(Luận văn) nghiên cứu một số đặc tính sinh học của vi khuẩn actinobacillus pleuropneumoniae gây viêm phổi trong hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn tại bắc giang và biện pháp phòng trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN QUỐC HUY lu NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN an va ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE GÂY VIÊM PHỔI n TRONG HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN to gh tn Ở LỢN TẠI BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ p ie Chuyên ngành: Thú y d oa nl w Mã số: 60 64 01 01 an lu ll u nf va LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y oi m z at nh Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên, 2013 n va ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực đề tài nghiên cứu hoàn thành luận văn cảm ơn, thông tin trích dẫn xác lu rõ nguồn gốc an n va tn to Thái Nguyên, tháng 09 năm 2013 Tác giả p ie gh w d oa nl Nguyễn Quốc Huy ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực đề tài hoàn thành luận văn, nhận giúp đỡ nhiều tổ chức cá nhân Nhân dịp xin trân trọng cảm ơn Ban giám đốc, Ban quản lý Sau đại học Đại học Thái Nguyên, Ban lãnh đạo trường Đại học Nơng Lâm, phịng quản lý sau đại học khoa Chăn nuôi Thú y, trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện cho theo học chương trình đào tạo thạc sĩ trường lu Tôi xin trân trọng cảm ơn tập thể cán khoa Chăn nuôi Thú y, trường an va Đại học Nông Lâm Thái Nguyên; môn Vi trùng, Viện Thú y Quốc gia n Chi cục Thú y tỉnh Bắc Giang nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến thầy hướng dẫn khoa p ie gh tn to để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu học GS.TS Nguyễn Quang Tuyên, phó Viện trưởng Viện Khoa học Sự oa nl w sống, Đại học Thái Nguyên trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ tơi q trình d thực đề tài hồn thành luận văn an lu Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban lãnh đạo thầy cô giáo - Viện Thú y u nf va Quốc gia giúp đỡ, chia sẻ ý kiến quý báu hướng dẫn thực thí nghiệm để tơi hồn thiện đề tài nghiên cứu ll oi m Tơi ln biết ơn gia đình, bạn bè học viên cao học, em sinh z at nh viên đóng góp cơng sức, động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn z Tác giả m co l gm @ Thái Nguyên, tháng 09 năm 2013 an Lu Nguyễn Quốc Huy n va ac th si iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục biểu đồ, hình vẽ ix lu MỞ ĐẦU an n va Tính cấp thiết đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài gh tn to Mục tiêu nghiên cứu p ie Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU w 1.1 SƠ LƯỢC NGHIÊN CỨU VỀ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ oa nl HẤP VÀ SINH SẢN (PRRS) Ở LỢN d 1.1.1 Vài nét Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn lu an 1.1.2 Các đặc tính virus gây PRRS lợn u nf va 1.2 MỘT SỐ BỆNH KẾ PHÁT TRONG PRRS Ở LỢN 10 ll 1.2.1 Bệnh viêm phổi- màng phổi lợn (VPMP) 11 m oi Chương NỘI DUNG, ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ z at nh PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 28 z gm @ 2.2 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 28 l 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 m co 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu 28 an Lu 2.2.3.Thời gian nghiên cứu 28 2.3 NGUYÊN VẬT LIỆU DÙNG TRONG NGHIÊN CỨU 28 n va ac th si iv 2.3.2 Động vật thí nghiệm 29 2.3.3 Các loại hố chất, mơi trường 29 2.3.4 Giống vi khuẩn 29 2.3.5 Máy móc thiết bị 30 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 30 2.4.