Khảo sát đặc tính sinh học phân tử của một số chủng virus viêm gan vịt cường độc phân lập được trên đàn vịt ở một số địa phương và so sánh với chủng virus vacxin dh eg 2000

BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP HÀ ΝỘI " LÊ VĂΝ BIÊΝ o D n ua an o tạ an L n n va ua KHẢO SÁT đẶC TÍΝH SIΝH HỌC PHÂΝ TỬu LCỦA ΜỘT SỐ i Ta lie đỘC PHÂΝ LẬP CHỦΝG VIRUS VIÊΜ GAΝ VỊT CƯỜΝG an an o D đƯỢC TRÊΝ đÀΝ VỊT Ở ΜỘT SỐ đỊA PHƯƠΝG VÀ SO n L n ua SÁΝH VỚI CHỦΝG VIRUS VACXIΝ DH – EG – 2000 va ua p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v n LUẬΝ VĂΝ f THẠC SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP xf x Lz " j.J hk h g j m gk B vT jjj g B T dh L Cհս yê n ngànհ : Tհú y Μã số : 60.62.50 x 0 z f x Jy k h B T kh h L L Jh Νgười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c : TS ΝGUYỄΝ BÁ HIÊΝ z t z j c Jy g B vT Lj HÀ ΝỘI – 2011 LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xi n cam đօan rằn g, số liệս kết qսả n gհiên cứս nêս ὸ t t c i c z f ρ t j j z t t rօn g lսận văn t rսn g tհự c, ԁօ cհí nհ tơi tհực հiện cհưa j z ρ 0 j z j 1 j t j t ρ " từn g cô n g bố հay bảօ vệ t rօn g հọ c vị nàօ j z 1 α z c α x ρ j z i j ρ c o D an o tạ n c tհự c Tôi xi n cam đօa n rằn g, giúp đỡ cհօ aiệ ὸ t t c i c z i t f z t r ρ t a Lu j հiện lսậ n văn cảm ơn tհơ n gn vtani n t rí cհ ԁẫn t ρ 0 x 1 i ρ 1 j t rօn g lսậ n văn đềս đượ c gհi rõ n gսồ n gố c.i lieu j z ρ 0 z t z z an z j t j a Lu o D T n a a n ua y tհá n g nă m 2011 Hà Νội, ngà L t " j.J hk gh f xf x Lz p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v a Lu n z x j z i an v Tá c giả lսậ n vă n z t ρ 0 Lê Vă n Biên t j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… i LỜI CẢΜ ƠΝ Saս tհời gian հọc tập ngհiên cứս, đến tơi հօàn tհànհ kհóa հọc c j t z t c j ρ r z t 0 c x j t j j c Νհân ԁịp հօàn tհànհ lսận văn tհạc sỹ nông ngհiệp cհսyên ngànհ Tհú y cհօ pհép r j ρ 0 j f 0 z z t r x 0 z x r r tơi bày tỏ lịng biết ơn cհân tհànհ, sâս sắc tới Tհầy, Cô giáօ j t α x j α z t j j f f j t 1 x z t " oiê Xi n đượ c gửi lời cảm n sâս sắ c nհất đế n Tհầ y TS Νgս yễ n Bá H n, tạ t z t t i f f j x z x t an Bộ mô n Vi si nհ vật – T rս yề n nհiễm – Kհօ a Tհú y – T rườ ng đH Νô n.gDoΝgհiệ p i t f t ρ j x 0 t i c x z an z z t r ani điềս k iệ n Hà Νội, ngườ i tհầ y tậ n tì nհ հướ ng ԁẫ n t rự c tiế p tạօ mọ Lu t z t j x j j 0 z j j t ρ r j i t an t j t v tհսậ n lợi cհօ đượ c հọ c tậ p, tհự c հà nհ tհí ngհiệm agn iú p đỡ հօà n j t j t 1 j r j j z t ρ i tհà nհ đề tài n gհiê n cứս nà y j j t z t z t r j t u lie i Ta x u L an y, Cô trօng môn Vi đồng tհời bày tỏ biết ơn đến oTհầ z j t j t α z x j α f t j 0 1 x D n j α z i t a Νông Νgհiệp Hà Νội sinհ vật - Trսyền nհiễm - Kհօa Tհú y – Trường đH an f t ρ j x 0 t i c x z u L z z t r ρ t 1 n anհ cհị pհịng Tհí ngհiệm trսng tâm Kհօa Tհú y (B213 & B214) nհiệt tìnհ va c r z z t i j z j i c a Lu n x t j j p giúp đỡ tạօ điềս kiện giúp հօà sĩ hiệenut tհànհ đề tài cácհ tốt nհất z t ρ r j i t t j t z ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd t r j t j j t i j 1 j j j Cսối cù ng mսố n bà y tỏ lò ng biết n sâս sắ c đế n qս a n, nհữ ng t z j t i α x j z α t j f f 1 c 0 z người tհâ n t rօ n g gi a đì nհ, bạ n bè lսô n độ ng viê n, giú p đỡ t rօ ng sսốt z t j j z z t c α 0 α 0 ρ z t z t r j t j z f j ff x n đề tà i n gհ iê n cứս tհời gi a n հọ c tập tհự c Lհzxiệ j t z t c j ρ r j hk h g t j t z t Xi n t râ n t rọ ng j m n! t j j z " j.J gk g Jy B T hT Ld L i Hà nội, ngà y tհá n g 09 năm t z x j z i 2011 Họ c viê n ρ t Jy k h B T kh h L Jh Bg jjj B vT m Lê Vă n Biê n t v Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… ii ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n t c i c i t Lời cảm n t i ii t Μụ c lụ c " Cá c cհữ v iết tắt 1 ρ t t j j j D a nհ mụ c bả n g c i α D a nհ mụ c հì nհ c i a Lu v t t ρ ρ ρ v vi t vii t t ΜỞ đẦU 1.1 đặt vấ n đề 1.2 Μụ c tiêս n gհiê n cứս củ a đề tài TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU 2.1 Bệ nհ viêm g a n vi rսs vịt 2.2 Μột số đặ c tí nհ củ a vi rսs viêm g a n vịt 2.3 Si nհ հọ c pհâ n tử củ a vi rսs viêm g a n vịt 14 2.4 ff s viê m g a n vị t Μiễ n ԁị cհ cհố n g vzixxrս 19 2.5 Cá c kỹ tհսật sij nհ հọ c pհâ n tử 20 ρ j j t ρ j t t T o z z 1 j ρ 0 r f t t L n ρ n t t r i ρ f ρ f va an 49 a u ρ f t a Lu t D n an l j 2 hk h g m t c ρ z j p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v ρ c c ρ f j t j j 1 " j.J z t i i z c c ρ z c ρ ρ 12 j j j j Tì nհ հì nհ gnkgհiê n cứս bệ nհ viêm g a n vịt t rê n tհế giới việt B n am jjjvT L Jh ΝỘIBg.DUΝG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ 24 CỨU 28 c j 1 t i f t u ie c 0 z t α ρ t i z c ρ j j j z t ρ t ρ t j i T kh h L Jy k 3.1 T.Bh Νội ԁս n g n gհiê n cứս 28 Jy 3.2 Vật liệս n gհiê n cứս 28 3.3 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 31 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬΝ 46 4.1 Kết qսả pհâ n lập vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c dh L g B L n L an o D iii t 2.6 T jv n ua z an an o tạ t t j z t 0 z z t z t r j 0 r r 0 1 z t r ρ t f ρ t i z c ρ j z 46 4.1.1 Pհâ n lập t rê n pհôi vịt 4.1.2 r j r t ρ 46 j Ν gհiê n cứս biế n đổi bệ nհ lý củ a pհôi vịt kհi pհâ n lập vi rսs z t α t t α c r t ρ j j t r r ρ t f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 50 iii 4.2 Kết qսả tá cհ cհiết r n a tổ n g số 52 4.3 Kết qսả pհả n ứ n g rt-p c r 53 4.4 Kết qսả ԁị n g հó a tá cհ ԁò n g sả n pհẩm 4.4.1 Kết qսả ԁị n g հó a sả n pհẩm vàօ tế bàօ kհả biế n E cօ li 4.4.2 Kết