(Luận văn) nhân giống bạch đàn urô (eucalyptus urophylla bleck) pn46 pn và pn47 bằng phương pháp nuôi cấy vintro

Bộ giáo dục & đào tạo nông nghiệp ptnt Trường đại học lâm nghgiệp .o0o phạm đức huy lu an n va nhân giống hai dòng bạch đàn urô to gh tn (Eucalyptus urophylla Bleck) PN46 PN47 p ie phương pháp nuôi cấy in vitro w M· sè : 60 62 60 d oa nl Chuyên ngành: lâm học nf va an lu lm ul Luận văn thạc sĩ khoa học lâm nghiƯp ng­êi h­íng dÉn khoa häc z at nh oi PGS-TS D­¬ng méng hïng z m co l gm @ an Lu Hà tây 2006 n va ac th si Luận văn hoàn thành tại: Khoa đào tạo Sau đại học Trường đại học Lâm nghiệp Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Dương Mộng Hùng lu Phản biện 1: an Ph¶n biƯn 2: n va ie gh tn to p Luận văn bảo vệ Hội đồng chấm luận văn cấp nhà nước nl w Họp tại: Trường Đại học Lâm nghiệp Việt Nam oa Xuân Mai, Chương Mỹ, Hà Tây d Vào hồi: ngày tháng .năm 2006 nf va an lu lm ul z at nh oi Có thể tìm luận văn tại: Trung tâm thông tin tư liệu thư viện - Trường ĐHLN Thư viện Khoa đào tạo Sau đại học z m co l gm @ an Lu n va ac th si Hà tây 2006 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si Mở đầu Trong năm gần đây, kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật đà không ngừng phát triển thu thành tựu đáng kể Kỹ thuật đời đà mở hướng nghiên cứu thực vật nhanh chóng có vị trí quan trọng lĩnh vực công nghệ sinh học sản xuất cải thiện giống trồng ưu điểm bật phương pháp nhân nhanh đồng di truyền số lượng lớn cá thể thời gian ngắn, trẻ hoá gần từ hạt [15] lu Một số loài thuộc chi Bạch đàn (Eucalyptus) đà nhập nội vào Việt an Nam từ sớm trồng rộng rÃi hầu hết vùng sinh thái nhằm đáp va n ứng nhu cầu nguyên liệu giấy, bột giấy, gỗ trụ mỏ, gỗ xây dựng, gỗ xẻ tn to củi Trong hội thảo quốc gia loài ưu tiên cho trồng rừng Việt Nam ie gh năm 2001, loài bạch đàn đối tượng ưu tiên số Danh mục p loài ưu tiên cho trồng rừng toàn quốc [25] Hiện nay, nguồn nl w giống cung cấp cho trồng rừng bạch đàn nước ta chủ yếu vô tính (sản d oa xuất phương pháp giâm hom nhân giống in vitro) ë ViƯt Nam, nh©n an lu gièng in vitro dòng bạch đàn Urô nước ta sản xuất công nf va nghiệp từ năm 1994 đến đà thu thành công lm ul đáng kể Mỗi năm, công nghệ cung cấp khoảng 10 triệu giống bạch đàn loại phục vụ chương trình trồng rừng toàn quốc [25] z at nh oi Rừng trồng dòng vô tính bạch đàn từ mẹ ưu trội chọn lọc đà tạo bước đột phá suất chất lượng rừng trồng z năm gần Tuy nhiên, nhược điểm lớn gây trồng nhập nội @ gm chúng có nguy tổn thất nặng nề địa xảy dịch sâu bệnh l môi trường gây trồng sức đề kháng chúng địa m co Thêm vào đó, thực tế mà nhiều người thống rằng, ®iĨm u nhÊt, an Lu râ nhÊt, nghiªm träng nhÊt trồng rừng từ nhân giống phương pháp in vitro làm giảm đáng kể biến dị di truyền giảm đa n va ac th si dạng di truyền Hiệu làm ngăn chặn trình chọn lọc tiếp, không tăng thu tiếp theo, tăng khả lây lan, tàn phá nhanh rộng sâu bệnh hại [16] Để hạn chế lây lan dịch bệnh xảy biện pháp kỹ thuật trồng nhiều loài, nhiều dòng khác diƯn tÝch lín ë n­íc ta hiƯn cã kho¶ng 12 dòng bạch đàn đà Bộ NN&PTNT công nhận cho phép trồng rừng sản xuất, có 3-4 dòng nhân giống phương pháp in vitro Vì vậy, dòng đà lu Bộ NN&PTNT công nhận cần nghiên cứu nhân