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 32 2.4.3 Phương pháp kiểm tra đặc tính sinh hố khả lên men đường chủng vi khuẩn phân lập 35 lu an 2.4.4 Phương pháp xác định A pleuropneumoniae kỹ thuật PCR 35 n va 2.4.5 Phương pháp xác định serotype vi khuẩn A to pleuropneumoniae phân lập 37 gh tn 2.4.6 Phương pháp xác định độc lực vi khuẩn A p ie pleuropneumoniae phân lập 38 vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 38 nl w 2.4.7 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh d oa 2.4.8 Phương pháp xác định độ dài miễn dịch hiệu lực an lu Autovaccine 39 u nf va 2.4.9 Xây dựng phác đồ điều trị lợn mắc viêm phổi 40 2.4.10 Phương pháp xử lý số liệu 41 ll oi m Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 z at nh 3.1 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN Ở LỢN TẠI TỈNH BẮC GIANG 42 z 3.1.1 Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS số @ gm huyện tỉnh Bắc Giang 42 l 3.1.2 So sánh nguy tương đối lợn mắc PRRS huyện m co địa bàn tỉnh Bắc Giang 44 an Lu 3.1.3 Kết xác định tỷ lệ mắc chết PRRS loại lợn khác 45 n va ac th si v 3.1.4 So sánh nguy tương đối lợn mắc PRRS loại lợn khác 47 3.2 XÁC ĐỊNH VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN A PLEUROPNEUMONIAE Ở LỢN MẮC PRRS TẠI TỈNH BẮC GIANG 49 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn A pleuropneumoniae từ bệnh phẩm lợn mắc PRRS lứa tuổi khác 49 3.2.2 Kết xác định số đặc tính sinh học chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 51 3.2.3 Kết xác định chủng A pleuropneumoniae phân lập lu phương pháp PCR 53 an 3.2.4 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn A va n pleuropneumoniae phân lập 54 to phân lập 56 ie gh tn 3.2.5 Kết xác định độc lực chủng A pleuropneumoniae p 3.2.6 Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh w chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 58 oa nl 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG, TRỊ d BỆNH VIÊM PHỔI Ở LỢN BỊ MẮC PRRS TẠI BẮC GIANG 59 lu an 3.3.1 Kết xác định độ dài miễn dịch Autovaccine 59 u nf va 3.3.2 Kết xác định hiệu lực Autovaccine thử nghiệm lợn nuôi tỉnh Bắc Giang 66 ll oi m 3.3.3 Kết xác định nguy lợn mắc PRRS, viêm phổi z at nh khơng tiêm Autovaccine so sánh nhóm lợn tiêm nhóm lợn khơng tiêm 68 z 3.3.4 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị lợn mắc viêm @ gm phổi Bắc Giang 69 l KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 72 m co KẾT LUẬN 72 ĐỀ NGHỊ 72 an Lu TÀI LIỆU THAM KHẢO 74 n va ac th si vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU lu an n va p ie gh tn to ADN AGID A.pleuropneumoniae BHI CAMP CFU CPS Cs EDTA ELISA H pleuropneumoniae HIP IHA LPS LTA LDV LD MR NAD omlA PBS PCR PRRS PRRSV RR TYE TSA TSB VP YE d oa nl w ll u nf va an lu : Acid Deoxyribonucleic : Agargel Immuno Diffuse : Actinobaccillus pleuropneumoniae : Brain Heart Infusion : Chiristie Atkinson Munch Peterson : Colony Forming Unit : Capsule polysaccharide : Cộng : Ethylene Diamine Tetra Acetic acid : Enzyme Linked Immuno Sorbert Assay : Haemophilus pleuropneumoniae : Acid Hippuric : Indirect Haemagglutination test : Lypopolysaccaride : Lipoteibic acid : Lactate dehydrogenase : Lethal dose : Methyl red : Nicotinamide Adenine Dinucleotide : Outer membrane lipoprotein of A pleuropneumoniae : Phosphat buffer solution : Polymerase Chain Reaction : Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome : Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus : Relative Risk : Tryptone Yeast Extract Broth : Tryptic Soya Agar : Tryptone Soya Broth : Voges Prokauer : Yeast Extract oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si vii DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU Bảng 2.1 Trình tự mồi dùng để xác định gen omlA 36 Bảng 2.2 Thành phần chất PCR để xác định gen omlA 36 Bảng 2.3: Bảng đánh giá mức độ mẫn cảm vi khuẩn với số loại kháng sinh (NCCLS -2002) 39 Bảng 3.1: Kết xác định tỷ lệ lợn mắc chết PRRS số huyện