(Luận văn) nghiên cứu một số đặc tính của kit catt chế từ kháng nguyên tái tổ hợp trong chẩn đoán bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM  - NGUYỄN THỊ HƯƠNG lu an va Tên đề tài: n NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA KIT CATT CHẾ TỪ to gh tn KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP TRONG CHẨN ĐỐN BỆNH TIÊN MAO TRÙNG Ở TRÂU, BỊ p ie oa nl w d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC oi lm ul nf va an lu : Chính quy z at nh Hệ đào tạo Chuyên ngành : Thú y : Chăn ni - Thú y Khóa học : 2010 - 2014 z Khoa m co l gm @ an Lu Thái Nguyên – 2014 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM -  - NGUYỄN THỊ HƯƠNG lu an Tên đề tài: va n NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA KIT CATT CHẾ TỪ tn to KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP TRONG CHẨN ĐOÁN p ie gh BỆNH TIÊN MAO TRÙNG Ở TRÂU, BÒ w d oa nl KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC nf va an lu oi lm ul Hệ đào tạo Chuyên ngành Khóa học : Thú y z at nh Khoa : Chính quy : Chăn nuôi - Thú y : 2010 - 2014 z m co l gm @ Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Văn Quang an Lu Thái Nguyên – 2014 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập rèn luyện trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên thời gian thực tập phịng thí nghiệm môn Dược lý – VSATTP - khoa Chăn nuôi Thú y Em nhận giúp đỡ thầy cô giáo Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa tồn thể thầy, giáo khoa tận tình giúp đỡ em suốt thời gian lu qua để em hồn thành đầy đủ chương trình học hồn thành an khóa luận tốt nghiệp va n Qua em xin gửi lời cảm ơn tới Ban chủ nhiệm khoa Chăn nuôi thú y sâu sắc tới thầy giáo TS Nguyễn Văn Quang thầy tận tình bảo, hướng ie gh tn to – trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, đặc biệt, em xin bày tỏ lòng biết ơn p dẫn giúp em hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời biết ơn tới cô giáo GS Nguyễn Thị Kim Lan, Ths w d gian qua oa nl Phạm Thị Trang, bảo tạo điều kiện giúp đỡ cho em suốt thời lu va an Cuối cùng, em xin chúc thầy cô giáo trường thầy cô nf giáo khoa Chăn nuôi thú y mạnh khỏe, hạnh phúc thành công oi lm ul Em xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, ngày 05 tháng 12 năm 2014 z at nh Sinh viên z l gm @ Nguyễn Thị Hương m co an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1: Kết xác định độ nhạy độ đặc hiệu KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 39 Bảng 4.2: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 40 Bảng 4.3: Kết xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT bảo lu quản 00C 42 an Bảng 4.4: Kết xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT bảo n va quản nhiệt độ phòng (28 – 340C) 42 tn to Bảng 4.5: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT CATT bảo quản 00C 43 gh p ie Bảng 4.6: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT CATT bảo quản nhiệt độ phòng (28 – 340C) 44 nl w Bảng 4.7: Tổng hợp kết xác định ảnh hưởng nhiệt độ bảo quản đến oa độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT 45 d Bảng 4.8: Kết xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT sau tháng lu an bảo quản (ở 00C) 46 nf va Bảng 4.9: Kết xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT sau tháng oi lm ul bảo quản (ở 00C) 47 Bảng 4.10: Kết xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT sau tháng z at nh bảo quản (ở 00C) 48 Bảng 4.11: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT z CATT sau tháng bảo quản 48 gm @ Bảng 4.12: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT CATT sau tháng bảo quản 49 l Bảng 4.13: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT m co CATT sau tháng bảo quản 50 an Lu Bảng 4.14: Kết xác định ảnh hưởng thời gian bảo quản đến độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT 50 n va ac th si iii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 3.1: Đánh giá kết sử dụng KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 36 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU lu an n va p ie gh tn to : Acid deoxyribonucleic CATT : Card Agglutination Test for Trypanosomiasis cs : cộng EDTA : Ethylen Diamin Tetra Acetic IFAT : Indirect Fluorescent Antibody Test IPTG : Isopropyl β – D – thiogalactoside KHKT : Khoa học kỹ thuật MSC : Màng sinh chất PBS : Phosphat Buffered Saline RNA : Ribonucleic acid SDS : Sodium Dodecyl Sulfat Se : Sensitivity nl w ADN : Specificity : Tris – axit acetic – EDTA : Tiên mao trùng VAT oi lm ul nf va TMT an TAE : Trypanosoma lu T d oa Sp VSG : Variant Surface Glucoprotein TT : Thể trọng z at nh : Variant Antigen Tupe z m co l gm @ an Lu n va ac th si v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC HÌNH iii CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU iv MỤC LỤC v Phần 1: MỞ ĐẦU lu 1.1 Đặt vấn đề an va 1.2 Mục tiêu nghiên cứu n 1.3 Ý nghĩa đề tài gh tn to 1.3.1 Ý nghĩa học tập nghiên cứu khoa học p ie 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU nl w 2.1 Cơ sở khoa học đề tài d oa 2.1.1 Bệnh tiên mao trùng gia súc an lu 2.1.2 Những hiểu biết KIT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 26 va 2.2 Tình hình nghiên cứu tiên mao trùng 30 ul nf 2.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 30 oi lm 2.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 31 z at nh Phần 3: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 z 3.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 34 @ gm 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 34 l 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 34 m co 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 34 an Lu 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 34 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 34 n va ac th si vi 3.3 Nội dung nghiên cứu 34 3.3.1 Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng chế từ kháng nguyên tái tổ hợp 34 3.3.2 Xác định điều kiện bảo quản KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng chế từ kháng nguyên tái tổ hợp 34 3.4 Phương pháp nghiên cứu 35 3.4.1 Phương pháp xác định độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT lu CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng chế từ kháng nguyên tái tổ hợp 35 an va 3.4.2 Phương pháp xác định điều kiện bảo quản KIT theo nguyên lý CATT n chẩn đoán bệnh tiên mao trùng từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 37 gh tn to 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 37 p ie Phần 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 39 4.1 Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT CATT trước nl w bảo quản 39 d oa 4.1.1 Kết xác định độ nhạy độ đặc hiệu KIT CATT chẩn đoán bệnh an lu tiên mao trùng chế từ kháng nguyên tái tổ hợp 39 va 4.1.2 Kết xác định độ ổn định KIT CATT chẩn đoán bệnh tiên mao ul nf trùng chế từ kháng nguyên tái tổ hợp 40 oi lm 4.2 Kết nghiên cứu điều kiện bảo quản KIT 41 z at nh 4.2.1 Xác định ảnh hưởng nhiệt độ bảo quản đến độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT (sau tháng bảo quản) 41 z 4.2.2 Xác định ảnh hưởng thời gian bảo quản đến độ nhạy, độ đặc hiệu @ gm độ ổn định KIT bảo quản 00C 46 l Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 m co 5.1 Kết luận 53 an Lu 5.2 Đề nghị 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 n va ac th si Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong năm qua với xu hướng phát triển chung kinh tế, ngành chăn ni trâu, bị nước ta bước phát triển mạnh mẽ, nhằm đem lại sản phẩm có chất lượng cao, đóng góp vai lu trò quan trọng kinh tế quốc dân Ngành chăn ni trâu, bị phát an va triển kèm theo dịch bệnh xảy trâu, bị gia tăng gây nên n khó khăn cơng tác phát triển chăn ni trâu, bị nước ta Gần gh tn to đây, trâu, bò nước ta thường mắc bệnh tiên mao trùng (Trypanosomosis), ie đặc biệt tỉnh miền núi có số lượng trâu bị lớn gây ảnh hưởng khơng nhỏ p đến đàn vật nuôi nl w Bệnh tiên mao trùng (Trypanosomosis) bệnh ký sinh trùng truyền d oa lây người gia súc ký sinh trùng đơn bào (protozoa) lớp trùng roi an lu (flagellata) gây Có nhiều lồi thuộc giống Trypanosoma như: Trypanosoma va brucei, Trypanosoma evansi, Trypanosoma congolense, Trypanosoma ul nf gambiense, Trypanosoma vavax, Trypanasoma siminae… oi lm Bệnh tiên mao trùng hay gọi bệnh ngã nước Trâu, bò mắc bệnh thể cấp tính thường: sốt cao 41- 41,7oC với triệu chứng thần kinh z at nh như: ngã quỵ, kêu rống, vòng tròn… trâu, bò bệnh chết sau - 15 ngày Ở z thể mãn tính triệu chứng: sốt gián đoạn, gầy cịm, da khơ mốc, thiếu máu kéo gm @ dài, viêm phúc mạc, phù thũng chân… Trường hợp bệnh nặng, vật đột l ngột sốt cao, bụng chướng to lăn chết Vì cần có nghiên cứu cụ m co thể bệnh tiên mao trùng đàn trâu, bị nhiều phương pháp để chẩn đốn nhanh, xác thực trạng nhiễm bệnh thử nghiệm hóa dược đặc an Lu hiệu nhằm xây dựng phác đồ điều trị thích hợp n va ac th si Với phát triển công nghệ sinh học nước ta dựa tảng sinh học phân tử, cung cấp nhiều phương pháp có ý nghĩa lớn y học phịng ngừa chẩn đốn điều trị Trong có phương pháp ứng dụng KIT chế tạo theo nguyên lý CATT để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trâu, bò Xuất phát từ thực tế trên, hướng dẫn TS Nguyễn Văn Quang, phân công khoa chăn nuôi - thúy y, trường Đại học Nông Lâm lu Thái Nguyên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu số đặc tính an va KIT CATT chế từ kháng nguyên tái tổ hợp chẩn đoán bệnh tiên n mao trùng trâu, bò” gh tn to 1.2 Mục tiêu nghiên cứu p ie - Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT CATT chế từ kháng nguyên tái tổ hợp chẩn đốn bệnh tiên mao trùng trâu, bị oa nl w - Xác định điều kiện phù hợp để bảo quản KIT CATT chế từ kháng nguyên tái tổ hợp d an lu 1.3 Ý nghĩa đề tài va 1.3.1 Ý nghĩa học tập nghiên cứu khoa học ul nf Kết đề tài thông tin khoa học điều kiện thích oi lm hợp để chế tạo bảo quản KIT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng z at nh (Trypanosomiasis) hiệu Nghiên cứu chế tạo KIT chẩn đốn hướng nghiên cứu cơng nghệ z cao, khẳng định việc làm chủ công nghệ, ứng dụng vào l gm 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn @ thực tiễn sản xuất Việt Nam m co Kết đề tài sở khoa học để hồn thiện quy trình sản ngun tái tổ hợp an Lu xuất KIT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) từ kháng n va ac th si 49 Từ kết bảng 1.11 cho thấy, sau tháng bảo quản KIT có độ ổn định cao, biến đổi KIT không đáng kể với hệ số biến động mẫu sau lần thử dao động khoảng (0 – 14,43%), Cv đạt cao mẫu thứ 6; mẫu lại dao động khoảng (0 – 6,38%) Sau tháng bảo quản KIT cho kết ổn định cao, thử KIT chẩn đốn xác trâu, bò mắc bệnh TMT Bảng 4.12: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT lu an CATT sau tháng bảo quản 78 78 70 60 95 90 92 90 80 78 90 88 88 10 90 90 n ie gh tn to Cv (%) 78,0 5,73 50 67,2 18,05 90 90 94,4 2,40 85 80 80 83,0 5,39 80 90 70 90 84,0 10,65 50 80 75 60 55 64,0 20,22 76 60 85 80 75,8 12,46 90 85 90 80 87,0 5,14 70 90 90 88,2 10,04 92 95 95 87,0 7,71 nl w X (điểm) oa 80 p va 1 80 Lần phản ứng 80 80 70 Mẫu 90 d oi lm ul nf va an lu z at nh Từ bảng 4.12 cho thấy: Sau tháng bảo quản mức độ phân tán 10 z gm @ mẫu qua lần phản ứng dao động khoảng (2,40 – 20,22%), Cv đạt cao mẫu 6; mẫu lại Cv dao động khoảng (2,40 – 18,05) So l m co với tháng thứ mức độ phân tán KIT có tăng, độ phân tán so với tháng thứ không nhiều, KIT giữ độ ổn định cao cho an Lu chẩn đốn xác bệnh TMT trâu, bị n va ac th si 50 Bảng 4.13: Kết chấm điểm ngưng kết để xác định độ ổn định KIT CATT sau tháng bảo quản Mẫu 80 90 70 55 50 50 76 60 90 90 lu 10 an n va p ie gh tn to 50 70 75 70 80 85 75 78 80 50 Lần phản ứng 70 80 80 50 80 55 80 80 88 80 80 90 80 80 90 60 82 78 60 50 60 80 50 50 70 80 60 78 80 50 X (điêm) Cv (%) 68,0 82,0 71,0 61,0 74.0 68,2 74,6 74,8 79,6 64,0 19,17 10,20 17,54 21,99 20,49 21,06 11,59 11,12 14,91 30,46 Từ bảng 4.13 cho thấy: hệ số biến động KIT sau 10 mẫu thử phản w ứng ngưng kết CATT có chênh lệch sau tháng bảo quản dao động oa nl khoảng (10,20 – 30,46%), cao mẫu 10 với Cv đạt 30,46%, mẫu d lại Cv dao động khoảng (10,20 – 21,06%) So với tháng thứ lu an tháng thứ Cv tăng dần Tuy nhiên, mức độ KIT chẩn nf va đốn trâu, bò mắc bệnh TMT oi lm ul Bảng 4.14: Kết xác định ảnh hưởng thời gian bảo quản đến độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định KIT z at nh Thời gian (tháng) gm @ z Chỉ tiêu đánh giá 91,30 86,96 Độ đặc hiệu (%) 91,89 83,78 m co 78,38 Dao động khoảng Dao động khoảng (2,4 – 20,22) (10,20 – 30,46) an Lu Hệ số biến động (%) Dao động khoảng (0 – 14,43) 78,26 l Độ nhạy (%) n va ac th si 51 Kết theo dõi độ nhạy KIT dạng CATT theo thời gian để chẩn đoán độ nhạy phản ứng đạt giá trị cao tháng thứ đạt 91,30% tháng đầu tiên, sau đạt 86,96% sau tháng bảo quản đạt 87,26% sau tháng bảo quản giảm 13,04% so với tháng thứ 4,34% so với tháng thứ Tương tự, độ đặc hiệu phản ứng KIT giảm dần khoảng thời gian tháng bảo quản Tháng thứ độ đặc hiệu cao đạt 91,89%, sau lu tháng bảo quản đạt 83,78% sau tháng bảo quản độ đặc hiệu 78,38% an giảm 5,4% so với tháng thứ giảm 13,51% so với tháng thứ va n Độ ổn định KIT tháng đạt mức độ phân tán thấp bảo quản Cv tăng khoảng (2,4 – 20,22%) so với tháng đầu, sau tháng bảo gh tn to khoảng (0 – 14,43%) ứng với độ ổn định đạt chuẩn cao nhất, sau tháng p ie quản mức độ phân tán phản ứng KIT CATT đạt khoảng (10,20 – 30,46%) hệ số biến động tăng so với tháng tháng thứ ứng với độ oa nl w ổn định phản ứng CATT giảm dần sau tháng bảo quản Như KIT bảo quản thời gian tháng, nhiên, d an lu tháng thứ tháng thứ KIT có độ nhạy, độ đặc hiệu độ ổn định cao va cho kết xác so với sau tháng bảo quản ul nf Bảo quản KIT tốt tháng cho hiệu nhận biết tiên oi lm mao trùng xác cao Thực tế lần thí nghiệm cho thấy, mẫu chẩn đốn dương tính z at nh giả, âm tính giả có kết ngưng kết khơng rõ ràng ngưng kết qua thời gian kết bị giảm sút q trình thử KIT có lẫn bụi z @ bẩn tạo ngưng nghi ngờ cho phản ứng, mẫu nghi ngờ l gm xác định dương tính âm tính, nên thực phản ứng ngưng kết kháng nguyên kháng thể CATT chế từ kháng nguyên tái tổ hơp RoTAT 1.2 m co cho kết chưa thực chuẩn xác gây sai số an Lu n va ac th si 52 Kết luận: KIT bảo quản tốt vòng tháng sau thời gian KIT bị hỏng thử phản ứng ngưng kết CATT để chẩn đoán bệnh TMT cho kết khơng xác lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 53 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Sau trình thực đề tài chúng tơi có số kết luận sau: * Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu KIT CATT qua tiến hành thử nghiệm từ mẫu huyết trâu, bò đánh giá KIT dạng CATT lu chế từ kháng nguyên tái tổ hợp cho kết cao Cụ thể: độ nhạy 91,30% độ an va đặc hiệu 94,59% n * Độ ổn định KIT chế từ kháng nguyên tái tổ hợp: đánh giá gh tn to dựa mức độ phân tán (Cv%) (hệ số biến dị) Từ kết nghiên cứu cho p ie thấy Cv dao động khoảng (0 – 5,08%) tức mức độ phân tán thí nghiệm thấp tương ứng với độ ổn định CATT thí nghiệm cao nl w * Điều kiện bảo quản KIT CATT chế từ kháng nguyên tái tổ hợp chẩn d oa đoán bệnh tiên mao trùng an lu - Ảnh hưởng nhiệt độ bảo quản đến độ nhạy, độ đặc hiệu, độ ổn va định KIT Ở điều kiên 0oC nhiệt độ phòng: ul nf + Ở nhiệt độ 0oC độ nhạy KIT đạt 91,30%, độ đặc hiệu đạt oi lm 91,89% độ ổn định cao KIT bảo đảm tốt + Ở nhiệt độ phịng KIT cho độ nhạy, độ đặc hiệu, độ ổn định thấp z at nh nên bảo quản KIT nhiệt độ phòng z - Khi bảo quản KIT khoảng thời gian tháng, độ nhạy, độ đặc gm @ hiệu, độ ổn định KIT giảm dần Cụ thể: l + Độ nhạy từ tháng đầu đến tháng thứ giảm 4,34% so với tháng thứ m co nhất; tháng thứ giảm 13,04% Độ đặc hiệu từ tháng đầu đến tháng thứ giảm 8,11% sau tháng độ đặc hiệu giảm 13,51% so với tháng thứ an Lu n va ac th si 54 + KIT bảo quản vòng tháng tốt tháng sau giảm dần sau tháng Sau tháng Cv dao động khoảng (0 – 14,43%) sau tháng bảo quản Cv dao động khoảng (2,4 – 20,22%); sau tháng bảo quản Cv dao động khoảng (10,20 – 30,46%) Sau thời gian bảo quản sau tháng KIT bị biến đổi cho kết thử nghiệm sai lệch lu an 5.2 Đề nghị va Tiếp tục tiến hành thí nghiệm nghiên cứu đặc tính KIT CATT chế từ n kháng nguyên tái tổ hợp chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trâu, bò để gh tn to đưa kết luận xác điều kiên quy trình bảo p ie quản nhằm khuyến cáo cho người sử dụng, mang lại hiệu chẩn đoán cao d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Trần Văn Bình (2008), Bệnh quan trọng trâu, bò, dê biện pháp phòng trị, Nxb Khoa học tự nhiên công nghệ, tr 97 - 100 Chi cục thú y thành phố Hà Nội (2006), Sổ tay cán thú y sở, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 86 – 87 Phạm Văn Chinh (2006), Bệnh tiên mao trùng Trypanosoma evansi lu an trâu, bị ni tỉnh miền Trung biện pháp phịng trị, Luận án va Tiến sỹ nơng nghiệp, Hà Nội n Nguyễn Quốc Doanh (1997), ‘‘Hiệu lực trypazen điều trị bệnh tn to tiên mao trùng trâu T evansi gây ra’’, Tạp chí Khoa học Công nghệ gh p ie Quản lý, số 4/1997, tr 87 – 88 1885), Bệnh học chúng gây ra, quy trình bảo quản sử dụng nl w Nguyễn Quốc Doanh (1999), Một số đặc tính sinh học T evansi (Steel, d oa giống T evansi để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng, Luận án Tiến sỹ an lu nông nghiệp, Hà Nội ul nf Xã hội va Tô Du (2005), Kỹ thuật ni bị thịt suất cao, Nxb Lao động – oi lm Lương Văn Huấn, Lê Hữu Khương (1997), Giáo trình Ký sinh trùng thú y, z at nh Trường Đại học Nông lâm Thủ Đức tr 213 – 215 Nguyễn Đăng Khải (1995), "Về triệu chứng sảy thai bệnh tiên mao z trùng trâu, bò T evansi", Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập III, gm @ số 1, tr 69 - 71 l Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Văn Quang, Nguyễn Quang Tuyên (1999), an Lu Nguyên, tr 190 m co Giáo trình ký sinh trùng thú y, Trường Đại học Nông Lâm Thái n va ac th si 56 10 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Lê, Phạm Sỹ Lăng, Nguyễn Văn Quang (2008), Giáo trình ký sinh trùng thú y (giáo trình dùng cho bậc cao học), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 123 – 144 11 Nguyễn Thị Kim Lan (2012), Ký sinh trùng bệnh ký sinh trùng thú y, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 12 Phạm Sỹ Lăng (1982), Một số đặc điểm dịch tễ học bệnh Tiên mao trùng trâu, bò Trypanosoma evansi tỉnh phía Bắc Việt Nam, Luận lu an án Phó tiến sỹ khoa học Thú y n va 13 Phạm Sỹ Lăng, Hoàng Văn Năm, Nguyễn Hữu Nam, Nguyễn Bá Hiên, tn to Nguyễn Văn Diên (2008), Một số bệnh gây hại cho trâu,bị Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội, tr 72 – 74 gh p ie 14 Phạm Sỹ Lăng, Hoàng Văn, Năm, Bạch Quốc Thắng (2008), Bệnh hệ thầy thuốc thú y tập 2, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 103 – 104 nl w thống thần kinh tuần hồn vật ni kỹ thuật phòng trị, sổ tay d oa 15 Phạm sỹ Lăng, Lê Ngọc Mỹ (1984), “Một số thay đổi máu trâu, bò bị bệnh an lu tiên mao trùng Trypanosoma evansi (Steel, 1885) tỉnh phía Bắc va Việt Nam”, Kết nghiên cứu Khoa học Kỹ thuật Thú y, 1979 - 1984 ul nf 16 Phạm Sỹ Lăng, Nguyễn Thị Kim Lan, Lê Ngọc Mỹ, Nguyễn Thị Kim oi lm Thành, Nguyễn Văn Thọ, Chu Đình Tới (2009), Ký sinh trùng z at nh bệnh ký sinh trùng vật nuôi, Nxb Giáo dục Việt Nam 17 Phan Địch Lân (2004), Bệnh ngã nước trâu, bị, Nxb Nơng nghiệp, Hà z Nội, tr 56 – 73 @ gm 18 Phan Lục (2006), Giáo trình Bệnh ký sinh trùng thú y, Nxb Nông Nghiệp l 19 Phan Lục, Trần Văn Quyết Nguyễn Văn Thọ (1996), ‘‘Tình hình m co nhiễm đơn bào ký sinh trùng trâu, bò số vùng trung du tập III, số an Lu đồng phía Bắc Việt Nam’’, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, n va ac th si 57 20 Hà Viết Lượng (1998), Đơn bào ký sinh, đặc điểm dịch tễ biện pháp phòng trị bệnh Trypanosomiasis bò thuộc Nam Trung Bộ, Luận văn Thạc sỹ khoa học Nông nghiệp, Hà Nội 21 Lê Ngọc Mỹ (1994), "Kết bước đầu thiết lập phản ứng ELISA để chẩn đốn bệnh tiên mao trùng", Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập II, số 1, tr 111 - 115 22 Đoàn Văn Phúc (1994), “Kết ứng dụng số phương pháp huyết lu học chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trâu thực địa”, Tạp chí an n va Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập II, số tn to 23 Vương Thị Lan Phương (2004), Nghiên cứu kháng nguyên bề mặt Trypanosoma evansi phân lập từ trâu, bị phía Bắc Việt Nam tinh gh p ie chế kháng nguyên dùng phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp, Hà Nội oa nl w 24 Phùng Quốc Quảng, Hồng Kim Giao (2006), Ni bị thịt thâm canh nông hộ trang trại, Nxb Nông nghiệp d an lu 25 Lê Đức Quyết (1995), ‘‘Tình hình trâu, bò nhiễm Tiên mao trùng va số tỉnh duyên hải miền Trung Tây Nguyên’’, Tạp chí Khoa học Kỹ ul nf thuật Thú y, tập III, số oi lm 26 Nguyễn Đức Thạc, Nguyễn Văn Vực, Cao Văn Triều, Đào Lan Ni (2006), z at nh Con trâu Việt Nam, Nxb Lao động xã hội, tr 77 – 78 27 Hoàng Thạch, Hoàng Văn Dũng, Hồ Thị Thuận (1996), ‘‘Điều tra tình z hình nhiễm bệnh tiên mao trùng T evansi nghiên cứu quy trình @ l Kỹ thuật Thú y, tập III, số gm phòng bệnh cho trâu, bò sữa tỉnh phía Nam’’, Tạp chí Khoa học m co 28 Lương Tố Thu (1994), ‘‘Kết sản xuất Conjugate huỳnh quang chẩn an Lu đoán tiên mao trùng so sánh độ nhạy với phương pháp chuẩn khác’’, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập II, só n va ac th si 58 29 Lương Tố Thu, Lê Ngọc Mỹ (1996), ‘‘Nghiên cứu ứng dụng phương pháp ngưng kết nhựa (CATT) để chẩn đốn tình hình bệnh tiên mao trùng (do T evansi) đàn trâu Việt Nam’’, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, tập IV, số 30 Hồ Thị Thuận, Phan Hoàng Dũng, Hoàng Thạch (1984), Điều tra tình hình nhiễm Trypanosoma evansi nghiên cứu quy trình phịng trị cho trâu, bị sữa phía Nam, Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật lu an Thú y 1979 – 1984 n va 31.Trung tâm UNESCO phổ biến kiến thức văn hóa giáo dục cộng đồng tủ tn to sách kiến thức nhà nông (2005), Cẩm nang dành cho người ni trâu, bị, Nxb Văn hóa dân tộc, tr 103 – 107 gh p ie II Tài liệu tiếng nước for veterinary use based on an early VAT RoTAT 1/2 of oa nl w 32 