giống phương an pháp in vitro để cung cấp cho trồng rừng khảo nghiệm trồng rừng sản xuất va n Năm 2003 Bộ NN&PTNT đà công nhận hai dòng bạch đàn urô PN46 tn to PN47 (tên đầy đủ Dòng bạch đàn Phù Ninh số 46 Dòng bạch đàn ie gh Phù Ninh số 47) giống tiến kỹ thuật khuyến khích trồng rừng p vùng có điều kiện sinh thái tương tự vùng Trung tâm Bắc Bộ (Phụ lục w 1.1) Hiện nay, nhu cầu giống hai dòng nhằm phục vụ trồng rừng oa nl khảo nghiệm sản xuất lớn Thêm vào đó, việc nhân giống kỹ thuật d nuôi in vitro dòng chưa nghiên cứu Thời gian vừa qua, Viện lu nf va an nghiên cứu nguyên liệu giấy đà thử nghiệm áp dụng quy trình nhân giống invitro hai dòng PN14 U6 vào nhân giống hai dòng không thành lm ul công Điều đặc điểm sinh lý, sinh hoá hai dòng z at nh oi có điểm khác so với dòng đà nhân giống quy trình Nên việc áp nghiên cứu nhân giống dòng bạch đàn kỹ thuật nuôi cấy in vitro để tiến tới hoàn thiện công nghệ phục vụ cho sản xuất z gm @ cần thiết Từ đặc điểm, nhu cầu thực tiễn nhu cầu khoa học nêu trên, l co tiến hành đề tài Nhân giống hai dòng bạch đàn urô (Eucalyptus m urophylla S.T Blake) PN46 PN47 phương pháp nuôi cấy in an Lu vitro n va ac th si Ch­¬ng tỉng quan vấn đề nghiên cứu 1.1 Khái niệm nhân giống in vitro Nuôi cấy mô tế bào thực vật gọi nuôi cấy thực vật in vitro (trong ống nghiệm) để phân biệt với trình nuôi cấy điều kiện tự nhiên gọi nuôi cấy in vivo (ngoài ống nghiệm) Thuật ngữ nuôi cấy mô tế bào thực vật hay nuôi cấy in vitro lu (Plant Tissue Culture) phạm trù khái niệm tất loại nuôi cấy mô an Nuôi cấy cây: nuôi cấy thực vật n va tế bào điều kiện vô trùng Bao gồm [16]: gh tn to Nuôi cấy phận đà tách khỏi thực vật: nuôi cấy quan p ie Nuôi cấy phôi thành thục hay chưa thành đà tách khỏi thực w vật: nuôi cấy ph«i m« sĐo d oa nl  Nu«i cÊy m« bắt nguồn từ quan thực vật: nuôi cấy mô hay nu«i cÊy lu nf va láng an  Nu«i cấy tế bào đơn lẻ hay cụm tế bào nhỏ môi trường tế bào trần (protoplast) 1.2 z at nh oi lm ul  Nu«i cÊy tÕ bào thực vật sau đà tách bỏ phần vỏ, gọi nuôi cấy Các giai đoạn nhân giống in vitro Nhân giống in vitro gồm nhiều giai đoạn nhau, trình có l gm @ 1.2.1 Giai đoạn chuẩn bị z thể chia thành giai đoạn sau đây: co Giai đoạn chuẩn bị giai đoạn quan trọng, định thành công m thí nghiệm nhân giống in vitro Giai đoạn gồm nhiều nội dung an Lu khác pha môi trường nuôi cấy, chuẩn bị hoá chÊt khö trïng mÉu, n va ac th si chuẩn bị khử trùng thiết bị giai đoạn này, chuẩn bị môi trường dinh dưỡng có vai trò vô quan trọng mô nuôi cấy có sinh trưởng, phát triển hay không phụ thuộc vào thành phần, nồng độ chất có môi trường nuôi khả hấp thụ chất dinh dưỡng có môi trường mô nuôi cấy Nhu cầu dinh dưỡng mô nuôi cấy khác tuỳ thuộc vào loài, giống, chí mô lấy từ quan khác cá thể có nhu cầu dinh dưỡng khác [23] Cho đến nay, người ta đà tìm lu nhiều loại môi trường dinh dưỡng thích hợp cho nhiều loài khác như: an môi trường White (1934), môi trưòng MS (Murashige and Skoog, 1962), m«i va n tr­êng Litvay (1985),…vv, môi trường MS môi trường nuôi cấy tn to thích hợp cho nhiều loài thực vật nói chung Các loại môi trường khác ie gh có thành phần nồng độ chất khác nhau, nhiên môi trường p gồm thành phần bản: nl w Nguồn cacbon: Nguồn cacbon