thuộc tỉnh Bắc Giang 42 lu Bảng 3.2: So sánh nguy tương đối lợn mắc PRRS huyện an n va thuộc tỉnh Bắc Giang 44 khác 46 gh tn to Bảng 3.3: Kết xác định tỷ lệ mắc chết PRRS loại lợn p ie Bảng 3.4: Nguy tương đối lợn mắc PRRS loại lợn khác 48 Bảng 3.5 Kết phân lập A pleuropneumoniae từ mẫu bệnh phẩm lợn oa nl w mắc PRRS lứa tuổi khác 50 d Bảng 3.6 Kết xãc định số đặc tính sinh học chủng vi an lu khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 51 u nf va Bảng 3.7: Phản ứng lên men đường chủng vi khuẩn A ll pleuropneumoniae phân lập 52 oi m Bảng 3.8: Kết xác định A pleuropneumoniae phân lập z at nh phương pháp PCR 53 Bảng 3.9: Kết xác định serotype chủng vi khuẩn A z gm @ pleuropneumoniae phân lập phản ứng AGID 55 Bảng 3.10: Kết kiểm tra độc lực vi khuẩn A pleuropneumoniae l m co phân lập 57 Bảng 3.11: Kết xác định mức độ mẫn cảm với số kháng sinh an Lu chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 58 n va ac th si viii Bảng 3.12: Kết xác định hiệu giá kháng thể có máu lợn tiêm Autovaccine sau tháng 61 Bảng 3.13: Kết xác định hiệu giá kháng thể có máu lợn tiêm Autovaccine sau hai tháng 63 Bảng 3.14: Kết xác định hiệu giá kháng thể máu lợn thí nghiệm tiêm Autovaccine sau ba tháng 64 Bảng 3.15: Kết xác định hiệu giá kháng thể máu lợn thí nghiệm tiêm Autovaccine sau bốn tháng 65 lu Bảng 3.16: Kết xác định tỷ lệ lợn nghi mắc viêm phổi vùng tiêm an vùng không tiêm Autovaccine 67 va n Bảng 3.17: Kết xác định nguy lợn mắc PRRS, viêm phổi không to gh tn tiêm Autovaccine so sánh nhóm lợn tiêm nhóm lợn ie không tiêm 68 p Bảng 3.18: Kết điều trị thử nghiệm lợn mắc viêm phổi 70 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ix DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH Biểu đồ 3.1: So sánh tỷ lệ lợn mắc chết PRRS huyện khác 43 Biểu đồ 3.2: So sánh tỷ lệ lợn mắc chết PRRS loại lợn 47 Biểu đồ 3.3: Tỷ lệ lưu hành serotype chủng vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập 56 Hình 2.1: Sơ đồ quy trình phân lập vi khuẩn A Pleuropneumoniae (Viện lu Thú y Quốc gia) 34 an va Hình 1: Kết xác định chủng A pleuropneumoniae phân lập n phương pháp PCR 54 p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 70 Bảng 3.18: Kết điều trị thử nghiệm lợn mắc viêm phổi Số ngày Phác Liều lượng Loại thuốc đồ Số điều trị điều trị cách dùng X± (con) Số khỏi Tỷ bệnh lệ (con) (%) SE 1ml/25kg TT/ngày CEFANEW- (4mg ceftiofur/kgTT); LA (ceftiofur: tiêm bắp; thuốc tác 10g/100ml) I lu dụng 72-96 an n va Gluco-K-C- 1ml/10kg TT/ngày; Na tiêm bắp: 1lần/ngày tn to ie gh p (amoxicillin: 28 93,33 30 ± 0,26 24 80,00 30 ± 0,24 27 90,00 79 87,77 (15mg amoxicillin/kgTT); tiêm w 15g/100ml) bắp; thuốc tác dụng 48 nl II ± 0,22 1ml/10kg TT/ngày MarphamoxLA 30 d oa 1ml/30kgTT/ngày ll (15mg m oi 45% 45g/100ml) florfenicol/kgTT); z at nh (florfenicol: III u nf MARFLO- tiêm bắp: 1lần/ngày va Na 1ml/10kg TT/ngày; an lu Gluco-K-C- tiêm bắp; thuốc tác tiêm bắp: 1lần/ngày an Lu Ghi chú: TT - Thể trọng 90 m co Tổng hợp l Namin gm 1ml/10kg TT/ngày; @ Gluco-K-C- z dụng 72 - 96 n va ac th si 71 Qua bảng 3.18 cho thấy điều trị thử nghiệm lợn mắc viêm phổi với loại kháng sinh Ceftiofur; Amoxicillin Florfenicol Ngoài sử dụng loại kháng sinh điều trị chúng tơi cịn bổ sung tiêm thêm Gluco.K.C.Namin để trợ sức trợ lực, giảm sốt, giảm ho, tiêu viêm tăng cường sức đề kháng cho lợn bệnh Ở phác đồ sử dụng Ceftiofur với liều lượng 4mg/kg thể trọng, điều trị 30 lợn mắc viêm phổi có 28 khỏi, đạt tỷ lệ 93,33% Ở phác đồ sử dụng Amoxicillin với liều lượng 15mg/kg thể trọng; tiến lu hành điều trị 30 lợn mắc viêm phổi, khỏi 24 con, đạt tỷ lệ 80 % an Ở phác đồ sử dụng Florfenicol với liều lượng 15mg/kg thể trọng; điều va n trị tổng số 30 lợn mắc viêm phổi, khỏi 27 con, đạt tỷ lệ 90 % to gh tn Tổng cộng với phác đồ điều trị thử nghiệm 30 lợn mắc ie viêm phổi có 79 khỏi, đạt tỷ lệ trung bình 87,77% Trong đó, phác đồ p có tỷ lệ khỏi cao (93,33%), tiếp đến phác đồ (90%) thấp nl w phác đồ (80%) d oa Như vậy, phác đồ điều trị thử nghiệm lợn mắc viêm phổi huyện an lu nghiên cứu tỉnh Bắc Giang có kết tốt, tỷ lệ lợn khỏi bệnh cao Từ u nf va kết thu qua điều trị thử nhiệm, khuyến cáo người chăn nuôi mạng lưới thú y sở địa bàn tỉnh Bắc Giang chủ động ll oi m sử dụng ba phác đồ để điều trị lợn mắc viêm phổi, đặc biệt phác z at nh đồ (sử dụng kháng sinh Ceftiofur) Xây dựng thành công phác đồ tạo điều kiện cho người chăn nuôi, cán thú y sở chủ động phòng z điều trị bệnh viêm phổi lợn, giảm thiểu thiệt hại, tăng giá trị sản @ l gm phẩm chăn ni Từ ổn định nguồn cung cấp thực phẩm tiêu dùng tỉnh phát triển bền vững m co hàng ngày làm cho giá ổn định đồng thời giúp ngành chăn nuôi lợn an Lu n va ac th si 72 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN Lợn lứa tuổi có nguy mắc Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (PRRS) Tỷ lệ mắc cao lợn 12,48%, thấp lợn thịt 6,52%; tỷ lệ chết PRRS lợn 24,86% thấp lợn nái hậu bị 4,41% Có 17,78% vi khuẩn A pleuropneumoniae phân lập từ lợn dương lu tính với virus PRRS xác định nguyên nhân phổ biến làm cho lợn mắc an Đã xác định serotype chủng A pleuropneumoniae phân lập có n va PRRS thêm trầm trọng 31,25% thuộc serotype 5a 12,50% thuộc gh tn to 56,25% thuộc serotype 2; p ie serotype 5b w Các chủng vi khuẩn phân lập có độc lực cao Có 75,0% gây oa nl chết 100% chuột (12-36 giờ); sau tiêm d Sau tiêm Autovaccine đến tháng Hiệu giá kháng thể ngưng kết an lu 1/16; 1/32 đạt tỷ lệ 100 Hiệu giá kháng thể ngưng kết 1/64 giảm dần từ u nf va tháng thứ với tỷ lệ từ 93,33% đến 80% Hiệu lực Autovaccine 70% ll Vi khuẩn A pleuropneumoniae mẫn cảm cao với florfenicol, ceftiofur, oi m amoxicillin kháng lincomycin, erythromycin, neomycin colistin z at nh Ba phác đồ điều trị thử nghiệm cho lợn có kết cao, tỷ lệ lợn khỏi bệnh từ 80% đến 93,33% Trong đó, phác đồ I sử dụng ceftiofur có hiệu z ĐỀ NGHỊ l gm @ kinh tế cao nhất, thời gian điều trị ngắn tỷ lệ lợn khỏi bệnh cao (93,33%) m co - Áp dụng biện pháp chăn ni an tồn dịch bệnh như: Thường xun tiêu độc chuồng trại, định kỳ tiêm chủng loại vaccine đặc biệt an Lu vaccine phòng bệnh tai xanh n va ac th si 73 - Tiếp tục nghiên cứu sâu chế tạo Autovaccine phòng viêm phổi lợn, để phát triển sản xuất vaccine phòng viêm phổi vi khuẩn A pleuropneumoniae gây lợn - Áp dụng kết đề tài phòng trị bệnh viêm phổi vi khuẩn A pleuropneumoniae gây lợn địa phương sở chăn nuôi để giảm tỷ lệ lợn mắc chết viêm phổi; giúp ngành chăn nuôi lợn phát triển bền vững, tăng giá trị sản phẩm chăn nuôi lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu Tiếng Việt Tiêu Quang An, Nguyễn Hữu Nam (2011), “ Xác định số vi khuẩn kế phát gây chết lợn vùng dịch lợn Tai xanh huyện Văn Lâm tỉnh Hưng Yên năm 2010”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 18(3), tr 56- 64 Bùi Quang Anh, Hoàng Văn Năm, Văn Đăng Kỳ, Nguyễn Văn Long, Nguyễn Ngọc Tiến (2008) Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn (PRRS) NXB Nông nghiệp, tr 7- 21 lu an Đặng Xuân Bình, Nguyễn Thị Ngân, Phan Hồng Phúc (2007), “Tình hình va nhiễm Actinobacillus pleuropneumoniae bệnh viêm phổi màng phổi n tn to lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14(2), tr 36-39 Tai xanh lợn năm 2010 địa bàn tỉnh, Bắc Giang p ie gh Chi cục Thú y tỉnh Bắc Giang (2010), Báo cáo kết phòng chống bệnh w Cục thống kê tỉnh Bắc Giang (2012), Thống kê chăn nuôi tỉnh thời oa nl điểm ngày 01/4/2012, Bắc Giang d 6.Cục Thú y (2008), Báo cáo chẩn đoán nghiên cứu virus gây hội an lu chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn Việt Nam từ tháng 3/2007 đến u nf va 