(Luận văn) nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và khả năng đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vacxin cúm h5n1 tại tỉnh bắc ninh

i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN KIÊN lu an n va NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ p ie gh tn to BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACXIN CÚM H5N1 TẠI TỈNH BẮC NINH d oa nl w va an lu ll u nf LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP oi m z at nh z m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2011 n va ac th si i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN VĂN KIÊN lu an n va NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ p ie gh tn to BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACXIN CÚM H5N1 TẠI TỈNH BẮC NINH d oa nl w Chuyên ngành: THÚ Y Mã số: 60.62.50 va an lu ll u nf LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP oi m z at nh Người hướng dẫn khoa học: z TS NGUYỄN QUANG TÍNH PGS.TS TÔ LONG THÀNH m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2011 n va ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: Các kết nghiên cứu luận văn trực tiếp nghiên cứu hướng dẫn TS Nguyễn Quang Tính, PGS.TS Tơ Long Thành giúp đỡ chân tình chú, anh chị: phịng virus - Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ương, Chi Cục Thú y tỉnh Bắc Ninh Các số liệu kết trình bày luận văn hồn tồn trung thực, rút từ tình hình thực tế tỉnh Bắc Ninh năm qua lu an chưa sử dụng để bảo vệ học vị n va Mọi giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn ie gh tn to thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc p Thái Nguyên, tháng 09 năm 2011 d oa nl w Tác giả luận văn an lu ll u nf va Nguyễn Văn Kiên oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt năm học tập, với nỗ lực thân, nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể, đến luận văn tơi hồn thành Nhân dịp này, cho phép tơi tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm Thái nguyên, Khoa Sau Đại học, Khoa Chăn nuôi - Thú y, thầy cô giáo giúp đỡ, tạo điều kiện để lu học tập, tiếp thu kiến thức suốt trình học an Các cán thuộc phòng Virus, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ương va n Ban Lãnh đạo, cán Chi Cục Thú y tỉnh Bắc Ninh số bạn tn to đồng nghiệp làm việc lĩnh vực Chăn nuôi - Thú y gh Đặc biệt thầy giáo hướng dẫn trực tiếp: TS Nguyễn Quang Tính- p ie Khoa Chăn ni - Thú y PGS.TS Tô Long Thành - Giám đốc Trung tâm w Chẩn đoán Thú y Trung ương người tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi oa nl suốt trình thực đề tài d Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi gửi lời cảm ơn sâu lu va an sắc tới gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ tơi vượt qua u nf khó khăn suốt trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài ll Một lần tơi xin bày tỏ lịng biết ơn, cảm ơn chân thành tới m oi tập thể, cá nhân tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành chương trình học