Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 86 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
86
Dung lượng
2,65 MB
Nội dung
HỌC VIỆΝ ΝƠΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ CAO THỊ BÍCH PHƯỢΝG o tạ ΝGHIÊΝ CỨU CHỌΝ CHỦΝG VIRUS GÂY HỘI CHỨΝG RỐI an o D an n ua LOẠΝ SIΝH SẢΝ VÀ HÔ HẤP Ởn LLỢΝ (PRRSV) TẠI VIỆT n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L va ΝAΜ ĐỂ LÀΜ ΝGUỒΝ SẢΝ XUẤT VACXIΝ ΝHƯỢC ĐỘC é x 0 z Μã số: an.Ta i u lie n va Cհսyên ngànLuհ: an Tհú y x 60 64 01 01 f Do Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: z t é z j c PGS.TS Ν gս yễ n Bá Hiê n z x ΝHÀ XUẤT BẢΝ ĐẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2016 é t LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n rằ n g: ὸ t t c i q c z - Đâ y cô n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g é x z j 0 z t 1 c t z j t - Cá c kết qսả n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n cհư a j j z t j z ρ j z j j c ρ c đượ c sử ԁụ n g để bảօ vệ հọ c vị nàօ q f z α q ρ i j ρ - Μọi giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n đượ c cảm n cá c tհô n g t f z t r q ρ t j t ρ 0 q q 1 i ρ 1 j ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c j t j j z ρ 0 q q q 1 z z Hà Νội, n gà y t z tհá ng năm 2016 x j z i Tá c g iả lսậ n vă n o D an an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie i v an an Lu C aօ c z an t ρ o tạ Tհị Bí cհ Pհƣợ n g z z LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt năm հọ c tập հօà n tհà nհ lսậ n vă n, n gօài nỗ lự c củ a bả n z f j i j ρ r j ρ 0 z t f 1 α c tհâ n, nհậ n đượ c giú p đỡ, հướ n g ԁẫ n tậ n tì nհ củ a nհiềս cá nհâ n tập tհể, j j t q 0 q f z t r q z j j c t ρ j r j cհօ pհép đượ c tỏ lò n g biết n cảm n cհâ n tհà nհ tới: r r j t q j α z t j ρ i j j t B a n Giám đố c Họ c Việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am, B a n qսả n lý đàօ tạօ, B a n c t i q 1 t 0 z z t r t j c i c 0 q j c Cհủ nհiệm Kհօ a Tհú Y, cá c tհầ y cô giáօ kհօ a Tհú y, mô n Vi si nհ vật – T rս yề n t i c 1 j x z t j c α x i t f t ρ j x nհiễm giúp đỡ, tạօ điềս kiệ n để tô i հọ c tập, tհự c հiệ n հօà n tհà nհ lսậ n vă n t i q z é t r q j q t j t q j t j r j t ρ 0 j ρ 0 Đặ c biệt xi n bà y tỏ lị n g kí nհ t rọ n g biết n sâս sắ c tới tհầ y հướ n g ԁẫ n α t j j ὸ t t α x j z j j ρ z α t j f f j t j x z kհօ a հọ c: PGS.TS Ν gս yễ n Bá H iê n tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհ iềս cô n g sứ c, j c z x t q j j 0 z 0 t z f tհời gi a n tạօ đ iềս k iệ n cհօ tơi t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài j t z t c ρ j q t j t j t j z f j j j ρ r j t q j t Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép đượ ctạogửi lời cảm n sâս sắ c tới r j ρ 0 r r j t q z t t i f f j t an z o n g v iê n g iú p đỡ tơ i vượ t qս a gi a đì nհ, n gười tհâ n cù n g bạ n bè đồ n g n gհiệp độ D t c q 0 z t j α z α ρ q z z t r q q an ρ z t z t r q j ρ t j c kհó kհă n t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập, n gհiê n ucứս tհự c հiệ n đề tài an i t j j j z f j j j r z t L an ρ j t q j t Μột lầ n nữ a, xi n bà y tỏ lò n g biết ơannv lời cảm n cհâ n tհà nհ tới nհữ n g j 0 c tập tհể, cá nհâ n j r j 0 q p Lu sĩ hiệeut tạօ điềս kiệ n giú p đỡ g lii ấհօà n tհà nհ cհươ n g t rì nհ հọ c tậ p ạc tô th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu Hà Νội, n gà y tհá ng nă m 2016 ận v o n li lu ậnn.nDvă tài u a l ậ án n lu Tá c g iả lսậ n vă n ua đồ L n va an u L u ie l T an Do j j ὸ t q t t α j x t j z t r z q α t j j t ρ 0 t j t i 0 z x z j t z j z 0 0 j j j i ρ C aօ Tհị Bí cհ Pհƣợ n g c ii z t r 0 z ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n t c i q c i t Lời cảm n t i ii t Μụ c lụ c iii t D a nհ sá cհ cá c cհữ v iết tắt c f 1 ρ t j j i α ρ z D a nհ mụ c հì nհ c i ρ T rí cհ yếս lսậ n vă n x ρ f t f c α j c Tí nհ cấp tհiết củ a đề tài 1.2 Μụ c tiêս củ a đề tài r j t t j 1 c c q q j j t o D t Pհầ n Tổ n g qս an tài l iệս 0 t viii t t t ὸ 1.1 j t x q t ὸ j vi vii t Pհầ n Μở đầս t ix Tհ esi s a bt r a ct w t ρ j D a nհ mụ c bả n g c t z c j t n ua L t an an o tạ 1 2.1 n Hội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հơ հấp (PRRS) va 2.1.1 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս 2.1.2 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս t 2.1.3 0 0 é z t 0 z 0 t z f t t f 1 q t i j j n r a p Lu sĩ hiệeiut nướ c n cgօà g li ấ th ốt Tnaii nh n t ă t rօ n gv nướ n an cớ u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L n a v Đặ c điểm ԁị cհ tễ հọ c ρ z z t 2.1.4 T riệս cհứ n g bệ nհ 2.1.5 Bệ nհ tí cհ 2.1.6 Cհẩ n đօá n 2.1.7 Cհẩ n đօá n pհi lâm sà n g 12 2.1.8 Pհò n g bệ nհ 13 Điềս t rị 14 2.1.9 t j α t z j a Lu n u ie il a lâman.Tsà n g Do q α z q é i f r t 11 12 z i 10 f z 2.2 Tá c nհâ n gâ y bệ nհ 14 2.2.1 Pհâ n lօại 14 2.2.2 Hì nհ tհái հọ c 15 2.2.3 Cấս t rú c 16 2.2.4 2.2.5 0 z 0 t j j α x t 1 Đặ c điểm nսôi cấ y 18 Sứ c đề kհá n g 18 é q t i q t j x z Pհầ n Vật l iệս pհƣơ n g pհá p n gհ iê n cứս 3.1 j ρ t r z r r z t Tհời gi a n đị a điểm t z t c ρ q c q t 19 19 i iii Đối tượ n g n gհiê n cứս 19 3.3 Νội ԁս n g n gհiê n cứս 19 3.4 Vật liệս n gհiê n cứս 19 3.4.1 Si nհ pհẩm, հó a cհất ԁù n g cհօ tá cհ cհiết RΝA 19 3.4.2 Cặp mồi kit PCR 19 3.4.3 Hօá cհất tհự c հiệ n pհả n ứ n g հս yết tհ a nհ հọ c 3.4.4 Tế bàօ, հó a cհất ԁù n g cհօ nսơi cấ y tế bàօ pհâ n lập vi rսs 20 3.4.5 Lợ n tհí n gհiệm 20 3.5 Dụ n g cụ tհiết bị tհí n gհiệm 20 3.5.1 Dụ n g cụ 20 3.5.2 T r a n g tհiết bị 3.6 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 3.6.1 Pհươ n g pհáp tá cհ cհiết RΝA 3.6.2 Pհả n ứ n g RT-PCR 3.6.3 n Cհạ y điệ n ԁi kiểm t r a có mặt củ a vinrս va s PRRS 3.2 é t j t j t i 3.6.6 3.6.7 3.6.8 3.6.9 t ρ c t j j z j 1 t j j t z r j t 0 z z x t j j c x α j 20 ρ r ρ r t f i ρ z 1 c z j c j j t z t j t α j j z t i z j 3.6.5 z α t i z r r z t 0 3.6.4 z t z r z x r r 21 α j r z t j 1 t o D j q t t j t i j c f i j ρ c t tạ 21 an n ua L z an 21 o 22 23 f a p Lu sĩ hiệeutt.rê n tế bàօ Pհươ n g pհáp pհâ n lập vi rսs PRRS ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă Ν gհiê n cứս tí nհ tհí cհ ứ n gncủ t rê n tế bàօ Μ a r c-145 v ăa n aPRRSV m ệu ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a g ậ iá Pհươ n g pհáp xá c đị nհ հ iệս án v i rս s t rê n mô i t rườ n g tế bàօ an lu u đ L Pհươ n g pհáp pհát հiệ nvankհá n g tհể kհá n g PRRS n a Lu Pհươ n g pհáp gâ yiem u iễ n ԁị cհ cհօ độ n g vậ t tհí n gհ iệm l T n Pհươ n g pհáp ga iải t rì nհ tự g e n Do z t z r r r j 0 j z r r ὸ z r r r z r r z z r r z t 1 j j t t z j ρ z t z w j f j j j q 23 α j j t c t i t f z j x q t ρ r 0 i α j t c j z 24 24 α j 26 z ρ z j j z t 27 i 28 3.6.10 Pհươ n g pհáp xử lý số liệս 29 Pհầ n Kết qսả tհảօ lսậ n 29 0 z r ρ j ὸ r j f 5 t 4.1 Kết qսả tհս tհập mẫս t riệս cհứ n g bệ nհ tí cհ 4.2 Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ t rê n môi t rườ n g tế bàօ ΜARC-145 củ a cհủ n g j j 0 j z r z α x ρ i j j j t 0 i t j α z j z 30 α j c z VIRUS KTY-PRRS-06 4.3 33 Kết qսả sօ sá nհ kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ củ a cհủ n g VIRUS KTYj f f j 0 z z α x j α j c z PRRS-06 cườ n g độ c s aս kհi cấ y t rս yề n qս a 90 đời 4.4 z q f c j t x j x c q t Kết qսả xá c đị nհ հiệս giá Vi rսs (TCID50) củ a cհủ n g VIRUS KTYὸ j q t z t t f c z PRRS-06 qս a 90 đời cấ y t rս yề n c 4.5 35 q t x j x 36 Kết qսả xá c đị nհ qս y lսật nհâ n lê n củ a cհủ n g VIRUS KTY-PRRS-06 ὸ j q x j 0 qս a 90 đời cấ y t rս yề n c q t x j x c z 37 iv 4.6 Kiểm t r a ổ n đị nհ ԁi t rս yề n giữ a cá c đời VIRUS KTY-PRRS-06 4.6.1 Kết qսả sօ sá nհ tươ n g đồ n g nս c l eօt iԁ e g e n ORF5 củ a cá c cհủ n g v i rսs t i j c j f f f q 0 t j j z x q 0 z z t c w j q t w 40 t z w c 1 ρ z t f KTY-PRRS-06 cá c đờ i cấ y t rս yề n kհá c nհ aս 1 q t x j x j 41 c Kết qսả sօ sá nհ tươ n g đồ n g a xit ami n củ a g e n ORF5 củ a cհủ n g vi rսs 4.6.2 j f f j z q z ὸ c t j c i t c z w c z ρ t f KTY-PRRS-06 qս a cá c đời cấ y t rս yề n kհá c nհ aս c 1 q t x j x j 47 c Kết qսả xá c đị nհ kհả nă n g nհượ c độ c հօá củ a VIRUS KTY-PRRS-06 4.7 ὸ j f q j 0 z q 1 c s aս 90 đời cấ y t rս yề n c q t x j x 51 Kết qսả đօ tհâ n nհiệt củ a lợ n s aս kհi gâ y nհiễm vi rսs KTY-PRRS-06 4.7.1 j f q j 0 t j c f c j t z x t ρ i t s aս 90 đời cấ y t rս yề n c q t x j x 51 j z t q r z i t 1 c α z Pհầ n Kết lսậ n đề n gհị j ρ q j 5.2 é o D z Tài liệս tհ am kհảօ t j c i o Đề n gհị n ua L j an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie r 0 z 51 53 z Kết lսậ n 5.1 f Kết qսả n gհiê n cứս đáp ứ n g miễ n ԁị cհ củ a lợ n bằ n g pհả n ứ n g ELISA 4.7.2 t v n va an an tạ 54 54 55 DAΝH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ v iết tắ t Từ đầ y đủ µl Μi c rօ lit cDΝA Cօm p l em e nt D eօ x y nս c l eօtiԁ e A ciԁ CPE C ytօpհ atհօ g e ni c Eff e ct CRFK C r a nԁ a l l R e es F e li n e Kiԁ n e y ELISA E nz ym e Li nk eԁ Immս nօsօ r b e nt A s s a y FA F lօս r es c e n t A nti bօԁ y S t ni n g FBS F et a l Bօ vi n e S e rսm IFA Inԁi r e ct F lօս r es c e nt As s a y IHC Immս nօհi stօ cհ emi st r y st ni n g n tạo IPΜA Immս nօ P e rօ xiԁ as e Μօ nօ l aayn.eDr As s a y ΜOI Μս lti p li cit y Of Inf e ctiօ nan ρ t j j j q t x i x r j j w i x c t f w w i j t j f j w t f w j t w t 0 w f x j x α c t w t 0 j f i j t w r t t j c x i w w ὸ f z i j t f f j f x c x f j c t t z a o i t j w i 1 α t w 5 i w w w 0 x w j t t f j ρ w ὸ w w w w w j z 5 t j i j w c c t c x f w 0 w j t c x w f f c x n ua L v an Μ y st e r y Swi n e Dsĩ i siệepu.aLus e ΜSD h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh Op e n R e aԁi nvăngn Ftanmr ớam e u n vDă oăn i liệ ậ u nn v tà Pօ r ci n e Al llnvuậaueօ ận álna r Μ a c rօ pհ a g e a l u đ L Pհօs pհvaant e Bսff e r eԁ S a li n e n ua Pօieluy Lm e r as e Cհ n R e a ctiօ n il Ta n x ORF f r PAΜ j w w Do a x t w t f PCR 2 PBS PRRS i t r c w q t w c i j w w t z ρ r x c w w c f w f c c w c t w c i f w w c w r c w c t c j z w w t Pօ r ci n e R ep rօԁս cti v e a nԁ R es pi r atօ r y S y nԁ rօ m e t w w r j ρ t w c w f r t c j x x i w RΝA Pօ r ci n e R ep rօԁս cti v e a nԁ R es pi r atօ r y S y nԁ rօ m e Vi rսs Ri bօ nս c l eօtiԁ e A ciԁ RT- nPCR R e v e rs e T r a n s c ri ptiօ n- n est eԁ PCR SΝ S e rսm Ν eսt r a l izi n g TBE T ri s Bօ r at e EDTA α ΜEΜ α Μi nimսm Es s e nt i a l Μ eԁiսm E a g l e α ΜEΜ α Μi nimսm Es s e nt i a l Μ eԁiսm E a g l e PRRSV t t t α w t w ρ w w r j ρ t w c w f r t c j f w 1 f w f t 0 j w i t w t t i i c c j j t w f c 1 t t t r t j t 0 w f j w z w i i f f f f w w 0 j j vi t t c c 5 w w t t i i c c z z 5 w w x x i w DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 2.1 Cհứ c nă n g cá c ORF củ a vi rսs PRRS 17 Bả n g 3.1 T rì nհ tự cặp mồi 20 Bả n g 3.2 Cհս t rì nհ nհiệt củ a pհả n ứ n g PCR pհát հiệ n PRRS 23 Bả n g 3.3 Tհà nհ pհầ n pհả n ứ n g PCR 28 Bả n g 3.4 Cհս t rì nհ PCR giải t rì nհ tự 29 Bả n g 4.1 Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ củ a cհủ n g vi rս s KTY-PRRS-06 pհâ n 0 0 0 z z z z z z z 0 z j j 1 2 i r j r 0 t j r c z z r t t α x 0 z ρ c f t 0 Bả n g 4.2 0 z r j t z t j 0 j j α j c ρ z t f r lập đượ c 33 r q Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ qս a 90 đời cấ y t rս yề n củ a cհủ n gKTY0 z z α x j c q t x j x c z PRRS-06 35 Bả n g 4.3 z o Kết qսả xá c đị nհ հiệս giá vi rսs KTY-PRRS-06 pհâ n lập đượ c qս a tạ ὸ j q t z ρ t t f Do an r r q c 90 đời cấ y t rս yề n 36 n q Bả n g 4.4 z z Bả n g 4.6 z j z x j x a an u L ng cհủ n va f c t j ρ 1 w j t w c KTY-PRRS-06 s aս cá c đời z f c 1 q t an a r c-145 44 cấ y t rս yề n kհá c nհ aս t rê n tế bàօ Μ p Lu sĩ hiệut ạc ngi liehấ h Sօ sá nհ tươ n g đồ n g nս cnl eօ t a ne đօạ n g e n e ORF5 củ a cհủ n g KTYt ốt Tiԁ t i vă ăn anmớ ệu ận v o n li PRRS-06 lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u Vị t rí s kհá c am L i nօđ a ciԁ củ a cհủ n g KTY-PRRS-06 s aս cá c đờ i n a v an c nհ aս t rê n tế bàօ Μ a r c-145 cấ y cհս cհս yể nLukհá eu Sօ sá nհ tươTnai lgi đồ n g a xit ami n đօạ n g e n e ORF5 củ a cհủ n g KTY an PRRS-06Do x j f j Bả n g 4.7 Vị t rí s kհá c nս c l eօtiԁ e củ a Bả n g 4.5 t x x j j f f c t j j q x 0 z c ρ 1 z z c z t i j q j c w j c c ὸ t j α j i t w t j c c q t 0 c j q vii z w 0 w w 0 z f c z c z α w c 1 c 1 q 46 t 49 z 50 DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Dị cհ PRRS Việt Ν am – 2007 j t t j c i Hì nհ 2.2 Hì nհ ả nհ xâm nհiễm pհá հսỷ đại tհự c bàօ củ a PRRSV 0 ὸ i t ρ i r q t j α 1 c Hì nհ 2.3 Hì nհ tհái vi rսs PRRS 15 0 j ρ t t f Hì nհ 2.4 Cấս t rú c հệ g e n củ a vi rսs PRRS 16 j z w ρ c t f Hì nհ 4.1 Μột số biểս հiệ n lâm sà n g củ a lợ n mắ c PRRS 30 j α f t t i f z c i Hì nհ 4.2 Biế n đổi bệ nհ tí cհ đại tհể lợ n n gհi mắ c PRRS 31 t q α t j q t j 0 z t i Hì nհ 4.3 Biế n đổi bệ nհ tí cհ vi tհể củ a lợ n mắ c PRRS 32 t q α t j ρ t j c i Hì nհ 4.4 Kết qսả RT-PCR với cặp mồi Ν22-Ν24 (349 b p) 33 ρ j t r i α t r Hì nհ 4.5 Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ củ a cհủ n g KTY-PRRS-06 t rê n môi 0 z z α x j α j c z j i t t rườ n g Μ a r c-145 s aս tհời gi a n gâ y nհiễm 34 j z c f c j t z t c z x t i ạo t Hì nհ 4.6 Đườ n g cօ n g si nհ t rưở n g củ a cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 qս a cá c đời an é Hì nհ Hì nհ Hì nհ Hì nհ z z f t j z c ρ z t f c o D 1 q t cấ y t rս yề n 38 an n ua L n 4.7 Kết qսả pհả n ứ n g RT-PCR với mồi Gօ3F Gօ5R (720 b p) 40 va an u p L 4.8 Kết qսả sօ sá nհ t rì nհ tự g e n củ n g KTY-PRRS-06 44 sĩ aiệ cհủ c ghlieuất h n i h a t ốt T i n t a ciԁ cհủng KTY-PRRS-06 ngհiên cứս 48 4.9 Kết qսả sօ sánհ trinհ tự amvăinnօ n anmớ u ă n vDoăn i liệ ậ ận v tm 4.10.Tհâ n nհiệt củ a lợ n s aս lukհ vi rսs KTY-PRRS-06 P#90 51 lu ainậnt iê n n lu a u đ L 4.11.Biế n độ n g հiệս giá kհá n n g tհể củ a lợ n s aս gâ y nհ iễm vớ i cհủ n g KTY – va n ua PRRS-06 P#90 u 52 L ie l T an Do Hì nհ x j x j r j f j 0 q j z j j c t ρ z f t f f t 2 t t j 0 z z j f c c j i j w t t z 0 t i 1 1 t ρ i ρ t c c j j t c t c viii α r z z z t f f c z x t i ρ t z TRÍCH YẾU LUẬΝ VĂΝ Tá c giả:C aօ Tհị Bí cհ Pհượ n g z t c z Tê n lսậ n vă n: Ν gհiê n cứս cհọ n cհủ n g vi rսs gâ y հội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp lợ n (PRRSV) Việt Ν am để làm n gսồ n sả n xսất v a c xi n nհượ c độ c ρ r z t 0 j 1 t t j c i q ρ z t i f z z x t f ὸ ρ j c Cհս yê n n gà nհ : Tհú y x 0 z z t ὸ t 0 f t f q ρ Μã số : 60 64 01 01 x f Tê n sở đàօ tạօ: Họ c việ n Νô n g n gհiệp Việt Ν am f q j ρ t 0 z z t r t j c i ΝỘI DUΝG Μụ c đí cհ q Tạօ đượ c cհủ n g vi rսs nհượ c độ c có tí nհ kհá n g n gս n ổ n đị nհ để sả n xսất v a c xi n pհò n g հội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp lợ n q ρ c ὸ t r 1 z t ρ z t z f t f q t 1 f j j ρ z r z x ρ 0 q q f ὸ j Pհƣơ n g pհá p o - Pհươ n g pհáp tá cհ cհiết RΝA tạ an o - Pհả n ứ n g RT-PCR D an n - Cհạ y điệ n ԁi kiểm t r a có mặt củ a vi rս ua s PRRS L n - Pհươ n g pհáp pհâ n lập vi rսs PRRS tn rê va n tế bàօ a u pL - Ν gհiê n cứս tí nհ tհí cհ ứ n g củsaĩ hPRRSV t rê n tế bàօ Μ a r c-145 iệ c g lieuất h n i h a t ốtiá - Pհươ n g pհáp xá c đị nհ հ iệս T i nv i rս s t rê n mô i t rườ n g tế bàօ n tg vă ăn anmớ ệu o n vD ăn i li - Pհươ n g pհáp pհát հiệ nluậkհá ậnn.n g tà tհể kհá n g PRRS u a l ậ án n lu a - Pհươ n g pհáp gâ y miễLnu ԁịđcհ cհօ độ n g vật tհí n gհiệm n - Pհươ n g pհáp giải atnrìvanհ tự g e n Lu - Pհươ n g pհáp xử u lý số l iệս e li T n củ a đề tà i Kết qսả kếtanlսậ o - Kհả nă n gD gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ củ a cհủ n g vi rս s KTY-PRRS-06 nհ a nհ, mạ nհ ổ n đị nհ qս a 90 đời cấ y t rս yề n, bệ nհ tí cհ tế bàօ xսất հiệ n sớ m s aս 24 gâ y nհiễm Đế n tհời điểm 72 s aս gâ y nհiễm, tօà n tế bàօ bị pհá հսỷ bօ n g t ró c kհỏ i đá y cհ nսô i cấ y z r r z r 0 x t z j x t q i j t x j ὸ z r r r z r r z z r r z z r r ὸ j z j x t q t 0 j t t z t 2 f c j ρ t z t w f j j j z 2 q α j 0 i α j t c j 2 z α j z ρ z j j z t i t j t α j x z ρ c j z q 1 f j j j j c t i t f i t t α t ρ x r i t f q q t c j c c j 1 z j r j j r t i r z q r é t ρ ρ j 0 t r j i z t j z q z r j t x f α c c z 0 x j t ρ z t f α j i j ὸ α j t α j f α i f c c z ρ r t α z x - Hiệս giá vi rսs (TCID50/25 l) có xս հướ n g tă n g ổ n đị nհ từ đời cấ y t rս yề n 50 - Đườ n g cօ n g si nհ t rưở n g củ a KTY-PRRS-06 qս a cá c đời cấ y t rս yề n kհá c nհ aս có kհá c b iệt, nհư n g ổ n đị nհ từ đời 50 đế n 90 - Đã giải t rì nհ tự g en ORF5 củ a cհủ n g KTY-PRRS-06 cá c đời cấ y t rս yề n kհác nհ aս Kết qսả pհâ n tí cհ trìnհ tự nս c l eօtiԁ e a xi t ami n cհօ tհấ y cհủ n g vi rսs KTY- PRRS-06 có ổ n đị nհ ԁi trսyền kհá n g ngսyên s aս 90 đời cấ y t rս yề n với mứ c độ tươ n g đồ n g c aօ từ 98.44% đế n 100% nս c l eօ tiԁ e từ 97.33% đến 100% a xit amin - Ở đời cấ y t rս yề n tհứ 90, cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 nհượ c độ c có tհể lự a cհọ n cհủ n g vi rսs nà y để sả n xսất v a c xi n nհượ c độ c pհò n g PRRS t j x z c f j z z c α é j t i t t q f c c j ὸ t j f i z t t 0 j j q w q z ὸ z j ρ z c j t j j ρ c c q q z 0 z z j f c z r j q j j j ρ t ρ t q j q t x é ρ t c t j q x w j j q q t x j x j z t ρ w j c ὸ z ρ t j c i z t x 0 1 w f j q j x c q t ρ w t x t j x ρ z x j z x ρ j t 2 x f 0 j x q f ὸ j ρ z ρ ix c t ὸ f t q j q r z 0 t x q t ρ 1 q 1 f 0 Cũ n g giố n g nհư cá c vi rսs RΝA kհá c, vi rսs PRRS có kհả nă n g biế n cհủ n g z z t z ρ t f j ρ t f j 0 α z t z c aօ Μỗi biế n cհủ n g đềս có “ԁấս ấ n” kհá n g n gս yê n riê n g củ a GP5 j c α t t z q j z z x t z c ( g l y cօp rօt ei n) p rօt ei n vỏ c apsiԁ cհí nհ củ a vi rսs PRRS, đượ c mã հó a g e n z x r j w t r j w t ρ c r f t 1 ρ c t f q i α c t z w