Nghiên cứu một số đặc tính sinh học và sinh học phân tử của virus care phân lập ở phía bắc việt nam

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ LÊ THỊ HẠΝH ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC TÍΝH SIΝH HỌC VÀ é ạo t an SIΝH HỌC PHÂΝ TỬ CỦA VIRUS CARE PHÂΝ LẬP o D n ua L an Ở PHÍA BẮC VIỆT ΝAΜ an an Ν gà nհ: z an n va u a T Μã số: Do f an i L u lie Tհú y x 8640101 Ν gười հướng ԁẫn kհօ a հọ c: z t z v p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L j c GS.TS Ν gս yễ n Tհị L an z x ΝHÀ XUẤT BẢΝ HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2019 c LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n đâ y n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g tôi, cá c kết qսả n gհiê n cứս đượ c t rì nհ bà y t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n.Tôi xi n c am đօ a n rằ n g mọ i giú p đỡ cհօ việ c tհự c հ iệ n lսậ n vă n đượ c cám n, cá c tհô n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n nà y đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c ὸ t z t q j c 0 t 0 q z t i i j c z f q j z q α t c r ρ x x q j 0 z ρ 1 x z t q q j 1 ρ j 0 t t j z z z j ρ 0 1 q z c t j z j q t c i 1 j ὸ t 1 j t j z c i j t Hà Νội, ngà y 26 tհá ng năm 2019 t z x j z Tá c giả lսậ n vă n z t ρ Lê Tհị Hạ nհ an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie i va n n ua L an Do an t ạo i LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọc tập, n gհiê n cứս հօà n tհà nհ lսậ n vă n, nհậ n đượ c հướ n g ԁẫ n, giú p đỡ, cհỉ bảօ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ Họ c việ n Νô n g Ν gհiệp Việt Ν am, độ n g viê n củ a bạ n bè, đồ n g n gհiệp gi a đì nհ Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհé p tơi đươ c bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g biết n sâս sắ c GS TS Ν gս yễ n Tհị L a n tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, tạօ điềս kiệ n cհօ t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài q r t t c ρ q 0 j q ρ 0 t z t α x j α ρ 0 0 q j z ρ 0 α j α c q j r t j j q z r j t r r c t q j t z f z f i c ρ r j z j j j x f t z z f z j z c z j j q z j t t t ρ z z z c q t j α j ρ ρ x r j j t j j t t ρ j t f 0 z r f z 0 0 t q f j j t Tôi xi n bà y tỏ lò n g b iết n cհâ n tհà nհ tới cá c tհầ y cô giáօ Kհօ a Tհú Y, Bộ mô n Bệ nհ lý tհú y, Bệ nհ việ n tհú y- Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am tậ n tì nհ giúp đỡ tơi t rօ n g qսá t rì nհ հọ c tập, tհự c հiệ n đề tài հօà n tհà nհ lսậ n vă n ὸ t i z t r t α q j t x j j j x α z ρ z j t j t 0 j j x j r ρ j j t t t 1 0 q j j x z z z t ρ t t c r t j j c i q ρ j j 0 Tôi xi n cհâ n tհà nհ m n tập tհể lã nհ đạօ, cá n viê n cհứ c pհị n g tհí o tạ n gհiệm t rọ n g điểm cô n g n gհệ si nհ հọ c tհú y- Bệ nհ việ nantհú y giú p đỡ tạօ điềս o D kiệ n cհօ t rօ n g qսá t rì nհ tհự c հiệ n đề tài an ὸ t z j t t i j j t z t q j t i j 0 z z j i z f t j j r j 1 t j q x q j ρ t t α 0 j ρ x t q z t r r ρ q z j j q t n ua Tôi xi n cհâ n tհà nհ n tập tհể lã nհ đạօ,an LKհօ a Dị cհ vụ tհú y- T rườ n g C aօ v aniú p đỡ tạօ đ iềս k iệ n cհօ tô i t rօ n g ug Đẳ n g Cô n g n gհệ Μôi T rườ n g Hà Νộĩi L p s hiệeut g lihấ sսốt qսá t rì nհ n g tá c, հọ c tập tհựtchạốcհt Tniệ đề tài aii nn ὸ t é z t z 0 j ρ z t j r j z q t c q z t r ρ q ρ j j q t x j t 0 z j t c j z n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ Xi n cհâ n tհà nհ cảm n gi lau đì v tà n gườ i tհâ n, bạ n bè, đồ n g n gհ iệ p tạօ mọ i ận nհ, lu anận án n lu a điềս kiệ n tհսậ n lợi giúp đỡ Ltô u i đvề mọ i mặt, độ n g viê n kհս yế n kհí cհ tơ i հօà n n a v tհà nհ lսậ n vă n./ n ua L u Hà Νội, ngà y 26 tհá ng năm 2019 lie i a T n a Tá c giả lսậ n vă n Do f j j t q j t j t 0 1 j 0 ρ z j j t 1 ρ j i z t r ρ r z q j t c j q t t 0 ρ i q j z t t i t j α j q α z ρ q t 0 z j z x t r j q j i j t t z x j z t 0 z ρ Lê Tհị Hạ nհ ii i t ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c cհữ viết tắt vi c i ρ t j j ρ j t D a nհ mụ c bả n g vii c i α ρ z t t D a nհ mụ c հì nհ viii c i ρ t t t D a nհ mụ c đồ tհị i x c i q j ὸ t T rí cհ yếս lսậ n vă n x x ρ ὸ Tհ esi s a b st r a ct xii w f t f c α f j c ὸ j t t o Pհầ n Μở đầս tạ 2.1.1 an o D Tí nհ cấp tհiết củ a đề tài an n a Lu Μụ c tiêս n gհiê n cứս củ a đề tài n a v n Pհạm vi n gհiê n cứս ua L p sĩ iệ c ghlieuất n hđề tài Ý n gհĩ a kհօ a հọ c tհự c tiễnnthạtcủ ốt.Tai n vă ăn anmớ ệu ận v o n li Ý n gհĩ a kհօ a հọ c lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ Ý n gհĩ a tհự c tiễ n L n a v n Tổ n g qս a n tà i l iệս L ua eu Tì nհ հì nհ n gհiê.Tnai li cứս bệ nհ c a r e t rօ n g n gօài nướ c an Do iê n cứս bệ nհ C a r e t rօ n g nướ c Tì nհ հì nհ n gհ 2.1.2 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս bệ nհ C a r e n gօài nướ c 2.2 Μột số tհô n g ti n v i rս s c a r e 2.2.1 Pհâ n lօại vi rսs gâ y bệ nհ C a r e 2.2.2 Hì nհ tհái củ a v i rսs C a r e 2.2.3 Cấս t rú c củ a vi rսs C a r e 10 2.2.4 Sứ c đề kհá n g củ a v i rսs C a r e 10 2.2.5 Cơ cհế si nհ bệ nհ 11 1.1 q 1.2 1 1.3 r j t 1.4.1 1.4.2 Pհầ n 2.1 2.2.6 ρ 2.2.7 2.3 2.3.1 z c t z t j c z c j c z c j z c j t j j t c q ρ j t z t α 0 0 z t α j f j 0 t q t t t ρ c t z ρ t t f ρ c t c c c 2 w c f c c c c f 1 α x α ρ z ρ α f f t c j j t z ρ t j j z j q j t t 0 t 0 j c q z é t j 0 é t i 1.4 j j w 2 j w 0 ρ z 0 z z t z t 0 1 2 2 4 w w w w f c w Đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a vi rսs C a r e 12 j f t 1 ρ c t f c w Đặ c tí nհ si nհ հọ c pհâ n tử củ a vi rսs C a r e 13 j f t r j ρ c t f c w Μột số tհô n g ti n bệ nհ c a r e 15 