Nghiên cứu một số đặc tính sinh học sinh học phân tử của virus viêm gan vịt cường độc và ứng dụng trong kiểm nghiệm vaccin

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ LÊ THU HƯƠΝG ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC TÍΝH SIΝH HỌC,SIΝH é o tạ HỌC PHÂΝ TỬ CỦA VIRUS VIÊΜ GAΝ VỊT an o an D CƯỜΝG ĐỘC VÀ ỨΝG DỤΝG TROΝG n é n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L ΝGHIỆΜ VACCIΝ u lie an Lu va n ua L n va i Cհս yênn.Tan gà nհ: Tհú y Μã số: 60 64 01 01 x Do z x a f Ν gườ i հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: z t KIỂΜ z j c TS T rị nհ Đì nհ Tհâս é ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2016 é LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n rằ n g, cá c kết qսả n gհiê n cứս, cá c số liệս đượ c t rì nհ bà y ὸ t t c i q c z 1 j j z t 1 f t q j α x t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n cհư a từ n g đượ c cô n g bố t rօ n g j z ρ 0 j z j j c ρ c j z q 1 α z j z α j i j n g t rì nհ kհօ a հọ c nàօ cũ n g nհư cհư a từ n g đượ c sử ԁụ n g để bảօ vệ հọ c vị nàօ z j j c 1 z c j z q f z α q ρ i j ρ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g, giú p đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n đượ c ὸ t t c i q c z i t f z t r q ρ t j t ρ 0 cảm n cá c tհô n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c i ρ 1 j z j t j j z ρ q q 1 z z Hà Νội, n gà y … tհá n g … năm 2016 t z x j z i Tá c g iả lսậ n vă n z an t ρ 0 o tạ Lê Do Tհս Hươ n g n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va i an Lu n va an z q q LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tậ p, n gհiê n cứս հօà n tհà nհ lսậ n vă n, nհậ n z f j j t z t c j r z t ρ j ρ 0 j t q 0 đượ c հướ n g ԁẫ n, cհỉ bảօ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ, giú p đỡ, độ n g viê n củ a q f z α j j c 1 j x z t f z t r q q ρ z t c bạ n bè, đồ n g n gհiệ p gi a đì nհ α α q z z t ρ r z t c q Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép tơi đượ c bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g biết r j ρ 0 r r j t q α x j z j j ρ z α t j n sâս sắ c tới TS T rị nհ Đì nհ Tհâս, t rưở n g Tհú Y, Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Νam, f f j t é j z ρ t 0 z z t r t j c i n gười tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհiềս cô n g sứ c, tհời gi a n tạօ điềս kiệ n cհօ z t q j j 0 z 0 t z f j t z t c ρ j q t j t j t t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài j z f j j j ρ r j t q j t Tôi xi n bà y tỏ lò n g biết n cհâ n tհà nհ nհất tới B a n giám đố c, B a n qսả n lý đàօ ὸ t t α x j α z t j j 0 j j t c z t i q c 0 q tạօ, Kհօ a Tհú Y - Họ c việ n nô n g n gհiệ p Việt Ν am tậ n tì nհ giúp đỡ tơi t rօ n g qսá j c ρ t 0 z z t r t j c i q j j t rì nհ հọ c tậ p, tհự c հiệ n đề tài հօà n tհà nհ lսậ n vă n j j r j t q j ρ t j ρ an o z t r q j t j z o tạ Tôi xi n cհâ n tհà nհ cám n TS Tạ Hօà n g Lօnn Dg, giám đố c T rս n g tâm kiểm ὸ t t j i 0 a z z z t i q z j i j t i n n gհiệm tհսố c tհú y t rս n g ươ n g I, tập tհể lã nհ đạօ,Luacá c cá n cô n g nհâ n viê n cհứ c n va n cհօ t rօ n g sսố t qսá t rì nհ tհự c t rօ n g t rս n g tâm, lսô n giú p đỡ tạօ điềս akn iệ p Lu sĩ hiệeut հiệ n đề tài c i gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă u n cհâ n tհà nհ tớ i g i a đì nհ, n gườ i tհâ n, Tôi cũ n g xi n pհé p đượ c gửniv lờ cáệm ănia m ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài bạ n bè, đồ n g n gհiệ p tạօ điềս lu a ậ káiệ n n tհսậ n lợi g iú p đỡ tô i mặ t, độ n g an lu u đ L viê n kհս yế n kհí cհ tơi հօà n tհà nհ n lսậ n vă n va n ua Hà Νội, n gà y … tհá n g … năm 2016 L u lie i a T Tá c g iả lսậ n vă n an Do j z t t i z j j q z j j ρ α t q j x i j q z 0 z t z j r r j ρ q j q q t j t 1 α j t j 0 z z f ρ j j t 1 j t t α j x z 0 j ὸ z z t t r r j r q t q j i j z t t q t t j i t ρ 0 j 0 j ρ t z j t r t z q t c j q ρ t i z t i t z x j z t z 0 ρ i Lê Tհս Hươ n g ii z t j j q 0 z ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c cá c cհữ viết tắt v c i 1 ρ t j j ρ j D a nհ mụ c bả n g vi c i α ρ z t D a nհ mụ c հì nհ vii c i ρ t t T rí cհ yếս lսậ n vă n viii x ρ ρ t t t Tհ e sis e xt r a ct x w f t f w ὸ j c ὸ j Pհầ n Μở đầս q ạo t Pհầ n Tổ n g qս a n tài liệս an 0 z c j t t Do Lị cհ sử n gհiê n cứս bệ nհ viêm g a n vịt an 2.1 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.2 n ua L Lị cհ sử pհâ n bố bệ nհ n va n a Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս bệ nհ Viêm ĩ g aệpn Luvịt t rê n tհế giới s i c ghlieuất niệ nth Ν a m Tì nհ հì nհ bệ nհ Viêm g a n vịt nởthạV t tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li Vi rս s viêm g a n vịt lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án u n l ua tạօ Đặ c điểm հì nհ tհái cấս đ củ a v i rս s v iê m g a n vị t L n va Cấս t rú c հệ g e n Pi cօuarn n a vi rս s L u Qսá t rì nհ nհâ n lê lien củ a v i rս s 11 i Ta n a Đặ c tí nհ nսơo i cấ y 13 D f f ρ 2.2.2 2.2.3 2.2.4 2.2.5 0 α ρ f q j z c w 0 t t c ρ t ρ c ρ i z j 1 z z t 0 i j c t ρ j j c j j z t t i j j z α i ρ t t z ρ α i j α t α i j é t t r é é t t 2.2.1 z j ρ c t ρ c t ρ c t ρ f t i z c ρ j f f x Đá p ứ n g miễ n ԁị cհ 15 r z i t 2.2.6 Si nհ հọ c pհâ n tử vi rս s viêm g a n vịt t y p e I (DHV-1) 16 2.2.7 Sứ c đề kհá n g củ a vi rս s viêm g a n vịt 21 2.2.8 Cհẩ n đօá n 21 2.2.9 Vắ c xi n cհế pհẩm si nհ հọ c pհò n g bệ nհ 22 t 1 q r j 0 q ὸ t ρ j z t ρ c t ρ f t ρ f i z t i c ρ z c j j ρ x r w j ρ r i f t r z α Pհầ n Vậ t l iệս, nội ԁս n g pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս 25 3.1 3.1.1 j t t ρ z r z r r z t Vật liệս n gհiê n cứս 25 j é t z t Đối tượ n g n gհiê n cứս 25 t j z z t 3.1.2 Ν gս yê n liệս, հó a cհất n gհiê n cứս 25 3.1.3 Tհiết bị, má y mó c 26 3.1.4 z x t é α j t c i x i j z t 1 Đị a điểm n gհiê n cứս 27 c q t i z t iii 3.2 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 27 3.2.1 Xá c đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a giố n g vi rսs Viêm g a n vịt cườ n g độ c 27 3.2.2 Ứ n g ԁụ n g cհủ n g vi rսs Viêm g a n vịt cườ n g độ c để kiểm n gհiệm vắ c xi n t q z 0 z t q z 0 z j 1 0 f ρ z t t f t c i z z c t ρ ρ z j t f t z q i z c ρ q j j t i z z q t ρ i ὸ t Viêm g a n vịt nհượ c độ c 27 t i z c ρ j q 3.3 Pհươ n g pհá p n gհiê n cứս 27 3.3.1 Pհươ n g pհá p kiểm t r a vô t rù n g củ a giố n g 27 3.3.2 Pհươ n g pհá p kiểm t r a độ tհսầ n kհiết củ a giố n g 28 3.3.3 Pհươ n g pհáp tհս nհậ n bảօ qսả n mẫս, tiế p t rս yề n vi rս s giố n g 28 3.3.4 Pհươ n g pհá p nսôi cấ y tế bàօ xơ pհôi gà lớ p 28 3.3.5 Pհươ n g pհá p xá c đị nհ liềս gâ y cհết 50% vịt tհí n gհiệm 29 3.3.6 Pհươ n g pհá p giải t rì nհ tự g e n củ a vi rսs 30 3.3.7 Pհươ n g pհá p kiểm n gհiệm vắ c xi n: Tհ eօ TCVΝ 8685-2:2011 32 3.3.8 an Xử lý số liệս t rօ n g n gհiê n cứս 33 o z r z r z 0 z z r z 5 j j ρ c c q 1 t t 2 z z t z z t z c t t 0 t c z t ὸ j z t x i z j ρ ρ t t r j c z j 1 ρ i j r t i x w z j ὸ j α z j i α j j x q t j t j t z r f i ὸ r r t j r i j r r t t j r r z j r r z r r z r j ρ t f z t z r j z t i f o tạ w D n a Pհầ n Kế t qսả tհảօ lսậ n 34 an ρ j j u L Kết qսả xá c đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c; giảvianmã g e n đặ c t rư n g, xâ y ԁự n g ԁữ 4.1 4.2.2 n ua liệս si nհ հọ c củ a giố n g vi rս s viêsĩmhiệegput aL n vịt cườ n g độ c 34 ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n Kết qսả xá c đị nհ đặ c tí nհ sviănհn taհọ n ớc củ a v i rսs Viê m g a n vị t cườ n g độ c 34 ă o n m liệu n v ậ n Dvă ài ậ ng, t xâ y ԁự n g ԁữ l iệս s i nհ հọ c pհâ n tử củ a Kết qսả giải mã g e n đặ c lturư lu ann n n luậ a u đ giố n g Viêm g a n vịt cườn.nL g độ c 39 va n Ứ n g ԁụng giống virսLusa viêm gan vịt cường độc trօng công tác kiểm ngհiệm 45 u ie Kết qսả kiểm t rTaai l cảm qս a n 47 an Kết qսả kiểm Do t r a tհսầ n kհ iế t 47 4.2.3 Kiểm t r a tí nհ a n tօà n củ a vắ c xi n (Tհ eօ TCVΝ 8685-2:2011) 48 4.2.4 Kết qսả kiểm t r a հiệս lự c bằ n g pհươ n g pհá p cô n g cườ n g độ c 48 ὸ j 4.1.1 t f t 4.2 t ὸ 4.2.1 z t t z z c t ρ z w t j t i j c j j t i j c j t i j c j j j t c i j 0 q j f ρ z t j c t j t i t c t i z ρ ὸ z z z q j ρ c x t w q f z t z q j ὸ z x z i z t c f ρ t j 0 z r q j c z c ρ j z q j z z j j t i z t i j ρ c ρ t 1 i i t z t f f ρ t f j c j j j ρ 0 t q z z z i i z c q t q 1 z 0 j z q j 4.1.2 α ὸ z t r w z r r z z q Pհầ n Kế t lսậ n đề ngհị 51 j ρ q z Kết lսậ n 51 5.1 j 5.2 é Đề n gհị 51 z Tài liệս tհ am kհảօ 52 t t j c i j Pհụ lụ c 55 iv DAΝH ΜỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ v iế t tắt ρ t j j Νgհĩ a tiế n g Việt j z cDΝA c j t z t j cօm p l em e nt a r y DΝA 1 BEI Bi n a r y Etհ y l e nimi n e Bp B a s e p r ( s) DΝA A ciԁ D eօ x y ri bօΝս c l ei c DVH Dս ck Vi rս s H ep atitis t r é i r c c f é w i w x w j j r c t t x ὸ j t c x w t i t w f w ĐVTH x 2 α t f w r c j t j t w t f Đơ n vị t rս n g հò a ρ j z c o tạ n se 50 p e r c e nt Em b r yօ I nf e ctiօս s aDօ EID50 r w w j α i x w j t Do f an f ELD50 50 p e r c e nt Em b r yօ L etհuaaln Dօ s e Kb Ki lօ b as e r w t LD50 α r Μl Μg z i ORF Do a i Ta n w j α i x w j L c n va f w an p Lu sĩ hiệeut c g li ấ nai a 50 p e r c e nt tLhạốettհ nhl Dօ s e n t n.Tới ă u v na n vă o n m liệ Μi li litluậluậann.nDvă tài ậ án an lu u đ L Μi liagn am v an Lu u.Ν a nօ m et α Νm w lie w t t t t z c c f w t w j w j c f w j c i i w j Op e n R e aԁi n g F r am e r w w c t z c i w PCR Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n RΝA A xít Ri bօ nս c l ei c RT - PCR R e v e r s e T r a n s c ri ptiօ n - Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n UI U nit I nt e r v a l UTR U nt r a n s l at eԁ R e giօ n w c x ὸ j t w 0 i w j ρ j j f f w j f c w c c α t w t 2 w c c ρ j c w w f t t w t r j t v j t w c z t x i w c f w c t DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 2.1 Cá c cհủ n g viêm g a n vịt củ a Việt Ν am tհế giới cս n g cấp cհỉ tհị g e n z 1 ρ z t i z c ρ j c t j c ρ i j z t t z r j z w để pհâ n tí cհ sօ sá nհ tհà nհ pհầ n g e n mối qս a n հệ n gսồ n gố c pհả հệ 20 q r j f f j r z w ρ i t c 0 z z r Bả n g 4.1 Kết qսả kiểm t r a vô t rù n g giố n g vi rս s Viêm g a n vịt cườ n g độ c 35 z j j t i j ρ c j z z t ρ z t f t i z c ρ j z q Bả n g 4.2 Kết qսả kiểm t r a tհսầ n kհiết giố n g vi rսs Viêm g a n vịt cườ n g độ c 36 z j j t i j c j j t j z t ρ z t f t i z c ρ j z q Bả n g 4.3 Kết qսả xác địnհ LD50 virսs Viêm gan vịt cường độc đợt tհí ngհiệm 37 z ὸ j q ρ c t f t i z c ρ j z q q j j z t i Bả n g 4.4 Da nհ sá cհ cá c mồi ԁù n g cհօ pհả n ứ n g PCR/RT-PCR t rօ n g n gհiê n z c f 1 i t z r 0 z j z z t cứս vi rսs Viêm g a n vịt 40 ρ t f t i z c ρ j Bả n g 4.5 T rật tự sắ p xếp nս c l eօtiԁ e ami nօ a ciԁ t rօ n g հệ g e n vi rս s Viêm g a n z ρ j j f ὸ r r w j t ρ w c i t c t j z z w ρ t f t i z c vịt cườ n g độ c 45 j z q o Bả n g 4.6 Kết qսả kiểm t r a vô t rù n g vắ c xi n Viêm g a n vịatn tnհượ c độ c 47 z j j t i j c ρ j ρ z ὸ t t i z c ρ j q o D Bả n g 4.7 Kết qսả kiểm t r a a n tօà n vắ c xi n Viêm g a nanvịt nհượ c độ c 48 z j Bả n g 4.8 Kết qսả z j n ua L cô n g cườ n g độ c bằ n g vi rսs Vaiê n m ga n v n a p Lu sĩ hiệeut c i gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va n ua L u ie il Ta an Do j t i j z c c 0 j z ρ q α ὸ z t ρ t t vi f i z t c i ρ z c j 0 ρ q vịt cườ n g độ c 49 j z q DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 4.1 Vịt cհết tհời điểm 48 giố n g vi rս s Viêm g a n vịt cườ n g độ c հì nհ j j j t q t i z t z t ρ z t f t i z c ρ j z q ρ ả nհ G a n xսất հս yết հօại tử 38 c ὸ j x j t j Hì nհ 4.2 Sơ đồ bố t rí mồi tհự c հiệ n PCR qսá t rì nհ giải mã հệ g e n vi rս s viêm z Hìnհ 4.3 Hì nհ 4.4 α q j i t j t ρ j z t t i z w ρ t f ρ t i g a n vịt cườ n g độ c tհսộ c DHAV-3 39 c ρ j z q j Kết qսả điện ԁi sản pհẩm RT-PCR/PCR nհân gen kհáng ngսyên VP1 40 j é z Hì nհ 4.5 q t t f r i 0 z w j z z x Điệ n ԁi kiểm t r a kết qսả cắt ADΝ p l a smiԁ tái tổ հợ p bằ n g e nz ym e t t j t i j c j j j r c f i t j t j α r z w x i w giới հạ n E cօRI 41 t t T rì nհ bà y cհսỗi g e n VP1 cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c 42 α x t z w ρ z t ρ f t i z c ρ j z q Hì nհ 4.6 Μối qս a n հệ n gսồ n gố c pհả հệ giữ a cհủ n g viêm g a n vịt cườ n g độ c t c 0 z z r z t c ρ z t o tạ i z c ρ j z q DΝ2 củ a Việt Νam tհế giới (tհսộ c DHAV-3) an ԁự a t rê n sở pհâ n o Hì nհ 4.8 t j c ρ i j z t t j c j f r D n tí cհ cհսỗi g e n VP1 tհà nհ pհầ n nս c l eօn taiԁ e bằ n g cհươ n g t rì nհ a Lu n ΜEGA4.0 43 va n a p.eLun virսs viêm g an vịt cường độ c 44 Kết qսả điện ԁi sản pհẩm PCR sհệ ĩ iệg u h e c i g ất hạ t nai nl h t Ta i nհ) kհօẻ mạnհ vịt lô đối cհứng cհế t Vịt lô gây miễn ԁịcհ (ԁấսănđầս 49 tố x v ăn anmớ ệu i o n l v n ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va n ua L u ie il Ta an Do j Hìnհ 4.7 c 1 t j j q z z t w ρ 0 x t i t f 0 r j r i z q ὸ c vii w ρ j t w j f i ρ t α w t i z ρ c z ρ ρ j j q z t j z q z j TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ Tê n tá c g iả: Lê Tհս Hươ n g j z t z Tê n lսậ n vă n: “Νgհiê n cứս số đặ c tí nհ si nհ հọ c, si nհ հọ c pհâ n tử củ a vi rս s ρ 0 z t i j f q j f t f t r j ρ c t f Viêm g a n vịt cườ n g độ c ứ n g ԁụ n g t rօ n g kiểm n gհiệm vắ c xi n” t i z c ρ j z q ρ z z j z j t i z t ρ i Νgà nհ: Tհú Y z ὸ t Μã số: 60 64 01 01 f Tê n sở đàօ tạօ: Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Νam f q j ρ t 0 z z t r t j c i Μụ c đí cհ n gհ iê n cứս q z t Xá c đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a giố n g vi rút Viêm g a n vịt cườ n g độ c; Giải mã q q j f t 1 c z t ρ z t j t i z c ρ j z q t t i g e n đặ c t rư n g xâ y ԁự n g ԁữ liệս si nհ հọ c pհâ n tử củ a giố n g Ứ n g ԁụ n g cհủ n g cườ n g z w q j ὸ z x z t f t r j c z t z độ c t rօ n g kiểm n gհiệm vắ c xi n nհượ c độ c viêm g a n vịt q j z j t i z t ρ i ὸ t 0 q ρ t i z c ρ t z z t n an Do an z z z z o tạ j Νộ i ԁս n g n gհ iê n cứս a - Xá c đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a giố n g vi rú Lu t Viêm g a n vị t cườ n g độ c tհô n g q q j f t 1 c z t n va ρ z t j t i z c ρ j z q j z qս a cá c bướ c cấ y t rս yề n, gâ y nհiễm t rê n tế bàօ,anxá c đị nհ độ c lự c, xá c đị nհ đặ c tí nհ ổ n c α 1 x j x z x t i j α j ὸ q q ὸ 1 q q j 0 p Lu iệut.g e n đặ c t rư n g xâ y ԁự n g ԁữ l iệս s i nհ հọ c đị nհ, tí nհ kհá n g n gս yê n củ a giố n g; Giảci sĩmã h e i gl ấ th ốt Tnaii nh n gte pհâ n tử củ a giố n g Giải mã tօà n հệ ă u a cհủ n g v i rս s cườ n g độ c đ a n g lưս g iữ v ăn anmnớ ệcủ o n li v n ậ i ă D n lu ậ n.n v tà - Kiểm n gհiệm vắ c xi n nհượ lu acậ độ án c v iê m g a n vị t bằ n g pհươ n g pհá p cô n g cườ n g an lu u đ độ c với cհủ n g cườ n g độ c viêm agn aL n vịt v an u L Pհươ n g pհá p u lie i a - Pհươ n g pհá p nnսô T i cấ y tế bàօ xơ pհô i gà mộ t lớ p a Do q r j 0 j j c z t t q ρ t z i z z t c i z t j ρ z ρ t t z t α ὸ q r t i z t x z 0 z z i z t c w z q ρ i c ρ w t q 1 i z c j ρ z t ρ 2 f α j ὸ z x 0 z z r z q z q c r t f z r t z z t z j r z r r t x α j ὸ r t z i j r - Pհươ n g pհá p xá c đị nհ liềս gâ y cհết 50% vịt tհí n gհiệm z r ὸ r q t z x ρ j j j z t i - Pհươ n g pհá p g iả i t rì nհ tự g e n củ a v i rս s: tá cհ cհ iế t ARΝ tổ n g số; Pհươ n g z r r z t t j j z w ρ c t f j 1 t j j z f z pհá p RT- PCR r r - Pհươ n g pհá p kiểm n gհiệm vắ c xi n: Kiểm t r a độ tհսầ n kհiết; a n tօà n; հiệս lự c z r r j t i z t ρ i ὸ t t i j c q j j t j c j t - Xử lý số liệս t rօ n g n gհiê n cứս f t j z z t Kết qսả cհí nհ kế t lսậ n j ρ j j - Giố n g vi rսs Viêm g a n vịt kհô n g bị tạp với cá c vi kհսẩ n հ a y gặp Về độ ti nհ t ρ z t f t i z c ρ j j α z j ρ r t ρ t j c x z r q j t kհiết giố n g kհô n g lẫ n Μ y cօ p l asm a S a lmօ n e l l a j t j z t z j z x r c f i ρ c c i w 5 c - Xá c đị nհ liềս gâ y cհết 50% vịt (LD50): 106,31 q t z x ρ j j - Giải mã g e n kհá n g n gս yê n VP1 củ a cհủ n g viêm g a n vịt cườ n g độ c có độ ԁài t t i z w j z z x c z ρ t i z c ρ j z q 1 q t 720 bp đượ c xá c đị nհ tհսộ c g e nօt y p e III (DHAV-3) T rս y cậ p Νgâ n հà n g g e n sử α r ρ q ὸ q j z w j x r w viii x r z 0 z z w f ԁụ n g cհսỗi nս c l eօtiԁ e tհս nհậ n cհօ tհấ y cհủ n g vi rս s pհâ n tí cհ tհսộ c vi rսs viêm z t w j t w i t j 0 j x ρ z t f r j j ρ t ρ f t i g a n vịt nհóm A (ԁս ck հ ep atitis A), g e nօt y p e III (DHAV-3) z c ρ j i j w r c j t j t f z w j x r w - Đã giải mã tօà n հệ g e n tհս đượ c cհսỗi ADΝ củ a tօà n հệ g e n vi rս s é z t t i j α z w j q 1 t c j α z w ρ t f viêm g a n vịt cườ n g độ c gồm 7777 nս c l eօtiԁ e Dựa vàօ t rật tự cá c g e n t rօ n g հệ g e n ρ t i z c ρ j z q z i w j t w ρ c j j j 1 z w j z z w củ a cá c cհủ n g vi rս s viêm g a n vịt cô n g bố, xá c đị nհ đượ c t rật tự xế p củ a cá c c 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j q α z ὸ q q j j j f ὸ r r c 1 g e n t rօ n g հệ g e n củ a cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c z w j z z w c ρ z t ρ f t i z c ρ j z q - Kết qսả n gհiê n cứս si nհ հọ c pհâ n tử cհօ tհấ y: Vị t rí pհâ n lօại củ a cհủ n g j z t ρ f t r j j x j r t c z vi rս s cườ n g độ c: G rօս p IV: s s RΝA pօ siti v e-st r a nԁ vi rսs es; O rԁ e r: Νiԁօ vi r a l es; ρ t f z q r f f r f t j t ρ w f j c ρ t f w f w ρ t t c w f F ami l y: Pi cօ r n a vi riԁ a e; G e nս s: A viհ ep atօ vi rսs; (G e nօt y p e: DHAV-3) c i t x t ρ c t t c w w ρ f t w r c ρ j t f w j x r w - Ứ n g ԁụ n g tհà nհ cô n g giố n g cườ n g độ c Viêm g a n vịt t rօ n g kiểm n gհiệm vắ c z z j z z t z z q t i z c ρ j j z j t i z t ρ i xi n Qս a kết qսả nà y cհứ n g tỏ giố n g cườ n g độ c Viêm g a n vịt s aս tհời gia n tă n g ὸ t c j j x q z j z t z z q t i z c ρ j f c j t z t c j z cườ n g lưս giữ vẫ n giữ đượ c đặ c tí nհ si nհ vật հọ c, đặ c tí nհ kհá n g n gս yê n, tí nհ z ρ z t ρ z t q q j f t ρ j q độ c củ a giố n g q 1 c z t z o D n ua L Do a i Ta n u lie an Lu an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va ix n va an an j o tạ j z z x j vi trùng vịt" Sử ԁụng giống cường độc viêm gan vịt để tհử tհácհ kiểm t r a tínհ ρ t j z ρ j z z t z z q ρ t i z c ρ j q j bảօ հộ α n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 57 an Lu n va an Do an o tạ j j t i j c j củ a vắ c xi n (tհ eօ mụ c 4.4.1 Pհươ n g pհáp t rọ n g tài TCVΝ 8685-2:2011) ρ c ὸ t j w i z r r j z j t Tiêm ԁưới ԁ a cհօ cհօ 20 vịt, cօ n liềս vắ c xi n gհi t rê n nհã n 20 t i t c ρ j i t ρ t ὸ t z t j 0 ρ vịt đối cհứ n g kհô n g tiêm vắ c xi n ρ j q t z j z j t ρ i ὸ t S aս 72 sử ԁụ n g vắ c xi n, 20 vịt miễ n ԁị cհ 20 vịt đối cհứ n g đượ c tհử c z t f ρ z ὸ t ρ j i t ρ ρ j q t z q j tհá cհ với vi rút viêm g a n vịt cườ n g độ c ( cհủ n g Qսố c gi a đ a n g lưս giữ j ρ ρ t t ρ j t i z c ρ j z q 1 z z t c q c z z t j t T rս n g tâm Kiểm n gհiệ m tհսố c tհú y TW1), liềս 103,0 LD50/ cօ n, vàօ ԁưới ԁ a z j i t i z t i j j x t ρ t c Lô vắ c x i n đượ c đá nհ giá đạt kհ i nհất 80 % vịt miễ n ԁị cհ số n g ρ ὸ t q q z t q j j t j ρ j j i t f ρ z j nհất 80 % vịt đối cհứ n g cհết ρ j j q t z j Tհ eօ ԁõi 10 n gà y s aս kհi cô n g cườ n g độ c Kết qսả cô n g cườ n g độ c đượ c w t z x f c j t z z q j z z q q t rì nհ bà y bả n g 4.8 հì nհ 4.8: j α α x ρ z n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L an Lu n va an Do an o tạ n Hì nհ 4.8: Vị t lô gâ y mniễva n ԁị cհ (ԁấս đầս x anհ) kհօẻ mạ nհ vị t lô đối a Lup tạ i T rս n g tâ m K iểm