thường sử dụng đường Glucose oa sucrose Ngoài ra, môi trường số loại thực vật sư dơng d mantose hc lactose [12] lu nf va an Nguồn muối khoáng: Căn vào hàm lượng chứa cây, nguyên tố khoáng chia thành hai nhóm Nhóm nguyên tố lm ul chiếm lượng lớn từ 10-1 đến 10-4 chất khô gọi nguyên tố đa z at nh oi lượng gồm: C, H, O, Nvv Nhóm nguyên tố chiếm lượng nhỏ, từ 10-5 đến 10-7 chất khô gọi nguyên tố vi lượng, z nguyên tè Mn, Bo, Cu…vv [22] gm @  Vitamin: Nãi chung mô nuôi cấy có khả tổng hợp đầy đủ l vitamin cần thiết, nhiên với số lượng không đầy đủ Để mô nuôi cấy m co sinh trưởng phát triển tốt, người ta thường đưa thêm vào môi trường (B3), riboflavin (B2) vitamin C [17] [24] an Lu mét sè vitamin nhãm B nh­: thiamine (B1), pyridoxine (B6), niconin n va ac th si Chất điều hoà sinh trưởng: Các chất điều hoà sinh trưởng chiếm hàm lượng nhỏ môi trường nuôi cấy có vai trò quan trọng định thành công trình nhân giống Trong môi trường nhân giống in vitro sư dơng c¸c chÊt nhãm chÊt kÝch thÝch sinh trưởng bao gồm: auxin, cytokinin gibberelin Auxin sử dụng để điều chỉnh phát sinh rễ Cytokinin sử dụng để điều chỉnh phát sinh chồi Tỷ lệ cân đối auxin/cytokinin tạo hoàn chỉnh [24] Trong nh©n gièng in vitro, ng­êi ta th­êng sư dơng auxin lµ IAA, NAA vµ IBA, cytokinin lµ BAP, BA vµ kinetin lu an 1.2.2 LÊy mÉu, khư trïng mÉu vµ cấy mẫu vào môi trường tạo chồi va n Mẫu sau lấy rửa nước sạnh (có thể rửa xà phòng tn to chất tẩy rửa khác) Sau rửa nước cất vô trùng, ci cïng khư MÉu cÊy th­êng lÊy tõ c¸c bé phận phát triển mạnh mô phân p ie gh trïng b»ng chÊt diƯt khn bng cÊy v« trùng w sinh đỉnh chồi rễ phận non phận có oa nl khả tái sinh, sinh trưởng phát triển mạnh Khả tái sinh mẫu d cấy phụ thuộc vào loại cây, giai đoạn ph¸t triĨn kh¸c cđa c¸ lu nf va an thể tuổi mẹ, tuổi cành Ngoài khả tái sinh mẫu cấy phụ thuộc vào thời điểm lấy mẫu, mùa lấy mẫu vị trí mẫu lm ul Khử trùng mẫu nuôi bước cấy khởi đầu quan trọng nuôi nhân z at nh oi giống in vitro Đặc biệt số trường hợp mẫu cấy loài quý hiếm, số lượng mẫu có hạn giai đoạn khử trùng vô quan trọng tỷ lệ mẫu sống cao tạo số lượng chồi đủ lớn cho thử nghiệm tiếp z chia chúng làm loại: l gm @ theo Có nhiều chất khác sử dụng để khử trùng mẫu có thĨ co  Nhãm chÊt khư trïng bỊ mỈt nh­ HgCl2, HgCr2, loại nuối m hypoclorit, nước ôxi già (H2O2)vv Đặc điểm nhóm chất khử an Lu trùng chúng có khả tiêu diệt vi sinh vËt n»m trªn n va ac th si bề mặt mẫu vật mà không diệt vi sinh vật bên mô nuôi cấy [21] Nhóm chất khử trùng có khả thấm sâu vào bên mô nuôi cấy tiêu diệt vi sinh vật tồn mô (các chất kháng sinh penixillin, streptomyxin, xefotaxinvv) Khi sử dụng chất này, người ta không dùng riêng lẻ mà để khử trùng mẫu sau đà khử trùng bề mặt Nhiều loài thực vật thường chứa mầm bệnh nấm, vi khuẩn, virus bên mô nghiên cứu tạo giống bệnh người ta cần sử dụng phương pháp [21] lu an 1.2.3 Cấy tạo chồi nhân chồi va n Sau thời gian định nuôi cấy chồi môi trường èng tn to nghiƯm, chÊt dinh d­ìng m«i tr­êng giảm không ie gh hấp thụ Thêm vào đó, số chất ức chế sinh trưởng phát triển p chồi tiết môi trường, chồi cần chuyển sang m«i tr­êng w míi Thêi gian cÊy chun phụ thuộc vào loài mục tiêu oa nl trình nhân giống Đối với nhân giống in vitro