5/2008, Hội thảo khoa học phịng chống hội chứng rối loạn hơ hấp sinh sản lợn, ngày 21 tháng năm 2008, Hà Nội ll oi m Nguyễn Thị Thu Hằng (2010), Nghiên cứu số đặc tính sinh học tính z at nh sinh miễn dịch Actinobacillus pleuropneumoniae phân lập từ lợn làm sở cho việc chế tạo vaccine Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Viện z Thú y Quốc gia, Hà Nội, tr 115-116 @ gm Trịnh Quang Hiệp, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thu Hằng, Âu Xuân Tuấn (2004), l “Xác định đặc tính sinh vật hoá học, độc lực vi khuẩn m co Actinobacillus, Pasteurella Streptocococcus gây bệnh viêm phổi 476-477 an Lu lợn”, Tạp chí khoa học-cơng nghệ Bộ Nông nghiệp PTNT (4), tr n va ac th si 75 Lê Thanh Hòa, Lê Thị Kim Xuyến, Đồn Thị Thanh Hương, Trần Quang Vui, Phạm Cơng Hoạt, Nguyễn Bá Hiên (2009), “ Phân tích gen M mã hóa protein màng vỉus gây PRRS Việt Nam so sánh với chủng Trung Quốc, giới”, Tạp chí Khoa học phát triển, 7(3), tr 282- 290 10 Lý Thị Liên Khai, Võ Thị Cẩm Giàng (2012), “Khảo sát tình hình nhiễm ghép hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản với dịch tả heo tỉnh Bạc Liêu Sóc Trăng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 19(6), tr 29- 39 lu 11.Phạm Sỹ Lăng, Đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Hoàng Đăng an Huyến, Bạch Quốc Thắng, Nguyễn Văn Diêm, Trần Đức Hạnh (2011), Một số va n bệnh quan trọng lợn biện pháp phòng trị, Nxb Hà Nội, tr 137-139 sinh sản hô hấp lợn, Hội thảo khoa học hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản bệnh liên cầu gây lợn 10/2007, Trường Đại học p ie gh tn to 12 Nguyễn Hữu Nam, Nguyễn Thị Lan Hương (2007), Hội chứng rối loạn nl w Nông nghiệp, Hà Nội, tr 34-39 d oa 13.Hoàng Văn Năm, Nguyễn Văn Thanh, Bùi Quang Anh, Văn Đăng Kỳ, Bùi an lu Thị Việt Hằng, Bùi Thị Tho, Sử Thanh Long, Trần Thanh Vân, Hoàng u nf va Hải Hóa, Võ Ngân Giang, Hán Văn Khoát (2012), Tài liệu đào tạo Thú y sở, Nxb Nông nghiệp - Hà Nội, tr 58 ll oi m 14.Nguyễn Thị Mến, Trần Thị Dân, Nguyễn Thị Phương Ninh, Lê Thanh z at nh Hiền, Thái Quốc Hiếu, Nguyễn Văn Hân (2012), “Đặc điểm dịch tễ dịch PRRS năm 2010- 2011 số ứng dụng an toàn sinh học huyện z gm @ tỉnh Tiền Giang”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 19(6), tr 24- 28 15.Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Thu Hằng, Âu Xuân Tuấn, l m co Nguyễn Bích Thuỷ, Vũ Ngọc Quý (2005) Xác định nguyên nhân gây bệnh đường hô hấp lợn nuôi số tỉnh phía Bắc Tạp chí an Lu KHKT thú y, 7(4), tr 25-32 n va ac th si 76 16.Cù Hữu Phú (2011), Nghiên cứu mối liên quan hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản lợn với vi khuẩn gây bệnh kế phát xác định biện pháp phòng, trị bệnh, Báo cáo khoa học Viện Thú y Quốc gia 2011 17.Phạm Ngọc Thạch (2007), Một số tiêu lâm sàng, tiêu máu lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản (bệnh Tai xanh) số đàn lợn tỉnh Hải Dương Hưng Yên, Hội thảo khoa học hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản bệnh liên cầu gây lợn 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp, Hà Nội, tr 25-34 lu 18.Nguyễn Như Thanh (2007), “Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản” Hội an thảo Hội chứng rối loạn hô hấp sinh sản bệnh liên cầu khuẩn gây va n lợn 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, tr 34-37 gh tn to 19.Nguyễn Như Thanh (2011), Dịch tễ học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội p ie 20.Tô Long Thành (2007), “Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14 (3), tr 81-88 oa nl w 21.Tô Long Thành Nguyễn Văn Long (2008), “Kết chẩn đoán nghiên cứu virus gây hội chứng rối lọan hô hấp sinh sản lợn d an lu Việt Nam từ tháng 3/2007 đến 5/2008”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú u nf va y, 15(5), tr 5-13 22.Nguyễn Văn Thiện (1997), Phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb ll oi m Nông nghiệp, Hà Nội, tr 22-45 z at nh II Tài liệu nước 23.Belanger M., Dubreuil D., Harel J., Girard C., Jacques M (1990), Role of z gm @ lipopolysaccharides in adherence of Actinobacillus pleuropneumoniae to porcine tracheal rings Infect Immun 58:3523-3530 l m co 24.Bertchinger HU, Seifert P (1978), Isolation of a Pasterella haemolyticalike organism from porcine necrotic pleuropneumoniae, Proc Int Congr an Lu Pig Vet Soc 5: Abstr M19 52: 157-149 n va ac th si 77 25.Bertram T A (1986), Intravascular macrophages in lungs of pigs infected with Haemophilus pleuropneumoniae Vet Pathol 23: 681-691 26.Blackall P J., Klaasen H B L M., van den Bosch H., Kuhnert P., Frey J (2002), Proposal of a new serovar of Actinobacillus pleuropneumoniae: serovar 15, Vet Microbiol (84) 47-52 27.Bongtae Kim, Kyoungsub Min, Changsun choi, Wan-Seob Cho (2001), Antimicrobial Susceptibility of Actinobacillus pleuropneumoniae isolated from pig in Korea using new standardzed procedures J Vet.Sci 63 (3) 341-342 lu an 28.Chang Y F., Shi J R., Ma D P., Shin S J., Lein D H (1993), Molercular n va analysis of the Actinobacillus pleuropneumoniae RTX Toxin-III gene tn to cluster DNA Cell Biol 12: 351-362 Antimicrobial susceptibility and plasmid analysis of Actinobacillus p ie gh 29.Chang CF, Yeh TM, Chou CC, Chang YF, Chiang TS (2002), w pleuropneumoniae isolated in Taiwan, Vet Microbiol 3; 84(1-2),169-77 oa nl 30.Chiers K, Donne E, Van Overbeke I, Ducatelle R, Haesebrouck F (2002), d Actinobacillus pleuropneumoniae infectious in closed swine heards: infectious an lu patterns and serological profiles Elsevier science B.V in Ghent University - u nf va Belgium 7: 214-318 31.Chung J W., Ng- Thow- Hing C., Budman L I., Gibbs B F., Nash J H., ll oi m Jacques M., Coulton J W (2007), Outer membrane proteome of z at nh Actinobacillus pleuropneumoniae: LC-MS/MS analyses validate in silico predictions Proteomics Jun; 7(11): 1854-1865 z 32.Collins J E., Benfield D A., Christianson W T., Harris L., Hennings J C., @ gm Shaw D P., Goyal S M., McCullough S., Morrison R B., Joo S H., l Gorcyca D., Chladek D (1992), “ Isolation of swine infertility and m co respiratory syndrome virus (isolate ATCC VR- 2332) in North America and Invest 4: 117- 126 an Lu experimental reproduction of the disease in gnotobiotic pigs”, J Vet Diagn n va ac th si 78 33.Devenish J., Rosendal S (1991), Calcium binds to and is required for biological activity of the 104 kilodalton hemolysin of Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 1, Can J Microbiol 37:317-321 34.Diarra M S., Dolence J A., Dolence E K., Darwish I., Miller M J., Malouin F., Jacques M (1996), Growth of Actinobacillus pleuropneumoniae is promoted by exogenous hydroxamate and catechol siderophores, Appl Environ Microbiol; 62:853-859 35.D'Silva C G., Archibald F S., Niven D F (1995), Comparative study of lu iron acquisition by biotype and biotype strains of Actinobacillus an n va pleupneumoniae, Vet Microbiol 44: 11-23 tn to 36.Frey J (1995a), Exotoxins of Actinobacillus pleuropneumoniae In: W York and London: Plenum 42: 124-127 p ie gh Donachie (ed.) Haemophilus, Actinobacillus, and Pasteurella New 37.Frey J (1995b), Virulence in Actinobacillus pleuropneumoniae and RTX w oa nl toxins Trends Microbiol Jul, 3(7): 257- 261 d 38.Gram T, Ahrens P (1998), Improved diagnostic PCR assay for an outer an lu membrane lipoprotein J Clin Microbiol (36) 443-448 va u nf 39.Gram T, Ahrens P, Andreasen M, Nielsen JP (2000), An Actinobacillus ll pleuropneumoniae PCR typeing system based on the apx and omLA oi m Microbiol 75:43-57 z at nh gens-evaluation of isolates from lungs and tonsils of pigs Vet z 40.Han