Ứng dụng các kỹ thuật sắc ký để phân tích chất độc có trong muối tắm và nước biểnghb

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ KHOA DƯỢC LBM HĨA PHÂN TÍCH – KIỂM NGHIỆM – ĐỘC CHẤT -  - Bài báo cáo thực tập MÔN: ĐỘC CHẤT CHỦ ĐỀ 8: ỨNG DỤNG CÁC KỸ THUẬT SẮC KÝ ĐỂ PHÂN TÍCH CHẤT ĐỘC CĨ TRONG “MUỐI TẮM” VÀ “NƯỚC BIỂN/GHB” GVHD: PGS.TS Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ Nhóm SVTH: 12 – Dược-LT K34 Cần Thơ 2022 DANH SÁCH NHĨM STT Họ Tên MSSV Đóng góp Lê Tuấn Hùng 2033030001 100% Võ Minh Hưng 2033030002 100% Lê Kim Ngân 2033030003 100% Nguyễn Thái Sơn 2033030004 100% Phan Thị Thắm 2033030005 100% Trương Thị Ngọc Trâm 2033030007 100% Trần Huyền Trang 2033030008 100% Trần Quốc Trung 2033030009 100% Lý Hồng Vân 2033030010 100% MỤC LỤC DANH MỤC VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH A MỞ ĐẦU B NỘI DUNG NGUỒN GỐC, TÍNH CHẤT LÝ HĨA: 1.1 Muối tắm 1.2 GHB ĐỘC TÍNH, CƠ CHẾ GÂY ĐỘC VÀ XỬ LÝ NGỘ ĐỘC 2.1 Flakka muối tắm .6 2.2 GHB nước biển PHÂN TÍCH SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG “ FLAKKA TRONG MUỐI TẮM “ VÀ “ GHB TRONG NƯỚC BIỂN” CÓ TRONG MẪU DỊCH SINH HỌC ( MÁU, HUYẾT TƯƠNG, NƯỚC TIỂU) BẰNG CÁC KỸ THUẬT MIỄN DỊCH VÀ SẮC KÝ HIỆN ĐẠI 3.1 GHB nước biển 3.1.1 Kỹ thuật xét nghiệm sắc ký đại 3.1.2 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch 10 3.2 Flakka muối tắm .12 3.1.3 Kỹ thuật xét nghiệm sắc ký đại 12 3.1.4 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch 18 C TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ nguyên α-PVD Alpha-pyrrolidinovalerophenone CNS Central nervous system GABA Acid gamma-aminobutyric GHB Gamma-hydroxybutyrate GHB-DH Gammahydroxybutyrate- Nghĩa tiếng Việt Hệ thần kinh trung ương dehydrogenase GC/MS Gas Chromatography Mass Phương pháp sắc ký khí- Spectometry khối phổ LC Liquid chromatography Sắc kí lỏng LC-HRMS Liquid chromatography -High Sắc ký lỏng khối phổ Resolution Mass Spectrometry phân giải cao Liquid chromatography–mass Phương pháp sắc ký spectrometry lỏng-khối phổ LOQ Limit of Quantitation Giới hạn định lượng MDPV Methylenedioxypyrovalerone MSTFA N-methyl-N-tri- LC-MS methylsilyltrifluoracetamide DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1: Xét nghiệm chẩn đoán nhanh GHB với mẫu vật nước tiểu 10 Bảng 2: Tương quan mẫu vật …….12 Bảng 3: Chuyển tiếp phân mảnh lớn chất chuyển tiếp chất chuẩn nội 14 Bảng4: Các thông số Gradient sắc ký lỏng………………………………………….15 Bảng 5: Dữ liệu xác thực thu từ phương pháp “pha loãng bắn” cho tất chất phân tích có xét nghiệm 16 Bảng 6: Dữ liệu NPS dương tính từ khoảng thời gian 14 tháng thử nghiệm 18 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1: Cấu trúc phân tử α-PVP Hình 2: Tổng hợp Flakka Hình 3: Thành phần hóa học GHB