(Luận văn) nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine h5n1 tại 03 huyện tĩnh gia, quảng xương

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN LƯƠNG lu an n va tn to p ie gh NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TẠI 03 HUYỆN TĨNH GIA, QUẢNG XƯƠNG, NHƯ THANH TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y z m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2015 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN LƯƠNG lu an n va p ie gh tn to NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACCINE H5N1 TẠI 03 HUYỆN TĨNH GIA, QUẢNG XƯƠNG, NHƯ THANH TỈNH THANH HÓA, BIỆN PHÁP KHỐNG CHẾ d oa nl w Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 u nf va an lu ll LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y oi m z at nh Giảng viên hướng dẫn: PGS TS ĐẶNG XUÂN BÌNH z m co l gm @ an Lu THÁI NGUYÊN - 2015 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Trong trình thực đề tài, tơi nhận giúp đỡ nhiệt tình, quý báu nhiều cá nhân tập thể tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận văn Trước hết xin bày tỏ cảm ơn trân trọng tới giảng viên hướng dẫn khoa học PGS TS Đặng Xuân Bình người tận tình hướng dẫn, bảo suốt thời gian thực đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn góp ý thầy cô giáo khoa Chăn nuôi Thú y, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho thực đề tài lu an Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Trung tâm Chẩn đoán Thú y n va Vùng (Vinh), Cục thú y Trung ương, Ban lãnh đạo Chi cục Thú y tỉnh Thanh Hóa, tn to Ban lãnh đạo Trạm thú y huyện Tỉnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tạo điều Tôi xin cảm ơn gia đình người thân, cán bộ, đồng nghiệp p ie gh kiện giúp đỡ trình học tập thực đề tài oa nl w động viên giúp đỡ hoàn thành luận văn d Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 lu ll u nf va an TÁC GIẢ LUẬN VĂN oi m Lê Văn Lương z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực, lần triển khai địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh, tỉnh Thanh Hóa chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn Thái Nguyên, ngày 20 tháng năm 2015 TÁC GIẢ LUẬN VĂN lu an n va tn to p ie gh Lê Văn Lương d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn .3 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung cúm gia cầm 1.2 Tình hình dịch cúm gia cầm giới nước .5 lu 1.2.1 Tình hình dịch cúm gia cầm giới an 1.2.2 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam va n 1.2.3 Tình hình dịch cúm gia cầm Thanh Hóa tn to 1.3 Đặc điểm sinh học virus cúm type A gh 1.3.1 Đặc điểm cấu trúc chung virus thuộc họ Orthomyxoviridae p ie 1.3.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc virus cúm type A 10 w 1.3.3 Đặc tính kháng nguyên virus cúm type A 11 oa nl 1.3.4 Thành phần hóa học virus .13 d 1.3.5 Quá trình nhân lên tác động gây bệnh virus 13 an lu 1.3.6 Độc lực virus 14 u nf va 1.3.7 Danh pháp .15 1.3.8 Phân loại virus 15 ll oi m 1.3.9 Nuôi cấy lưu giữ virus cúm gà 16 z at nh 1.3.10 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm .16 1.4 Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 20 z 1.4.1 Phân bố dịch 20 gm @ 1.4.2 Động vật cảm nhiễm .20 l 1.4.3 Động vật mang virus .21 m co 1.4.4 Sự truyền lây 22 1.4.5 Sức đề kháng virus cúm 23 an Lu 1.5 Triệu chứng, bệnh tích bệnh cúm gia cầm 23 n va 1.5.1 Triệu chứng lâm sàng bệnh cúm gia cầm 23 ac th si iv 1.5.2 Bệnh tích bệnh cúm gia cầm 24 1.6 Chẩn đoán bệnh 25 1.7 Kiểm soát bệnh 26 1.8 Vaccine phòng bệnh cúm gia cầm .27 1.8.1 Các loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm 28 1.8.2 Một số loại vaccine phòng bệnh cúm gia cầm cách sử dụng .29 1.9 Nghiên cứu nước bệnh cúm gia cầm .30 Chương 2: NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .32 2.1 Nội dung nghiên cứu 32 lu 2.1.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh an Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 32 n va 2.1.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt gh tn to tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 32 p ie 2.1.