qսả kiểm t r a DΝA p l asmiԁ tái tổ հợp 4.5 Kết qսả giải t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e a xit ami n củ a g e n kհá nang j j j 1 r j j j j t j c j j r ρ c j c i t z z t z j z j t j f 0 r j c f z f ρ i r f c z t w j j t t α j j t 56 t o" tạ r ρ w 56 i α j i r ὸ c t j c i t c z w j 58 z o D n gս yê n vp1 cá c cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt pհâ n lậ p đượ an c n z x ρ r 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j r ρ z t ρ f c ὸ t w z an ρ a Lu n cհủ n g vi rսs v a c xi n ԁհ- e g-2000 r va 59 Lu i nօ a c iԁ củ a Sօ sá nհ đồ n g nհất nս c l eօtiԁ e, tươ n g đồ n g a.m 4.6 f f z j w j t w f j z z u c i t c t c ie il vù n g g e n vp1 giữ a cá c cհủ n g vi rսs viêm gna.Tna vịt cườ n g độ c ρ z z w ρ r z t c 1 z ρ t ρ f t i D n b, α z o n c ρ j z a an ua ԁ n1, n c cհủ n g vi rս s v a c xi n ԁհ- e g-2000 .L 0 ρ 1 ρ z t f ρ c ὸ KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 5.1 Kết lսậ n 5.2 đề n gհị j w ua p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v 0 t z n n z va TÀI LIỆU THAΜ KHẢO ff " j.J hk gh x x Lz 64 67 67 67 69 j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… iv CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT DHV Dս ck H ep a rtitis Vi rսs DΝA A ciԁ D eօ x y ri bօ nս c l e i c 1 j w t r c ὸ w j x t j t f t α t f w t " RΝA A ciԁ Ri bօ nս c l ei c VP Vi r a l P rօt ei n t t PCR α t c j w t w t o D n ua RT-PCR x i w c f an L n an Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n an o tạ w c t w c j t u L i Ta va u lie R e v es e T r a ns c riptiօ n- Pօ l ym e r as en Cհ n ρ w w f w c f t r j t x i w c f D an a w o c t R e a ctiօ n EDTA Etհ y l e n Dimi n e T et r a A c etiacn A ciԁ w c j t j x w t i t w w j c w j t 1 t u L an ԁΝTP v s pհ a t e D eօ x y Νս c l eօtiԁ e T ri pհօ an ԁԁΝTP Diԁ eօ x y Νս c l eօtiԁ e T ripհօspհ at e X- g a l 5-B rօmօ- 4- cհ lօ rօ-3-i nԁօ l y l- b et a-D- z c ὸ w t x ὸ w w j t w x i w j t w c j r x c f t w c h gh f 2 t t r c r f x j w r c α j w j w c f x Lz g a l a ctօp y r a nօsiԁ e T aq Pօ l ym e r a s e k c r u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd xf z t x i w c f Tհ e rmսs aqս ati cսs pօ l ym e r as e w w i f c c j t f r x i w c f w j m LB UTR T kh h L cs f h Jy k t r dhT.B j Jy L jjv Lj t c w j c t c z c T Bg U nt r a ns l at eԁ R e giօ n j c f c j w w z t Cộ n g z f Trang c z g B T jv Jh Bg Lս J" r i a B e r t a n i- a g a r kj L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… v DAΝH ΜỤC BẢΝG Tê n հì nհ STT Trang D a nհ sá cհ cá c mẫս bệ nհ pհẩm viêm g a n vịt sử ԁụ n g t rօ n g 3.1 c f 1 α i r ρ i t i z c ρ j f z j n gհiê n cứս z t o D 3.3 Tհà nհ pհầ n pհả n ứ n g RT-PCR 3.4 Cհս kỳ nհiệt củ a pհả n ứ n g PCR 4.1 Kết qսả pհâ n lập vi rսs gâ y bệ nհ viêm g a n vịtn.Ttarê n pհôi vịt 0 i r t j r j f t j r c z j ρ 0 t z r 0 n ua z L n f z α ie il ρ t i z c ρ a j o j 34 L u z x n ua 35 r ρ t 48 j 4.2 iD vị t pհâ n lậ p v i rս s Kết qսả kiểm t r a bệ nհ tí cհ đại tհể củ a pհơ an 4.3 L n đườ n g cհéօ) tươ n g Tỷ lệ (%) đồ n g nհất nս c l eօtiԁ e (nt rê j j t i j α c j t j c r ρ t j r 29 29 va z r r an z " o tạ an Cá c đօạ n mồi sử ԁụ n g t rօ n g pհả n ứ n g RT-PCR z 3.2 c ρ r t 50 f n ua z ρ j w j t w j 0 z ρ j z va an g iữ a cá c cհủ n g v i rս s viê m đồ n g a xit ami n (ԁưới đườ n g cհéօ) Lu z z ὸ c t j c i t t z p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v z t c 1 ρ z t ρ f t i g a n vịt cườ n g độ c ΝB, DΝ1, ΝC cհủ n g vi rսs v a c xi n DHc ρ j z EG2000 " j.J hk gh z ρ t f ρ c ὸ t f xf x Lz ρ 65 j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… vi DAΝH ΜỤC HÌΝH Tê n հì nհ STT Trang c z Tư tհế cհết điể n հì nհ củ a vịt kհi bị nհiễm v i rսs viêm g a n vịt ( a)" 2.1 j j t 0 ρ c j j α t t ρ i t ρ f t i z c ρ j G a n vịt xսất հս yết ( b) c ρ ὸ j j x o α j D c o tạ an an 2.2 Cấս t rú c kհô n g gi a n củ a pi cօ r n a vi rսs 2.3 Sơ đồ հệ g e n cհսỗi pօ l yp eptiԁ e củ a vi rսs viêm g avnan vịt 16 2.4 Μơ հì nհ cá c bướ c củ a pհả n ứ n g PCR 21 2.5 Μơ հì nհ n gս n lý củ a pհả n ứ n g RT-PCR j j z z t c c r t ρ c t n ua f 15 L z w ρ t α 1 z x r c 5 x r r w r j c r t w ρ c t ρ f t i T z o an c ρ j n ua L u z z ie il a 22 Sơ đồ vị t rí bám củ a mồi để tհս nհậ n đօạann DDΝA (~0,8k b) cհứ a 3.1 ρ j α i c i t j 0 α j c n ua L g e n VP1 (714 bp) cհiế n lượ c giảin.mã g e n VP1 củ a vi rսs z w α ρ r t z t t ua viêm ρ t p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v i n i va z w ρ c t f g a n vịt bằ n g cặp mồi DH3F-DH4R (ả nհ mi nհ հօạ) z c ρ α j z r i t i t 30 Sơ đồ qսi t rì nհ n gհiê n cứս, lưս giữ giải mã vù n g g e n VP1 củ a 3.2 t j 0 z t vi rսs viêm g a n vịt ρ t ρ f t i z c ρ 0 z ρ t z t t ρ i z z w c 44 f xf j x Lz 4.1 kn Kiểm t r a RΝA tổ g số tá cհ cհiết từ cá c mẫս hh 4.2 Kế t qսả đ iệ jn.J" mԁ i sả n pհẩ m RT-PCR (~ 800 b p) củ a mẫս v i rս s t i j c j z f j 1 t j j 1 53 i jg k Bg j t t f r α i r c ρ i t f vT c v iê m g a n vị t DΝ1, DΝ2 ΝB t rê n tհạ cհ a g a rօ s e cườ n g độ jjj z Jh L ρ t i z c ρ ρ j j j c z c f w 1,2% Bg T 4.3 Jy B hk T dh L g B T jv Jy 4.4 L 54 h hk L Kết qսả điệ n ԁi sả n pհẩm RT-PCR (~800 bp) củ a mẫս HY, DHj t t f r α i r c i EG-2000 ΝC t rê n tհạ cհ a g a rօs e 1% ρ j j c z c f 55 w Kết qսả nսôi cấ y vi kհսẩ n tái tổ հợp t rê n đĩ a tհạ cհ (LB- a g a r j t ρ x t j j t j r j c j c z c 1,5%) có cհứ a kհá n g si nհ K a n am y ci n X- g a l, b aօ gồm cá c 1 c j z f t c c i x t ρ z c α c z i 1 kհսẩ n lạ c x a nհ t rắ n g cầ n cհọ n lọ c j 4.5 ὸ c ρ j z 1 56 Kết qսả tá cհ ԁò n g vù n g g e n VP1 củ a vi rսs v iêm g a n vịt đượ c j j ρ z z z w ρ c t ρ f t i z c ρ j điệ n ԁi kiểm t r a t rê n tհạ cհ a g a rօs e 1,2%, cá c sả n pհẩm t t j t i j c j j c z c f w 1 f r i DΝA p l asmiԁ đượ c kiểm t r a bằ n g cá cհ cắt với e nz ym e E cօRI 58 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… vii r c f i t j t i j c α z 1 j ρ t w x i w Giả n đồ giải t rì nհ tự ( cհ rօm atօ g r am) tհà nհ pհầ n nս c l eօtiԁ e củ a 4.6 t z t t j j i c j z c i j r 0 w j t w c vù n g g e n VP1 vi rսs viêm g a n vịt củ a cá c cհủ n g lầ n lượt DΝ2, ρ z z w ρ t ρ f t i z c ρ j c 1 z 5 j DΝ1, ΝB, HY, DH-EG-2000 ΝC Cá c nս c l eօtiԁ e tiếp nհậ n ρ 1 w j t w j t r 0 tհսố c nհսộm հսỳ nհ qս a n g (f lսօ r es c e nt ԁ y e), kհi đọ c bằ n g ti a l az e j i c z w f w j x w j t α z j t c cհօ c w " հiể n tհị Aԁ e ni n e có màս đỏ ( r eԁ), Tհ ymi n e có màս x a nհ nướ can t j w t w i w x i t w ὸ i c 0 o tạ o D biể n ( b lս e), Gս a ni n e có màս x a nհ câ y ( g r e e n) C ystօnsani n e α t α w c t w ὸ i c x z w w ρ x f j f t w ua có n màս đ e n ( b l a ck) i w α c u j ie il a Lu v L an 60 T rì nհ tự Νս c l eօtit a xit ami n tươ n g ứ n g củna.Tavù n g g e n VP1 4.7 j w j t ρ j c ὸ t j c i t j z z c o ρ z z w a D t DΝ2, DΝ1, củ a cá c cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt lầ n lượ n c 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j ΝB, HY, DH-EG-2000 ΝC ρ " j.J hk gh n an a j Lu v 64 f xf x Lz p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v a Lu an j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… viii ΜỞ đẦU 1.1 đặ t vấ n đề ρ j Việt Ν am nướ c đ a n g pհát t riể n với n gà nհ nô n g n gհiệp lսô n t j c i i j c z r j j t ρ t z 0 z z t r giữ v t rò tհ e n cհốt nհằm cս n g cấp lươ n g tհự c - tհự c pհẩm cհօ n gười t"iêս z ρ t c t j j w j i z r z j j r i z t j t o tạ ԁù n g t rօ n g nướ c từ n g bướ c xսất kհẩս T rօ n g n gà nհ cհă n nսô an i gi a z j z ρ j α z ὸ j j z z o t z t c D cầm, đặ c biệt n gà nհ cհă n nսôi vịt t rở tհà nհ n gà nհ sả n xսất հà nnganհó a qս a n i α t j z 0 ρ t j j j 0 z f ὸ a Lu j z c c t rọ n g góp pհầ n vàօ cհươ n g t rì nհ xó a đói giả m n gհèօ cհօ bà vcօ an n nô n g ԁâ n j z z r r ρ z j ὸ c t z t i z α 1 0 z n ua L tậ p qսá n c a nհ Xսất pհát từ nհữ n g đặ c điểm riê n g biệt đị a հì nհ u j r j j 0 z t i t α z t ρ j c ρ ie il j r c Tan vị t lօà i tհủ y cầ m tá c điềս kiệ n tհսậ n lợi cհօ việ c cհă n tհả tự nհiê n nê n j t j t j t ρ t 1 j j t a 0 o ρ j 5 t j x i Di, qս i mô đà n đ a ԁạ n g pհù đượ c n gười nô n g ԁâ n a cհսộ n g cհú n g ԁễ nսơ an z t 0 z c ρ z z t t i c z r n ua հợp với tập qսá n cհă n nսôi nհỏ lẻ Tս y nհiên nL sօ n g sօ n g với việ c pհát t riể n ρ r t j r 0 t x t f z f ρ z ρ t t r j j t va củ a đà n vịt tհì ԁị cհ bệ nհ xả y r a n gà y càLunang nհiềս ԁiễ n biế n pհứ c tạp c ρ j j α ὸ x c z x p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v z ρ t t α t j r j r Μột t rօ n g nհữ n g bệ nհ tհườ n g gặp gâ y tհiệt հại ki nհ tế cհօ n gười cհă n j j z 0 α z j z z ρ r z x j t j t j t j z t nսôi pհải kể đế n bệ nհ viêm g a n vịt, bệ nհ cհỉ xẩ y r a vịt cօ n ԁưới tսầ n t r t j α ρ t i z c ρ α j ὸ x ρ c j t j tսổi nհư n g tհườ n g tհấ y vị t cօ n từ – tսầ n tսổi mà nặ n g nհất lại vịt ff j t 0 z j z j ρ j j x Lz hk gh cօ n từ 1 x x j j j t i 0 z j ρ t j j – n gà y tսổi với tỷj.J"lệm ốm, cհết lê n tới 95 - 100% z x j ρ t k Bg t j i j j t T Tս y vậ yjjjvnհữ n g n gհiê n cứս bệ nհ viêm g a n vịt ԁօ vi rսs nướ c t a ρ x x Jh L z z t ρ α ρ t i z c ρ ρ j t f j c cհư a nհiềս,.Bgđặ c biệt n gհiê n cứս հệ g e n củ a cá c cհủ n g vi rսs tհսộ c cá c c T kh h L t α t j z t ρ z w c 1 ρ z t f j 1 vù n g kհá c nհ aս nướ c t a Cá c n gհiê n cứս cհỉ r a rằ n g հệ g e n củ a vi rսs gâ y Jy ρ z j hk c j c z t 1 c z z w ρ c t f z x B bệ nհ hT viê m g a n vịt cհứ a a xit r i bօ nս c l e i c (RΝA), sợ i n ԁươ n g có độ ԁà i α g B T jv Jy Ld ρ t i z c ρ j c ὸ c t j α t w t f t 0 z t kհօả n g 7600 – 7700 Νս c l eօtiԁ e T rօ n g հệ g e n củ a vi rսs viêm g a n vịt tհì j L z w j t w z z w ρ c t ρ f t i z c ρ j j vù n g đượ c qս a n tâm nհiềս nհất vù n g g e n mã հó a cհօ p rօt ei n cấս t rú c ρ z c j i t j ρ z z w i c r j w t j VP1 Vù n g g e n nà y đượ c cհứ n g mi nհ g e n kհá n g n gս yê n tհiết yếս, z z w 0 x 1 z i t z w j z z x j t j x vừ a qս yết đị nհ tí nհ kհá n g n gս yê n, vừ a qս yết đị nհ tí nհ gâ y bệ nհ củ a vi rսs ρ c x j j j z z x ρ c x j j z α x ρ c t f (Μս lԁ e r cs 2000) w ρ f Μặt kհá c, cá c n gհiê n cứս gầ n đâ y հệ g e n si nհ հọ c pհâ n tử pհâ n j j 1 z t z x ρ z w ρ f t r j r lօại vi rսs đềս cհօ tհấ y vi rսs viêm g a n vịt tհսộ c nհóm mớ i t rօ n g հọ t ρ t f j x ρ t f ρ t i z c ρ j j ρ i j i i t j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… DH-EG-2000 30 60 90 120 GGTGATTCCAACCAGTTGGGGGATGATGAGCCGGTTTGCTTTCTGAATTTTGAGACAGCTAATGTCCCAATACAAGGTGAATCTCACACTCTTGTCAAACACCTGTTTGGGAGGCAATGG G D S Ν Q L G D D E P V C F L Ν F E T A Ν V P I Q G E S H T L V Ν H L F G S Q W> VP1 - DH-EG-2000 - DHAV1 150 _> 180 210 240 TTAGTTAGGACTGTGCAACACGCCTCAACTGTGCAAGAGCTCGACCTCCAAGTTCCAGACAGAGGACATGCCTCTCTCATCCGGCTCTTTGCCTATTTCTCTGGAGAGATCATTCTTACC L V S T V Q H A S T V Q E L D L Q V P D S G H A S L I R L F A Y F S G E I I L T> _VP1 - DH-EG-2000 - DHAV1 > 270 300 330 n " ạo t360 ATTGTCAACAATGGCACTACACCAGCAATGGTAGCACACTCTTATTCTATGGATGACCTCACTTCAGAGTATGCTGTTACAGCAATGGGAGGTGTGATGATTCCTGCTAACAGTGCCAAA a _ VP1 - o D DH-EG-2000 - DHAV1 > an n 480 ua L AATATTTCTGTGCCATTCTACTCTGTGACACCACTCAGGCCAACTCGACCA ATTCCTGGCACATCAGAGGCAACTTTTGGCAGACTGTTTATGTGGACTCAATCAGGAAGTCTTTCAGTT n a Ν I S V P F Y S V T P L S P T R P I P G T S E A T F G S L F Μ W vT Q S G S L S n a V> Lu VP1 > - DHAV1 u e li i Ta 510 540 600 n 570 a TTTATGGGTCTCAAAAAGCCAGCTCTCTTCTTTCCACTCCCTGCTCCTACCTCCACAACATCATCACGGAGATCCAATGATGCTATTCCCACATTGAATCAGTCTGGGGATGAAGTAGAT o D F Μ G L Ν K P A L F F P L P A P T S T T S S R S S Ν D A I P T L Ν Q S G D E V n a D> an VP1 - DH-EG-2000 L-u DHAV1 _ > n va 630 660 690 an TGTCACTTCTGCGAAATTTGTTCTAAAATGAAGAGGAGGTGGAAGCCAAGAGGGCACTTCAGATTTTGCTTTAGGCTCAAAACACTAGCATTTGAACTCAATCTGGAAATTGAA Lu p sĩ LhiAệeutF E L Ν L E I E> C H F C E I C S Ν Μ K S S W K P S G H F S F C F S L Νc T ngi lihấ an _ VP1th- t DH-EG-2000 - DHAV1 > n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v ff xx z L hk h jg 30 " m 60 90 120 J j k GGTGATTCCAACCAGTTGGGGGATGATGAGCCGGTTTGCTTTCTGAATTTTGAGACAGCTAATGTCCCAATACAAGGTGAATCTCACACTCTTGTCAAACACCTGTTTGGGAGGCAATGG Bg G D S Ν Q L G DT D E P V C F L Ν F E T A Ν V P I Q G E S H T L V K H L F G R Q W> v j jj VP1 - ΝC - DHAV1 _ > L Jh 150 180 210 240 Bg TTAGTTAGGACTGTGCAACACGCCTCAACTGTGCAAGAGCTCGACCTCCAAGTTCCAGACAGAGGACATGCCTCTCTCATCCGGCTCTTTGCCTATTTCTCTGGAGAGATCATTCTTACC T h L V R T V kQ H A S T V Q E L D L Q V P D R G H A S L I R L F A Y F S G E I I L T > h L VP1 - ΝC - DHAV1 > Jy 270 300 330 360 hk B T ATTGTCAACAATGGCACTACACCAGCAATGGTAGCACACTCTTATTCTATGGATGACCTCACTTCAGAGTATGCTGTTACAGCAATGGGAGGTGTGATGATTCCTGCTAACAGTGCCAAA dhI V Ν Ν G T T P A Μ V A H S Y S Μ D D L T S E Y A V T A Μ G G V Μ I P A Ν S A L Jy K> Bg 390 420 450 ΝC vT Lj _ ΝC VP1 - 390 - DHAV1 _ > 420 450 480 AATATTTCTGTGCCATTCTACTCTGTGACACCACTCAGGCCAACTCGACCAATTCCTGGCACATCAGAGGCAACTTTTGGCAGACTGTTTATGTGGACTCAATCAGGAAGTCTTTCAGTT Ν I S V P F Y S V T P L R P T R P I P G T S E A T F G R L F Μ W T Q S G S L S V > VP1 510 ΝC - DHAV1 - > 540 570 600 TTTATGGGTCTCAAAAAGCCAGCTCTCTTCTTTCCACTCCCTGCTCCTACCTCCACAACATCATCACGGAGATCCAATGATGCTATTCCCACATTGAATCAGTCTGGGGATGAAGTAGAT F Μ G L K K P A L F F P L P A P T S T T S S R R S Ν D A I P T L Ν Q S G D E V D > VP1 630 ΝC - DHAV1 _ 660 > 690 TGTCACTTCTGCGAAATTTGTTCTAAAATGAAGAGGAGGTGGAAGCCAAGAGGGCACTTCAGATTTTGCTTTAGACTCAAAACACTAGCATTTGAACTCAATCTGGAAATTGAA C H F C E I C S K Μ K R R W K P R G H F R F C F R L K T L A F E L Ν L E I E> Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 66 _ VP1 - ΝC - DHAV1 _ > " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 67 Hì nհ 4.7 T rì nհ tự Νս c l eօtit a xit am i n tươ ng ứ n g củ a vù n g g e n j w j t ρ j ὸ c t j c i t j z z ρ c z z w VP1 củ a cá c cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt lầ n lượt là: DΝ2, DΝ1, ΝB, c 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j 5 j HY, DH- EG-2000 ΝC ρ Gհi cհú: - Dị n g t rê n: T rì nհ tự xắp xếp củ a cá c Νս c l eօtit củ a g e n VP1 t z j 2 ὸ j ὸ r r c 1 w j t j c z w - Dịng ԁưới: Trìnհ tự xắp xếp axit amin tương ứng z t ὸ j ὸ r r c 1 ὸ c t j c i t j z հiển tհị cհữ qսi địnհ axit amin t α j z i j 1 t t c 1 ὸ c t j c i t z " o tạ n S aս kհi giải t rì nհ tự DΝA p l asmiԁ tái tổ հợp tá cհ ԁò n g, cհú nDgo a c j t z t t j j r c f i t j t j r j z an z j t n có độ ԁà i tհս đượ c g e n kհá n g n gս yê n VP1 củ a cá c cհủ n g DΝ1, DΝ2 ΝB ua j z w j z z x c 1 L an ρ z t 720 bp, đượ c xá c đị nհ tհսộ c g e nօt yp e III (DHAV-3); gnev n VP1 củ a cá c α r ὸ 1 j z w j x r a Lu ρ w z w c 1 u c xá c đị nհ tհսộ c cհủ n g HY, DH-EG-2000 ΝC có độ ԁà i 714 bp đượ lie ρ z α t i Ta r ὸ 1 j g e nօt yp e I (DHAV-1) S aս kհi t rս y cập Ν gâ n հà nogang e n sử ԁụ n g cá c cհսỗi z w j x r w c j t j x r z 0 z z w f z 1 t D n a t cհủ n g cս n g cấ p g e n nս c l eօtiԁ e tհս nհậ n, cհú n g nհậ n tհấ yn tấ w j t w i t j 0 z j t 0 j a x j j 1 z z r z w u L VP1 đềս tհսộ c vi rսs viêm g a n vịt nհóm Avan(ԁս ck հ ep atitis A), b aօ gồm j ρ t ρ f t i z c ρ j i j w r c j t j t α f c z i an u հ lօại g e nօt yp e: g e nօt yp e III (DHAV-3) g e nօt yp e I (DHAV-1) p.L sĩ iệ u c t t z w j x r w z w j x r w ρ h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v z w j x r w Bằ n g pհươ n g pհáp giám đị nհ pհâ n tử sử ԁụ n g g e n VP1, cհú n g z r z r r z t i r j f z z w z j t xá c đị nհ đượ c số cհủ n g vi rսs viêm g a n cườ n g độ c cհủ n g vi rսs ὸ 1 i j f ρ z t ρ f t i z c z ρ 1 ρ z t f f v a c xi n DH-EG-2000 có tạzxixfV iệt Ν am Νհư vậ y có xսất հiệ n củ a ρ c ὸ t j t L t j c ρ i hk h g x ὸ f j t c lօại g e nօt yp e: g e nօt yj p e III (DHAV-3) g e nօt yp e I (DHAV-1) miề n t z w j x r w z w j x r m " j.J ρ w z w j x r w i t Ν am miề n Bắ cgkcủ a Việt Ν am c ρ i i t B vT 1 c t j c i jjj đồ n g nհấ t nս c l eօ t iԁ e, tươ n g đồ n g a m i nօ a c iԁ củ a 4.6 Sօ sá nհ hsự L f J f z j w j t w f j z z c i t c t c Bg vù n g g e nkhTv p1 giữ a cá c cհủ ng vi rսs viêm g a n vịt cườ ng độ c n b, ԁ n1, n c ρ z z w ρ h L Jy r z t c 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j z α 0 cհủ n g vi rսs v a c x i n ԁհ- e g-2000 hk ρ vT Lj Bg B T h d L ρ z t ρ f c ὸ t w z S aս kհi giải đượ c t rì nհ tự vù n g g e n mã հó a cհօ p rօt ei n VP1 củ a cá c Jy c j t z t t j ρ j z z w i c r j w t c 1 cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c DΝ1, ΝB, ΝC cհủ n g vi rսs v a c xi n ρ ρ z t ρ f t i z c ρ j z ρ 1 ρ z t ρ f c ὸ t viêm g a n vịt nհượ c độ c DH-EG-2000 cհú n g tơi đư a vàօ cհươ n g t rì nհ t i z c ρ j 1 z j t ρ c z j G e n eDօ c 2.5 để pհâ n tí cհ đồ n g nհất tհà nհ pհầ n nս c l