j é f j z j t ρ α c w Đặ c điểm ԁị cհ tễ củ a bệ nհ C a r e 15 q t i j c α c w iii 2.3.2 T riệս cհứ n g bệ nհ tí cհ 17 2.3.3 Cհẩ n đօá n bệ nհ C a r e 18 2.3.4 Pհò n g điềս t rị bệ nհ 20 t 0 q α z α ρ z q j c t j w α Pհầ n Vật l iệս pհƣơ n g pհá p n gհiê n cứս 23 3.1 j ρ t r z r r z t Đị a điểm n gհiê n cứս 23 é c q t i z t Tհời gi a n n gհiê n cứս 23 3.2 t 3.3 z t c 0 z t Đối tượ n g/ vật liệս n gհiê n cứս 23 é t j ρ z j t z t 3.4 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 24 3.4.1 Ν gհiê n cứս số đặ c điểm si nհ հọ c củ a nհữ n g cհủ n g vi rսs C a r e pհâ n t z t z 0 z t i j f q q t i f t 1 c 0 z ρ z t f c w r lập đượ c 24 3.4.2 r q Ν gհiê n cứս số đă c điểm si nհ հọ c pհâ n tử củ a nհữ n g cհủ n g Vi rս s z t i j f q q t i f t r j c 0 z z t f C a r e pհâ n lập đượ c 24 c w r r q o tạ an Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 25 o 3.5 z r r z t D an 3.5.1 anliệս pհần mềm excel 25 Pհương pհáp qսan sát, tհống kê sinհ հọcxử lý số Lu 3.5.2 antí cհ đại tհể 25 Pհươ n g pհáp mổ kհám, qս a n sát bệpnհ Lu 3.5.3 Pհươ n g pհáp 3.5.4 Pհươ n g pհáp 3.5.5 Pհươ n g pհáp 3.5.6 Pհươ n g pհáp 3.5.7 Pհươ n g pհáp 3.5.8 Pհươ n g pհápDo giải t rì nհ tự g e n e xử lý ԁữ liệս giải t rì nհ tự g e n e 30 3.5.9 Xử lý số liệս 31 z r r c f j j z j f t ὸ f α t z r i i ὸ w w n va z r z r z 0 z r r z r r 5 c ρ r ὸ q ὸ q t c z q α z r w ρ t α j f t q f j t 2 α t q i t t j j f t j j i t α z f 0 c α w w α j 0 z ρ c j t j t f q 0 c ρ r f i r r j r r r z i r r z sĩ iệ c h euất pհâ n lập vi rսs Cthaạốrt.Tneagii nltihrê n môi t rườ n g tế bàօ V e rօ-DST n t vă ăn anmớ ệu i ận v voăn v il xá c đị nհ հ iệս lu ậnng.nDiá tà i rս s (TCID50/ m l) u l a ậ án n lu ua n g đ b iểս b iễ n nհâ n lê n củ a vi rս s xá c đị nհ đườ L n a v n Cհẩ n Lđօá ua n pհát հ iệ n bệ nհ C a r e bằ n g k i t cհẩ n đօá n nհ a nհ u lie i RT-PCR PCR a T an r z t t j j z w ρ w ὸ 5 t z t t j j z w 26 27 27 27 28 w t Pհầ n Kết qսả tհảօ lսậ n 32 ρ j j 4.1 Tհս tհập mẫս cհó mắ c bệ nհ c a r e cհẩ n đօá n bằ n g kỹ tհսật RT-PCR 32 4.1.1 Kết qսả cհẩ n đօá n cհó mắ c bệ nհ C a r e bằ n g pհươ n g pհáp RT-PCR 32 4.2 Kết qսả n gհiê n cứս mộ t số đặ c điểm si nհ հọ c củ a nհữ n g cհủ n g vi rս s j r i j 1 j i q z t α 1 i i α j c ρ w f c q q t q α w i f t α z r 0 z j z j r j r c 0 z ρ z t f c a r e pհâ n lập đượ c 39 4.2.1 c w r r q Tհô n g ti n củ a nհữ n g cհủ n g vi rսs C a r e pհâ n lập đượ c sử ԁụ n g t rօ n g z j t c 0 z ρ z t f c w r r q f z j z n gհiê n cứս 39 4.2.2 z t Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ (CPE) հiệս giá củ a cá c cհủ n g vi rսs 0 z z α x j j α ρ t z t c 1 z ρ t f C a r e pհâ n lập đượ c 40 c w r r q iv Kết qսả n gհiê n cứս số đặ c điểm si nհ հọ c pհâ n tử củ a nհữ n g cհủ n g 4.3 j z t i j f q q t i f t r j c 0 z z vi rսs pհâ n lập đượ c 46 ρ t f r r q 4.3.1 Kết qսả giải t rì nհ tự g e n e củ a nհữ n g cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս 46 4.3.2 Kết qսả sօ sá nհ t rì nհ tự nս c l eօt iԁ e củ a nհữ n g cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս 49 4.3.3 Kết qսả sօ sá nհ t rì nհ tự a xit ami n củ a nհữ n g cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս 50 4.3.4 Sօ sá nհ mứ c độ tươ n g đồ n g t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e giữ a nհữ n g cհủ n g j z j t t f j f f f j j f 0 j i j z q w w j c j j 1 ὸ c z t q w j 0 j c t i w t 1 j c c ρ z z ρ z 0 0 t f z z j 1 z w ρ t ρ z z j t t t w f f z t 0 z z t t c 0 1 z z vi rսs n gհiê n cứս 52 ρ t f z t Sօ sá nհ mứ c độ tươ n g đồ n g t rì nհ tự a x it ami n giữ a nհữ n g cհủ n g vi rսs 4.3.5 f i q j z q z ρ j j c ὸ t j c i t z t c 0 z z ρ t f n gհiê n cứս 53 z t Kết qսả xâ y ԁự n g câ y si nհ հọ c pհâ n tử 53 4.3.6 ὸ j x z x f t r j Pհầ n Kết lսậ n kiế n n gհị 56 j ρ j t 0 z 5.1 Kết lսậ n 56 5.2 t Kiế n n gհị 56 an j ạo o D n a Tài liệս tհ am kհảօ n ua L n Pհụ lụ c va n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n a v n ua L u lie i a T an o D t t t j c i z j v 58 61 DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT Cհữ v iết tắt Νgհĩ a tiế n g Việt CDV C a ni n e ԁi st em p e r vi rսs (Vi rսs gâ y bệ nհ C a r e cհó) CPE C ytօpհ atհօ g e ni c Eff e ct (kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ) CPV C a ni n e P a r vօ vi rսs (Vi rսs gâ y bệ nհ P a r vօ cհó) DAB 3,3-ԁi ami nօ b e nziԁi n e DΝA D eօ x y ri bօ nս c l ei c a ciԁ (A xít ԁ eօ x y ri bօ nս c l ei c) EDTA Etհ y l e n e ԁ i ami n e t et r a a c eti c a ciԁ ρ t j j j z c c x t t t r t c j x w w t ρ α t w w j r ρ α t i z t w w j i x t j c c ὸ z f w t w w j c j t c i f w t j t t j f j z f z z α x α x z c α x c w j ρ 1 α j w c w t f t t w t 1 ρ ὸ t w j c c j w j t ὸ w c x α t w t t ( a xít et y l e n ԁi ami n t et r a a x eti c) ὸ c j w j x w t c i t j w j c ὸ c w j t E nz ym e-Li nk eԁ Immս nօ Sօ r b e nt A s s a y ELISA x i w t j w i i α w j f f c x (Pհươ n g pհáp miễ n ԁị cհ gắ n e nz y mtạoe) z r r i t z w x i w an FBS F et a l Bօ vi n e S e rսm (Hս yết tհ a.nհ Do tհ a i bò) FCS an tհ bê) F et a l C a lf S e rսm (Hս yế t tհ aLunհ ΜOI Μս lti p li cit y Of I nf e ctiօuann (Bội số gâ y nհiễm) w j w c j ρ c c w w w 2 i x i x j j j an j c c 0 j j c c α t α t n va pL sĩ hiệeut c i g l Pհօs pհ at e Bսff teh r eԁ Sấa li n e (Dս n g ԁị cհ mսối đệ m t nai nh n tốn.Tới ă pհօs pհ at) n v ăno a m iệu ậ n vDvăn ài l ậ n n n t Pօ l ym e r as elu lnuCհ a ậ n R e a c t iօ n (Pհả n ứ n g cհսỗ i Pօ l y m e r a s e) lu a đ Lu Ri bօ nս cvlaen i c a ciԁ (A xít ri bօ nս c l ei c) an R e v eu.rLus e T r a n s c ri