tập z at nh Thái Nguyên, tháng 09 năm 2011 z l gm @ Tác giả m co Nguyễn Văn Kiên an Lu n va ac th si iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục biểu đồ ix lu Danh mục đồ thị x an n va Danh mục hình xiv MỞ ĐẦU Mục tiêu yêu cầu đề tài ie gh tn to Tính cấp thiết đề tài p Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài nl w Địa điểm nghiên cứu d oa Thời gian nghiên cứu đề tài an lu Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU u nf va 1.1 Giới thiệu chung bệnh cúm gia cầm 1.2 Lịch sử bệnh cúm gia cầm ll oi m 1.3 Tình hình dịch cúm gia cầm z at nh 1.4 Đặc điểm sinh học virus cúm type A 11 1.4.1 Đặc điểm cấu tạo, hình thái cấu trúc 11 z 1.4.2 Đặc tính kháng nguyên virus cúm type A 14 @ gm 1.4.3 Quá trình nhân lên gây bệnh virus 16 m co l 1.4.4 Đặc tính ni cấy lưu giữ virus cúm gà 18 1.4.5 Độc lực virus cúm gia cầm 18 an Lu 1.4.6 Phân loại virus 21 n va ac th si iv 1.4.7 Sức đề kháng virus cúm gia cầm 23 1.4.8 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm 23 1.5 Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 27 1.5.1 Đối tượng lứa tuổi mắc bệnh 27 1.5.2 Mùa vụ phương thức lây truyền 28 1.5.3 Ký chủ virus 29 1.5.4 Sự lưu hành virus cúm đàn gia cầm 32 1.6 Triệu chứng, bệnh tích bệnh cúm gia cầm 33 lu 1.6.1 Triệu chứng lâm sàng 33 an 1.6.2 Bệnh tích 34 va n 1.7 Chẩn đoán bệnh cúm gia cầm 35 1.8.1 Kiểm soát dịch bệnh 37 p ie gh tn to 1.8 Phòng bệnh 37 1.8.2 Vacxin phòng bệnh cúm gia cầm 38 nl w 1.9 Một số nghiên cứu nước bệnh cúm gia cầm 43 d oa Chương ĐỐI TƯỢNG - VẬT LIỆU - NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG an lu PHÁP NGHIÊN CỨU 45 u nf va 2.1 Đối tượng nghiên cứu 45 2.2 Vật liệu dùng nghiên cứu 45 ll oi m 2.2.1 Dụng cụ thí nghiệm 45 z at nh 2.2.2 Các hoá chất dùng xét nghiệm 45 2.2.3 Đối tượng kiểm tra 47 z gm @ 2.2.4 Vacxin sử dụng 47 2.3 Nội dung nghiên cứu 47 l m co 2.3.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm Bắc Ninh 47 2.3.2 Đánh giá đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, an Lu vịt sau tiêm vacxin cúm H5N1 Bắc Ninh 47 n va ac th si v 2.4 Phương pháp nghiên cứu 47 2.4.1 Điều tra số tiêu liên quan đến chăn nuôi dịch cúm gia cầm tỉnh Bắc Ninh 47 2.4.2 Phương pháp lấy mẫu 47 2.4.3 Bố trí thí nghiệm 48 2.4.4 Giám sát số tiêu đàn gia cầm tỉnh Bắc Ninh sau tiêm phòng vacxin H5N1 49 2.4.4.1 Giám sát lâm sàng 49 2.4.4.2 Giám sát huyết 49 lu an 2.4.4.3 Phản ứng ngưng kết hồng cầu HA 49 n va 2.4.4.4 Giám định virus phân lập phản ứng ngăn trở ngưng kết 2.4.5 Phương pháp xử lý số liệu 51 ie gh tn to hồng cầu HI 50 p Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 52 w 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm tỉnh Bắc Ninh 52 oa nl 3.1.1 Tình hình bệnh cúm gia cầm từ cuối năm 2003 đến năm 2011 52 d 3.1.2 Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm gia cầm theo mùa 54 lu va an 3.1.3 Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm gia cầm theo loại gia cầm 56 u nf 3.1.4 Biến động tỷ lệ mắc bệnh