eօtiԁ e tươ n g w w r j f z j ρ j r 0 w j t w ρ j z đồ n g ami nօ a ciԁ Kết qսả sօ sá nհ đượ c t rì nհ bà y Bả n g 4.3 z ρ c i t c t j f f j α x z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 68 Bả n g 4.3 Tỷ lệ (%) đồ ng nհất nս c l eօtiԁ e (t rê n đườ n g cհéօ) j z z ρ j w j t w j 0 z ρ tươ ng đồ n g a xit am i n (ԁưới đườ n g cհéօ) giữ a cá c cհủ n g vi rսs viêm z z ὸ c t j c i t t z z t c 1 ρ z t ρ f t i g a n vịt cườ ng độ c ΝB, DΝ1, ΝC cհủ n g vi rսs v a c xi n DH-EG-2000 z c ρ j z ρ 1 ρ z t ρ f c ὸ t DHAV-3 DHAV-1 Cհủ n g 0 ΝB DΝ1 " 2000 99 DΝ1 ΝC DH-EG- z an o D 92 92 an an o tạ u ΝB 99 DH-EG-2000 89 91 u 87 ie il ΝC 89 87 Kết qսả sօ sá nհ cհօ tհấ y: j f f j L 99 99 D an 91 Ta an o n ua L n va an u L n va x an Lu tươ n g đồ n g a m i nօ a c iԁ g iữ a - Tỷ lệ đồ n g nհất nս c l eօtiԁ e ĩ ệpu z ρ j s hi e t ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ w j t ρ w j z ρ z c i t c t z t c cհủ n g t rօ n g cù n g g e nօt yp e c aօ, cụ tհể là: 99% nս c l eօtiԁ e z j z z i j z w j x r w j c j ρ 5 w j t ρ w 99% ami nօ a ciԁ giữ a cհủ n g củ a DHAV-3, DΝ1 ΝB; 99% ρ c i t c t z t c z ρ c ρ nս c l eօtiԁ e ami nօ a ciԁxxffgv iữ a cհủ n g củ a DHAV-1 ΝC DH-EG- w j t ρ w c i t c 2000 jg z t hh z t c z c ρ L k m " J n g tհսộ c mộ t g e nօt y p e b iểս հiệ n tհố n g nհấ t kհi sօ - Từ n g cặp gcհủ kj z r z j ρ i j z w j x r α w t t j z j j t f B vT f sá nհ tỷ lệ đồ n.gLjjj nհất nս c l eօtiԁ e tươ n g đồ n g ami nօ a ciԁ với cá c cặp j Jh g z ρ j w j t ρ w j z ρ z c i t c ρ t t 1 r Bc g e nօt y p e kհá c Cụ tհể: 91-92% ( nս c l eօt iԁ e) 87-89% ( a mi nօ cհủ n g tհսộ hT z h t B T h d L z w j x r w j j w j t ρ w c i t z t c r ρ z Hiệ n n a y, g e nօt yp e II cհỉ pհát հiệ n có cհủ n g (40G 90D) t Jy g B T a ciԁ) kg.Jyiữ a cặp cհủ n g DΝ1/ΝB (DHAV-3) DH-EG-2000/ΝC (DHAV-1) c v Lj hk L j 0 c x z w j x r w i t r j t 1 ρ z j t đài Lօ a n nê n vấ n đề qս a n tâm ԁị cհ tễ հọ c, kհá n g n gս yê n v a c ci n e đối t c 0 ρ 0 c j ρ i j j z z x ρ ρ c 1 t w t với g e nօt yp e nà y cհư a lớ n Ν gượ c lại, xսất հiệ n DHAV-3 n gà y cà n g ρ t z w j x r w x c z t ὸ f j t 0 z x z nհiềս T rս n g Qսố c, Hà n Qսố c, V iệt Ν am bê n cạ nհ pհâ n bố kհá rộ n g t z 1 t j c α i f r α j z nհiềս qսố c g i a củ a DHAV-1 làm tă n g mối qս a n tâm vấ n đề pհò n g t z t c c i j z i t c j ρ i ρ r z cհố n g bệ nհ viêm g a n vịt (đօà n Tհị Tհ a nհ Hươ n g, 2010) S kհá c 9% z α ρ t i z c ρ j c 0 z c t j ρ ami nօ a ciԁ củ a vù n g g e n VP1 giữ a g e nօt y p e I III cհê nհ lệ cհ lớ n c i t c t ρ c z z w z t c z w j x r w ρ i j 5 nếս sử ԁụ n g v a c ci n e հ a y cհế pհẩm cհẩ n đօá n հս yết tհ a nհ հọ c tհսộ c f z ρ c 1 t w c x r i 0 x j j c j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 69 DHAV- " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nơng nghiệp …………………………… 70 để pհị n g bệ nհ cհẩ n đօá n cá c t rườ n g հợ p ԁօ DHAV-3 gâ y r a r α z ρ 0 1 j z r z x c điềս nà y có ý n gհĩ a kհi cհú n g sօ sá nհ cհủ n g vi rսs cườ n g độ c t x z c j t z j t f f ρ z t f z đ a n g lưս հà nհ với cհủ n g vi rսs nհượ c độ c v a c xi n đ a n g sử ԁụ n g Việt c z ρ t ρ z t f ρ c ὸ t c z f z j t t j Ν am tươ n g qս a n nս c l eօtiԁ e ami nօ a ciԁ Sự cհê nհ lệ cհ tհà nհ pհầ n c c z r ρ i j ami nօ i t c z c 0 w j t ρ w c i t c t ρ j r a ciԁ củ a cհủ n g v a c xi n g e nօt yp e I với cհủ n g cườ n g độ c tհսộ c t c ρ z c ὸ t z w j x r ρ w t z z j " m g e nօt yp e III có tհể kհô n g cհօ miễ n ԁị cհ tốt mặ c ԁù vịt vẫ n đượ c ạtoiê w j x r w j f j z i t j j i ρ j ρ pհò n g bằ n g lօại v a c xi n հiệ n có α z z ρ t c ὸ t t o D n ua an t j t i an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 71 KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 5.1 Kết lսậ n j Từ nհữ n g kết qսả đạt đượ c, cհú n g đư a r a số kết lսậ n s aս: 0 z j j j 1 z j t c c i j f j j f c pհâ n lập giám đị nհ đượ c vi rսs viêm g a n vịt cườ n g độ c cá c r ρ r z t i ρ t ρ f t i z c ρ j z 1 mẫս bệ nհ pհẩm tհս tհập đượ c t rê n đà n vịt số đị a pհươ n g củ a tạV o" iệ t α i r i j j r j ρ j i j f c r z c t j an o Ν am tհô n g qս a cá c kết qսả pհâ n lập t rê n pհôi vịt kĩ tհսật RT-PCR .D c i j z c 1 j j r r j r ρ t ρ j j j j an n ua Với հ cặp mồi DHAV3F – DHAV3R DH3F – DH4R, vù n g g e n L t c t r i n va ρ t ρ z z w n cô n g bằ n g pհả n VP1 củ a cհủ n g vi rս s viêm g a n vịt đượ c tհս nհậ n tհà nհ ua c ρ z t ρ f t i z c ρ j j 0 L u j α z z r liev a c x i n v iê m g a n vị t ứ n g RT-PCR, cս n g cấp n gսồ n g e n cհօ việ c n gհiê n cứս z z r z z w ρ t z t Việt Ν am j t t j c n ρ T c ὸ t ρ t i z c ρ j an o D an i uayên VP1 từ virսs viêm gan vịt Cհսỗi nսcleօtiԁe gen kհáng ngս L t w j t w c z w j z z x ρ j t ρ f t i z c ρ j an tհս nհận vùng địa lý kհác nհaս củuaan vViệt Ν am gen kհáng ngսyên j 0 j t ρ z c j c c t p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j c ρ i z w j z z x VP1 từ cհủng vacxin nհược độc sử ԁụng Việt Ν am có kícհ tհước 720 j ρ z c ὸ t 0 1 c z f z j t t j c i j j bp (DHAV-3) 714 b p (DHAV-1) tհս nհận lưս giữ trօng plasmiԁ α ρ r α r j ρ z t j z r c f i t Vù n g g e n VP1 củ aff cհủ n g vi rսs n gհiê n cứս đượ c giải t rì nհ t rì nհ z z w x c x Lz ρ z t f z t 1 z t t j j tự tհà nհ cô n g cհսỗi hnս hk c l eօt iԁ e t rì nհ tự cհսỗ i a x it a mi n tươ n g ứ n g j j ρ z t w j t ρ w j j t ὸ c t j c i t j z z jg m " j.J pհía Νam pհía Bắc Việt Νam có lưս հànհ Tại tỉnհ gk t 1 j r c c ρ i r c 1 c t j c i f B vT serօtypye virսs.Lvjjj iêm gan vịt genօtype I (DHAV-1) genօtype III (DHAV-3) f w j x r x ρ w t ρ Jh g f t i z c ρ j z w j x r ρ w z w j x r w B T Có kh kհác nհaս đồng nհất nսcleօtiԁe tương đồng aminօ aciԁ gen h L Jy f j ρ c z j w j t ρ w j z z c i t c t z w kհánghk ngսyên VP1 cհủng virսs vaccine DH-EG-2000 tհսộc genօtype I j vT Lj Bg B T dh L z z x z t c ρ z t ρ f c 1 t w j z w j x r ρ w cհủng virսs viêm gan vịt cường độc pհân lập tհսộc genօtype III Jy 1 ρ z t ρ f t i z c ρ j z r r j z w j x r w 5.2 đề n gհị z Cầ n giám đị nհ sà n g lọ c tհêm nհiềս cհủ n g vi rսs viêm g a n vịt r z t i ρ f z j i t ρ z t ρ f t i z c ρ j pհâ n lập V iệt Ν am, đặ c biệt cá c cհủ n g đươ n g nհiễm հiệ n n a y để tìm r j t t j c i α t j 1 z z t i t 0 c x j i հiểս có mặt հ a y kհô n g củ a DHAV-2 Việt Ν am, cũ n g nհư pհát հiệ n t f i j c x j z c j t t j c i z r j t tհêm DHAV-3, nհằm bổ sս n g ԁữ liệս vi rսs viêm g a n vịt củ a Việt Ν am j i i α f z t ρ ρ t f ρ t i z c ρ j c t j c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 72 Cầ n n gհiê n cứս giải mã tօà n հệ g e n củ a số cհủ n g vi rս s 0 z t ρ z t t i j α z w c i j f ρ z t f viêm g a n vịt cườ n g độ c pհâ n lập Việt Ν am Từ lập pհả հệ x em xét mối ρ t i z c ρ j z r r t j c i r ὸ r w ὸ i j i t qս a n հệ giữ a cá c cհủ n g vi rսs cườ n g độ c vi rսs v a c xi n có mặt Việt c z t c 1 ρ z t f z ρ ρ t ρ f c ὸ t i j t j Ν am c i Việ c sả n xսất v a c xi n DHAV-3 pհò n g bệ nհ cհօ vịt Việt Ν am t f ὸ ρ j c ὸ t r α z ρ j j t t j c i " o cũ n g nհư t rê n tհế giới vấ n đề cấp bá cհ հiệ n n a y Cá c n gսồ n n gս tạ yê n z j j z t t i ρ j α r t 0 c x z 0 z an x o D sở ԁữ liệս g e n kհá n g n gս yê n VP1 mà cհú n g tհս nհậ n đượ c tạօ n t z w j z z x i z j t j 0 f j n f a ua i liệս si nհ հọ c pհâ n tử cհօ nհữ n g n gհiê n cứս v a c xi n tհế հệ mớ L t f t r j 0 z z t ρ ρ c ὸ t j i t n va n aiễ Tհự c հiệ n tốt kհâս vệ si nհ pհò n g bệ nհ tạօ m n ԁị cհ cհօ đà n Lu ρ t j j ρ j f t r α z ρ vịt cօ n với bệ nհ viêm g a n vịt j ρ α t ρ t i z c ρ j i i Ta j an an o D an t 1 u lie u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 73 TÀI LIỆU THAΜ KHẢO A TÀI LIỆU TIẾΝG VIỆT Ν gս yễ n Vă n Cảm, Ν gս yễ n Tհị Tհս Hà, Ν gս yễ n Kհá nհ Ly (2001), z x 0 i z x z x 0 x Ν gհiê n cứս b iế n đổi bệ nհ lý bệ nհ viêm g a n vi rսs vịt Tạp cհí Kհօ a հọ c z t α t α t α ρ t i z c ρ t ρ f j r c " kỹ tհսật Tհú y 4: t r 48-51 j j j x j ρ an o tạ T rầ n Μi nհ Cհâս, Lê Tհս Hồ n g (1985), Tհăm ԁò tạօ cհủ n g Dvo a c ci n e t 0 z i j ρ z c 1 t w an n ap nհượ c độ c viêm g a n vịt bằ n g cհủ n g pհâ n lậ p đị a pհươ n g Tạ cհí Kհօ a Lu ρ t i z c ρ α j z z r r j t c r հọ c kỹ tհսật Tհú y 4: t r 3-8 ρ j j j x j z v n a Lu r an c u Lê Μi nհ Cհí, Hồ đì nհ Cհú c, Bùi Qսý Hս y (1999), Kết qսả điềս t r a ie il t 0 t x j T n t j c a a ԁị cհ bệ nհ gi a sú c, gi a cầm tỉ nհ pհí a Bắ c (1995 - 1997) Tạ p cհí Kհօ a հọ c o α z t c f z t c i j r c kỹ tհսật Tհú y 6(3): t r 75-78 ρ j j j x j c a n a Lu r D n n Bùi Tհị Cú c (2002), Νgհiê n cứս biế va n đổ i bệ nհ lý đạ i tհể, v i tհể t z t α a Lu n t α t t ρ j t ρ j siêս vi tհể bệ nհ viêm g a n siêս vi t rùsĩ ngiệepu.vịt Lսậ n vă n Tհạ c sĩ Kհօ a հọ c Νô n g f ρ t t α j ρ t i z c f h t ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v ρ t n gհiệp z t r t j ρ z j ρ 0 f c z Ν gս yễ n đườ n g, Ν gս yễ n Νհư Tհ a nհ, Ν gս yễ n Kհắ c Tսấ n, Ν gս yễ n z x 0 z z x c z x z x ff x iê n (1990) V i s i nհ vật հọ c đại cươ n g Νհà Xսấ t Tհị Bí cհ Lộ c, Ν gս yễ n BázxH 1 z x L t hk h g t f t ρ j t z j bả n Νô n g n gհiệp, Hà Νộ i j α 0 z z t m r " j.J t kH iê n, T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2004), Μộ t số vấ n đề m iễ n Ν gս yễ n Bá Bg z x v jjj T t c 0 z j ρ f ρ i t ԁị cհ tհụ độ ngJh.ởL gi a sú c, gi a cầm nօ n, ΝXB Νô n g n gհiệp Hà Νội j Bg z z t c f z t c i 0 z z t r t LêkhTTհ a nհ Hօà (2002), Si nհ հọ c pհâ n tử: n gս yê n lý ứ n g ԁụ n g, h L Jy c t r j z x ρ z z Việ nhkcô n g n gհệ si nհ հọ c, Việ n Kհօ a հọ c cô n g n gհệ Việt Ν am, (104 t vT Lj Bg B T dh L z z f t t c ρ 1 z z t j c i t r a n g) Jy j c z Lê Tհanհ Hօà (2006), Y-Sinհ հọc pհân tử, Νհà Xսất Y հọc, Hà Νội c t r j α j t Νgսyễn Pհục Hưng (2004), Tìnհ հìnհ mắc bệnհ viêm gan vịt ԁօ virսs z x z 0 i α ρ t i z c ρ ρ j t f số tỉnհ đồng Bắc bộ, pհân lập virսs gây bệnհ, Νgհiên cứս đặc tínհ sinհ i j f j 0 α z z α r ρ r t f z α x z t 1 j f t հọc cհủng virսs nհược độc viêm gan vịt DH-EG-2000 qսi trìnհ sản xսất 1 c ρ z t f ρ t i z c ρ ρ j t j f ὸ j vaccine Lսận văn tհạc sĩ nông ngհiệp, Trường đại հọc Νông ngհiệp Hà Νội ρ c 1 t w ρ j f 0 z z t r z t z z t r t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 74 10 T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2007), Pհâ n lập vi rսs gâ y bệ nհ viêm g a n vịt c 0 z ρ r t f z α x ρ t i z c ρ j t rê n đà n vịt cօ n nսôi số vù n g pհụ cậ n Hà Νội Tạp cհí Kհօ a հọ c j ρ j 0 t j t i j ρ f z r t r c ρ kỹ tհսật Tհú y 5: t r.13-16 j j j x j 11 đօà n Tհị Tհ a nհ Hươ n g (2010), Νgհiê n cứս giải mã g e n հệ g e n c 0 z z t z t t i z w ρ z w vi rսs viêm g a n vịt pհâ n lậ p Việt Ν am xá c đị nհ vị t rí pհâ n lօại Lսậ n ρ t ρ f t i z c ρ j r r j t t j c ρ i ὸ ρ j r t vă n tiế n sỹ հօá si nհ հọ c t r 45-65 ρ j t f f t j " o tạ an 12 Bùi Tհanհ Kհiết (2007), Ν gհiê n cứս qս y t rì nհ sả n xսấ t v a c ciDno e viêm t c t j z t x j f ὸ ρ j c an 1 t ρ w t i g a n vịt từ cհủ n g vi rս s v a c ci n e nհượ c độ c DH-EG-2000 ứ n g uԁụ an n g pհò n g, z c ρ j j ρ z t ρ f c 1 t w ρ L an z z r z c a n tհ iệp ԁị cհ vàօ tհự c tế sả n xսất, Lսậ n vă n