Hình 4: Quá trình sinh tổng hợp acid GHB Hình 5: Bộ xét nghiệm lạm dụng thuốc có độ nhạy cao GHB Thử nghiệm nhanh dải mm 10 Hình 6: Sắc ký đồ LC-MS/MS 13 Hình 7: Sắc ký đồ phủ 10 chất phân tích xác định xét nghiệm 16 Hình 8: Sắc đồ cho thấy phân tách đồng phân etylone butylone 17 Hình 9: Kit test xét nghiệm nhanh α-PVP (Nước tiểu) 20 Hình 10: Hướng dẫn sử dụng Panel 21 A MỞ ĐẦU • Thực trạng sử dụng : Muối tắm Alpha-pyrrolidinovalerophenone (a-PVP) chất kích thích tổng hợp bất hợp pháp có tên gọi đường phố "flaka" Mặc dù phát triển chất kích thích hệ thần kinh trung ương vào năm 1968, việc sử dụng để giải trí, trở nên phổ biến 4-5 năm gần đây, nhiều trường hợp ngộ độc tử vong báo cáo chất Chúng mua trực tuyến từ cửa hàng bán lẻ thường bán dạng "muối tắm" GHB/ nước biển Gamma-hydroxybutyrate (GHB) chất ức chế hệ thần kinh trung ương chủ yếu sử dụng loại thuốc bị lạm dụng để giải trí, dùng để điều trị chứng ngủ rũ với cataplexy bệnh nhân người lớn chất bổ trợ để kiểm soát hội chứng cai rượu • Đặt vấn đề “Vì lại chọn nghiên cứu chất độc Muối tắm GHB/ nước biển” Hiện “Muối tắm” , “Nước biển” trở nên phổ biến phận giới trẻ Việt Nam, hiểm họa ma tuý nguy hiểm ẩn nắp với tên gọi tưởng chừng vô hại Việc sử dụng trái phép chất ma tuý gây nên hậu nghiêm trọng nghiện, ngộ độc cấp tính, chí dẫn đến tử vong Ngoài , sản xuất trái phép loại ma tuý đặt tên chúng trùng với sản phẩm bày bán hợp pháp “muối tắm”, “nước biển” dễ gây nhầm lẫn nghiêm trọng , khó khăn cho việc kiểm sốt phát chúng Vì việc lựa chọn chủ đề nhằm cung cấp nhìn khái qt nguồn gốc, tính chất lý hố, thành phần hố học, biểu độc tính , chế gây độc ,cách xử lí ngộ độc cách sử dụng số kỹ thuật miễn dịch sắc ký định tính, định lượng “Flaka muối tắm” “ GHB nước biển” có mẫu dịch sinh học • Giải pháp để kiểm soát việc sử dụng “ Muối tắm” “ GHB/ Nước biển” + Tuyên truyền hậu tác hại ma tuý, tránh xa chất gây nghiện + Có biện pháp chế tài nghiêm khắc người buôn bán chất gây nghiện + Quản lí bắt buộc cai nghiện đối người sử dụng nghiện B NỘI DUNG NGUỒN GỐC, TÍNH CHẤT LÝ HĨA: 1.1 Muối tắm ➢ Nguồn gốc: Muối tắm tên đặt cho nhóm ma túy có chứa nhiều hóa chất tổng hợp liên quan đến cathinone, chất kích thích tương tự amphetamine tìm thấy Khát (Catha edulis) Một loại ma túy tổng hợp biết đến đường phố “Flakka” (αpyrrolidinovalerophenone, α-PVP) trở nên phổ biến Hoa Kỳ Nó tương tự mặt hóa học với MDPV, cịn gọi muối tắm, nguyên nhân gây gia tăng trường hợp say kích động kỳ lạ Hoa Kỳ vài năm trước ➢ Tính chất lý hóa: α-PVP loại bột kết tinh màu trắng trắng nhạt, khơng mùi Có dạng viên nén, viên nhộng chất lỏng ➢ Thành phần hóa học: α-PVD [thường α-PVP, α-PVP, O-2387, β xeton-prolintan, prolintanone 1-phenyl-2- (pyrrolidin-1-yl) pentan-1- one] pyrovalerone