theo phương thức chăn nuôi 57 ll 3.1.5 Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo quy mô đàn gia cầm 59 m oi 3.2 Kết đánh giá đáp ứng miễn dịch đàn gà tiêm phòng z at nh vacxin cúm gia cầm H5N1 tỉnh Bắc Ninh năm 2010 60 3.2.1 Kết tiêm phòng vacxin cúm cho đàn gia cầm tỉnh Bắc z gm @ Ninh năm 2010 60 3.2.2 Kết giám sát lâm sàng đàn gia cầm sau tiêm phòng l m co vacxin 62 3.2.3 Giám sát huyết học đàn gia cầm sau tiêm an Lu phòng vacxin 63 n va ac th si vi 3.2.3.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch gà tiêm vacxin H5N1 63 3.2.3.2 Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vacxin H5N1 thời điểm lấy mẫu 68 3.2.3.3 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà thí nghiệm 72 3.2.3.4 So sánh hiệu giá kháng thể trung bình đàn gà thí nghiệm đàn gà tỉnh 75 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt lu tiêm vacxin H5N1 Trung Quốc Bắc Ninh năm 2010 77 an 3.2.4.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vacxin 78 va n 3.2.4.2 Tần số phân bố mức kháng thể vịt tiêm vacxin to gh tn H5N1 thời điểm lấy mẫu 81 p ie 3.2.4.3 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn vịt thí nghiệm sau tiêm vacxin H5N1 84 nl w 3.2.4.4 So sánh hiệu giá kháng thể trung bình đàn vịt TN với d oa đàn tỉnh 86 an lu KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 89 u nf va 5.1 Kết luận 89 5.2 Đề nghị 89 ll oi m TÀI LIỆU THAM KHẢO 90 z at nh PHỤ LỤC z m co l gm @ an Lu n va ac th si vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TN : Thí nghiệm ARN : Acid ribonucleic cADN : Complementary ADN GMT : Geometric Mean Titer-Hiệu giá kháng thể trung bình HA : Hemagglutination test-Phản ứng hồng cầu HI : Hemagglutination inhibitory test-Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu lu an HPAI : High Pathogenicity Avian Influenza-Virus cúm thể độc lực cao : Antigene-Kháng nguyên KT : Antibody-Kháng thể n va KN tn to OIE : Office Internationale des Epizooties-Tổ chức thú y giới : Phosphate-Buffered-Saline p ie gh LPAI : Low Pathogenicity Avian Influenza-Virus cúm thể độc lực thấp nl w PBS d oa FAO : Food and Agriculture Organization-Tổ chức lương thực ll u nf va an lu nông nghiệp Liên hiệp quốc oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Tỷ lệ gia cầm mắc bệnh cúm tính từ năm 2003 - 2011 52 Bảng 3.2: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo mùa 54 Bảng 3.3: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo loại gia cầm 56 Bảng 3.4: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm gia cầm theo phương thức chăn nuôi .58 Bảng 3.5: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo quy mô đàn gia cầm 59 Bảng 3.6: Kết tiêm phòng vacxin cúm cho đàn gia cầm tỉnh Bắc Ninh năm 2010 61 lu an Bảng 3.7: Kết theo dõi độ an toàn vacxin H5N1 đàn gia cầm 62 n va Bảng 3.8: Hiệu giá kháng thể trung bình gà tiêm vacxin H5N1 64 tn to Bảng 3.9: Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vacxin H5N1 68 gh Bảng 3.10: Hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch đàn gà thí nghiệm 73 p ie Bảng 3.11: Hiệu giá kháng thể trung bình, tỷ lệ bảo hộ đàn gà thí w nghiệm đàn gà tỉnh 75 oa nl Bảng 3.12: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt tiêm vacxin H5N1 78 d Bảng 3.13: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh tiêm lu va an vacxin qua thời điểm 81 u nf Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch đàn vịt thí nghiệm 84 ll Bảng 3.15: Hiệu giá kháng thể trung bình, tỷ lệ bảo hộ đàn vịt TN m oi đàn vịt tỉnh 86 z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 95 Tô Long Thành (2007), “Các loại vacxin cúm gia cầm đánh giá hiệu 39 tiêm phòng (Bài tổng hợp)”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y (tập XIV, số 2), tr 84-90 40 Thủ Tướng Chính Phủ (2005), Chỉ thị số 25/2005/CT-TTg ngày 12 tháng năm 2005 việc tiêm vacxin phòng dịch cúm gia cầm Đỗ Ngọc Thuý dịch (2008), “Tin khoa học kĩ thuật cúm gia cầm”, số 41 - 2008, tr 92 - 94 42 Trần Công Xuân, Lê Hồng Mận, Nguyễn Thiện, Phạm Sĩ Lăng (2005), lu Giải pháp phòng chống dịch cúm, khôi phục phát triển chăn nuôi an gia cầm bền vững, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, tr n va tn to II Tài liệu tiếng Anh Alexander D J (1993), Orthomyxovirus Infections, In: Viral Infections of Vertebrates, Volume 3: Viral Infections of Birds McFerran J B., & p ie gh 43 nl w McNulty M S., eds, Horzinek M C., Series editor, Elservier, Amsterdam, APHIS (2002) Animal and Plant Health Inspection Service, Highly d an lu 44 oa The Netherlands, 287-316 Pathogenic Avian Influenza - Feb [Wed page], tr.58-69 va Bean B., Moore B.M., Stemer B., et al (1982), Surviral of Influenza u nf 45 ll virus on environmental surfaces, J Infect Dia, Jun; 146 (1); 47-51 oi m 46 Collins R A., Ko L S., So K L., Ellis T., Lau L T., Yu A C., (2002), z at nh Detection of hyghly pathogenic avian influenza subtype H5 (Euracian z lineage) using NASBA J Virology Methods, 103(2): 213-215 @ Fouchier R.A.M., Schireeberger P.M., Rozendaal F W Et al (2004), gm 47 m co l Avian influenza A virus (H7N7) associated with human conjunctivitis and a fatal case of acute respiratory distress sydrine, Proc Natl Acad an Lu Sci 2004, published online before print January 26 n va ac th si 96 48 Fouchier R.A.M , Munster V., Wallensten A., et al (2005), Characterization of a novel influenza A virus haemagglutinin subtype (H16) obtained from black - headed gulls J Virol Maz; 79(5); 2814-22 49 Horimoto T and Kawaoka Y (1995), Direct reverse transcriptase PCR to determine virulence potential of influenza A viruses in birds, J Clin Microbiol, 33(3): 748-751 50 Ito T and Kawaoka Y (1998), Avian influenza, p 126-136 In Nicholson K G., Webster R G., and Hay A J., (ed.), Textbook of influenza, Blackwell Sciences Ltd, Oxford, United Kingdom lu an 51 Ito T., Couceiro J N., Kelm S., Baum L G., Krauss S., Castrucci M R., n va Donatelli I., Kida H., Pauson J C, Webter R G., and Kawoaka Y (1998), to Molecular basic for the generation in pigs of influenza A viruses with gh tn pandemic potential, J Virology, 72: 77-7373 Kawaoka (1988), Is the gene pool of influenza viruses in shorebirds p ie 52 Kawaoka Y (1991), Difference in receptor specificity among influenza A nl w 53 and gulls different from that in wild ducks, Virology, 179:759-767 Lu X., Tumpey T M., Morken T., Zaki S R., Cox N J., and Katz J M an lu 54 d oa viruses from different species of animals, J Vet Med Sci, 53: 357-358 (1999), A mouse model for the evaluation of pathogenesis and immunity va m Lisa F.P.Ng., Lan Barr, Nguyen Tung, Suriani Mohd norr, Rosemary oi 55 ll 73: 5903-5911 u nf to influenza A (H5N1) viruses isolated from human, J Virology, z at nh Sok - Pin Tan, Lora V Agathe, Sanjay Gupta, Hassuzana Khalin, To Long Thanh, Sharifah Syed Hassan, Ec - Chee Ren (2007), Specific z l 56 gm step RJ - PCR assay @ ditection of H5N1 avitan inflienza A virus in field specimens by an oneMo I P, Brugh M., J FletcherO., Rowland G N., and Swayne D E m co (1997), Comparative pathology of chickens experimentaly inoculated 41: 125-136 an Lu with avian influenza viruses of low and high pathogenicity, Avian Dis, n va ac th si 97 57 OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167, 1-15 58 Seo S., and Webster R G (2001), Cross-reactive cell-mediated immunity and protection of chickens from lethal H5N1 influenza virus infection in the HongKong poultry markets, J Virology, 75: 2516-2525 59 Swayne D E & Suarez D L (2000), Highly pathogenic avian influenza, Rev sci tech Off Int epiz., 20: 463-482 lu 60 Voyles B.A (2002), Orthomyxo virus; In: The biology of viruses, Ed 2, an New York, NY; Me Graw - Hill; 147 va n 61 Webster R G., Bean W J., Gorman O T., Chambers T M., and to tn Kawaoka Y (1992), Evolution and ecology of influenza A viruses, 62 WHO (2004), Laboratory study of H5N1 viruses in domestic ducks: p ie gh Microbiol Rev, 56: 152-179 Main findings, Oct 29 nl w d oa Danh mục trang web http:// www vietnamnet ngày 28/11/2006 64 http://www.ndhan.gov/data/translation/AVIAN%20INFLUENZA%20_ va an lu 63 http://www.ykhoanet.com/binhluan/nguyendinhnguyen/ndn- ll 65 u nf BIRD%20FLU_-Vietnamese%20pdf.pdf z at nh http://www.fao.org/ag/againfo/subjects/en/health/diseasescards/avian_recomm.html z http://www.baomoi.com/Nguy-co-xuat-hien-chung-virut-moi-cua-dichcum-gia-cam-o-chau-A/82/6907797.epi http://cctytg.wordpress.com/2011/09/06/cm-gia-c%E1%BA%A7m- m co l 68 gm @ 67 oi 66 m cumgiacam.htm t%E1%BA%A1i-qu%E1%BA%A3ng-tr%E1%BB%8B- an Lu qu%E1%BA%A3ng-ngi-v-thi-bnh/ n va ac th si l u a n v a n 98 to t n g p hi e Bảng phụ lục minh họa cho phần: “kiểm tra hiệu giá kháng thể phân bố hiệu giá KT kháng virus cúm huyết gà tiêm vacxin H5N1 qua thời điểm khác nhau” Số mẫu KT Số mẫu (-) Tỷ lệ (%) Yên Phong 60 6,67 Tiên Du 60 3 Lương Tài 60 Thuận Thành 60 Tổng 240 Hiệu giá kháng thể HI (log2) nl Địa điểm 7 11 15 13 10 5,00 12 17 10 3,33 10 12 13 18 0 24 20 3,75 27 51 60 52 32 11,69 22,08 25,97 22,51 13,85 3,89 >8 nf u o lm i n h a t z Tỷ lệ n v a a lu ≤3 l o a d STT d o w Bảng 1: Phân bố hiệu giá KT kháng virus cúm huyết gà thời điểm 30 ngày sau tiêm vacxin z Bảng 2: Kết kiểm tra kháng thể kháng virus cúm huyết gà thời điểm 30 ngày sau tiêm vacxin mi @ gm Gà tiêm phòng Gà báo Địa iểm Số mẫu KT Số mẫu chuyển dơng Tỷ lệ chuyển dơng (%) Bảo hộ Tỷ lệ (%) GMT (log2) Sè mÉu KT MÉu (-) Yên Phong 60 56 93,33 49 81,67 5,14 10 10 Tiên Du 60 57 95,00 52 86,67 6,15 10 10 Lương Tài 60 58 96,67 48 80,00 4,96 10 10 Thuận Thành 60 60 100,00 55 91,67 4,90 10 10 Tổng 240 231 96,25 204 85,00 5,13 40 40 m l.c o STT an Lu v an t h a c si l u a n v a n 99 to t n g Bảng 3: Phân bố hiệu giá KT kháng virus cúm huyết gà thời điểm 60 ngày sau tiêm vacxin hi e Địa điểm Số mẫu KT Số mẫu (-) Yên Phong 60 2 Tiên Du 60 Lương Tài 60 lu Thuận Thành 60 Tổng số 240 ≤3 3,33 13 11 15 1,67 12 10 16 11 0,00 13 10 13 11 0,00 14 18 11 10 1,25 25 52 49 55 41 15 10,55 21,94 20,68 23,21 17,30 6,33 o a d nl d o w Tỷ lệ (%) l nf u n v a a >8 a t z i n h o lm Tỷ lệ Hiệu giá kháng thể HI (log2) p STT z Bảng 4: Kết kiểm tra kháng thể kháng virus cúm huyết gà thời điểm 60 ngày sau tiêm vacxin mũi Gà tiêm phòng Gà báo @ Địa điểm STT Số mẫu Tỷ lệ Số mẫu Tỷ lệ bảo GMT Số mẫu Mẫu KT (+) (%) bảo hộ hộ (%) (log2) KT (-) Yên Phong 60 58 96,67 53 88,33 5,43 10 10 Tiên Du 60 59 98,33 55 91,67 5,56 10 10 Lương Tài 60 60 100,00 51 85,00 5,27 10 10 Thuận Thành Tổng số 60 60 100,00 53 88,33 5,05 10 10 240 237 97,08 212 88,33 5,32 40 40 l.c o gm Số mẫu m Lu an v an t h a c si l u a n v a n 100 to t n g Bảng 5: Phân bố hiệu giá KT virus cúm huyết gà thời điểm 90 ngày sau tiêm vacxin hi e Hiệu giá kháng thể HI (log2) Số mẫu Tỷ lệ KT (-) (%) ≤3 Yên Phong 60 6,67 13 15 10 2 Tiên Du 60 3,33 12 14 11 Lương Tài 60 8,33 14 12 13 10 Thuận Thành 60 1,67 20 13 10 13 Tổng số 240 12 5,00 46 49 51 47 27 20,18 21,49 22,37 20,61 11,84 3,51 d o w o a d nl Địa điểm p Số mẫu STT a lu n v a l nf u i n h o lm Tỷ lệ >8 a t z Bảng 6: Kết kiểm tra kháng thể kháng virus cúm huyết gà thời điểm 90 ngày sau tiêm vacxin mi z Gà tiêm phòng @ a im STT MÉu (%) (log2) KT (-) 47 78,33 4,98 10 10 96,67 46 76,67 5,12 10 10 55 91,67 50 83,33 5,22 10 10 60 59 98,33 39 65,00 4,42 10 10 240 228 95,00 182 75,83 4,73 40 40 (+) (%) Yên Phong 60 56 93,33 Tiên Du 60 58 Lương Tài 60 Thuận Thành Tổng số m l.c o gm KT Lu v t Sè mÉu Tỷ lệ an an GMT Số mẫu h a c T l S mu Gà báo Bo hộ si l u a n v a n 101 to t n g Bảng 7: Phân bố hiệu giá KT virus cúm huyết gà thời điểm 120 ngày sau tiêm vacxin (-) (%) Yên Phong 30 3,33 Tiên Du 30 Lương Tài 30 Thuận Thành 35 Tổng 125 Hiệu giá kháng thể HI (log2) ≤3 10 3 3,33 12 0,00 11 2,86 12 6 2,40 31 31 25 20 13 25,41 25,41 20,49 16,39 10,66 1,64 d o w p KT hi e Tỷ lệ nl Số mẫu Địa điểm nf u Số mẫu STT o a d a lu n v a >8 l lm Tỷ lệ o i n h a t z Bảng 8: Kết kiểm tra kháng thể kháng virus cúm huyết gà thời điểm 120 ngày sau tiêm vacxin mũi z Số mẫu (+) Yên