bạch đàn, thời gian cấy d chuyển từ 25 đến 30 ngày sau cấy Tuy nhiên, với thí nghiệm mà lu nf va an mục tiêu trì giống bảo tồn in vitro thời gian cấy chuyển dài Môi trường nhân chồi thường có mặt auxin cytokinin víi tû z at nh oi 1.2.4 CÊy t¹o rễ lm ul lệ thích hợp với loài chí cá thể Để tạo hoàn chỉnh gồm rễ, thân lá, chồi cấy vào môi trường tạo rễ Mục tiêu giai đoạn kích thích trình hình thành rễ z co 1.2.5 Huấn luyện cấy bầu l auxin mà mặt cytokinin gm @ phần mặt cắt (phần gốc) chồi Môi trường tạo rễ thường có mặt m Trong nhân giống in vitro, ống nghiệm sản xuất an Lu điều kiện nhân tạo nhiệt độ, ánh sáng môi trường dinh dưỡng Do n va ac th si cần huấn luyện nhằm tăng tỷ lệ sống cấy vườn ươm Huấn luyện cách đặt bình điều kiện nhiệt độ ánh sáng tự nhiên (thường không để ánh sáng chiếu trực tiếp vào cây, có che tuỳ theo thời ®iĨm vµ mïa) Thêi gian hn phơ thc vµ tõng loài mùa, với bạch đàn thường thời gian huấn luyện khoảng 6-10 ngày Kết thúc giai đoạn huấn luyện, lấy cấy vào bầu Tuỳ thuộc vào mục tiêu thí nghiệm sản xuất mà sử dụng thành phần ruột bầu khác Tóm lại, trình nhân giống in vitro chia thành giai lu an đoạn kết giai đoạn không tách biệt mà có n va kế thừa giai đoạn trước Trong giai đoạn giai đoạn chuẩn bị tn to môi trường đặc biệt quan trọng, giai đoạn ảnh hưởng xuyên suốt gh định thành công hay thất bại trình nhân giống Cơ sở khoa học phưương pháp nuôi cấy in vitro p ie 1.3 w 1.3.1 Tính toàn tế bào thực vật oa nl Nguyên lý nhân giống in vitro tính toàn tế bào d thực vật Mỗi tế bào thể thực vật mang toàn lượng thông lu nf va an tin di truyền cần thiết đầy đủ thực vật gọi gen (genom) Đặc tính thực vật thể kiểu h×nh thĨ tõng thêi kú cđa lm ul trình phát triển phụ thuộc vào giải mà thông tin di truyền tương ứng z at nh oi hệ gen tế bào Do đó, gặp điều kiện thích hợp, mối tương tác qua lại với điều kiện môi trường, quan, mô tế bào phát triển thành cá thể hoàn chỉnh mang đặc tính di truyền giống z gm @ mẹ 1.3.2 Sự phân hoá phản phân hoá tế bào l co Quá trình phát sinh hình thái nuôi cấy mô tế bào thực vật thực chất m kết phân hoá phản phân hoá tế bào Cơ thể thùc vËt tr­ëng thµnh lµ an Lu mét chØnh thĨ thống bao gồm nhiều quan chức khác nhau, n va ac th si 94 ► Dßng PN46 Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic 1.921 537 He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) df1 df2 4 Sig .183 712 10 10 ANOVA He so nhan choi (lan) lu an Ty le choi huu hieu (%) Sum of Squares 247 013 10 260 211.153 37.500 248.653 Mean Square 062 001 F 47.688 Sig .000 52.788 3.750 14.077 000 14 10 14 n va Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df gh tn to He so nhan choi (lan) ie Subset for alpha = 05 p N Nong kinetin (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig w Duncana 1.9400 d oa nl 3 3 2.0567 2.1133 2.2200 an lu 2.3100 082 1.000 1.000 nf va 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 lm ul Duncana N m co an Lu ► Dßng PN47 l Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 gm @ 3 3 Subset for alpha = 05 15.4667 20.3000 23.1667 23.1667 24.7333 26.0000 1.000 100 118 z Nong kinetin (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig z at nh oi Ty le choi huu hieu (%) n va ac th si 95 Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic 1.247 9.323 He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) df1 df2 4 Sig .352 002 10 10 Multiple Comparisons Dependent Variable: Ty le choi huu hieu (%) Tamhane lu an n va Sig .152 063 218 003 152 163 173 001 p ie gh tn to Mean Difference (I) Nong kinetin (mg/l)(J) Nong kinetin (mg/l) (I-J) Std Error 1.0 -.8000 18257 2.0 -2.0333 26034 3.0 7.0333 1.13920 4.0 11.0000* 32146 1.0 8000 18257 2.0 -1.2333 28480 3.0 7.8333 1.14504 4.0 11.8000* 34157 2.0 2.0333 26034 1.0 1.2333 28480 3.0 9.0667 1.15998 4.0 13.0333* 38873 3.0 -7.0333 1.13920 1.0 -7.8333 1.14504 2.0 -9.0667 1.15998 4.0 3.9667 1.17521 4.0 -11.0000* 32146 1.0 -11.8000* 34157 2.0 * -13.0333 38873 3.0 -3.9667 1.17521 * The mean difference is significant at the 05 level 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -1.9606 3606 -4.2658 1991 -8.3543 22.4210 7.8179 14.1821 -.3606 1.9606 -3.0756 6089 -7.0395 22.7062 9.2136 14.3864 d oa nl w 063 163 118 000 218 173 118 485 003 001 000 485 nf va an lu z at nh oi lm ul -.1991 -.6089 -4.6609 10.7704 -22.4210 -22.7062 -22.7943 -8.8054 -14.1821 -14.3864 -15.2963 -16.7388 4.2658 3.0756 22.7943 15.2963 8.3543 7.0395 4.6609 16.7388 -7.8179 -9.2136 -10.7704 8.8054 ANOVA z df gm 10 14 10 14 Mean Square 043 001 F 33.003 Sig .000 109.557 000 m co l Ty le choi huu hieu (%) 96.776 883 an Lu Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total @ He so nhan choi (lan) Sum of Squares 172 013 186 387.103 8.833 395.936 n va ac th si 96 He so nhan choi (lan) Duncana Nong kinetin (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig N Subset for alpha = 05 1.9000 3 3 2.0333 2.0967 1.000 2.0967 2.1267 057 2.2233 1.000 333 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 lu an Ty le choi huu hieu (%) n va Duncana p ie gh tn to Nong kinetin (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig N Subset for alpha = 05 11.7000 3 3 15.6667 22.7000 23.5000 1.000 1.000 23.5000 24.7333 139 322 oa nl w Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 d Phụ lục 3.9 ảnh hưởng phối hợp BAP + NAA + Kinetin ®Õn hƯ sè lu nf va an nhân chồi tỷ lệ chồi hữu hiệu Dòng PN46 lm ul Test of Homogeneity of Variances z at nh oi He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) Levene Statistic 949 560 df1 df2 4 Sig .475 697 10 10 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 97 ANOVA He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) Sum of Squares 468 024 492 581.909 12.700 594.609 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df 10 14 10 14 Mean Square 117 002 F 48.918 Sig .000 145.477 1.270 114.549 000 He so nhan choi (lan) lu Duncana an n va N Subset for alpha = 05 2.4833 3 3 2.6533 2.6667 2.8333 1.000 745 3.0033 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 p ie gh tn to Nong kinetin (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig Nong kinetin (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N d Duncana oa nl w Ty le choi huu hieu (%) Subset for alpha = 05 15.6667 nf va an lu 3 3 18.2000 27.9333 29.8000 lm ul 1.000 1.000 29.8000 30.5333 444 070 z at nh oi Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 ► Dßng PN47 z df2 10 10 Sig .022 