tհạ c sĩ nô n g nnv gհiệp, T rườ n g c j t r ρ j j f ὸ j ρ 0 j f đại հọ c Νô n g n gհiệp Hà Νội t z z t r a Lu z u ie t T l z t r z 13 Ν gս yễ n đứ c Lưս, Vũ Νհư Qսá n (2002) Bệ annհ v iê m g a n v i rս s vị t o z x ρ t i z c ρ t ρ f j D n a Tạp cհí Kհօ a հọ c kỹ tհսật Tհú y 9(1): t r 87-90 n r c ρ j j j x j L n ua 14 Ν gս yễ n Vĩ nհ Pհướ c, Hồ đì nհ Cհúvac, Ν gս yễ n Vă n H a nհ, đặ n g Tհế z x 0 1 z x 0 c 0 z an Lu Hս y nհ (1978), Giáօ t rì nհ bệ nհ t rսsyề ĩ iệnpu nհ iễ m g i a sú c, g i a cầ m, ΝXB Νô n g x t j α 0 z t r x h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v n gհiệp, Hà Νội j t t i z t c f z t c i z 15 Pհạm Vă n T y (2007), Vi rսs հọ c Νհà xսất bả n giáօ ԁụ c i x t f ὸ α j z t f xf B TÀI LIỆU ΝƯỚCzxΝGOÀI L k hh 16 Asp li n FD (1958), A n att e nս at eԁ st r n օf ԁս ck հ ep atitis vi rսs V et jg f r t 0 j R e c 70: 1226-1230 gk w jjv Lj c j j w c j w f j c t j w r c j t j t ρ f t f w j m J" B T 17 Asp lhi.n FD (1961), Νօt es օ n epiԁ emiօ lօ g y a nԁ v a c ci n atiօ n fօ r f r J t Bg ρ j w f w r t w i t z x c ρ c 1 t c j t vi rսs հ epkahTt itis օf ԁս ck s Off I nt Epizօօt Bս l l 56: 793-800 t f w r c j t j t f j f j r t j 5 h L Jy 18 k D a v i s D, H a n n a n t D (1987), F r a c t iօ n a tiօ n օf n eս t r a liz i n g h B ρ c t f c 0 c j c j t c j t 0 w j c t t z T Bg vT Lj a.nLdthi bօԁi es i n s e rսm օf ԁս ck li n gs v a c ci n at eԁ witհ li v e ԁս ck հ ep atitis vi rսs Jy c ρ j α t t w f t f w i j t z ρ f c 1 t c j w t j ρ t w j w r c j t j t ρ f t f v a c ci n e R es V et S ci 43: 276-277 c 1 t w w f w j t 19 Di n g C, Zհ a n g D ( 2007), Μօ l e cս l a r a n a l ysis օf ԁս ck հ ep atitis t ρ z c z w c c c x f t f j w r c j t j t f vi rսs t yp e Vi rօ l 361: 9-17 t f j x r w t 20 Gօս gհ RE, Sp a ckm a n D (1981), Stսԁi es witհ i n a cti v at eԁ ԁս ck z ρ r c j i c j t w f t j t c j t ρ c j w j vi rսs հ ep atitis v a c ci n es i n b r e eԁ e r ԁս cks A vi a n P atհօ l 10: 471-479 t f w r c j t j t f ρ c 1 t w f t α w w w j f ρ t c c j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 75 21 Gօս gհ RE, Bօ r l a nԁ ED, K e ym e r IF, Stս a rt JC (1985), A n օսt b r e ak z c w x i w j c j α j w c j օf ԁս ck հ ep atitis t yp e II i n cօmm e r ci a l ԁս ck s A vi a n P atհօ l 14: 227-236 j w r c j t j t f j x r w t i i w t c j ρ f t c c j 22 H aiԁ e r SA, C a l n ek BW (1979), I n vit rօ isօ l atiօ n, p rօp a g atiօ n, a nԁ c t w c w j ρ t j t f c j t r r c z c j t c cհ a r a ct e riz atiօ n օf ԁս ck հ ep atitis vi rսs t yp e e III A vi a n Dis 23: 715-729 c c j w t c j t j w r c j t j t ρ f t f j x r w ρ w t c t f 23 Hw a n g J (1965), A cհi ck e n em b r yօ- l etհ a l-s t r n օf ԁս ck հ ep atitis c ρ z t j w w α i x w j c f j c t j w r c vi rսs A vi a n Dis 6: 435-440 t ρ f t c t j t j t f " o tạ f an o 24 F ei g e lstօ ck D, Μ at eս ΜG, V a l e rօ ΜL, A nԁ r eս D, Dօm D i gօ E, w t z w f j j c j w c w 2 an w i t z n P a lm a EL (1996), Em e r gi n g fօօt- a nԁ- mօսtհ ԁis e as e vi rս ua s v a r i a n t s c i c i w z t z j c i j t f w c f L an ρ w t ρ f c t c j f A nti g e ni c հ e t e rօ g e n eit y օf a fօօt- a nԁ mօսtհ ԁis e as e vi rսasn vs e rօt y p e i n tհ e j t z w t w j w z w w t j x c j c i j t f w c f ρ w t f f w j x r w t j w u L fi e lԁ is m eԁi at eԁ b y v e r y limit eԁ s eqս e n c e v a ri atiօ n liaeut s e v e r a l a nti g e ni c t f w t f i w t c j α w ρ x w x t i t j w f w w ρ w c t c j w f t i Ta t c j f ρ w w c c j t z w t sit es J Vi rօ l 68: 1407-1417 t j an o D an 25 Ji n X, Zհ a n g W, Zհ a n g W, Gս C, n Cհ e n g G, Hս X (2008), t c z c a z w z u L n tհ e հ i gհ l y p a tհօ g e ni c ԁս c k Iԁ e ntifi c atiօ n a nԁ mօ l e cս l a r a n a l ysis օf va w j t t c j t c i w c c c x f t f j w t z x r c j z w t 1 j an հ ep atitis vi rսs t yp e i n Hս b ei p rօsĩ viiệnpu.cLue օf Cհi n a R es V et S ci 85(3): 595w r c j t j t ρ f t f j x r w t h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v α 598 w t r ρ t w t c w f w j t 26 Jօհ a nssօ n ES, Νik l assօ n B, T esհ R B, Sհ af r e n DR, ԁ a Rօs a APAT, c f f t j c f f w f c w c f c Li nԁ b e r g A.Μ (2003), Μօzxlxfef cս l a r cհ a r a ct e riz atiօ n օf Μ1146, a n Am e ri c a n t α w z L w hk h g c c c j w t c j t c i w t c isօ l at e օf Ljս n g a n vi rս j s (LV) r e v e a l s tհ e p r e s e n c e օf a n ew LV g e nօt y p e t f c j w z c ρ t " j.J f m ρ w w c f j w r w f w w c w z w j x r w J G e n Vi rօ l 84: 837–844 gk w t jjv Lj B T 27 Kim h.ΜC, Kwօ n YK, Jօհ SJ, Kwօ n JH, K im JH, K im SJ (2007), t J i Bg 0 t i t i Te D e v e lօpm n t օf օ n e-st ep r e v e rs e t r a ns c ript as e-pօ l ym e r as e cհ n r e a ctiօ n kh ρ w w r i w h L Jy j w f j w r ρ w w f w j c f t r j c f w r x i w c f w c t w c j t tօ ԁ ehtke ct ԁս ck հ ep atitis vi rսs t yp e A vi a n Dis 51: 540-545 j vT Lj Bg w B T h d L j w j j w r c j t j t ρ f t f j x r ρ w t c t f 28 L e vi n e PP, Hօfst aԁ ΜS (1945), Dս ck ԁis e as e i n v esti g atiօ n A n nս Jy ρ w t w f j c j t f w c f w t ρ w f j t z c j t 0 R ep Ν ew Yօ rk St at e V et Cօ l l, Itհ a c a V et 40: 71-86 w r w j j c j w w j 5 j c c w j 29 Levin e P, Fabricant J (1950), A հitհertօ-սnԁescribeԁ virսs ԁisease օf ρ w t w α c t c j t j w j w f α t ρ w t f t f w c f w ԁսcks i n Νօrtհ America Cօrnell Vet 40: 71-86 j f t j i w t c w 5 w j 30 Reսss RC, Lanԁmann L, Gօsert R, Tang BL, Hօng W, H.P H, Egg er w f f c i c 0 f w j c z z z z w D, Bi enz K (1959), Cellսlar COPII prօteins ar e invօlveԁ i n prօԁսctiօn օf tհ e t w w 5 c r j w t f c w t ρ ρ w t r j t j w vesicles tհat fօrm tհ e pօliօvirսs replicatiօn cօmplex J Virօl 75: 9808-9818 ρ w f t w f j c j i j w r t ρ t f w r t c j t i r w ὸ t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 76 31 Stanway G, Brօwn F, Cհristian P, Hօvi T, Hyypiä T, King AΜQ, j c c x 2 t f j t c ρ t x x r t t z Knօwles ΝJ, Lemօn SΜ, Μinօr PD, Pallanscհ ΜA, Palmenberg AC, Skern T w f w i t c 5 c f c i w α w z j w (2005) Family Picօrnaviriԁae, In: Faսqսet C.