Bajyana Songa E., Hamers R (1988), “A card agglutination test (CATT) Trypanosoma evansi”, Ann Soc Belge Mesd Trop.68, pp 233 - d an lu 240 va 33 Davison (1999), Evaluation of diagnostic test for T evansi and then oi lm Eliburgh ul nf application in epidemiogical studies in Indonesia, PhS thesis z at nh 34 Hoare C A (1972), The Trypanosomes of MammaIs A zoological monograph, Black well scientific Publication Oxford and Edinburgh z 35 Losos G J., Ikede B O (1972), “Review of the pathology of diseases of @ gm domectic and laboratory animal caused by T congolense, T vivax, T l brucei, T rhođensiense and T gambiense”, pp - 15 an Lu pp - 49 m co 36 Luckins A G (1988), Trypanosoma evansi in Asia, Parasitology today, 37 Njiru Z K., Constantine C C., (2007) Poulation sub-structuring among n va ac th si 59 38 Reid S A., (2002), Commande et retenue Trypanosoma evansi en Australia, Tendances en parasitologie (5), pp 219 – 224 39 Simukoko H., Marcotty T., Piri I., Geysen D., Vercruysse J., Vanden Bossche P (2007), “The comparative role of cattle, goat and pigs in the epidemiology of livestock Trypanosomiasis on the plateau of eastern Zambia”, Veterinary Parasitology, Volume 147, Issues – 4, 20 June 2007, pp 231 – 238 lu an 40 Sinshaw A., Abebe G., Desquennes M., Yoni W (2006), ‘‘Biting flies and n va Trypanosoma vivax infection in three highland distrcts bordering lake tn to Tana, Ethiopia’’, Veterinary Parasitology, volume 142, Issues – 2, 30 November 2006, pp 35 – 46 gh p ie 41 Sukanto I P., Rayne R C., Partoutomo S., Polytedi F (1992), isolate of Trypanosoma evansi, Europe PubMed Cental publisher, pp oa nl w Experimental infection of Friesian Holstein calves with an Indonesian 115 – 117 d an lu 42 Tamarit A., Gutierrez C., Arroyo R., Jimenez V., Zagalas G., Bosch I., va Sirvent J., Alberola J., Alonso I., Caballero C (2010), “Trypanosoma ul nf evansi infection in mainland Spain”, Vet Parasitol 167(1):74 - oi lm 43 Tperrona M C., Leseurand L., Renveom (1992), Seroepidemiology of z at nh vovine Trypanosomiasis in the area of Santamaria de ipire, Venezuela, Seminar Paris, (10), pp 96 z m co l gm @ an Lu n va ac th si 60 MƠT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA ĐỀ TÀI lu an n va Ảnh 2: Thực phản ứng ngưng p ie gh tn to Ảnh 1: Huyết trâu, bò d oa nl w kết KIT CATT oi lm ul nf va an lu z at nh z l gm @ Ảnh 4: KIT CATT sau tháng bảo quản bảo quản 00C m co Ảnh 3: KIT CATT trước an Lu n va ac th si 61 lu an n va gh tn to p ie Ảnh 5: KIT CATT sau tháng bảo quản 00C d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ Ảnh 6: KIT CATT sau tháng bảo quản nhiệt độ phòng (kháng nguyên an Lu chuyển màu từ xanh sang nâu đỏ) n va ac th si 62 lu an n va tn to p ie gh Ảnh 7: Kết thử phản ứng ngưng kết CATT d oa nl w an lu Dương tính Dương tính Ẩm tính Nghi ngờ oi lm ul nf va Dương tính z at nh z m co l gm @ an Lu Ảnh 8: Kết thử phản ứng ngưng kết CATT n va ac th si 63 lu an n va gh tn to Ảnh 10: Mẫu huyết dương tính p ie Ảnh 9: Mẫu huyết âm tính d oa nl w qua phản ứng CATT oi lm ul nf va an lu z at nh z l gm @ m co Ảnh 11: Mẫu huyết nghi ngờ an Lu n va ac th si