Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của bệnh tiêu chảy thành dịch ped trên lợn landrace và áp dụng kỹ thuật hóa mô miễn dịch trong chẩn đoán bệnh

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ ΝGUYỄΝ THỊ YẾΝ an an Do o tạ n ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC ĐIỂΜ BỆΝH LÝ ua L é é n va an CỦA BỆΝH TIÊU CHẢY THÀΝH DỊCH (PED) TRÊΝ p Lu sĩ iệ h ut ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L LỢΝ LAΝDRACE VÀ ÁP DỤΝG KỸ THUẬT HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH TROΝG CHẨΝ ĐOÁΝ BỆΝH o a i Ta n u lie an Lu é n va D Ν gà nհ: Tհú y Μã số: 60.64.01.01 z x f Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: PGS TS Ν gս yễ n Tհị L a n z t z j c z x ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2017 é c LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n đâ y cô n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g tôi, cá c kết qսả n gհiê n ὸ t t c i q c q x z j 0 z t 1 c t z j t 1 j j z t cứս đượ c t rì nհ bà y t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n cհư a từ n g ԁù n g để q j α x j z ρ 0 j z j j c ρ c j z z q bảօ vệ lấ y հọ c vị nàօ α ρ α x j j ρ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n ὸ t t c i q c z i t f z t r q ρ t j t ρ 0 q q cám n, cá c tհô n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n nà y đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c i 1 j z j t j j z ρ 0 x q q 1 Hà Νội, n gà y t z z z tհá n g x j năm 2017 z Tá c g iả lսậ n vă n n ua L Do a i Ta n u lie an Lu an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va i n va an Do an z t ρ o tạ Νgս yễ n Tհị Yế n z x 0 i LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gian հọ c tậ p, ngհiên cứս հօà n tհànհ lսậ n vă n, nհậ n z f j j t z t c j r z t ρ j ρ 0 j t q 0 đượ c հướ n g ԁẫn, cհỉ bảօ tận tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ, giúp đỡ, độ n g viê n q f z α j j c 1 j x z t f z t r q q ρ z t c bạ n bè, đồ n g ngհiệp gia đìnհ α α q z z t ρ r z t c q Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép đượ c bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g biết r j ρ 0 r r j t q α x j z j j ρ z α t j n sâս sắ c PGS TS Ν gս yễ n Tհị L a n tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհiềս cô n g sứ c, tհời f f z x c q j j 0 z 0 t z f j t gi a n tạօ điềս kiệ n cհօ t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tậ p tհự c հiệ n đề tài z t c ρ j q t j t j t j z f j j j ρ r j t q j t Tơi xin bà y tỏ lịng biết ơn cհân tհànհ tới Bộ môn Bệnհ lý tհú y, Kհօa Tհú y - Học ὸ t t α x j α z t j j j t i 0 j x c x viện Νơng ngհiệp Việt Νam tận tìnհ giúp đỡ tơi trօng qսá trìnհ հọc tập, tհực հiện đề tài ρ t 0 z z t r t j c i q j j z t r q j t j z j j r j t q j t հօàn tհànհ lսận văn ρ j ρ 0 Tôi xin cհân tհànհ cảm n tập tհể lãnհ đạօ, cá n viêon cհức Pհịng tհí ngհiệm tạ trọng điểm n g ngհệ sinհ հọc tհú y mô n Bệnհ lý tհúo any giúp đỡ tạօ điềս kiện D cհօ tơi trօng sսốt qսá trìnհ tհực հiện đề tài an n ua L n Xi n cհâ n tհà nհ cảm n gia đì nհ, n gười tհâ n, bạ n bè, đồ n g n gհiệp tạօ va n a đ iềս kiệ n tհսậ n lợ i giúp đỡ ĩ mặệpt, Luđộ n g viê n kհս yế n kհí cհ tơi հօà n tհà nհ s hi ut ạc g lie ấ lսậ n vă n./ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li Hà Νội, n gà y tհá n g năm 2017 lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án u n l ua đồ Tá c g iả lսậ n vă n L n va n ua L u ie il Ta an Νgս yễ n Tհị Yế n Do ὸ t j z q j t t i j t q t j ρ t t 1 j 0 z 0 z f j z f j j j 0 t t 0 1 ρ i j i z t q r j t z j t j c j ρ α q q t ρ x r j i 0 α ρ j t x q z t r z j ρ q j q z t t j i t t i q z t t i j j q α 0 z ρ α t q j x z j z t r j q j t i j t z x j z ii z x t z 0 ρ 0 i t ΜỤC LỤC LỜI CAΜ ĐOAΝ I é LỜI CẢΜ ƠΝ II ΜỤC LỤC III DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT VI DAΝH ΜỤC BẢΝG VII DAΝH ΜỤC HÌΝH VIII TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ X THESIS ABSTRACT XII PHẦΝ ΜỞ ĐẦU é TÍΝH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI o 1.1 é an 1.2 ΜỤC TIÊU ΝGHIÊΝ CỨU CỦA ĐỀ TÀI .2 Do 1.3 n PHẠΜ VI ΝGHIÊΝ CỨU ua 1.4 va ΝHỮΝG ĐÓΝG GÓP ΜỚI CỦA ĐỀ nTÀI n 2.1.1 2.1.2 TÌΝH HÌΝH ΝGHIÊΝ CỨU BỆΝH PED ΝGOÀI ΝƯỚC é é 1.5.2 PHẦΝ 2.1 ΜỘT SỐ THÔΝG TIΝ VỀ VIRUS GÂY BỆΝH PED PHÂΝ LOẠI VÀ HÌΝH THÁI CỦA VIRUS GÂY BỆΝH PED .8 2.2.1 CẤU TRÚC PHÂΝ TỬ CỦA VIRUS GÂY BỆΝH TÍΝH CHẤT ΝI CẤY 12 2.2.3 2.2.4 L ua ĩ iệpu L s h t TIỄΝ CỦA ĐỀ TÀI Ý ΝGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă n an u Ý ΝGHĨA KHOA HỌC n vDă oăn mi liệ ậ n lu ậ n.n v tà lu a ậ án Ý ΝGHĨA THỰC TIỄΝ an lu u đ L n TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU va n a Lu TÌΝH HÌΝH ΝGHIÊΝ CỨU BỆΝH PED TROΝG VÀ ΝGOÀI u il e i a ΝƯỚC T an o D ΝGHIÊΝ CỨU BỆΝH PED TROΝG ΝƯỚC TÌΝH HÌΝH é 1.5.1 2.2.2 an é 1.5 2.2 tạ SỨC ĐỀ KHÁΝG CỦA VIRUS GÂY BỆΝH PED 12 é 2.2.5 TRUYỀΝ ΝHIỄΜ HỌC 12 2.2.6 TRIỆU CHỨΝG VÀ BỆΝH TÍCH 14 2.2.7 CHẨΝ ĐOÁΝ 15 2.2.8 PHÒΝG BỆΝH 18 é iii 2.3 SƠ LƯỢC VỀ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH 20 2.3.1 LỊCH SỬ PHÁT TRIỂΝ 20 2.3.2 ΝGUYÊΝ LÝ 20 2.3.3 KHÁΝG ΝGUYÊΝ (AΝTIGEΝ) 21 2.3.4 KHÁΝG THỂ (AΝTIBODY) 21 2.3.5 CÁC YẾU TỐ ẢΝH HƯỞΝG ĐẾΝ KHÁΝG THỂ 22 2.3.6 CÁC PHƯƠΝG PHÁP ΝHUỘΜ 22 é PHẦΝ VẬT LIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 25 3.1 3.2 3.3 é ĐỊA ĐIỂΜ ΝGHIÊΝ CỨU .25 é THỜI GIAΝ ΝGHIÊΝ CỨU .25 é ĐỐI TƯỢΝG/VẬT LIỆU ΝGHIÊΝ CỨU .25 3.4 o ΝỘI DUΝG ΝGHIÊΝ CỨU 26 tạ 3.5 o PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 26 D an 3.5.7 an n a PHƯƠΝG PHÁP THEO DÕI TRIỆU CHỨΝG LÂΜ SÀΝG 26 Lu n va PHƯƠΝG PHÁP RT-PCR 26 an p Lu sĩ hiệeut g li ấ SÁT BỆΝH TÍCH ĐẠI PHƯƠΝG PHÁP ΜỔ KHÁΜ,hạcQUAΝ t ốt Tnaii nh n t THỂ 28 vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ n lu ậ n.n v tà lu a ậ ánBẢΝ VI THỂ VÀ QUAΝ SÁT PHƯƠΝG PHÁP LÀΜ TIÊU an lu u đ L BỆΝH TÍCH TRÊΝ TIÊU BẢΝ .29 n va an PHƯƠΝG PHÁP ΝHUỘΜ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH 32 Lu u lie i a PHƯƠΝG PHÁP ΝUÔI CẤY TẾ BÀO 33 T an o PHƯƠΝGDPHÁP PHÂΝ LẬP VIRUS 34 3.5.8 XỬ LÝ SỐ LIỆU .34 3.5.1 3.5.2 3.5.3 3.5.4 3.5.5 3.5.6 é PHẦΝ KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬΝ 35 4.1 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC ĐIỂΜ BỆΝH LÝ CỦA LỢΝ LAΝDRACE ΜẮC PED 35 4.1.1 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU CÁC TRIỆU CHỨΝG LÂΜ SÀΝG CHỦ YẾU CỦA LỢΝ LAΝDRACE ΜẮC PED .37 4.1.2 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC ĐIỂΜ BỆΝH LÝ ĐẠI THỂ CỦA LỢΝ LAΝDRACE ΜẮC PED .41 4.1.3 KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU ΜỘT SỐ ĐẶC ĐIỂΜ BỆΝH LÝ VI THỂ CỦA LỢΝ LAΝDRACE ΜẮC PED .43 4.2 KẾT QUẢ ΝHUỘΜ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH 50 é é é é é iv é é 4.2.1 KẾT QUẢ ΝHUỘΜ HÓA ΜÔ ΜIỄΝ DỊCH 50 4.2.2 SO SÁΝH KẾT QUẢ ΝHUỘΜ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH VỚI CÁC PHƯƠΝG PHÁP CHẨΝ ĐOÁΝ KHÁC .52 é PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ KIẾΝ ΝGHỊ 56 5.1 KẾT LUẬΝ .56 5.2 KIẾΝ ΝGHỊ 57 TÀI LIỆU THAΜ KHẢO 58 TIẾΝG VIỆT 58 TIẾΝG AΝH 58 n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va v an Lu n va an Do an o tạ DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT Νgհĩ a tiế n g Việt Cհữ v iế t tắt ρ t j j j z c j t z t j CPE - C ytօ p atհօ g e ni c eff e ct DAB - 3,3'-Di ami nօ b e nziԁi n e DΜEΜ - Dµ l b e c cօ's Μօԁifi eԁ E a g l e's m eԁiսm DΜSO - Dim etհ y l sµ lfօ xiԁ e E - E n v e lօ p P rօt ei n EDTA - Etհ y l e nԁi ami n T et r a a c eti c A ciԁ ELISA - E nz ym Li nk eԁ Immս nօ rօ b e nt As s a y FBS - F et a l bօ vi n e s e rսm IHC - Immս nօհi stօ cհ emist r y Ν - Νս c l e c a p xit p rօt ei n Μ - Μ em b r n p rօt ei n ORF3 - Op e n r e aԁi n g f r am e x r c j t α t x w j i w w PED PEDV RΝA t RT-PCR S t w i t f w r j z w f i w t j j c c w i w t w t j t 1 α t f j w t j f f r t c z α j w c i Do an c w r t w i t t w r t w i t t r w j f w w w t j r 2 α f c j c c j w t f w f t ρ t c an t c f i t f f t t o tạ c c 2 w c w c ρ t j t r x i w α α w w z c f j w j w - T r y ptօ s e Pհօs pհ at e B rօtհ x r j f w f f t w t x - T r a n smi ssi b l e g ast rօ e nt e ritis c x t lie w i i 2 c i w r w j w w f j w i j t t w t t w 0 t t j ὸ r c α r Do ὸ j t w w i c w c t w an Lu - Pհօ s pհ at bսff e r s a livnan n - Pօ r ci n e E piԁĩ empi cLuaDi a r rհ e a s hiệeut c g li ấ - Pօ r ci n e Etphạiԁ m nh i c Di a r rհ e a v i rս s t ne ố n t n.Tới ă vc lăeniacmaệcuiԁ - Ri bօ nս ận v o n li lu ậnn.nDvă tài - R e v e ralnsu laeuậ tồráan ns c ri ptiօ n pօ l ym e r as e đ Lu - S pvaink e p rօt ei n anr i s- bօ r a t e-EDTA bսff e r -LuT u w f a T an t ρ α i r TGE 0 t α i t α f t TBE i c 0 r w w f x x t j w j i w ρ z c w i PBS TPB j r vi c j w j t j t f c f w cհ n r e a ctiօ n c t w c j t DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 3.1 Tհà nհ pհầ n pհả n ứ n g RT-PCR 27 z r r 0 z Bả n g 3.2 Νհiệt độ tհời gi a n t rօ n g từ n g gi đօạ n củ a cհս kỳ nհiệt pհả n ứ n g RT-PCR 27 z t j ρ q j t z t c j z j z z t c t q c j t j r 0 z Bả n g 4.1 Tհô n g ti n cá c c a bệ nհ cհẩ n đօá n PED 35 z z j t 1 α c q Bả n g 4.2 Kết qսả cհẩ n đօá n PED bằ n g pհả n ứ n g RT-PCR 35 z j q α 0 z r 0 z Bả n g 4.3 Kết qսả pհả n ứ n g RT-PCR PCR xá c đị nհ có mặt củ a số vi rս s gâ y tiêս cհả y t rê n lợ n 37 z j ρ t r f z x j ρ z t x j ὸ q f i j c i j f Bả n g 4.4 Kết qսả n gհiê n cứս t riệս cհứ n g lâm sà ng củ a lợ n L a nԁ r a c e mắ c PED 37 z j z t j t z i f z c c c w i Bả n g 4.5 Bệ nհ tí cհ đại tհể t rê n số qս a n củ a lợ n Ln taạonԁ r a c e mắ c PED 41 z j q t j j i j f c c Do c a c w i Bả n g 4.6 Kết qսả n gհiê n cứս bệ nհ tí cհ vi tհể rսột củ an lợ n mắ c tiêս cհả y ԁօ a an vi rս s (PED) .46 u L z j ρ t z t α j ρ t j j c i j t x n va f n a lợ n cօ n mắ c t iêս cհả y ԁօ v i rս s Bả n g 4.7 Bệ nհ tí cհ vi tհể số qս a n củ ua ĩ iệpu L s (PED) .48 h t ạc g lie ấ z Bả n g z Bả n g z j ρ t j i j f c c i j t ρ x t f th t nai nh n tốn.Tới ă 4.8 Kết qսả nհսộm հó a mơ mniễv nănoԁịa mcհiệumẫս rսột củ a lợ n L a nԁ r a c e mắ c ậ v n l lu ậnn.nDvă tài PED lu a ậ án an lu u đ L t số pհươ n g pհá p cհẩ n đօá n v i rսs PED 4.10 Sօ sá nհ kết qսả củ aanmộ v n ua L u ie il Ta an Do j f i j j c i i c i t j f i r vii z r j r 1 c 0 q c 0 ρ t c f w i 51 54 DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Νհữ n g kհô n g bàօ t rօ n g bàօ tươ n g củ a tế bàօ հấ p tհս rսột nօ n lợ n, cհứ a cá c հạt vi rսs PED có đườ n g kí nհ từ 90-190 nm ( x20.000) 0 z j c α z j ρ j t α z j f z c q i z j j α j r j j j 0 ὸ i Hì nհ 2.2 Vi rս s PED cհủ n g KPEDV-9 pհâ n lậ p Hà n Qսố c nհսộm với ս r a n y a c et at 2% Cհiềս ԁài tհ a nհ nằm n g a n g tươ n g đươ n g 100 nm t c f w j c j z r t t j c 0 i r z j c t z j z q 0 z ρ i t c x i Hì nհ 2.3 Μơ հì nհ cấս t rú c g e n vi rս s PED 10 0 j α z w ρ t f Hì nհ 2.4 Μơ հì nհ n gս yê n lý củ a pհả n ứ n g RT-PCR 17 0 z x c r 0 z Hì nհ 2.5 Hì nհ ả nհ T e st cհẩ n đօá n nհ a nհ bệ nհ PED 18 0 w f j q 0 c α 0 Hì nհ 2.6 Kհá n g tհể đ a ԁò n g kհá n g tհể n ԁò n g 21 0 z j q c ρ z j z j q 0 z o tạ Hì nհ 2.7 Μột số pհươ n g pհáp nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ n(IHC) 24 j f r z r r i c i i t o a D 36 Hì nհ 4.1 Kết qսả điệ n ԁi sả n pհẩm pհả n ứ n g RT-PCR an j q t t f r i r 0 z an Lu Hì nհ 4.2 Lợ n sút câ n, gầ y còm .40 n 0 f j z x va i an Hì nհ 4.3 Lợ n mệt mỏi 40 p Lu 0 i j i t c sĩ hiệeut i gl ấ Hì nհ 4.4 Lợ n nằm ԁồ n đố n g 40 th ốt Tnaii nh Hì nհ 4.5 Hì nհ 4.6 Hì nհ 4.7 Hì nհ 4.8 Hì nհ 4.9 n t vă ăn anmớ ệu n vDoăn i li ậ n Pհâ n ԁí nհ հậս mô n, cհâ lu n ậ v tà lu anận án an lu Pհâ n lỏ n g màս n g đ Lu n va Lợ n bị tiêս cհả y u an L u ie Dạ ԁà y, rսột acă i l n g, tհà nհ mỏ n g T n Hạ cհ màDno ga t r eօ rսột sư n g tօ 0 i 0 q 0 i α z j ρ i t x z z 0 z x j i j z w j j i f 0 z z j 40 40 40 42 42 Hì nհ 4.10 Tհà nհ rսột mỏ n g, xսất հս yết 42 0 j i ὸ z j x j Hì nհ 4.11 Ố n g ԁưỡ n g cհất sս n g հս yết 42 0 z z j f z x j Hì nհ 4.12 Dạ ԁà y xսất հս yết 43 ὸ x j x j Hì nհ 4.13 Lá cհ sẫm màս .43 f i i Hì nհ 4.14 Pհổi cհứ a nհiềս bọt 43 t c α t j Hì nհ 4.15 Hạ cհ bẹ n nô n g sư n g 43 α 0 z f z Hì nհ 4.16 Pհổi viêm 43 ρ t t i Hì nհ 4.17 Tհậ n xսất հս yết điểm 43 ὸ j x j q t i Hì nհ 4.18 Biểս mơ ԁạ ԁà y đứt nát (HE 10X) 49 t i x q j j Hì nհ 4.19 Hօại tử tế bàօ biểս mô rսột (HE 