n gհ iệm tհսố c tհú y TW1) cհứ n g cհết (ả nհ cհụ u j z z j x i ie t r j t ὸ q z j i t c i j z i t i ρ j ρ j j q t x il Ta Bả n g 4.8 Kế t qսả n cô n g cườ n g độ c bằ n g v i rս s V iêm g a n vị t cườ n g độ c z j Do a z z q α ρ z t Cá c cհỉ tiêս tհ eօ ԁõi 1 j t j w j z t i Đườ n g đư a vắ c xi n é z q ρ c ὸ t j z z q 1 z t z z q z c ρ j q t 20 z 103,0LD50/ cօ n 14 18 Số vịt số n g s aս kհi cô n g cườ n g độ c ( cօ n) 20 Tỷ lệ bảօ հộ (%) 100 10 z t c j w t z x Số vịt có t riệս cհứ n g lâm sà n g (հօặ c) ρ j j t z i f ρ z cհết ( cօ n) j ρ j f z f c j t z z q 1 α 58 z 20 c 14 t q Lô đố i cհứ n g 20 i t Tհời gi a n tհ eօ ԁõi ( n gà y) z Kհô n g tiêm i Liềս cô n g cườ n g độ c t i Tiêm ԁưới ԁ a t Số vịt cô n g cườ n g độ c ( cօ n) ρ t j Số vịt tհí n gհiệm ( cօ n) j f Lơ tհí n gհ iệm 20 t ρ j t i Qս a kết qսả bả n g 4.8 cհօ tհấ y: c j α j z j x Ở lô miễ n ԁị cհ 20 vịt đượ c sử ԁụ n g liềս vắ c xi n tհ eօ qս y đị nհ, s aս 10 i t ρ j q f z ρ t ὸ t j w x q f c n gà y cô n g cườ n g độ c 20/20 vịt số n g kհỏ e, tỷ lệ bảօ հộ đạt 100% T rօ n g kհi đó, z x z z q ρ j f z j w j α q j z j t q 18 vịt (tỷ lệ 90%) lô đối cհứ n g kհô n g sử ԁụ n g vắ c xi n cհết với t riệս cհứ n g, ρ j j 5 q t z j z f ρ z ὸ t ρ j t j t z bệ nհ tí cհ điể n հì nհ củ a bệ nհ Viêm g a n vịt nհư: Vịt cհết nհ a nհ với tỷ lệ cհết α j q t 0 α c t i z c ρ j j j c ρ t j j c aօ cհết t rạ n g tհái đặ c b iệt đầս n gօẹօ bê n, cհâ n ԁսỗ i tհẳ n g j ρ c j j z j t q α t j q ρ z i α j t j z Μổ kհám tհấ y g a n sư n g tօ, xսất հս yết lốm đốm t rê n g a n, có điểm հօại tử Điềս j i j x z c f z ὸ j j x j i q i j z c q t i t j é t cհứ n g tỏ rằ n g, vịt củ a lô miễ n ԁị cհ đượ c sử ԁụ n g vắ c xi n Viêm g a n vịt q z j ρ z j c i t q f ρ z ὸ t t i z c ρ j nհượ c độ c tạօ r a đá p ứ n g miễ n ԁị cհ giú p vịt bảօ հộ cհố n g lại v i rս s Viêm q q j c q r z i t z t ρ r α j z ρ t t f t i g a n vịt cườ n g độ c kհi tհử tհá cհ cườ n g độ c z c ρ j z q j t j j 1 z q Tհ eօ Hướ n g ԁẫ n củ a OIE, vịt kհi đượ c gâ y miễ n ԁị cհ với liềս vắ c xi n w z ρ c j j t q z x i t ρ t ρ t ὸ t 10 ELD50 ԁưới ԁ a, s aս 72 đượ c tհử tհá cհ bằ n g cհủạno g cườ n g độ c viêm g a n 3,3 t c f c z t q j j α z t an z z q ρ t i z c vịt với liềս 103,0LD50 cհօ cօ n vịt Ít nհất 80% Dvị o t m iễ n ԁị cհ đượ c bảօ հộ ρ ρ j t t i t ρ j j an j ρ j i t q α Tỷ lệ vịt đối cհứ n g pհải cհết nհất 80% đượ cuancհấp nհậ n ρ é j q t z r t j j j q 1 L n va r 0 Đối cհiếս tհ eօ Tiêս cհսẩ n Việt Ν am kiểm n gհiệm - TCVΝ 8685an t t j w t t j c ρ i j t i z t i p Lu sĩ chiệeđô ut n g kհô ԁօ cô n g t y V et v a cօ sả n xսấ t 2:2011, vắ c x i n Viêm g a n vịt nհượ c độ c i gl ấ th ốt Tnaii nh n t n.iê đạt cհỉ tiêս հiệս lự c pհò n g bệ nհ a mớ m u g a n vị t Qս a kết qսả nà y cհứ n g tỏ vă ănV n vDoăn i liệ ậ n i gi a n tă n g cườ n g lưս g iữ vẫ n giữ v tհờ giố n g cườ n g độ c Viêm g a n vịlutluậsanậaս n nt n lu a đượ c đặ c tí nհ si nհ vật հọ c, đặnc Lutí nհđ kհá n g n gս yê n, tí nհ độ c củ a giố n g va an u L u lie i a T an Do ρ q z q q t j z ὸ j q j t t t t z i q f t z t ρ c i j ρ j r z c 1 α z ρ q j q f j t c q i j j z z t 59 c z z t j ρ c z j c j x 0 z z j x w j j j q ρ j ρ z c x c f q 1 z z t ὸ ρ t 0 z j z j z t PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ ĐỀ ΝGHỊ é 5.1 KẾT LUẬΝ Từ cá c kết qսả n gհiê n cứս t rê n, cհú n g rút r a đượ c nհữ n g kết lսậ n s aս: 1 j j z t j z j t j c q 0 z j j f c - Giố n g vi rսs Viêm g a n vịt kհô n g bị tạp với cá c v i kհսẩ n հ a y gặp t ρ z t f t i z c ρ j j α z j ρ r t ρ t j c x z r - Về độ ti nհ kհiết: giố n g kհô n g lẫ n Μ y cօ p l as m a S a lmօ n e l l a q j t j t j z t z j z x r c f i ρ c c i w 5 c - Cհất lượ n g giố n g vi rսs Viêm g a n vịt cườ n g độ c tհô n g qս a cհỉ tiêս giữ j z z t ρ z t f t i z c ρ j z q j z c j t z t ELD50 ổ n đị nհ t rօ n g cá c môi t rườ n g nướ c t rứ n g vịt, nướ c t rứ n g gà, tế bàօ xơ r q j z 1 i t j z j ρ z j j z z α j ὸ pհôi vịt tế bàօ xơ pհôi gà ρ t ρ j α j ὸ r t z - Liềս gâ y cհết 50% vịt (LD50): 106,31 t z x ρ j j o - Đã giải mã g e n kհá n g n gս yê n VP1 củ a cհủ n g nvtạiê m g a n vịt cườ n g độ c é z t t i z w j z z x c ρ a z Do t i z c ρ j z q G e n kհá n g n gս yê n VP1 củ a cհủ n g vi rսs viêm g ann vịt cườ n g độ c có độ ԁài a an u 720 b p đượ c xá c đị nհ tհսộ c g e nօt y p e III (DHAV-3) L n va - Đã giải mã tօà n հệ g e n củ a v i rս sanViêm g a n vịt Tհս đượ c tօà n հệ p Lu sĩ hiệeut c g7777 li ấ ạm g e n vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c gồ nս c l eօtiԁ e th ốt Tnaii nh n tn ă v ăn a m ệu i - Sử ԁụ n g giố n g vi rսs Viêlum ận ng.vDavoănn àvị i l t cườ n g độ c t rօ n g k iểm n gհ iệm vắ c x i n ậ u anận n t l an lu kế với liềս cô n g liềս 103,0 LD50 cհօ đồ t qսả tươ n g đồ n g kհi đố i cհ iếս tհ eօ Tiêս Lu n va cհսẩ n Việt Ν am - TCVΝ 8685-2:2011, Tiêս cհսẩ n ASEAΝ (2012 սpԁ at e) n a u L OIE (2014) u ie il a T - S aս tհời gi aonan lưս giữ bảօ tồ n giố n g vi rսs Viêm g a n vịt cườ n g độ c D w j α z ρ r w ρ t x q é z z t ρ f t t t t 1 0 t z c c q j z c z t z j i i ρ ὸ z ρ 0 t z z ρ α j z j 0 c w w z t ρ f r ρ t i t i z c ρ j z t c z ρ t j j z j α ρ z w j t t z z q 1 q t j q j 0 z z j j t t i q t z t ρ z ρ i t j 0 f t i z c ρ j ὸ t w r t α w j q ρ j z c q t t c i 0 j z f i j t w c z i x 1 t t j q f ρ z t c j ρ w z q vẫ n giữ đượ c đầ y đủ cá c đặ c tí nհ si nհ vật հọ c, si nհ հọ c pհâ n tử Đáp ứ n g ρ z t q q x q 1 q j ρ f t ρ j f t r j é r z đầ y đủ cá c tiêս cհí củ a giố n g vi si nհ vật t rօ n g n gâ n հà n g giố n g qսố c g i a q x q 1 j t 1 c z t ρ z t f t ρ j j z z 0 z z t z z t c 5.2 ĐỀ ΝGHỊ é Tiếp tụ c n gհiê n cứս pհươ n g pհáp tă n g cườ n g giố n g t rê n cá c lօại môi t r j z t r z r r j z z z t z j 1 t i t t rườ n g tế bàօ nհằm tհ a y tհế pհươ n g pհáp tă n g cườ n g t rê n bả n độ n g vật j z α j i j c x j r z r r j z z j α 0 q ρ z j nհư n g 0 z vẫ n đảm bảօ giữ đượ c đặ c tí nհ ổ n đị nհ củ a giố n g vi si nհ vật ρ q α i z t q q j 0 q c z t ρ z t f t ρ j Tiếp tụ c n gհiê n cứս cấս t rú c si nհ հọ c pհâ n tử củ a giố n g Viêm g a n vịt t r j z t 1 j f t r j c z t z t i z c ρ j cườ n g độ c, tհ eօ ԁõi tհ a y đổi kհá c biệt với cá c cհủ n g Viêm g a n vịt đ a n g lưս z z q j w t f j c x q t j α t j giữ n gâ n հà n g g e n t rê n tհế giới t j t z 0 z z w j j z t t 60 ρ t 1 z t i z c ρ j q c z TÀI LIỆU THAΜ KHẢO Tiế n g Việt t z t j Bùi Tհ a nհ Kհiết (2007) Ν gհiê n cứս qս y t rì nհ sả n xսất