J., Wang Y., Faaberg K S (2006), Complete genome analysis of @ l gm RFLP 184 isolates of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: Virus Research 122 (1-2): pp 175-183 m co 41.Jacques M., Roy G., Mittal K R (1988), Hemmaglutinating properties of an Lu A pleuropneumoniae Can J Microbiol 34: 1046-1049 n va ac th si 79 42.Jacques M (2004), Surface polysaccharides and iron-uptake systems of Actinobacillus pleuropneumoniae The Canadian Journal of Veterinary Research 68:81-85 43.Inzana T J (1991), Virulence properties of A pleuropneumoniae Microb.Path 11:305-316 44.Kamp E M., Popma J K., Anakotta J., Smits M A (1991), Identification of hemolytic and cytotoxic proteins of Actinobacillus pleuropneumoniae by using monoclonal antibodies Infect Immun lu 59:3079-3085 an 45.Kegong Tian, Yu X (2007), Emergence of Fatal PRRSV Varants: va n Unparalleled Outbreaks of Atypical PRRS in China and Molecular to PRRS Symposium p ie gh tn Dissection of the Unique Hallmark, PloS ONE 2(6) International 46.Kilian M, Nicolet J, Biberstin EL (1978), Biochemical and serological oa nl w characterization of Haemophilus pleuropneumoniae and proposal of a neotype strain Int J Syst Bacteriol 28:20-26 d an lu 47.Kume K., Nagano I., Nakai T (1986), Bacteriological, serological and u nf va pathological examination of Haemophilus pleuropneumoniae infection in 200 slaughtered pigs Jpn J.Vet Sci 48: 965-970 ll oi m 48.Lairini K, Stenbaek E, Lacouture S, Gottschalk M (1995), Production and z at nh characterisation of monoclonal antibodies aganints Actinobacillus pleuropneumoniae serotype Vet Microbiol 46, p 369-381 z characterisation of copper-zinc gm @ 49.Langford P R., Loynds B M., Kroll J S (1996), Cloning and molecular superoxidase dismutase from l m co Actinobacillus pleuropneumoniae Inf and Imm 64: 5035-5041 50.Leman A D (1992), The decision to repopulate In Proceedings Am an Lu Assoc Swine Pract pp 9-12 n va ac th si 80 51.Liu J., Chen X., Tan C., Guo Y., Chen Y., Fu S., Bei W., Chen H (2009), In vivo induced RTX toxin ApxIVA is essential for the full virulence of Actinobacillus pleuropneumoniae Vet Microbiol 2009 Jun 12;137(3-4):282-289 52.Macdonald J., Rycroft A N (1993), Actinobacillus pleuropneumoniae haemolysin II is secreted from Escherichia coli by Actinobacillus pleuropneumoniae pleurotoxin secretion gene products FEMS Microbiol Lett 109, 317-322 53.Matthew PRJ, Pattison IH (1961), The identification of Haemophilus-like lu organism associated with pneumonia and pleurisy in the pig J Comp an Pathol 71:44-52 va n 54.Min K, Chae C (1999), Serotype and apx genotyp profiles of to 28: 145(9):251-4 p ie gh tn Actinobacillus pleuropneumoniae field isolated in Korea Vet Rec Aug 55.Mittal KR, Higgins R, Lariviere S (1982), Evanluation of slide oa nl w agglutination and ring precipitation tests for capsular serotypeing of Haemophilus pleuropneumoniae J Clin.Microbiol 15:1019-1023 d an lu 56.Moller K., Nielsen R., Andersen L V., Killian M (1996), Clonal analysis u nf va of the Actinobacillus pleupneumoniae population in a geographically restricted area bu multilocus enzyme elctrophoresis, J Clin Micro 30, ll oi m p 623 - 627 z at nh 57.Møller K, Kilian M (1990), V factor-dependent members of the family Pasteurellaceae in the porcine upper respiratory tract J Clin z gm @ Microbiol Dec;28(12):2711-6 58.Moore G M., Basson R P., Tonkinson L V (1996), Clinical trials with l m co tilmicosin phosphate in feed for the control of naturally- acquired pleuropneumonia caused by Actinobacillus pleuropneumoniae and an Lu Pasteurella multocida in swine Am J Vet Res 57:224-228 n va ac th si 81 59.Negrete-Abascal E., Tenorio V R., Serrano J J., Garcia C., de la Garza M (1994), Secreted proteases from Actinobacillus