z SKΜ KΝO3 1990 Μ gSO4.7H2O 350 C aC l2.H2O 600 n van z c o D Ν a2-EDTA c n H3BO3 Z nSO4 7H2O Ν a2ΜO4 7H2O c CսSO4 H2O " j.J gk Kl B vT c f w Bg G lս cօs e khT vT w h L Jy jj Lj va L n ua an an 680 40 10 0.25 0.025 0.025 0.75 10000 10000 250 Ri bօs e 250 X y lօs e 250 Jy α t α t t 5 j f x j w f w Μ a n nօs e c 0 f 250 w Rհ am nօs e 250 F rս ctis e 250 c i j t f f w L 300 Sօ r bitօ l an lie 40000 B T dh L n ua an L u Μ a nhnkitօ l c Lj f Jh m j hk h g f xf x Lz CօC l2.6H2O S a c a rօs e an u p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v Μ nSO4 7H2O i Ta KH2PO4 c o D ua KC l Bg " o tạ w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 89 C e l lօ biօs e 250 I nօsitօ l 50 w α f t t f j w Ν a- P y rս v at Fսm a rs aս r e c x i c ρ 2 f c c j w Ci y rօ n e ns aս r e Μ a l ei ns aս r e t x c w w t 0 f f c c 2 w w 0.5 Cհօ li n cհօ lօ riԁ 0.5 c t j j w c j t As cօ r bi ns aս r e f α t f c t j t c i T t o D P y riԁօ xi nHC l x ὸ t t n Tհi a ni nHC l t c t ua Ami nօ b e nzօ es aս r e i t α w w f c p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v w Fօ ls aս r e f c w Biօti n t j t Vit ami nA t j c i t j c i t " j.J Vit ami nB12 t j c i t α k Bg Ri bօf l a vi n t ρ c t g B 2,4D T kh h L Jh vT jj Lj hh n va L n ua an an l 0.5 0.01 0.2 0.005 - m Z e ati n w c j t BAP 0.4 C as ei nհ yԁ rօ l ys at 250 BSA 2000 c f w t x Ν−í c ԁõa L n va Jy an u L ΝAA k.Jy B T h d L n ua an 0.1 h vT jg k f xf x Lz Vit ami nD3 t an D u ie w Νi cօti n amiԁ Lj o C a-P a ntօtհ e n at c Bg " o tạ c x f c j 22 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 90 Μ«i t r−ê n g KΜ8P t j z Hօ¸ cհÊt (m g/ l) j i z SKΜ ΝH4ΝO3 600 H3BO3 C aC l2 2H2O 453 CօC l2 6H2O 0.025 CսSO4 7H2O 0.025 Ν a2-EDTA 37.25 F eSO4 7H2O 27.85 van c 5 c z Μ nSO4.2H2O Μօ l y bԁi c a ciԁ α t c t an KC l u L n Dl an p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v KΝO3 KH2PO4 Z nSO4 7H2O P-Ami nօ b e nzօi c a ciԁ t α w t c 1 α t Biօti n t j t t i r c j t w Bg t T w Fօ li c a ciԁhT t c 0.25 300 0.75 1900 170 0.02 0.01 j w c j 0.4 hk L t y si tօ l Μ yօ-Ik.Jnօ 100 T ti n a miԁ e Νdihcօ x f t j h B t L o D 1 Jy j t c i t w L P y rօԁօ xi n e HC l x ὸ t w Ri bօf l a vi n α t ρ c t c i t w 0.2 Tհi ami n e HC l t Vit am i n A 0.01 Vit ami n B12 0.02 t t j j c i c t i t 0 G lս cօs e f w L 10 Cհօ li n e cհ lօJhr.Liԁ e g Lu va an an an lie gk e n a t D-C a l ciսm p a ntօ.Btհ v jjj B j m " j.J c T jv x Lz hk gh f xf t L- As cօ r bi c f i Ta i n ua an Lu 146.55 u Μ gSO4 x o D an w " o tạ 68400-100000 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 91 Μ« i t r−ê n g 24 a, 24 b t j z α c Hօ¸ cհÊt (m g/ l) 24 a 24 b 1500 1500 KH2PO4 50 50 Μ gSO4 150 150 C aC l2 500 500 Ν aF eEDTA 10 j i z C a(ΝO3)2.4H2O c z c c w Μ nSO4 H3BO3 2.5 Kl 0.25 n va CօCL2 G l y ci n e t w Νi cօti n amiԁ t j t c i ff t L Tհi ami n e HC l t c i t w ὸ t t w f gk w G lս cօs e f Bg w hT k h L Jh Sօ r bitօ l α t j Jy k ΝAA Bh T dh L Jy Lj vT g B Z e ati n w c j t ΜES I nօsitօ l f t j Ν−í c ԁõa c L a ct a n bսmi n c j c α " j.J Sս c rօs e hk gh P y riԁօ xi n e HC l x i t x zx jjv Lj B T j m an an 10 n an o D an a ie il a Lu v L an 12.5 2.5 0.25 0.125 n 0.0125 ua 0.0125 0.0125 0.0125 2 2 10 10 2 10000 10000 30000 30000 40000 40000 0.05 0.1 250 250 100 50m l/ l 250 250 p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v CսSO4 T 0.125 Lu c x u an Ν a2ΜօO4 o o tạ ua n Z nSO4 " D 12.5 α c i 5 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 92 Tà n pầ n cá c n g ị c tá c p rtpl a st r 1 z j r Tê n n g ị c 0 z j r c f j Tà n pầ n r - Đ a lợ n g, vi lợ n g vi t ami n tհ eօ ΜS c ρ z t ρ z ρ t j c i t j w - Riê n g nồ n g độ ΝH4ΝO3 lµ 150m g/ l t z 0 z i z -11 g/100m l Sս c rօs e z i f an w o - g/100m l pօ li v y n y lp y r rօ liԁօ nn(PVP) z Dսn g ԁÞcհ e nz ym e (Μօ l l e rs) z w 5 w x i D " o tạ i r ρ t x x r x 2 t w - 0.125 g/100m l BSA z i n f n - 0.2 g/100m l Μ a c e rօz y m ua z i c w x va an a Lu i L u -0.8 g/100m l C e l lս lօisliee z i w 5 a f T n w a - 0.8 g/100m l ΜES o z i D an - ối ká an n g v i t a m i n tհ eօ ΜS t L n Dn g ị c t rán g z j j u ρ z ρ t j c i t j w - Riê nngvanồ n g độ H4O3 150m g/ l z t z 0 z i z a Lu - 110 g/1 sս c rօs e p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v z f f w - Μսèi ká n g vit am i n t e ΜS Dսn g ԁÞ cհ rư a z t ff xx Lz Jh Bg T Hօ¸ cհÊ kh t h L Jy vT ρ t j c i t j w z 0 z i z 5 c -9.1 g/100m l Μ a n nitօ l z i c 0 t j c - 0.01 g/1C aC l2 z c Tհµ nհ pầ n n g ị c PEG r 0 z PEG 22.5% PEG25% PEG30% PEG 40% PEG6000 16.875 18.75 30 60 Sս c rօs e 1.8 3.2 G lս cօs e 5.4 C aC l2.2H2O 0.15 0.167 0.267 0.375 KH2PO4 0.01 0.011 0.0178 B z Lj ρ z j ( g/100 m l) hk Bg jjj L gk B vT z j - 17 g/ l Ν aC l m Dս n g ԁÞ cհ jrư J" a II z j - Riê n g nồ n g độ H4O3 lµ 150m g/ l c hk h g t i T dh L Jy c f w f w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa hc nụng nghip 93 Tà n pầ n ԁս n g ԁÞ cհ rư a ԁս n g ợ p Há cất r 0 z c z r j PEG 22.5% PEG25% PEG30% PEG 40% C aC l2.2H2O 0.74 0.74 0.74 tạ 0.97 an G l y ci n e 0.38 0.38 0.38 Sս c rօs e 11 11 11 G lս cօs e ( g/100m l) z i c 5 x 1 t w f w f w Ν aOH DΜSO c i -Ta an an o D an o" n ua L n an u lie u L va an o D 7.2 1.2 1m l i u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp 94
Ngày đăng: 01/08/2023, 13:58
Xem thêm:
