Khảo sát thành phần hóa học của lá sầu đâu (azadirachta sp ) mọc tại an giang

i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ DƯƠNG THỊ NGỌC CHÂU KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SẦU ĐÂU (Azadirachta sp.) MỌC TẠI AN GIANG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cần Thơ – 2018 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ DƯƠNG THỊ NGỌC CHÂU KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SẦU ĐÂU (Azadirachta sp.) MỌC TẠI AN GIANG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THỊ THU TRÂM Cần Thơ – 2018 i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến cô TS Nguyễn Thị Thu Trâm, người tận tình hướng dẫn truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm bổ ích động viên, chia sẻ, định hướng giải khó khăn suốt q trình thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô ThS Nguyễn Thị Trang Đài cô TS Nguyễn Thị Ngọc Vân quan tâm, giúp đỡ, động viên, tạo điều kiện giúp em hoàn thành đề tài Em chân thành cám ơn quý thầy cô, anh chị Bộ mơn Hóa – Khoa Khoa học bản, Liên môn Dược liệu – Dược cổ truyền – Thực vật, Liên mơn Hóa phân tích – Kiểm nghiệm – Độc chất tạo điều kiện thuận lợi trình thực đề tài Cuối lời, xin cám ơn cha mẹ ủng hộ, động viên tinh thần để yên tâm hồn thành đề tài Xin chân thành cám ơn Cần Thơ, ngày 12 tháng 06 năm 2018 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết luận văn trung thực hoàn toàn riêng tôi, chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Cần Thơ, ngày 12 tháng 06 năm 2018 Sinh viên ký tên Dương Thị Ngọc Châu iii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH VÀ SƠ ĐỒ viii ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Thực vật học 1.1.1 Vị trí phân loại sầu đâu 1.1.2 Tổng quan họ xoan (Meliaceae) 1.1.3 Tổng quan loài sầu đâu 1.2 Thành phần hóa học 1.2.1 Limonoid 1.2.2 Các nhóm khác 1.3 Tác dụng dược lí 10 1.3.1 Hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn 11 1.3.2 Hoạt tính hạ đường huyết 12 1.3.3 Tác dụng ngừa thai 13 1.3.4 Ức chế ký sinh trùng sốt rét 13 1.3.5 Chống loét dày 13 1.3.6 Tính vị cơng công dụng theo y học cổ truyền 14 1.4 Sơ lược enzym α-glucosidase 14 1.5 Sơ lược số dược liệu có khả ức chế enzym α-glucosidase 15 iv Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.1 Nguyên liệu 17 2.1.2 Dung mơi, hóa chất 17 2.1.3 Trang thiết bị 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu 19 2.2.1 Điều chế cao cồn tổng 19 2.2.2 Điều chế đánh giá hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase loại cao 19 2.2.3 Phân lập 20 2.2.4 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 21 Chương KẾT QUẢ 22 3.1 Điều chế cao cồn tổng 22 3.2 Điều chế đánh giá hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase loại cao 22 3.3 Phân lập 23 3.3.1 Sắc ký cột chân không cao ethyl acetat 23 3.3.2 Khảo sát phân đoạn 24 3.3.4 Khảo sát phân đoạn 25 3.4 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 28 3.4.1 Xác định cấu trúc hợp chất AZA3 28 3.4.2 Xác định cấu trúc hợp chất AZA5 29 Chương BÀN LUẬN 31 4.1 Điều chế cao cồn tổng 31 4.2 Điều chế đánh giá hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase loại cao 31 4.3 Phân lập 32 v 4.4 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 33 4.4.1 Biện luận cấu trúc hợp chất AZA3 33 4.4.2 Biện luận cấu trúc hợp chất AZA5 34 KẾT LUẬN 36 KIẾN NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Nghĩa tiếng Việt Từ gốc ACN Acetonitrile Dung môi acetonitril C Chloroform Dung môi cloroform dd Doublet of doublet Mũi đôi đôi DEPT Distortionless enhancement by (Phổ) DEPT polarization tranfers EA Ethyl acetate IC50 Half maximal Dung môi ethyl acetat inhibitory Nồng độ ức chế 50% đối concentration tượng thử m Multiplet Mũi đa MeOH Methanol Dung môi methanol NMR Nuclear magnetic resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân PE Petroleum ether Dung môi ether dầu hỏa Thuốc thử Thuốc thử vanilin 1% VS cồn – acid sulfuric 5% cồn (tỉ lệ 1:1) vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Hàm lượng số thành phần sầu đâu 10 Bảng 1.2 Hoạt tính sinh học số phận sầu đâu 11 Bảng 3.1 Khối lượng loại cao 22 Bảng 3.2 Nồng độ ức chế 50% enzyme α-glucosidase loại cao acarbose 22 Bảng 3.3 Kết phân đoạn cao ethyl acetat 23 Bảng 4.1 Bảng so sánh liệu phổ hợp chất AZA3 mannitol 34 viii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH VÀ SƠ ĐỒ HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây sầu đâu tự nhiên Hình 1.2 Cơng thức số hợp chất sầu đâu Hình 2.1 Lá sầu đâu Azadirachta indica A Juss 17 Hình 3.1 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết AZA5 25 Hình 3.2 Sắc ký đồ kiểm tra độ tinh khiết AZA3 26 Hình 3.3 Hợp chất AZA3 27 Hình 3.4 Sắc ký đồ AZA3 AZA5 phân lập từ cao ethyl acetat 27 Hình 3.5 Phổ 1H-NMR hợp chất AZA5 30 Hình 3.6 Phổ giãn 1H-NMR hợp chất AZA5 30 Hình 4.1 Cấu trúc dự đốn hợp chất AZA3 34 SƠ ĐỒ Sơ đồ 3.1 Sơ đồ phân lập hợp chất AZA3 hợp chất AZA5 28