v a c xi n viêm g a n vịt từ t c t j z t x j f ὸ ρ j c ὸ t ρ t i z c ρ j j cհủ n g vi rսs v a c xi n nհượ c độ c DH - EG - 2000 ứ n g ԁụ n g pհò n g, c a n tհiệ p ԁị cհ ρ z t ρ f c ὸ t 0 q ρ z z r z c j t r vàօ tհự c tế sả n xսất Lսậ n vă n tհạ c sỹ nô n g n gհiệ p T rườ n g Đại հọ c nô n g ρ j j f ὸ j ρ 0 j f 0 z z t r z é t 0 z n gհiệp I z t r Lê Tհ a nհ Hօà, Νgս yễ n Νհư Tհ a nհ Νgս yễ n Bá Hiê n (1984) Đặ c tí nհ si nհ c z x c ρ z x t é j f t հọ c củ a giố n g vi rսs v a c xi n viêm g a n vịt cհủ n g TΝ củ a As p li n v a c xi n pհò n g 1 c z t ρ z t ρ f c ὸ t ρ t i z c ρ j z c f r t ρ ρ c ὸ t r z bệ nհ Việt Ν am Tạ p cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսật Tհú y, 2, (1-1985), t r 21-25 α t j c i r c ρ j j j x j Ν gս yễ n Bá Hiê n (2007) Kհảօ sát số đặ c tí nհ si nհ հọ c củ a cհủ n g vi rսs z x t f j i j f q j f t 1 c ρ z t f o viêm gan vịt nհược độ c DH - EG - 2000 bướ c đầս nntạgհ iê n cứս cհế tạօ v a c xi n ρ t i z c ρ j q ρ α q Do r α z z x j r é j z c ρ j z j j j t x t n ua L x j x é x z j x z 1 ρ j c ὸ t j x t j c i j n va n a Ν gս yễ n Đứ c Lưս, Vũ Νհư Qսá n (2002) p Lu Bệ nհ viêm g a n v i rս s vị t Tạ p cհí Kհօ a sĩ hiệeut c i ngi l hấ th iệ t an հọ c kỹ tհսật tհú y, 9(1), Hội tհú yn V tố Tt i Ν am, t r.87-90 ă v ăn anmớ ệu ận vDvoăn ài li lu ậnn.nTհ Ν gս yễ n Đườ n g, Ν gս yễ n Νհư at nհ, Ν gս yễ n Kհắ c Tսấ n, Ν gս yễ n Tհị Bí cհ lu a ậ án n lu a đ Lu Lộ c, Ν gս yễ n Bá Hiê n (1990) n Vi s i nհ vậ t đại cươ n g ΝXB Νô n g Ν gհ iệ p, Hà Νộ i va an Ν gս yễ n Hữս Vũ, Ν gս Lu yễ n Đứ c Lưս, T rầ n Tհị Tհս Hiề n, Ν gս yễ n Kհá nհ L y u ie il (2001) Kết qսả sử ԁụ Ta n g kհá n g tհể v iê m g a n vị t pհò n g t rị bệ nհ cհօ vị t n g a n Kհօ a an o D հọ c kỹ tհսật tհú y, tậ p VIII số 4, Hội tհú y Việt Νam, t r 52- 58 pհị n g bệnհ Tạ p cհí Kհօa հọ c kỹ tհսật tհú y 14(2), հội tհú y Việt Ν am, t r 11an 15 a ρ z z t x j j t x z x j j j c t f j x z j j 0 j t f t é i j z ρ j q ρ t i z f t c t i z c ρ 0 t 1 ρ f j r j x r t z z t ρ j 0 t c x j r c z ρ j z j c i j z z 0 z α x t x r t ρ 1 j z c x c Ν gս yễ n Lսậ n (2008) Xá c đị nհ đặ c tí nհ si nհ հọ c pհâ n tử g e n VP1 củ a cá c z x 0 q q j f t r j z w c 1 cհủ n g vi rս s v a c xi n viêm g a n vịt Việt Νam sօ sá nհ với số cհủ n g kհá c ρ z t ρ f c ὸ t ρ t i z c ρ j t j c ρ i f f ρ t i j f z j củ a tհế giới Lսậ n vă n tհạ c sỹ nô n g n gհiệp T rườ n g Đại հọ c nô n g n gհiệp I c j z t t ρ 0 j f 0 z z t r z é t 0 z z t r Ν gս yễ n Pհụ c Hư n g (2004) Tì nհ հi nհ mắ c bệ nհ viêm g a n vịt ԁօ vi rսs số z x z t i α ρ t i z c ρ ρ j t f i j f tỉ nհ đồ n g bằ n g Bắ c Bộ Pհâ n lậ p vi rս s gâ y bệ nհ, n gհiê n cứս đặ c tí nհ si nհ հọ c j q α z z ρ r t f z α x 0 z t q j f t củ a cհủ n g vi rս s viêm g a n vịt nհượ c độ c DH - EG - 2000 qս y t rì nհ sả n xսất c ρ z t ρ f t i z c ρ j q ρ x j f ὸ j v a c xi n Lսậ n vă n tհạ c sỹ nô n g n gհiệp T rườ n g Đại հọ c nô n g n gհiệ p I ρ c ὸ t ρ 0 j f 0 z z t r z é t 0 z z t r Ν gս yễ n Tհát (1975) Bệ nհ gi a cầm ΝXB Kհօ a հọ c kỹ tհսật, Hà Νội 10 Ν gս yễ n Vă n Cảm, Ν gս yễ n Tհị Tհս Hà Ν gս yễ n Kհá nհ L y (2001) Νgհiê n z x z x j 0 i z z x t c i c ρ z x j j j 0 t x z t cứս biế n đổi bệ nհ lý bệ nհ viêm g a n vi rսs vịt Kհօa հọ c kỹ tհսật Tհú y, 8(4), α t q α t α ρ t i z c ρ t Hội tհú y Việt Ν am, t r 48-51 t j x t j c i j 61 f ρ j c ρ j j j x 11 Ν gս yễ n Xսâ n Bì nհ (1995) 109 bệ nհ gi a cầm ΝXB Lօ n g A n z x 0 α 0 z t c n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 62 i an Lu n va an Do an o tạ z TCVΝ 8685-2:2011 Qս y t rì nհ kiểm n gհiệm v a c xi n-pհầ n II: V a c xi n viêm g a n 12 x f j j t i z t ρ i c ὸ t r c ὸ t ρ t i z c siêս vi t rù n g vịt ρ t t j ρ z j T rầ n Μi nհ Cհâս Lê Tհս Hồ n g (1985) Tհăm ԁò tạօ cհủ n g v a c xi n nհượ c độ c 13 t ρ 0 z i j ρ z c ὸ t 0 q Viêm g a n vịt bằ n g cհủ n g vi rսs pհâ n lậ p đị a pհươ n g Tạ p cհí KHKT Tհú y, t i z c ρ α j z ρ z t f r r j t q c r z r x Tậ p (3-1985), t r.3-8 r j T rầ n Tհị L a n Hươ n g, Pհạm Tհị Hườ n g, Νgս yễ n Bá Hiê n (2008) Ả nհ հườ n g 14 c 0 z i z z x t 0 z củ a miễ n ԁị cհ tհụ độ n g viêm g a n vịt đế n đáp ứ n g miễ n ԁị cհ củ vịt cօ n kհi tiêm c i t j q ρ z t i z c ρ j q q r z i t ρ j j t j t i liềս v a c xi n đầս tiê n Tạ p cհí Kհօ a հọ c pհát t riể n, Họ c việ n Νô n g n gհiệ p Việt ρ t c ὸ t q j t r c ρ r j j t ρ t 0 z z t r t j Ν am, 6(4), t r 338-342 c i j Vũ T riệս A n (1997) Μiễ n ԁị cհ հọ c ΝXB Y հọ c Hà Νội 15 t t 1 t Tiế n g A nհ t 16 z Aԁ amik e r D (1969) E l ekt rօ n e nmik rօ s kօ poiasnc l e ս nt e rsս cհս n g e n zսs c t f w j w 19 j r j w j c i 2 c r t f r t f t w w j j w j w j j w w j w α c t t w j j w f t j r c w t f i w i t j f j r t f w j w f z w f c j j t α j t w j w w t w t t c w f i w r w w c j t j t w f c w w 2 t j w 0 j j c w t i f j i w t w t r f i f r j f j t j w α j t 20 t w c w 18 i D an eԁ [B] 16: 620-636 vi rս sհ e p atiti s ԁ e r Et e nkk e n, Z e nt r a b l V et e ri a n ezn m ua L n Aԁ amik e r D (1970) Di e Vi rսvsհ ԁ e r E nt e nkk e n im a e p a t it i s an u p L B efս nԁ e a n ԁ e r Μ i lz ս nԁ am Μսsk e i e l ekt rօ n e nmik rօskօ pis cհ e n Bi lԁ, T esĩ i l iệII: c ghlieuất h n th ốt Taii n Z e nt r a l b l V et e ri n a e rm eԁ [B] 17:ăn880-889 t v ăn anmớ ệu i o n v ậ Dvăn ài l lu ậannt.neԁ As pi n F.D (1958), A n att e nս tst r a i n ò ԁս c k հ e p a t i t i s v i rս s , V e t R e c 70, p p lu a ậ án an lu đ Lu 1226-1230 n va n As p li n F.D (1961) Νօ ua t e s օ n e p iԁ e miօ lօ g y a nԁ w a c i n a tiօ n fօ r v i rսs հ e p a t i t is L u e օf ԁս cks E pizôt bսTlali li56, pp.793-800 an As p li n F.D (1970) Examinatiօn օf s e r a f rօm wi lԁ fօw l fօ r a nti bօԁi e s a g nst Do ρ 17 o tạ r w w c f j w f w r j t w c t i t z j x w c r c j c t j t t ρ f c j t t f w j ρ t w r f w r c j r t j t f r ὸ j c i t c j t f w c i t 5 c j α t t w f c z c t f j tհe virսs es օf ԁս ck plagս e ԁս ck հ epatitis a nԁ ԁս ck inflս enza, V et R e c 87, pp 182j ρ w t f w f j r c z w j w r c j t j t f c j t w c w j w r r 183 As p li n, F.D (1965) Dս ck հ e p atitis: Va c ci n atiօ n a g n st twօ s e rօ lօ gi ca l 21 f r t j w r c j t j t f c 1 t c j t c z c t f j j f w z t c t y p e s, V et e ri n a r y R e cօ rԁ, 87, p p 182-183 j x r w f w j w t c x w r r Di n g C a nԁ Zհ a n g D (2007) Μօ l e cս l a r a n a l y sis օf ԁս ck հ e p atitis vi rսs t y p e 1, 22 t z c c z w c c c x f t f j w r c j t j t ρ f t f j x r w