Đặc điểm bất thường nhiễm sắc thể và mối liên quan đến dấu ấn siêu âm trên thai có dị tật bẩm sinh tại bệnh viện phụ sản hà nội giai đoạn 2020 2021

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO – BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG NGUYỄN TUẤN QUÝ H P ĐẶC ĐIỂM BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ VÀ MỐI LIÊN QUAN ĐẾN DẤU ẤN SIÊU ÂM TRÊN THAI CÓ DỊ TẬT BẨM SINH TẠI BỆNH VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI GIAI ĐOẠN 2020-2021 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 HÀ NỘI, 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO – BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG NGUYỄN TUẤN QUÝ NGUYỄN TUẤN QUÝ H P ĐẶC ĐIỂM BẤT THƯỜNG NHIỄM SẮC THỂ VÀ MỐI LIÊN QUAN ĐẾN DẤU ẤN SIÊU ÂM TRÊN THAI CÓ DỊ TẬT BẨM SINH TẠI BỆNH VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI GIAI ĐOẠN 2020-2021 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS Bùi Thị Ngọc Hà GIẢNG VIÊN HƯỚN G DẪN KHOA HỌ HÀ NỘI, 2022 i LỜI CẢM ƠN Với tất lịng kính trọng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới Thầy, Cô: TS Bùi Thị Ngọc Hà, người Thầy ln tận tình bảo, truyền đạt kiến thức ý kiến quý báu, hướng dẫn động viên tơi suốt q trình học tập để tơi hồn thành luận văn Thầy, Cô Hội đồng chấm luận văn có nhiều góp ý q báu giúp tơi hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới: Đảng uỷ, Hội đồng trường, Ban giám hiệu, Trung tâm xét nghiệm H P phòng chức Trường Đại học Y tế công cộng tạo điều kiện để tơi hồn thành luận văn Đảng uỷ, Ban Giám đốc, Phòng Kế hoạch tổng hợp, Trung tâm đào tạo - đạo tuyến, Trung tâm sàng lọc - chẩn đoán trước sinh sơ sinh Bệnh viện Phụ sản Hà Nội giúp đỡ q trình nghiên cứu hồn thành luận văn U Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: Các anh chị, bạn đồng nghiệp Trung tâm sàng lọc - chẩn đoán trước sinh sơ sinh, Bệnh viện Phụ sản Hà Nội giúp đỡ, tạo điều kiện cho tơi H q trình học tập Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến bố mẹ tôi, người sinh thành, nuôi dưỡng, yêu thương tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập; vợ hai trai, người thân gia đình động viên, giúp đỡ bên suốt trình học tập nghiên cứu để tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày .tháng năm 2022 Nguyễn Tuấn Quý ii MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG BIỂU v DANH MỤC HÌNH ẢNH, BIỂU ĐỒ vi TÓM TẮT NGHIÊN CỨU vii ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hội chứng bất thường nhiễm sắc thể 1.1.1 Hội chứng Down (Trisomy 21) H P 1.1.2 Hội chứng Edwards (Trisomy 18) 1.1.3 Hội chứng Patau (Trisomy 13) 1.1.4 Hội chứng Turner .8 1.1.5 Hội chứng Klinefelter .9 1.1.6 Bất thường cấu trúc nhiễm sắc thể 1.2 Các phương pháp chẩn đoán hình ảnh khảo sát bất thường hình thái 11 U 1.2.1 Dấu ấn siêu âm ba tháng đầu 11 1.2.2 Dấu ấn siêu âm ba tháng .12 H 1.2.3 Các dấu hiệu mềm siêu âm .13 1.2.4 Chụp cộng hưởng từ thai nhi 13 1.3 Một số xét nghiệm di truyền áp dụng chẩn đoán trước sinh 14 1.3.1 Các phương pháp lấy mẫu dùng chẩn đoán trước sinh 14 1.3.2 Các kỹ thuật xét nghiệm áp dụng để chẩn đoán trước sinh 15 1.4 Tình hình nghiên cứu nghiên cứu bất thường nhiễm sắc thể thai giới Việt Nam 19 1.4.1 Trên giới 19 1.4.2 Tại Việt Nam 20 1.5 Giới thiệu địa điểm nghiên cứu 21 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Đối tượng nghiên cứu 23 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn mẫu 23 iii 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 23 2.2 Thời gian thu thập số liệu địa điểm nghiên cứu 23 2.3 Thiết kế nghiên cứu 23 2.4 Cỡ mẫu 24 2.5 Trình bày phương pháp thu thập số liệu 24 2.6 Các biến số nghiên cứu 24 2.7 Phương pháp phân tích số liệu 24 2.8 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 25 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 26 3.1.1 Tuổi thai phụ 26 H P 3.1.2 Tiền sử sản khoa .26 3.1.3 Nghề nghiệp 27 3.1.4 Tuổi thai thời điểm chọc ối 27 3.1.5 Nhiễm sắc thể đồ bố mẹ thai có bất thường hình thái .28 3.1.6 Phân loại dị tật thai 28 U 3.2 Kết nhiễm sắc thể đồ thai 29 3.3 Mối liên quan dạng đột biến nhiễm sắc thể dấu ấn siêu âm 32 Chương 4: BÀN LUẬN 38 H 4.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu 38 4.2 Kết xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ 40 4.3 Mối liên quan dấu ấn siêu âm kết nhiễm sắc thể 43 4.4 Hạn chế nghiên cứu 45 KẾT LUẬN 46 Kết nhiễm sắc thể đồ thai 46 Mối liên quan dạng bất thường nhiễm sắc thể dấu ấn siêu âm 46 KHUYẾN NGHỊ 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHỤ LỤC 01 54 PHỤ LỤC 02 55 PHỤ LỤC 03 56 PHỤ LỤC 04 57 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Array CGH Tiếng Anh Tiếng việt Microarray-based Kỹ thuật lai so sánh hệ gen comparative genomic hybridization BoBs BACs-on Beads Nhiễm sắc thể nhân tạo vi khuẩn gắn hạt DNA Deoxyribo Nucleic Acid DTBS FISH Dị tật bẩm sinh Fluorescence In Situ HC chỗ Hội chứng Noninvasive Screening NT Nuchal translucency NF Nuchal fold Prenatal Xét nghiệm sàng lọc không U NST PN BoBs kỹ thuật lai huỳnh quang H P Hybridization NIPS Axít nucleic Prental BACs-on Beads H xâm lấn Độ mờ da gáy Nếp gấp da gáy Nhiễm sắc thể Sàng lọc trước sinh kỹ thuật BoBs Polymerase Chain Reaction Phản ứng chuỗi trùng hợp Quantitative fluorescence - Kỹ thuật PCR huỳnh quang polymerase chain reaction định lượng Short tandem repeat Đoạn trình tự lặp ngắn SM soft-marker Dấu hiệu mềm WGS Whole Genome Sequencing Giải trình tự tồn gen PCR QF-PCR STR v DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 3.1 Phân bố tuổi thai phụ nghiên cứu 26 Bảng 3.2 Đặc điểm tiền sử sản khoa thai phụ 26 Bảng 3.3 Đặc điểm nhiễm sắc thể đồ bố mẹ 28 Bảng 3.4 Tỷ lệ dị tật thai 28 Bảng 3.5 Phân loại lệch bội nhiễm sắc thể thai có bất thường số lượng 30 Bảng 3.6 Nguồn gốc đột biến trường thai có kết nhiễm sắc thể bất thường cấu trúc 30 Bảng 3.7 Kết NST thai trường hợp bố/mẹ có bất thường cấu H P trúc nhiễm sắc thể 31 Bảng 3.8 Mối liên quan dấu ấn siêu âm kết nhiễm sắc thể thai 32 Bảng 3.9 Tần số bất thường siêu âm liên quan tới hội chứng Down 33 Bảng 3.10 Mối liên quan dấu ấn siêu âm trường hợp thai mắc hội chứng Down 33 Bảng 3.11 Mối liên quan dấu ấn siêu âm nhóm thai mắc hội chứng U Down bất thường nhiễm sắc thể khác 34 Bảng 3.12 Tần số bất siêu âm liên quan tới hội chứng Edwards 35 H Bảng 3.13 Mối liên quan dấu ấn siêu âm thai mắc hội chứng Edwards 36 Bảng 3.14 Các hội chứng Patau bất thường siêu âm 37 Bảng 3.15 Các hội chứng Turner bất thường siêu âm 37 vi DANH MỤC HÌNH ẢNH , BIỂU ĐỒ Hình 1.1 Trẻ mắc hội chứng Down Hình 1.2 Trẻ mắc hội chứng Edwards Hình 1.3 Trẻ mắc hội chứng Patau Hình 1.4 Trẻ mắc hội chứng Turner Hình 1.5 Chuyển đoạn cân bố (hình trái) thai dị tật có chuyển đoạn khơng cân (hình phải) 10 Hình 1.6 Mẹ mang chuyển đoạn hồ hợp tâm (bên trái) Karyotype thai mắc HC Down chuyển đoạn (bên phải) 11 H P Hình 1.7 Các giai đoạn kỹ thuật Fish 17 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 24 Biểu đồ 3.1 Phân bố nghề nghiệp thai phụ 27 Biểu đồ 3.2 Tuổi thai thời điểm chọc ối 27 U Biểu đồ 3.3 Phân loại kết nhiễm sắc thể đồ thai 29 Biểu đồ 3.4 Phân loại dạng bất thường nhiễm sắc thể 29 H vii TÓM TẮT NGHIÊN CỨU Dị tật bẩm sinh (DTBS) nguyên nhân hàng đầu gây nên bệnh tật tử vong cho trẻ sơ sinh toàn giới Có nhiều nguyên nhân gây nên DTBS, bất thường NST nguyên nhân để lại hậu nghiêm trọng Hiện nay, siêu âm phương pháp truyền thống thường sử dụng việc sàng lọc bất thường NST dựa vào bất thường hình thái Đề tài nghiên cứu “Đặc điểm bất thường nhiễm sắc thể mối liên quan đến dấu ấn siêu âm thai có dị tật bẩm sinh Bệnh viện Phụ sản Hà Nội giai đoạn 2020 -2021” thực với mong muốn tìm hiểu rõ mối liên quan bất thường hình H P thái thai siêu âm với số HC bất thường NST Thiết kế nghiên cứu đề tài là: nghiên cứu cắt ngang mô tả, số liệu thu thập thông qua hồi cứu hồ sơ bệnh án thai phụ thực thủ thuật lấy dịch ối để xét nghiệm NST đồ cho thai có hình ảnh bất thường hình thái siêu âm phát từ tuần thai 14 đến 27 tuần ngày Bệnh viện Phụ sản Hà Nội từ tháng 01/2020 tới tháng 12/2021 Kết số 665 trường hợp thai có bất thường hình thái siêu âm U tỷ lệ bất thường NST 13,8% Bất thường số lượng NST có tỷ lệ cao 79,3%, bất thường cấu trúc NST chiếm tỷ lệ 15,2%, bất thường dạng khảm chiếm 5,4% Trong bất thường mặt số lượng HC Down bất thường H gặp nhiều với tỷ lệ 67,1%, HC Edwards với tỷ lệ 15,1% Hai hội chứng có tỷ lệ thấp HC Patau HC Turner với tỷ lệ 2,7% 4,1% Các lệch bội khác có trường hợp (11%) bao gồm: tam bội thể, TH 47,xxx, TH 47,xxy, TH 47,xyy Các dấu ấn bất thường thai phát siêu âm có mối liên quan với bất thường NST : dị tật hệ tiêu hố (OR-1,999, KTC 95%: 1,006-3,971) ; dị tật chi (OR-2,213; KTC 95%: 1,138-3,989) ; dấu hiệu mềm (Ỏ-1,958; KTC 95%: 1,252-3,063) Nghiên cứu cho thấy siêu âm quý thai kỳ phương pháp sàng lọc bất thường NST thai hiệu quả, dấu ấn siêu âm thuộc nhóm dấu hiệu mềm việc thai mắc HC Down có mối liên quan với Các dấu ấn siêu âm thuộc nhóm bất thường hệ thần kinh, hệ tiêu hóa, hệ tim mạch bất thường chi bất thường có liên quan đến HC Edwards ĐẶT VẤN ĐỀ Dị tật bẩm sinh (DTBS) số nguyên nhân hàng đầu gây nên tử vong bệnh tật cho trẻ sơ sinh toàn giới với khoảng 7% tổng số ca tử vong trẻ sơ sinh DTBS (1) DTBS nhiều nguyên nhân bất thường nhiễm sắc thể (NST), đột biến gen, nhiễm trùng bào thai nguyên nhân bất thường NST khoảng 6%, chiếm tần suất 1:200 trẻ sinh sống để lại hậu nghiêm trọng (2) Trẻ sinh với bất thường NST hay gặp nhiễm sắc thể thường Trisomy 21, 18 13 gây nên hội chứng (HC) Down, Edwards, Patau bất thường nhiễm sắc thể giới tính gây nên HC Tunner, Klinefelter Cho đến H P chưa có biện pháp điều trị triệt để DTBS Chính việc phát sớm bất thường NST sàng lọc, chẩn đoán sớm tư vấn di truyền việc làm cần thiết nhằm giảm tỷ lệ sinh bị DTBS Các phương pháp sàng lọc trước sinh truyền thống phát lệch bội NST gồm siêu âm hình thái phân tích huyết thai phụ thai kỳ Phân tích U huyết thai phụ có xét nghiệm Combinde test (Double test kết hợp với siêu âm hình thái đo khoảng sáng sau gáy ba tháng đầu thai kỳ) Triple test giúp phát sớm thai phụ có nguy cao mang thai bị dị tật bẩm sinh, đặc biệt thai mắc HC H Down (2, 3) Siêu âm thai thực suốt thai kỳ, siêu âm phát bất thường hình thái thai có hiệu vào ba tháng thai kỳ cấu trúc thai hoàn thiện độ phản hồi sóng âm tốt nhất, tỷ lệ phát trường hợp thai bất thường NST siêu âm đạt từ 33% đến 46% (4) Các phương pháp gọi chung xét nghiệm sàng lọc khơng xâm lấn, an tồn cho bà mẹ thai Để chẩn đoán xác định trường hợp thai phụ có kết xét nghiệm sàng lọc trước sinh nguy cao, thai phụ thực thủ thuật xâm lấn sinh thiết gai rau, chọc hút nước ối để làm xét nghiệm chẩn đoán bất thường NST NST đồ, QF-PCR, prenatal BoBs, array-CGH Hiện xét nghiệm NST đồ coi tiêu chuẩn vàng chẩn đoán bất thường số lượng, cấu trúc NST (kích thước 