Phong 30 29 96,67 Tiên Du 30 29 Lương Tài 30 Thuận Thành Tổng l.c o m an Lu gm Số mẫu KT Tỷ l @ a im STT Gà tiêm phòng Gà chØ b¸o v an t h a c Tỷ lệ GMT Số mẫu (log2) Số mẫu KT (%) 19 63,33 4,52 10 10 96,67 26 86,67 5,00 10 10 30 100,00 19 63,33 4,55 10 10 35 34 97,14 27 77,14 4,58 10 10 125 122 97.60 91 72,80 4.41 40 40 (%) Bảo hộ (-) si l u a n v a n 102 to t n g Bảng 9: Phân bố hiệu giá KT virus cúm huyết gà thời điểm 150 ngày sau tiêm vacxin p hi e nl d o w Tỷ lệ (%) 33,33 30,00 20,00 30,00 28,75 o a d a Yên Phong Tiên Du Lương Tài Thuận Thành Tổng Tỷ lệ Số mẫu (-) 23 lu Số mẫu KT 15 20 15 30 80 n v a Địa điểm ≤3 10 32 56,14 Hiệu giá kháng thể HI (log2) 3 11 19,29 14,04 10,53 i n h o lm l nf u STT Bảng 10: Kết kiểm tra kháng thể kháng virus cúm huyết gà thời điểm 150 ngày sau tiêm vacxin mũi a t z z Địa điểm Tỷ lệ 15 10 Tiên Du 20 Lương Tài Gà báo S mu (log2) KT (-) 20,00 3,4 10 10 25,00 3,5 10 10 80,00 40,00 4,25 10 10 21 70,00 11 36,67 4,09 10 10 57 71,25 25 31,25 3.51 40 40 66,67 14 70,00 15 12 Thuận Thành 30 Tổng 80 gm m v Số mẫu Tỷ lệ (%) l.c o Lu an an GMT Bảo hộ Yên Phong Số mẫu (+) Số mẫu KT @ STT Gµ tiêm phòng (%) t h a c si l u a n v a n 103 to t n g p hi e Phụ lục bảng biểu chi tiết minh họa: “Phần kiểm tra phân bố hiệu giá kháng thể huyết vịt tiêm vacxin H5N1 qua thời điểm lấy mẫu khác nhau” Số mẫu KT Số mẫu (-) Yên Phong 60 Tiên Du 60 Lương Tài 60 Thuận Thành 60 5,3 6,3 7,3 8,3 0,00 15 12 10 11 10,00 12 17 11 1,67 13 13 11 13 6,67 11 13 13 10 10 4,17 45 58 45 44 33 19,57 25,22 19,57 19,13 14,35 2,17 n v a a 4,3 nf u o Tỷ lệ Hiệu giá kháng thể HI (log2) ≤3,3 lm i n h 240 a t z Tổng Tỷ lệ (%) lu Địa điểm l STT o a d nl d o w Bảng 11: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 30 ngày sau tiêm vacxin mũi > 8,3 z m l.c o gm @ Bảng 12: Kết kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 30 ngày sau tiêm vacxin mũi Vịt tiêm phòng Vịt báo STT Địa điểm Số mẫu Số mẫu Tỷ lệ Tỷ lệ GMT Số mẫu Số mẫu Bảo hộ GMT KT (+) (%) (%) (log2) KT (-) Yên Phong 60 60 100,00 51 85,00 5,43 43,11 10 10 Tiên Du 60 55 91,67 43 71,67 4,97 31,34 10 10 Lương Tài 60 59 98,33 46 76,67 5,16 35,75 10 10 Thuận Thành 60 56 93,33 45 75,00 5,21 37,01 10 10 77,08 30,91 Tổng số 240 230 95,83 185 4,95 40 40 Lu an v an t h a c si l u a n v a n 104 to t n g hi e Bảng 13: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 60 ngày sau tiêm vacxin mũi Số mẫu Tỷ lệ (-) (%) Yên Phong 60 0,00 Tiên Du 60 Lương Tài 60 Thuận Thành 60 8,33 Tổng 240 3,75 16 6,93 ≤ 3,3 4,3 5,3 a l 6,3 7,3 8,3 51 12 45 11 10 11 25 30 31 118 4,76 10,82 12,99 13,42 51,08 nl o a d lu 6,67 17 0,00 i n h o lm Tỷ lệ d o w Số mẫu KT nf u Địa điểm n v a p Hiệu giá kháng thể HI (log2) STT a t z Bảng 14: Kết kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 60 ngày sau tiêm vacxin mũi z @ gm Địa điểm Vịt báo 8,00 256 10 10 81,67 6,08 67,65 10 10 60 100,00 7,80 222,8 10 10 91,67 46 76,67 5,90 59,71 10 10 96,25 215 89,58 6,85 115,36 40 40 Tỷ lệ GMT (%) Yên