(Luận văn) nghiên cứu tác dụng ức chế vi khuẩn in vitro và ứng dụng điều trị bệnh viêm tử cung bò của nano bạc và dịch chiết cây sài đất wedelia chinensis (osbeck) merr

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM PHẠM TRUNG TRỰC lu an n va NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ỨC CHẾ VI KHUẨN IN VITRO tn to VÀ ỨNG DỤNG ĐIỀU TRỊ BỆNH VIÊM TỬCUNG BÒ ie gh CỦA NANO BẠC VÀ DỊCH CHIẾT CÂY SÀI ĐẤT p WEDELIA CHINENSIS (OSBECK) MERR d oa nl w lu Thú Y 60 64 01 01 ul nf Mã số: va an Chuyên ngành: oi lm Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thanh Hải PGS.TS Nguyễn Văn Thanh z at nh z m co l gm @ an Lu NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP- 2017 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn, tài liệu tham khảo rõ nguồn gốc danh mục tài liệu tham khảo luận văn Hà Nội, ngày 09 tháng năm 2017 lu an Tác giả luận văn n va tn to p ie gh Phạm Trung Trực d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th i si LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, nỗ lực thực thân, nhận giúp đỡ, bảo tận tình thầy giáo Khoa Thú y, Khoa Công nghệ sinh học, Ban quản lý đào tạo - Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới hai thầy hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Văn Thanh, PGS.TS Ngyễn Thanh Hải tận tình giúp đỡ, bảo hướng dẫn trình nghiên cứu hồn thiện luận văn lu Tơi xin chân thành cảm ơn quan tâm ban lãnh đạo, thầy cô giáo môn Ngoại Sản - Khoa thú y, môn Công nghệ sinh học thực vật – Khoa Công an n va nghệ sinh học; tập thể cán bộ, kỹ thuật viên phòng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ Sinh học Thú y tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực đề tài nghiên cứu bè, người tạo điều kiện, động viên, giúp đỡ suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn ie gh tn to Nhân dịp này, xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến gia đình, người thân, bạn p Hà Nội, ngày 09 tháng năm 2017 d oa nl w Tác giả luận văn an lu oi lm ul nf va Phạm Trung Trực z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th ii si MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình ảnh viii lu Trích yếu luận văn ix an Thesis abstract xi va n Phần Mở đầu Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn p ie gh tn to 1.1 Phần Tổng quan tài liệu nl Hiện tượng kháng thuốc vi khuẩn tồn dư kháng sinh sản oa 2.2 Tình hình phát triển chăn ni bò sữa giới việt nam w 2.1 d phẩm chăn nuôi lu Hiện tượng kháng thuốc vi khuẩn 2.2.2 Vấn đề tồn dư kháng sinh sản phẩm chăn nuôi 2.3 Bệnh viêm tử cung bò 10 2.3.1 Khái niệm 10 2.3.2 Một số yếu tố ảnh hưởng đến bệnh viêm tử cung bò sữa 13 2.4 Nano bạc ưng dụng phòng trị bệnh 15 2.5 Tình hình nghiên cứu sử dụng sản phẩm thảo dược giới oi lm ul nf va an 2.2.1 z at nh z việt Nam 18 @ Tình hình nghiên cứu sử dụng sản phẩm thảo dược giới 18 2.5.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng sản phẩm thảo dược Việt Nam 21 2.6 Cây sài đất (Wedelia calendulaceae less.,) 24 2.6.1 Nguồn gốc phân loại 24 2.6.2 Bộ phận dùng 24 2.6.3 Tác dụng sử dụng theo y học cổ truyền 24 m co l gm 2.5.1 an Lu n va ac th iii si 2.6.4 Thành phần hóa học 25 2.6.5 Tổng quan nghiên cứu tác dụng Sài đất 25 Phần Đối tượng, nội dung phương pháp nghiên cứu 29 lu an n va 3.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 29 3.2 Đối tượng nghiên cứu 29 3.2.1 Bò sữa 29 3.2.2 Cao khô dược liệu Sài đất 29 3.2.3 Vi khuẩn nghiên cứu 29 3.2.4 Nano bạc 30 3.2.5 Thiết bị, dụng cụ hóa chất thí nghiệm 30 3.3 Nội dung nghiên cứu 30 3.4 Phương pháp nghiên cứu 31 4.1 p ie gh tn to Phần Kết thảo luận 35 huyện vĩnh tường tỉnh vĩnh phúc 35 Kết phân lập giám định thành phần vi khuẩn dịch tử cung 4.2 Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung bò sữa số địa phương thuộc Kết xác định biến đổi tổng số vi khuẩn hiếu khí có dịch d oa 4.2.1 nl w bò sữa 36 Kết xác định biến đổi thành phần vi khuẩn hiếu khí có va an 4.2.2 lu tử cung bò sữa 36 dịch viêm tử cung bò sữa 38 nf Đánh giá hiệu suất định tính nhóm chất cao khô dịch chiết oi lm ul 4.3 sài đất sử dụng dung môi tách chiết khác 39 Hiệu suất tách chiết cao khô dịch chiết Sài đất sử dụng dung môi tách z at nh 4.3.1 chiết khác 39 4.3.2 Định tính xác định số nhóm hoạt chất hịa tan cao khơ dịch z Đánh giá khả ức chế vi khuẩn in vitro cao