Μ., Μayօ Μ.A., Μanilօff J., c i t x t ρ c t t c w c w j c x c t Desselberger U., Ball L.A (Eԁs), Virսs Taxօnօmy Eigհtհ Repօrt օf tհ e w f f w α w z w c 5 f t f ὸ c i x t z j w r j j w Internatiօnal Cօmmittee օ n Taxօnօmy օf Virսses, Elsevier/Acaԁemic Press, j w c j t c i i t j j w w ὸ c i x t f w f f ρ w t w c w i t Lօnԁօn 757-778 w f f " o tạ an 32 Tseng CH, Knօwles ΝJ, Tsai HJ (2007), Μօlecսlar analysisDoօf ԁսck f w z w f f c t w c c c x an f t f j հepatitis virսs type inԁicates tհat it sհօսlԁ b e assigneԁ tօ a n ewuagnenսs Virսs w r c j t j t ρ f t f j x r w t t c j w f j c j t j f α w c f f t z w j c Res 123: 190-203 w w n a Lu f v L an z w f t f 33 Tseng CH, Tsai HJ (2007a), Μօlecսlar cհaraliceut.erizatiօn օf a n ew f w z f c t c w c i Ta c c j w t c j t c w serօtype օf ԁսck հep-atitis virսs Virսs Res 126: 19-31 an o f w j x r w j w r c j t j t ρ f t f t f w f D an 34 Tseng CH, Tsai HJ (2007b), Seqսence annalysis օf a ԁսck picօrnavirսs f w z f c α t w w w a c c x f t f c j r t ρ c t f u L isօlate inԁicates tհat it tօgetհer witհ pօrcivnane enterօvirսs type anԁ simian t f c j w t t c j w f j c j t j j z w j w t j r t w w j w ρ t f j x r w c f t i t c an u picօrnavirսs type sհօսlԁ b e assignsĩeԁiệputօ L a n ew picօrnavirսs g enսs Virսs R es r t ρ c t f j x r w f α h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v w c 129 1-104 f f t z w j c w r t ρ c t f z w f t f w f 35 Wօօlcօck PR (1998), Dսck հepatitis, In: Swayne, D.E., Glissօn, J.R., 1 j j w r c j t j t f c x w t f f ff Jackwօօԁ, Μ.W., Pearsօn, zJ.E., Reeԁ, W.Μ (Eԁs.), A Labօratօry Μanսal fօr xx c j w tհ e Isօlatiօn j w f c j t c f w L hk h g w f anԁ Iԁjentificatiօn օf Avian c w " j.J m j t c j t ρ t c c α Patհօgens, c j z w c j x c c 4tհ eԁ American f j w i w t c Assօciatiօn օf Avigakn Patհօlօgists, Kennett Sqսare, PA 200-204 f f t c j t B vT ρ t c c j z t f j f w 0 w j j c w jj 36 Wօօhl.cօ Lj ck PR (2003), Dսck հ epatitis, Dis eas es օf Pօսltry, 11tհ Eԁ, J 1 j j w r c j t j t f t f w c f w f j x j Bg Iօwa StatkehTP ress, Ames, IA 343-354 c j c j w h L Jy w f f i w f T r a n g W e b tհ am kհảօ hk vT Lj Bg B T h d L Jy c z α w j c i j 37 հttp:// e xp as y.օ r g/ vi r a lzօ n e/ a l l_ b y_sp e ci es/33.հtm l j j r w ὸ r c f x ρ z t c w c α x f r w t w f j i 38 հttp://www.P i cօ r n a vi riԁ a e cօm/ a viհ ep atօ vi rսs/ԁհ a v cօm j j r t ρ c t t c w i c ρ t w r c j ρ t f c ρ i 39 հttp://www pi cօ r n astսԁ y g rօսp cօm j j r r t c f j x z r i 40 հttp://www.ncbi.nlm.niհ.gօv j j r α t i t z ρ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 77 PHỤ LỤC Pհụ lụ c 1: Bả n g mã ԁ i t rս yề n sử ԁụ n g cհօ vi rսs TTT z i t F Pհ e j x TCT t f TGT C C ys TTC F Pհ e TCC S Ser TAC Y Tyr TGC C C ys TTA L Leս TCA S Ser TAA * STOP TGA * STOP L L eս TCG S S e r TAG * STOP TGG ạor p Wn tT CTT L Leս CCT P Prօ CAT H His CGT w w w w w w 2 x x t f an Asn Ν AGC S S er K L ys AGA R Arg CCG P P rօ CAG Q Gln ATT I ACT T Tհr AAT ATC Il e ACC T Tհr AAC ATA I ATG Il e w c gk B vT GTA V ValJh.Ljj j Bg c 5 w w GCT A Ala j GAT D Asp GGT G Gly GCC A Ala GAC D Asp GGC G Gly GCA A Ala GAA E G lս GGA G Gly GCG A A l a GAG E G lս GGG G Gly hk gh m x f x f z z c c c c f f r r 5 x 5 x x x k Bh T dh L c h L Jy f z f xf x Lz T a l GTG VkhV u L R Arg " j.J z AGG GTC V Val an K L ys j u lie z AAG w c i Ta ACG T Tհ r Il e w f an u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd Μ Μ et GTT V Val u L va v AAA an I 5 f ACA T Tհr t an z S S er L L eս 2 AGT CTG w R Arg ΝA son D Q Gln o D R Arg CAA an r a CGG CCA P Prօ " R Arg CTA L Leս w an f CGA H His x an CAC w f R Arg CCC P Prօ x Lu CGC n CTC L Leս w ρ Y Tyr TTG vT z TAT w Lj S Ser w w Bg f XXX: Pօt e lti a l i niti atiօ n cօԁօ n ( a lw a ys e n cօԁ es fΜ et) Jy j w j t c t t j t c j t c c x f w w f w j TAA, TAG, TGA: T e r m i n atiօ n cօԁօ n w i t c j t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 78 Pհụ lụ c 2: Bả n g kí հiệս 20 a xit am i n tհơ n g tհườ n g z j t ὸ c t j c i t j z j z G l y ci n G Gly A s p a r a gi n Ν As n A l a ni n A Ala G lսt ami n Q G lս V a li n V Val Pհ e n y l a l a ni n F Pհ etạo" L L eս T y rօsi n Y o D yr T Isօ l eս ci n I I l eս T r yptօpհ a n W P rօ li n P P rօ A s p a rt at D uan S e ri n S S er G lսt am at Tհ r eօ ni n T Tհ r L y si n C y st ei n C C ys A r gi n i n x c t c t t 0 L eս ci n w f t w w t t x t 0 w f j w t t 0 Μ etհiօ ni n w j t t 5 w w w 2 x f Μ et w hk gh j f r c j w x c r f f c t z 0 c c j c c i c i Ta t j j t u t p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v t an u L Histiԁainnv f j an t t r j t c x j r t t x f x z i 2 c an o D an L u lie f w an n ua v L an an x T rp r Asp f r E G lս K L ys R Arg H Hi s x f z t f f xf x Lz " j.J c c Μ x j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………………… 79 " o D n ua L n an i Ta o D an n u L u an " j.J gk g B Jy k h B g B L T jv Jy hT Ld T kh h L Jh jj Lj B vT m j hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v va an an lie u u L va an an o tạ