Phong 60 60 100,00 60 100,00 Tiên Du 60 56 93,33 49 Lương Tài 60 60 100,00 Thuận Thành 60 55 Tổng số 240 231 m l.c o Số mẫu (+) Lu t Số mẫu Tỷ lệ bảo hộ (%) v an Số mẫu KT Số mẫu KT h a c GMT Số mẫu bảo hộ an STT Vịt tiêm phòng (log2) (-) si l u a n v a n 105 to t n g Bảng 15: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 90 ngày sau tiêm vacxin mũi Số mẫu Tỷ lệ (-) (%) Yên Phong 20 10,00 Tiên Du 15 Lương Tài 30 Thuận Thành 17 Tổng 82 Hiệu giá kháng thể HI (log2) p Số mẫu KT hi e Địa điểm ≤ 3,3 4,3 5,3 6,3 7,3 5 4 3 o a d nl d o w STT 6,67 8,3 lu 0,00 2 2 10,98 13 17 12 17 10 17,81 23,29 16,44 23,29 13,70 5,48 lm l nf u n v a a 20,00 Tỷ lệ o i n h a t z Bảng 16: Kết kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 90 ngày sau tiêm vacxin mũi z gm @ Vịt tiêm phòng Địa điểm GMT Số mẫu KT Số mẫu 4,75 26,91 10 10 93,33 5,45 43,71 10 10 21 70,00 5,60 48,50 10 10 100,00 14 82,35 4,66 25,28 10 10 89,02 63 76,83 4,97 31,34 40 40 Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ bảo hộ (%) GMT Yên Phong 20 18 90,00 14 70,00 Tiên Du 15 14 93,33 14 Lương Tài 30 24 80,00 Thuận Thành 17 17 Tổng số 82 73 l.c o Số mẫu KT v STT Vịt báo m Lu an (log2) (-) an t h a c si l u a n v a n 106 to t n g Bảng 17: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 120 ngày sau tiêm vacxin mũi Số mẫu KT Số mẫu (-) Tỷ lệ (%) Yên Phong 15 0,00 Tiên Du 18 3 Lương Tài 20 Thuận Thành 15 Tổng 68 p Địa điểm hi e STT Hiệu giá kháng thể HI (log2) 4,3 16,67 25,00 13,33 10 14,71 27 17 46,55 29,31 10,34 13,79 o a d nl d o w ≤ 3,3 5,3 6,3 7,3 8,3 a lu n v a l nf u lm Tỷ lệ a t z i n h o Bảng 18: Kết kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm huyết vịt thời điểm 120 ngày sau tiêm vacxin mũi Vịt tiêm phòng Vịt báo z Số mẫu KT Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Số mẫu bảo hộ Tỷ lệ bảo hộ (%) GMT (log2) GMT Số mẫu KT Số mẫu (-) Yên Phong 15 15 100,00 10 66,67 4,45 21,86 10 10 Tiên Du 18 15 83,33 33,33 3,91 15,03 10 10 Lương Tài 20 15 75,00 10 50,00 4,15 17,75 10 10 Thuận Thành 15 13 86,67 33,33 3,85 14,42 10 10 Tổng số 68 58 85,29 31 45,59 3,45 10,93 40 40 Địa điểm l.c o gm @ STT m Lu an v an t h a c si 107 MỘT SỐ HÌNH ẢNH lu an Ảnh 1: Bảo quản vacxin từ 2-80C n va Ảnh 2: Dụng cụ, vacxin dùng tiêm phòng p ie gh tn to d oa nl w va an lu ll u nf Ảnh 3: Tập huấn kỹ thuật tiêm phòng Ảnh 4: Tiêm phòng vacxin H5N1 cho gà oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Ảnh 5: Lấy mẫu máu tĩnh mạch gà Ảnh 6: Lấy mẫu máu tĩnh mạch vịt n va ac th si 108 Ảnh 7: Mẫu huyết Ảnh 8: Bảo quản mẫu huyết lu an n va p ie gh tn to oa nl w d Ảnh 9: Dung dịch hồng cầu gà 1% ll u nf va an lu Ảnh 10: Nhỏ dung dịch hồng cầu gà 1% vào giếng oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 11: Lắc mẫu Ảnh 12: Máy PCR an Lu n va ac th si 109 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu Ảnh 13: Kết phản ứng HI oi m z at nh z m co l gm @ Ảnh 14: Gà chăn thả tự Ảnh 15: Gà nuôi nhốt hoàn toàn an Lu n va ac th si