dịch chiết dung gm 4.4 @ chiết Sài đất phương pháp hóa học 42 4.4.1 m co l môi khác với vi khuẩn phân lập từ dịch viêm tử cung bò 45 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết sử dụng dung môi an Lu khác vi khuẩn Staphylococcus spp phân lập từ dịch viêm tử cung bò 46 n va ac th iv si 4.4.2 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết sử dụng dung môi khác vi khuẩn Streptococcus spp phân lập từ dịch viêm tử cung bò 47 4.4.3 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết sử dụng dung môi ethanol 70% vi khuẩn phân lập từ dịch viêm tử cung bò pha loãng 50 4.5 Đánh giá khả ức chế vi khuẩn Streptococcus spp Staphylococcus spp nano bạc 52 4.6 Đánh giá tác dụng ức chế vi khuẩn in vitro phối hợp Nano bạc cao lu an dịch chiết 54 va 4.7 Sử dụng cao dịch chiết sai dất kết hợp với nano bạc dể diều trị thử n nghiệm bo bị viêm tử cung 56 5.1 Kết luận 60 5.2 Kiến nghị 61 p ie gh tn to Phần Kết luận kiến nghị 60 d oa nl w Tài liệu tham khảo 62 oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th v si DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DMSO – Dimethyl Sulfoxide lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vi si DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Tỷ lệ bò sữa mắc bệnh viêm tử cung số địa phương thuộc huyện Vĩnh Tường tỉnh Vĩnh Phúc 35 Bảng 4.2 Tổng số vi khuẩn hiếu khí có dịch tử cung bò 37 Bảng 4.3 Tần suất xuất số vi khuẩn hiếu khí dịch tử cung 38 Bảng 4.4 Hiệu suất tách chiết Sài đất loại dung môi khác nhau 40 Bảng 4.5 Kết định tính sơ thành phần hóa học cao khơ dịch chiết lu Sài đất sử dụng dung môi khác 43 an Bảng 4.6 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết Sài đất dung va môi khác với vi khuẩn Staphylococcus spp 46 n tn to Bảng 4.7 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết Sài đất dung môi khác với vi khuẩn Streptococcus spp 48 gh ie Bảng 4.8 Khả ức chế vi khuẩn pha lỗng cao khơ dịch chiết dược liệu p Sài đất 50 vi khuẩn Streptococcus spp Và Staphylococcus spp 53 oa nl w Bảng 4.9 Kết khảo sát hoạt tính diệt khuẩn in vitro dung dịch nano bạc d Bảng 4.10 Khả ức chế vi khuẩn pha loãng cao khô dịch chiết dược liệu an lu Sài đất (sử dụng dung môi ethanol 70%) phối hợp với nano bạc 55 oi lm ul nf va Bảng 4.11 Kết thử nghiệm điều trị bò mắc bệnh viêm tử cung .57 z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vii si DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 4.1 Biểu đồ tỷ lệ bò sữa mắc bệnh viêm tử cung số địa phương thuộc huyện Vĩnh Tường tỉnh Vĩnh Phúc 35 Hình 4.2 Màu sắc dịch chiết cao dịch chiết sài đất sử dụng dung môi khác 40 Hình 4.3 Hiệu suất tách chiết Sài đất sử dụng loại dung môi khác 42 Hình 4.4 Phản ứng định tính xác định nhóm hoạt chất có cao dịch lu chiết Sài đất 45 an Hình 4.5 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết sử dụng dung môi va khác với vi khuẩn Staphylococcus spp 47 n tn to Hình 4.6 Khả ức chế in vitro cao khô dịch chiết sử dụng dung môi khác với vi khuẩn Streptococcus spp 49 gh ie Hình 4.7 Tác dụng ức chế vi khuẩn in vitro Nano bạc pha loãng 53 p Hình 4.8 So sánh khả ức chế vi khuẩn in vitro cao dịch chiết có w không bổ sung nano bạc 55 d oa nl Hình 4.9 Kết điều trị thử nghiệm bò mắc bệnh viêm tử cung 58 oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th viii si TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Phạm Trung Trực Tên luận văn: “Nghiên cứu tác dụng ức chế vi khuẩn in vitro ứng dụng điều trị bệnh viêm tử cung bò nano bạc dịch chiết Sài đất Wedelia Chinensis (Osbeck) Merr” Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Tên sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: lu an Đánh giá thực trạng tỷ lệ bò mắc bệnh viêm tử cung địa bàn số địa va phương thuộc huyện Vĩnh Tường, Tỉnh Vĩnh Phúc n Phân lập đánh giá tỷ lệ lồi vi khuẩn có dịch tử cung bị dụng dung mơi khác nano bạc vi khuẩn Staphylococus spp gh tn to Đánh giá khả ức chế vi khuẩn in vitro cao khô dịch chiết Sài đất sử p ie Streptococus spp phân lập từ dịch viêm tử cung bò Thử nghiệm hiệu điều trị bệnh viêm tử cung bị cao khơ dịch chiết Sài nl w đất kết hợp với nano bạc oa Phương pháp: d - Điều tra tỷ lệ bò mắc bệnh viêm tử cung: Tiến hành kiểm tra tỷ lệ bò sữa bị viêm lu an tử cung 03 xã thuộc huyện Vĩnh Tường tỉnh Vĩnh Phúc nf va - Lấy mẫu dịch viêm tử cung