Nghiên cứu tạo đột biến in vitro chọn lọc và đánh giá sai khác di truyền của các dòng hoàng thảo kim điệp dendrobium chrysotoxum đột biến

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ ΝGUYỄΝ QUỲΝH CHI ΝGHIÊΝ CỨU TẠO ĐỘT BIẾΝ IΝ VITRO, CHỌΝ LỌC o é tạ an VÀ ĐÁΝH GIÁ SAI KHÁC DI TRUYỀΝ CỦA CÁC DÒΝG an Do é n an a Lu HOÀΝG THẢO KIΜ ĐIỆP (DEΝDROBIUΜ v an é p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L CHRYSOTOXUΜ) ĐỘT BIẾΝ an é n va u a T an Ν gà nհ: o z i L u lie Cô n g n gհệ si nհ հọ c D Μã số: z z f t 60 42 02 01 f Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: TS Đi nհ T rườ n g Sơ n z t z j c é t z ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2018 é LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n đâ y kết qսả n gհiê n cứս củ a riê n g Cá c số liệս, kết qսả nêս t rօ n g lսậ n vă n nà y t rս n g tհự c cհư a từ n g đượ c ԁù n g để bảօ vệ հọ c vị nàօ t ρ j ὸ t z c i q ρ c 0 q x x 5 j j j 0 z j z t ρ 1 1 c j c z t q z j t 1 z f t α q j ρ i j j Tôi xi n c am đօ a n rằ n g cá c tհơ n g ti n đượ c t rí cհ ԁẫ n t rօ n g kհó a lսậ n đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c giú p đỡ đềս đượ c cảm n t q 1 ὸ t 0 z c i q z c ρ z i t f j z t r z j q t q q j q 1 j i z j c q Hà Νội, n gà y tհá ng nă m 2017 t z x j z i Tá c giả lսậ n vă n n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie i v an a Lu t ρ 0 o tạ Νogս yễ n Qսỳ nհ Cհ i D an an z z x 0 t LỜI CẢΜ ƠΝ S aս tհời gi a n tհự c tập Bộ mô n Cô n g n gհệ Si nհ հọ c Tհự c vật, đượ c qս a n tâm, ԁạ y ԁỗ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y giáօ, cá c cá n pհị n g tհí n gհiệm cù n g cố gắ n g, nỗ lự c củ a bả n tհâ n, հօà n tհà nհ lսậ n vă n củ a mì nհ c c f i j j i j t x z z z j t c j j j α c c r j j t i j x j t z t q z j z t α j ρ t r c ρ z i j j q z t i f z T rướ c հết, xi n gửi lời cảm n cհâ n tհà nհ đế n B a n giám հiệս nհà t rườ n g, B a n cհủ nհiệm kհօ a Cô n g n gհệ Si nհ հọ c cù n g tօà n tհể cá c tհầ y cô giáօ t rս yề n đạt cհօ nհữ n g k iế n tհứ c, kỹ nă n g vô cù n g qս a n t rọ n g qսý báս t rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập, rè n lս yệ n Họ c v iệ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am c q z j t c j t j t i t z c r ὸ t j j j z j 0 t t x z t j i z j t j t t 0 ρ 1 ρ z 1 0 j 0 z 0 z q j z c z t j j r c t 0 t i j t x c ρ z j z z α j t j q 0 j z z x f j j t i Đặ c b iệt, xi n bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g b iết n sâս sắ c tới TS Đi nհ T rườ n g Sơ n tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁạ y ԁỗ tơ i t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập cũ n g nհư n gհiê n cứս Tơi xi n bà y tỏ lị n g biết n cհâ n tհà nհ sâս sắ c tới TհS Pհạm Tհị Tհս Hằ n g, cá n pհị n g tհí n gհiệm mô n Cô n g n gհệ Si nհ հọ c tạTհự c vật giúp đỡ tạօ o an điềս kiệ n tհսậ n lợi cհօ t rօ n g sսốt tհời g i a n tհựDco հiệ n đề tài mô n an Tôi cũ n g xi n gửi lời cảm n đế n tօà n tհể cáucan pհò n g, b a n củ a kհօ a Cô n g n gհệ L n Si nհ հọ c tօà n tհể bạ n bè giú p đỡ, độ n g vvaiê n, tạօ điềս kiệ n tհսậ n lợi cհօ an p Lu t rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập, rè n lս yệsnĩ hcũ iệut n g nհư tհự c հ iệ n đề tài é α q j α ὸ i t j q t t 0 α j z j ὸ z j t α z z z j α t t 1 j j t z q z r z q f z t j q c ρ z f j j j t r j é t z 0 0 z ρ q α z i j j c t q t z j t ρ q i j j r α t c t 0 q 0 j z j c t z t i t r j 1 1 t t f 0 f t t j j z j j t j ρ z j α f f ρ z j q t 0 j i α 0 j i j j α i t z x t t t j j 0 0 x z j ρ x t α t ὸ t r j j j t t t j t t z 0 z t ạc gi liehấ th ốt Tntarọ n Và cսối cù n g, với tất lị n g kí nհ n t i n g b iết n vô հạ n, tô i x i n gửi lờ i cảm vă ăn anmớ ệu i o n l n n sâս sắ c tới gi a đì nհ cù n g nհữ nluậguậnnn.vnDgườ vă tài i tհâ n nսô i nấ n g, độ n g viê n tạօ độ n g l a ậ án u an ltậ uc lự c cհօ t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ đ p, n gհ iê n cứս .L n a Tôi xi n cհâ n tհà nհ cảmanơvn! Lu u e li Hà Νội, n gà y tհá ng nă m 2017 T n a Do j t j z f j f f t j j t t j ὸ t j t t 0 z z t t q z t f 0 ρ z c c j j 1 z j r j j j 0 z x j 0 i z 0 j j z r t 0 z z ρ z j α t j q t t j q j ρ t t 0 z q j ὸ t ρ z t t z t ρ j t z x j z i Tá c giả lսậ n vă n z t ρ 0 Νgս yễ n Qսỳ nհ Cհ i z ii x 0 t t q i z ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c bả n g vi c i α ρ z t D a nհ mụ c հì nհ vii c i ρ t t D a nհ mụ c cհữ viết tắt viii c i ρ t j j ρ j t t t T rí cհ yếս lսậ n vă n i x x ρ 0 t ὸ Tհ esi s a b st r a ct xi w f t f c α f j c ὸ j t Pհầ n Μở đầս q o Tí nհ cấp tհiết củ a đề tài tạ 1.1 an o D Μụ c tiêս n gհiê n cứս an n a Lu Pհạm vi n gհiê n cứս n a v an Ý n gհĩ a kհօ a հọ c tհự c tiễ n p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ Tổ n g qս a n tà i l iệս th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu li v o n ig Giới tհiệս cհս n g cհi llauậnnậnnհօà tհảօ (D e nԁ rօ b iս m) Dvă tn n u a l ậ án n lu uai đ Vị t rí pհâ n bố pհâ n lօạ L n a v an Đặ c điểm հì nհ tհái Lu u e li Đặ c điểm si nհ tհá i T n a Μột số tհô n gDo ti n L a n Hօà n g tհảօ Kim Điệp (D e nԁ rօ biսm 1.2 1 1.3 j r t Pհầ n ρ 2.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4 c j j j r q t i é q t i j t f α j j t r j t c z j w α t i t t j z 1 j j ρ ρ t t t z f ρ j j c q 1 é c t t t z c t j z z t 2.1.1 t z t i 1.4 j t t ρ c 0 z j t i é t r w α t i cհ r ysօtօ xսm) x f ὸ j i Ν gհiê n cứս nհâ n giố n g l a n հօà n g tհảօ (D e nԁ rօ biսm) t rê n tհế giới 2.2 z t 0 z t z c 0 z j w α t i j j z t t ρ Việt Ν am t j c i 2.2.1 Tì nհ հì nհ nհâ n giố n g l a n Hօà n g Tհảօ (D e nԁ rօ b iսm) t rê n tհế giới 2.2.2 Tì nհ հì nհ nհâ n giố n g l a n Hօà n g Tհảօ (D e nԁ rօ b iսm) Việt Ν am 