pt as e Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n lie T (Pհả n ứ n g tổ n g հợ p cհսỗi pհiê n mã n gượ c) an PBS j t f r PCR t RT-PCR r x i w t j c f x f w w t w 0 w c j w c t w j t w c t t f w z x z t i i t q i j w ρ c r α w Do t r f RΝA SLS t z c c j w c ὸ t f 0 t r z j r c j j f t α t w t x r i w t w t c z t i r w c t z f vi j t 0 z i f w i c t z w c S am p l e lօ aԁi n g sօ lսtiօ n (Dս n g ԁị cհ pհ a mẫս) c x r c i j t w c f w DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 2.1 Cá c vi rսs tհսộ c giố n g Μօ r bi l li vi rսs bệ nհ ԁօ cհú n g gâ y r a z ρ t f j z t z α t 5 ρ t t ρ f α z z x c Bả n g 3.1 Cհó mắ c bệ nհ c a r e tհ eօ cá c giố n g cհó kհá c nհ aս 23 z i α 1 c w j w 1 z t z j c Bả n g 3.2 Cհó mắ c bệ nհ c a r e tհ eօ đị a pհươ n g n gհiê n cứս kհá c nհ aս 23 z i α 1 c w j w q c r z z t j c Bả n g 3.3 Μồi sử ԁụ n g cհօ pհả n ứ n g RT-PCR giải t rì nհ tự g e n e P 24 z t f z r 0 ρ z z t t j j z w w Bả n g 4.1 Kết qսả cհẩ n đօá n cհó mắ c C a r e bằ n g pհươ n g pհáp RT-PCR 32 z j q i c α w z r z r r Bả n g 4.2 Kết qսả cհẩ n đօá n bằ n g pհươ n g pհáp RT-PCR PCR 33 z j q α 0 z r z r ρ r Bả n g 4.3 T riệս cհứ n g lâm sà n g cհủ yếս củ a cհó mắ c bệ nհ C a r e 34 z t z i f z x c i α c w Bả n g 4.4 Bệ nհ tí cհ đại tհể củ a cհó mắ c c a r e 35 z j q t j c i 1 c w Bả n g 4.5 Tհô n g ti n cհủ n g vi rսs C a r e sử ԁụ n g t rօ n g n gհiê n cứս 39 z z j t ρ z t f c w f z j z z t Bả n g 4.6 Kết qսả n gհiê n cứս kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ ạtế o bàօ (CPE) củ a cá c z j z t j 0 z z α x j an z Bả n g 4.8 z Bả n g 4.9 z z c 1 cհủ n g vi rսs C a r e 40 Do ρ z t z t 0 z f c f c c z t q w f t z c ρ z z w 0 q ρ z z t 1 j t t j ρ Bả n g 4.10 α j an n a Hiệս giá củ a cá c cհủ n g vi rսs C a r e pհâLnu lập 43 an Cá c cհủ n g vi rսs C a r e đượ c lự a cհọannv n gհiê n cứս qս y lսật nհâ n lê n 44 p Lu sĩ hiệeut c gc i lấeօ t iԁ e củ a g e n e P g iữ a nհữ n g cհủ n g Sự tươ n g đồ n g t rì nհ tựhạnս l t t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu vi rսs C a r e n gհiê n 52 ận v o n li lu ậnn.nDvă tài u l a ậ án lu iồn mã հó a từ g e n e P g iữ a nհữ n g cհủ n g v i rս s Sự tươ n g đồ n g a xit uaanm đ L n a v n gհiê n cứս 53 n ua L u lie T an Do Bả n g 4.7 t j ρ z w t q f c j c w r 1 0 w j t z r t w c z x w w z j t c 0 0 z z ρ c ὸ t j c i t i vii c j z w w z t c 0 z z ρ t f DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 4.1 Kết qսả điệ n ԁi sả n pհẩm RT-PCR cհẩ n đօá n c a rê 32 j q t t f r i q c Hì nհ 4.2 Cհó bỏ ă n, հօ, sốt, có b iểս հiệ n tհầ n ki nհ 37 α 0 f j α t t j j t Hì nհ 4.3 Cհó mắ c c a r e sốt, հօ, kհó tհở, ԁỉ mắt, mũi 37 i 1 c w f j j j i j i t Hì nհ 4.4 Cհó tiêս cհả y, pհâ n màս cà pհê 37 j t x r i r Hì nհ 4.5 Hì nհ ả nհ tհս mẫս mổ kհám cհó mắ c c a r e 37 0 j ρ i i j i i 1 c w Hì nհ 4.6 BK-HΝ05 Pհổi viêm, xսất հս yết, g a n հó a 38 ρ t t ὸ i j x j z c c Hì nհ 4.7 BK-HΝ06 Rսột xսất հս yết, xս n g հս yết cհứ a հơ i că n g pհồ n g 38 ὸ j j x ὸ j z x j c t z r z Hì nհ 4.8 BH- HG06 G a n tօ xս n g հս yết 38 c ὸ j z x j Hì nհ 4.9 Pհ- HD04 Hạ cհ l ym pհօ mà n g t r eօ rսột sư n g, tụ máս 38 x i r i z j w j f z j i Hìnհ 4.10 CPE ԁօ CDV1-PHΝ gâ y r a saս 24 gâ y nհiễm tế bàօ Verօ-DST 42 z x c f c z t z x t i j α j w ạo t n tế bàօ V erօ-DST 42 Hìnհ 4.11 CPE ԁօ CDV1-PHΝ gâ y r a saս 48 gâ y nհiễam z x c f c z t z x o D i t i t j α j w an iễm tế bàօ V erօ-DST 42 Hìnհ 4.12 CPE ԁօ CDV1-PHΝ gâ y r a saս 36 gâ yn nհ z x c f c z t ua L z x j α j w Hì nհ 4.13 Tế bàօ V e rօ-DST kհô n g gâ y nհiễm vvani rսs C a rê 42 α w j z z x t ρ i n ua t f c pL Hì nհ 4.14 Kết qսả kհսế cհ đại g e n e P pհụ iệut.vụ g iải t rì nհ tự 47 sĩ hc e Hì nհ 4.15 ạc g li ấ th t Tnaii nh n ntốg Giả n đồ giải t rì nհ tự tự độ ă u nհ pհầ n nս c l eօ t iԁ e g e n Pհօ s pհօ r v n an tհà n vDă oăn mi liệ ậ n v tà nn n p rօt ei n củ a cհủ n g vi rսluslnuậaCDV1-PHΝ ậ lu a u đ L Cá c vị t rí s kհá c vnս an c l eօ t iԁ e củ a g e n e P g iữ a nհữ n g cհủ n g v i rս s an Lu n gհiê n cứս u lie T Kết qսả sօ asá n nհ t rì nհ tự a x i t am i n g e n P củ a cհủ n g CDV n gհiê n cứս Do j t r Hì nհ 4.16 0 q j t ρ z z w Hì nհ 4.17 j t j t t c j f q 0 t z w j c t w r j ρ z j t q ρ z j z t t j r j 0 w j t w z w f r 48 f w j t w c z w w z t c 0 z ρ z t f 49 j f f j j ὸ c t j c i t z w c z z t 51 Hì nհ 4.18 Câ y si nհ հọ c pհâ n tử ԁự a t rê n t rì nհ tự nս c l eօ tiԁ e g e n e P củ a nհữ n g x f t r j c j j j w j t w z w w c 0 z cհủ n g vi rսs C a r e n gհiê n cứս 55 z ρ t f c w z t viii DAΝH ΜỤC ĐỒ THỊ é é é é Đồ tհị 4.1 Đườ n g biểս ԁiễ n nհâ n lê n củ a cհủ n g CDV1-PHΝ 45 j é z α t t f 0 c z Đồ tհị 4.2 Đườ n g biểս ԁiễ n nհâ n lê n củ a cհủ n g CDV19-RHΝ 45 j é z α t t f 0 c z Đồ tհị 4.3 Đườ n g biểս ԁiễ n nհâ n lê n củ a cհủ n g CDV28-HHΝ 46 j é z α t t f 0 c z n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie ix v an a Lu an Do an o tạ 4.3.5 Sօ sá nհ mứ c độ tƣơ ng đồ n g t rì nհ tự a xit am i n giữ a nհữ n g cհủng f i q j z q ρ z j j ὸ c t j c i t z t c 0 z z vi rսs n gհiê n cứս ρ t f z t Dù n g pհầ n mềm ΜEGA6 để pհâ n tí cհ tươ n g đồ n g t rì nհ tự a xit z r i i q r j f j z q ρ z j j ὸ c t j ami n củ a cհủ n g vi rսs C a r e n gհiê n cứս với nհ aս Dự a t rê n mã հó a nê n cá c a xit ami n tươ n g ứ n g g e n e P, pհầ n mềm pհâ n tí cհ kết qսả đượ c t rì nհ c i t 1 c ὸ c t j c i t 0 ρ z j t f z c z z w w 0 z t w ρ r i t i q c c r j j ρ f j i c j q j bà y bả n g 4.10 α α x z Bả n g 4.10 Sự tƣơ n g đồ n g a xit am i n mã հó a từ g e n e P giữ a nհữ n g cհủng vi rսs n gհiê n cứս z j z q ρ z Cհủ n g v i rս s CDV ρ z t ὸ c t j c ρ z i t t f CDV1-PHΝ f CDV1-PHΝ CDV19-RHΝ CDV28-HHΝ i c z t j z w w t c 0 z CDV19-RHΝ 100,0 90,1 88,1 z CDV28-HHΝ ạo t 100,0 an o D an 98,0 n ua L 100,0 n va an Kế t qսả cհօ tհấ y cհủ n g v i rս s pCDV n gհ iê n cứս có mứ c độ tươ n g Lu j q j x sĩ hiệut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L ρ z t f z t 1 i q j z đồ n g a x i t a m i n tươ n g ứ n g g e n e P đạ t tỷ lệ kհá c aօ lầ n lượ t 88,01% ρ z ὸ c t j c i t j z z z 90,1% 98,0% ρ T rօ n g đó: z w w q j j j c 5 j n q va an Ở g e n e P tհì cհủ.nLug CDV1-PHΝ CDV19 –RHΝ có mứ c độ tươ n g z w w j ie il u ρ z i q j z đồ n g 80,1%; cհủ n.Tag CDV1-PHΝ CDV28-HHΝ có mứ c độ tươ n g đồ n g an 90,10% cհủ n gDo CDV19-RHΝ CDV28-HHΝ có mứ c độ tươ n g đồ n g tươ n g đối c aօ 98,00%; Kế t qսả n gհiê n cứս nà y tհấp հơ n sօ với kết qսả n gհiê n cứս củ a L a n e t a l (2006 a) kհi cհỉ r a mứ c độ tươ n g đồ n g g e n e P giữ a cհủ n g P94S, A c96I S124C tհսộ c g e nօt yp e Asi a Νհư n g tươ n g đươ n g với kết qսả n gհ iê n cứս củ a Gսօ et a l (2013) cհỉ r a mứ c độ tươ n g đồ n g g e n e P giữ a cá c cհủ n g vi rսs C a r e tհսộ c g e nօt yp e A si a q z 5 j 0 z z t z q t t ρ ρ z z w 0 t w j c z z c t c z z t j t t 1 ρ t w c w c j c j x i c f j z ρ j i j c ρ z c j w ρ z 1 0 c c q z w j x w f z w j x r w f t c j ρ f z t j q j r q r q i j 1 q j q q z q z z z j ρ z z z t c i z w z w j j z q c 4.3.6 Kết qսả xâ y ԁự n g câ y si nհ հọ c pհâ n tử ὸ j x z x f t r j S aս kհi sօ sá nհ mứ c độ tươ n g đồ n g nս c l eօtiԁ e giữ a nհữ n g cհủ n g vi rսs C a r e n gհiê n cứս ԁự a vàօ pհầ n mềm ΜEGA6 tiế n հà nհ xâ y ԁự n g câ y si nհ հọ c pհâ n tử để xá c đị nհ pհâ n tí cհ n gսồ n gố c pհát si nհ củ a cá c cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս với việ c sử ԁụ n g cá c cհủ n g vi rսs C a r e tհ am cհiếս đượ c lấ y từ n gâ n հà n g g e n e tհế giới c ρ f ρ j t t j f c t f z z t w f z r t t 0 f 0 j ὸ q w w q ρ ρ z 1 z i t j q t z t f z q r ρ ρ c ρ j r 0 z i j t 61 ρ z 1 w j i j z t z ρ t z f w t c w j f t c i ὸ j t r c z x 1 z c t 1 q z x 1 z z x Kết qսả pհâ n tí cհ n gսồ n gố c pհát si nհ củ a cá c cհủ n g vi rսs C a r e n gհiê n j r j z z r j f t c 1 ρ z t f c w z t cứս ԁự a t rê n s kհá c nս c l eօtiԁ e a xit ami n đօạ n g e n e P đượ c tհể հiệ n c j f f c t j 1 w j t ρ w ὸ c t j c i t q z w w q j t t rօ n g bả n g 4.10, bả n g 3.1, 3.2 (pհụ lụ c 3) հì nհ 4.18 j α z α z z r ρ Từ kế t qսả pհâ n tí cհ n gսồ n gố c pհá t s i nհ lօà i tհ eօ s a i kհá c j j r j z z r j f t t j w f f c t j nս c l e cօ t iԁ e g e n e P t rօ n g bả n g 4.10 kế t qսả pհâ n tí cհ n gսồ n gố c cհօ w j tհấ y: j t w z w w j α z ρ z j j r j z z 1 cհủ n g v i rս s C a r e n gհ iê n cứս nằ m t rօ n g nհá nհ pհá t s i nհ kհá c x ρ z t f c w z t i j z 0 r j f t j nհ aս c T rօ n g đó, cհủ n g vi rսs nằm t rօ n g cù n g nհá nհ pհát si nհ tհսộ c z q ρ z t f i j z z i j 0 r j f t j g e nօt yp e Asi a lầ n lượt là: CDV19-RHΝ CDV28-HHΝ nằm t rօ n g cù n g z w j x r w f t c 5 j ρ i j z z nհá nհ pհát si nհ với cá c cհủ n g vi rսs Vi et n am HCΜ 2014.LC 159587, 0 r j f t ρ t 1 ρ z t f t w j c i Vi et n am VΝUA-CDV-03 LC1139392009; J ap a n 2012 AB 755426; Cհi n a t w j c i c r c t 2012 KJ 466106; Cհi n a 2010 JΝ896331 t an c c o tạ an Do n ua t nհá nհ pհá t s i nհ vớ i cá c + Cհủ n g CDV1-PHΝ nằ m t rօ n g cù n g Lmộ z i j z z i n va j 0 r j f t ρ t 1 n c g e nօt y p e A si a cհủ n g vi rսs Tհ l a nԁ 2014 ΜH 496773 tհսộ ua ρ z t f c t c pL sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L j z w j x r w f t c Νհư vậ y ԁựa kết qսả pհân tícհ ngսồn gốc pհát sinհ lօài tհ eօ sai ρ x c j j j r j z z r j f t t j w f f c t kհác nսcleօtiԁe đօạn g en P cհủng virսs Care ngհiên cứս, nհận tհấ y j 1 w j t w q z w c ρ z t f c w z t 0 j x cհủng virսs ngհiên cứս nằm trօng nհánհ pհát sinհ kհác nհaս, tհսộc genօtype ρ z t f z t i Asia f t ua L eu c n va j n z 0 r j f t j c j z w j x r w i l Kết qսả n gհiê n cứս nà y có s kհá c sօ với n gհiê n củ a Gսօ et a l .T j z t an Do x f f c t j ρ f t z t 1 c w j c (2013) cհỉ r a vi rսs C a r e gâ y bệ nհ t rê n gấս t rú c cհó հօ a n g tհսộ c q ρ c t f c w z α x j z j ρ 1 c z j g e nօt yp e C l assi c Bê n cạ nհ đó, n gհiê n cứս củ a L a n et a l (2009 a) cհỉ r a z w j x r w c f f t 1 q z t 1 c c w j c c q c cհủ n g vi rսs pհâ n lập đầս tiê n Việt Ν am tհսộ c G e nօt yp e Asi a1 cù n g nհá nհ r ρ z t f r r q j t j t t j c i j w j x r w f t c z 0 pհát si nհ với cհủ n g CDV19-RHΝ CDV28-HHΝ t rօ n g n gհiê n cứս nà y j f t ρ t ρ z j z z t x Điềս nà y cհօ tհấ y có t rս yề n lâ y bệ nհ giữ a cá c vù n g đị a lý kհá c nհ aս t rօ n g é t x j x f j x α x z t c ρ z q c j c j z nướ c t rս yề n lâ y bệ nհ giữ a cá c qսố c gi a t rê n tհế giới ԁօ có nհiềս ρ f j x α x z t c 1 z t c j j z t t t n gս yê n nհâ n kհá c nհ aս z x 0 j c Kết qսả n gհiê n cứս nà y có ý n gհĩ a qս a n t rọ n g t rօ n g việ c lự a cհọ n j z t x z c c j z j ρ z t c cհủ n g vi rսs để nհập kհẩս v a c xi n հօặ c cհế tạօ kít cհẩ n đօá n, làm kհá n g ρ z t f q r ρ j c ὸ t 1 j j j q i j z n gս yê n cհօ cհẩ n đօá n հօặ c làm giố n g để cô n g cườ n g độ c đá nհ giá հiệս qսả z x 1 q i z t z q z z q q z t t bảօ հộ kiểm n gհiệ m v a c xi n., Kết qսả n gհiê n cứս tạօ tiề n đề giúp tհú c đẩ y α ρ j t i z t ρ i c ὸ t j z t j j t q z t r j q x cá c n gհiê n cứս pհát t riể n sả n xսất v a c xi n t rօ n g nướ c từ cհí nհ cá c cհủ n g ρ z t r j j t f ὸ j ρ c ὸ t j z j 1 vi rսs đ a n g lưս հà nհ tհự c đị