bò: Tiến hành lấy mẫu dịch viêm tử cung bò oi lm Vĩnh Phúc ul đàn bị sữa ni nơng hộ thuộc 03 xã thuộc huyện Vĩnh Tường tỉnh - Xác định vi khuẩn gây bệnh viêm tử cung bò phương pháp phân lập vi z at nh khuẩn: Vi khuẩn gây bệnh viêm tử cung phân lập theo phương pháp thường qui - Phương pháp điều trị thử nghiệm: Sử dụng phác đồ điều trị, thụt rửa tử cung z dung dịch Rivanol 0,1% @ gm - Phương pháp xử lý số liệu: Các thí nghiệm bố trí ngẫu nhiên lặp l lại lần Số liệu thu xử lý thống kê sinh học phần mềm Excel 2007 m co Kết chính: Tỷ lệ bị mắc bệnh viêm tử cung 03 xã thuộc huyện Vĩnh Tường, Vĩnh Phúc có an Lu chênh lệch cao biến đổi từ 18,26% đến 28,33% Bò bị viêm tử cung sau đẻ, chiếm tỉ lệ bình quân 23,44% n va ac th ix si 4.7 SỬ DỤNG CAO DỊCH CHIẾT SÀI DẤT KẾT HỢP VỚI NANO BẠC ĐỂ ĐIỀU TRỊ THỬ NGHIỆM BÒ BỊ VIÊM TỬ CUNG Để kiểm chứng hiệu thực tế dịch chiết Sài đất dung môi ethanol 70% tiến hành điều trị thử nghiệm bò bị viêm tử cung Căn hiệu suất chiết xuất Sài đất dung môi ethanol 70% dựa theo phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược liệu (Viện Dược liệu, 2006), lựa chọn liều dùng điều trị thử nghiệm cho bị 10 mg/kg thể trọng Chúng tơi lựa chọn phác đồ điều trị viêm tử cung thường bác sỹ lu an thú y sử dụng làm đối chứng va Chúng tiến hành thử nghiệm theo 03 phác đồ sau n * Phác đồ 1: Thụt rửa tử cung dung dịch Rivanol 0,1% ngày lần, Norfloxacin 5mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử cung; kết hợp gh tn to sau thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ngoài, dùng p ie điều trị tồn thân ADE, B.complex Liệu trình điều trị khơng ngày w * Phác đồ 2: Thụt rửa tử cung dung dịch Rivanol 0,1% ngày lần, nl sau thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ngoài, dùng cao d oa khô dịch chiết Sài đất 10 mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bơm vào tử va an ngày lu cung; kết hợp điều trị toàn thân ADE, B.complex Liệu trình điều trị khơng nf * Phác đồ 3: Thụt rửa tử cung dung dịch Rivanol 0,1% ngày lần, oi lm ul sau thụt rửa kích thích cho dung dịch thụt rửa chảy hết ngồi, dùng cao khơ dịch chiết Sài đất 10 mg/kg thể trọng pha với 100ml nước cất bổ sung nano bạc đến nồng độ 25 ppm bơm vào tử cung; kết hợp điều trị toàn thân z at nh ADE, B.complex Liệu trình điều trị không ngày Thử nghiệm thực 36 bò mắc bệnh viêm nội mạc tử z @ cung, kết trình bày bảng 4.11 biểu diễn hình 4.9 gm Qua bảng 4.11 chúng tơi nhận thấy, tổng số 36 bị định điều trị có m co l 34 bị khỏi bệnh Điều trị bò theo phác đồ II có bị khỏi bệnh, đạt tỷ lệ thấp 88,89%; phác đồ III điều trị cho 12 bò có 11 khỏi bệnh đạt 91,67% Ở phác đồ điều trị 15 bị 15 bị khỏi bệnh Tuy nhiên, thời gian điều trị an Lu trung bình phác đồ I ngắn nhất, có 3,93 ngày, phác đồ III 4,18 n va ngày phác đồ II có thời gian điều trị trung bình dài 4,38 ngày ac th 56 si lu an n va p ie gh tn to Bảng 4.11 Kết thử nghiệm điều trị bò mắc bệnh viêm tử cung Số bòthử ngày d nghiệm Tổng hợp Tổng số Tỷ lệ khỏi (%) Thời gian Số Tỷ lệ Số Tỷ lệ Số Tỷ lệ khỏi (%) khỏi (%) khỏi (%) 26.67 53.33 20.00 15 100.00 3.93 55.56 33.33 88.89 4.38 58.33 25.00 11 91.67 4.18 va an lu đồ oa nl w Phác Thời gian điều trị 15 II III 12 (ngày) lm ul nf I điều trị TB 0.00 oi z at nh 8.33 z m o l.c gm @ an Lu n va 57 ac th si lu an n va p ie gh tn to Hình 4.9 Kết điều trị thử nghiệm bò mắc bệnh viêm tử cung w oa nl Ở phác đồ I, sau ngày điều trị với kháng sinh thuốc bổ trợ sức có d 4/15 bị khỏi bệnh đạt 26,67% Tỷ lệ điều trị khỏi cao phác đồ đạt an lu ngày thứ với 8/15 bò khỏi bệnh, đạt 53,33% Số bò khỏi bệnh ngày thứ 3/15 bò đạt tỷ lệ 20,00% Số ngày điều trị trung bình ghi nhận 3,93 ngày va nf Ở phác đồ II sử dụng cao khô dịch chiết Sài đất thuốc bổ trợ sức, oi lm ul ngày điều trị thứ không ghi nhận ca khỏi bệnh Tỷ lệ điều trị khỏi cao phác đồ đạt ngày thứ với 5/9 bò khỏi bệnh, đạt 55,56% Số bò khỏi z at nh bệnh ngày thứ bò đạt tỷ lệ 33,33% Số ngày điều trị trung bình ghi nhận phác đồ 4,38 ngày Tuy nhiên theo phác đồ điều trị cịn 1/9 bị khơng khỏi sau điều trị ngày z @ Phác đồ III điều trị sử dụng cao khô dịch chiết Sài đất có bổ sung nano gm bạc kết hợp thuốc bổ trợ sức ngày điều trị thứ có 1/12 bò khỏi bệnh đạt l 8,33% Tỷ lệ điều trị khỏi cao phác đồ đạt ngày thứ với 7/12 m co bò khỏi bệnh, đạt 58,33% Số bò khỏi bệnh ngày thứ 3/12 bò đạt tỷ lệ 25,00% Số ngày điều trị trung bình ghi nhận phác đồ 4,12 ngày an Lu Tuy nhiên theo phác đồ điều trị cịn 1/12 bị khơng khỏi sau điều trị n va ngày ac th 58 si Theo chúng tơi có kết hoạt chất có cao dịch chiết Sài đất gây tác dụng ức chế tiêu diệt lên vi khuẩn chậm, từ từ thuốc kháng sinh nên phác đồ I ghi nhận số ca khỏi bệnh sớm điều trị phác đồ II III Khi so sánh kết điều trị phác đồ II phác đồ III nhận thấy nano có tác dụng tăng cường khả diệt khuẩn cao khô dịch chiết Sài đất, thời gian điều trị trung bình ngắn Kết phù hợp với kết nghiên cứu Nguyễn Văn Thanh Nguyễn Thanh Hải (2014a), khẳng định khả điều trị bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ sử dụng cao khơ mị hoa trắng Tác dụng cao lu khơ dịch chiết thường có tác dụng điều trị chậm so với kháng sinh đối chứng an va Tương tự nghiên cứu Nguyễn Văn Thanh Nguyễn n Thanh Hải (2014b) sử dụng cao khô dịch chiết Huyền diệp điều trị Huyền diệp có khả điều trị bệnh viêm ruột tiêu chảy chó, tác dụng gh tn to bệnh viêm ruột tiêu chảy cho chó có kết luận cao khơ dịch chiết p ie chậm kháng sinh gentamycin d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 59 si PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Từ thí nghiệm kết nghiên cứu rút số kết luận sau: Tỷ lệ bò mắc bệnh viêm tử cung 03 xã thuộc huyện Vĩnh Tường, Vĩnh Phúc có chênh lệch cao dao động từ 18,26% đến 28,33% Bò bị viêm tử cung sau đẻ, chiếm tỉ lệ bình quân 23,44% lu Tổng số vi khuẩn hiếu khí có dịch viêm tử cung tăng lên gấp 120,34 lần so với dịch tử cung bị sữa khơng bị viêm (7,77±2,71)x10 so (6,46±2,95)x106CFU/ml an n va p ie gh tn to Vi khuẩn Staphylococcus Streptococcus xuất 100% mẫu dịch viêm tử cung bò Trong dịch tử cung bị khơng bị viêm, tỷ lệ mẫu phát thấy Staphylococcus Streptococcus 22,22% 11,11% Hiệu suất tách chiết dược liệu Sài đất sử dụng dung môi khác giao động lớn biến đổi từ 4,2 % (dung môi nước) đến 17,2% (dung môi ethanol 70%) w d oa nl Tách chiết dược liệu Sài đất sử dụng dung môi ethanol 70% thu cao dịch chiết có chứa nhóm hoạt chất sau Alkaloid, Flavonoid, Phytosterol, Polyphenol, đường khử, Saponin, Tanin, chất béo chất nhầy an lu oi lm ul nf va Trong dung mơi sử dụng cao dịch chiết thu từ dung mơi ethanol 70% có hoạt tính ức chế vi khuẩn tốt hai chủng vi khuẩn phân lập từ dịch viêm tử cung Nồng độ ức chế tối thiểu dịch chiết dược liệu Sài đất sử dụng dung môi ethanol 70% vi khuẩn Streptococcus spp 0,39 mg/ml, với vi khuẩn Staphylococcus spp 0,20 mg/ml z at nh z Nano bạc có khả ức chế in vitro 02 chủng vi khuẩn nghiên cứu Nồng độ nano bạc nhỏ quan sát thấy sai so với đối chứng khả ức chế vi khuẩn in vitro 50 ppm @ l gm Bổ sung nano bạc vào cao dịch chiết dược liệu Sài đất nồng độ khác làm tăng khả ức chế vi khuẩn in vitro cao dịch chiết m co Có thể sử dụng cao dịch chiết Sài đất kết hợp với nano bạc điều trị bệnh viêm tử cung bò cho tỷ lệ khỏi bệnh đạt 91,67% thời gian điều trị trung bình 4,18 ngày Tuy nhiên kết thấp so với dùng thuốc kháng sinh an Lu n va ac th 60 si 5.2 KIẾN NGHỊ Đánh giá hoạt tính ức chế vi khuẩn in vitro cao dược liệu Sài đất tách chiết nhiều phương pháp khác để lựa chọn phương pháp tách chiết đem lại hiệu suất chất lượng cao Các nghiên cứu sau cần tiến hành phân tích sâu thành phần hóa học dịch chiết đánh giá vai trò hoạt tính kháng khuẩn thành phần hóa học Tiến hành điều trị bệnh viêm tử cung bò sử dụng dịch chiết Sài đất lu nano bạc quy mơ thử nghiệm, từ đưa khuyến cáo góp phần điều chế chế an phẩm ứng dụng phòng trị bệnh viêm tử cung bò n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 61 si TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt: Báo Người lao động (2014) Thịt heo tồn dư kháng sinh vượt ngưỡng Bùi Thị Tho (1996) Nghiên cứu tác dụng số thuốc hóa học trị liệu phytocid E.coli phân lập từ bệnh lợn phân trắng, Đại học Nông nghiệp Hà Nội Bùi Thị Tho (2001) "Sự kháng thuốc E coli phytoncid tỏi, hẹ lu mật động vật so với số kháng sinh." Tạp chí Dược liệu, (5) tr 147-152 an Bùi Thị Tho (2003) Thuốc kháng sinh nguyên tắc sử dụng chăn nuôi, va n NXB Hà Nội Bùi Thị Tho (2004) "Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian điều kiện bảo quản đến tn to Bùi Thị Tho Nguyễn Thành Trung (2010) Khảo sát tác dụng xuân hoa (Pseuderanthemum palatiferum) điều trị bệnh tiêu chảy lợn con, Chi ie p gh tác dụng dược lý dịch chiết củ Bách Bộ." Báo KHKT Thú y, 11 (1) tr 52-55 Bùi Thị Tho Nguyễn Thị Thanh Hà (2009a) Giáo trình dược liệu thú y, NXB oa nl w hội Thú y – Đại học Nông nghiệp Hà Nội d Nông nghiệp lu Bùi Thị Tho Nguyễn Thị Thanh Hà (2009b) "Sử dụng Bồ công anh va an (LACTUCA INDICA L.) chống tồn dư kháng sinh ENROFLOXACIN điều nf oi lm ul trị tiêu chảy gà." Tạp chí Khoa học Phát triển, (1) tr 41-47 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên Bùi Bình Minh, (1999) "Kết phân lập z at nh vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hóa học chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phòng trị." Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y (1) tr 47-51 z Đặng Đình Tín (1985) Giáo trình sản khoa bệnh sản khoa thú y, Nxb gm @ 10 ĐHNNI- Hà Nội l 11 Đinh Văn Cải Vương Ngọc Long (2003) "Điều tra trạng sử dụng tinh m co bò đực giống sữa phía Nam." Đỗ Huy Bích (2006) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, NXB Khoa an Lu 12 học kỹ thuật n va ac th 62 si 13 Đỗ Ngọc Thúy (2002) "Tính kháng kháng sinh vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tỉnh phía Bắc Việt Nam." Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (9) tr 21-27 14 Đỗ Tất Lợi (1991) Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y Học 15 Hoàng Thị Tuyết Nhung (2012) Nghiên cứu chiết xuất tinh chế conessin, kaempferol, nuciferin từ dược liệu làm chất chuẩn đối chiếu kiểm nghiệm thuố, trường Đại học Dược Hà Nội 16 Khúc Huy Hoàng (2015) Nghiên cứu sử dụng dịch triết huyền diệp điều trị lu thử nghiệm bệnh viêm vú bò khu vực Gia Lâm – Hà Nội, Đại học Nông an nghiệp Hà Nội Lê Thị Ngọc Diệp (1999) Tác dụng dược lý số ứng dụng dược liệu n va 17 18 Lê Trần Tiến (2006) Nghiên cứu biến đổi số tiêu lâm sàng, phi lâm gh tn to actiso chăn nuôi thú y, NXB Đại học Nông nghiệp Hà Nội p ie sàng, vi khuẩn học thử nghiệm điều trị bệnh viêm tử cung, Trường đại học Nguyễn Bá Phước (2014) Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn in vitro dịch chiết w 19 Nông nghiệp Hà Nội oa nl Huyền diệp (Polyalthia longifolia var.pendula Hort.) vi khuẩn E coli, d Salmonella spp phân lập từ phân chó tiêu chảy thử nghiệm điều trị, Học viện lu Nguyễn Hồng Loan (2010) "Sử dụng chất chiết từ hoàng kỳ (Astragalus nf va 20 an Nông nghiệp Việt Nam 21 oi lm cá tra." ul membranaceus) để phòng bệnh mủ gan vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Nguyễn Hữu Ninh Bạch Đăng Phong (1994) Giáo trình bệnh sinh sản gia z at nh súc,, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 22 Nguyễn Mạnh Hiển Bùi Thị Tho (2006) "Tác dụng chế phẩm dạng mỡ từ z Nguyễn Ngọc Sương (1998) Nghiên cứu tách chiết cô lập Sesquiterpen gm 23 @ hạt củ đậu trị bệnh ghẻ chú." Báo KHKT Thú y, 13 (4) tr 60-63 l Lacton từ Sài đất Wedelia Calendulacea less, họ Asteracea, NXB Đại học Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên Trần Thị Lan Hương, (2001) Vi sinh vật Thú Y, NXB Nông nghiệp Hà Nội an Lu 24 m co Tự nhiên n va ac th 63 si 25 Nguyễn Thanh Hải Bùi Thị Tho (2013) "Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn in vitro dịch chiết tỏi (Allium sativum l.) E.coli gây bệnh E.coli kháng Ampicillin, Kanamycin." Tạp chí Khoa học Phát triển, 11 (6).tr 804-808 26 Nguyễn Thanh Tâm, Nguyễn Gia Hoàng Diễm Nguyễn Văn Bá (2012) "Tác dụng kháng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri dịch chiết số thảo dược." Thương mại thủy sản 152: 1-7 27 Nguyễn Thượng Dong (2006) Nghiên cứu phát triển dược liệu đông dược Việt Nam, Nxb Khoa học kỹ thuật 28 Nguyễn Trọng Thiện (2009) Nghiên cứu xác định số tiêu sinh sản, bệnh lu an quan sinh dục thử nghiệm điều trị bệnh viêm tử cung bò sinh sản n va nuôi huyện Lập Thạch, tỉnh Vĩnh Phúc, Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Văn Thanh (1999) Một số tiêu sinh sản bệnh đường sinh dục thường gặp đàn trâu tỉnh phía bắc Việt Nam Luận án Tiến sỹ Nơng nghiệp, gh tn to 29 Đại học Nông nghiệp Hà Nội ie p 30 Nguyễn Văn Thanh, Trần Tiến Dũng Dương Đình Long (2002) Giáo trình Nguyễn Văn Thanh Lê Trần Tiến (2007) "Khảo sát tỷ lệ mắc thử nghiệm oa nl 31 w sinh sản gia súc, Nxb nông nghiệp d điều trị bệnh viêm tử cung đàn bị sữa ni số địa phương ngoại thành (1) tr 50 - 54 Nguyễn Văn Thanh Nguyễn Thanh Hải (2014a) "Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn ul nf 32 va an lu Hà Nội Bắc Ninh." Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Hội Thú y Việt Nam, oi lm in vitro dịch chiết Mò hoa trắng (Clerodendron fragrans Vent.) vi khuẩn E coli, Salmonella spp phân lập từ phân lợn theo mẹ mắc bệnh viêm ruột tiêu z at nh chảy thử nghiệm điều tr." Tạp chí Khoa học Phát triển, 12 )5) tr 683-689 33 Nguyễn Văn Thanh Nguyễn Thanh Hải (2014b) "Tác động kháng khuẩn in z vitro dịch chiết Huyền diệp (Polyalthia longifolia var.pendula) @ gm vi khuẩn E coli Salmonella phân lập từ phân chó bị tiêu chảy điều trị thử Nguyễn Văn Thanh Nguyễn Thanh Hải (2016) "Nghiên cứu ảnh hưởng m co 34 l nghiệm." Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y,19 (8) tr 23-30 dung môi đến hiệu suất chiết tác dụng diệt khuẩn in vitro cao khô dịch an Lu chiết đơn đỏ (Excoecaria cochinchinensis Lour.) với vi khuẩn n va ac th 64 si Staphylococcus spp Streptococcus spp phân lập từ dịch viêm tử cung bị." TC Nơng nghiệp Phát triển nông thôn – Kỳ – Tháng 3/2016 35 Nguyễn Văn Thưởng (2000) Kỹ thuật nuôi bị sữa-bị thịt gia đình, NXB Nơng nghiệp 36 Nguyễn Văn Tý (2002) Nghiên cứu tác dụng dược lý số dược liệu Việt Nam: Thuốc lào, bách bộ, hạt na ngoại ký sinh trùng thú y Ứng dụng điều trị thử nghiệm động vật nuôi, Đại học Nông nghiệp Hà Nội 37 Phạm Khắc Hiếu Lê Thị Ngọc Diệp (1997) Dược lý học thú Nxb Nông nghiệp Hà Nội lu an 38 Phạm Thanh Xuân (2014) Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn in vitro dịch chiết n va Mò hoa trắng (Clerodendrum Fragrans Vent.) vi khuẩn E coli to Salmonella spp phân lập từ phân lợn theo mẹ bị tiêu chảy thử nghiệm Phạm Thị Dung (2015) Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn in vitro ứng dụng điều trị bệnh viêm tử cung chó dịch chiết Đơn đỏ, Nxb Đại học p 39 ie gh tn điều tr, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Nông nghiệp Hà Nội w Phạm Trung Kiên (2012) Nghiên cứu thực trạng bệnh viêm tử cung đàn bị oa nl 40 d sữa ni khu vực đồng sông Hồng thử nghiệm biện pháp phịng, trị, Trần Danh Thế, Vũ Văn Độ Ngơ Kế Sương (2010) "Bước đầu trồng thử nghiệm va 41 an lu Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội ul nf tách chiết hoạt chất miraculin Thần kỳ (Synsepalum dulcificum oi lm Daniell)." Tạp chí Phát triển Khoa học Công nghệ, 13 (1) tr 48 – 53 Trần Quang Hùng (1995) Thuốc bảo vệ thực vật, Nhà xuất Nông nghiệp 43 Viện Dược liệu (2006) Nghiên cứu thuốc từ thảo mộc, NXB Khoa học kỹ thuật @ Ahmed, F., Saxena, M., and Maini, S (2014) "A herbal intrauterine infusion gm 44 z Tài liệu tiếng Anh: z at nh 42 l “Arasksha liquid” for treatment of reproductive disorders in cows." IJPRBS 45 m co 3(2): 42-48 Babu, M M (1999) Developing bioencapsulated ayurvedic product for an Lu maturation and quality larval production in Penaeus monodon MS University, Tirunelveli n va ac th 65 si 46 Bhat, F A., Bhattacharyya, H K., & Hussain, S A (2014) White side test: A simple and rapid test for evaluation of nonspecific bacterial genital infections of repeat breeding cattle In Veterinary research forum: an international quarterly journal 47 Black, W G (1983) "Inflammatory response of the bovine endometrium." Am Jour Vet Res 14: 179 48 Centers for Disease Control and Prevention (2001) Outbreaks of multidrugresistant Salmonella Typhimurium associated with veterinary facilities Morbidity and Mortality Weekly Report 50: 701–704 49 Chanda, S., Rakholiya, K., & Parekh, J (2013) "Indian medicinal herb: lu an Antimicrobial efficacy of Mesua ferrea L seed extracted in different solvents against va infection causing pathogenic strains." Journal of Acute Disease 2(4): 277-281 n 50 Citarasu, T., Immanuel, G., & Marian, M P (1999) "Effect of feeding Artemia to tn enriched with stresstol and cod liver oil on growth and stress resistance in the Indian gh white shrimp Penaeus indicus postlarvae." Asian Fisheries Science 21: 65-76 p ie 51 Cui, D., Li, J., Wang, X., Xie, J., Zhang, K., Wang, X., and Yang, Z (2014) "Efficacy of herbal tincture as treatment option for retained placenta in dairy Dawson, F L M (1950) "The microbial content and morphological character of d oa 52 nl w cows." Animal reproduction science 145(1): 23-28 2): 150-156 va 53 an lu the normal bovine uterus and oviduct." The Journal of Agricultural Science 40(1Dolezel, R., Palenik, T., Cech, S., Kohoutova, L., & Vyskocil, M (2010) nf oi lm ul "Bacterial contamination of the uterus in cows with various clinical types of metritis and endometritis and use of hydrogen peroxide for intrauterine 54 z at nh treatment." Vet Med.