5Mb) với độ xác độ tin cậy 99,4-99,8% 97,5-99,6% cho xét nghiệm với mẫu dịch ối gai rau (5, 6) 53 55 Huafeng L, Yongli L, Rui Z Cytogenetic analysis of amniotic fluid cells in 4206 cases of high-risk pregnant women Iranian Journal of Public Health 2019;48(1):126 56 Tran C, Van Bich Nguyen MXT, Nguyen LNTH, Ngo AT, Van Ngo T, Ngo C, et al Cytogenetic Findings on 11,451 Cases of Amniocentesis in Hanoi, Vietnam Global Journal of Health Science 2018;10(6):152- 57 Đinh Thuý Linh, Hoàng Hải Yến, Phạm Thế Vương, Trần Thị Minh Thu, Nguyễn Đức Nghĩa, Nguyễn Tài Đức, et al Ứng dụng kỹ thuật array CGH chẩn đoán trước sinh số bất thường nhiễm sắc thể Bệnh viện Phụ sản Hà Nội Tạp chí Phụ sản 2022;20(3):32-5 H P 58 Elbery S, Shded A, Selim K, Sadek A, Ahmed A Role of Second-Trimester Soft Markers for Screening of Down Syndrome Benha Journal of Applied Sciences 2020;5(2 part (1)):61-6 59 Locatelli A, Piccoli MG, Vergani P, Mariani E, Ghidini A, Mariani S, et al Critical appraisal of the use of nuchal fold thickness measurements for the U prediction of Down syndrome American journal of obstetrics and gynecology 2000;182(1):192-7 60 Boghosian-Sell L, Mewar R, Harrison W, Shapiro RM, Zackai EH, Carey J, et H al Molecular mapping of the Edwards syndrome phenotype to two noncontiguous regions on chromosome 18 American journal of human genetics 1994;55(3):476 61 Papp C, Beke A, Mezei G, Szigeti Z, Bán Z, Papp Z Prenatal diagnosis of Turner syndrome: report on 69 cases Journal of ultrasound in medicine 2006;25(6):711-7 54 PHỤ LỤC 01 H P H U 55 PHỤ LỤC 02 BỘ CÔNG CỤ NGHIÊN CỨU Mã đối tượng nghiên cứu : …………………………………………………… Mã bệnh nhân:………………… Năm sinh:………… Tiền sử sản khoa? ❑ Tiền sử xảy thai, thai lưu Mã bệnh phẩm:……… ❑ Mang thai lần đầu sinh khoẻ mạnh ❑ Tiền sử mang thai sinh dị tật ❑ Công nhân ❑ Nông dân Nghề nghiệp? H P ❑ Nhân viên văn phòng ❑ Lao động tự Tuổi thai thời điểm chọc ối? …………………tuần………………ngày ❑ Kết nhiễm sắc thể bố và/ mẹ bình thường Kết nhiễm sắc thể ❑ Kết nhiễm sắc thể bố và/hoặc mẹ bất bố/mẹ thường ❑ Bố mẹ chưa làm nhiễm sắc thể đồ U H ❑ Dị tật hệ thần kinh trung ương ❑ Dị tật hệ tim mạch ❑ Dị tật hệ tiêu hóa Loại bất thường thai ❑ Dị tật đường tiết niệu siêu âm ❑ Dị tật phổi, khí quản, phế quản ❑ Dị tật chi ❑ Dị tật vùng đầu, mặt, cổ ❑ Dị tật khác ❑ Bình thường Kết nhiễm sắc thể đồ thai (ghi rõ công thức nhễm sắc ❑ Bất thường thể bất thường) …………………………………………………… ……………………… 56 PHỤ LỤC 03 BẢNG BẤT THƯỜNG HÌNH THÁI CỦA THAI TRÊN SIÊU ÂM Phân loại dị tật Dấu hiệu siêu âm Không phân chia não trước ; Giãn não thất ; Thiểu Dị tật hệ thần kinh sản thuỳ não, tiểu não ; Não úng thuỷ ; Hội chứng trung ương Dandy-walker ; Bất sản vách suốt, thể