mặt hóa học liên kết với chất tương tự xeton prolintane Công thức phân tử C15H21NO (C15H22NOCl trường hợp muối clohydrid nó) Hình 1: Cấu trúc phân tử α-PVP Tổng hợp Quá trình tổng hợp α-PVP phịng thí nghiệm theo bước + Bước 1, 1-phenyl1-pentanone tạo thành từ phản ứng valeronitril với phenylmagnesium bromide, với phản ứng tạo axit + Bước 2, brom hóa để tạo α-bromo xeton tương ứng Chất phản ứng với pyrrolidine để tạo α-PVP (hiệu suất 51%) + Bước 3, chuyển thành muối hydrochloride Hình 2: Tổng hợp Flakka 1.2 GHB ➢ Nguồn gốc Trường hợp tổng hợp GHB có từ năm 1874 báo cáo A Zaytseff Nghiên cứu tiên phong ảnh hưởng GHB người Tiến sĩ Laborit dẫn đầu vào đầu năm sáu mươi Vào năm 1964, GHB sử dụng chất gây mê, chưa phát huy tác dụng triệt để có nhiều tác dụng phụ Từ năm 1970 đến 1980, nhiều trường hợp lạm dụng GHB báo cáo số người xây dựng thể cho có khả làm tăng hormone tăng trưởng Trong suốt năm 1980 1990, tiếng chất kích thích hoạt động tình dục, đặc biệt người thường xuyên hộp đêm Từ năm 1990, GHB ý nhiều nhiều trường hợp ngộ độc cấp tính Năm 2000, Cơ quan Thực thi Ma túy Hoa Kỳ (DEA) đưa GHB vào Bảng I loại ma túy khả lạm dụng phụ thuộc thể chất tâm lý Năm 2003, liệt vào danh sách thuốc loại C Đạo luật lạm dụng thuốc Vương quốc Anh Là loại thuốc bị lạm dụng, GHB nằm tầm kiểm soát tất nước thành viên EU Tuy nhiên, ứng dụng điều trị chứng ngủ rũ thường xuyên chất bổ trợ việc kiểm soát hội chứng cai rượu nghiện rượu ➢ Tính chất lý hóa Gamma-hydroxybutyrate (GHB) tiền chất nội sinh axit gammaaminobutyric (GABA) chất gây suy nhược hệ thần kinh trung ương (CNS) trở nên khét tiếng bị lạm dụng loại thuốc tiêu khiển dạng chất lỏng không màu, không mùi màu trắng bột, viên nén viên nang số tên (“Georgia Home Boy”, “Juice”, “Liquid Ecstasy”, “Mils”, “G”, “Liquid X”, “Liquid G” “Fantasy” ) ➢ Thành phần hóa học Hình 3: Công thức cấu tạo GHB Công thức phân tử: C4H8O3 PHÂN TÍCH SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG “ FLAKKA TRONG MUỐI TẮM “ VÀ “ GHB TRONG NƯỚC BIỂN” CÓ TRONG MẪU DỊCH SINH HỌC ( MÁU, HUYẾT TƯƠNG, NƯỚC TIỂU) BẰNG CÁC KỸ THUẬT MIỄN DỊCH VÀ SẮC KÝ HIỆN ĐẠI 3.1 GHB nước biển 3.1.1.Kỹ thuật xét nghiệm sắc ký đại Giới thiệu phương pháp Axit gamma-hydroxybutyric (GHB) loại thuốc an thần sử dụng tội phạm ma túy Cửa sổ phát ngắn GHB trải qua q trình chuyển hóa giai đoạn I chuyên sâu thành axit hữu : axit glycolic, axit succinic, axit dihydroxybutyric Phương pháp sắc ký khí-khối phổ (GS/MC) sử dụng chiết lỏng-lỏng tạo dẫn xuất với N-metyl-N-tri-metylsilyltrifluoracetamit phát triển cho phép phát định lượng mức độ nội sinh chất chuyển hóa mẫu sinh học (máu nước tiểu) Thuốc thử Chất chuẩn nội sinh pha loãng (GHB-d6, 1,0 mg / mL metanol) pha loãng với metanol để thu dung dịch gốc 500 μg / mL N-methyl-N-tri-methylsilyltrifluoracetamide (MSTFA) Axit clohydric 6M Axit clohydric 0,1 mol / L 2-propanol Ethyl axetat Mẫu nước tiểu: Để tránh ô nhiễm vi khuẩn mẫu nước tiểu, thêm vào hai đến ba giọt cloroform, mẫu bảo quản -20°C sử dụng (Tốt đầu sau sử dụng GHB) Tiến hành Nước tiểu (1 mL) thêm vào 40 μL GHB-d6 nội chuẩn (500 μg / mL) Một lượng 100 μL axit clohydric 6M thêm vào để điều chỉnh độ pH đến 1– Cuối cùng, chất phân tích chiết cách sử dụng mL etyl axetat Hỗn hợp lắc kỹ phút ly tâm tốc độ 3000 vòng / phút phút Phần phía cẩn thận chuyển sang ống nghiệm thủy tinh khác Sau đó, 100 μL HCl (0,1 mol / L 2-propanol) thêm vào, phần phía làm khơ dịng nitơ nhẹ nhiệt độ phịng Cặn khơ tạo dẫn xuất trimetylsilyl hóa cách sử dụng 500 μL MSTFA 60 ° C 60 phút Hỗn hợp phản ứng chuyển vào lọ lấy mẫu tự động μL tiêm vào hệ thống GC – MS Điều kiện máy sắc ký khối phổ GC/MS GC/MS thực cách sử dụng MSD 5975C (Agilent Technologies, Santa Clara, USA) trang bị 7890A GC (Agilent) lấy mẫu tự động 7683B (Agilent) Cột mao quản sử dụng TG-5SILMS (30 m × 0,25 mm i.d., độ dày màng 0,25 μm) (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) GC vận hành chế độ phân chia (tỷ lệ phân chia 1/20), nhiệt độ kim phun đầu báo đặt 280 ° C 230 ° C Chương trình nhiệt độ sử dụng sau: tăng 10 ° C / phút từ 80 ° C đến 300 ° C, với nhiệt độ ban đầu trì phút nhiệt độ cuối trì phút Heli có độ tinh khiết cao sử dụng làm khí mang tốc độ dịng chảy 0,9 mL / phút Các hợp chất bị ion hóa tác động điện tử 70 eV Detector chọn lọc khối lượng sử dụng chế độ giám sát ion chọn để phân tích định lượng Các ion sau theo dõi (sử dụng thời gian dừng 20 ms) GHB: m/z 233 (target), 204; GHB-d6: m/z 239 (target), 206; Glycolic acid: m/z 205 (target), 147; 2-hydroxybutyrate: m/z 131 (target), 190; 3-hydroxybutyrate: m/z 191 (target), 192, 204; 3-hydroxyisobutyrate: m/z 177 (target), 218; Succinic acid: m/z 247 (target), 218, 262; 10 2,4-dihydroxybutyrate: m/z 219 (target), 321; 3,4-dihydroxybutyrate: m/z 233 (target), 321 Quy trình GC – MS xác nhận để định lượng axit hữu nói theo hướng dẫn quốc tế Kết quả: Phương pháp thiết kế đặc biệt để đánh giá định lượng GHB axit hữu nội sinh trình chuyển hóa GHB giai đoạn I mẫu huyết nước tiểu Các nồng độ chất nội sinh axit glycolic, GHB, axit succinic, axit 2,4dihydroxybutyric, axit 3,4-dihydroxybutyric sở kết luận có sử dụng GHB hay khơng 3.1.2.Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch Hình 5: Bộ xét nghiệm lạm dụng thuốc có độ nhạy cao GHB Thử nghiệm nhanh dải mm Bảng 1: Xét nghiệm chẩn đoán nhanh GHB với mẫu vật nước tiểu Bộ dụng cụ Thể loại TESGTING lạm Định dạng STRIP GHB dụng ma túy Mẫu vật Nước tiểu Thời hạn sử dụng 24 tháng Thời gian thử nghiệm – 15 phút Ứng dụng Xét nghiệm GHB Cắt 10 gg Điểm bật Self testing drug kits, strip drug test 11 Mơ tả Axit-Hydroxybutyric (GHB), cịn gọi axit 4-hydroxybutanoic, chất dẫn truyền thần kinh tự nhiên loại thuốc thần kinh Nó sử dụng môi trường y tế loại thuốc gây mê nói chung phương pháp điều trị bệnh cataplexy, chứng ngủ rũ nghiện rượu Nó sử dụng bất hợp pháp chất gây say, để cố gắng tăng hiệu suất thể thao, loại thuốc hiếp dâm ngày Nó thường sử dụng dạng muối, chẳng hạn natri-hydroxybutyrate (Na.GHB, natri oxybate) kali-hydroxybutyrate (K.GHB, kali oxybate) Nước tiểu thường mẫu vật thường dùng cho mục đích theo dõi lạm dụng thuốc Cả-butyrolactone (GBL) 1,4-butanediol chuyển đổi thành GHB thể Nguyên tắc kiểm tra GHB-DH (gammahydroxybutyrate dehydrogenase) xúc tác phản ứng GHB NAD+ để tạo NADH, phản ứng nhuộm tetrazoliym cặp diaphorase dẫn đến việc tạo phức hợp thuốc nhuộm màu tím Các thuốc thử ổn định sử dụng để tạo xét nghiệm sàng lọc GHB nước tiểu mức 10 μg / mL Hạn chế Băng thử nghiệm nhanh cung cấp kết phân tích sơ bộ, định tính Một phương pháp phân tích thứ cấp phải sử dụng để có kết xác nhận Phương pháp sắc ký khí / quang phổ khối (GC/MS) phương pháp xác nhận Có thể có lỗi kỹ thuật, chất gây nhiễu khác mẫu nước tiểu gây kết sai Chất pha trộn, chẳng hạn thuốc tẩy phèn, mẫu nước tiểu tạo kết sai lệch phương pháp phân tích sử dụng Nếu nghi ngờ, xét nghiệm nên lặp lại với mẫu nước tiểu khác Một kết dương tính cho thấy diện thuốc chất chuyển hóa khơng cho thấy mức độ nhiễm độc, đường dùng nồng độ nước tiểu 12 Một kết âm tính khơng thiết nước tiểu khơng có thuốc Kết âm tính thu có thuốc mức giới hạn xét nghiệm * So sánh băng thử nghiệm nhanh GHB (Nước tiểu) GC/MS Các kết sau lập bảng: Bảng 2: Tương quan mẫu vật GC / MS Phương pháp Tổng kết Kiểm tra nhanh GHB Cassette (nước tiểu) Các kết Tích Tích cực Tiêu cực 46 50 136 140 50 140 190 92,0% 97,1% 95,8% cực Tiêu cực Tổng kết Thỏa thuận% Giải thích; Tích cực (+) Tiêu cực (-) Khảo sát 50 người sử dụng GHB thử nghiệm nhanh GHB có 46 người cho kết dương tính => sai số người (âm tính) => độ nhạy pp 92% Khảo sát 140 người khơng sử dụng GHB pp GC/MS có 136 người cho kết âm tính => sai số người (dương tính) => độ đặc hiệu pp 97.1% 3.2 Flakka muối tắm 3.1.3.Kỹ thuật xét nghiệm sắc ký đại 13 Mẫu huyết nước tiểu giữ tủ lạnh đem phân tích thường thực vào hôm sau Bảo quản mẫu thời gian dài thực - 80 ° C Phép đo chất tác động thần kinh thực phương pháp sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) đa thành phần LCđộ phân giải cao (LC-HRMS / MS), dựa tín hiệu ghi hai ion sản phẩm cho chất phân tích chế độ theo dõi phản ứng tích cực chọn (SRM) Phương pháp LC-HRMS thường xuyên cập nhật chất mới, chúng xuất thị trường thuốc Hình 6: Sắc ký đồ LC-MS/MS Vật liệu phương pháp phân tích Thuốc thử Tất hợp chất chuẩn đối chứng Dung môi, bao gồm metanol, axetonitril axit fomic Nước tiểu bình thường khơng chứa thuốc 14 Chuẩn bị tiêu chuẩn hiệu chuẩn Nước tiểu bình thường khơng chứa ma túy bổ sung chất chuẩn đối chiếu nồng độ 25 ng / mL, 250 ng / mL 1000 ng / mL làm chất chuẩn Tất mẫu, mẫu chuẩn mẫu chứng pha loãng lần với dung dịch nội chuẩn (0,5 µg / mL metylone D3 alpha-PVP D8) cách thêm 400 µL chất chuẩn nội vào 100 µL mẫu Bảng 3: Chuyển tiếp phân mảnh lớn chất chuyển tiếp chất chuẩn nội Thiết bị đo đạc Tất phân tích thực thông qua LC – MS / MS hệ thống Acquity TQD UPLC / MS / MS (Waters) Cột phân tích UPLC BEH C18 (Waters) 2,1 × 50 mm, 1,7 µm sử dụng để tách sắc ký Thời gian chạy cho phương pháp 2,0 phút với tổng thời gian chu kỳ 2,5 phút Không cần chiết làm mẫu trước phân tích LC – MS / MS Hai trình chuyển đổi theo dõi cho 10 chất phân tích (alpha-PVP, butylone, ethylone, MDPV, mephedrone, d, lmethcathinone, methedrone, methylone, mitragynine naphyrone), cộng với hai chất chuẩn nội (methylone D3 alpha-PVP D8 ), thể Bảng I Các dung môi rửa giải sử dụng gradient 0,1% axit fomic 10% metanol (pha động A) 0,1% axit fomic 50:50 metanol– axetonitril (pha động B), với tốc độ dòng 0,4 mL / phút (Bảng II) 15 Bảng 4: Các thông số Gradient sắc ký lỏng Phương pháp xác nhận Phương pháp xác nhận cách kiểm tra thông số khác giới hạn, độ tuyến tính, độ chụm độ xác (P&A: Mười lần lặp lại ba nồng độ ngày ba ngày với hệ số phương sai [% CV] điểm P&A lặp lại ngày tất ngày P&A giảm khoảng +/- 15%), ảnh hưởng hiệu ứng ma trận Lạm dụng ma túy (benzoylecgonine, THC-A, amphetamine, methamphetamine, MDMA, MDEA, MDA phentermine) thuốc điều trị (oxazepam, morphine, imipramine, buprenorphine, fentanyl, meprobamate, methadone, tramadol, gabapentin, pregentabalin) kiểm tra nguồn gây nhiễu có Các mẫu bệnh phẩm đánh giá cách so sánh kết định lượng phương pháp với kết phương pháp mô tả Phương pháp trước phát triển xác nhận mô tả thiếu chất phân tích quan trọng, ví dụ, mitragynine alpha-PVP 16 Bảng 5: Dữ liệu xác thực thu từ phương pháp “ pha loãng bắn” cho tất chất phân tích có xét nghiệm Dung sai cho tất chất phân tích mức nồng độ ± 25% Tất đường chuẩn hàng ngày có giá trị hệ số tương quan (r ) lớn 0,99 Các khoảng trống ma trận theo sau điểm hiệu chuẩn cao không cho thấy dấu hiệu chuyển nào, nghĩa khơng có phản ứng lớn 50% giới hạn định lượng (LOQ) Hình 7: Sắc ký đồ phủ 10 chất phân tích xác định xét nghiệm Sắc ký đồ thu sau tiêm mẫu giới hạn định lượng (LOQ) 25 ng / mL Tiêu chuẩn nội (IS) không hiển thị 17 Hai chất chuyển đổi khối lượng chọn cho chất phân tích sau nghiên cứu tiêm truyền chất chuẩn tinh khiết hòa tan chất Sự chuyển đổi đóng vai trị chuyển