(Praha) 55: 504-511 Du, J L., Qin, J H., Chu, J S., & Xu, L N (2010) "Effects of Yimu Shenghuasan preparation on the cytochrome P450 in endometrial cells and immune function of z Dubuc, J., Duffield, T F., Leslie, K E., Walton, J S., & LeBlanc, S J (2011) gm 55 @ dairy cows." Agricultural Sciences in China 9(10): 1497-1503 cows." Journal of dairy science 94(3): 1339-1346 Đuričić, D., Lipar, M., & Samardžija, M (2014) "Ozone treatment of metritis an Lu 56 m co l "Effects of postpartum uterine diseases on milk production and culling in dairy and endometritis in Holstein cows." Veterinarski arhiv 84(2): 103-110 n va ac th 66 si 57 Edahiro, T., Hamaguchi, M & Kusuda, R (1991) "Suppressive effect of glycyrrhizin against streptococcal infection promoted by feeding oxidized lipids to yellowtail Seriola quinqueradiata." Aquaculture Science 39(1): 21-27 58 Esparza-Borges H and Ortiz-Marquez A (1996) Therapeutic efficacy of plant extracts in the treatment of bovine endometritis In: International Symposium on Medicinal and Aromatic Plants 59 Faizi, S., Mughal, N R., Khan, R A., Khan, S A., Ahmad, A., Bibi, N., & Ahmed, S A (2003) "Evaluation of the antimicrobial property of Polyalthia longifolia var pendula: isolation of a lactone as the active antibacterial agent lu from the ethanol extract of the stem." Phytotherapy Research 17(10): 1177-1181 an 60 Gilbert, R O., Shin, S T., Guard, C L., Erb, H N., & Frajblat, M (2005) va n "Prevalence of endometritis and its effects on reproductive performance of dairy 61 Hai, N T and Atsushi, M (2014) "Evaluation acaricidal efficacy of Camellia gh tn to cows." Theriogenology 64(9): 1879-1888 p ie sasanqua thumb seed oil against the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and the dog tick Rhipicephalus sanguineus." International Journal of Hsieh, T J., Wang, J C., Hu, C Y., Li, C T., Kuo, C M., & Hsieh, S L (2008) oa nl 62 w Medicinal Plant Research 3(3): 284-289 d "Effects of Rutin from Toona sinensis on the immune and physiological an lu responses of white shrimp (Litopenaeus vannamei) under Vibrio alginolyticus Huang, M., Parker, M J., & Stubbe, J (2014) "Choosing the right metal: case nf 63 va challenge." Fish & shellfish immunology 25(5): 581-588 289(41): 28104-28111 Immanuel, G., Vincybai, V C., Sivaram, V., Palavesam, A., & Marian, M P z at nh 64 oi lm ul studies of class I ribonucleotide reductases." Journal of Biological Chemistry (2004) "Effect of butanolic extracts from terrestrial herbs and seaweeds on the z survival, growth and pathogen (Vibrio parahaemolyticus) load on shrimp Penaeus 65 gm @ indicus juvenile." Aquaculture 236(1): 53-65 Kopecky, K E., Larsen, B and Merkal, R S (1977) Am J Vet Res 28: tr m co 66 l 1043 – 1045 Lloyd, D H., Lamport, A I , and Feeney, C (1996) "Sensitivity to antibiotics the UK, 1980–96." Veterinary Dermatology 7(3): 171-175 an Lu amongst cutaneous and mucosal isolates of canine pathogenic staphylococci in n va ac th 67 si 67 Marquez, A O., Gonzalez, I M., Borges, H E., and Carro-Juarez, M (2007) "Effects of the intra-uterine administration of Montanoa tomentosa extracts upon Postpartum Metritis in the dairy cow." Cameroon Journal of Experimental Biology 3(1): 46-49 68 Minomol, M (2005) Culture of Gold fish Carassius auratus using medicinal plants having immunostimulant characteristics M.Phil Dissertation, MS University, India 69 Mohammadzadeh, F., Dolatian, M., Jorjani, M., Majd, H A., & Borumandnia, N (2014) "Comparing the therapeutic effects of garlic tablet and oral metronidazole lu on bacterial vaginosis: a randomized controlled clinical tria." Iranian Red an Crescent Medical Journal 16(7): 1-7 va n 70 Mottakin, A K M., Chowdhury, R., Haider, M S., Rahman, K M., Hasan, C tn to M., & Rashid, M A (2004) "Cytotoxicity and antibacterial activity of extractives from Wedelia calendulacea." Fitoterapia 75(3): 355-359 Dairy Cattle Reproduction Council ie Overton, M and Fetrow, J (2008) Economics of postpartum uterine health Proc p gh 71 Padmapriya, N and Poonguzhali, T V (2015) "Antibacterial