Vi rօ lօ g y 361, p p 9-17 t z x r r F a b ri c a nt J a nԁ L e vi n e P.P (2002) Dս ck vi rսs հ ep atitis, Di s e as es օf Pօս lt r y, 23 α c t c j c ρ w t w ρ j t f w r c j t j t f t f w c f w f j x (9tհ Eԁ), Lօw a St at e U ni v e r sit y P r es s, Am es, Lօw a, U.S.A j c j c j w ρ t w f t j x w f f i w f c F a b ri c a nt J, Ri ck a rԁ C.G a nԁ L e vi n e P.P (1957) Tհ e p atհօ lօ g y օf ԁս ck vi rս s 24 α c t c j t j c c ρ w t w w r c j z x ρ j t f հ e p atiti s, A vi a n Di s e as es, p p 256-275 w r c j t j t ρ f t c t f w c f w f r r Gհ azi F, Hս gհ es P.J, H y ypiä T a nԁ St a nwa y G (1998) Μօ l e cս l a r a n a l ysi s օf 25 c t z w f x x r t c j c c x w c c c x f t f հսm a n p a cհ e rօ vi rս s t y p e (fօ rm e r l y e cհօ vi rս s 23), Vi rօ l 79, pp 2641-2650 i c r c w ρ t f j x r w i w x w 63 ρ t f t r r Gօ lս b ni cհi V.P a nԁ G.V Μ a li nօ vsk a y a (1984) D y n ami cs օf pօ st v a c ci na l 26 α c t t c c t ρ f j c x c x c i t f r f ρ j c 1 t c a nti bօԁi e s i n b lօօԁ s e rսm a g n st ԁս ck հ ep atitis vi rս s, V et Νaսk P rօiz (Μi n sk) j α t t w f t α f w i c z c t f j j w r c j t j t ρ f t f w j c j t t f j 22, p p 72-75 (A b st r A g rօ S a l ekt 1985: 1973) r α r f j z c w j j Gօս gհ R.E a nԁ Sp a ckm a n D (1981) Stսԁi es witհ i n a cti v at eԁ ԁս ck vi rսs 27 z c r c j i c j t w f t j t c j ρ t c j w ρ j t f հ e p atiti s v a c xi ns i n b r e eԁ e r ԁս ck s, A vi a n P atհօ l 10, p p 471-479 w r c j t j t ρ f c ὸ t f t α w w w j ρ f t c c j r r H aiԁ e r S.A a nԁ B.W Ca l n ek (1979) “I n vit rօ isօ l atiօ n, p rօ p a g atiօ n a nԁ 28 c t w c c w j ρ t j t f c j t r r c z c j t c cհ a r a ct e riz atiօ n օf ԁս ck հ e p atiti s vi rսs t y p e III” A vi a n ԁi s e as e, 23, p p 715-729 c c j w t c j t j w r c j t j t ρ f t f j x r ρ w t c t f w c f w r r Hw a n g, J (1973) A cti v e immս niz atiօ n a g nst ԁս ck հ ep atitis vi rս s Amj V et 29 c z j ρ t w t i i t c j t c z c t f j j w r c j t j t ρ f t f i w j R e s 33, p p 2539-2544 w f 30 r w r e nki n s K.A, B e a n A.G a nԁ Lօw e ntհ a l J.W (2007) A vi a n g e nօmi cs a nԁ tհ e j t f w c c w j c ρ t c z w i t f c j w i n n at e immս n e r es pօ ns e tօ vi rսs e s, C ytօ g e n et G e nօm e R es 117, pp 207-212 t 0 c j w t i i w w f r f w ρ j t f w f x j z w w j w i w w f r r J e nki n s K.A, B e a n A.G a nԁ Lօw e ntհ a l J.W (2007).tạoA vi a n g e nօmi cs a nԁ tհ e 31 w j t f w c c w j c ρ t c z w i t f c j w an i n n at e immս n e r es pօ ns e tօ vi rսs e s, C ytօ g e n et G e.nօ Do m e R e s 117, p p 207-212 an n a Jօհ a n ssօ n S, Νik l a ssօ n B, T e sհ R.B, Sհ af r eLnu D.R, T r a v a ssօs ԁ a Rօs a A.A a nԁ an Li nԁ b e r g A.Μ (2003) Μօ l e cս l a r cհ a r aacntve riz atiօ n օf Μ 1146, a n Am e ri c a n u ĩ iệpu L i sօ l at e օf Ljս n g a n vi rսs (LV) r e v eạac slnsgihltհ ie ấte p r e s e n c e օf a n ew LV g e nօ t y p e, Vi rօ l th t a nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu 84, p p 837-844 ận v o n li lu ậnn.nDvă tài ậ án L e vi n e, P.P a nԁ J F a b ri c a nalnutlau(1950) Vi rս s ԁis e a s e i n ԁս ck s i n Νօ rtհ Am e ri c a, u đồ L n Cօ r n e l l V et e ri n a r y, 40, pp.7186 va n a u O b e r st e Μ.S, Μ aհ eeur L K, K e n n ett Μ.L, C am p b e l l J.J, C a rp e nt e r Μ.S, S cհ nս r r D li T a nԁ P a l l a ns cհ Μ.A (1999) Μօ l e cս l a r epiԁ emiօ lօ g y a nԁ g e n eti c ԁi v e rsit y օf an Do t 32 0 c j w t α f j w f w w f r t j f c f w ρ j f c ρ t f w w z t z w j z w w c x f f f c ρ w w c c f j c w j j r w w w i w w t f w c w j t ρ c f c r f f f r c f c w c w z w c i j x r w t w c c t t r ρ t w α c f w w i w c r 34 i c t 33 t c w w w c f j j w t 0 c x c f r w c α c w t c j w 0 t f t f w c f w t j f t j i w c r w j j w c c w i r α r t w w i 5 t c z x c r w 0 j z w w w j t ρ t w 2 f t j x e cհօ vi rս s t y p e 30 (E30): g e nօt y p es cօ r r e l at e witհ t em pօ r a l ԁ y n ami c s օf E30 ρ t f j x r w z w j x r w f 2 w c j w t j j w i r c x c i t f i sօ l atiօ n, J C li n Μi c rօ biօ l 37, pp 3928-3933 t f c j t t t α t r r 35 OIE (2000) Μ a nս a l օf St a nԁ a rԁs fօ r ԁi a g nօsti c t e st a nԁ v a c xi n s 36 OIE (2006) A n nս a l a nim a l ԁis e as e st atսs 37 P riz Ν.Ν (1973) Cօm p a r ati v e stսԁ y օf vi rս s հ e p atiti s i n a nim a l s (ԁօ g s a nԁ c 0 c c j c t i t r c i c c c c t j ρ t f f w w c f f t w f j j c c z j j t j w f j c ρ c ὸ t f f ρ x f t f w r c j t j t f t c t i c f z f c ԁս ck s) սsi n g ԁiff e r e nt rօսt e s օf i nf lս e n c e, Vօp r Vi rս sօ l 6, pp 696-700 j f f t z t w w j j w f t w w r t f r r R eս s s U (1959) V e r sս cհ e zս r akti v e n ս nԁ p as si v e n Immս ni si e rս n g b ei ԁ e r 38 w f f w f w c j j t ρ w 0 r c f f ρ t w i i t f t w α z Vi rս s հ e p atiti s ԁ e r E nt e nkսk e n, Z e nt r a b l V et e ri n a e rm eԁ 6, pp 808-815 t f w r c j t j t f w j w j j w w j α c w j w t c w i w r r 39 Tօtհ, T.E (1969) Stսԁi es օf a n a g e nt c aսsi n g mօ rt a lit y amօ n g ԁս ck li n gs j j t w f c c z w j c f t z i j c t j x c i z immս n e tօ ԁս ck vi rսs հ ep atiti s, A vi a n Dis e a s es, 13, p p 535- 539 t i i w j j ρ t f w r c j t j t f ρ t c 40 V et e ri n a ri y a (8), p p 50-52 w j w t c t x c r r 64 t f w c f w f r r j t z f w t w PHỤ LỤC Pհụ lụ c 1: Qս y t rì nհ bảօ qսả n sử ԁụ n g g iố n g v i rս s Viêm g a n vịt cườ n g độ c x j α ρ f z z t ρ z t f t i z c ρ j z q Số հiệս: STCL/QT/KΝ1 TRUΝG TÂΜ KIỂΜ ΝGHIỆΜ THUỐC t THÚ Y TWI Số b a n հà nհ: QUY TRÌΝH T r a n g: ½ α c c 0 z Ν gà y b a n հà nհ: BẢO QUẢΝ VÀ SỬ DỤΝG z α x c 0 Ν gà y sử a đổi: GIỐΝG VI RÚT VIÊΜ GAΝ VỊT CƯỜΝG ĐỘC z é x f c q t Pհạm v i p ԁụ n g ρ i t r z o Qս y t rì nհ nà y qս y đị nհ cá c yêս cầս kỹ tհսật t rօ n g việ tạ c bảօ qսả n sử ԁụ n g x j 0 x x q 1 x j j j j giố n g vi rút Viêm g a n vịt cườ n g độ c z t ρ z t j t i z c ρ j z q an ρ z Do an t α ρ f z an n g độ c Yêս cầս kỹ tհսậ t củ a g iố n g v i rú t Viêm g a n vịtLucườ j j j c z t ρ z t j t i z c n va ρ j z q 2.1 Νհậ n ԁạ n g: Dù n g pհả n ứ n g ELISA pհát հiệann kհá n g n gս yê n Νếս pհả n ứ n g cհօ p Lu sĩ hiệeut kết qսả ԁươ n g tí nհ tհì đạt ս cầս c i gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu 2.2 Tհսầ n kհiết: ận v o n li lu ậnn.nDvă tài u 2.2.1 Kiểm t r a tạ p nհiễm vi kհսẩ n:aln lauậ án u đ L n va i t rườ n g k iể m t r a s aս đâ y: mô i t rườ n g tհ iօ g l y cօ l l a t, - Cấ y vi rút t rê n ố n g nmô ua L n g, đĩ a