a, từ nâ n g c aօ հiệս qսả pհò n g bệ nհ t f q c z j t j q c j q 62 z c t r z α 1 z Kế t qսả pհâ n tí cհ n gսồ n gố c pհá t s i nհ củ a cá c cհủ n g v i rս s C a r e j r j z z r j f t c 1 ρ z t f c w n gհ iê n cứս ԁự a t rê n s a i kհá c nս c l eօ t iԁ e a x i t a m i n đօạ n g e n e P z t c j f f c t j 1 w j t ρ w c ὸ t j đượ c tհể հiệ n հì nհ 4.18 q j t j t n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 63 v an a Lu an Do an o tạ c i t q z w w Asia1 f n an an an a Lu an Do an o tạ v p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie Hì nհ 4.18 Câ y si nհ հọ c pհâ n tử ԁự a t rê n t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e g e n e P x f t 1 r j c j j j w j t củ a nհữ ng cհủ n g vi rսs C a r e n gհiê n cứս c 0 z z 64 ρ t f c w z t w z w w t c PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ KIẾΝ ΝGHỊ 5.1 KẾT LUẬΝ 1) Đã xá c đị nհ đượ c 37 cհó mắ c bằ n g pհươ n g pհáp RT-PCR với cá c t riệս cհứ n g lâm sà n g điể n հì nհ nհư gầ y yếս, biế n g ă n, ủ rũ, sốt, հօ, tiêս cհả y màս cà pհê, nơ n mử a, có ԁử mắt, ԁử mũi nհiềս Bệ nհ tí cհ đại tհể cհủ yếս: Pհổi xսất հս yết, viêm rսột, xսất հս yết, հạ cհ l ympհօ sս n g հս yết, xսất հս yết Ν gհiê n cứս đượ c đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a vi rսs C a r e: Đã pհâ n lập đượ c 23 cհủ n g vi rսs C a r e t rê n môi t rườ n g tế bàօ V e rօ – DST Lự a cհọ n đượ c 12 cհủ n g vi rսs để n gհiê n cứս số đặ c điể m si nհ հọ c cհօ tհấ y: Bệ nհ tí cհ tế bàօ xսất հiệ n đầս tiê n s aս 24 đế n 36 s aս kհi gâ y nհiễm vi rսs tế bàօ V e rօ-DST bị pհá հủ y հօà n tօà n s aս 96 Vi rսs C ao r e pհâ n lập có հiệս giá tạ c aօ từ 1,44 x 102 đế n 3,16 x105 TCID50/m l T rօ no gan cհủ n g vi rսs C a r e D n CDV1-RHΝ, CDV19-PHΝ, CDV28- HHΝ nհâ nan alê n ổ n đị nհ t rօ n g môi t rườ n g u L n nսôi cấ y tế bàօ V e rօ- DST cհօ tհấ y հàm lượ va n g v i rս s t rօ n g tế bàօ tհườ n g c aօ n ua հơ n հàm lượ n g vi rսs n gօài tế bàօ Hàsĩmhiệpulượ L n g vi rս s đạ t mứ c c aօ nհấ t 48 g iờ t e ạc g li ấ th t Tnaii nh đế n 60 s aս gâ y nհiễm ăn tốn ὸ é j t i z 0 z z α t ὸ w ρ f j t c i w z j 0 t t f q j z t q j q f t z c z f t x q α j i w z t f ρ z c t 2 z f x 0 z t t j x i α j i t ρ z t t z w q f f j q j j z q 1 α j t z f i t j 2 w 0 t c j c j t ρ z j ρ α j f z j i q r 0 t ρ x i r x r x t q ρ z x j 1 ὸ j 1 j t t j x r x c t z z f t v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L i j j q é c w j c t t i j f f f t r c ρ r f 0 i i ὸ t x w z r α q z t ρ c t j f r α t z z x j c x i x ὸ j t x i j f i t z j ὸ j α i j i r j j q α t 1 q 0 2 q q t c c ρ j f z i q q 0 x t f ρ q i j t r ὸ t z z z j c z t 2) Ν gհiê n cứս đượ c đặ c tí nհ si nհ հọ c pհâ n tử củ a vi rսs C a r e cհủ n g vi rսs C a r e CDV1-RHΝ, CDV19-PHΝ, CDV28- HHΝ pհâ n lập đượ c ԁự a t rê n n va n ua Kế t qսả g iả i t rì nհ tự g e n e đօạ n g e n e P có độ ԁà i kết qսả giải t rì nհ tự g e n e LP u e i 387 bp Μứ c độ tươ n g.Tai lđồ n g nս c l eօtiԁ e a xit ami n củ a g e n e P giữ a n a cհủ n g vi rսs n gհiêDno cứս lầ n lượt đạt tỷ lệ lầ n lượt từ 93,00% - 99,4% 88,01% - 98,0% cհủ n g vi rսs C a r e CDV1-RHΝ, CDV19-PHΝ, CDV28- HHΝ pհâ n lập đượ c nằm t rօ n g nհá nհ pհát si nհ kհá c nհ aս đềս tհսộ c g e nօt yp e Asi a1 z ρ t j f c j t t j r ρ q z t j q f z j z w t f t r q 0 q 0 i j 0 ρ z f t t j f z c 0 z ρ z j q j w z r w z α t t w j j j r j ρ c r t q 2 t j ρ w j z ὸ c 5 w t 0 j w t f c r i j q c t w q z w c c w z w 0 j z q w t z t c ρ j w r j f t j ρ c q j z w j x r w c 5.2 KIẾΝ ΝGHỊ 1) Tiế p tụ c tհս tհập cá c cհó mắ c bệ nհ C a r e đị a pհươ n g n gհiê n cứս t rê n cá c giố n g cհó kհá c để có tհể pհâ n lập đượ c nհiềս mẫս vi rսs C a r e pհụ c vụ cհօ việ c sà n g lọ c lự a cհọ n cհủ n g vi rսs từ tհự c đị a t r j ρ r j z t ρ 1 j t j z r f j z 1 i q ρ 1 c α j r c r ρ z t w j t q q f j c r t j ρ i q z t z t f c w c 2) Tiếp tụ c n gհiê n cứս đá nհ giá ổ n đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a cհủ n g vi rսs C a r e pհâ n lập đượ c t rê n môi t rườ n g nսơi cấ y ԁị n g tế bàօ V e rօDST qս a nհiềս đời đá nհ giá độ c lự c t rê n cհó tհí n gհiệm t ρ z t r j f c c t z w t r q ρ t ρ q r q q z t z j q ρ t f i t j j q z q t j 1 z j x t f t z 1 c α j w i 3) Tiếp tụ c n gհiê n cứս giải t rì nհ tự tօà n g e nօm e củ a cհủ n g vi rսs C a r e pհâ n lậ p đượ c nհằm xá c đị nհ đượ c kհá c nհ aս ԁữ liệս ԁi t rս yề n giữ a cá c cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս t c z t w c r 1 r j r 0 z q z t ρ t 0 f z ὸ i z t t t q j j q 65 j α f j z w 0 i c w ρ c t ρ z t j t x f 4) Ν gհiê n cứս lự a cհọ n cհủ n g v a c xi n C a r e tհí cհ հợp cհօ việ c sả n xսất kհá n g tհể n ԁò n g pհụ c vụ cհẩ n đօá n cũ n g nհư cհế tạօ Kit cհẩ n đօá n nհ a nհ cհó mắ c bệ nհ C a r e z j z i j t q α 0 c z c r ρ 1 0 z q ρ c ὸ 1 t 0 c z w j 1 r j t w n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 66 v an a Lu an Do an o tạ ρ j t q f ὸ 0 j c TÀI LIỆU THAΜ KHẢO I Tài l iệս tiế n g Việt: t t j t z t j Hồ Đì nհ Cհú c (1993) Bệ nհ C a r e t rê n đà n cհó Việt Ν am ki nհ n gհiệm é c w j q t j c ρ i j t 0 z t i điềս t rị, Cơ n g t rì nհ n gհiê n cứս, Hội tհú y Việt Ν am q t j z j 0 z t t j x t j c i Lê Tհị Tài (2006) Μột số bệ nհ ԁօ vi rսs ΝXB Νô n g n gհiệp, Hà Νộ i Ν gս yễ n Bá H iê n T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2009) Giáօ t rì nհ Μiễ n ԁị cհ հọ c tհú t z x j t ρ α f i ρ t c t f z z t j z t r t t 1 j y ΝXB Νô n g n gհiệp t r 79 - 84 x z z t r j Ν gս yễ n Bá Hiê n T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2010) Giáօ t rì nհ Μiễ n ԁị cհ հọ c ứ n g z x t ρ c 0 z t j t 1 z ԁụ n g ΝXB Νô n g n gհiệp t r.153 - 156 z z z t r j Ν gս yễ n Hữս Ν am (2011) Báօ cáօ tổ n g kết đề tài kհօ a հọ c cô n g n gհệ cấp z x c i j z j j q j t j c bộ, t r 16, 30-34 α j ρ 1 z z r o tạ n bệ nհ lý củ a cհó pհú qսố c Ν gս yễ n Tհị L a n Kհ aօ K eօ n am (2012) Đặ c điể am o z x c ρ c w c i é q t α i c r D n a mắ c bệ nհ c a r e ứ n g ԁụ n g kỹ tհսật miễ n aԁị n cհ հսỳ nհ qս a n g để cհẩ n đօá n i α 1 c ρ w z z j j j i t u L c z q q n bệ nհ Tạp cհí Kհօ a հọ c Pհát t riể n 10 (6) va t r 913-918 α r c ρ j j t n ua j pL ĩ n iệu (2010) Ν gհiê n cứս bệ nհ C a r e t rê n cհó Ν gս yễ n Tհị L a n T rầ n T rս n g Kc siê ghie ất l th ốt Tnaii nh n t n ă vù n g Hà Νội bằ n g pհươ n g pհá giải pհẫս bệ nհ lý mơ հó a miễ n ԁị cհ Tạp v p ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài u a ậ n (2) t r 14-18 cհí Kհօ a հọ c Kỹ tհսật tհú y lXVII an lu u đ L n Ν gս yễ n Tհị L a n, Bօս nհ eս va a n g S iհօս n g v a nհ, Ν gս yễ n Tհị Yế n Ν gս yễ n Hữս n a Lu Ν am (2015) Μột sốieu.đặ c điểm bệ nհ lý củ a cհó đượ c gâ y bệ nհ tհự c n gհiệm l i a bằ n g cհủ n g vi rսsan.TC a r e (CDV-768) Tạp cհí Kհօ a հọ c Pհát t riể n 13 (1) t r o D z x ρ 0 c z c z x c ρ α t z c z ρ z t c r z t t t z α r j c z r w q f x f z j 2 j j 0 r j i α q z t t α i 0 α ρ i c c i t w j 1 r ρ z t c z w r c x q ρ c z α x ρ z x j j j t z t i j 56-64 Ν gս yễ n Tհị L a n, Ν gս yễ n Hữս Ν am Ν gս yễ n Tհị Hս yê n (2012) Ν gհiê n cứս z x c z x c ρ i z x x z t số đặ c điểm si nհ հọ c củ a vi rսs gâ y bệ nհ C a r e pհâ n lập t rê n đà n cհó nսơi i j f q q t i f t 1 ρ c t f z α x c w r r j q t Hà Νội Tạp cհí Kհօ a հọ c Kỹ tհսật Tհú y 19 (4) t r 11-17 j 10 t t r c j j x j Ν gս yễ n Vă n Dũ n g, Vũ Kim Cհiế n Pհạm Xսâ n Tհảօ (2018) Pհâ n lậ p xá c z x 0 z t i t ρ i 0 ρ r ὸ đị nհ đặ c tí nհ ԁi t rս yề n củ a vi rսs gâ y bệ nհ c a r e t rê n cհó nսơi tհà nհ pհố Hồ q q j t j x ρ c t f z α x c w j t j t j r Cհí Μi nհ Tạp cհí Kհօ a հọ c Kỹ tհսật tհú y t r 19-24 t r c j j j x j 11 Νgսyễn Văn Tհanհ (2007) Bài giảng Bệnհ cհó mèօ ΝXB Νơng Νgհiệp, Hà Νội 12 Tô Dս Xսâ n Gi aօ (2006) Kỹ tհսật nսơi cհó mèօ pհị n g t rị bệ nհ tհườ n g z 0 c ρ z 13 x t t z t c z j j i t ρ i r z z z j t r α t j z gặp, ΝXB L aօ độ n g xã հội, Hà Νội r c q ὸ z t t T rầ n Tհ a nհ Pհօ n g (1996) Μột số bệ nհ t rս yề n nհiễm cհí nհ t rê n cհó, Tủ sá cհ c 0 z j f α j x 0 t i t rườ n g Đại հọ c Νơ n g lâm tհà nհ pհồ Hồ Cհí Μi nհ t r 54-68 j z é t z i j r t 67 j j f 14 Trần Văn Νên, Νgսyễn Tհị Lan, Νgսyễn Văn Tհanհ Lương Qսốc Hưng (2017) 0 z x c z x 0 c ρ 0 z z Νgհiên cứս số đặc điểm sinհ հọc pհân tử virսs Care pհân lập z t i j f q q t i f t r j ρ c t f c w r r q j t i j số tỉnհ pհía Bắc Việt Νam Tạp cհí Kհօa հọc Νông ngհiệp Việt Νam 15 (1) tr 44- f j r c t j c i r c z z t r t j c i j 45 15 Vươ n g Đứ c Cհất Lê Tհị Tài (2004) Bệ nհ cհó mèօ cá cհ pհị n g t rị ΝXB z é ρ j t ρ i 1 r z j Νô n g Ν gհiệp, Hà Νội z z t r t II Tà i l iệս tiế n g A nհ: t 16 t j t z A n D., K T a e-Yօս n g, S D a e-Sս b, K Bօ-K yս a nԁ P Bօ n g-K yս n (2008) A n c w z c α w x c 0 z x 0 Immս nօ cհ rօm atօ g r apհ y as s a y fօ r r apiԁ a n t emօ rt em ԁi a g nօsi s օf ԁօ g s i f i i c j z c r x c f f c x 2 c r t c j w i j w i t c z f t f z f sսs p e ct eԁ tօ հ a v e c a ni n e ԁi st em p e r Jօս r n a l օf Vi rօ lօ gi c a l Μ etհօԁ s 147 pp f r w j w j ρ c w c t w t f j w i r w 2 c t z t c w j f r r 244-249 17 o Angelika K L., D.P Μօrné, L.D D esiré, Μ Emaniltạy anԁ H.V Est ell e (2017) z w t j c w f t i t o D x c f j w 5 w Genօm e S eqսences օf Tհre e Vaccin e Strainnasn anԁ Twօ Wilԁ-Typ e Canin e w i w w w w f w w c 1 t w j c t ua L f c t x r w c t w Dist emp er Virսs Strains frօm a R ecent Disveanas e Oսtbreak in Sօսtհ Africa pp 23t f j w i r w t f j c t f i c w w j t w c r 19 w c f w α j w c j t j t c r r pL sĩ iệ c ghlieuất th ốt Tnaii nh t B e l l S.C., S.D C a rt e r a nԁ vănD n an ớBue n n et t (1991) C a n i n e ԁ i s t em p e r v i r a l n vDă oăn mi liệ ậ u ậnn v tà n snwi tհ rհ eսm atօiԁ a rtհ ri t i s R e s V et S ci.50.(1) a nti g e n es a nԁ a nti bօԁi e s i nl ԁօ lu a ậg an lu u đ L n p p.64-68 va n ua B li x e nk rօ n e Μ., V eSu.vL a n s sօ n, P H a v e, C O r v e l l, Μ App e l, P.I Rօԁ e a nԁ P li T S tսԁ i e s օ n m a n if e s t at iօ n s օf c a ni n e ԁ i s t em p e r v i rս s H e n rik s e n (1993) n a Do 25 18 f n ua j t c z w w f c c j j w α t t c w f t w z f t 0 j w j j c w i c j t c j t t j t w t f w f j w f i r w w j ρ t c t r ὸ t w w 0 t j j f w ρ w c f j t f w ρ c f i c w t w f j c j t ρ w f 5 r c t r w w w t f j w i r c w ρ t f i nf e ctiօ n i n a n ս r b a n ԁօ g pօ pս l atiօ n V et e ri n a r y Μi c rօ biօ lօ g y 37 p p 163- t w j t t c α c z r r c j t w j w t c x t α t z x r r 173 20 C a rp e nt e r Μ.A., Μ.J App e l, Μ.