chai ; Nang màng nhện ; Nang hố sau ; Thoát vị não Teo van hai ; Thất phải hai đường ; Chuyển gốc Dị tật hệ tim mạch động mạch ; Thông liên thất ; Tứ chứng Fallot ; Thiểu sản tim trái ; Hẹp động mạch chủ ; U tim ; H P Quai động mạch chủ đơi Tắc ruột non ; Thốt vị rốn ; Teo thực quản ; Thốt vị hồnh ; Viêm phúc mạc phân su ; Khe hở thành Dị tật hệ tiêu hóa bụng ; Nang ống mật chủ ; Nang ruột đôi ; Tắc tá tràng ; Dạ dày nhỏ Dị tật đường tiết niệu, sinh dục Giãn đài bể thận, niệu quản ; Bất sản thận ; Loạn sản U thận ; Hội chứng vùng nối hai bên ; Thận đa nang ; Thận lạc chỗ, cấu trúc bất thường ; Lỗ tiểu thấp H Dị tật phổi, khí quản, Bệnh phổi tuyến nang ; Tràn dịch màng phổi ; Nang phế quản tuyến phổi trái ; Thiểu sản phổi ; Phổi biệt lập Bàn chân vẹo; Bàn tay hai bên không mở; Hai bàn Dị tật chi chân khoèo; Thiểu sản đốt ngón; Bàn tay phải sau ngón; Loạn sản sụn xương; Tứ chi ngắn; Theo dõi cứng đa khớp; Bất sản xương đùi; Dị tật vùng đầu, mặt, cổ Dấu hiệu mềm Các dị tật khác Sứt môi, hở hàm ; Cằm nhỏ ; Nang bạch huyết vùng cổ ; Hàm lệch trục ; Không quan sát xương sống mũi; Ruột non tăng âm vang; Nang đám rối mạch mạc; Da gáy dầy; Nốt tăng âm buồng thất trái; Phù thai; Dư ối; Da bụng dầy; Theo dõi u máu; Thai chậm phát triển; khối u vùng cụt 57 PHỤ LỤC 04 BẢNG BIẾN SỐ NGHIÊN CỨU Mơ tả/định nghĩa Tên biến Tính theo tuổi dương lịch ghi nhận tuổi theo năm Tính theo tuổi dương lịch ghi nhận Nhóm tuổi thai phụ tuổi theo năm Tiền sử lần mang thai trước Tiền sử sản khoa thai phụ Nghề nghiệp khai hồ sơ Nghề nghiệp bệnh án Tuổi thai thời Tuổi thai tính đến thời điểm thai phụ điểm chọc ối thực chọc ối dựa theo siêu âm Kết nhiễm sắc Kết nhiễm sắc thể đồ thai phụ thể đồ bố/mẹ chồng thai phụ Tuổi thai phụ Phân loại biến Định lượng rời rạc Định tính xếp loại Định tính danh mục Định tính danh mục H P Các dị tật phát siêu âm Các dị tật phân lại theo nhóm: Dị tật hệ thần kinh trung ương Dị tật hệ tim mạch Dị tật hệ tiêu hóa Dị tật thai qua Dị tật đường tiết niệu hình ảnh siêu âm Dị tật phổi, khí quản, phế quản Dị tật chi Dị tật vùng đầu, mặt, cổ Dấu hiệu mềm Các dị tật khác U Định lượng Định tính danh mục Định tính danh mục H Kết nhiễm sắc thể thai sau Kết nhiễm sắc phân tích Kết bình thường thường Định tính danh mục thể đồ thai 46,XX 46,XY Phân loại kết Kết nhiễm sắc thể đồ bất thường nhiễm sắc thể đồ phân loại theo bất thường số Định tính danh mục thai theo dạng lượng, cấu trúc thể khảm bất thường Phân loại kết Kết nhiễm sắc thể đồ bất thường số nhiễm sắc thể đồ lượng phân loại theo số dạng Định tính danh mục thai theo dạng lệch bội lệch bội 58 H P H U 59 H P H U 60 H P H U 61 H P H U 62 H P H U 63 H P H U 64 H P H U 65 H P H U 66 H P H U 67 H P H U