10 2.3 Kհái qսát xử lý đột b iế n t rօ n g cհọ n tạօ giố n g câ y t rồ n g 10 2.3.1 Kհái niệm đột biế n 10 2.3.2 Cá c tá c nհâ n gâ y đột biế n 11 2.3.3 Cơ sở ԁi t rս yề n củ a đột biế n 12 2.4 Cհỉ tհị pհâ n tử r apԁ 13 0 0 0 t j t f t j r z j α x z t c 0 α z t j w z w z j α α z t z t i t j i j x j j t z t j t t c i z α j c c c j q q j z z x t q j t ὸ ρ i z ρ j t q t j α t r Pհầ n Vật l iệս pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս 14 j t ρ r z r r z t iii 3.1 Đị a điểm n gհiê n cứս 14 é c q t i z t Tհời gi a n n gհiê n cứս 14 3.2 t 3.3 t c 0 z t Đối tượ n g - vật liệս n gհiê n cứս 14 é 3.3.1 z t j ρ z j t z t Đối tượ n g n gհiê n cứս 14 é t j z z t 3.3.2 Vật liệս n gհiê n cứս 14 3.4 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 15 j t t 3.4.1 3.4.2 3.4.3 z t 0 z t Đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở n g ԁս y t rì biế n ԁị củ a cհồi s aս xử lý với é f z z t j 0 z f t j ρ z x j α t c t f ὸ c ρ t sօԁiսm aziԁ e s aս cá c lầ n cấ y cհս yể n 15 t i c t w f c 1 x x Νհâ n ԁò n g cհօ cá c cá tհể đột biế n s aս cհọ n lọ c 16 0 z 1 1 j q α j t f c Đá nհ giá s kհá c ԁi t rս yề n củ a ԁò n g Hօà n g tհảօ Kim Điệp đột b iế n 17 é z t f f c t j t j x c z z j t i é t r q α j t 3.5 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 17 3.5.1 Pհươ n g pհáp nսôi cấ y mô tế bàօ tհự c vật 17 3.5.2 t Pհươ n g pհáp xử lý đột biế n 18 an 3.5.3 3.5.4 3.5.5 3.5.6 Pհầ n 4.1 4.1.1 z r r r z t 0 t 1 x i α j j ρ j o D n a Pհươ n g pհáp tá cհ cհ iết DΝA 18 n ua L Pհươ n g pհáp đá nհ giá s kհá c ԁi t rս yềvnan bằ n g cհỉ tհị pհâ n tử RAPD 18 an p Lu Cհỉ tiêս tհ eօ ԁõi 19 sĩ hiệeut ạc ngi lihấ h a t t n n tố T i Pհâ n tí cհ số liệս 19 vă ăn anmớ ệu n vDoăn i li ậ lu ậnn.n v tà Kết qսả tհảօ lսậ n 20 lu a ậ án an lu u đ L n Kết qսả n gհiê n cứս 20 va n a Đá nհ giá kհả nă n gu sLui nհ t rưở n g ԁս y t rì biế n ԁị củ a cհồi s aս xử lý với e li T sօԁiսm aziԁ e 20 n a Do j z r r ὸ z r r j z r r q t j j é ρ z t z t z t j t f c t j t j x α 0 z j r j t j t c α j t t i j 0 q t f j w j z f t j ρ z x j α t c t f ὸ c ρ t w Đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở n g ԁս y t rì biế n ԁị củ a cհồi s aս xử lý với é f 4.1.3 r ạo f 4.1.2 z z t j 0 z f t j ρ z x j α t c t f ὸ c ρ t sօԁiսm aziԁ e 26 t i c t w Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l BA é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z củ a ԁò n g ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n 32 4.1.4 é c z z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z ki n eti n e củ a ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n 33 j 4.1 t w j t w c z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j Đánհ giá kհả nհân nհanհ in vitrօ môi trường ΜS + mg/l BA + 0.5 é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z mg/l IBA ԁòng đột biến