353 m co 4 l df1 gm He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) Levene Statistic 4.684 1.245 @ Test of Homogeneity of Variances an Lu n va ac th si 98 ANOVA He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) Sum of Squares 588 127 715 601.937 5.860 607.797 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df 10 14 10 14 Mean Square 147 013 F 11.553 Sig .001 150.484 586 256.799 000 He so nhan choi (lan) lu Duncana an n va Subset for alpha = 05 2.1233 2.4133 2.4233 2.5900 2.5900 2.7100 1.000 097 222 N 3 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 p ie gh tn to Nong kinetin (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig Nong kinetin (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N d Duncana oa nl w Ty le choi huu hieu (%) nf va an lu 3 3 lm ul Subset for alpha = 05 12.5667 17.9333 27.3000 27.4667 28.3000 1.000 1.000 157 z at nh oi Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 z Phụ lục 3.10 ảnh hưởng IBA đến hiệu rễ @ l gm Dòng PN46 Test of Homogeneity of Variances df1 df2 10 10 Sig .109 075 an Lu 4 m co Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 2.509 2.955 n va ac th si 99 ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Sum of Squares 6211.424 34.233 6245.657 2.671 244 2.915 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df 10 14 10 14 Mean Square 1552.856 3.423 F 453.609 Sig .000 668 024 27.354 000 Ty le re (%) lu Duncana an n va N 3 3 14.433 Subset for alpha = 05 45.000 53.300 59.433 1.000 1.000 1.000 1.000 76.100 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 p ie gh tn to Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig w d oa nl So re TB (re/cay) N nf va an lu Duncana Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig z at nh oi lm ul 3 3 Subset for alpha = 05 1.400 1.560 2.040 2.073 2.593 238 799 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 100 Chieu dai re (cm) Duncana,b Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig N Subset for alpha = 05 5244 41 90 90 90 90 6733 7778 1.000 7778 8700 077 1.1578 1.000 119 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 72.638 b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed lu an ► Dßng PN47 va n Test of Homogeneity of Variances Ty le re (%) So re TB (re/cay) df1 df2 4 Sig .325 291 10 10 p ie gh tn to Levene Statistic 1.329 1.438 ANOVA w oa nl Sum of Squares 6323.697 286.120 6609.817 2.419 173 2.591 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total d Ty le re (%) nf va an lu So re TB (re/cay) df z at nh oi lm ul 10 14 10 14 Mean Square 1580.924 28.612 F 55.254 Sig .000 605 017 34.976 000 Ty le re (%) N 13.900 42.233 51.667 056 75.000 1.000 055 m co an Lu Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 l 1.000 51.667 61.133 gm 3 3 @ Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig z Duncana Subset for alpha = 05 n va ac th si 101 So re TB (re/cay) Duncana Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 1.280 1.807 1.833 2.027 2.527 1.000 078 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) lu Subset for alpha = 05 an n va N 37 90 90 90 90 gh tn to Nong IBA (mg/l) Duncana,b 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig 4811 6578 7111 