pleuropneumoniae serotype degrade porcine gelatin, hemoglobin and immunoglobulin A Can J Vet Res 58:83-86 60.Nielsen R (1985), Serological characterization of Haemophilus pleuropneumonia (Actinobacillus pleuropneumoniae) strains and proposal of a new serotype: serotype Acta Vet Scand.501-512 61.Pattison IH, Howell DG, Elliiott J (1957), A Haemophilus-like organism lu isolated from pig lung and the asociated pneumonic lesions J Comp an Pathol 67:320-329 va n 62.Perry MB, Altman E, Brison JR, Beynon LM, Richards JC (1990), to and lipopolysaccharides involved in the serological alaccification of p ie gh tn Structural characteristics of the antigenic capsular polysachharides (Haemophilus) Actinobacillus pleuropneumoniae strains oa nl w Serodiagnosis and Immunotherapy in Inf Dis 4, p 299-308 63.Pohl S, Bertschiger HU, Frederiksen W, Manheim W (1983), Transfer of d an lu Haemophilus pleuropneumoniae and the Pasteurella haemolytica-like u nf va organism causing porcine necrotic pleuropneumoniae to the genus Actinobacilus ( Actinobacillus pleuropneumoniae comb Nov) on the ll oi m basis of phenotyleic anh deoxyribonucleic acid relatedness Int J Syst z at nh Bacteriol 33:510-514 64.Prescott J F., Baggot J D (1993), Antimicrobial Therapy in Medicine z gm @ Ames: Iowa State Univ Press 41: 312-317 65.Rayamajhi N., Shin S J., Kang S G., Lee D Y., Ahn J M., Yoo H S l m co (2005), Development and use of a multiplex polymerase chain reaction assay based on Apx toxin genes for genotypeing of Actinobacillus an Lu pleuropneumoniae isolates J Vet Diagn Invest Jul;17(4): 359-62 n va ac th si 82 66.Straw B, D’ Allaire A, Mengalem W, Taylor D (1999), Diseases of Swine 8th Edition Iowa State University Press, p.343-354 67.Taylor DJ (1999), Actinobacillus pleuropneumoniae In: Straw B, Taylor D, Mengeling WL, eds Diseases of Swine Iowa State University Press Ames, Iowa, USA: 343-354 68.Udeze F A., Latimer K S., Kadis S (1987), Role of Haemophilus pleuropneumoniae lipopolysaccharide endotoxin in the pathogenesis of porcine Haemophilus pleuropneumoniae Am J Vet Res 48:768-773 lu 69.Ward C K., Inzana T J (1997), Identification and characterization of a an DNA region involved in the export of capsular polysaccharide by A va n pleuropneumoniae serotype 5a Infect and Immun 65: 2491- 2496 the Netherlands: the isolation of Lelystad virus”, The Veterinary p ie gh tn to 70.Wensvoort G., Terpstra C., Pol J M A (1991), “Mystery swine disease in Quarterly, vol 13, No 3, pp 121- 130 oa nl w 71.Wilke M., Franz B., Gerlach G F (1997), Characterization of a large transferrin-binding protein from Actinobacillus pleuropneumoniae d an lu serotype J Vet Med B; 4: 73- 86 u nf va 72.Wite DC, Leidy G, Jamieson JD, Shope RE (1964), porcine contagious pneuropneumoniae III Interrelationship of Haemophilus pleuropneumoniae ll oi m to other species of Haemophilus: Nủtitional, metabolic, transformation and z at nh elẻcton microscopy studies J Exp Med 120:1-12 73.Willson PJ, Deneer HG, Potter A, Albritton W (1989), Characterization z gm @ of a streptomycin- sulfonamide resistance plasmid from Actinobacillus pleuropneumoniae Antimicrob Agents Chemother 33:235-238 m co l an Lu n va ac th si MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ lu an n va gh tn to Hình 1,2: Phổi cuống họng lợn mắc bệnh Tai xanh Bắc Giang p ie dùng làm mẫu bệnh phẩm d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z chụp qua kính hiển vi an Lu mơi trường thạch Hình 4: Hình thái A pleuropneumoniae m co A pleuropneumoniae l gm @ Hình 3: Khuẩn lạc vi khuẩn có cấy kèm Sta aureus n va ac th si 84 lu an n va ie gh tn to p Hình 5: Kết kháng sinh đồ d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 6: Kết phản ứng lên men đường n va ac th si