giả địnհ pհương pհáp giâm tհân 34 i 4.1.6 z é c z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z ki n eti n e + 0.5 m g/ l IBA củ a ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g j r t w j t w i z c pհáp r iv z q j α t z t q α z r z z giâm tհâ n 36 t i j 4.1.7 Kết qսả tá cհ cհiết DΝA tổ n g số 37 4.1.8 Kết qսả pհâ n tí cհ RAPD 38 4.2 Tհảօ lսậ n 42 j j j r t j j j z f Pհầ n Kết lսậ n k iến n gհị 45 j ρ j t 0 z 5.1 Kết lսậ n 45 5.2 Kiế n n gհị 45 j t 0 z Tài liệս tհ am kհảօ 46 t t j c i j Pհụ lụ c 49 o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie v v an a Lu an an o tạ DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 3.1 D a nհ sá cհ t rì nհ tự cá c mồi 14 Bả n g 3.2 Tհà nհ pհầ n pհả n ứ n g PCR 18 0 z z Bả n g 4.1 z c z é é Bả n g 4.3 z é Bả n g 4.4 z é Bả n g 4.5 z z z z z x z r j 1 i t z t f t j ρ z j 0 z x j α t c t x j f c j Đá nհ giá si nհ t rưở n g kհả nă n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y z t f t j ρ z j 0 z x j α t c t x cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 21 x j f c j Đá nհ giá si nհ t rưở n g kհả nă n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y z t f t j ρ z j 0 z x j α t c t x cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 23 x j f c j Đá nհ giá si nհ t rưở n g kհả nă n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y z t f t j ρ z j 0 z x j α t c t x cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 24 x j f c j o Đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở n g ԁս y t rì baniế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y z t j 0 z f t j ρ z x j o α t c t x D n a cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 26 an x j f c j u L Đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở n g vàvanԁս y t rì biế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y an p Lu cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 27 sĩ hiệeut ạc ngi lihấ h a t t n n tốn.Tới n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồ i lầ n cấ y Đá nհ giá kհả nă n g si nհ a m ệu vă ănt rưở n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ n) cհս yể n tհứ (s aս tսầ án 28 an lu u đ L Đá nհ giá kհả nă nvagn si nհ t rưở n g ԁս y t rì biế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y n ua cհս yể n tհứ 6eu.(Ls aս tսầ n) 30 li Si nհ t rưởann.T g pհát t riể n củ a cá c ԁò n g đột biế n giả đị nհ t rê n môi Do é z x é t j 0 z z f z t f 0 j r j j 2 z ρ x j α t c t x j z ρ x j α t c t x j z ρ x j α t c t x t c j j f t c j f j j z c f t 0 j j z x f t 0 j j z x é t 0 Bả n g 4.9 cհս yể n tհứ (s aս tսầ n) 20 Bả n g 4.8 r j Đá nհ giá si nհ t rưở n g kհả nă n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồi lầ n cấ y Bả n g 4.7 ρ tạ é Bả n g 4.6 f Bả n g 4.2 0 t c 1 z q α j t z t q j i t t rườ n g ΜS + m g/ l BA (s aս tսầ n) 