so sánh ưu điểm của chiết pha rắn so với chiết lỏng lỏng, đưa ra quy trình chiết pha rắn ứng dụng trong phân tích một đối tượng cụ thể, XÁC ĐỊNH FUMONISIN B1 VÀ B2 TRONG NGÔ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO CÓ LÀM SẠCH BẰNG CHIẾT PHA RẮN
Tìm hiểu chiết pha rắn Giáo viên hướng dẫn : Thầy Trần Quang Hải SVTH: Nhóm Danh sách thành viên nhóm 5 Nguyễn Thị Kim Oanh Nguyễn Thị Hà Phương Lê Thị Thanh Ngô Đức Duy Thành Vũ Thị Trang Nội dung thuyết trình Ưu điểm chiết pha rắn so với chiết lỏng – lỏng Quy trình chiết pha rắn ứng dụng phân tích đối tượng cụ thể Ưu điểm chiết pha rắn so với chiết lỏng – lỏng Ưu điểm chiết pha rắn so với chiết lỏng – lỏng Tốn dung mơi Đặc biệt chiết lỏngĐây phương lỏng sử dụng pháp tiến hành Yêu cầu tách đơn lượng lớn dung nhanh , thao giản môi đắt tiền, lại tác đơn giản độc hại gây ô nhiễm môi trường Hệ số làm giàu cao Quy trình chiết pha rắn ứng dụng phân tích đối tượng cụ thể XÁC ĐỊNH FUMONISIN B1 VÀ B2 TRONG NGÔ - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO CĨ LÀM SẠCH BẰNG CHIẾT PHA RẮN TCVN: 8162:2009 Nguyên tắc: Fumonisin chiết khỏi mẫu ngô hỗn hợp metanol nước Dịch chiết lọc tinh ống chiết pha rắn (SPE) trao đổi anion mạnh fumonisin rửa giải hỗn hợp axit axetic metanol Dịch chiết làm bay cặn hòa tan lại metanol o-phthadialdehyd/2-mercaptoethanol bổ sung để tạo thành dẫn xuất fumonisin huỳnh quang Các dẫn xuất phân tích sắc ký lỏng hiệu cao pha đảo có detector huỳnh quang.fumonisin huỳnh quang Cách tiến hành Chiết tách Làm Dung dịch dẫn xuất chuẩn Tạo dẫn xuất xác định Dung dịch thử ngô Chiết tách Cách tiến hành Cho 50 g mẫu thử vào vật chứa thủy tinh chất dẻo thích hợp Chiết với 100 ml dung dịch metanol, sử dụng trộn với tốc độ khoảng 10 000 min-1 Cho ly tâm dịch chiết 10 500 g Lọc phần phía qua giấy lọc gấp nếp Kiểm tra pH dịch rửa giải chỉnh pH đến khoảng từ 5,8 đến 6,5 dung dịch natri hydroxit, cần Làm Cách tiến hành Gắn hộp SPE vào ống chiết SPE ổn định cách rửa liên tiếp với ml metanol sau với ml dung dịch metanol Giữ tốc độ dịng khơng q ml/min, lấy 10 ml dịch chiết mẫu lọc cho vào hộp SPE Rửa hộp ml dung dịch nước-metanol , sau ml metanol Không để hộp bị khô Rửa giải fumonisin 10 ml axit axetic % metanol tốc độ không ml/min Thu dịch rửa giải vào lọ nhỏ thích hợp Làm Cách tiến hành Chuyển dịch rửa giải vào lọ thu nhận thích hợp cho bay dịch rửa giải đến khô sử dụng bay dung mơi dịng khí nitơ nhiệt độ khoảng 60oC Rửa lọ thu nhận ml metanol cho nước rửa vào lọ thích hợp Làm bay metanol bổ sung dòng nitơ, đảm bảo tất axit axetic bay hết đậy nắp lọ Bảo quản cặn sấy lại khoảng 4oC phân tích, lượng cần phân tích vịng hai tuần Tạotiến dẫn xuất xác định Cách hành Dung dịch dẫn xuất chuẩn Dung dịch thử ngô Chuyển 25 ml dung dịch chuẩn fumonisin vào đáy ống nghiệm nhỏ Hòa tan lại cặn sấy 200 ml metanol Có thể sử dụng dung dịch axetonitril Thêm 225 ml thuốc thử tạo dẫn xuất , trộn mạnh dung dịch bơm lượng dung dịch dẫn xuất vào cột HPLC thời gian lặp lại vòng sau thêm thuốc thử tạo dẫn xuất Chuyển 25 ml dung dịch sang đáy ống nghiệm nhỏ thêm 225 ml thuốc thử tạo dẫn xuất Nếu sử dụng hiệu chuẩn điểm riêng lẻ chỉnh độ nhạy detector huỳnh quang đến 80 % độ đáp ứng máy ghi Trộn dung dịch bơm lượng Nếu pic fumonisin vượt pic dung dịch chuẩn fumonisin vượt điểm cao đường chuẩn phải pha loãng tiếp dịch chiết mẫu thử metanol lặp lại việc tạo dẫn xuất THANK YOU! DO YOU HAVE ANY QUESTIONS? hello@mail.com 555-111-222 mydomain.com