đổi ion định lượng chuyển đổi thứ hai đóng vai trị chuyển đổi ion định tính (Bảng I) Tỷ lệ diện tích chuyển đổi ion định lượng cho chất phân tích quan tâm chất chuẩn nội (IS) sử dụng để thu phản ứng tương đối cách vẽ biểu đồ tỷ lệ diện tích chất phân tích-IS so với nồng độ chất phân tích Diện tích q trình chuyển đổi ion thứ hai chất phân tích sử dụng để tạo tỷ lệ tương đối cụ thể với diện tích pic định lượng Điều tạo “tỷ lệ ion” hợp chất cụ thể cho chất phân tích với thời gian lưu giúp xác nhận đỉnh kết từ hợp chất quan tâm Hình 8: Sắc đồ cho thấy phân tách đồng phân etylone butylone 18 Kết Phương pháp tạo liệu hiệu chuẩn với diện tích pic tỷ lệ ion quán cho tất chất phân tích chất chuẩn nội Các đường chuẩn ba điểm hàng ngày hoàn thành với giá trị hệ số tương quan (r 2) 0,99 tất chất phân tích Độ xác quán 100 ± 25% thu tất điểm hiệu chuẩn, đối chứng âm dương, điểm tạo hàng ngày cho hiệu chuẩn đối chứng Giới hạn định lượng (LOQ) xác định 25 ng / mL, đủ để đạt độ xác độ xác quán tỷ lệ ion chấp nhận được, giới hạn độ tuyến tính độ mang (ULOL, ULOC) 1000 ng / mL Sắc ký đồ tất chất phân tích Hình cung cấp chứng rõ ràng có phân tách phân giải sắc ký tốt tất chất phân tích đánh giá xét nghiệm LOQ Bảng trình bày tóm tắt kết xác nhận Bảng 6: Dữ liệu NPS dương tính từ khoảng thời gian 14 tháng thử nghiệm 3.1.4 Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch Máy xét nghiệm nhanh α-PVP (Nước tiểu) xét nghiệm miễn dịch sắc ký nhanh để phát alpha-Pyrrolidinovalerophenone (α-PVP) nước tiểu người với nồng độ 1000ng / mL.Xét nghiệm cung cấp kết xét nghiệm phân tích sơ bộ, định tính 19 Mơ tả: Alpha-Pyrrolidinovalerophenone (cịn gọi α-PVP, A-PVP, alpha-PVP, Flakka) chất kích thích tổng hợp nhóm hóa chất cathinone pyrrolidine Nó tạo kích thích tập trung giống cathinone với thành phần "vội vàng" rõ rệt dùng α-PVP tương tự mặt hóa học với hợp chất pyrrolidine khác MDPV hợp chất cathinone khác tìm thấy bụi khat miền đơng châu Phi Nó thường có dạng bột tinh thể mảnh kết tinh mà người dùng ăn để tạo tác dụng kích thích hưng phấn mạnh mẽ tồn thời gian ngắn tương đương với methamphetamine cocaine bơm hóa Kit test xét nghiệm nhanh α-PVP (Nước tiểu) xét nghiệm sàng lọc nước tiểu nhanh chóng thực mà khơng cần sử dụng dụng cụ Xét nghiệm sử dụng kháng thể đơn dịng để phát có chọn lọc nồng độ alphaPyrrolidinovalerophenone nước tiểu Kit test xét nghiệm nhanh α-PVP (Nước tiểu) cho kết dương tính alpha-Pyrrolidinovalerophenone nước tiểu vượt 1000ng / mL Sử dụng Cho phép xét nghiệm, mẫu nước tiểu kiểm soát đạt đến nhiệt độ phòng (15-30 ° C) trước thử nghiệm Mang túi đến nhiệt độ phòng trước mở Tháo băng thử khỏi túi kín sử dụng vòng Đặt hộp thử nghiệm bề mặt phẳng Giữ ống nhỏ giọt theo chiều dọc chuyển