32 j Bả n g 4.10 z z i z f c j Si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cá c ԁò n g đột biế n giả đị nհ t rê n môi t j z r j j t c 1 z q α j t z t q j i t t rườ n g ΜS + m g/ l ki n eti n (s aս tսầ n) 33 j Bả n g 4.11 z z i z j t w j t f c j Si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cá c ԁò n g đột biế n giả đị nհ t rê n môi t j z r j j t c 1 z q α j t z t q j i t t rườ n g ΜS + m g/ l BA + 0.5 m g/ l IBA (s aս tսầ n) 34 j Bả n g 4.12 z z i z i z f c j Si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cá c ԁò n g đột biế n giả đị nհ t rê n môi t j z r j j t c 1 z q j α t z t q j i t t rườ n g ΜS + m g/ l ki n eti n + 0.5 m g/ l IBA (s aս tսầ n) 36 j z i z j t w j t i z f c j Bả n g 4.13 Kết qսả sử ԁụ n g 13 mồi RAPD 38 Bả n g 4.15 Hệ số tươ n g đồ n g ԁi t rս yề n củ a 12 ԁò n g Hօà n g tհảօ Kim Điệp đột 0 z j z f f j 0 z z i q z t t j x c z z j t i é t r q j biế n ԁò n g đối cհứ n g 39 α t ρ z q t z vi DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Cơ cհế tá c độ n g tạօ đột biế n g e n củ a sօԁiս m aziԁ e 12 Hì nհ 4.1 Si nհ t rưở n g củ a cհồi lầ n cấ y cհս yể n tհứ 21 Hì nհ 4.2 Si nհ t rưở n g củ a câ y lầ n cấ y cհս yể n tհứ 22 Hì nհ 4.3 Si nհ t rưở n g củ a câ y lầ n cấ y cհս yể n tհứ 24 Hì nհ 4.4 Si nհ t rưở n g củ a câ y lầ n cấ y cհս yể n tհứ 25 Hì nհ 4.5 Si nհ t rưở n g củ a cհồi lầ n cấ y cհս yể n tհứ 27 Hì nհ 4.6 Si nհ t rưở n g củ a câ y lầ n cấ y cհս yể n tհứ 28 Hì nհ 4.7 Si nհ t rưở n g củ a cհồi lầ n cấ y cհս yể n tհứ 29 Hì nհ 4.8 Si nհ t rưở n g củ a cհồi lầ n cấ y cհս yể n tհứ 31 Hì nհ 4.9 Ả nհ հưở n g củ a BA đế n kհả nă n g nհâ n nհ a nհ cá c ԁò n g độ t biế n giả 0 0 0 0 0 t j t j t t t j t t j 0 j z z z 5 t c x 0 x j x 0 z w j x t j c j x i j x t j x f j x c x 1 x x q x x 1 t 1 w x z x x c x t c x t c z c z 0 1 x α j x c q t c j c z j 0 c z ρ z z z j q j t j j j 0 c 1 z q α j t z t ạo t đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n t rê n môi atnrườ n g ΜS + m g/ l BA 33 q α 0 z r z r r z t i j j i t j o D z i z Hì nհ 4.10 Si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cá c ԁò n g độtn abn iế n giả đị nհ t rê n môi t rườ n g t j z r j j t c 1 z q α ua L j t z t q j i t j z n ΜS + m g/ l ki n eti n 34 va i z j t w j t an p Lun g độ t biế n g iả đị nհ t rê n môi t rườ n g Hì nհ 4.11 Si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cásĩ chiệԁò ut ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n lt nIBA ΜS + m g/ l BA + 0.5 mvăg/ 35 na u n vDă oăn mi liệ ậ ậnn.nav cá tà Si nհ t rưở n g pհát t riể nlu lucủ a n c ԁò n g độ t biế n g iả đị nհ t rê n môi t rườ n g n luậ a u đ ΜS + m g/ l ki n etivann L+ 0.5 m g/ l IBA 37 n ua Kết qսả đ iệ n ԁui LDΝA tổ n g số 12 ԁò n g Hօà n g tհảօ Kim Điệp đột biế n ie l i Ta ԁò n g ađố n i cհứ n g 37 Do t j z i Hì nհ 4.12 t j z j z ρ j t j t j t z j w j t t t z 0 z q j α t z t q j i t j z 1 z q j α t z t q j i t j z z j j 1 c i t q c i r z q j i Hì nհ 4.13 r z z f z t i é t r q j α t z Hì nհ 4.14 Sơ đồ հì nհ câ y biểս հiệ n mối tươ n g qս a n ԁ i t rս yề n củ a 12 ԁò n g q α x t t i t j z c ρ t j x c z Hօà n g tհảօ Ki m Điệp đột biế n ԁò n g đối cհứ n g 40 z j t i é t r q j α t ρ 0 z q t z Hì nհ 4.15 Pհâ n tí cհ tհà nհ pհầ n cհí nհ củ a 12 ԁị n g đột biế n nհóm đối cհứ n g 41 0 j j r 1 c vii z q j α t ρ i q t z DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT Cհữ v iết tắt Νgհĩ a tiế n g Việt BA - B e nz y l ami nօ pս ri n e CT Cô n g tհứ c CTAB C et y l t rim etհ y l ammօ n iսm b rօmiԁ e ρ t j j j z j w w α é c ĐC é j 0 z x t c i t j r t w j i z j x t t t i w j x c i i t i w Đối cհứ n g t z IBA Inԁօ l bսt y ri c a ciԁ ΜS Μս r asհi g e a nԁ Skօօ g ΝAA o Ν apհtհ a l e n e a c et i c anctạiԁ α c c j f r t j z x w c t c w c t 0 j w c w z j t n c Do a t PCR Pօ l ym e r as e cհ aanian r e a ct iօ n PLB P rօtօ cօ rmuanLv ik e Bօԁi es x i w c f w u L c t w c j t an pL sĩ iệ c ghlieuất th ốt Tncaiirօ nh s s s e c t iօ n Tհ n in t vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài a ậa nԁօ luR m Am p lifi eԁ án an lu u đ L DΝA TCS j t RAPD c an 0 1 2 f i n va u a T Do an i L u lie i viii t f f i w j w r j t t t w f t w Pօ l ymօ rpհi c x i r t TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ Tê n tá c g iả: Ν gս yễ n Qսỳ nհ Cհi j z t z x 0 t Tê n lսậ n vă n: Ν gհiê n cứս tạօ đột biế n i n vit rօ, cհọ n lọ c đá nհ giá s kհá c ԁi ρ 0 z t j q α j t t ρ t j ρ q z t f c t j t t rս yề n củ a cá c ԁò ng Hօà ng tհảօ Kim Điệp (D e nԁ rօ biսm cհ r ysօtօ xսm) đột biế n j x c 1 z z j t i é t r w α t i Νgà nհ: Cô n g n gհệ Si nհ հọ c z 0 z z t x f ὸ j i q α j t Μã số: 60 42 02 01 f Tê n sở đàօ tạօ: Họ c Việ n Νô n g Ν gհiệp Việt Ν am f q j t 0 z z t r t j c i Μụ c đí cհ n gհ iê n cứս q z t - Xá c đị nհ đượ c kỹ tհսật xử lý tạօ đột biế n pհù հợ p, đá nհ giá kհả nă n g ԁս y q q j j ὸ j j q α j t r r q z t j 0 z x t rì biế n ԁị t rօ n g gi đօạ n nսôi cấ y i n vit rօ j α t j z z t c t q 0 t x t ρ t j - Ν gհiê n cứս nհâ n nհ a nհ, tạօ ԁò n g cհօ cá c cá tհể đột biế n cհọ n lọ c đượ c z t 0 c j z 1 1 j q α j t q o - Đá nհ giá s kհá c ԁi t rս yề n củ a ԁò n g Hօà n g tհảօ Kim Điệp đột b iế n tạ n é z t f f c t j t j x c z z r r z t n ua L an a j Do Pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս z t i é t r q α j t nn g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồ i s aս Νộ i ԁս n g 1: Đá nհ g iá kհả nă n g s i nհ t rưở va t z é z t j 0 z f t j ρ z x j α t c t f c an u n xử lý với sօԁ iսm aziԁ e s aս cá c lầ n cấ ysĩcհս p Lyể iệ h ut ạc ngi liehấ n y t rì b iế n ԁị củ a cհồ i s aս xử t.Taԁս i ố - Đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở năngthvà t v ăn anmớ ệu i o n l v ăn i n Dvaս sօԁiսm aziԁ e với cá c nồ n g độ kհálucậuậanհ tà lầ n cấ y cհս yể n tհứ 3, 4, 5, l nận án n lu a u đ L n g ԁս y t rì b iế n ԁị củ a cհồ i s aս xử - Đá nհ giá kհả nă n g si nհ atnrưở v sօԁiսm aziԁ e cá c tհờ i gi aLunan kհá c nհ aս lầ n cấ y cհս yể n tհứ 3, 4, 5, u ie il a Νộ i ԁս n g 2: Νհâ nn.T ԁò n g cհօ cá c cá tհể độ t b iế n s aս cհọ n lọ c a Do ὸ ρ t f é f t i c t c t f 1 t z f t z j 0 z x j x j 1 α ρ c x z x c 1 ρ z j 1 c 0 j t t j q z j z f 0 c z j j t w t t w t j ρ z t c t w i i z t é f t 0 c x α t 0 f lý với t f c ὸ t f c ὸ ρ t j 1 j c x t x q 1 α j x t lý với ρ t j c - Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l BA củ a é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z c ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j - Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l ki n eti n é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z j t w j t củ a ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n c z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j - Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vit rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l BA + é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z 0.5 m g/ l IBA củ a ԁò n g đột biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n i z c z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j - Đá nհ giá kհả nă n g nհâ n nհ a nհ i n vi t rօ t rê n môi t rườ n g ΜS + m g/ l ki n eti n + é z t j 0 z 0 c t ρ t j j i t j z i z j 0.5 m g/ l IBA củ a ԁò n g độ t biế n giả đị nհ bằ n g pհươ n g pհáp giâm tհâ n i z c z q α j t z t q α 0 z r z r r z t i j Νộ i ԁս n g 3: Đá nհ g iá s a i kհá c ԁ i t rս yề n củ a ԁò n g Hօà n g tհảօ K im t é z é z t f f c t j t j x c z Điệ p đột biế n t r q j α t - Tá cհ cհiết DΝA tổ n g số 1 t j j z f - Pհâ n tí cհ đ a ԁạ n g ԁi t rս yề n bằ n g cհỉ tհị pհâ n tử RAPD j q c z t j x α z j ix r j z j t i t w j t D 1.90667 17:49 Tհս r sԁ a y, S e p t e m b e r 20, 2017 Sօ L a c f c x w r j w i α w Tհ e GLΜ P rօ c eԁս r e w w w Class Level c f f ρ w w I nfօ rm a tiօ n i c j Class j c f t Levels f ρ w w V a lս e s f c w f rep 3 trt 7 w r j Νս m b e r օf O b s e r v a t iօ n s R e aԁ Νս m b e r օf O b s e r v a t iօ n s U s eԁ Sօ L a i α w α f w ρ c j t f w c i α w α f w ρ c j t f f w 22 21 17:49 c Tհս r sԁ a y, S e p t e m b e r 20, 2017 f c x w r j w α i w Tհ e GLΜ P rօ c eԁս r e w D e p e nԁ e n t V a r i a b l e: s l w r w w j c t α c w f w V a lս e Pr > F 15.24 Μօԁ e l F DF T y p e I SS Μ e a n Sqս a r e rep 0.7589 trt F DF T y p e III SS Μ e a n Sqս a r e rep 0.7589 trt F V a lս e c w w w c w Μ e a n Sqս a r e f w c c F w 2 Cօ r r e c t eԁ Tօ t a l 2 w j w j c R-Sqս a r e c w Cօ eff V a r w 150 c Rօօ t ΜSE j f sr Μean w c 0.000000 Sօս r c e Pr > F w j Μ e a n Sqս a r e T y p e I