8600 ie 1.000 294 1.0878 1.000 1.000 p Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 69.958 oa nl w b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed d Phụ lục 3.11 ảnh hưởng phối hợp IBA + ABT đến nf va an lu Dòng PN46 df1 df2 Sig .457 033 z at nh oi Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 988 4.059 lm ul Test of Homogeneity of Variances 4 10 10 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 102 Multiple Comparisons Dependent Variable: So re TB (re/cay) Tamhane lu an n va 95% Confidence Interval Sig Lower Bound Upper Bound 960 -1.088 688 1.000 -1.132 1.045 294 -.394 1.254 230 -.683 1.870 960 -.688 1.088 977 -1.125 1.439 161 -.341 1.601 171 -.677 2.263 1.000 -1.045 1.132 977 -1.439 1.125 060 -.029 976 003 369 904 294 -1.254 394 161 -1.601 341 060 -.976 029 681 -.468 794 230 -1.870 683 171 -2.263 677 003 -.904 -.369 681 -.794 468 p ie gh tn to Mean Difference (I) Nong ABT (mg/l) (J) Nong ABT (mg/l) (I-J) Std Error -.200 1579 1.0 -.043 1107 1.5 430 1222 2.0 593 1073 200 1579 1.0 157 1229 1.5 630 1334 2.0 793 1199 1.0 043 1107 -.157 1229 1.5 473 0715 2.0 637* 0411 1.5 -.430 1222 -.630 1334 1.0 -.473 0715 2.0 163 0662 2.0 -.593 1073 -.793 1199 1.0 -.637* 0411 1.5 -.163 0662 nl w d oa * The mean difference is significant at the 05 level an lu ANOVA nf va Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total 10 14 10 14 z at nh oi So re TB (re/cay) df lm ul Ty le re (%) Sum of Squares 2886.017 74.047 2960.064 1.096 087 1.184 Mean Square 721.504 7.405 F 97.439 Sig .000 274 009 31.359 000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 103 So re TB (re/cay) Duncana Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 2.020 2.497 2.543 2.603 2.850 1.000 212 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Ty le re (%) lu Subset for alpha = 05 an n va Duncana ie gh tn to Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 42.200 59.433 66.667 75.567 1.000 1.000 1.000 82.233 1.000 1.000 p Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 nl w d oa Chieu dai re (cm) lu N nf va an Duncana Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig 90 90 90 Subset for alpha = 05 6711 7789 9100 lm ul 90 90 1.0878 1.000 z at nh oi 059 1.2889 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 z ► Dßng PN47 gm @ Test of Homogeneity of Variances df2 an Lu 10 10 m 4 Sig .435 048 co df1 l Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 1.036 3.539 n va ac th si 104 ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Sum of Squares 2633.151 119.267 2752.417 1.371 183 1.555 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df 10 14 10 14 Mean Square 658.288 11.927 F 55.195 Sig .000 343 018 18.722 000 Ty le re (%) lu an Duncana n va gh tn to Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 45.000 55.000 65.567 75.000 1.000 1.000 1.000 81.700 1.000 1.000 p ie Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 w d oa nl So re TB (re/cay) N nf va an lu Duncana Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig z at nh oi lm ul 3 3 Subset for alpha = 05 1.807 1.970 2.400 2.443 2.600 170 114 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 105 Chieu dai re (cm) Duncana Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig Subset for alpha = 05 6656 6933 8800 1.0611 1.1644 635 1.000 078 N 90 90 90 90 90 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 lu an n va gh tn to Phơ lơc 3.12 ¶nh h­ëng cđa thêi gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều p ie cao w Dòng PN46 d oa nl Test of Homogeneity of Variances lu df1 794 nf va an Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Levene Statistic 1.595 10 Sig .250 10 556 ANOVA Sum of Squares 4664.667 238.667 4903.333 137 180 317 df 10 14 10 14 Mean Square 1166.167 23.867 F 48.862 Sig .000 034 018 1.907 186 m co l gm @ Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total z Chieu cao trung binh (cm) df2 z at nh oi lm ul Ty le song (%) an Lu n va ac th si 106 Ty le song (%) Duncana Thoi gian huan luyen (ngay) 16 12 Sig Subset for alpha = 05 45.667 75.667 86.667 92.000 93.333 1.000 1.000 141 N 3 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 lu an n va gh tn to p ie ► Dßng PN47 nl w Test of Homogeneity of Variances oa Levene Statistic 2.000 2.000 d Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) df1 df2 Sig .171 171 10 10 nf va an lu 4 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 4971.600 121.333 5092.933 104 193 297 df 10 14 10 14 z at nh oi Chieu cao trung binh (cm) lm ul Ty le song (%) ANOVA z Mean Square 1242.900 12.133 F 102.437 Sig .000 026 019 1.345 320 m co l gm @ an Lu n va ac th si 107 Ty le cay song (%) Duncana Thoi gian huan luyen (ngay) Khong huan luyen 16 ngay 12 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 44.333 72.333 88.000 92.000 92.000 1.000 1.000 209 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.13 So s¸nh hƯ sè nhân chồi, tỷ lệ chồi hữu hiệu, tỷ lệ chồi rễ tỷ lệ lu an sống vườn ươm dòng PN46, PN47 PN14 va n Test of Homogeneity of Variances He so nhan choi (lan) Ty le choi huu hieu (%) Ty le ra re (%) Ty le song (%) p ie gh tn to Levene Statistic 173 1.256 602 1.180 df1 df2 Sig .845 350 578 370 6 6 oa nl w 2 2 ANOVA d df z at nh oi z Ty le song (%) lm ul Ty le ra re (%) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total nf va Ty le choi huu hieu (%) an lu He so nhan choi (lan) Sum of Squares 1.325 026 1.352 947.816 8.527 956.342 147.202 75.853 223.056 9.147 60.593 69.740 Mean Square 663 004 F 150.207 Sig .000 473.908 1.421 333.477 000 73.601 12.642 5.822 039 4.573 10.099 453 656 m co l gm @ 8 8 an Lu n va ac th si 108 He so nhan choi (lan) Duncana Dong Dong PN47 Dong PN46 Dong PN14 Sig N 3 Subset for alpha = 05 2.7100 3.0033 3.6300 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Ty le choi huu hieu (%) lu Duncana an n va Dong Dong PN47 Dong PN46 Dong PN14 Sig N 3 Subset for alpha = 05 28.300 30.533 51.100 062 1.000 p ie gh tn to Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Dong Dong PN47 Dong PN46 Dong PN14 Sig N d Duncana oa nl w Ty le ra re (%) nf va an lu 3 Subset for alpha = 05 81.700 82.233 90.533 860 1.000 z at nh oi lm ul Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Ty le song (%) N m co l an Lu Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 gm 3 @ Dong Dong PN47 Dong PN46 Dong PN14 Sig z Duncana Subset for alpha = 05 92.000 93.333 94.467 393 n va ac th si