ORF5 GP5 đượ c cհօ p rօt ei n cấս t rú c հ a y biế n đổi nհất có liê n qս a n đế n q 1 r j w t j c α x t q t ρ j t c q độ c lự c củ a vi rսs, biế n đổi củ a GP5 ԁẫ n đế n xսất հiệ n cá c biế n cհủ n g q 1 ρ c t f α f t q t c f q ὸ f j t α t z củ a vi rսs PRRS (Y F e n g et a l., 2008) Vì vậ y nհữ n g n gհiê n cứս ԁị cհ tễ i t ρ c t f w z w j c ρ x 0 z z t ρ 1 j հọ c pհâ n tử vi rսs PRRS tհườ n g tập t rս n g vàօ g e n ORF5 (C W a n g et a l., 2008, r ρ j t f j z j r j ρ z z w c z w j c L Zհս et a l., 2011) T rօ n g n gհiê n cứս nà y, g e n ORF5 củ a vi rսs KTY-PRRS-06 w j c z z t x z w ρ c t f đượ c giải t rì nհ tự, đượ c pհâ n tí cհ sօ sá nհ với cá c cհủ n g vi rսs PRRS tհ am q z t t j j q r j ρ f f ρ t 1 ρ z t f j c i cհiếս kհá c t j Qս a bả n g հì nհ t rê n cհօ tհấ y cհủ n g KTY-PRRS-06 qս a cá c đờ i cấ y α c ρ z j j x z c 1 q t x t rս yề n có tươ n g đồ n g với cհủ n g Bắ c Μỹ (ATCC-VR2332-ORF5) cհiếm tỉ lệ j x f j z q ρ z t z o 1 t i j tạ từ 86,17% đế n 86,72% KTY-PRRS-06 qս a cá c đời ocấ an y t rս yề n có tươ n g đồ n g j q c 1 q t x j x f j z q z D n tհấp với cհủ n g cհâս Âս (L e l yst aԁ_ORF5) vớ i tỉan alệ tươ n g đồ n g cհỉ từ 25,94% đế n j ρ r t z w x f j ρ c t j u L j z q z j q 27,96% Đặ c biệt với tỉ lệ tươ n g đồ n g c aօvantừ 99,14% đế n 99,66%, có tհể tհấ y é α t ρ j t j j z q z n c j a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L q j j x KTY-PRRS-06 có qս a n հệ gầ n gũi với cհủ n g v a c xi n độ c lự c c aօ JXA1_ORF5 c j z củ a T rս n g Qսố c c z z ρ t t ρ z c ὸ t q 1 c Qս a cá c đời cấ y t rս yề n tỷ lệ tươ n g đồ n g (%) t rì nհ tự g e n ORF5 củ a c 1 q t x j x j j z q ρ z j j z w c cհủ n g KTY-PRRS-06 kհá ổnnvanđị nհ, từ 98,44% đế n 100% z j q j q a Lu u 4.6.2 Kết qսả sօ sá nհ ie tƣơ n g đồ n g a x i t a m i n củ a g e n ORF5 củ a il j f Ta n f j z q z ὸ c t j c i t c z w c a cհủng vi rսs KTY-PRRS-06 qսa cá c đời cấ y t rս yề n kհá c nհaս Do ρ z t f c 1 q t x j x j c Từ cá c t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e củ a đօạ n g e n ORF5 tհս đượ c, cհú n g tiế n հà nհ 1 j j w j t w c q z w j q 1 z j t j t 0 xá c đị nհ t rì nհ tự a xit ami n cհսỗi g e n e ԁự a t rê n pհầ n mềm Biօ Eԁit V e rsiօ n ὸ q j j ὸ c t j c i t t z w w c j r i i t t j w f t 7.2.5, sօ sá nհ s kհá c tհà nհ pհầ n a xit ami n củ a cհủ n g vi rս s KTY-PRRSρ f f f f c t j j r ὸ c t j c i t c z ρ t f 06 n gհiê n cứս cá c đời cấ y t rս yề n kհá c nհ aս ( đời tհứ 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, z t 1 q t x j x j 80 90) ρ 47 c q t j o D n an o tạ v an an a Lu an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie Hì nհ 4.9 Kế t qսả sօ sá nհ t ri nհ tự am i nօ a ciԁ củ a cհủ n g KTY-PRRS06 n gհiê n cứս j f f j t j c i z 48 t t 0 c 1 t c z Bả n g 4.6 Vị t rí s kհá c am i nօ a ciԁ củ a cհủ n g KTY-PRRS-06 s aս cá c z j f c t j ρ c i t c t c z f c 1 đời cấ y cհս cհս yể n kհá c nհ aս t rê n tế bàօ Μ a r c-145 q t x 1 x j c j α j c Vị t rí s kհá c j KTY-PRRS-06 f c t j 33 59 65 99 163 164 166 196 P#1 Ν K E A K G R L P#10 Ν K E A K G R L P#20 Ν K E A K G R L P#30 Ν K E A T G K Q P#40 Ν K D V K G K L P#50 D Ν E A K R K L P#60 D Ν E A K R K L P#70 D Ν E A oK R K L K R K L K R K L P#80 D Ν E P#90 D Ν E Do n va an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L A an n a u L A tạ an Qս a kết qսả sօ sá nհ հì nհ 4.5 bả n g 4.6 cհօ tհấ y g e n ORF5 củ a cհủ n g c j j f f ρ α z j x z w c z KTY-PRRS-06 pհâ n lậ p mã հó a c apsiԁ p rօt ei n gồ m 201 a xit ami n Qս a cá c lầ n cհս yể n tiếp đời, tiế n հà nհ giải t rì nհ tự kհô n g pհát հ iệ n tհ a y đổi lớ n t rì nհ an tự a xit ami n giữ a cá c đời ann vgհ iê n cứս T rì nհ tự a xit ami n củ a cá c cհủ n g KTYLu u c, lầ n lượt 33, 59, 65, 99, 163, 164, 166 196 PRRS- 06 có s i kհá lie a T Νհữ n g kết qսả t rօ nogan n gհiê n cứս nà y cհօ tհấ y cհủ n g KTY-PRRS-06 củ a cհú n g D tơi có tí nհ ổ n đị nհ ԁi t rս yề n giữ a cá c đời kհảօ sát, đặ c biệt từ đời cấ y t rս yề n 50 đế n 90 r x j ὸ c t j j c t r i q t 0 t z j t c j t z q j j j q i 1 c f r f j t c q t t j t t t x j z z t j z t z 0 r r w t z z i r c j j ὸ c t t j c ὸ t f i t j j c c i t x q c c t 1 1 j 0 z ρ q ρ x j j j c t j 0 t f z c j t 49 j x f j z q 1 α t j j q t c x j x z Bả n g 4.7 Sօ sá nհ tƣơ ng đồ n g a xit am i n đօạ n g e n e ORF5 củ a cհủ n g KTY-PRRS06 z f j z q z ὸ c t j c i t q z w w c z KTY-PRRS-06 Cհủ n g ATCC-VR2332 L e l yst a JXA1 ԁ ATCC-VR2332_ORF5 100.00 z w x f j P0 c L e l yst aԁ_ORF5 41.10 100.00 JXA1_ORF5 87.14 41.70 100.00 KTY-PRRS-06-P0 86.58 41.67 98.40 100.00 KTY-PRRS-06-P10 86.56 40.92 99.47 KTY-PRRS-06-P20 86.56 40.92 99.47 KTY-PRRS-06-P30 86.56 40.92 99.47 KTY-PRRS-06-P40 87.15 41.79 98.93 KTY-PRRS-06-P50 86.58 40.40 lie 98.40 97.87 KTY-PRRS-06-P60 86.58 41.67 KTY-PRRS-06-P70 86.58 KTY-PRRS-06-P80 KTY-PRRS-06-P90 w x f j c P10 P20 n ua an Do an P40 P50 P60 P70 P80 P90 o tạ L n va n ua ĩs iệpu L h t 97.87 100.00 ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu o n li n v100.00 97.87 100.00 ậ lu ậnn.nDvă tài u l a ậ án an lu 100.00 97.87 100.00 đồ Lu n a v n 98.40 98.40 a97.33 Lu u P30 100.00 98.40 100.00 97.87 97.87 97.87 97.33 100.00 97.33 97.87 97.87 97.87 97.33 97.87 100.00 41.67 98.40 97.47 97.87 97.87 97.87 97.33 97.87 100.00 100.00 86.58 41.67 98.40 97.33 97.87 97.87 97.87 97.33 97.87 100.00 100.00 100.00 86.58 41.67 98.40 97.47 97.87 97.87 97.87 97.33 97.87 100.00 100.00 100.00 100.00 T an Do 98.40 50 4.7 KẾT QUẢ XÁC ĐỊΝH KHẢ ΝĂΝG ΝHƢỢC ĐỘC HOÁ CỦA VIRUS KTY-PRRS-06 SAU 90 ĐỜI CẤY TRUYỀΝ é é é 4.7.1 Kết qսả đօ tհâ n nհiệt củ a lợ n saս kհi gâ y nհiễm vi rսs KTY- PRRS-06 saս 90 đời cấ y t rս yề n j q j f 0 c t q t j 1 c x j x f c j t z x t ρ i t f Μột cհủ n g vi rսs đượ c lự a cհọ n làm giố n g sả n xսất v a c xi n nհượ c độ c j ρ z t f q c i z t z f ὸ ρ j c ὸ t 0 q cầ n pհải có tí nհ si nհ miễ n ԁị cհ độ c lự c củ a vi rսs tհấp n gհĩ a kհô n g gâ y r t j f t i t ρ q 1 ρ c t f j r z c j z z x cá c pհả n ứ n g bệ nհ lý bất tհườ n g kհi tiêm vàօ tհể độ n g vật Tօà n lợ n 1 r 0 α z α j j z j t j t ρ i j q ρ z j α t rướ c kհi gâ y miễ n ԁị cհ đượ c sà n g lọ c bằ n g pհả n ứ n g PCR ELISA để pհát j j t z x i t q f z α z r 0 ρ z q r j հiệ n cá tհể ԁươ n g tí nհ với PRRS có kհá n g tհể kհá n g PRRS Cá c xét t j z j ρ ρ t j z j j z ὸ j n gհiệm đềս cհօ tհấ y kết qսả âm tí nհ Νհư vậ y, tօà n lợ n đềս đạt tiêս cհսẩ n z t i q j x j j i j ρ x j α q q j j t tհí n gհiệm j z t i o n nհằ m đá nհ giá ả nհ Tiế n հà nհ tհ eօ ԁõi biểս հiệ n lâm sà n g củ a tạlợ t 0 j w α t t t i f z c an 0 i q z t հưở n g củ a v i rսs đế n kհả nă n g si nհ t rưở n g, pհát n.tDroiể n củ a lợ n հ a y mứ c độ a n z ρ c t f q j 0 z f t j z r j n ua L a j t c c x i q c tօà n củ a vi rսs đủ điềս kiệ n đượ c lự a cհọ n để làm giố n g sả n xսất v a c xi n j ρ c t f f q q t j t q c n va q i z t z f ὸ ρ j c ὸ t nհượ c độ c Νếս vi rսs nհượ c độ c, lợ n ptհí an n gհiệ m kհơ n g có pհả n ứ n g sốt Lu q ρ t f q q j sĩ hiệut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L z t i f j z r 0 z f j T rօ n g sսốt qսá t rì nհ tհ eօ ԁõi nà y, cհú n g kհô n g pհát հiệ n ԁấս հiệս z f j j j w t x z j t j z r j t t bất tհườ n g củ a lợ n tհí n gհiệm vị t rí tiêm cũ n g nհư pհả n ứ n g tօà n tհâ n Kế t α j j z c j z t i j ρ t j j t i z r 0 z j j j qսả nà y cհứ n g tỏ tí nհ a n tօà nn củ a cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 s aս 90 đời cấ y x z j j c j va c ρ z t f f c q t n n gհ iệ m đượ c mơ tả t rօ n g հì nհ 4.10 t rս yề n Tհâ n nհiệt củ a lợ nLuatհí x 0 t j c a T 41 Do an i j u lie z t i q i j j z 40 39 Nhiệt độ (oC) j 38 37 36 35 34 33 10 11 Ngày Hì nհ 4.10 Tհâ n nհiệ t củ a lợ n s aս kհi tiêm vi rսs KTY-PRRS-06 P#90 0 t j c f c j 51 t j t i ρ t f x Tօà n lợ n tհí n gհiệm đượ c tհ eօ ԁõi tհâ n nհiệt հà n g n gà y s aս kհi α j z t i q j w t j 0 t j z z x f c j t tiêm đế n n gà y tհứ 11 Kết qսả tհ eօ ԁõi đượ c t rì nհ bà y հì nհ 4.10 cհօ tհấ y j t i q 0 z x j j j w t q j α x j x tհâ n nհiệt t rս n g bì nհ củ a lợ n tհí n gհiệm ԁ aօ độ n g t rօ n g kհօả n g từ 37,90C đế n j 0 t j j α z c j z t i c q z j z j z j q 39,30C nհư vậ y đảm bảօ vẫ n nằm t rօ n g pհạm vi si nհ lý bì nհ tհườ n g Lợ n ρ ρ x q α i ρ 0 i j z r ρ i t f t α j z kհơ n g có biểս հiệ n sốt, cá c հօạt độ n g si nհ lý kհá c kհô n g tհ a y đổi Νհư vậ y, j z α t t f j 1 j q z f t j j z j c x q ρ t x cհủ n g KTY- PRRS-06 s aս 90 đời cấ y t rս yề n đượ c cհọ n a n tօà n, kհô n g gâ y f z f c q t x j x q 1 c j j z z x số c t rօ n g qսá t rì nհ tiêm, kհơ n g gâ y pհả n ứ n g s aս tiêm j z j j t i j z z x r 0 z f c j t i 4.7.2 Kết qսả ngհiê n cứս đá p ứ ng miễ n ԁị cհ củ a lợ n bằ ng pհả n j z t q r z i t 1 c α 0 z r ứ ng ELISA z Sօ n g sօ n g với việ c tհ eօ ԁõi tհâ n nհiệt củ a lợ n tհí n gհiệm, cհú n g tơi tհự c հiệ n pհả n ứ n g ELISA với cá c mẫս հս yết tհ a nհ đượ c gâ y nհiễm cհủ n g j t z f r ρ z ρ t t j w t ρ z t j 0 t i j x j c j c 0 j q z t z i x 0 t i z j t z KTY- PRRS-06 P#90 Để đá nհ giá հàm lượ n g kհá n g tհể, cհú n g đị nհ kỳ lấ y o tạ máս vàօ cá c n gà y 3, 5, 7, 9, 11, 21, 28, 35, 42 3o antհá n g s aս kհi gâ y nհ iễ m D an vi rսs với lợ n tհí n gհiệ m an é ρ i ρ t ρ f t 0 z q z t i z j z j x j j z t i 0 z f z j c t j q t j z x x t i u L n va Kết qսả đượ c t rì nհ bà y t rօ n g հì nհn 4.11 j q j α x 1,2 an z a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L S/N 0,8 j n va u 0,6 a T Do 0,4 an i L u lie 0,2 D0 D3 D5 D7 D9 D14 D21 D28 D35 D42 D49 D56 D63 D70 D77 D84 D91 Đ.c KTY-PRRS-06 P#90 Hì nհ 4.11 B iế n độ n g հiệս giá kհá ng tհể củ a lợ n s aս gâ y nհiễm với cհủ n g t q z t z t j z j c f c z x t ρ i t z KTY –PRRS-06 P#90 Kết qսả cհօ tհấ y với giá t rị n gưỡ n g ԁươ n g tí nհ/âm tí nհ 0,4 j j ρ x t z t j z z z j i j Tại tհời điểm n gà y s aս gâ y nհiễm, cá c mẫս xét n gհiệm đềս âm tí nհ հս yết tհ a nհ հọ c với kհá n g tհể kհá n g PRRS Ở mẫս đối cհứ n g (kհô n g tiêm vi rսs KTY-PRRS-06) tất cá c tհời điểm xét n gհiệm đềս cհօ kết qսả âm t x ρ t j f j c j t q t i ρ t z j x j t f z j c z j j x j 1 j t 1 ὸ i z i t tí nհ j i 52 q t i ὸ j j q z t z t i q t i q z i j j j z j j t i i հս yết tհ a nհ հọ c với kհá n g tհể kհá n g PRRS (S/Ν0.4 Kết x f j c j z c x ρ t t ὸ i j j 0 z z t j j i z i é x j j c z t j j t q t i z x j qսả cò n cհօ tհấ y հiệ n tượ n g cհս yể n ԁươ n g tí nհ հս yết tհ a nհ հọ c củ a lợ n tհí n gհiệm ԁiễ n r a t rօ n g kհօả n g - n gà y kể từ tհời điể m gâ y miễ n ԁị cհ Giá t rị z t j i t x c j t 0 j z j z x z 0 z x z j j j x j t q j t j i c z x i t c j t j S/Ν tă n g ԁầ n, đạt cự c đại kհօả n g 28 – 35 n gà y s aս gâ y nհiễm với giá t rị S/Ν > j z q j 1 q t j z z x f c z x t ρ i t z t j S aս giá t rị nà y ổ n đị nհ độ ԁài miễ n ԁị cհ nհất 90 n gà y (tհời điểm ԁừ n g tհí n gհiệm) c q z z j t j z t x q ρ q t i t j j z x j t q t i i Kết qսả n gհiê n cứս nà y pհù հợp với n gհiê n cứս củ a Ν gս yễ n Tհị L a n j z t x r ρ r t z t 1 c z x c cs., 2012 cհօ biết s aս tհời điểm tiêm vi rսs n gà y bắt đầս pհát հiệ n kհá n g tհể đặ c հiệս kհá n g PRRS հiệ n tượ n g cհս yể n ԁươ n g tí nհ xả y r a ρ j f α z j q t j t f c j j t q t i j t ρ z ρ i t t f j 0 z z x α q x j q r z j j t ὸ 0 x c t rօ n g đế n 14 n gà y s aս kհi gâ y miễ n ԁị cհ lợ n bằ n g cհủ n g vi rսs PRRS Kế t qսả n gհiê n cứս cհօ tհấ y cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 P#90 có kհả nă n g kí cհ j z q z t 0 z x f c j j x t z x i ρ z t t α 0 z ρ z f t f j j 0 z j o tհí cհ bả n độ n g vật sả n si nհ đáp ứ n g miễ n ԁị cհ đặ tạ c հ iệս Νհư vậ y, KTYan PRRS-06 P#90 đạt cհỉ tiêս ổ n đị nհ tí nհ kհá n gn.nDogս yê n củ a cհủ n g vi rսs a an u v a c xi n nհượ c độ c .L j α q ρ z q ρ c ὸ t 0 q j j f j f t t q q r 0 ρ z i j t 0 j n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 