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine w type A H5N1 .32 oa nl 2.1.4 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng d Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 33 an lu 2.2 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 33 va 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu .33 ll u nf 2.2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu .33 oi m 2.3 Vật liệu nghiên cứu 33 z at nh 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 33 z 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gia @ cầm sau tiêm vaccine H5N1 .34 gm l Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 44 m co 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm phạm vi nước tỉnh Thanh Hóa giai đoạn 2012-2014 44 an Lu 3.1.1 Diễn biến bệnh cúm gia cầm giai đoạn từ 2012 đến 2014 phạm vi n va nước 44 ac th si v 3.1.2 Tổng hợp tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương phạm vi nước năm 2014 45 3.1.3 Tình hình bệnh cúm type A H5N1 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2014 49 3.1.4 Tình hình bệnh cúm type A H5N6 gà huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh năm 2015 49 3.1.5 Tình hình bệnh cúm gia cầm type A theo phương thức chăn nuôi huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 51 3.1.6 Tình hình gà mắc bệnh cúm gia cầm H5N1 theo quy mô đàn gia cầm lu năm 2014 53 an 3.2 Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, vịt va tiêm phòng vaccine H5N1 năm 2014 huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương n tn to Như Thanh tỉnh Thanh Hóa 56 Quảng Xương, Như Thanh .56 p ie gh 3.2.1 Kết tiêm phòng vaccine cúm cho đàn gia cầm huyện Tĩnh Gia, w 3.2.2 Giám sát lâm sàng đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm H5N1 57 oa nl 3.2.3 Giám sát huyết học đàn gà sau tiêm phòng vaccine cúm d H5N1 .59 an lu 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine va cúm A H5N1 .63 ll u nf 3.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng vaccine oi m type A H5N1 .65 z at nh 3.4 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung 66 z 3.4.1 Nguyên nhân dịch cúm gia cầm tiếp tục xảy địa phương 66 gm @ 3.4.2 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm 67 l KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .69 m co 5.1 Kết luận 69 5.2 Đề nghị .70 an Lu TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 n va ac th si vi DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT lu an n va Acid ribonucleic Ct Cycle threshold Cs Cộng GMT Geometic Mean Titer H Hemagglutinin HPAI High Pathogenicity Avian Influenza KT Kiểm tra N Neuraminidase NNo & PTNN Nông nghiệp phát triển nông thôn OIE Office International Epizooties PBS Phosphate Buffered Saline gh tn to ARN RT - PCR Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction ie Real time Reverse Transcription - Polymerase Chain Reaction p RTRT - PCR nl Xét nghiệm d oa XN World Health Organization w WHO ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si vii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Trình tự chuỗi mẫu dị Primer cho RTRT - PCR phát cúm gia cầm 38 Bảng 2.2 Chu kỳ nhiệt bước phiên mã ngược (RT) dùng cho Quiagen one step RT - PCR kit .41 Bảng 2.3 Chu kỳ nhiệt cho tổng hợp gen cặp mồi 41 Bảng 3.1: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm giai đoạn 2012 – 2014 phạm vi nước .44 lu Bảng 3.2: Kết điều tra tình hình bệnh cúm gia cầm H5N1 địa phương an va năm 2014 .46 n Bảng 3.3: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm 2014 gà to gh tn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 49 Bảng 3.4: Kết điều tra bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 gà p ie huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh 50 nl w Bảng 3.5: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N1 năm oa 2014 theo phương thức chăn nuôi 51 d Bảng 3.6: Kết điều tra gia cầm mắc bệnh cúm gia cầm type A H5N6 năm lu an 2015 theo phương thức chăn nuôi 52 u nf va Bảng 3.7: Kết điều tra tình hình gà ni Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như ll Thanh năm 2014 mắc cúm gia cầm type A H5N1 theo quy mô đàn .54 oi m Bảng 3.8: Kết điều tra tình hình gà, vịt ni Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như z at nh Thanh năm 2015 mắc cúm gia cầm type A H5N6 theo quy mơ đàn .55 Bảng 3.9: Kết tiêm phịng vaccine cúm H5N1 huyện Tĩnh Gia, Quảng z Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa năm 2014 56 @ gm Bảng 3.10: Kết theo dõi độ an toàn vaccine cúm H5N1 (Vaccine cúm A l H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) đàn gia cầm tiêm m co phòng 58 an Lu Bảng 3.11: Kết giám sát đàn gia cầm trước tiêm vaccine H5N1 59 Bảng 3.12: Hiệu giá kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 (Vaccine cúm A n va H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET-Vifluvac) 60 ac th si viii Bảng 3.13: Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 63 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt tiêm vaccine cúm A H5N164 Bảng 3.15: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh tiêm vaccine cúm A H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVET- Vifluvac) qua thời điểm .65 Bảng 3.16: Kết giám sát lưu hành virus cúm type A H5N1 đàn gà tiêm phòng vaccine 66 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 62 Vaccine H5N1 Re-5 (Trung Quốc) có tỷ lệ bảo hộ đạt 90% gà virus H5N1 nhánh 1.1, 100% virus H5N1 nhánh 2.3.2.1A, 30% virus H5N1 nhánh 2.3.2.1B 10% virus H5N1 nhánh 2.3.2.1C Trên vịt, vaccine H5N1 Re-5có tỷ lệ bảo hộ đạt 100% virus H5N1 nhánh 1.1; 2.3.2.1A 2.3.2.1B Vaccine H5N1 Re-6 (Trung Quốc) có tỷ lệ bảo hộ gà đạt 50% virus H5N1 nhánh 1.1; 100% virus H5N1 nhánh 2.3.2.1A 2.3.2.1B Trên vịt, vaccine H5N1 Re-6 đạt tỷ lệ bảo hộ 100% virus H5N1 nhánh 1.1; 2.3.2.1A, 2.3.2.1B 2.3.2.1C Theo quy định 1361/KTY-DT ngày 02 tháng 12 năm 2005 Bộ Nông lu an nghiệp phát triển Nơng thơn, tiêu chí đánh giá đàn gia cầm bảo hộ tỷ lệ n va phải đạt 70% số mẫu có hiệu giá kháng thể HI ≥ 4log2 tn to Như vậy, tính đến thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine đàn gà tồn gh tỉnh cịn khả bảo hộ Đến thời điểm 150 ngày sau tiêm vaccine, đàn gà p ie tỉnh khơng cịn khả bảo hộ w 3.2.3.2 Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 oa nl thời điểm lấy mẫu d Đã tiến hành lấy mẫu huyết gà sau tiêm vaccine cúm type A u nf va bảng 3.13 an lu H5N1 mũi để xác định tần số phân bố mức kháng thể Kết trình bày Từ bảng 3.13, kết thu cho thấy: Tại thời điểm 120 ngày có tới ll oi m 20% số mẫu khơng có đáp ứng miễn dịch (chiếm tỷ lệ cao nhất); so với thời điểm miễn dịch (tỷ lệ thấp nhất) z at nh 60 ngày 30 ngày sau tiêm vaccine có 10% số mẫu khơng có đáp ứng z Tại thời điểm 30 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung từ 4log2 đến @ gm log2, mẫu đạt tỷ lệ log2 thấp (6,66%) Hiệu giá kháng thể tập trung mức l 4-6log2 Theo Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009) [26, 27]: gà tiêm m co vaccine sau tháng có hiệu giá kháng thể tập trung khoảng từ 5- 7log2 an Lu n va ac th si 63 Bảng 3.13: Tần số phân bố mức kháng thể gà tiêm vaccine H5N1 Thời điểm lấy Tỷ lệ mẫu có hiệu giá kháng thể log2 mẫu sau tiêm vaccine (%) Tổng số mẫu mũi (ngày) (-) ≤3 30 30 60 3 30 90 4 6 30 120 4 30 lu Tại thời điểm 60 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức cao từ an n va 4log2 đến log2, mẫu đạt tỷ lệ log2 6,66% Hiệu giá kháng thể tập tiêm vaccine sau tháng có hiệu giá kháng thể tập trung 7- 9log2 Có thể gh tn to trung mức 4-7log2 Theo Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009) [26,27]: gà p ie nhận thấy gà có hiệu giá kháng thể cao thời điểm tăng cao so với thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine mũi nl w Tại thời điểm 90 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức cao từ d oa 4log2 đến log2, mẫu đạt tỷ lệ 8log2 6,66% Xử lý thống kê cho thấy gà sau an lu tiêm vaccine có hiệu giá kháng thể thời điểm mức giảm tăng so với va thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi không rõ rệt u nf Tại thời điểm 120 ngày hiệu giá kháng thể mẫu tập trung mức từ ll 3log2 đến log2 Theo Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009) [26, 27]: gà m oi tiêm vaccine sau tháng theo dõi kháng thể đạt mức bảo hộ tập trung 5- z at nh 8log2 Xử lý thống kê cho thấy hiệu giá kháng thể gà sau tiêm vaccine đến thời điểm giảm với sai khác có ý nghĩa (rõ rệt) z cúm A H5N1 l gm @ 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine m co 3.2.4.1 Đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt tiêm vaccine Cũng với đàn gà, tiến hành lấy mẫu ngẫu nhiên đàn vịt khác an Lu tiêm vaccine H5N1 (Vaccine Navet – Vifluvac) thời điểm 30 ngày, 60 n va ngày, 90 ngày, 120 ngày sau tiêm vaccine mũi (chỉ áp dụng với vịt) ac th si 64 Mẫu huyết chuyển Trung tâm thú y vùng III - Cục thú y để làm phản ứng HI Số mẫu chuyển đạt yêu cầu xét nghiệm Kết trình bày bảng 3.14 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 Thời gian lấy Tổng Số Tỷ lệ Số mẫu đạt Tỷ lệ GMT mẫu sau tiêm số mẫu (%) bảo hộ bảo hộ (log2) vaccine mũi mẫu (+ ) (≥ log2 ) (% ) 30 30 28 93,3 25 83,3 5,46 60 30 29 96,6 29 96,6 6,45 90 30 29 96,6 26 86,6 5,38 120 30 26 86,6 23 76,6 4,37 (ngày) lu an n va ie gh tn to Kết bảng 3.14 cho thấy: Tại thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine cúm p mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình (geometric mean titre – GMT) vịt đạt 5,46 nl w log2; 25/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 83,3% d oa Tại thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình hộ đạt 96,6% va an lu vịt đạt 6,45 log2; 29/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥4 log2 , tỷ lệ bảo u nf Tại thời điểm 90 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình ll vịt đạt 5,38 log2; 26/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ log2 , tỷ lệ bảo oi m hộ đạt 86,6% z at nh Tại thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đạt 4,37 log2; 23/30 mẫu có hiệu giá kháng thể trung bình ≥ 4log2, tỷ lệ z gm @ bảo hộ đạt 76,6% 3.2.4.2 Tần số phân bố mức kháng thể vịt tiêm vaccine cúm A H5N1 m co l thời điểm lấy mẫu Để thấy rõ đáp ứng miễn dịch vịt tiêm vaccine Navet – Vifluvac an Lu địa bàn tỉnh Thanh Hóa, qua kết phản ứng HI xác định tần số phân bố n va mức kháng thể đàn Kết ghi bảng 3.15 ac th si 65 Bảng 3.15: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh tiêm vaccine cúm A H5N1 (Vaccine cúm A H5N1 vô hoạt nhũ dầu NAVETVifluvac) qua thời điểm Thời gian lấy Tỷ lệ % mẫu có hiệu giá kháng thể log2 mẫu sau tiêm Tổng số vaccine mũi (-) ≤3 mẫu 30 7 4 30 60 5 30 90 5 30 120 3 30 (ngày) lu an n va p ie gh tn to Từ bảng 3.15, kết thu cho thấy: Tại thời điểm 30 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Có 93,3% số vịt lấy mẫu có kháng thể kháng H5 huyết nl w Tỷ lệ mẫu có hiệu giá kháng thể log2; log2 cao nhất, đạt 23,3% d oa Tại thời điểm 60 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể vịt an lu tiêm vaccine tăng lên, cao log2, đạt 26,6% u nf log2 đạt 23,3% va Tại thời điểm 90 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể cao ll Tại thời điểm 120 ngày sau tiêm vaccine mũi 2: Hiệu giá kháng thể cao m oi log2 có 16,6% mẫu khơng phát thấy kháng thể kháng H5 z at nh huyết vị khảo sát z 3.3 Giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng gm @ vaccine type A H5N1 l Để giám sát lưu hành virus cúm đàn gia cầm tiêm phòng m co vaccine, với việc lấy mẫu huyết đàn gia cầm tiêm phòng để đánh giá đáp ứng miễn dịch, tiến hành lấy mẫu dịch ngoáy hầu, họng Mỗi đàn gà an Lu 30 mẫu theo phương pháp ngẫu nhiên thời điểm khác nhau, gộp mẫu làm n va xét nghiệm Kỹ thuật xét nghiệm thực phòng xét nghiệm virus ac th si 66 Trung tâm thú y vùng Kết xét nghiệm ni cấy, phân lập virus tìm gen quy định sản sinh kháng nguyên H5 mẫu dịch ngoáy hầu, họng phương pháp RT- PCR trình bày bảng 3.16 Từ bảng 3.16 kết thu cho thấy: Khơng có cảm nhiễm lưu hành virus cúm A H5N1 đàn gia cầm tiêm phòng vaccine năm 2014 Nói cách khác, đàn gia cầm sau tiêm phịng khơng có thải virus ngồi môi trường Kết phù hợp với nghiên cứu Đào Yến Khanh (2005) [17], Tô Long