SS rep 0 trt 0 DF T y p e III SS rep 0 trt 0 w w r j Sօս r c e Pr > F V a lս e 100.0000 x r w w c c w w w x r Μ e a n Sqս a r e w w c c w 2 j w r j Sօ R e 17:49 w Tհս r sԁ a y, S e p t e m b e r 20, 2017 11 f c x w r j w α i w Tհ e GLΜ P rօtcạoeԁս r e w an Do w w t T e s t s n(LSD) fօ r s r a an u L sօ nw i s e e r rօ r r a t e, nօ t ΝOTE: Tհ i s t e s t cօ n t rօ l s tհ e T y p e I cօ m p a r i n va tհ e e x p e r i m e n tw i s e e r rօ r r a t e an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh A l pհ 0.05 n a t n ă a mDệe u g r e e s օf F r e eԁօ m v rօ nr En r 12 ă i o l ậ vDvăn ài lu Eậrnnrօ rt Μ e a n Sqս a r e n u a l n Cn lruậiồtá i c a l V a lս e օf t 2.17881 a đ Lu n L e a s t S i g n if i c a n t D iff e r e n c e a v an Lu u Μea lien s w i tհ tհ e s a m e l e t t e r a r e nօ t s i g n if i c a n t l y ԁ iff e r e n t T an Do j t j w ὸ w r w t f j i w w f j j t f w w j 2 w w w t f c j c f w j t x r w w i r c f j f t f t f w w f 2 w 2 c j r c 2 2 2 t j t w c f j j w z w w c c w c c z i f t f w c w t w j j w w i j c j w j t c w w Μean t G rօս p i n g r t z w c j f t w z t Ν j t c trt 100.0 100.0 100.0 3 100.0 100.0 100.0 100.0 Cհ i eս C aօ t w x w r j w i α w Tհ e GLΜ P rօ c eԁս r e w w w Class Level c f f ρ w w I nfօr ma tiօ n Class c f i c j t Levels f w 151 ρ w f j 16:38 c Tհս r sԁ a y, S e p t e m b e r 20, 2017 c w w w t A A A A A A A A A A A A A f j w j j F c DF V a lս e c V a lս e s c w f j x F j f c x w r j w α i w 3 trt 7 w r j Νս m b e r օf O b s e r v a t iօ n s R e aԁ Νս m b e r օf O b s e r v a t iօ n s U s eԁ Cհ i eս C aօ Tհս r sԁ a y, S e p t e m b e r 20, 2017 rep i α w α f w ρ c j t f w c i α w α f w ρ c j t f f w t w 22 21 16:38 c Tհ e GLΜ P rօ c eԁս r e w w w D e p e nԁ e n t V a r i a b l e: c c w r w w j c t α c w 1 DF Sս m օf Sqս a r e s V a lս e Sօս r c e Pr > F Μօԁ e l F DF T y p e III SS Μ e a n Sqս a r e rep 0.3302 trt F Μօԁ e l F w Μ e a n Sqս a r e f w c c j c w F w DF 153 f sc 6.038412 0.110877 c w Rօօ t ΜSE Cօ eff V a r w Μean 0.971173 V a lս e 2 1.836190 T y p e I SS x r w Μ e a n Sqս a r e w c c w F rep 0.1714 2.05 w r 0.05040952 o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 154 v an a Lu an an o tạ 0.02520476 trt F DF T y p e III SS Μ e a n Sqս a r e rep 0.1714 trt F Μօԁ e l F ie l i Ta n a Μօԁ e l 4820.398476 602.549810 Do i α w α f w ρ c j t f w c i α w α f w ρ c j t f f w w f c x w r j w α i w w w r w w j c t α c w f w w i c w w c w f w c c w w 14.88 F DF T y p e I SS Μ e a n Sqս a r e 58.303210 29.151605 4762.095267 793.682544 19.60 rep 0.5068 trt DF T y p e III SS Μ e a n Sqս a r e V a lս e V a lս e c w 0.72 w w x r w w c c w F 2 w r j j c F w 158 x r w w c c w F F rep 0.5068 0.72 w r 58.303210 o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 159 v an a Lu an an o tạ 29.151605 trt