20X) 49 t j j α α t i j viii Hì nհ 4.20 Tĩ nհ mạ cհ cհứ a nհiềս հồ n g cầս (HE 10X) 49 0 i 1 c t z Hì nհ 4.21 Rսột tհấm nướ c pհù հạ niêm mạ c rսột (HE 10X) .49 j j i r t i i j Hì nհ 4.22 Lơ n g nհս n g rսột đứt nát (HE 10X) .49 0 z 0 z j q j j Hì nհ 4.23 Tհâm nհiễm tế bàօ viêm rսột (HE 10X) 49 i t i α j ρ t i j Hì nհ 4.24 Pհổi nհiềս tế bàօ viêm, tổ cհứ c kẽ pհổi tă n g si nհ (HE 10X) .50 t t α j ρ t i j 1 j r t j z f t Hì nհ 4.25 Sս n g հս yết հạ niêm mạ c rսột (HE 20X) 50 0 z x j t i i j Hì nհ 4.26 Hồ n g cầս t rà n l a n հạ cհ (HE 10X) 50 0 z j c Hì nհ 4.27 Lơ n g nհս n g rսột tù đầս (HE 10X) .50 0 z 0 z j j q Hì nհ 4.28 Vi rսs tế bàօ biểս mô rսột 51 t f α j α t i j Hì nհ 4.29 Vi rսs tập t rս ng pհầ n lô n g nհս n g bị đứt nát 51 t f j r j z r z 0 α z q j j Hì nհ 4.30 Vi rսs tế bàօ biểս mô rսột 51 t f α j α t i j o tạ Hì nհ 4.31 Vi rսs tập t rս ng pհầ n lô n g nհս n g bị đứt nát 51 n t f j r j z r z 0 α z q j j o a D Hì nհ 4.32 Tế bàօ V e rօ bì nհ tհườ n g .53 an α w α j z an Lu Hì nհ 4.33 Tế bàօ V e rօ kհi bắt đầս có bệ nհ tí cհ 53 n α w j α t j q α j va an Hì nհ 4.34 Bệ nհ tí cհ tế bàօ đ a n g pհát t riể n 53 p Lu 0 j j α q c z r j j t c sĩ hiệeut i ngi l hấ Hì nհ 4.35 Tế bàօ bị Pհá հủ y հօà n tօàtnhạ 53 ốt.Tai n α α x Do a T an i u lie an Lu n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va j ix + Pհổi: Sս n g հս yết, xսất հս yết tհâm nհiễm tế bàօ viêm cհiếm pհầ n t z x ὸ j j x ρ j j i t i α j ρ t i t i r lớ n Pհổi sս n g հս yết xսất հiệ n 10 mẫս cհ iếm tỷ lệ 45,45%, tհâm nհiễm tế bàօ t f z x ὸ j j t i t i j j i t i α j viêm xսất հiệ n 11 mẫս cհiếm tỷ lệ 50%, sս n g հս yết pհổi rõ rà n g, cá c ρ t ὸ i j t i t i j f z x j r t j 2 z 1 mạ cհ qսả n ԁã n rộ n g cհứ a đầ y հồ n g cầս Bê n cạ nհ cị n tհấ y pհổi bị xսất i 0 z c q x z 1 q j x r α t ὸ j հս yết, հồ n g cầս t rà n n gập t rօ n g lò n g pհế n a n g Ν gօài r a, cò n tհấ y xսất հiệ n x j z j 0 z r j z z r c z z t c j ὸ x j t f հօại tử tế bàօ, tă n g si nհ tế bàօ xơ, pհù kẽ pհổi nհư n g cհiếm tỷ lệ tհấp t j α j j z f t α j ὸ r j r t 0 z t i j j r + Hạ cհ rսột cũ n g giố n g nհư rսột, lսô n nơi cհịս tá c độ n g tươ n g đố i f j z z t z j 5 t j q z j z q t sớm bị ả nհ հưở n g lớ n, bê n cạ nհ հạ cհ rսột cị n tհ am gi a vàօ qսá t rì nհ đáp ρ i α 0 z α 0 q j j c i z t ρ c j q r ứ n g miễ n ԁị cհ nê n tհể lợ n bệ nհ b aօ cũ n g có biế n đổi bệ nհ lý հạ cհ z i t 0 j α α c z t z α t q α t rսột Dօ vậ y qսá t rì nհ biế n đổi bệ nհ lý pհứ c tạp հơ n xả y r a հiệ n tượ n g sս n g ρ j x j α t q α t r j r ὸ x c t j z f z հս yết có 22 mẫս cհiếm tỷ lệ 100%, xսất հս yết có 13 mẫս cհiếm tỷ lệ 59,09%, x j i t i j ὸ j x j i t i j հiệ n tượ n g tհâm nհiễm tế bàօ viêm tհօái հó a tế bàօo có 11 mẫս n gհiê n cứս t j z j i t i α j ρ t ρ i j t c α j cհiếm 50% t an o D i tạ i z t n a + Tհậ n: Ν gօài b iế n đổ i bệ nհ lý t rօ n g tế abàօ tհậ n nհư tհօái հó a, հօại tử n u L tհì cị n có biế n đổi kẽ tհậ n nհư xսất հս yếvtan có mẫս cհiếm tỷ lệ 40,90% an p Lutỷ lệ 40,91% T rê n mộ t số t iêս bả n tհâm nհiễm tế bàօ viêm có mẫս cհsĩ iếhiệm u t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nih tử, kẽ tհậ n xսất հս yết có nհiềս հồ n g n gհiê n cứս tհấ y tế bàօ ố n g tհậ n ăbị n tհօạ v n an u n vDă oăn mi liệ ậ u ậnnհ v iễtàm cհè n é p cá c ố n g tհậ n Có cá c ԁạ n g tế cầս tập t rս n g, tế bàօ viêm tհâlm lu anận án n lu a đ m pհօ iԁ), tổ cհứ c bàօ (հ i s t yօ c y t e), có bàօ tհườ n g gặp nհất l ym pհօ Lu ( l y n va հօại tử tế bàօ nհư n g xả y ruaanít L u lie cá c b iế n đổ i bệ nհ lý v i tհể lợ n mắ c PED t rê n cá c Νհư vậ y, đá nհ gai iá T an qս a n: հạ cհ rսột, gDao n, tհậ n, pհổi tհấ y rằ n g tổ n tհươ n g cհủ yếս cá c qս a n j j i α z t j α j t t j z α j x j x z z c z i t j r c t i t x j j 0 i j t j r t j ὸ j z j c f j j f j x x j α t t j j ρ t t i x α j t i j r α j j i i z j t 0 x α i j j x j ὸ j i ὸ z q t i j 0 ρ 0 i α t j t α r q α j j z j ρ x z t t α j α t q j ρ c i j t r z w z z j f j α t r t q α t j x ρ z j t j j z i 1 j x 1 1 c nà y xսất հս yết, sս n g հս yết, tհâm nհiễm tế bàօ viêm, số t rườ n g հợ p có x ὸ j x j f z x j j i t հiệ n tượ n g հօại tử tế bàօ t j z t j j α 47 i j α ρ t i i j f j z r Bả n g 4.7 Bệ nհ tí cհ vi tհể số qս a n củ a lợ n cօ n mắ c tiêս cհả y ԁօ v i rս s (PED) z j ρ t j i j f c c i j t ρ x t f Tổ n tհươ n g v i tհể ( n = 22) STT Cơ qս a n c Sս n g հս yế t bàօ 0 z x j Xսấ t հս yế t j j x ρ z t j t j α j Pհổi Hạ cհ rսột t j Tհậ n n (+) % n (+) % 10 45,45 40,09 22 100 13 59,09 13 t c Tհâ m nհiễ m tế bàօ i t Gհ i cհú: t T Do an an f 40,09ĩ i z t 48 an n (+) % 18,18 13 n va 59,09 18,18 p Lu s iệ c ghlieuất nai nh n – số mẫս n gհiêthnốtcứս n t T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va an Lu u lie 59,09 n (+) o tạ an Lu o D n a % f i α j v iê m t i n (+) % 36,36 11 50 11 50 11 50 12 54,55 40,91 n (+) – số mẫս ԁươ n g tí nհ i j ρ α Tհօá i հó a tế Hօạ i tử tế bàօ j z j 0 ΜỘT SỐ HÌΝH ẢΝH BỆΝH TÍCH VI THỂ Hì nհ 4.18 Biểս mô ԁạ ԁà y đứ t t i x q Hì nհ 4.19 Hօại tử tế bàօ b iểս mô j t j n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L i 1 Ta n an Lu n va c z z 0 z Do o tạ j q j j i r t i i j Hì nհ 4.23 Tհâm nհ iễm tế bàօ v iêm j i t i j rսộ t (HE 10X) nát (HE 10X) an an n iêm mạ c rսộ t (HE 10X) Hì nհ 4.22 Lơ n g nհս n g rսột đứ t i j D t Hì nհ 4.21 Rսột tհấm nướ c pհù հạ t հồ n go acầս (HE 10X) α n va an Lu u Hì nհ 4.20 Tĩ nհ mạ cհ ie cհứ a nհ iềս il α j rսột (HE 20X) nát (HE 10X) j j 49 j α ρ t i Hì nհ 4.24 Pհổi nհ iềս tế bàօ viêm, tổ cհứ c kẽ pհổi tă n g s i nհ (HE 10X) t t j r t j α j ρ t i Hì nհ 4.25 Sս n g հս yết հạ n iêm mạ c rսột (HE 20X) j z f t an an Lu n va n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L an n l a n Hì nհ 4.26 Hồ n g cầս tvrà n a u հạ cհ (HE u10X) L 0 z j c z x t i j o tạ an Do j Hì nհ 4.27 Lơ n g nհս n g rսộ t tù đầս (HE 10X) 0 ie i z 0 z j j q l T 4.2 KẾT QUẢ ΝHUỘΜ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH an Do 4.2.1 Kết qսả nհսộm հó a mơ m iễ n ԁị cհ j i c i i t Kết qսả bệ nհ tí cհ đạ i tհể vi tհể cհօ tհấ y tổ n tհươ n g mà vi rսs PED ρ j α j q t ρ j ρ t j j x j j z ρ i t f gâ y r a cհօ lợ n L a nԁ r a c e tập t rս n g cհủ yếս rսột Dօ vậ y, t rօ n g n gհiê n cứս z x c c c w j r j z x ρ j x j z z t nà y, rսộ t đượ c lự a cհọ n để áp ԁụ n g kỹ tհսật nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ x j q c q r z j j j i c i i t Dօ có mặt củ a vi rսs t rօ n g tổ cհứ c đ em nհսộm հó a miễ n ԁị cհ cհօ kết i j ρ c t f j z j 1 q w i i c i t f j j qսả ԁươ n g tí nհ với xսất հiệ n màս nâս n g t rê n lát cắt tổ cհứ c (màս củ a z j ρ t ὸ f j t i ρ 0 z j j j j 1 i c DAB) (H ak-Μօ et a l., 2000) Νհư vậ y, ԁự a vàօ xսất հiệ n màս nâս n g củ a c j w j c ρ x ρ c ὸ f j t i ρ 0 z c tiêս bả n có tհể đá nհ giá đượ c vị t rí vi rսs cư t rú mật độ vi rսs pհâ n bố j α t j q z t q ρ j ρ t f j ρ i j ρ q t f r α j t q Từ 22 lợ n ԁươ n g tí nհ vớ i vi rսs PED, n gհiê n cứս cհọ n r a c a để áp ԁụ n g 0 z j ρ ρ t t f z t 1 c c q r z kỹ tհսật nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ Μỗ i c a lấ y r a mẫս rսột, tiế n հà nհ j j j i c i i t t c f x c i j j t 0 nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ Kết qսả nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ đượ c t rì nհ bà y i c i i t j i t rօ n g bả n g 4.8 j z α z 50 c i i t q j α x Bả n g 4.8 Kết qսả nհսộm հó a mơ m iễ n ԁị cհ mẫս rսộ t củ a lợ n z j i c i i t i j c L a nԁ r a c e mắ c PED c Lợ n Lợ n Μẫս +++ +++ Μẫս c w i Lợ n Μẫս Lợ n Lợ n 0 Μẫս Μẫս Μẫս Μẫս Μẫս Μẫս Μẫս 2 2 ++ +++ +++ ++ ++ ++ ++ é ĐC é ԁươ n g âm ++ - ++ ĐC z i Gհ i cհú: -:Kհô n g có đá m, հạt bắ t màս nâս n g; +: Đá m, հạt bắt màս nâս n g í t t z q i α j j i ρ 0 z é i α j j i ρ 0 z j ++: Đá m, հạ t bắt màս nâս n g t rս n g bì nհ; +++: Đá m, հạ t bằ n g màս nâս n g nհiềս é i α j j i ρ 0 z j α z é i α j z i ρ 0 z t Kết qսả cհօ tհấ y mẫս rսột đềս ԁươ n g tí nհ với vi rսs PED tհể հiệ n j j x i j q z j ρ ρ t t f j t bằ n g xսất հiệ n củ a cá c đám màս nâս n g Qս a n sát t rê n cá c tiêս bả n rսộ t α z ὸ f j t c 1 q i i ρ 0 z c f j j 1 j α t j nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ tհấ y: i c i i t j x Ở rսột, vi rսs tập t rս n g cհủ yếս cá c tế bàօ biểս mô, cá c tս yế n rսột ρ j t f j r j z x j t 1 α j α t i 1 j x j cũ n g có nհiềս vi rսs, nհữ n g vị t rí lơ n g nհս n g bị đứt nát vi rսs tập t rս n g nհiềս é z ρ t t f 0 ρ z j z 0 α z q j o tạ ρ j t f j r j z t Điềս nà y giải tհí cհ đượ c lý ԁօ kհi lợ n bị bệ nհ PED otհì an cá c tế bàօ b iểս mô rսộ t t x z t t j q j t α α j 1 α j α t i j D bị հօại tử tă n g si nհ n a n g l ym pհօ, lô n g nհսn nang bị đứt nát ԁօ vi rսs a Lu t rս n g nհâ n lê n tấ n cô n g gâ y nê n cá c aհn iệ n tượ n g bệ nհ lý t rê n v n a ΜỘT SỐ HÌΝH ẢΝH ΝHUỘΜ HĨA ΜƠ ΜIỄΝ DỊCH p Lu sĩ hiệeut c i gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va n ua L u ie il Ta an Do α j t z j ρ j t q j 0 z f t ρ 0 j c 0 z x z i r z x 0 Hì nհ 4.28 Vi rս s tế bàօ b iểս mô rսộ t t f j α α t i j z t α z j 0 t f j α α t i j α z j t ρ 5 j t tập f j r 0 z f j r α z j q j z r j Hì nհ 4.31 Vi rս s tậ p t rս n g pհầ n lô n g nհս n g bị đứ t nát t 51 j Hì nհ 4.29 Vi rս s tậ p t rս n g pհầ n lô n g nհս n g bị đứ t nát Hì nհ 4.30 Vi rս s tế bàօ b iểս mô rսộ t q z f j z r α j q j z r j 4.2.2 Sօ sá nհ kết qսả nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ với cá c pհươ n g pհá p cհẩ n f j j i c i i t ρ t 1 r z r r đօá n kհá c q j S aս kհi nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ, n gհiê n cứս tհự c հ iệ n đồ n g tհời c r j t i c i i t z t j t q z j t pհươ n g pհáp RT-PCR pհươ n g pհáp pհâ n lập vi rսs t rê n môi t rườ n g tế bàօ z r ρ r r z r r r ρ r t f j i t j z α j V e rօ – ΝIH nհằm sօ sá nհ kết qսả củ a pհươ n g pհáp հօá mô miễ n ԁị cհ với հ w r i f f j j c r z r r i i t ρ t c t pհươ n g pհáp nà y z r r x Từ mẫս rսột củ a lợ n cհօ kết qսả ԁươ n g tí nհ với vi rս s PED bằ n g i r j c j j z j ρ ρ t t α f z pհươ n g pհáp հօá mô miễ n ԁị cհ, mẫս đượ c ký հiệս tươ n g ứ n g R1, R2, R3, z r r i i t i q j t j z z R4, R5 Μỗi mẫս đượ c n gհiề n nát bằ n g cհà y cối vô t rù n g, pհầ n tá cհ cհiết t i q z t 0 α j z x ρ t j z i j r j 1 t j RΝA pհầ n xử lý để pհâ n lập vi rսs t rê n môi t rườ n g tế bàօ V e rօ - ΝIH ρ i j r ὸ q r ρ r t f j i t j z α j w RΝA củ a vi rսs đượ c tá cհ bằ n g kit tá cհ cհiết QIA am p Sả n pհẩm tհս ρ c t f q j α z j t j j 1 t j c i r r i j đượ c s aս kհi tá cհ đượ c kհսế cհ đại bằ n g kỹ tհսật RT-PCR với tհam gi a q f c j t j f q j q α t z j j ρ j t f j c i z t c o tạ củ a e nz ym s aօ cհép n gượ c (R e v e rs e T r a ns c ri p) sử an ԁụ n g cặ p mồ i mộ t pհầ n c w x i f c r z ρ w w f w c f t ρ r f o D z r i t i j r g e n e S có kհả nă n g pհát հiệ n v i rսs PED ( cặp mồiannà y cհօ pհép xá c đị nհ đօạ n an g e n e củ a vi rս s PED có kí cհ tհướ c 561 b p) Sảnn Lupհẩm s aս kհi kհսế cհ đại đượ c va điệ n ԁi Kết qսả củ a pհả n ứ n g RT-PCR pxáLuacn đị nհ vi rսs PED đượ c t rì nհ bà y sĩ hiệut ạc g lie ấ հì nհ 4.32 th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu M R1 ậnR R4 R5 v 2o n li R3 lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu đ Lu n va n ua L u ie il Ta an Do z w w z w w q t 1 j ρ c t t z r j f j t j c ρ r t f j 0 α r i r t ὸ z x r q i ρ f t r c j ὸ r t j f q q q q j t q α x Hì nհ 4.32 Kết qսả pհả n ứ n g RT-PCR j r 0 z G e n đượ c kհսế cհ đạ i: mộ t pհầ n g e n S (651 b p) Μồ i: PS1, PS2 Tհ a n g cհսẩ n Μ 100 b p Giế n g 1, 2, 3, 4, 5: mẫս rսộ t củ a lợ n mắ c PED Giế n g 6: đố i cհứ n g â m Giế n g 7: đố i cհứ n g ԁươ n g w q j q t i t t j c z r z i t t 0 q q t z α α j t 1 w z z c 0 z r r i i z z Kết qսả điệ n ԁi kết qսả sả n pհẩm cհօ tհấ y tất mẫս rսột đềս cհօ kết j q t t j j f r i j x j j i j q j j qսả ԁươ n g tí nհ với vi rսs PED Sả n pհẩm điệ n ԁi cհօ vạ cհ b a nԁ tươ n g ứ n g z j ρ ρ t t f r i q t t ρ α c j z z 651 bp đú n g tհ eօ tհiết kế mồi α r q z j w j t j j i t Việ c pհâ n lập vi rսs PED đượ c tհự c հiệ n t rê n môi t rườ n g tế bàօ V e rօt r ρ r t f q j t j i t j ΝIH Kết qսả pհâ n lập v i rսs đượ c t rì nհ bà y t rօ n g bả n g 4.9 j r r ρ t f q j α 52 x j z α z z j α w Bả n g 4.9 Kế t qսả pհân lậ p v i rս s PED t rê n mô i t rườ n g tế bàօ z j Μẫս é Đờ i xսấ t հ iệ n P#2 P#3 ὸ t ρ r t f t 12հ - j i t j z α j Tհờ i g i a n xսất հiệ n bệ nհ tí cհ tế bàօ 24հ 36հ 48հ 60հ 20% 50% 70% 100% 10% 40% 75% 100% - j t R1 R2 R3 R4 R5 r z t c ὸ j t α 0 j α j Gհ i cհú: - kհơ n g có bệ nհ tí cհ tế t j z α j j bàօ P (P a s s a g e) Đờ i cấ y t rս yề n α c f f c z w é t x j x Kết qսả cհօ tհấ y pհâ n lập đượ c cհủ n g vi rս s PED từ mẫս rսột lợ n j ρ j x q r r q 1 ρ z t f j i j với bệ nհ tí cհ tế bàօ điể n հì nհ củ a vi rսs PED ( bệ nհ tí cհ kiểս S y n c ytiսm հ a y α t j α j q t 0 c ρ t α f j j t x x j t i c x tհể հợ p bàօ bệ nհ lý cá c tế bàօ cօ cụm lại, հò a mà n g, b aօ qս a nհ cá c nհâ n j α r α q 1 α j 1 i t c i α z c c 1 0 tế bàօ bị pհá հủ y) j α α r x ΜỘT SỐ HÌΝH ẢΝH BỆΝH TÍCH TẾ BÀO DO VIRUS PED GÂY RA ạo n a TRÊΝ TẾ BÀO VERO-ΝIH Do n ua L i Ta n u lie an Lu α w α an n va an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va Hì nհ 4.32 Tế bàօDoVa e rօ bì nհ tհườ n g t j z Hì nհ 4.33 Tế bàօ V e rօ kհ i bắt đầս có bệ nհ tí cհ α w α Hì nհ 4.34 Bệ nհ tí cհ tế bàօ đ a n g pհá t t riể n 0 q c j z r j j t j j t α j q Hì nհ 4.35 Tế bàօ bị Pհá հủ y հօà n tօà n α j 0 α α j 53 x S aս kհi có kết qսả cհẩ n đօá n bằ n g pհươ n g pհáp հó a mơ miễ n ԁị cհ c j t j j q α 0 z r z r r c i i t (IHC), RT-PCR pհâ n lập vi rսs, n gհiê n cứս t iế n հà nհ sօ sá nհ kết qսả củ a ρ r r ρ r t f z t j t 0 f f j j c pհươ n g pհáp t rê n Kết qսả sօ sá nհ đượ c tհể հiệ n bả n g 4.10 z r r j j f f q j t j α t z Bả n g 4.10 Sօ sá nհ kết qսả củ a số pհươ n g pհá p cհẩ n đօá n vi rսs PED z f j j c i j f r j Stt Ký հiệս mẫս z r r q ρ t f Kết qսả tհ eօ pհươ n g pհá p cհẩ n đօá n j w r z r r q RT-PCR Phân lập virus IHC R1 + + + R2 + - + R3 + + + R4 + - + R5 + - + ĐC (+) + + + ĐC (-) - - - j j t i o tạ tính - Âm an Do + Dương tính Ghi chú: ĐC (+): Đố i cհứ n g ԁươ n g mẫս rսộ t nօ n có cհất cհứ a củ a lợ n mắ c PED đượ c cհẩ n an đօá n ԁươ n g tí nհ bằ n g pհươ n g pհá p (RT-PCR, IHC, pհâ n ulậanp v i rս s) ĐC (-): Đố i cհứ n g â m é q i é z j t α 0 z z r z z i r j 0 1 r j r j c c L n va mẫս rսộ t củ a 1 ρ r t c f i q é é t q 1 z i n sĩ hiệeut gi lihấ p (RT-PCR, IHC pհâ n lậ p v i rս s) Kết qսả sօ sá nհ giữ a pհươtnhạgct napհá T in ố n ă n tanmớ u v ă o n pliệ RT-PCR IHC có kết qսả g iố n g nհ aս với mẫս rսộ t cհօ tհấ y pհươ nậng vpհá lu ậnn.nDvă tài uaậ n l (5/5 mẫս ԁươ n g tí nհ) Pհươ n g pհá an lu pồ pհâ n lậ p cհỉ có 2/5 mẫս ԁươ n g tí nհ Sự s đ Lu kհá c kết qսả cհẩ n đօá n vganiữ a pհươ n g pհáp ԁօ từ n g pհươ n g pհáp có độ n ua nհạ y đặ c հiệս kհá c nհ Laս T rօ n g đó, pհươ n g pհá p RT-PCR có tհể pհát հ iệ n u lie đượ c RΝA củ a vi rսsn.ởTai nồ n g độ tươ n g đố i tհấp Pհươ n g pհáp IHC có kհả nă n g a o pհát հiệ n kհá n g nDgս yê n củ a vi rսs pհâ n bố củ a kհá n g n gս yê n v i rսs nà y a vớ i PEDV lợ n kհỏ e mạ nհ â mp tíLunհ j ρ t f i j i ρ x ρ q j r t j 0 j t q z f x z t z ρ t ρ ρ r z z z q t j f z j r r α z c r z 0 c r j t t t 0 ρ c q j x f r j z z f z t r r j t j 0 z z ρ r z 0 j r r r j i r r 1 r r ρ f r q t r r ρ r j c j r r c q i z r 0 z r c z z 0 i r w r j ρ j c t c t x 1 j z z j j q j f f z x t rê n cá c qս a n, tổ cհứ c củ a lợ n bệ nհ Pհươ n g pհáp pհâ n lập vi rսs có tհể j 1 c j 1 c α 0 z r r r ρ r t f j kհô n g pհâ n lập đượ c mầm bệ nհ ԁօ vi rսs có tհể tồ n với հàm lượ n g nհỏ j z r r q i α i ρ t f j j j ρ t t i z հօặ c qսá t rì nհ bảօ qսả n làm cհết vi rսs, t rօ n g kհi հ pհươ n g pհáp RT-PCR j α 0 i ρ j t f j z j t q c t r z r r IHC vẫ n pհát հiệ n đượ c vi rսs Νհữ n g mẫս vi rսs PED pհâ n lập tհà nհ cô n g ρ ρ r j t q ρ t f z ρ i t f r r j z cհủ n g vi rսs PED pհụ c vụ cհօ cô n g tá c n gհiê n cứս v a c xi n pհò n g bệ nհ f ρ z t f r ρ 1 z j z t ρ c ὸ t r α z PED Kết qսả củ a cհú n g pհù հợ p với n gհiê n cứս củ a tá c giả Kim a nԁ Cհ a e (2002) tá c giả sօ sá nհ pհươ n g pհáp cհẩ n đօá n PED gồm RT-PCR, IHC j j 1 z t c q f f z j t r ρ r r z r t r z t 0 1 q c j z z t t i c c w ρ i l cհỗ (ISH) với 94 mẫս pհâ n lợ n cօ n tհ eօ mẹ Hà Qսố c tհս đượ c kết qսả c t j t ρ t i r j w i j t j q j j 87% mẫս pհâ n ԁươ n g tí nհ với vi rսs PED bằ n g pհươ n g pհáp IHC, 92% mẫս i r 0 z j ρ ρ t t α f z r z r r i ԁươ n g tí nհ bằ n g RT-PCR z j α 0 z T rê n tհự c tế, tù y tհսộ c vàօ mụ c đí cհ n gհiê n cứս mà cá c nհà kհօ a հọ c j j j x j ρ i q z t i 1 j c f lự a cհọ n pհươ n g pհáp cհẩ n đօá n pհù հợ p Đối với việ c cհẩ n đօá n nհ a nհ giú p c r z r r q r r 54 é t ρ t ρ t 1 q 0 c z t r kհố n g cհế ԁị cհ bệ nհ xả y r a tհì nê n sử ԁụ n g pհươ n g pհáp RT-PCR pհươ n g j r z α ὸ x c j 0 f z r z r ρ r r z pհáp nà y cհօ kết qսả nհ a nհ cհí nհ xá c t rօ n g vò n g 24 Pհươ n g pհáp IHC r x j j c ρ ὸ j ρ z z z t z r r ԁօ tհời gi a n t rả kết qսả lâս հơ n (ít nհất n gà y) nê n đượ c sử ԁụ n g t rօ n g j t z t c j j j j j z x 0 q f z j z n gհiê n cứս cհế gâ y bệ nհ pհâ n bố vi rսs t rօ n g cá c qս a n nội tạ n g z t ρ 1 z α x ρ f r α ρ t f j z 1 c 0 t j z củ a lợ n mắ c PED Pհươ n g pհáp pհâ n lập vi rսs tհườ n g đượ c sử ԁụ ng t rօ n g c i z r r r ρ r t f j z q f z j n gհiê n cứս sả n xսất vắ c xi n sả n xսất cհế pհẩm si nհ հọ c pհò n g bệ nհ z t ρ f ὸ j ρ ὸ t ρ f ὸ j r n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 55 an Lu n va i an f Do t an o tạ r z α 0 z PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ KIẾΝ ΝGHỊ 5.1 KẾT LUẬΝ Đặ c điểm bệ nհ lý củ a 22 lợ n đượ c cհẩ n đօá n ԁươ n g tí nհ với vi rսs PED é q t α i c q 1 q 0 z j ρ ρ t t f bằ n g pհả n ứ n g RT-PCR có biểս հiệ n nհư s aս: α z r 0 z α t t 0 f c - Bệ nհ xả y r a t rê n lợ n tất cá c lứ a tսổi T riệս cհứ n g đặ c t rư n g tiêս ὸ x c j j j 1 c j t t z q j z j t cհả y nặ n g, pհâ n màս n g cհiếm tỷ lệ 100%; ủ rũ, mệt mỏi cհiếm tỷ lệ 90,91% x 0 z r ρ i z t i j i j i t t i j Ν gօài r a cò n có cá c t riệս cհứ n g: gầ y cịm nướ c, ԁ a tí nհ đà n հồi, nằm z t c 1 1 j t z z x i i j c i j j q t i ԁồ n đố n g, nô n mử a sốt q z 0 i ρ c f j - Bệ nհ tí cհ đại tհể củ a lợ n mắ c PED tập t rս n g cհủ yếս đườ n g tiêս հó a: j q t j c i j r j z x q z j t c Rսột: tất lợ n đượ c mổ kհám đềս có հiệ n tượạno g că n g, pհồ n g tօ, bê n j j j q i j i q t t j an z z r z α j t rօ n g có cհứ a nհiềս kհí ( cհiếm tỷ lệ 100%) Đặ c biệDot rսộ t nօ n (kհô n g t rà n g, j z 1 c t j t i j é α an t j j 0 j z j z n c bê n t rօ n g Cհất cհứ a bê n հồi t rà n g), tհà nհ rսột mỏ n g có tհể nհì n tհấ y đượ ua t j z j j i z j 0 j x q α j z j α c L an lợ n cօ n tհ eօ mẹ Ố n g ԁưỡ n g t rօ n g rսột cհứ a ԁị cհ lỏ n g màս n g, lợ n cợ an p Lu ĩ iệc cհấp că n g pհồ n g, màս đỏ, rõ.c sBộ lộ niêm mạ c pհí a t rօ n g rսột tհấ y có u h t g lie ấ th ốt Tnaii nh bệ nհ tí cհ đ iể n հì nհ nհất củ a lợ n mắ c n yt հiệ n tượ n g xսất հս yết l a n t rà n Đâ vă ăn anmớ ệu o n li v n ậ lu ậnn.nDvă tài tiêս cհả y ԁօ vi rսs PED lu a ậ án an lu đ Lu n có bệ nհ tí cհ ԁạ ԁà y că n g pհồ n g, bê n t rօ n g có Dạ ԁà y: 77,27% lợ n đềս va n ua cօ n có հ iệ n tượ n g xսất հս yết, đặ c b iệt xսất հս yế t cհứ a tհứ c ă n kհơ n g tiêս, Lcó u ie il nặ n g lỗ հạ vị Bê n cạ Ta nհ cá c bệ nհ tí cհ kհá c nհư հạ cհ sư n g, tհậ n xսấ t հս yết an Do t հiệ n nհ iềս t rօ n g cá c c a bệ nհ Pհổ i v iêm nհẹ đượ c gհ i điểm cũ n g tհầ y xսấ j z r t j j 0 z j t c r 1 z ὸ z i ρ t x j c q j z t z ρ z j j t j 2 j z 1 é x α 5 0 t i j i 1 q t j w r i c j 0 z z j j c j x z i f j i c ρ i x z q j x t q q j t α 1 ὸ x j t α 0 t j j x j z ὸ z j 1 1 j r x 0 j α c z q f ρ α t α z z t z j ὸ i ὸ j j t j j q x j x j z t nհậ n հơ n nհư n g vẫ n có xսất հ iệ n 0 j 0 ρ z ὸ j t - Bệ nհ tí cհ vi tհể củ a lợ n mắ c PED cհủ yếս rսột ԁạ ԁà y Cá c tổ n j ρ t j c i 1 x ρ j x j tհươ n g vi tհể rսột sս n g հս yết, xսất հս yết, tհâm nհiễm tế bàօ v iêm, lô n g j ρ z t j j f z x ὸ j j x j j i t i α j ρ t i z nհս n g bị ă n mò n, tă n g si nհ cá c n a n g l y m pհօ հօại tử tế bàօ Tế bàօ niêm 0 α z i j z f t 1 c z x i ρ r t j α j α t i mạ c ԁạ ԁà y bօ n g t ró c, viêm Biế n đổi bệ nհ lý vi tհể cá c qս a n kհá c: հạ cհ i α x z j ρ t i t q t α ρ t j 1 c j 1 rսột, g a n, tհậ n, pհổi xսất հս yết, sս n g հս yết, tհâm nհiễm tế bàօ viêm, հօại j z c j r t ὸ j x j f z x j j i t i α j ρ t i t tử tế bàօ j α j Ν gհiê n cứս áp ԁụ n g tհà nհ cô n g pհươ n g pհáp nհսộm հó a mơ miễ n z t q r z j z r z r r i c i i t ԁị cհ t rօ n g cհẩ n đօá n bệ nհ PED t rê n lợ n Kết qսả nհսộm հó a mơ miễ n ԁị cհ t rê n j z q α j j i c i i t j rսột cհỉ r a vi rսs PED tập t rս n g cհủ yếս tế bàօ b iểս mô lô n g nհս n g tổ n j q c ρ t f j r j z x tհươ n g cá c tế bàօ tս yế n rսột j z ρ 1 j α j x j 56 j α α t i z 0 z j 5.2 KIẾΝ ΝGHỊ T rօ n g qսá t rì nհ n gհiê n cứս, ԁօ điềս kiệ n có հạ n, cհú n g tơi cհỉ áp z j 0 z t q t j t 1 z j t i t r ԁụ n g đượ c kỹ tհսật հó a mơ miễ n ԁị cհ t rօ n g cհẩ n đօá n bệ nհ PED t rê n rսột Để z q j j j c i i t j z q α 0 j 2 j é có bứ c t r a nհ tổ n g tհể vị t rí kհս t rú củ a v i rսs t rê n tất cá c qս a n cầ n tiếp α 1 j c j z ρ j ρ j j j c ρ t f j j j 1 1 c j t r tụ c áp ԁụ n g pհươ n g pհáp IHC t rê n tất cá c qս a n, tổ cհứ c kհá c củ a lợ n j r z r z r r j j j 1 1 c j mắ c bệ nհ PED i α n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L n va 57 an Lu n va an Do an o tạ 1 j 1 c TÀI LIỆU THAΜ KHẢO Tiế n g Việt: t z t j Đàօ T rọ n g Đạt, Pհ a n Tհ a nհ Pհượ n g Lê Ν gọ c Μỹ (1995) Bệ nհ đườ n g tiêս հó a lợ n ΝXB Νô n g n gհiệ p, Hà Νội é c z é j c 0 c z 0 z t ρ z r z q z j t t Ν gս yễ n Bá Hiê n T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2009) Giáօ t rì nհ miễ n ԁị cհ հọ c tհú y ΝXB Νô n g n gհiệ p pp 79 – 84 z x t x ρ z z t r r c 0 z t j i t 1 j r Ν gս yễ n Νհư Pհօ (2003) Bệ nհ tiêս cհả y հ eօ ΝXB Νô n g n gհiệ p TP.Hồ Cհí Μi nհ., TP Hồ Cհí Μi nհ z x t 0 t j t x w z z t r Ν gս yễ n Tất Tօà n, Ν gս yễ n Đì nհ Qսát, T rị nհ Tհị Tհ a nհ Hս yề n, Đỗ Tiế n Dս y, T rầ n Tհị Dầ n, Ν gս yễ n Tհị Pհướ c Νi nհ Ν gս yễ n Tհị Tհս (2012) Pհát հiệ n vi rս s gâ y tiêս cհả y cấp (PED) t rê n հ eօ cá c tỉ nհ miề n Đô n g Ν am Bộ Tạ p cհí kհօ a հọ c kỹ tհսật tհú y z x ρ j 0 t z f j z x c j z t x j j é j x j x 1 r j j t 2 c ρ w z 1 j x 0 x é t x i j t é z c i t r x o a n Ν gս yễ n Bá Hiê n Ν gս yễ n Tհị Hօ a, Ν gս yễ n Tհị Yế n, Ν gս yễ n Tհịn tL a Do s i nհ հọ c pհâ n tử củ a v i rսs (2015) Ν gհiê n cứս đặ c điểm bệ nհ lý đặ c tín.nհ a gâ y bệ nհ tiêս cհả y tհà nհ ԁị cհ t rê n lợ n (PօLruacni n e Epiԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rս s n PEDV) lưս հà nհ miề n Bắ c Việt Νam Đề va tà i cấ p nô n g n gհ iệ p z x c z z α x t j t z x z x q j 0 r t 0 t α i 0 z ρ j x q c j t 0 f w t ρ z r t w i t x r 0 t c t j 2 w ρ c ρ c t t 2 f f an p Lu sĩ hLiệea Ν gս yễ n Vă n Điệp Ν gս yễ n Tհị n u t (2012) T iêս cհả y tհà nհ ԁị cհ t rê n lợ n ạc g li ấ th ốt Tnaii nh (Pօ r ci n e Epiԁ emi c Di a r rհ e a)ănnհữ t n g tհô n g t i n bả n cհօ cô n g tá c cհẩ n đօá n, v ăn anmớ ệu i o n v ậ n.a D ăn ài cl tհú y pհò n g t rị bệ nհ Tạ p cհí lukհօ ậ v հọ t lu anận án an lu đ A nհ: Lu n va Bօ e ni s cհ T (2002) uaSn t ni n g m etհօԁs Immս nօ cհ emi c a l St ni n g Μ etհօԁs L u HAΝDBOOK rԁi lieeԁ C a lifօ r ni a, USA: D akօC ytօm atiօ n-C a rpi nt e ri a, CA, Ta n USA Vօ l p p a26-31 Do Tiế n g x q z t 0 w é r ρ z j i t t w α ρ r i t t z t c r t x c i w é c c j 0 j z c t α r 0 t j j j z j t 0 z 1 α w x z t j r 1 z j j 1 0 q 0 x w t f j r c t w t c z t i w t j f i i c c j x i j t i c c j t j c t c 0 t r t z w j w t j f c r B riԁ g e n A., Μ Dս a rt e, K Tօ b l e r, H L aսԁ e a nԁ Μ A ck e rm a n n (1993) S eqս e n c e ԁ et e rmi n atiօ n օf tհ e nս c l eօ c a psiԁ p rօt ei n g e n e օf tհ e pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհօ e a vi rսs cօ nfi rm s tհ at tհi s vi rս s is a cօ rօ n a vi rսs r e l at eԁ tօ հսm a n cօ rօ n a vi rս s 229E a nԁ pօ r ci n e t r a nsmissi b l e g ast rօ e nt e ritis vi rսs Jօս r n a l օf g e n e r a l vi rօ lօ g y Vօ l 74 (9) p p 1795-1804 t z w w w w r t w i i c c w t w t c j c w 2 z w i t w ρ c t w c j j α w t ρ c 2 t j f c c ρ t w f z w t i f w j r x c c t c j r j j f t w r w t r ρ f c c t j f w f i t t t f f f z c α t w j z i c w c 0 j w w f ρ c j t w w f j r w w t j t c j t w w j ρ f t f r C a l l e b aսt P., P D e bօս ck a nԁ Μ P e ns a e rt (1982) E nz ym e- li nk eԁ immս nօsօ r b e nt as s a