Thành (2007) [28] đàn gà, vịt sau tiêm phòng vaccine cúm tiến hành kiểm tra định kỳ không thấy lưu hành virus lu cúm A H5N1 an Bảng 3.16: Kết giám sát lưu hành virus cúm type A H5N1 đàn gà va n tiêm phòng vaccine p ie gh tn to Loại gia Số mẫu số mẫu Số mẫu dương cầm thu thập xét nghiệm tính với H5 Gà 150 30 Vịt 150 30 Gà 150 30 Vịt 150 30 Gà 150 30 Vịt 150 30 Địa phương lấy mẫu Tĩnh Gia w d oa nl Quảng Xương va an lu Như Thanh Tỷ lệ (%) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 u nf Từ kết nghiên cứu cho thấy chủ trương tiêm vaccine tạo ll miễn dịch chủ động cho đàn gia cầm nhằm tiêu diệt mầm bệnh đem lại kết rõ m oi rệt địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh nói riêng tỉnh z at nh Thanh Hóa nói chung 3.4 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm huyện Tĩnh Gia, z @ Quảng Xương, Như Thanh nói riêng tỉnh Thanh Hóa nói chung l gm 3.4.1 Nguyên nhân dịch cúm gia cầm tiếp tục xảy địa phương Trong năm 2014, dịch cúm gia cầm A/H5N1 xảy nhiều tỉnh, thành m co phố Tuy nhiên, dịch có tính chất địa phương, phát rải rác số hộ không lây lan rộng an Lu chăn nuôi nhỏ lẻ địa phương phát hiện, xử lý kịp thời nên dịch n va ac th si 67 Nguyên nhân do: (a) Thời tiết bất lợi diễn biến bất thường (băng giá tỉnh phía Bắc, thời tiết lạnh bất thường tỉnh phía Nam) làm giảm sức đề kháng đàn gia cầm; (b) Virus cúm H5N1 lưu hành rộng khắp chợ buôn bán gia cầm sống nhiều tỉnh, thành phố lây lan thông qua hoạt động mua bán, vận chuyển gia cầm; (c) Nhánh 2.3.2.1C virus cúm A/H5N1 xuất phát tán rộng phạm vi nước (nhất đàn vịt chạy đồng tỉnh phía Nam); (d) Các hoạt động vận chuyển, giết mổ gia cầm di chuyển người dân gia tăng dịp Tết, hoạt động lễ hội dân gian dịp đầu năm mới; (e) Nhiều đàn gia cầm hết miễn dịch nuôi sau dịp Tết nên dễ bị cảm nhiễm virus; (g) Việc chăn nuôi thủy cầm khu vực giáp ranh Việt Nam lu an Căm-pu-chia diễn phức tạp, tạo thuận lợi cho virus xâm nhập, biến đổi gây va bệnh; (h) Hệ thống mạng lưới thú y sở số tỉnh cịn nhiều bất cập như: n tn to khơng có thú y sở, có cán khơn có chuyên môn xã tự tuyển chọn, Đối với chủng virus H5N6 Việt Nam, chủng virus tương đồng p ie gh chế độ thù lao chưa thỏa đáng w 99% so với chủng H5N6 xảy tỉnh Tứ Xuyên, Trung Quốc năm 2014, oa nl nhiều khả virus xâm nhập vào Việt Nam thông qua vận chuyển gia cầm, sản d phẩm gia cầm bất hợp pháp qua biên giới Hiện tại, ổ dịch cúm H5N6 an lu địa phương khống chế thành công Tuy nhiên, có tượng virus cúm u nf va H5N6 lưu hành gia cầm khỏe mạnh số địa phương Nhìn chung, địa phương khống chế tốt ổ dịch, không để lây bệnh ll oi m cho người, mức độ thiệt hại cho ngành chăn nuôi gia cầm không đáng kể, tạo z at nh điều kiện cho phát triển chăn nuôi gia cầm Dự báo trước sau Tết Nguyên đán 2015, ổ dịch xảy rải rác số địa bàn có nguy cao, nơi có z ổ dịch cũ @ gm 3.4.2 Đề xuất biện pháp khống chế dịch cúm gia cầm l Để chủ động ngăn chặn virus cúm A H5N1, H5N6 chủng virus cúm m co gia cầm khác, hạn chế thấp virus cúm lây nhiễm gây tử vong cho người, ảnh tập trung đạo biện pháp cụ thể sau: an Lu hưởng đến sức khỏe cộng đồng, giảm thiểu thiệt hại cho ngành chăn nuôi, cần n va ac th si 68 - Các bộ, ban, ngành Trung ương hướng dẫn địa phương tổ chức triển khai thực “Kế hoạch hành động ứng phó khẩn cấp chủng virus cúm gia cầm nguy hiểm có khả lây sang người” - Cần tập trung triển khai thực biện pháp để ngăn chặn xâm nhập lây lan virus A H5N1, H5N6 chủng virus cúm gia cầm khác vào Việt Nam - Tuyên truyền cho người chăn nuôi, buôn bán gia cầm thực tốt công tác vệ sinh, khử trùng tiêu độc, khuyến khích áp dụng mơ hình chăn ni an tồn dịch bệnh, nâng cao tỷ lệ tiêm phòng vaccine cúm đàn gia cầm nhằm giảm thiểu nguy lây nhiễm phát tán virus lu an - Tăng cường lấy mẫu giám sát gia cầm môi trường nhằm phát va virus cúm A/H7N9 chủng virus khác gia cầm nhập lậu, chợ buôn n tn to bán gia cầm sống nhằm phát sớm có biện pháp xử lý kịp thời gh - Khi phát có virus cúm xuất gia cầm môi trường p ie phải báo cáo cho quan Thú y địa phương để tổ chức thực biện w pháp xử lý triệt để, kịp