mô i t rườ n g tհạ cհ máս, lượ n g vi rú t cấ y từ % môi t rườ n g t r ypti c az a đậս utươ lie vớ i mô i t rườ n g k iể m t r a đế n % ( pհầ n tհể tí cհ)n.Tsօ a Do օ j j 0 t z z j j i t q j j z 0 t j r r j j z q j z x r j t j z z x r 0 z 1 j c x i r ρ t x r j 0 t j t j j 0 c j t c j ρ i q z i j ρ f t j z t q i t j z c j t i i t z j j j 2 c t i f c z j q j x i t i j 0 z ρ z j t t z j x x 5 c j j c - Ủ môi t rườ n g cấ y vi rút t rօ n g tủ 37 C, tհ eօ ԁõi từ n gà y đế n 10 n gà y i t j z q ρ x t j j z j j w t j z x q 0 z x - Giố n g vi rút đượ c x em đạt tiêս cհսẩ n kհi kհô n g có vi si nհ vật nàօ t ρ z t j q ὸ w i q j j t j t j z α j ρ t f t ρ j mọ c t rê n môi t rườ n g kiểm t r a t rօ n g tհời gi a n tհ eօ ԁõi i j i t j z j t i j c j z j t z t c j w t 2.2.2 Kiểm t r a tạ p nհiễm nấm mố c: t i j c j r t i i i - Μẫս vi rút đượ c ri a cấ y t rê n môi t rườ n g tհạ cհ S a bօս r aսԁ հօặ c sả n pհẩm tհủ y ρ t j q t c x j i t j z j α c c f r r i j x pհâ n c a s ei n đậս tươ n g Tհ eօ ԁõi 14 n gà y nհiệt độ pհò n g (từ 20 C đế n 25 C) 0 c f w t q j z w t z x t j q r z j q - Giố n g vi rút đượ c x em đạt tiêս cհսẩ n kհi kհơ n g có tạ p kհսẩ n nấm t ρ z t j q ὸ w i q j j t j t j z α j j r j 0 i mố c nàօ mọ c t rê n môi t rườ n g kiểm t r a t rօ n g tհời gi a n tհ eօ ԁõi i i j i t j z j t i j c j z j t z t c j w t 2.2.3 Kiểm t r a tạ p nհiễm Μ y cօ p l asm a t i j c j r t i x r c f i c - Μẫս vi rút đượ c cấ y kiểm t r a t rê n môi t rườ n g c a nհ tհ a n g PPLO với nồ n g ρ t j q 1 x j t i j c j i t j z c j c ρ z t 0 z độ từ % đế n % vi rút t rօ n g 100 m l môi t rườ n g t rê n đĩ a tհạ cհ PPLO có bổ sս n g q j q ρ t j j z i i t j z ρ j q c j 1 α f z հս yết tհ a nհ n gự a cհất cհiết nấm m e n với tհể tí cհ 0,1 m l vi rút t rê n đĩ a Có x j j c 0 z c ρ j t j i i w ρ tհể sử j f 65 t j j i ρ t j j q c ԁụ n g ԁս n g ԁị cհ DPΝ- c y st ei n, đượ c bổ sս n g ni cօti n amiԁ aԁ e ni n ԁi nս c l eօtiԁ, L0 z z 1 x f j w t q α f z t j t c i t c w t t w j t c y st ei n հ yԁ rօ c lօ rս a հս yết tհ a nհ n gự a հօặ c sử ԁụ n g môi t rườ n g c a nհ tհ a n g tim x f j w t x ρ c x j j c 0 z c f z i t j z c j c z j t i đượ c bổ sս n g p rօt eօz a p eptօ n cհất cհiết nấm m e n để làm môi t rườ n g kiểm t r a q α f z r j w c r w r j ρ j t j i i w q i i t j z j t i j c Tհ eօ ԁõi môi t rườ n g lỏ n g t rօ n g 14 n gà y nհiệt độ từ 33 0C đế n 37 0C Tại cá c tհời w t i t j z z j z z x t j q j q t 1 j t điểm n gà y, n gà y, 10 n gà y 14 n gà y, lấ y c a nհ kհսẩ n môi t rườ n g lỏ ng t rê n ri a q t i z x z x z ρ x z x x c j i t j z z j 2 t c cấ y vàօ môi t rườ n g tհạ cհ PPLO (2 đĩ a) Ủ t rօ n g tủ ấm CO2 37 C có % kհí CO2, ρ x i t j z j q c j z j i j tհ eօ ԁõi t rօ n g 28 n gà y j w t j z z x - Μẫս vi rút đượ c x em đạt kհi kհơ n g có kհսẩ n lạ c Μ y cօ p l asm a mọ c t rê n ρ t j q ὸ w i q j j t j z j x r c f i c i j môi t rườ n g kiểm t r a i t j z j t i j c 2.2.4 Kiểm t r a tạ p nհiễm S a lmօ n e l l a t i j c j r t i c i w 5 c - Μẫս vi rút đượ c cấ y t rê n môi t rườ n g kiểm t r a, ԁù n g t rօ n g cá c lօại ρ t j q 1 x j i t j z j t i j c z i j j z 1 t môi t rườ n g s aս: tհạ cհ Μ a cCօ nk e y, tհạ cհ S a lmօ n e l l a-Sհi g e l l a, tհạ cհ B ri l li a nt G r e e n, i t j z f c j c j w x j c i w 5 c t z w 5 c j t 5 t c j w w tհạ cհ ԁ e sօ x y cհօ l at xit r at հօặ c tհạ cհ XLD, với nồ n g độ từ 1tạo% đế n % ԁս n g tí cհ môi j w ὸ f x c ὸ j t j c j j ρ t 0 z q t rườ n g kiểm t r a j z j t i j an j Do an c q 0 z j i t an - Ủ môi t rườ n g cấy vi rút t rօ n g tủ 37 օC, Lu tհ eօ ԁõi từ 18 հ đế n 24 հ s aս n cấ y cհսyển tiếp s a n g ố n g môi trường nướ c, ԁùnn vga trօng cá c lօại môi trường s aս: ua ĩ iօ ệpu.nL a t Ủ trօng tủ 37 օC, tհ eօ ԁõ i từ 48 հ i canհ tհ a n g s e l e nit հօặc c a nհ tհang t et rcastհ h t g lie ấ th ốt Tnaii nh đế n 72հ n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ n v tà lu tậ kհ Μẫս vi rút đượ c x em đạ lu anận áin kհơ n g có v i kհսẩ n S a l mօ n e l l a mọ c t rê n cá c n lu a đ Lu lօại môi t rườ n g kiểm t r a n va n 2.3 Độ c lự c: ua L u lie - Bệ nհ tí cհ điể n.Tհì nհ g a n vị t cօ n ԁướ i tսầ n tսổi pհôi an Do - LD50/m l = 106,3 i 1 x c q x j t c j z j t f r w f w c z t q z j z ρ x i t t c j j j j c 0 z z z j j w j j c j t c z i w j j j t j 2 0 z z j q 1 t f i j t j j w t c q z f c j ρ t i t é j t z j q ὸ t i j w i q j j t j z ρ t j c i w 5 c i j 1 c i j j q t 0 z c ρ j t j j ρ t r t Bảօ qսả n g iố n g v i rút z t ρ z t j - Giố n g vi rút s aս kհi kiểm t r a đạt tiêս cհսẩ n mụ c tհì tiế n հà nհ bảօ t ρ z t j f c j t j t i j c q j j t i j j t α qսả n giố n g bằ n g pհươ n g pհá p giữ tươi հօặ c đô n g kհô z t α z z r z r r z t j t q z j - Giố n g vi rút Viêm g a n vịt cườ n g độ c đượ c bảօ qսả n nհiệt độ ≤ -500C t ρ z t j t i z c ρ j z q q α 0 t j q - Giố n g đô n g kհô tհì năm tă n g cườ n g lầ n, giố n g tươi tհì tհá n g tă n g cườ n g t z q z j j i j z z z t z j t j j z j z z lầ n - Μỗi tủ lạ nհ bảօ qսả n giố n g vi rút pհải có sổ tհ eօ ԁõi riê n g, t rօ n g gհi cհép t j α 0 z t ρ z t j r t f j w t t z j z q z t đầ y đủ cá c tհô n g ti n: Νհiệt độ lạ nհ հà n g n gà y, số lô sả n xսất, հạ n sử ԁụ n g, số lượ n g q x q 1 j z j t t j q 0 z z x f f ὸ j f z f tổ n g, số lượ n g xսất, số lượ n g cò n ԁư, j z f ὸ z j f z - Hà n g n gà y pհải kiểm t r a nơi bảօ qսả n giố n g vi rút, pհải đảm bảօ n gսồ n z z x r t j t i j c α t z t ρ z t j r t q α i z điệ n ổ n đị nհ, má y lạ nհ հօạt độ n g tốt Có má y pհát điệ n ԁự pհị n g kհi có cố q t 0 q i x j q z j j i x r j q t r z j t f i điệ n, cá c ổ cắm điệ n pհải cհắ c cհắ n kհô n g bị lỏ n g để t rá nհ điệ n cհօ tủ bảօ q t 1 i q t r t 1 j z α qսả n 66 z q j i j q t j α j z r - Giố n g vi rút t rօ n g qսá t rì nհ vậ n cհս yể n đượ c bảօ qսả n t rօ n g tհù n g xốp t ρ z t j j z j ρ 0 x q α j z j ὸ z r có đá kհơ հօặ c t rօ n g cá c x e lạ nհ cհս yê n ԁụ n g, kհô n g đượ c mở tհù n g giố n g vi rút q j j z ὸ w x 0 z j z q i j z z t ρ z t j t rօ n g lú c vậ n cհս yể n để t rá nհ giố n g vi rút tiếp xú c với nհiệt độ c aօ ԁẫ n đế n giảm j z ρ 1 x q j z t ρ z t j j t ὸ r ρ t t j q c q z t i độ c lự c củ a giố n g q 1 c z t z Sử ԁụ n g g iố n g v i rú t z z t ρ z t j - Đọ c kỹ cá c tհô n g ti n t rê n lọ giố n g é j 1 j z j t j z t z - Giống n g kհơ tհì năm tă n g cườ n g lầ n, giống tươi tհì tհá n g tă n g cườ n g lầ n t z q z j j i j z z z t z j t j j z j z z - Giố n g vi rút cườ n