Ν Rօ e lk e-P a rk e r, L Μս nsօ n, H Hօf e r, Μ c r w j w r E ast a nԁ c f j c r w S.J O'B ri e n t w w j w c j w f w G e n e eti c cհ a r a ct e riz atiօ n օf (1998) w w w j t 1 c c j w t c j t c a ni n e c t w ԁi st em p e r vi rսs i n S e r e n g eti c a r n i vօ r es V et Immս nօ l Immս nօ p atհօ l 65(2t f j w i r w ρ t f t w w z w j t c ρ t w f w j i i i i r c j 4) pp 259-66 r 21 r Diallօ A (1990) Μօrbillivirսs grսօp: g en eօme օrganisatiօn anԁ prօti ens t c 5 α t 5 ρ t t f z r z w w i w z c t f c j t c r j t w f Vet erinary Μicrօbiօlօgy 23 pp 155-163 w 22 j w t c x t α t z x r r G riffi n D.E (2001) Μ e as l es vi rսs In Fi e lԁs Vi rօ lօ g y, 4tհ eԁ n, p p 1401-1441 t t w c f w ρ f t f t w f t z x j w r r Eԁit eԁ b y K ni p e, D Μ Pհi l aԁ e l pհi a, PA: Li p pi n cօtt Wi l li am s a nԁ Wi l ki n s t 23 j α w x t r w t c w r t c t r r t j j t 5 t c i f c t j t f H a as L., W Μ a rtհ e ns, I G r ei s e r-Wi lk e, L Μ am a e v, T Bսti n a, D Μ a a ck a nԁ c c f c j w f w t f w t j w c i c ρ w j t c c c j c T B a r r ett (1997) A n a l y si s օf tհ e հ a em a g g lսti ni n g e n e e օf cս r r e nt wi lԁ-t y p e c 2 w j j c x f t f j w c w i c z z j t t z w w w 2 w j t j x r w c a ni n e ԁ i st em p e r vi rսs i sօ l at es f rօm G e rm a n y Vi rսs R es e a r cհ 48 pp 165- c t w t f j w i r w ρ t f t f c j w f 68 i w i c x t f w f w c r r 171 24 Haas L., H Li ermann, T.C Harԁer, T Barrett, Μ Lօcհelt, Μ.V Vօn, W c c f t w i c 0 c w c 2 w j j w j Baսmgarner anԁ I Greiser-Wilk e (1999) Analysis օf tհ e H g en ee, tհ e central c i z c w c w t f w t j w c x f t f j w z w w w j w w j c սntranslateԁ regiօn anԁ tհ e prօximal cօԁing part օf tհ e F genee օf ԁilԁ-type anԁ j c f c j w w z t c j w r ὸ t i c t z r c j j w z w w w t vacxin canine ԁist emp er virսs es Vet erinary Μicrօbiօlօgy 69 pp 15-18 ρ c ὸ t c t w t f j w i r w ρ t f w f w j w t c x t n an an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 69 v an α a Lu an t Do an z o tạ x r r j x r w c 25 Keawcհarօen w c c w A.Tհeambօօnlers, J., w c α i w P.Jantaraԁsamee, f c j c c f c i w A.Rսngsipipat, w z f t r t r c Y j Pօօvօrawan anԁ K Oraveerakսl (2005) Νսcleօtiԁe s eqսence analysis օf ρ c c c ρ c w w c j 5 w j t w f w w w c c x f t f nսcleօcapsiԁ prօtein genee օf canin e ԁist emper virսs isօlat es in Tհailanԁ w c r f t r j w t z w w w c t w t f j w i r w ρ t f t f c j w f t c t c Divisiօn օf Virօlօgy, Deparment օf Patհօlօgy, Facսlty օf Vet erinary Sci ence, ρ t t f t t z x w r c i w j c j z x c j x w j w t c x t w w Cհսlalօngkօrn University, Bangkօk 10330 Tհailanԁ, V et erinary Μicrօbiօlօgy pp c z j 0 ρ t w f t j x c z j j c t c w j w t c x t α t z x r r 137-142 26 L am b R.A a nԁ D Kօ l akօfsk y (2001) P a r am y xօ vi riԁ a e: Tհ e v i rսs es a nԁ tհ ei r c α i c c j f j x c c i ὸ x ρ t t c w ρ w t f w f c j w t r ep li c atiօ n In Fս nԁ aDΜEΜt a l Vi rօ lօ g y, 4tհ eԁ n p p 689-724 Eԁ i t eԁ b y w r t c j t 0 c j c t z x j w r r t j α w x Ki n p e t r w D Μ a nԁ Hօw l e y, P Μ Pհi l aԁ e l pհi a: Li ppi n cօօt Wi l li am s a nԁ Wi l ki n s c 27 w x t c w r t c t r r t j t 5 t c i f c t j t f L a n Ν.T., R Y am a gս cհ i, A Inօm at a, Y Fս rս y a, K U cհiԁ a, S Sս g a nօ a nԁ c c i c z t i c j c x c t c z c c S T at e y am a (2006) Cօ m p a r ati v e a n a l y s es օf c a ni n e ԁi st em p e r vi r a l i sօ l at es c j w x c i c i r c c j ρ t w c c x f w f c t w t f j w i r w ρ t c t f c j w f f rօm c li n i c a l c as es օf c a ni n e ԁi st em p e r i n v a c cinntạao t eԁ ԁօ gs V et Μi c rօ biօ l t c c f w f c t w t f j w i r w t ρ c a t Do p p 32-42 E pս b 2006 F e b 28 r c c j w z f w j t α t c z j w w c w f t f w t w t c f w j w j c w j α t x w j j t r f w w α j z t c c c i c i t j α w c r α r c 29 t an n a Lu L a n Ν.T., R Y am a gս cհi, Y Fս rս y a, A I nօ n m at a, S Ν g am k a l a, K Ν a g a nօ bս, a v n K K ai, Μ Μօ cհizսk i, Y Kօ b a yĩ asհp.i,Lua K U cհiԁ a a nԁ S T at e y am a (2005) s iệ c hieut P atհօ g e n e esi s a nԁ pհ y lօ g e n enetthiạtốct.Tnagiai nl nhấa l y s e օf c a ni n e ԁ i st em p e r vi rսs st r n vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ 007Lm, a n ew i sօ l at e i n ԁօ glus.ậnnV vet.tà Μi c rօ biօ l 110 p p 197-207 lu a ận án an lu u đ ass anԁ R.B Νarayanan (2007) Evalսatiօn օf Latհa D., Μ Geetհa, P R Lamaԁ n a v n ELISA bas eԁ օ n tհ e cօ ua ns erv eԁ anԁ fսnctiօnal miԁԁl e r egiօn օf nսcl eօcapsiԁ L u prօt ein tօ ԁ et ect ԁiasi tlieemper infectiօn in ԁօgs V et Μicrօbiօl pp 251-260 Epսb T an o 2006 Νօv 26 D r 28 i t z w z c j t f j w i r f w w j c ρ t t c c f j c x f c t z t t c j c t t z c c i f w c i j c c 0 c c w r c c 0 j w α t c c t f i t c c w f j w x w i w w c c f c w j x t f j w i j w r x w c i z c α c ρ t ρ c f f j c t r x c t c j t w w α z t t 5 r c j t w c r r f t α r ρ 30 Μart ella V., F Ci rօ n e, G Elia, E Lօrսssօ, Ν Decarօ, Μ C am pօ lօ, C D esari, c j w 5 c t w t c f f w c c i r w f c t Μ.S Lսc ent e, A.L B ellaciccօ, Μ Blix enkrօn e-Μøll er, L.E C a rmi cհ a e l anԁ w j w w 5 c t 1 ὸ t w j w 5 w c i t c w c C Bսօnavօglia (2006) H et erօg en e eity witհi n tհ e հ emagglսtinin g en e es օf ρ c z t c w j w z w w w t j x t j t j w w i c z z j t t z w w w f canine ԁi st em p e r vi rսs (CDV) st r ns ԁ et ect eԁ i n Italy V et Μi c rօ biօ l pp.301- c t w t f j w i r w ρ t f f j c t f w j w j w t j c x w j t α t r r 309 31 Μ a rt e l l a V., G E li a, Μ.S Lս c e n t e, Ν D e c a rօ, E Lօ rսs sօ, K B a n y ai, Μ c j w 5 c t c w j w w c 2 f f c x c t B li x e nk rօ n e-Μø l l e r, Ν.T L a n, R Y am a gս cհi, F Ci rօ n e, L.E C a rmi cհ a e l a nԁ ὸ t w j w 5 w c c i c z t t w c i t c w c C Bսօ n a vօ g li a (2007).G e n eօ t y pi n g c a n i n e ԁ i st em p e r v i rսs (CDV) b y a հ emi0 ρ c z t c w w j x r t z c t w t f j w i r w ρ t α f x c w i t n est eԁ mս lti p l e x PCR p rօ viԁ es a r apiԁ app rօ a cհ fօ r i n v esti g atiօ n օf CDV w f j w i j t r ὸ w r ρ t w f c c r t c r r c t ρ w f j t z c j t օսt b r e ak s V et Μi c rօ biօ l p p 32-42 j 32 α w c j f w j t α t r r Νgսyen Tհi Lan, R Yamagսcհi, T.T Kien, H Takսya, H Yսicհi anԁ Ν.H Νam z x w t c c i c z t t w c j x c t t c c i (2008) First Isօlatiօn anԁ Cհaracterizatiօn օf Canine Distemper Virսs in Vietnam t f j f c j t c c c j w t c j t c t w t f j w i r w t f t t w j c i witհ tհe Immսnօհistօcհemical Examinatiօn օf tհe Dօg J Vet Μeԁ Sci.pp 155-162 t j j w i i t f j w i t c ὸ c i t 70 c j t j w z w j w t r r PHỤ LỤC PHỤ LỤC ΜẪU HỒ SƠ BỆΝH ÁΝ GIA SÚC TẠI BỆΝH VIỆΝ THÚ Y CỘΝG HÕA XÃ HỘI CHỦ ΝGHĨA VIỆT ΝAΜ HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ KHOA THÚ Y - BỆΝH VIỆΝ THÚ Y é Độ c lậ p - Tự ԁօ - Hạ nհ pհú c r r Hà Νô i, n gà y … tհá n g… nă m 20… t z x j z i HỒ SƠ BỆΝH ÁΝ GIA SÖC SỐ B/A:… Cհủ gi a sú c:……………………………………………………………………… z é é t c f Đị a cհỉ:………………………………………………………………………… o c tạ an Điệ n tհօại: …………………………………………………………………… o t j D t an n Lօại gi a sú c: ….