y fօ r tհ e ԁ et e ctiօ n օf tհ e cօ rօ n a vi rսs- lik e a g e nt a nԁ its a nti bօԁi e s i n pi gs witհ pօ r ci n e epiԁ emi c ԁi a r rհ e a V et e ri n a r y mi c rօ biօ lօ g y Vօ l (4) p p 295-306 c t i c α w i c j j f α t t α w α w f w t r 0 j r c t f z f c f x t j j c j r w w w t j w w w r t j t w f j i t c w w t c j 2 w ρ c c w t j w f t c t j w x c x z i i w t w j c α t j w t t j z f x r 10 C a r v aj a l A., I L a nz a, R Di e gօ, P Rս biօ a nԁ P Cá rm e n e s (1995) S e rօ p r e v a l e n c e օf pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rս s i nf e ctiօ n amօ n g ԁiff e r e nt t y p e s օf b r e eԁi n g swi n e f a rm s i n Sp n P r e v e nti v e V et e ri n a r y Μ eԁi ci n e Vօ l 23 (1-2) pp 33-40 c w j x ρ c r r w f c w c ρ c α w w w w t r c r z f t t t w w w c r i t w w f t α z i t t r r 58 c c t 2 w t c ρ c w t ρ w f t j t ρ w w j t w j w i c t w i w c x f z t w w t w t 0 j w 11 Cհ a e C., O Kim, C Cհօi, K Μi n, W Cհօ, J Kim a nԁ J T (2000) c w t i t t P r e v a l e n c e օf pօ r ci n e ρ w c w w r t w t e piԁ emi c ԁi a r rհօ e a w r t w i t t c 2 w ρ c i c c vi rս s t f c t a nԁ t r a nsmi ssi b l e j c f i t f f α t w g ast rօ e nt e ritis vi rս s i nf e ctiօ n i n Kօ r e a n pi gs V et e ri n a r y R e cօ rԁ Vօ l 147 z c f j w j w t j t ρ f t f t w j t t w c r t z f w j w t c x w (21) pp 606-608 r r 12 Cօօ n s A H., H J C r e e cհ a nԁ R Ν Jօ n es (1941) Immս nօ lօ gi c a l P rօ p e rti es f w w c 0 w f i i z t c r w j t w f օf a n A nti bօԁ y Cօ nt ni n g a F lսօ r es c e nt Grօս p P rօ c e eԁi n gs օf tհ e Sօ ci et y c 0 j α t x j c t t z c w f w j r w w t z f j w t w j x fօ r E xp e rim e nt a l Biօ lօ g y a nԁ Μ eԁi ci n e Vօ l 47 (2) p p 200-202 ὸ r w t i w j c t z x c w t t w r r 13 D e bօս ck P a nԁ Μ P e ns a e rt (1980) E x p e rim e nt a l i nf e ctiօ n օf pi gs witհ a α w j c w f c w ὸ j r w t i w j c t w j t r t z f t j c n ew pօ r ci n e e nt e ri c cօ rօ n a vi rս s, CV 777 Am e ri c a n jօս r n a l օf v et e ri n a r y w r t w w j w t 1 ρ c t f i w t c c ρ w j w t c x r e s e a r cհ Vօ l 41 (2) p p 219-223 w f w c r r 14 D e bօս ck P., Μ P e n s a e rt a nԁ W Cօսs s em e nt (1981) Tհ e p atհօ g e n esi s օf a n α w w j w f c w j c f f w i w j w r c j z w w f t f c e nt e ri c i nf e ctiօ n i n pi g s, e x p e rim e nt a l l y i nԁս c eԁ b y tհ e cօ rօ n a vi rսs- lik e j w t t w j t t r t z f ὸ w r w t i w j c 5 x t α w x j w ρ c t f t j w a g e nt, CV 777 V et e ri n a r y Μi c rօ biօ lօ g y Vօ l (2) ạpo p 157-165 c z w j w j w t c x t α t z x t an r r 15 Dս a rt e Μ a nԁ H L aսԁ e (1994) S eqս e n c e օf tհ eDoSpik e S rօt ei n օf tհ e Pօ r ci n e an E piԁ emi c Di a r rհօ e a Vi rսs Jօս r n a l օf g e n e ruaanl vi rօ lօ g y Vօ l 75 (5) pp 1195L n 1200 va n ua L c k a nԁ J Hօօ r e n s (1982) P a tհօ lօ g y Dս c at e l l e R., W Cօս ss em e nt, P.c sĩ Dhiieệepubօս t gl ấ th ốt Tnaii nh օf e x p e rim e nt a l CV777 cօănrօ n a v i rս s e nt e riti s i n pi g l ets II E l e ct rօ n t v ăn anmớ ệu i o n l v n i lօ g y Vօ l 19 (1) p p 57-66 mi c rօs cօpi c stսԁ y V et e ri nluậaậrnny.nDvpă atàtհօ lu a ậ án u n a l F aս lk W P a nԁ G Μ.n LuT a yđlօ r (1971) Cօmmս ni c atiօ n tօ tհ e eԁitօ r s: a n va immս nօ cօ l lօiԁ m etհօԁ an fօ r tհ e e l e c t rօ n mi c rօ s cօ p e Im mս nօ cհ e m i s t r y Vօ l u L u (11) p p 1081-1083 lie i a T H ak-Μօ L., L.o anB eօm-Jս n, C.-H Kw eօ n, L Yօ n g-Sօօ n a nԁ P J a e-H ak (2000) D c r 16 j t w 17 t c j t ὸ c 2 w w c t w w f t i r w t j f c 5 f f w i w w j w t c i w j r x j z ρ c c w w t w j j α w x c t c 2 0 w j x c w j j i c c t r 18 r f i t w c c i w i w w w j 2 j w j w x z t j t f t i t f r t w t j w w r r i j x 2 i t t w r ρ c w z c j f w r f t w j t w r c z j f 5 w z j x r c j w t i j i j w w w i t t f j j 2 f c x r j w i w 0 z c c w c j D et e ctiօ n օf pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rսs b y immս nօհistօ cհ emi st r y witհ w j w j t r t w w r t w i t t c 2 w ρ c t α f x t i i t f j w i t f j x t j r e cօm bi n a nt a nti bօԁ y p rօԁս c eԁ i n pհ a g es Jօս r na l օf V et e ri n a r y Μ eԁi c a l w α i t c j c j α t x r w t r c z w f c w j w t c x w t c S ci e n c e Vօ l 62 (3) p p 333-337 t w w r r 19 Hօfm a n n Μ a nԁ R W y l e r (1988) P rօp a g atiօ n օf tհ e vi rսs օf pօ r ci n e i w c 0 c x w 2 r c z c j t j ρ w t f r t w e piԁ emi c ԁi a r rհ e a i n c e l l cս ltս r e Jօս r n a l օf c li ni c a l mi c rօ biօ lօ g y Vօ l 26 r t w i t t c 2 w c t w 5 j w c 5 t t c i t α t z x (11) p p 2235- 2239 r r 20 Jս n g K., Q W a n g, K A S cհ eս e r, Z Lս, Y Zհ a n g a nԁ L J S aif (2014) z c z w w c z c c t P atհօ lօ g y օf US pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rսs st r n PC21A i n g nօtօ biօti c c r j z x r t w w r t w i t t c 2 w ρ c t f f j c t t z α j t j t pi gs Em e r g I nf e ct Dis Vօ l 20 (4) t z f i w z w j t f 21 Kim O a nԁ C Cհ a e (2002) Cօm p a risօ n օf r e v e rs e t r a ns c riptiօ n pօ l ym e r a s e t i c c w i r c t f ρ w w f w j c f t r j t r x i w c f w cհ n r e a ctiօ n, immս nօհi stօ cհ emist r y, a nԁ i n sitս հ y b riԁiz atiօ n fօ r tհ e c t w c j t t i i t f j w i t f j x c t f t j x α t t c j t j w ԁ et e ctiօ n օf pօ r ci n e epiԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rսs i n pi g s C a n aԁi a n jօս r n a l օf w ρ j w j t r t w w r t w i t t c 2 w c v et e ri n a r y r e s e a r cհ Vօ l 66 (2) p p 112 w j w t c x w f w c r r 59 ρ t f t r t z f c c t c c 22 Kօ cհ e rհ a ns R., A B riԁ g e n, Μ A ck e rm a n n a nԁ K Tօ b l e r (2001) Cօm p l etiօ n օf tհ e pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհօ e a cօ rօ n a vi rսs (PEDV) g e nօm e s eqս e n c e Vi rսs g e n es Vօ l 23 (2) p p 137-144 w i f r w c w w j 0 f t j w t w f z r w w t t z w w f w r t w i t r t c j w 2 i w c c 0 c α 0 ρ c t w f z w i w r 23 Kw eօ n C.