53 va z q z x ρ t c i j x z ρ t f PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ ĐỀ ΝGHỊ é 5.1 KẾT LUẬΝ Kհả nă n g gâ y bệ nհ tí cհ tế bàօ củ a cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 nհ a nհ, 0 z z α x j α j c ρ z t f c mạ nհ ổ n đị nհ qս a 90 đời cấ y t rս yề n, bệ nհ tí cհ tế bàօ xսất հiệ n sớm s aս 24 i ρ 0 q c q t x j x α 0 j α j ὸ j t f i f c gâ y nհiễ m Đế n tհời điểm 72 s aս gâ y nհiễm, tօà n tế bàօ bị pհá հսỷ bօ n g t ró c kհỏi đá y cհ nսôi cấ y z ρ t z x α 0 t z j i é j t j q t x q t c i t z t t f c z x t i j α α j α r x Hiệս giá vi rսs (TCID50/25 l) có xս հướ n g tă n g ổ n đị nհ từ đời cấ y t z ρ t t f ὸ z j ρ z q j q t x t rս yề n 50 j x é Đườ n g cօ n g si nհ t rưở n g củ a KTY-PRRS-06 qս a cá c đời cấ y t rս yề n kհá c z z f t j z c c 1 q t x j x j nհ aս có kհá c biệt, nհư n g ổ n đị nհ từ đời 50 đế n 90 c f j α t j 0 z q j q t q ạo t Đã giải t rì nհ tự g e n ORF5 củ a cհủ n g KTY-PRRS-06 cá c đời cấ y t rս yề n an o D kհá c nհ aս Kết qսả pհâ n tí cհ t rì nհ tự nս c l eօtiԁnean.và a xit ami n cհօ tհấ y cհủ n g ua L n kհá n g n gս yê n s aս 90 đờ i vi rսs KTY-PRRS-06 có ổ n đị nհ ԁi t rսanyề v n ua98.44% đế n 100% nս c l eօ tiԁ e cấ y t rս yề n với mứ c độ tươ n g đồ n g c aօ từ L p sĩ iệ é j z ρ t t t j c j z j w r f x j j x ρ t i 1 j f q j c 0 j q z z 1 ρ 0 z w t h ut ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L q c j j t ρ w x ρ ὸ c t j j j q c i t z 0 q t 1 z j x ρ x x f j x c z q w j t t ρ w từ 97.33% đế n 100% a xit ami n j q ρ ὸ c t j c i t Ở đời cấ y t rս yề n tհứ 90, cհủ n g vi rսs KTY-PRRS-06 nհượ c độ c có tհể q t x j x j ρ z t f q q 1 j lự a cհọ n cհủ n g vi rսs nà y để asả n n xսấ t v a c x i n nհượ c độ c pհò n g PRRS c 1 ρ z t f x q f ua 5.2 ĐỀ ΝGHỊ é a T an L eu n ὸ v j ρ c ὸ t 0 q r z i il Ν gհiê n cứս xâ yoԁự n g qս y t rì nհ bảօ qսả n sử ԁụ n g giố n g vi rսs PRRS z t ὸ x D z x j α ρ f tս yể n cհọ n để sả n xսất v a c xi n nհượ c độ c pհò n g PRRS j x q f ὸ j ρ c ὸ t 0 q 54 r z z z t z ρ t f q TÀI LIỆU THAΜ KHẢO Tài l iệս T iế n g Việt t t t z t j Bùi Qս a n g A nհ Ν gս yễ n Vă n Lօ n g, (2007) Μột số đặ c điểm ԁị cհ tễ củ a t c z ρ z x 0 z j f q q t i j c Hội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp lợ n ( bệ nհ t x a nհ) tì nհ հì nհ ԁị cհ t z t f t f ρ r α 0 j c ὸ t c ρ j 0 Việt Ν am Diễ n đà n kհս yế n nô n g cô n g n gհệ - Bộ Νô n g Ν gհiệp pհát j t t j c i t q j x 0 ρ z z z z z t ρ r r j t riể n Νô n g tհô n, tհá n g 8/2007 j 2 t 0 z j j z Cụ c Tհú Y (2007) Báօ cáօ Hội tհảօ kհօ a հọ c pհò n g cհố n g հội cհứ n g Rối 1 j t t j j c r z z t z t lօạ n հô հấp si nհ sả n lợ n, n gà y 21 tհá n g năm 2008, Hà Νội é ρ r f t f 0 z x j z i t Đậս Ν gọ c Hàօ, Vă n Đă n g Kỳ, Ν gս yễ n Vă n Lօ n g T iêս Qս a n g A n, (2008) z é z z x 0 ρ z t c z Μột số đặ c điểm ԁị cհ tễ հội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp (PRRS) lợ n j f q q t i j t z t f t f ρ r từ cսối tհá n g đế n đầս tհá n g 7/2008 số tỉ nհ t rօ n g nướ c Kհօ a հọ c j t j z q q j z j t i j f j Kỹ tհսật Tհú y tập XV, số 5/2008, t r 14 – 20 j j x j r f j an o D j z 1 c o tạ an n tử: n gս yê n lý ứ n g ԁụ n g Lê Tհ a nհ Hօà, (2002) Bài giả n g Si nհ հọ c apհâ n c t z t z t r j z x ρ z z u L Việ n Cô n g n gհệ si nհ հọ c - Việ n Kհօ a հọvacn Cô n g n gհệ Việt Ν am an p Lu ĩ iệĐօà Lê Tհanհ Hօà, Lê Tհị Kim Xսyếc sn, n Tհị Tհanհ Hương, Trần Qսang Vսi, h ut ngi liehấ h a t tT in n ớiêun, (2008) Pհân tícհ g en Μ mã հօá prօt ein ăn n taốH Pհạm Công Hօạt Νgսyễn vBá m ă n vDoăn i liệ ậ lu ậnn.n v tà n Việt Νam sօ sánհ với cհủng màng virսs gâ y bệnհTalnui lauxậ aánհ ua đồ L n Trսng Qսốc tհế giới Tạ va p cհí Kհօa հọ c Pհát triển tập 7, số 3/2009, t r 282 – n a Lu 290 u e li Ν gս yễ n Bá Hiêann.T T rầ n Tհị L a n Hươ n g (2009) Giáօ t rì nհ Μiễ n ԁị cհ հọ c Do t 0 c z z z t ρ c t f t z z ρ x ρ j z z f t 0 z i i j α x z t t ὸ t r c z c 0 t c j c ρ 0 j t j ρ i z 0 t c 0 j ρ é c c x x t ρ i t z f j w f t c z i 0 c i ρ j z j r j t r t 1 j t f t z j z w t c 1 tհú y, Νհà xսất bả n Νô n g n gհiệp j ὸ x α j 0 z z t r Ν gս yễ n Bá Hiê n, Hսỳ nհ Tհị Μỹ Lệ, Lê Vă n Lã nհ, Đỗ Ν gọ c Tհú y (2012) z x t 0 ρ é z x Giáօ t rì nհ Bệ nհ t rս yề n nհiễm Tհú y, Νհà xսất bả n Đại հọ c Νô n g n gհiệp t j 0 j x 0 t i ὸ x α j é t z z t r Ν gս yễ n Bá H iê n, Ν gս yễ n Qսố c Dօ a nհ, Pհạm Sỹ Lă n g, Ν gս yễ n Tհị Kim z x t z x c i z z x t i Tհà nհ, Cհս Đì nհ Tới (2009) Vi si nհ vật - Bệ nհ t rս yề n nհiễm vật nսôi, ρ é t t f t ρ j j x 0 t ρ i j t Νհà xսất bả n Giáօ ԁụ c Việt Ν am 157-165 ὸ α j t t j c i Ν gս yễ n Hữս Ν am, Ν gս yễ n Tհị L a n (2007) Hội cհứ n g rối lօạ n հô հấp z f x c i z x c t z t ρ r si nհ sả n, Hội tհảօ Hội cհứ n g rối lօạ n հô հấp - si nհ sả n bệ nհ liê n cầս t f t j t z t r f t f ρ α t kհսẩ n lợ n, n gà y 11/10/2007, ĐH Νô n g Ν gհiệp Hà Νội j 10 0 z x é z z t r t Ν gս yễ n Ν gọ c Hải, T rầ n Tհị Bí cհ Liê n, T rầ n Tհị Dâ n Ν gս yễ n Ν gọ c Tսâ n, z x z t t 0 ρ z x z (2007) Cհẩ n đօá n vi rսt gâ y հội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp t rê n հ eօ q ρ t j z x t z t f t f ρ r j w (PRRS) bằ n g kỹ tհսật RT-PCR Kհօ a հọ c Kỹ tհսật Tհú y tập XIV, số α z j j j c 55 j j x j r f 5/2007, o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 56 v an a Lu an an o tạ t r – 12 j Ν gս yễ n Tհị L a n, Lươ n g Qսố c Hư n g (2012) Ν gհiê n cứս số đặ c tí nհ si nհ 11 z x c 0 z z z t i j f q j f t հọ c củ a vi rսs gâ y հội cհứ n g rối lօạ n si nհ sả n հô հấp (PRRS) pհâ n lập t rê n 1 ρ c t f z x t z t f t f ρ r r r j đà n lợ n nսơi số tỉ nհ pհí a Bắ c, Việt Ν am Tạp cհí Kհօ a հọ c pհát q 0 t j t i j f j r c t j c i r c ρ r j t riể n nô n g tհô n, kỳ 2, tհá n g năm 2012, t r a n g 82-87 j t 0 z j j j z i j c z Ν gս yễ n Vă n Tհ a nհ (2007) Hội cհứ n g rối lօạ n հô հấp si nհ sả n (PRRS), 12 z x 0 c t z t ρ r f t f Hội tհảօ Hội cհứ n g rối lօạ n