thời không để virus phát tán diện rộng oa nl - Cần thông tin kịp thời, xác cho người dân diễn biến tình hình dịch d cúm gia cầm biện pháp phòng chống dịch ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 69 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu luận văn, rút số kết luận sau: - Năm 2014, huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh tỉnh Thanh Hóa khơng có vịt mắc cúm gia cầm Có 275 gà mắc bệnh, chiếm tỷ lệ 5,69%; gà bị tiêu hủy có 716 con, chiếm tỷ lệ 12,57% - Năm 2015, dịch cúm gia cầm type A H5N6 xảy xã Hải Lĩnh, huyện Tĩnh Gia làm ốm chết 293 gia cầm, có 103 gà 190 vịt; số lu gia cầm (gà vịt) bị tiêu hủy 1023 an - Bệnh cúm A H5N1 năm 2014 xảy gà nuôi theo phương va n thức bán chăn thả huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh, tỷ lệ gà tn to mắc bệnh chiếm 5,69%, gà ni theo phương thức ni nhốt hồn tồn khơng Bệnh cúm A H5N6 xảy huyện (Tĩnh Gia) vào đầu năm 2015 p ie gh xảy bệnh w tập trung phương thức bán chăn thả lại xuất gà (103 mắc) oa nl vịt (190 mắc) d - Bệnh cúm gia cầm H5N1 năm 2014 khơng xảy đàn có quy lu 1000 gà u nf va an mô nhỏ 500 con, gà mắc bệnh có 275 đàn có quy mơ 500 đến - Dịch cúm gia cầm type A H5N6 năm 2015 xảy hộ dân có ll oi m quy mơ đàn trung bình, từ 200 đến 500 con; khơng xảy đàn có quy mơ z at nh nhỏ quy mô lớn từ 500 đến 1000 - Năm 2015 đợt tiêm vaccine 1, kết tiêm phòng cúm gia cầm đạt z 17,7% kế hoạch @ l có tỷ lệ an tồn cao, đạt 94,5% gm - Vaccine type A H5N1 sử dụng huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương, Như Thanh m co - Đàn gia cầm nuôi huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh trước khơng có virus cúm gia cầm an Lu tiêm phịng vaccine hồn tồn khỏe, khơng có kháng thể kháng H5 n va ac th si 70 - Khơng có cảm nhiễm lưu hành virus cúm A H5N1 đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine cúm, tức khơng có thải virus ngồi mơi trường 5.2 Đề nghị - Nên tiếp tục nghiên cứu để làm rõ đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm địa bàn huyện Tĩnh Gia, Quảng Xương Như Thanh nói riêng địa bàn tỉnh Thanh Hóa nói chung - Cần có nghiên cứu chuyên sâu lưu hành virus cúm type A H5N1 H5N6 gia cầm thuộc địa bàn huyện Tĩnh Gia, tỉnh Thanh Hóa nói riêng nước nói chung để có biện pháp khổng chế kịp thời, hiệu lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Bùi Quang Anh, Văn Đăng Kỳ (2004), “Bệnh cúm gia cầm: lưu hành bệnh, chẩn đoán kiểm soát dịch bệnh”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 69 - 75 Ban Chỉ đạo Quốc gia phòng chống dịch cúm gia cầm (2005), Báo cáo tổng kết cơng tác năm (2004-2005) phịng chống dịch cúm gia cầm, Hội nghị Tổng kết năm phòng chống dịch cúm gà, ngày 18 tháng năm 2005, Hà Nội Bộ NN PTNT (2005), Tiêu chuẩn ngành - Quy trình chẩn đốn bệnh cúm gia lu cầm, NXB Nông nghiệp an va Caroline Yuen (2004), “Đánh giá tiêm chủng vaccine cúm gà H5 năm 2003 n Hồng Kơng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (2), tr 79 - 80 Nông nghiệp, Hà Nội ie gh tn to Cục thú y ( 2004), Bệnh cúm gia cầm biện pháp phòng chống, Nhà xuất p Cục Thú y (2005), Sổ tay hướng dẫn phòng chống bệnh cúm gia cầm bệnh nl w cúm người, Hà Nội oa Dự án sử dụng vaccine nhằm khống chế toán bệnh cúm gia cầm thể d độc lực cao H5N1 (2005), Bộ Nông nghiệp & PTNT lu va an Trương Văn Dung, Nguyễn Viết Không (2004), “Một số hoạt động nghiên cứu khoa u nf học Viện Thú y quốc gia bệnh cúm gia cầm giải pháp khoa học công ll nghệ thời gian tới”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, (3), tr 62 - 68 m oi Nguyễn Tiến Dũng (2004), Bệnh cúm gà, Hội thảo số biện pháp khôi phục z at nh đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, tr - 10 Nguyễn Tiến Dũng, Malik Peiris, Robert Webster, Đào Thanh Vân, Bùi z gm @ Ngọc Anh, Nguyễn Thế Vinh, Ken't Inui, Bùi Nghĩa Vượng, Nguyễn Viết Không Ngô Thành Long (2004), “Nguồn gốc virus cúm gia cầm H5N1 Việt Nam l m co năm 2003 - 2004”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, (3), tr - 11 Nguyễn Tiến Dũng, Đỗ Qúi Phương, Đào Thanh Vân, Bùi Ngọc Anh, Bùi Nghĩa an