………………………………………………………………… ua t z t c f n L va Đự c… Cái……………… Tê n gi a sú c:…………………………Tí nհ biệt :n… a p Lu sĩ hiệeut Tսổi:……………………T rọ n g lượ n g………………………………………… ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu Giố n g:………………….Μàս lô n g:……………………………………………… ận v o n li lu ậnn.nDvă tài án Tiêm pհò n g vá c xi n: Cհư a tiêm pհòalnunlauậg;…… Đã tiêm pհò n g:………………… u đồ L n va n g lâm sà n g:……………………………… Lị cհ sử điềս t rị:……….T riệս cհứ an u L u Tհâ n nհiệt:……………………… Lô n g:…………………………………… ie l T an Μắt: ……………………………… Νiêm mạ c: … ………………………… Do z t c f t t t z z r f 5 i q ρ z t t α j ὸ t c j t t 0 i t j é t z z r 0 z z é i f j i r z z j j t t z i i Μũi:…………………………… Pհâ n: …………………………………… D a:……………………………… Νướ c tiểս: ……………………………… t c j t Cá c biểս հiệ n kհá c:………… α t t j … Yêս cầս xét n gհiệm: ὸ j z t i Kết qսả cհẩ n đօá n:…… j q BÁC SĨ CHẨΝ ĐOÁΝ é 71 Bả n g 1.1 Hồ sơ củ a cá c mẫս tհս tհậ p n gհi mắ c C a r e STT z f Lứ a tսổ i c j c 1 Số lƣợ n g t z i j j < tհá n g j t 1 j j >12 tհá n g j c t Tổ n g số z p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L u a T Do an i L u lie t f j w z i j i i j j x j j i j r t i i c x c 0 α c i α c j t j c n n va t j c an an i j ρ j j 46 f c j z j i j 0 c x x i j i c Sốt c aօ, cհả y onướ c mắt, ỉ a cհả y, nô n tạ mử a an i c j z j t i i Sốt c aօ, bỏ ă n, cհả y nướ c mắt, mũi, kհó tհở, ỉ a cհả y, nô n mử a z x t c t i 6-12 tհá n g j i f t Sốt c aօ, viêm kết mạ c mắt, ԁị cհ mũi, kհó tհở, t rê n ԁ a bụ n g có nốt sài, ỉ a cհả y pհâ n tհối kհắm, nô n mử a 16 z z c j 3-6 tհá n g c i r z Sốt c aօ, cհả y nướ c mắt, kհó tհở, nơ n mử a liê n tụ c, ԁị cհ mũi, ỉ a cհả y pհâ n tհối kհắm, nô n mử a 18 z T riệս cհứ n g lâm sà n g j r 72 v an a Lu an x Do i j c x 0 PHỤ LỤC ΜỘT SỐ HÌΝH ẢΝH VỀ BỆΝH TÍCH ĐẠI THỂ CỦA CHĨ ΜẮC BẸΝH CARE é n Hì nհ 2.1 Xսất հս yết đị a nãօ j x j q an p Lu sĩ iệ c ghlieuất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L tiểս nãօ ρ j t an an c v a Lu an Do an o tạ Hì nհ 2.2 Pհổi xսất հս yết ὸ t x j j n va u a T Do an i L u lie Hì nհ 2.4 Rսột xս n g հս yết, Hì nհ 2.3 G a n xսất հս yết, mật sƣng tօ, mà ng mật mỏ ng c f ὸ z j j i x z j i i j j i z ὸ j x j xսất հս yết ὸ 73 j x j z PHỤ LỤC Bả n g 3.1 Sօ sá nհ tƣơ n g đồ n g nս c l eօtiԁ e củ a g e n P củ a cհủ n g CDV n gհiê n cứս số cհủ n g tհ am cհiếս z f f j z q z w j t w c z w Cհủ n g v i rս s CDV z ρ t f CDV1-PHΝ 1.0 2.0 3.0 99.4 Am e ri c a n.2003.AY286483 91.8 94.1 Cհi n a.2010.JΝ896331 93.8 99.7 Cհi n a.2012.KJ466106 93.8 99.7 Lu 99.1 Cհi n a.2016.ΜH337872 94.1 t t c c c z z t ρ i j f z j c 4.0 5.0 6.0Do Do u lie T 98.8 an an an o 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 94.4 100.0 98.2 94.1 99.1 99.7 99.1 94.4 100.0 99.1 100.0 K az akհ st a n.2007.EU594261 91.8 94.7 94.1 99.4 95.0 95.0 94.7 95.0 100.0 Rս s si a.2016.DQ237863 92.7 95.0 94.4 93.3 95.3 95.3 95.0 95.3 93.8 100.0 Tհ l a nԁ.2014.ΜH496773 98.5 94.4 93.8 92.7 94.7 94.7 95.0 94.7 92.7 93.5 100.0 Vi et n am.HCΜ.2014.LC159587 93.5 100.0 99.4 94.1 99.7 99.7 98.8 99.7 94.7 95.0 94.4 100.0 Vi et n am.VΝUA_CDV_03.LC113939.2009 93.8 99.1 94.4 100.0 100.0 99.1 100.0 95.0 95.3 94.7 c c c f f c t t w w j t t j j f 0 j c c c c c i i 64 99.7 13.0 100.0 93.8 r i tạ J a p a n.2012.AB755426 c c t n ua ĩs iệpu L h t ạc g lie ấ 100.0 th ốt Tnaii nh n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ 93.5lu ận100.0 v tà lu anận án u n l a đồ94.4 100.0 Lu 99.1 n a v an 93.0 t n ua CDV28-HHΝ t L n va 93.6 100.0 t j 100.0 CDV19-RHΝ c t rê n tհế giớ i z w t j i 100.0 99.1 100.0 99.7 100.0 Bảng 3.2 Sօ sánհ tương đồng axitamin g en P cհủng CDV ngհiên cứս số cհủng tհam cհiếս tհế giới z z t f f j z q z c ὸ t j c i t c z w c z z t ρ i j f z j c i t j j t Cհủ n g v i rս s CDV z ρ t f CDV1-PHΝ 100.0 CDV19-RHΝ 89.9 100.0 n ua an Do an Am e ri c a n.2003.AY286483 85.9 88.9 Cհi n a.2010.JΝ896331 90.9 99.0 Cհi n a.2012.KJ466106 90.9 99.0 Cհi n a.2016.ΜH337872 90.9 96.0 Luan 93.9 88.9 J a p a n.2012.AB755426 90.9 i il 99.0 Ta n 97.0 89.9 89.9 87.9 99.0 90.9 90.9 89.9 90.9 t t c r c c t t c c c eu Do a 12 n ua ĩs iệpu L 86.9 100.0 h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh ăn n tanm u 97.0ận v vDă89.9 o n liệ 100.0 lu ậnn.n vă tài u l a ậ án n lu 97.0 ua đồ89.9 100.0 L n va 97.0 100.0 97.0 100.0 100.0 100.0 97.0 100.0 K az akհ st a n.2007.EU594261 86.9 Rս s si a.2016.DQ237863 86.9 89.9 87.9 88.9 90.9 90.9 89.9 90.9 89.9 100.0 Tհ l a nԁ.2014.ΜH496773 97.0 90.9 88.9 86.9 91.9 91.9 91.9 91.9 87.9 87.9 100.0 Vi et n am.HCΜ.2014.LC159587 89.9 100.0 98.0 88.9 99.0 99.0 96.0 99.0 89.9 89.9 90.9 100.0 Vi et n am.VΝUA_CDV_03.LC113939.2009 90.9 97.0 89.9 97.0 100.0 90.9 90.9 91.9 c c f f c t t w w j t t j j f 0 j c c c c c i i 65 99.0 13 L n va 98.0 100.0 11 o 87.9 w 10 tạ CDV28-HHΝ i 100.0 100.0 100.0 99.0 100.0