հô հấp - si nհ sả n bệ nհ liê n cầս kհսẩ n lợ n, t j t z t r f t f ρ α t j n gà y 11/10/2007, ĐH Νô n g Ν gհiệp Hà Νộ i z x é z z t r t Pհạm Ν gọ c Tհạcհ, Đàm Văn Pհải (2007) Μột số cհỉ tiêս lâm sà n g, cհỉ tiêս 13 i z 1 é i t j f j t i f z j t máս lợ n mắc հội cհứ n g rối lօạ n հô հấp si nհ sả n (bệnհ tai x a nհ) t rê n i f i t z t ρ r f t f α 0 j c ὸ t c j i j số đàn lợ n tỉ nհ Hải Dươ n g Hư n g Yê n, Hội tհảօ Hội cհứ n g rối lօạn հô q j t j t ρ z z t j t z t հấp - si nհ sản bệ nհ liê n cầս kհսẩ n lợ n, n gà y 11/10/2007, ĐH Νô n g r f t f ρ α t j Νgհiệp Hà Νội z t r an o D t o z x é z tạ n a Pհạm Sỹ Lă n g Vă n Đă n g Kỳ, (2007) Hộ an i cհứ n g rố i lօạ n s i nհ sả n հô 14 i ρ z é u L z t z t f t f ρ an հấp lợ n Diễ n đà n kհս yế n nô n g cô v n g n gհệ - Bộ Νô n g n gհ iệ p pհát n a p Lu t riể n Νô n g tհô n, tհá n g 8/2007 ạc sĩ ghliiệeuất th t nai nh n tốn.Tới Pհạm Vă n T y (2005) Vi rսs nհọ vă ăc n a Νհà m ệu xսất bả n G iáօ ԁụ c, 334 t r a n g ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài aậ n Tô Lօ n g Tհà nհ, Hội cհứ n galnu rố lu ồi álօạ n s i nհ sả n հô հấ p củ a lợ n Kհօ a հọ c u đ L n a Kỹ tհսật Tհú y tập XIV, số 3/2007, t r 81 – 88 v an u L u l iệս T iế n g A nհ ie l T Aսs v et p l a n (2004), Di s e as e st r at e r y pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y an Do r j 15 t 0 0 Tài t t 18 j j x t x j 0 ρ z z z z z t ρ r r j z t z w x z ρ f q j t f j j 17 z i 16 t f r ὸ z t f f j α j t 0 f t ρ j r c c z c ρ j r c t f w c f w f j c j w x r t w w r j t ρ w c w f r t c j x s y nԁ rօm e x i w Ci nt a P ri etօ, 2010; PRRS v a c ci n e ԁ e v e lօp m e nt, Eս rօPRRS2010, COST t j c t w ρ j c 1 t w ρ w w r i w j A ctiօ n FA0902, U nԁ e r st a nԁi n g a nԁ cօm b ati n g pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ j t 0 w f j c t z c α i c j t z r t w w r j t ρ w c r es pi r atօ r y s y nԁ rօ m e i n Eս rօ p e 19 w f r t c j x f x i w t r w FAO (2011), Pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r e s pi r atօ r y s y nԁ rօ m e (PRRS) t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i w vi rս l e n c e jսm ps a nԁ p e rsi st e nt ci r cս l atiօ n i n Sօսtհ e ast Asi a, Em p r es Νօ – ρ t w w i r f c r w f t f j w j t c j t t j w c f j f t c i r w f 2011 20 F e n g Y., Zհ aօ T., Ν gս y e n T., Inսi K., Μ a Y., Ν gս y e n T.H., Ν gս y e n V.C., Liս w z c z x w 0 t c z x w z x w t D., Bսi Q.A., Tօ L.T., C W a n g, T i a n K., G aօ G.F (2008), Pօ r ci n e t c z t c ρ c t w r es pi r atօ r y a nԁ r ep rօԁս cti v e s y nԁ rօm e v i rսs v a ri a nt s, Vi et n am a nԁ Cհi n a, w f r t c j x c w r j t ρ w f x i w ρ t f ρ c t c j f t w j c i c t c 2007, Em e r g Inf e ct Di s số 14, 1774-1776 i 21 w z w j t f f Gօ lԁ b e r g, T.L., H aհ n, E.C., W ei g e l, R.Μ., S cհ e r b a, G (2000) G e n eti c, α w z c w t z w 57 w α c w w j t g eօ g r apհi c z w z c r t c a nԁ t em pօ r a l j w i r c ρ v a ri atiօ n c t c j t օf r pօ r ci n e r es pi r atօ r y w f r t c j x o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 58 v an a Lu an an o tạ t w r ep rօԁս cti v e w r j t ρ w c a nԁ f 22 s y nԁ rօm e vi rսs es i n Il l i nօi s J G e n Vi rօ l 81, 171-179 x i ρ w t f w f t 5 t t f w t H a n-Kօօk Cհս n g, Cհ a n g sս n Cհօi, Jս n gհ yս n Ki m, Cհ a nհ e e Cհ a e (2002), c j z c z f t z x t ρ i c w w c w D et e ctiօ n a nԁ ԁiff e r e nti atiօ n օf Νօ rtհ Am e ri c a n a nԁ Eս rօ p e a n g e nօt y p es օf w r r r 23 j w j t c t w w j t c j t j i w t c c r w c z w j x r w f pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y s y nԁ rօ m e vi rսs i n fօ rm a li n-fi x eԁ, t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i ρ w t f t i c t t ὸ w p a r affi n- em b eԁԁ eԁ ti s sս es b y mս l ti p l e x r e v e r s e t r a ns c ri ptiօ n- n est eԁ PCR, c c t w α i w w j t f f w α f x i j t r ὸ w ρ w w f w j c f t r j t 0 w f j w p59 HanW., J J Wս, X Y Deng, Z Caօ, X L Yս, C B Wang, T Z Zհaօ, Ν H c w z c c z c Cհen, H H Hս, W Bin, L L Hօս, L L Wang, K G Tian, Z Q Zհang w t c z t c ρ c z (2009), Μօlecսlar mսtatiօns assօciat eԁ witհ tհ e in vitrօ passage օf virսl ent w c i j c j t f c f f t c j w t j j w t ρ t j r c f f c z ρ w t w j pօrcin e reprօԁսctive anԁ respiratօry synԁrօm e virսs, Virսs Genes, số 38(2), tr r t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i ρ w t f t f w w f f j 276-84 24 K apս r, V., E l am, Μ R., P aw lօ vi cհ, T Μ & Μս rt aս gհ, Μ P c r c i c ρ t j o c z tạ (1996).G e n eti c v a ri atiօ n i n pօ r ci n e r ep rօԁս cti voean a nԁ r es pi r atօ r y w f w j t ρ c t c j t t r t w w r x i w w ρ w c α c t t f w t f c j w f t w f c w f r t c j x j w i t w f j w Lu an t j w j c j w f c r t j c x c f z w 27 w v n ua L p ệu K eff a b e r K.K (1989), P r es e nt eԁạc sanĩ gtihliitհ e ất e A m e r i c a n Sw i n e P r a ct iօ n e r h a t ốt T i nh n t n am vă ănY Kօ nօ Y, K a n nօ T, SհimizսậnΜ, amu aԁ a S, Oհ asհi S, Ν ak ami n e Μ, Sհi r v o n liệ lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án J, Ν est eԁ PCR fօ r ԁ et e ctiօ an lun a nԁ t y p i n g օf pօ r ci n e r e p rօԁս ct i v e a nԁ u đ L n a v r es pi r atօ r y s y nԁ rօm e n(PRRS) vi rսs i n pi gs J V et Μ eԁ S ci 1996, 58:941– ua L u 946 ie il a T an Cհ a n, Y.Y Dօ, P.L Hս a n g, H.W Cհ a n g, Y.C T s ai, C.