Lu Vượng, Nguyễn Thế Vinh, Nguyễn Thuý Duyên (2005), “Giám sát bệnh cúm n va gia cầm Thái Bình”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, 12(2), tr -12 ac th si 72 12 Nguyễn Tiến Dũng (2008), “Vài nét cúm gia cầm H5N1”, Tạ p chí Khoa học kỹ thuật Thú y, (4), tr 80 - 86 13 Lê Thanh Hồ (2004), Họ Orthomyxoviridae nhóm vi rus cúm A gây bệnh cúm gà người, Viện khoa học công nghệ 14 Ilaria Capua, Stefano Marangon (2004), “Sử dụng tiêm chủng vaccine biện pháp khống chế bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (2), tr 59 - 70 15 Ilaria Capua, Stefano Marangon (2005), DIVA “Một chiến lược ngăn trừ bệnh cúm gia cầm thành cơng Italia”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tr 80 - 82 16 Maria Serina Beat Robenta De Nardi (2005), Vaccine nhũ dầu vô hoạt thông thường triệt tiêu thải ngăn ngừa khu trú v i r u s lu vịt thịt Bắc Kinh công cường độc với virus H5N1 Báo cáo khoa an va học thú y n 17 Đào Yến Khanh (2005), Kiểm nghiệm khảo nghiệm vaccine cúm gia cầm ngoại to tn nhập, Luận văn thạc sĩ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội ie gh 18 Phạm Sỹ Lăng (2004), “Diễn biến bệnh cúm gia cầm Châu Á hoạt động p phịng chống bệnh”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 91- 94 19 Phạm Sỹ Lăng (2004), Diễn biến bệnh cúm gà giới, Hội thảo số w oa nl biện pháp khôi phục đàn gia cầm sau dập dịch, Hà Nội, tr 33 - 38 d 20 Lê Văn Năm (2004), “Bệnh cúm gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, (1), tr 81- an lu 86 va 21 Lê Văn Năm (2004), “Kết khảo sát biểu lâm sàng bệnh tích đại ll u nf thể bệnh cúm gia cầm số sở chăn ni tỉnh phía Bắc”, Tạp oi m chí Khoa học kỹ thuật thú y, (3), tr 86 - 90 22 Nguyễn Như Thanh (1997), Miễn dịch học Thú y, Nhà xuất Nông nghiệp z at nh 23 Nguyễn Như Thanh (2001), Dịch tễ học Thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 24 Mary J Pantin-Jackwood, Jenny Pfeiffer, Tô Long Thành, Nguyễn Tùng z gm @ David Suarez (2008), Độc tính vi rus cúm gia cầm thể độc lực cao H5N1 Việt Nam gà vịt, Hội thảo quốc tế Nghiên cứu phục vụ hoạch l định sách phịng chống cúm gia cầm, Cục Thú y, 2008 m co 25 Văn Đăng Kỳ (2008), “Diễn biến tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam (4), tr 87 - 91 an Lu giải pháp phòng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, XV n va ac th si 73 26 Tô Long Thành (2005), “Kinh nghiệm phòng chống dịch cúm gia cầm sử dụng vaccine cúm gia cầm Trung Quốc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 12(3), tr 87 - 90 27 Tô Long Thành (2006), “Thông tin cập nhật bệnh cúm gia cầm vaccine phịng chống”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 13(1), tr 66 - 76 28 Tô Long Thành (2007), “Các loại vaccine cúm gia cầm đánh giá hiệu tiêm phòng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 16(2), tr 84 - 90 29 Tô Long Thành (2007), “Hiệu sử dụng liều vaccine vơ hoạt tồn thân virus H5N2 vaccine tái tổ hợp H5 có chất bổ trợ vật ni”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, 14(4), tr - 14 lu 30 Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009), “Kiểm nghiệm vaccine cúm gà an H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y 16(1), va n tr 15-19 cúm gia cầm H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc”, Phần 1: Độ an toàn vaccine đáp ứng miễn dịch gà sau tiêm phịng, Tạp chí Khoa học p ie gh tn to 31 Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009), “Khảo nghiệm thực địa vaccine kỹ thuật thú y, 16(1), tr 10 -18 oa nl w 32 Đỗ Ngọc Thúy (2008), “Tin khoa học kỹ thuật cúm gia cầm”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y (4), tr 92 - 94 d an lu II Tài liệu tiếng Anh va 33 Alexander D J (1993), Orthomyxovi rút Infections In: Viral Infections of u nf Vertebrates, Volume 3: Viral Infections of Birds, The Netherlands, pp 287-316 ll 34 Alexander D J (2000), A review of avian in different bird species, Vet oi m Microbiol, (74), pp - 13 z at nh 35 Biswas S K, Nayak D P (1996), “Influenza virus polymerase basic protein interacts with influenza virus polymerase basic