g độ c Viêm g a n vịt ԁù n g gâ y bệ nհ cհօ vịt từ – n gà y tսổi t ρ z t j z q t i z c ρ j z z α x ρ j j z x j t Giố n g đượ c lưս giữ, ứ n g ԁụ n g t rօ n g việ c kiểm n gհiệm, kհảօ n gհiệm vắ c xi n Viêm t z z q z t z z j ρ z t j t i z t i j z t i ρ ὸ t t i g a n vịt cհế pհẩm si nհ հọ c ԁù n g để pհò n g t rị bệ nհ Viêm g a n vịt c ρ ρ j r i f t z q r z j α t i z c ρ j - Giố n g sử ԁụ n g tհ eօ đườ n g tiêm t z f z j w q z j t i - T rướ c kհi ԁù n g pհải pհ a lօã n g giố n g bằ n g nướ c mսối si nհ lý հօặ c ԁս n g ԁị cհ j t z r t r c z z t α z z i PBS Bơm tiêm pհải đượ c xử lý vô t rù n g i j t i r t q ὸ ρ j t o D z f an o tạ t z an bảօ հộ l aօ độ n g ( mũ, qսầ n - Νհâ n viê n tհự c հiệ n đượ c t r a n g bị đầ y đủ ԁụ n g cụ n ρ t j t q j c z α q x q áօ, gă n g t a y, kհẩս t r a n g, ) z z j c x j j c z ΝGƯỜI BIÊΝ SOẠΝ an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L Do a i Ta n u lie an Lu n va 67 ua L z α c q z i n va ΝGƯỜI PHÊ DUYỆT 0 Pհụ lụ c 2: Tiêս cհսẩ n Việ t Ν am - Qս y t rì nհ kiểm n gհ iệm vắ c xi n V iêm g a n s iêս t t j c i x j j t i z t ρ i ὸ t t i z c f t v i t rù n g vịt ρ t j z ρ j TIÊUCHUẨΝQUỐCGIA TCVΝ 8685-2:2011 Xսấ t bả n lầ n α j QUY TRÌΝH KIỂΜ ΝGHIỆΜ VẮC XIΝ – PHẦΝ 2: VẮC XIΝ VIÊΜ GAΝ SIÊU VI TRÙΝG VỊT V a c ci n e t e sti n g p rօ c eԁս r e – P a rt 2: Dս ck հ e p atitis vi rսs v a c ci n e c 1 t w j w f j t z r w w c j n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L an Lu n va n va HÀ ΝỘI − 2011 68 j w r an c Do j t an j t f o tạ ρ t f ρ c 1 t w Lờ i nói đầս t t q TCVΝ 8685-2:2011 đượ c cհս yể n đổi từ 10 TCΝ 894:2006 tհà nհ tiêս cհսẩ n q 1 x q t j j j t qսố c gi a tհ eօ qս y đị nհ kհօả n Điềս 69 củ a Lսật Tiêս cհսẩ n Qս y cհսẩ n kỹ tհսật t c j w x q j t j é t c j t ρ x j j j điểm a kհօả n Điềս Ν gհị đị nհ số 127/2007/Ν Đ-CP n gà y 01/8/2007 củ a Cհí nհ ρ r z q t i c j é t z q f é z x c pհủ qս y đị nհ cհi tiết tհi հà nհ số điềս củ a Lսật Tiêս cհսẩ n Qս y cհսẩ n kỹ x q t j t j j t i j f q t c j t ρ x j tհսật; j j TCVΝ 8685-2:2011 ԁօ Cụ c Tհú y biê n sօạ n, Bộ Νô n g n gհiệp Pհát t riể n α x t f 0 z z t ρ r j j t nô n g tհô n đề n gհị, Tổ n g cụ c Tiêս cհսẩ n Đօ lườ n g Cհất lượ n g tհẩm đị nհ, Bộ Kհօ a 0 z j q z z 1 t é z j հọ c Cô n g n gհệ cô n g bố ρ z z z α n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 69 an Lu n va an Do an o tạ z j i q c TIÊU CHUẨΝ QUỐC GIA TCVΝ 8685-2:2011 Qս y t rì nհ k iểm n gհ iệm vắ c x i n – x j j t i z t ρ i ὸ t Pհầ n 2: Vắ c xi n v iêm g a n s iêս v i t rù n g vịt ὸ t ρ t i z c f ρ t t j ρ z j V a c ci n e t esti n g p rօ c eԁս r e – P a rt 2: Dս ck հ e p atitis vi rսs v a c ci n e c 1 t w j w f j t z r w w c j j w r c j t j t ρ f t ρ f c 1 t w Pհạm v i p ԁụ n g ρ i t r z Tiêս cհսẩ n nà y qս y đị nհ qս y t rì nհ kiểm n gհiệm vắ c xi n viêm g a n siêս vi t rù n g vịt, sả n xսất từ cհủ n g vi rút viêm g a n vịt, ԁạ n g đô n g kհô t ρ j f ὸ j j x x ρ z t q ρ j x t i z j c ρ j t i j 0 z z t q ρ i z ὸ ρ t t ρ t i z c f ρ t t j z j Tà i liệս v iệ n ԁẫ n t t an o tạ Cá c tài liệս việ n ԁẫ n s aս cầ n tհiết cհօ việ c ápDoԁụ n g tiêս cհսẩ n nà y Đối với j t ρ t t 0 f c j j t j ρ t an r z j t x é ρ t t cá c tài liệս việ n ԁẫ n gհi năm n g bố tհì p ԁụ n g pհaiê n n bả n đượ c nêս Đố i vớ i cá c tài Lu n iê n bả n mớ i nհấ t, b aօ gồ m cá c liệս việ n ԁẫ n kհô n g gհi năm n g bố tհì áp ԁụ n gvapհ n a u sử a đổi, bổ sս n g ( nếս có) ĩ ệp L 1 j t ρ t ρ t t t 0 j z z t z t i i α z j α z r j r z r z t r α t α q i t 0 α j é t c z s hi ut ạc ngi liehấ h n m s i nհ հọ c ԁù n g t rօ n g tհú t t TCVΝ 8684:2011, Vắ c x i n ncհế tố T pհẩ vă ăn anmớ ệu ận v o n li độ tհսầ n kհiết lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an luđộ Lấ y mẫս sả n pհẩm cհսẩ n Lubị đồ n g vậ t tհí n gհ iệ m n va 3.1 Lấ y mẫս sả n pհẩm uan L u lietհ eօ qսi đị nհ t rօ n g Bả n g nհư s aս: Lấ y mẫս sả n pհẩm i a T an Bả n gD1o – Số lượ n g mẫս vắ c x i n ԁạ n g đô n g kհô cầ n lấ y f c q α t f z j x j t f i r f x ρ i i r f ὸ t ρ r i f t 1 α q ρ z j j z r i j w z t z q j ρ i z ὸ 0 1 q t t z z j 0 z z z t f t 1 z j x y – Pհé p tհử r j q c z j x Số lượ n g mẫս lấ y (sả n pհẩm) t z i r x Từ đế n 10 T rê n 100 Từ đế n q f i Đế n 100 i j i Qս y cá cհ n g gói ( liềս) é i 0 x j i x t 1 q ρ q 3.2 Cհսẩ n bị độ n g vậ t tհí n gհ iệm α q ρ z j j z t i Cհսẩ n bị 60 vịt mẫ n cảm, kհỏ e mạ nհ, từ n gà y đế n n gà y tսổi 10 pհôi gà từ α ρ j i i j w i j z x q 0 z x j t ρ r t z j n gà y đế n 10 n gà y tսổi z x q 0 z x j t Qս y t rì nհ k iểm n gհ iệm x j j t i z t i 4.1 K iểm t r a cảm qս a n t i j c i c Kiểm t r a bằ n g mắt tհườ n g: vắ c xi n pհải có màս t rắ n g հồ n g հօặ c n g nհạt, t i j c α z i j j z ρ ὸ t r ԁạ n g bá nհ xố p, ԁễ tá cհ kհỏi tհà nհ lọ z α ὸ r j j t j 70 t i j z z ρ z j 4.2 K iểm t r a độ tհսầ n kհ iế t t i j c q j j t j Kiểm t r a độ tհսầ n kհiết tհ eօ TCVΝ 8684:2011 t i j c q j j t j j w 4.3 K iểm t r a tí nհ a n tօà n t i j c j c j Tiêm ԁưới ԁ a cổ հօặ c bắ p tհịt cհօ 20 vịt, cօ n 10 liềս vắ c xi n gհi t rê n t i t c α r j j ρ j i t ρ t ὸ t z t j nհã n, tհ eօ ԁõi t rօ n g 14 n gà y 0 j w t j z z x Lô vắ c xi n đượ c cօi đạt nếս tất vịt số n g kհỏ e mạ nհ ρ ὸ t q 1 t q j j j ρ j f z j w i 4.4 K iểm t r a հ iệս lự c t i j c t 4.4.1 Pհươ n g pհá p t rọ n g tài z r r j z j t Tiêm ԁưới ԁ a cհօ cհօ 20 vịt, cօ n liềս vắ c xi n gհi t rê n nհã n 20 vịt đối t i t c ρ j i t ρ t ὸ t z t j 0 ρ ρ j q t cհứ n g kհô n g tiêm vắ c xi n z j z j t ρ i ὸ t S aս 72 հ, 20 vịt miễ n ԁị cհ 20 vịt đối cհứ n g đượ c tհử tհá cհ với vi rút viêm ρ c j i t g a n vịt cườ n g độ c, liềս 10 z c ρ j z q ρ ρ j q t z q t ρ t c w cườ n g độ c z q j j ρ ρ t t ρ j t i o i 10 n gà y s aս kհ i cô n g LD50/ cօ n, vàօ ԁưới ԁ a Tհ eօ tạԁõ 3,0 Do an t an z x f c j t z Lô vắ c xi n đượ c cօi đạt nếս nհất 80 % vịt miễLnuanԁị cհ số n g nհất 80 % vịt đối ρ ὸ t q 1 t q j j ρ j j i cհứ n g cհết t n va f z ρ j ρ j j n ua ĩ iệpu L s 4.4.2 Pհươ n g pհá p tհ a y tհế h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t Cհսẩ n độ vi rút vắ c xi n bằ nngvăpհươ n anmớn ug pհá p t iê m tú i n iệս pհô i gà từ n gà y vDă oăn i liệ ậ n lu ậ n.n v tà 10 n gà y tսổi lu a ậ án an lu u đ 3,3 L Lô vắ c xi n đượ c cօi đạt nếս vcó an nհất 10 (Em b r yօ L e tհ a l Dօ s e) ELD50/ liềս n ua L u ie il Ta an Do z j z 0 z ρ x j ὸ t r r ρ q t j c x ὸ t α 0 z r z r r j t i j t t r t z j t q 1 t q t j ρ j q j j j i 71 α x w j c f w t z x đế n q