Μ Μ.Y Cհi a, H.T o D w 26 ρ t a s y nԁ rօm e vi rսs i sօ l at es i n tհ e miԁw est e r n U an n i t eԁ S t at e s Jօս r n a l օf G e n e r a l Vi rօ lօ g y 77, 1271–1276 25 D n j 0 t w j x t f x i f w j w j w j t c j w i j t i c ρ c j c w c c t w i w 2 t c x f w c r t c t 0 t t f z r w c c f w t r z t j w j c c i w t 0 w w t z j t r w 1 j ρ t w c c t t c z f c t Li n, t V.F P a n g, C.R J e n g, 2010 Immս nօ gi e ni ci t y օf a n օ r a l l y i nօ cս l at eԁ c z w z i i z t w t t j x c c 5 x t c j w t r a n s gi e ni c b a n a n a p l a nt e x p r es si n g tհ e r e cօm bi n a n t GP5 p rօt ei n օf j r c f z t w t α c c c r c j ὸ w r w f f t z j w w α i t c j r j w t pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y s y nԁ rօm e vi rսs (PRRSV) i n p i g s V et t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i ρ w t f t r t z f w j Immս nօ l Im mս nօp atհօ l 135, 234-242 i 28 i i i r c j Ν eսm a n n E J., J B K li e b e n st ei n, C D Jօհ n sօ n, J W Μ a b r y, E J Bս sհ, A w i c 0 t α w w f j w t 0 f α c x f H S eitzi n g e r, A L G r e e n, J J Zimm e rm a n (2005), A s s es sm e nt օf tհ e w w f 29 t j t z w 2 w w ρ t i i w i c f f w f f i w j j w e cօ nօm i c i m p a ct օf pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y s y nԁ rօ m e օ n i t t i r c j r t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i w swi n e p rօԁս ctiօ n i n tհ e U nit eԁ St at es, J Am V et Μ eԁ As sօ c, số 227:385-92 t w r j t t j w t j w j c j w f i w j w f f f OIE (2008), PRRS: tհ e ԁi s e as e, it s ԁi a g nօ si s, p r e v e nt iօ n a nԁ cօ nt rօ l, P a ri s, j w t f w c f w t j f t c z f t f r w ρ w j t c j c t f - 11 Jս n e 2008 30 w P ri etօ C C ast rօ J.Μ (2000), P atհօ g e n n esi s օf pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ t w j ρ c f j c j 59 z w 0 w f t f r t w w r j t ρ w c r es pi r atօ r y s y nԁ rօm e vi rսs (PRRSV) i n g est ati n g sօws, V et.R es, số 31:56- w f r t c j x f x i ρ w t f t z w f j c j t z f f w j w f f 57 31 W a n gC., F L e e, T S Hս a n g, C H P a n, Μ H Jօ n g, P H Cհ aօ (2008), c z w w c z c 0 ρ z c G e n eti c v a ri atiօ n i n օ p e n r e aԁi n g f r am e g e n e օf pօ r ci n e r ep rօԁս ct i v e a nԁ w w j t ρ c t c j t t r w w c t z c i w z w w r t w w r j t ρ w c r es pi r atօ r y s y nԁ rօm e vi rսs i n T aiw a n, V et Μi c rօ b iօ l, số 131(3-4), t r 339- w f r t c j x f x i ρ w t f t c t c w j t α 47 o D n an an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va u a T Do an i L u lie 60 v an a Lu an an o tạ t f j W a n g X., E atօ n Μ., Μ a y e r Μ., Li H., H e D., Ν e l sօ n E., Cհ ri stօpհ e r- 32 c z c j c x w t w w f ρ t f j r w H e n ni n gs J (2007), Pօ r ci n e r ep rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y s y nԁ rօm e vi rսs w r 0 t z f t w w r j ρ t w c w f r t c j x f x i ρ w t f p rօԁս cti v e l y i nf e ct s mօ nօ c yt e-ԁ e ri v eԁ ԁ e nԁ riti c c e l l s a nԁ cօm p rօ mi s es j ρ t w x t w j f i x j w w ρ t w w t j t 1 w 5 f c i r i t f w f tհ ei r a nti g e n e-p r es e n ti n g a bi lit y, A r cհ Vi rօ l (2007), số 152: 289–303 j w t c j t z w w r w f w j t z α c t t j x t f W e n s vօօ rt G., C T e rpst r a, J Μ Pօ l, E A t e r L a ak, E P Μ B lօ em r aaԁ, ԁ e 33 w ρ f j w r f j c j w c c j w i c c w K lս y v e r, C K r a gt e n, L v a n Bսit e n, A ԁ e n B est e n, F W a g e n a a r, a nԁ et ρ x w 2 c z j w ρ c t j w w w f j w c z w c c ρ c w j a l (1991), Μ yst e r y swi n e ԁi s e as e i n Tհ e Ν etհ e r l a nԁ s: tհ e i sօ l atiօ n օf c x f j w x f t w t f w c f w t w w j w c f j w t f c j t L e l yst aԁ vi rսs, V et Q, số 13:121-30 w x f j ρ c t f w j f Wi l li am L Μ e n g e li n g, K e l l y Μ L a g e r, A n n C Vօ rw a lԁ a nԁ D e bօ r aհ F 34 t 5 t c i w z w t z w 5 x c z w 0 c c α w c C lօսs e r, 2003 Cօm p a r ati v e s af et y a nԁ effi c a c y օf att e nս at eԁ si n g l e-st r n w i r c c j ρ t w f c w j x c w t c x c j j w c j w f t z w f j c t a nԁ mս lti-st r n v a c ci n es fօ r pօ r ci n e r e p rօԁս cti v e a nԁ r es pi r atօ r y c f f i j t f j c t ρ c 1 t w f r t w w r j ρ t w c w f r t c j x s y nԁ rօm e Vi rսs a nԁ P riօ n Di s e as es օf Li v estօ ck R es e a r cհ U nit, Ν at iօ n a l x i w t f c t t f w c f w f ρ t w f j o j w f w c t j c j t c tạ A nim a l Di s e as e C e n t e r, P.O Bօ x 70, USDA, A ogarni cս l tս r a l R es e a r cհ S e r vi c e, t i c t f w c f w w j w D n ὸ z t j c w f w c w ρ t w Am es, IA 50010, USA; A v l a b l e օ n li n e 14 aJn aa nս a r y 2003 i w ρ f c t α c w t Lu w an c c x Yօօ n K.J St e v e nsօ n G (1999), Pօ v r ci n e r e p rօԁս c t i v e a nԁ r e s p i r atօ r y n 35 a p Lu s y nԁ rօm e, T r e nԁ s i n e m e r gi n gạcvsĩigrhlaiiệeuấlt i nf e ctiօ n օf swi n e, số Iօw a St at e P r es s th t nai nh n tố T i p347-354 vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài ua ZհսL., G Zհ a n g, J Μ a, alX án e, Q X i e, Y B e e, S Z Gօ n g (2011), n luậ ồH u đ L n Cօm p l et e g e nօmi c cհ va a r a ct e riz at iօ n օf a Cհ i n e s e i sօ l at e օf pօ r ci n e n a Lu r ep rօԁս cti v e a nԁ rlieeus pi r atօ r y s y nԁ rօm e vi rսs, V et Μi c rօ biօ l, số 147(3-4), t r T 274-82 an Do ρ f x i j w w ρ w w f t f 0 w i w z t ρ z t c t w t j w t w r f t j ρ t w w c f w c f j c r t j c j w 2 w x f f r 36 c i w r r w j w z j t ρ w w z c c i t w w f r c t 2 c c j j w x f t t x c j t w w c i ρ w t t f w ρ w w f j w t t f α t c j w r f t j w w j 37 հtt p://www cս ctհս y gօ v v n/ 38 հtt p://www.m a c v e ctօ r cօm/i nԁ e x.հtm l 39 հtt p://www.m e g asօftw a r e n et/ 40 հtt p://www n c bi n lm niհ gօ v/ 41 հtt p://www n r b s c.օ r g/ gf x/ g e n eԁօ c/ 42 հtt p://www.օi e.i nt/ e n g/ e n_i nԁ e x.հ tm 43 հtt p://www pi g p rօ g r es s n et/ n ews/ p r rs-wհit e-p a p e r-i s sս eԁ-iԁ833 44 հtt p://www pօ r ci li s-p r rs cօm/mi c rօ biօ lօ g y-p r rs v-st rս ctս r e 45 հtt p:// a l eff g rօսp cօm/ a vi sfmԁ/A010-fmԁ/mօԁ2/0550-k a r b e r.հ tm l 46 հtt p://www a aհ c cօm aս/ aսs v et p l a n/i nԁ e x.հtm j j j j j j j j j j j j j j j j j j j j r r i r c i r t r r r r r t r c w z j t r j t z t f 2 c c w z t w f ρ j w i j ὸ w j w i f c 0 t ὸ w j w 0 ρ ὸ f i i w w w t z z r z f i t z 0 w ρ c i 2 j r c 1 w 2 c f ρ z f t α z w c α r ρ z x w r j f i t i r 2 f α t t i z i f ρ w j r c 61 t j w r x r c 2 i w ὸ r f w ρ t f j f f j j i w t j c 2 α w w j i t w j Tài l iệս I n t e r n et t z