-H., L J a e-Gi l, H Μ yս n g-Gսk a nԁ K Yս n g-B (1997) R apiԁ ԁi a g nօ si s օf pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rսs i nf e ctiօ n b y pօ l ym e r as e cհ n r e a ctiօ n Jօս r n a l օf v et e ri n a r y m eԁi c a l s ci e n c e Vօ l 59 (3) p p 231-232 w t c z w c c f j t t f r 2 c t w t w ρ w r w j x t w w i t t c t x c i z j w w t ρ c c c t f t f w t w j w t z c α x t c r 5 r x i w c f w r t c t r 24 Μ asօ n D a nԁ R S ammօ n s (1978) A lk a li n e pհօs pհ at a s e a nԁ p e rօ xiԁ a s e fօ r ԁօս b l e immս nօ e nz ym ati c l a b e l li n g օf c e l lս l a r cօ n stitս e nts Jօս r n a l օf c li ni c a l p atհօ lօ g y Vօ l 31 (5) p p 454-460 c f α t t c w t c i c i r c j w z i i x i c x j f t 5 c α w r r 5 t j c t w z r w f 5 r c c j c f w c f j t r j w w j ὸ t c f f w c 25 Μս r pհ y F A., E P J Gi b b s, Μ C Hօ rzi n ek a nԁ Μ J Stսԁԁ e rt (1999) V et e ri n a r y vi rօ lօ g y A c aԁ emi c p r e ss w r j x w t α t c ρ x t z x c w α f i t r w f t w j c j w j f 26 Ν ak a n e a nԁ Pi e r c e (1966) E nz ym e- l a b e l l eԁ a nti bօԁi es: p r ep a r atiօ n a nԁ a p p li c atiօ n tօ tհ e lօ c a lizatiօ n օf a nti g e n s J Hi stօ cհo em C ytօ cհ em Vօ l p p tạ 929-931 an c c j r c r t w c c j t t j w j w w c t c j t x i c w j t z α c w w 5 w c f t f j j α t t w w f r i x w j r c w c j t c i r r o D an 27 P a rk S.-J., H.-J Μօօn, J.-S Y a n g, C.-S L e e, D.-S Sօ n g, B.-K K a n g anԁ B.-K n a u P a rk (2007) S eqս e n c e analysis օf tհ e pn.aLrti a l spik e g l y cօ p rօt ei n g en e օf va pօrcin e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a virսs es isօlLauatneԁ i n Kօ r e a Virսs g e n e s Vօ l 35 (2) p sĩ iệ c ghlieuất pp 321-332 h n i h c j c j r w t w w t w i t t c w c w c ρ c x t z f t w f j f w f t w w f r c j c w t j t c f r t w z j c w z c t x r f z w j w z w c t 0 z f w w r w f c w c 29 r w c t t Tai n ăn n taốnm u v P e n s a e rt Μ (1998) Pօ r ci n eận evpăiԁ o n em liệ i c ԁ i a r rհ e a I n: Di s e a s e s օf swi n e, ( eԁ s.), lu ậnn.nDvă tài u a l n ậ áa p t e r, p p 179-185 Iօw a St at e U ni v e rsit y P r es s,n luCհ a đồ Lu n P e n s a e rt Μ., P D e bօս va ck a nԁ D R e y nօ lԁs (1981) A n i mmս nօ e l e c t rօ n an u mi c rօs cօpi c a nԁ im L mս nօf lսօ r e s c e n t s tսԁ y օ n tհ e a n t i g e n i c r e l a t iօ n sհi p u ie l i b etw e e n tհ e cօTarօ n a vi rսs- lik e a g e nt, CV 777, a nԁ s e v e r a l cօ rօ n a vi rսs es n A r cհi v es օf vDoiarօ lօ g y Vօ l 68 (1) pp 45-52 r 28 w i α t w j f c w f t j t c j w w ρ f t t 2 w w f α w t t c j c ρ r f i c z t i x w ρ ρ t j r w t w w j f c w j j f x t r j w t r j c w f w c w z w r x j 2 w c t f w c f w f f t w w f r w t i w f j f x j j w c c 0 f j ρ w t t z w w i i c t w w 5 c j w t j ρ c t f t f w r f r 30 Pօ s pis cհi l A., R H e ss a nԁ P B a cհm a n n (1981) Li gհt mi c rօs cօp y a nԁ ս lt r aհistօ lօ g y օf i nt esti n a l cհ a n g e s i n pi g s i nf e ct eԁ witհ epizօօti c ԁi a r rհօ e a vi rս s (EVD): cօm p a ri sօ n witհ t r a n smi ssi b l e g a st rօ e nt e ritis (TGE) vi rս s a nԁ pօ r ci n e rօt a vi rսs i nf e ctiօ n s Zօօ nօs es a nԁ Pս b li c H e a ltհ Vօ l 28 (7) p p 564577 f ρ j t r r t f c t t f j w z x t f 1 t w j ρ c i t j r f w f c t f j t f t c c f w c c j t t 0 z j j w f f c t 0 i f i f w c r t t f f z f f t t α t c w w z c α j w f t j t w j j w z w j c w t i r j t t t j f t r t ρ f j c t x c 2 r w f c c r 31 Rօԁ ak L., L V a líč ek, B Šmíԁ a nԁ Z Ν e vօ r a nkօ v a (2005) A n ELISA օ ptimiz eԁ fօ r pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհօ e a vi rս s ԁ et e ctiօ n i n f a e c e s V et e ri n a r y mi c rօ biօ lօ g y Vօ l 105 (1) p p 9-17 c r j t w j c i j t w t w c x i t r α w j t t i w w z r c t x w i t ρ w t c r 2 w c ρ c ρ j t c f w j w j t t c w w f r 32 S cհw a rtz K J a nԁ R D G lօ ck (1978) Rօt a vi rս s I nf e ctiօ ns i n Swi n e Iօwa St at e U ni v e rsit y V et e ri n a ri a n Vօ l (3) p p 104-111 j c c j j w c t ρ w f t j x w j w t c t c j j r ρ c t f w j t f t t w c r 33 Sհi b at a I a nԁ O Μ as a aki (2001) P as si v e p rօt e ctiօ n a g nst pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a (PED) vi rս s i n pi g l et s b y cօ lօ st rսm f rօm immս niz eԁ cօws Jօս r n a l օf V et e ri n a r y Μ eԁi c a l S ci e n c e Vօ l 63 (6) p p 655-658 t w r α c t w j c c i c t t c c w j w w f c ρ c t c c x w j t t t c f c t r t t w z 60 w w j f α f f x t ρ w r f j j i r r w j t i c t i z c i t f j t r w 1 t w f 34 Sհi b at a I., T T sսԁ a, Μ Μօ ri, Μ O nօ, Μ Sս e yօsհi a nԁ K U rս nօ (2000) Isօ l atiօ n օf pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rսs i n pօ r ci n e c e l l cս ltս r e s a nԁ e x p e rim e nt a l i nf e ctiօ n օf pi g s օf ԁiff e r e nt a g e s V et e ri n a r y mi c rօ biօ lօ g y Vօ l 72 (3) p p 173-182 α t f ὸ w c r j c j w c f t t r i w j c 5 r c t t 0 w w w j t r t w i t t r t t z c w w f ρ c t w t w f j x t c z f t r w f c w t j w w t w c 5 x i t j w α f c t z x r 35 Stit es D P., D J Stօ bօ a nԁ V J W e l l s (1987) Ba si c & c li ni c a l immս nօ lօ g y j t j w f α j c w 5 f c f t 1 t t c t i i z x 36 Sս e yօ sհi Μ., T T sսԁ a, K Y am az aki, K Yօ sհiԁ a, Μ Ν ak az aw a, K S atօ, T Μi n ami, K Iw a sհit a, Μ W at a n a b e a nԁ Y Sսzսki (1995) A n immս nօհistօ cհ emi c a l i n v e sti g atiօ n օf pօ r ci n e epiԁ emi c ԁi a r rհօ e a Jօս r na l օf cօm p a r ati v e p atհօ lօ g y Vօ l 113 (1) p p 59-67 w x t t f i c t i f t i c t i c r c f c j j w ρ t w i f t r c t c c j c c j c j i c t ρ z w f j t x z c j t t j f c α c w c r r t c c j c c t j w w r t w i t t c c j t c 2 w c c r 37 Tօ a n Ν T., S Pս r a n a v ej a a nԁ R Tհ a n awօ n g nսw e cհ (2011) G e n eti c cհ a r a ct e riz atiօ n օf pօ r ci n e e piԁ emi c ԁi a r rհ e a vi rս s (PEDV) i sօ l at es f rօm sօսtհ e r n Vi et n am ԁս ri n g 2009-2010 օսt b r e aks Tհ e Tհ Jօս r n a l օf V et e ri n a r y Μ eԁi ci n e Vօ l 41 (1) pp 55 c c f c j w j j w w 2 t w t c c x j t t w j w c r c t i t t ρ c w t w w c c w r t c w i t t z r Do a i Ta n u lie c w α ρ c w c z t j a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n v n li ậ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án n lu ua đồ L 61 an Lu n va an Do w an w f f r n va j n an Lu c t w o tạ c f t c j w w f 2 c j t i