and Antioxidant w 72 oa nl Potential of the Acetone Extract of the Fruit of Phyllanthus acidus L." d International Journal of Current Research 17: E64-E72 Prakash, T., Kotresha, D., & Nedendla, R R (2011) "Neuroprotective activity of an lu 73 va Wedelia calendulacea on cerebral ischemia/reperfusion induced oxidative stress Prescott, J F., Hanna, W B., Reid-Smith, R., & Drost, K (2002) "Antimicrobial oi lm ul 74 nf in rats." Indian journal of pharmacology 43(6): 676 drug use and resistance in dogs." The Canadian Veterinary Journal 43(2): 107 Pulfer, K W and Riese, R L (1991) "Treatment of postpartum metritis in dairy z at nh 75 cows." Iowa State University Veterinarian 53(1): Roberts, S J (1980) "Dysmenorrhea." Nurse Practitioner 5: 9-10 77 Samad, A., Ali, C S., Ahmad, A., & Ahmad, N (1987) "Clinical incidence of z 76 gm @ reproductive disorders in the buffalo." Pakistan Veterinary Journal 1: 16-19 Sanchez, S., Stevenson, M M., Hudson, C R., Maier, M., Buffington, T., Dam, m co l 78 Q., & Maurer, J J (2002) "Characterization of multidrug-resistant Escherichia an Lu coli isolates associated with nosocomial infections in dogs." Journal of clinical microbiology 40(10): 3586-3595 n va ac th 68 si 79 Sarkar, S., Pressey, R L., Faith, D P., Margules, C R., Fuller, T., Stoms, D M., and Andelman, S (2006) "Biodiversity conservation planning tools: present status and challenges for the future." Annu Rev Environ Resour 31: 123-159 80 Settergreen, I (1986) Investigation on infetious infertility diseases in bovine, especcialy vibriosis and trichomoniasis in Indian Technical Management A.I Programmes, Swedish University of Agricutural Sciences Uppsala Sweden 81 Shang, X., Pan, H., Wang, X., He, H., & Li, M (2014) "Leonurus japonicus Houtt.: ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of an important lu traditional Chinese medicine." Journal of ethnopharmacology 152(1): 14-32 an 82 Shangliang, T (1990) "The antibacterial and antiviral activity of herbal extracts va n for fish pathogens." J Ocean Univ Qingdao 2: 53–60 Sheldon, I M and Dobson, H (2004) "Postpartum uterine health in cattle." tn to 83 gh Animal reproduction science 82: 295-306 Suresh, V., Kumar, R M., Suresh, A., Kumar, N S., Arunachalam, G., & p ie 84 Umasankar, K (2010) "CNS activity of ethanol extract of Wedelia chinensis in Thosar, N., Basak, S., Bahadure, R N., & Rajurkar, M (2013) "Antimicrobial d oa 85 nl w experimental animals." Int J Pharma Sci Nanotechnol 3: 881-886 an lu efficacy of five essential oils against oral pathogens: An in vitro study." European journal of dentistry 7(5): 71-77 va Van Vuuren, S F and Naidoo, D (2010) "An antimicrobial investigation of ul nf 86 oi lm plants used traditionally in southern Africa to treat sexually transmitted infections." Journal of ethnopharmacology 130(3): 552-558 Venkatramalingam, K., Christopher, J G., & Citarasu, T (2007) "Zingiber z at nh 87 officinalis an herbal appetizer in the tiger shrimp Penaeus monodon (Fabricius) z larviculture." Aquaculture Nutrition 13(6): 439-443 @ Wall, P G., Threllfall, E J., Ward, L R., & Rowe, B (1996) "Multiresistant gm 88 l Salmonella typhimurium DT104 in cats: a public health risk." The Lancet 89 m co 348(9025): 471 WHO (2014) Antimicrobial resistance: global report on surveillance, World an Lu Health Organization n va ac th 69 si 90 Wissing, A., Nicolet, J., & Boerlin, P (2001) "The current antimicrobial resistance situation in Swiss veterinary medicine." Schweizer Archiv fur Tierheilkunde 143(10): 503-510 91 Yogeeswaran, A (2007) Protection of Penaeus monodon against white spot syndrome virus by inactivated vaccine and herbal immunostimulants M.Phil Dissertation submitted to Manonmaniam Sundaranar University, Tirunalveli 92 Zhang, Y., Cao, H., Yu, Z., Peng, H Y., & Zhang, C J (2013) "Curcumin inhibits endometriosis endometrial cells by reducing estradiol production." Iranian journal of reproductive medicine 11(5): 415-422 lu an 93 Zhao, S., Qaiyumi, S., Friedman, S., Singh, R., Foley, S L., White, D G., and va Baron, E J (2003) "Characterization of Salmonella enterica serotype Newport n isolated from humans and food animals." Journal of clinical microbiology 41(12): to p ie gh tn 5366-5371 d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 70 si