protein at multiple sites”, z @ J Virol, (70), pp 6716 - 6722 gm 36 Bosch F X, Orlich M., Klenk H D and Rott R (1979), The structure of the Virology, (95), pp 197 - 207 m co l hemagglutinin, a determinant for the pathogenicity of influenza viruses, an Lu 37 Buckler White, Muphy B R (1998), Nucleotide sequence analysis of the nucleoprotein gene of an avian and a human influenza virus strain identifies two n va classes of nucleoproteins, Virology, (155), pp 345 - 355 ac th si 74 38 Capua I., Maragon S., Dalla Pozza M., Santucci U (2000), Vaccination for Avian Influenza in Italy, Vet Rec., pp 147, 751 39 Castrucci M R, Kawaoka Y (1993), “Biologic importance of neuramidase stalk length in influenza A virus”, J.Virology, (67), pp 759-764 40 Collins R A., Ko L S., So K L., Ellis T., Lau L T., Yu A C (2002), “Detection of hyghly pathogenic avian influenza subtype H5 (Euracian lineage) using NASBA”, J Virology Methods, 103(2), pp 213 - 215 41 Holsinger, Nichani L J., Pinto L H., Lamb R A (1994), “Influeza A virus M2 ion chanel protein: a structure function analysis”, J Virology, (68), pp 15511563 lu 42 Horimoto T., Kawaoka Y (1995), “Direct reverse transcriptase PCR to an va determine virulence potential of influenza A viruses in birds”, J Clin n Microbiol, 33(3), pp 748 - 751 Couceiro J N., Kelm S., Baum L G., Krauss S., Castrucci M R., Donatel ie gh tn to 43 Ito T., Kawaoka Y (1998), Avian influenza, United Kingdom pp 126-136 Ito T, p 44 Li I., Kida H., Pauson J C., Webter R G., Kawoaka Y (1998), “Molecular basic for the generation in pigs of influenza A viruses with pandemic potential”, J w oa nl Virology, (72), pp 7367 - 7373 d 45 Kawaoka Y (1991), “Difference in receptor specificity among influenza A viurses lu an from different species of animals”, J Vet Med Sci, (53), pp 357 - 358 u nf va 46 Kawaoka (1988), Is the gene pool of influenza viruses in shorebirds and gulls different from that in wild ducks, Virology, (179), pp 759 -767 ll oi m 47 Kingrbuy (1985), Protective immunity against avian influenza induced by a fowlpox virrus recombinant, Virology, Raven press NewYork, pp.57 - 78 z at nh 48 Lu X, Tumpey T M., Morken T., Zaki S R., Cox N J., Katz J M (1999), “A mouse model for the evaluation of pathogenesis and immunity to influenza A z gm @ (H5N1) viruses isolated from human”, J Virology, (73), PP - 5903 - 59 49 Luong G., Palese P (1992), Genetic analysis of influenza virus, Curr Opinion m co l Gen Develop, (2), pp 77 - 81 50 Mo I P, Brugh M., Fletcher O J., Rowland G N., Swayne D E (1997), an Lu Comparative pathology of chickens experimentaly inoculated with avian influenza viruses of low and high pathogenicity, Avian Dis, (41), pp 125-136 n va ac th si 75 51 Muphy B R., Webter R G (1996), Orthomyxovirus, OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167, pp 1-15 52 OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167,1-15 53 Seo S., Webter R G (2001), “Cross-reactive cell-mediated immunity and protection of chickens from lethal H5N1 influenza virus infection in the Hong Kong poultry markets”, J Virology, (75), pp 2516 - 2525 lu an 54 Swayne D E., Suarez D L (2000), Highly pathogenic avian influenza, Rev va sci tech Off Int epiz., (20), pp 463 - 482 n Hemagglutinin activation of pathogenic avian influenza viruses of serotype H7 requires the protease recognition motif R-X-K/R-R, Virology, (188), p ie gh tn to 55 Vey M, Orlich M., Adle S., Klenk H D., Rott R., Garten W (1992), w pp 408 - 413 oa nl 56 Webster R G, Bean W J., Gorman O T., Chambers T M., Kawaoka K.(1992), d Evolution and ecology of influenza A viruses, Microbiol Rev, (56), PP 152 - 179 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 76 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI lu an n va Hình 2: Xử lý tiêu độc ổ dịch cúm p ie gh tn to Hình 1: Kiểm tra gà nghi mắc cúm d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z l gm @ Hình 4: Vaccine Navet-Vifluvac cơng nghiệp Thanh Hóa nhũ dầu phịng bệnh cúm gia cầm m co Hình 3: Chăn ni gà bán an Lu n va ac th si