giọt nước tiểu đầy (khoảng 120 L) vào giếng mẫu (S) hộp thử nghiệm, sau khởi động hẹn Tránh bẫy bọt khí mẫu vật (S) Xem hình minh họa 20 Đợi cho dòng màu xuất Đọc kết sau phút Khơng giải thích kết sau 10 phút Hình 9: Kit test xét nghiệm nhanh α-PVP (Nước tiểu) 【 HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG PANEL】 Cho phép xét nghiệm, mẫu nước tiểu / kiểm soát đạt đến nhiệt độ phòng (15-30ºC) trước thử nghiệm Mang túi đến nhiệt độ phòng trước mở Tháo bảng thử khỏi túi kín sử dụng vịng Tháo nắp Với mũi tên phía mẫu nước tiểu, nhúng bảng thử nghiệm theo chiều dọc mẫu nước tiểu 10 đến 15 giây Nhúng dải tối thiểu đến mức đường lượn sóng, khơng nằm mũi tên bảng thử nghiệm Thay nắp đặt bảng thử nghiệm bề mặt phẳng không thấm nước Bắt đầu hẹn đợi (các) vạch màu xuất Kết nên đọc sau phút Khơng giải thích kết sau 10 phút 21 Hình 10: Hướng dẫn sử dụng Panel ➢ So sánh ưu nhược điểm phương pháp - Kỹ thuật miễn dịch sắc ký nhanh cho kết nhanh, chi phí thấp, tiện lợi di chuyển, xác định kết sơ định tính chất - Kỹ thuật sắc ký phổ đại cho kết xác, nhiều chất lúc, có tính định tính định lượng nhiên chi phí cao, tốn thời gian, khơng động C TÀI LIỆU THAM KHẢO Sách, Bài báo Abdulaziz A Aldubayyan, Erika Castrignano, Simon Elliott, Vincenzo Abbate (2022), A Quantitative LC-MS/MS Method for the Detection of 16 Synthetic Cathinones and 10 Metabolites and Its Application to Suspicious Clinical and Forensic Urine Samples, 15(5), 510 Debashish Roy, Christa L Colyer, Allyson L Mellinger, Erin C Strickland, Gregory L Mclntire, Oneka T Cummings (2018), Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry Method for Novel Psychoactive Substances: Kratom and Synthetic Cathinones in Urine Emma Tay, Wing Kwan Winky Lo, Bridin Murnion (2022), Current Insights on the Impact of Gamma-Hydroxybutyrate (GHB) Abuse, 13, 13-23 F.B.García, C.Pedraza, J.F.Navarro (2006), Update on gamma hydroxybutyric acid, 43(1), 39-48 Jiri Patocka, Bingshu Zhao, Wenda Wu, Blanka Klimova, Martin Valis, Eugenie Nepovimova and Kamil Kuca (2020), Flakka: New Dangerous Synthetic Cathinoneon the Drug Scene, 21, 8185 Pouria Jarsiah, Joerg Roehrich, Marek Wyczynski, Cornelius Hess (2020), Phase I metabolites (organic acids) of gamma-hydroxybutyric acid–validated quantification using GC–MS and description of endogenous concentration ranges, 12, 1135-1143 Turkiye Klinikleri J Foren Sci Leg Med (2018), A Synthetic Cathinone-αPyrrolidinovalerophenone (α-PVP): Flakka, 15(2), 93-104 Internet https://vietnamese.medicaldiagnostictestkits.com/sale-10529475-highsensitivity-ghb-rapid-diagnostic-test-kit-ghb-rapid-test-3mm-strip.html https://tiengchuong.chinhphu.vn/giai-phap-nao-han-che-viec-su-dung-matuy-trong-gioi-tre-113220804105235972.htm